细胞穿透肽Tat—LK15介导siRNA的转染效率和细胞毒性研究
SiRNA逆转肺耐药相关蛋白表达介导的白血病细胞多药耐药
SiRNA逆转肺耐药相关蛋白表达介导的白血病细胞多药耐药李宁;钱新华;王志远【期刊名称】《第四军医大学学报》【年(卷),期】2007(028)020【摘要】目的:研究双链短干扰RNA(siRNA)对白血病多药耐药细胞模型(K562/NaB)肺耐药相关蛋白(LRP)表达及功能的影响.方法:针对LRP基因设计合成特异性siRNA,在脂质体介导下转染K562/NaB;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测K562细胞LRP mRNA的水平;用流式细胞术检测K562/NaB细胞LRP蛋白表达的变化和细胞内柔红霉素(DNR)的蓄积;MTT法检测阿霉素(ADM)对K562/NaB细胞耐药的半数抑制浓度(IC50).结果:siRNA转染后:K562/NaB细胞的LRP mRMA水平明显降低;LRP蛋白表达由阳性转为阴性;细胞内DNR的蓄积明显增加,DNR平均荧光增强3.28倍;对ADM药物敏感相对逆转效率为78.18%.结论:siRNA可逆转由LRP介导的白血病细胞多药耐药.【总页数】4页(P1851-1854)【作者】李宁;钱新华;王志远【作者单位】南方医科大学,南方医院新生儿科,广东,广州,510515;南方医科大学,南方医院新生儿科,广东,广州,510515;南方医科大学,教务处,广东,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R733.71【相关文献】1.siRNA抑制人Tca8113/CDDP细胞多药耐药相关蛋白表达的研究 [J], 蒋磊;王代友;陆新萍2.非小细胞肺癌肺耐药相关蛋白和多药耐药相关蛋白表达与化疗疗效关系的探讨[J], 刘欣燕;张书敏;阎宝环;杨永辉;邢秋月;魏红艳3.阿霉素纳米粒对MRP介导的膀胱肿瘤多药耐药细胞株EJ/MRP多药耐药性的逆转作用 [J], 王磊;柯红;崔洁4.siRNA逆转survivin介导的T24/AMD细胞多药耐药的研究 [J], 刘正清;姚启盛;杨勇;陈从波;龚小新;黄力;王黎5.SiRNA联合asODN靶向逆转白血病细胞多药耐药的研究 [J], 魏军民;侯明;李丽珍;卞继峰;孔峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
穿膜肽HIV Tat蛋白的研究进展
穿膜肽HIV Tat蛋白的研究进展
尹锐;郝飞
【期刊名称】《免疫学杂志》
【年(卷),期】2005(21)B06
【摘要】经数十年的研究发现HIV—ITat蛋白的转导域具有穿膜活性,能将外源性的生物学分子如多肽、寡核苷酸、DNA、蛋白、质粒甚至颗粒性物质携带入多种哺乳动物活细胞质膜及核膜,并且对细胞不会产生毒副作用。
尽管其穿膜途径的具体机制,目前尚不十分清楚,但却不影响其在生命科学研究领域,包括基础研究和临床研究中的应用。
HIV-ITat蛋白转导域的发现及应用,为生物学研究领域开辟了一条新的探索途径。
【总页数】5页(P77-81)
【关键词】穿膜肽;HIV;Tat;细胞内在化
【作者】尹锐;郝飞
【作者单位】第三军医大学西南医院皮肤科
【正文语种】中文
【中图分类】R392
【相关文献】
1.穿膜肽TAT的原核表达及其穿膜效果的初步研究 [J], 伏彭辉;王一帆;王玲;罗宗刚
2.Tat穿膜肽的临床应用研究进展 [J], 蒋怡彬;俞仲望;徐晓辉
3.穿膜肽TAT-p38αG融合基因的构建、表达及穿膜特性的鉴定 [J], 张家平;应希;陈渝;张琼;黄跃生
4.穿膜肽HIV-TAT与呼吸道合胞病毒G蛋白片段G1及CTL表位融合蛋白的表达及纯化 [J], 张竞;龚伟;梅兴国;阎浩林
5.穿膜肽HIV-Tat_(49-57)和CTL表位融合多肽疫苗的初步免疫学效应研究 [J], 王莉;吴玉章;石统东;贾正才;周伟;邹丽云
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一种可穿透肿瘤多肽的辅助提高癌症药物的效率
一种可穿透肿瘤多肽的辅助提高癌症药物的效率
佚名
【期刊名称】《科学中国人》
【年(卷),期】2010(000)B08
【摘要】抗癌药物对肿瘤的低穿透性可能是药效限制的重要因素。
研究人员以小鼠癌细胞为模型，展示了先前表征过的一种可穿透肿瘤多肽iRGD在特定肿瘤和neuropilin-1依赖疗法中提高血管和组织的渗透性，可以辅助药物穿透进入血管外的肿瘤组织。
更为重要的是．这种作用不需要药物以化学的方式与多肽连接。
iRGD与多种结构药物共同注射均可提高药效．
【总页数】1页(P61-61)
【正文语种】中文
【中图分类】Q953
【相关文献】
1.提高腺病毒对肿瘤细胞转染效率的药物效果评价
2.中国科大发现一种特殊短肽：降低癌症诊疗毒副作用提高对肿瘤细胞杀伤效应
3.Dundee大学研究采用生物标记物提高癌症药物开发效率
4.多媒体计算机辅助教学——一种提高课堂教学效率的手段
5.Caerin多肽在提高人乳头瘤病毒相关恶性肿瘤治疗性疫苗效率中的研究进展
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肺癌治疗中靶向肽在递送siRNA中的应用价值
肺癌治疗中靶向肽在递送siRNA中的应用价值陈红莲;刘辉;马永超【期刊名称】《卫生职业教育》【年(卷),期】2016(034)012【摘要】目的：探讨肺癌治疗中靶向肽在递送siRNA中应用的价值，旨在提升肺癌患者临床治疗有效率。
方法选取2011年1月至2015年2月我校附属医院收治的肺癌患者80例，随机分为观察组和对照组，各40例。
给予对照组患者常规化疗和靶向治疗；对于观察组患者，除常规化疗和靶向治疗外，还应用必要的靶向肽，并将两组患者的最终治疗效果进行比较。
结果观察组临床治疗有效率明显高于对照组（P<0.05）；观察组不良反应发生率明显低于对照组（P<0.05）；观察组白细胞和血小板减少的发生率显著低于对照组（P<0.05）。
结论靶向肽可以起到递送siRNA的作用，能增强靶向性，从而增强肺癌的治疗效果，不仅能提高治疗有效率，还能在降低患者不良反应发生率的基础上延长患者生存期。
【总页数】2页(P107-108)【作者】陈红莲;刘辉;马永超【作者单位】漯河医学高等专科学校，河南漯河462002;漯河医学高等专科学校，河南漯河 462002;漯河医学高等专科学校，河南漯河 462002【正文语种】中文【中图分类】R195【相关文献】1.分析EGFR靶向药物在非小细胞肺癌治疗中的应用价值 [J], 朱保江2.靶向肽在递送siRNA进行肺癌治疗研究中的应用 [J], 高红林;刘鉴峰;宋娜玲3.MRI扩散加权成像在非小细胞肺癌靶向治疗早期疗效评价中的应用价值 [J], 郭真真;刘德祥;梁锦发;史瑞雪;朱姝华;叶裕丰;陈汉威4.MRI扩散加权成像在非小细胞肺癌靶向治疗早期疗效评价中的应用价值 [J], 郭真真;刘德祥;梁锦发;史瑞雪;朱姝华;叶裕丰;陈汉威;5.CT灌注成像参数在非小细胞肺癌靶向治疗疗效评估中的应用价值 [J], 潘细根;郑悦;邵阳通;陈泓羽;陈福春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人工合成的siRNA转染外周血活化T淋巴细胞方法学研究_葛晓松
两次转染的方法进行转染 ,转染效率要明显高于一次转染法 。
关键词 : siRNA;转染 ;脂质体
中图分类号 : Q813
文献标识码 : B
文章编号 : 1008 - 9632 (2009) 01 - 0079 - 02
在已经报道的有关 siRNA 转染的文献中 ,脂质体 往往都是用于将 siRNA 转染入贴壁细胞 [1 ] 。而对悬浮 细胞来说 , 由于传统的脂质体转染效率低下 ( 5%左 右 ) ,因此一般都是通过电穿孔转染的方式 ,将外源性 的 siRNA 导入细胞内 [2 ] 。或者利用 siRNA 的病毒表达 载体 ,通过在细胞内转录的方式 , 生成内源性的 siR2 NA[3 ] 。但是以上两种方法操作起来都比较复杂且实 验周期长 。随着新的脂质体的出现 ,使得用脂质体高 效率的转染悬浮细胞成为可能 。为了摸索 siRNA 转染 悬浮细胞高阳性率的方法 ,这里我们主要探讨了不同 转染次数 ,不同配比浓度脂质体 DMR IE2C与 siRNA 的 复合物转染抗原活化的 T淋巴细胞的转染效率 1 材料与方法 111 主要试剂
79
第 26卷第 1期 2009年 2月
生物学杂志
Vo l126 No11
JOURNAL OF B IOLOGY
Feb, 2009
114 转染效果的观察 在转染结束后的 4h内取细胞进行流式检测 ,分析
不同配比组细胞中 siRNA2FAM 的阳性率 ,确定最佳的 转染次数以及转染试剂和脂质体配比 。
标记的 siRNA 2FAM 与脂质体的复合物转染活化后的 T淋巴细胞 ,分别采用转染一次和连续转染两次的方法 ,并在
转染后 4h,分别取样本 ,通过流式细胞测定技术 ,比较两种方法的转染效率 ,并筛选出最佳转染效率剂量配比 。活
Tat-LK15运载nNOS siRNA治疗慢性炎性疼痛的实验研究
Tat-LK15运载nNOS siRNA治疗慢性炎性疼痛的实验研究周晓筠;杨雪;李舒愉;饶云;彭捷;陆建华【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2016(032)008【摘要】Objective To investigate the potential application of a non-viral gene carrier , TAT-LK15 , for delivering nNOSsiRNAin vivo and to study whether TAT-LK15/siRNA can be a new treatment method for chronic inflammatory pain. Method TAT-LK15 was complexed with nNOSsiRNA or scrambled control siRNA. The expression of nNOS was determined in SCDH of chronic inflammatory pain rats by western-blot assay. Pain control efficacy was evaluated by mechanical withdrawal threshold (MWT) and thermal withdrawal duration (TWD) assays. Results nNOS protein expression was efficiently inhibited by intrathecal injection of TAT-LK15/siRNA complexes , with the reduction of nNOS protein by 52%. Moreover , injection of TAT-LK15/siRNA com-plexes significantly could decrease MWT , but increase TWD in rats with chronic inflammatory pain. Conclusions TAT-LK15 can efficiently deliver nNOSsiRNAin vivo and nNOSsiRNA can relieve chronic inflammatory pain in rats.%目的：慢性疼痛如炎性疼痛的基因治疗缺乏安全且高效的载体，本实验探讨了细胞穿透肽Tat-LK15介导siRNA 干扰大鼠脊髓背角nNOS 表达进而治疗慢性炎性疼痛的可行性。
Tat蛋白:治疗HIV-1感染的新靶点
Tat蛋白：治疗HIV-1感染的新靶点
白如珺;刘新泳
【期刊名称】《生命的化学》
【年(卷),期】2005(25)6
【摘要】转录反式激活因子(trans-activator of transcription,Tat)蛋白在HIV-1的转录过程中起着十分重要的调节作用。
在没有Tat的情况下,整合后的病毒DNA 转录效率很低。
Tat与反式激活效应区(trans-activator
responseregion,TAR)RNA相互作用,反式激活转录,将转录效率提高几百倍。
Tat 在HIV-1复制中所起的关键作用以及Tat结构的高度保守使它成为寻找新的作用机制和不易产生耐药性的抗艾滋病药物的新靶点。
该文综述了HIV-1反式激活过程、Tat-TAR的相互作用机制和药物干预的新靶点。
【总页数】4页(P457-460)
【关键词】HIV-1;转录;反式激活;Tat;TAR
【作者】白如珺;刘新泳
【作者单位】山东大学药学院药物化学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.一个新的HIV-1治疗靶点-Rev蛋白 [J], 叶英;刘孝乐;熊晔
2.一个新的HIV-1治疗靶——Tat转录激活蛋白(英文) [J], 梁伟;王亚
芹;DAVALIAN DARIUSH
3.基质蛋白:治疗HIV-1感染的新靶点 [J], 展鹏;刘新泳
4.Rev蛋白:抗HIV-1感染的新靶点 [J], 曹原;刘新泳
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细胞穿膜肽TAT与小鼠干细胞转录因子Oct4融合表达及纯化
细胞穿膜肽TAT与小鼠干细胞转录因子Oct4融合表达及纯化王军;雷楗勇;陈蕴;金坚【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2013(032)009【摘要】将TAT-Oct4目的基因插入pET28a表达载体,构建重组表达质粒pET28a-TAT-Oct4,形成大肠杆菌重组表达体系.融合蛋白TAT-Oct4在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,表达产物经纯化后,纯度可达90％以上.通过尿素梯度透析复性,TAT-Oct4平均复性收率为8.8％.细胞免疫荧光技术分析表明,TAT-Oct4融合蛋白可穿透近100％细胞的细胞膜,其进膜后主要分布于细胞核内.建立了具有活性的TAT-Oct4融合蛋白生物制备方法,为细胞重编程提供了一种有效的研究材料,并可为其他用于细胞重编程的干细胞转录因子设计提供实用的方法学.【总页数】5页(P962-966)【作者】王军;雷楗勇;陈蕴;金坚【作者单位】江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学药学院,江苏无锡214122【正文语种】中文【中图分类】Q813.2【相关文献】1.干细胞转录因子OCT4在结直肠癌组织中的表达及其意义 [J], 程玉;赵醒;次云哲;严鹏;纪海茹2.干细胞转录因子OCT4、SOX2在食管鳞癌组织中表达及与预后的关系 [J], 温子海;吕巧云;李晓华3.干细胞转录因子OCT4、SOX2在食管鳞癌组织中表达及与预后的关系 [J], 温子海;吕巧云;李晓华;4.干细胞转录因子OCT4、SOX2在食管鳞癌中的表达及与预后的关系 [J], 张晖;周顺军;胡文聪5.胰腺癌组织中干细胞转录因子Sox2及Oct4的表达及意义 [J], 韩呈武; 杨强; 宋秦伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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细胞穿透肽Tat—LK15介导siRNA的转染效率和细胞毒性研究摘要：通过与Lipofectamine TM RNAiMAX（Lipo）比较，探讨细胞穿透肽Tal-LK15对人肾上皮细胞（human enbryonic kidney 293T cells，293T）和大鼠视神经节细胞（retinal ganglion cell ling，RGC-5）转染小干扰RNA（smallinterfernce RNA，siRNA）的效率和细胞毒性，为后期实验提供依据。
以羧基荧光素（carboxyfluorescein，FAM）标记的siRNA为报告基因，不同剂量的Tat-LK15 （Tat-LK15组）和Lipo（Lipo组）为转染试剂，分别转染293T和RGC-5细胞转染24 h后荧光显微镜观察FAM荧光强度，计算转染效率，并以CCK-8法检测细胞毒性。
随着Tat-LK15 和Lipo剂量的增加，siRNA转染效率逐渐提高。
当Tat-LK15与siRNA配比为2：1（μg/μg）时，RGC-5细胞的转染效率达到最高（（87.3±4.5）%），低于Lipo与siRNA配比为5：1（μL/μg）时的最高转染效率（（96.2±3.2）%（P＜0.05））；作用于293T细胞时，两转染试剂的最高转染效率没有统计学差异（P>O.05）转染试剂剂量增加，Lipo细胞毒性显著增加，而TaI-LK15毒性无明显变化。
转染效率最高时，Lipo（5μL）组293T和RGC-5的细胞荷活率仅为（（77.8±4.1）%，（73.4±7.7）%）显著低于Tal-LK15 （2：1）组同种细胞的存活率（（91.0±3.7）%.（90.0±6.1）%）（P＜0.05）Tat-LK15可有效地转染siRNA，细胞毒性低，安全性突出.有一定的应用前景。
关键词：细胞穿透肽（CPPs）：Tat-LK15；转染试剂：小干扰RNARNA干扰技术在生物医学研究中已被广泛应用，而转染试剂作为其关键因素一直得到大量关注。
常用的小干扰RNA （siRNA）转染方法有病毒载体法、阳离子脂质体介导法和阳离子聚合物法。
病毒载体转染效率高，但其制备过程复杂、价格昂贵，免疫原性和生物安全性问题也限制了它的应用。
阳离子脂质体细胞毒性相对较高，亦可能干扰细胞代谢。
动物实验表明，在体使用阳离子脂质体可诱发肺部炎症，甚至产生严重肺损伤。
阳离子聚合物安全窗小，当需要提高转染效率而增加转染试剂剂量时，会明显增加其生物毒性。
细胞穿透肽是一类由30个或更少氨基酸组成的富含碱性氨基酸、带正电荷的短肽，可高效介导小分子（蛋白、肽、核酸等）进入不同类型的细胞而发挥生物活性。
作为载体工具，细胞穿透肽在基因治疗及新药开发等领域具有很大的研究和应用价值。
HIV-Tat是一段由人类免疫缺陷病毒I型基因编码的反式转录激活因子（transactivator oftranscription，Tat），具有细胞穿透肽活性，能将与之连接的核酸、多肽等以浓度依赖的方式高效快速地导入胞内，且不影响细胞的正常结构和功能；具有转染效率高、毒性低、稳定性好等优点。
本实验为提高Tat的转染效率，选择Tat蛋白中具有穿膜功能的核心氨基酸序列（49～57，RKKR-RQRRR）与膜活化蛋白LKI5 （KLLKLLLKLLLKL-LK）融合.合成序列为RKKRRQRRRCJGGKLLKL-LLKLLLKLLK的新型细胞穿透肽Tat-LK15。
为研究Tat—LK15的转染效果，本实验拟以最常用的阳离子脂质体类转染试剂Lipofectamine TMRN_AiMAX （Lipo）为对照，转染羧基荧光素（FAM）标记的siRNA，通过荧光显微镜观察Tat-LK15的转染效率，并通过CCK-8法检测其细胞毒性。
1 材料和方法1.1 材料人肾上皮细胞（293T）和大鼠视网膜神经节细胞RGC-5（广州莱德尔牛物科技有限公司）、FAM-siRNA（上海吉玛制药技术有限公司）、Tat-LK15（厦门博欣生物科技有限公司）、Lipofec-tamine TM RNAiMAX （Invitrogen，美国）、胎牛血清（Hyclone，美国）、DMEM-高糖培养基（Hyclone，美国）、DMEM -F12培养基（Hyclone，美国）、Opti -MEM培养基（invilrogen，美国）、青链霉素（Hyclone，美国）、PBS磷酸钾缓冲液（Hyclone，美国）、CCK-8溶液（碧云天，上海）、酶标仪（Biocell，奥地利）、细胞恒温培养箱（Thermo，美国）、低速离心机（中佳，北京）、倒置光学显微镜（OL YMPUS CKX41，日本）、超净工作台（AIR TECH，日本）、倒置荧光显微镜（Leica，德国）。
1.2 方法1.2.1 细胞培养293T细胞使用DMEM -F12培养基（添加10%的胎牛血清和1%的青链霉素）、RGC-5细胞使用DMEM-高糖培养基（添加10%胎牛血清和1%青链霉素），置于含5%C02、37℃的细胞培养箱内培养。
于转染前l d，胰酶消化293T细胞、RGC-5细胞并计数，每孔lxl05接种于24孔培养板中，置于细胞培养箱中培养，使其在转染日细胞密度为300/c～50%左右。
1.2.2 细胞转染细胞去完全培养基，用PBS洗两遍，加250 μLOpti-MEM培养基准备转染。
Opti-MEM培养基125 μL稀释0.3 μg FAM-siRNA（终浓度50nmol/L）；Tat-LK15组：Opti-MEM培养基125 μL稀释Tat-LK15，Tat-LKl5与siRNA的质量比分别为1：2 .3：4、1：1、4：3、2：1 （μg/μg），Lipo组：Opti-MEM培养摹125μL 稀释Lipo，Lipo 与siRNA剂量比分别为1：1、2：1、3：1、4：1、5：1 （μL/μg）。
siRNA溶液和转染试剂溶液混合静止20min后加到相心细胞培养板中，终培养基500μL；各实验组设置4个复孔。
4 h后吸去转染培养基，用PBS洗两遍，每孔加入500 μL完全培养基后置于5%CO2、37℃的细胞培养箱内培养。
1.2.3 基因转染效率测定转染后24 h，倒置荧光显微镜检测FAM显色并拍照。
倒置荧光显微镜计算转染效率：每孔寻找3个代表性视野，各观察100个细胞，计算阳性细胞率。
普通视野下计得细胞数为N，相同视野换荧光下计得荧光细胞数为n转染效率=n/N×100%。
1.2.4 CCK一8检测细胞毒性转染后24 h将各孔细胞胰酶消化后分别吸出，每孔按l×10 4细胞接种至96孔培养板置于5%C02、37℃的细胞培养箱内培养24 h。
取出96孔细胞板去日培养，用新鲜DMEM培养摹清洗2次，加入10μLCCK-8溶液，继续孵育4 h：以未转染细胞为对照孔，符组设置6个复孔，酶标仪检测波长为450 nm的吸光度（OD），并计算细胞存活率（细胞存活率=转染组细胞（OD）对照组细胞0D×100%）。
1.3 统计学处理运用SPSSl3.0统计软件，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析（ANOV A）F检验对相关数据资料进行统计处理，多样本均数间的两两比较采用LSD-t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。
2 结果2.1 转染效率随着Tat-LK15和Lipo剂量增加转染效率增高，但是增长趋势减小。
在Tat -LK15组，Tat -LK15与siRNA比例为4：3—2：1 （μg/μg）时，转染效率达到最高，Tat-LK15/siRNA为4：3和2：1时两交联比的293T细胞的转染效率无明显差异（P>0.05，见表1、图1）；RGC-5细胞的转染效率也无明显差异（P>0.05，见表l、图2）。
Lipo与siRNA为5：1（μL/μg）时两细胞的转染效率达到最高。
作用于293T细胞时，Tat-LK15（2：1）转染效率为（93.1±3.0）%与Lipo （5：1）组（98.2±1.6）%差异没有统计学意义（P>0.05，见表l、图3、4）作用于RGC-5细胞时，Tat -LK15（2：1）组转染效率（87.3±4.5）%低于Lipo （5：1）组（96.2±3.2）%（P＜0.05.见表l、图5、6）；但是与Lipo （4：1）组转染效率为（90.1±4.2）%比较无显著差异（P>0.05）。
Tat-LK15对于介导siRNA转染具有良好的转染效率.（见表l、图1～6）。
2.2 细胞毒性两种转染试剂的细胞毒性随剂量增加而增强，并呈剂量依赖性。
Tat-LK15对293T和RGC-5细胞抑制率较小，转染24 h后无明显细胞毒性（图7、8黑色柱）；Lipo对细胞具有一定毒性，随剂量增加细胞仔活率明显下降（图7、8灰色柱）；作用于293T细胞时，TaI-LK15 （2：1）组转染效率最高，细胞存活率为（91.0±3.7）%，Lipo（5：1）组转染效率最高，细胞毒性也达到最大，细胞存活率为（77.8±4.1）%，两组间差异具有统计学意义（P＜O.05）；作川于RGC-5细胞时，Tat-LK15 （2：1）组转染效率最高时，细胞存活率为（90.0±6.11%.显著高于Lipo（5：1）组转染效率最高时的细胞存活率（73.4±7.7）%，与Lipo （4：1）组细胞存活率（82.1±3.9）%比较，差异同样具有统计学意义。
结果表示同等转染效率下，Tat-LK15比Lipo对细胞的毒性更小。
3 讨论脂质体是目前使用最为广泛的非病毒核酸转染试剂，具有转染效率高、可携带基因片段大、无免疫原性、可重复转染等优点。
尽管如此，其细胞毒性和在体实验组织损伤却限制了其进一步应用，开发更有效、毒性更小、不干扰细胞生理活动的非脂质体载体已成当务之急。
细胞穿透肽是一类具有穿透细胞膜功能的小分子多肽，可有效介导比其分子质量大近100倍的外源性疏水大分子（蛋白、核酸等）进入细胞内，而示见其对宿主细胞有明显毒副作用。
HIV -Tat蛋白则是现今研究最广泛的细胞穿透肽之一，其主要机制可能包括：通过脂质层的被动转运，Tat上大量碱性氨基酸携带的正电荷与细胞表面的负电荷通过静电作用转运物质；网格蛋白介导的内吞；巨吞饮介导的内吞等。
Tat蛋白结构域碱性区中49～57位氨基酸（RKKRRQRRR），即蛋白转导域（protein transduction domain，PTD）是HIV-Tat 蛋白中一个富含碱性氨基酸的具有穿膜活性的最小多肽片段。