抗核抗体检测及临床应用
消化系统肿瘤患者的抗核抗体检测与临床意义
消化系统肿瘤患者的抗核抗体检测与临床意义1 材料与方法1．1 病例选择：实验组84例消化系统肿瘤患者均随机取自教学医院住院病例，男46例，女38例，年龄33-80岁，平均47.2岁，其中40-65岁病例占78.3%，肿瘤类型均按病理诊断结果分类。
对照组40例取自正常接受体检者，男23例，女17例，无疾病史。
1．2 方法与操作：实验组与对照组按常规抽取清晨空腹静脉血2 ml，分离血清，在稀释板上用0.01 ml/L磷硝盐缓冲液（PBS）作1∶5稀释，滴度测定按1∶10，1∶20，1∶40，1∶80，1∶160稀释。
取处理好的底物片，滴加稀释血清，置于孵育湿盒为37℃60分钟，PBS振洗2～5分钟，滴加羊抗人IgG免疫荧光抗体（0.01%伊文氏兰稀释，染色效价1∶8-1∶16），复盖切片孵育37℃30分钟，PBS洗2～5分钟，荧光显微镜观察。
2 实验结果2.1 两组阳性率分型比较差异有显著性（见表1）。
2.2 46例肿瘤患者检出ANA阳性滴定度范围为1∶1-1∶80，平均阳性滴度为1：8。
健康对照组40例，滴度范围为1∶1-1∶10，平均阳性滴度为1∶1.3，两者差异有显著性。
2.3 84例肿瘤患者对免疫学试验的敏感性及ANA试验的表现率比较，ANA 检测阳性率为54.7%，其中各病种的敏感性有不同差异（见表2）。
3 讨论本组用间接免疫荧光检测手段，对84例消化系统肿瘤患者进行ANA测定，结果表明84例肿瘤患者外周血中46例明显阳性，占54.7%，38例为阴性，占45.3%，阳性率经统计学处理差异有显著性（P<0.01），与对照组比较P<0.01。
ANA滴度1∶5即可确定为阳性，本实验组肿瘤患者检出滴度均在1∶8以上，证明肿瘤患者自身ANA产生增多，提示恶性肿瘤患者发生了较严重的免疫功能紊乱，故检测恶性肿瘤患者ANA可作为术前、术后及预后的一种辅助性诊断指标，并可为临床进行免疫调节治疗提供有效的依据。
抗核抗体的检测方法及原理
抗核抗体的检测方法及原理
抗核抗体（ANA）是一种特殊的抗体，它们是人体免疫系统产生
的一类抗体，主要针对自身细胞核中的蛋白质和核酸成分。
抗核抗
体的检测方法主要用于自身免疫性疾病的诊断，如系统性红斑狼疮（SLE）和类风湿性关节炎（RA）等。
目前常用的抗核抗体检测方法包括间接免疫荧光法（IFA）和酶
联免疫吸附试验（ELISA）。
1. 间接免疫荧光法（IFA）：
该方法主要通过观察抗核抗体与细胞核结构的结合情况来确定
是否存在抗核抗体。
具体步骤如下：
- 取一份患者血清，将其与细胞核结构进行反应。
- 通过荧光显微镜观察，如果血清中存在抗核抗体，它们会与
细胞核结构结合形成荧光标记的复合物。
- 根据荧光标记的情况，可以确定抗核抗体的存在及其荧光模式，进而进行疾病的诊断。
2. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：
该方法通过测定抗核抗体与特定抗原的结合情况来确定是否存
在抗核抗体。
具体步骤如下：
- 取一份患者血清，将其与特定抗原进行反应。
- 加入特定抗核抗体的检测试剂，使其与抗核抗体结合。
- 加入酶标记的抗人免疫球蛋白抗体，使其与抗核抗体结合形
成复合物。
- 加入底物，使酶标记的抗体与底物发生反应，产生颜色反应。
- 通过测定反应产生的颜色强度，可以确定抗核抗体的存在及
其浓度水平。
以上是两种常用的抗核抗体检测方法。
这些方法的原理基于抗体与特定抗原的结合反应，并通过不同的检测手段来确定抗核抗体的存在及其水平。
这些检测方法在临床上被广泛应用于自身免疫性疾病的早期诊断和疾病活动性的监测。
抗核抗体检测及临床意义-张瑾
有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体； 抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体； 抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体； 观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体 研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体
基本概念
ANA荧光核型 ANAs中的常见抗体
抗核抗体
抗核抗体谱（ANAs）
dsDNA 抗核不溶成分
抗DNA抗体 抗核小体抗体
ssDNA
抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4
ANAs
抗Sm,U1RNP,SSA,SSB
抗核可溶成分 （抗ENA）
抗染色体DNA蛋白 抗核仁抗体
抗Scl-70,Jo-1,PM-1
抗rRNP,PCNA…….
抗着丝点抗体（ACA) 抗5sRNA
与预后相关的抗体：抗Scl-70（差）、ACA（好）
案例1
女性，34岁 游走性多关节痛，雷诺现象半年 RF 56U/L；抗CCP抗体阴性； ANA 1：320 （核仁型） 胸部CT：轻度肺间质病变 诊断？治疗？
UCTD ILD 发展为 SSc可能性大 Pred+CTX
抗均质型或核膜型抗体常与SLE有关。
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抗dsDNA：SLE特异性抗体，与LN及疾病活动度 有关，至少两种方法联合检测（如：
IIF法+ ELISA法）。
抗核小体、抗组蛋白、抗dsDNA三抗体阳性者强烈 提示增殖性LN。 与疾病活动性相关的抗体：抗dsDNA、抗核小体、 抗组蛋白、抗Jo-1、抗rRNP
核 膜
型 (M)
斑 点 型 (S)
抗核抗体谱检测临床意义
抗核抗体谱检测临床意义抗核抗体（ANA），是包含多种不同临床意义的一系列自身抗体，靶向的抗原包括：DNA、可提取核抗原（ENA）、RNA、核糖核蛋白（RNP）。
主要分为以下：抗DNA抗体（如抗ss-DNA抗体、抗ds-DNA抗体）。
抗组蛋白抗体(AHA)：抗H1、抗H2A、抗H2B、H3、抗H4抗体等（药物性狼疮的阳性率达95%以上，常见的药物有肼苯达嗪、异烟肼及氯丙嗪）。
抗非组蛋白抗体：ENA抗体谱（抗Sm抗体、抗RNP 抗体、抗SSA/Ro抗体、抗SSB/La抗体、抗Mi-2抗体、抗Ku抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体）。
抗核仁抗体：抗PM-Scl抗体、抗Th/To抗体、抗U3-RNP、抗4-6-S-RNA抗体等。
抗其它细胞成分抗体（PCNA）。
何时检测ANA：高验前概率的患者：存在SLE(如光敏性、胸膜炎)、SSc(雷诺现象、皮肤改变)或干燥综合征(Sjögren's disease, SjD，难以解释的眼干口干)的临床证据时，根据ANA结果很容易诊断。
如果患者的症状、体格检查和实验室结果提示有较大或很大概率为以下一种或多种诊断，适合检测ANA：ü关节出现持续性炎症，伴有骨骼及关节疼痛、肿胀、僵硬、活动受限。
早晨起床时关节感觉僵硬，在活动后减轻，称为“晨僵”。
ü肌肉疼痛、红肿、无力，甚至萎缩，做精细动作困难。
ü皮肤出现明显红斑、皮疹，光照后情况加重。
皮肤出现硬化，触觉异常，对温度的感觉出现异常，黏膜处可能出现反复发作的溃疡。
ü全身多器官损伤，出现乏力、发热、虚弱、贫血、血细胞减少、蛋白尿等症状。
如果不加选择地检测ANA，大多数阳性结果可能反映假阳性，还可能干扰医生的正确诊断。
假阳性情况：肺疾病：如特发性肺纤维化、特发性肺动脉高压；慢性感染：如寄生虫、结核杆菌感染等；肝病：如活动性肝炎、酒精性肝病等；血液系统疾病：如白血病、骨髓瘤等；其他系统疾病：如器官移植后、终末期肾病、I型糖尿病等。
检测抗核抗体常用的检测方法
检测抗核抗体常用的方法有：
放射免疫法。
常用于检测抗DNA抗体，有Farr法及过滤法。
间接ELISA法。
临床上主要是应用间接ELISA检测抗dsDNA抗体，其重复性及敏感性均较对流免疫电泳及双扩散为高。
抗核抗体检查是通过抽取患者的血清来进行检测，通过患者的抗体和血清综合，以最后的检查筛选结果为准，其中DNA抗体检测能够有效的检查体内抗细胞核酸和抗蛋白抗体，ENA 抗体包括sm抗体、抗ssa、抗ssb抗体等，每个患者的体质不同，最后的指标特异性也不太一样，最后还要结合患者的具体症状进行分析和诊断病情。
抗核抗体及常用检测方法
Ｉ Ｉ Ｆ检测 Ａ Ｎ Ａ， 主要有 以下 ６种常见荧 光染 色模 型： ①核均
置命名 ， 如抗线粒体抗体 、 抗 高尔基体抗体 和抗着丝点抗体等。
２ 检 测抗 核抗体 的临床意义 对Ａ Ｎ Ａ的认识 始于狼疮细胞 的发现 ， 而对 Ａ Ｎ Ａ研究 的兴 起和深入则是源于新病种 、 新技术 的不断发现和 临床 医学 的迅
些非结缔组织病如慢性活动性肝炎 、 重症 肌无 力和慢性淋 巴性 甲状腺炎等也可见 Ａ Ｎ Ａ阳性 ，正常老年人也可 出现低滴度 的
ＡＮＡ 。
组 专 门针 对 细胞 核 内脱 氧 核 糖 核 酸 （ Ｄ Ｎ Ａ） 、核 糖 核 酸
（ Ｒ Ｎ Ａ） 、蛋 白质 、脂类 、酶类及这些物质分子 复合 物的抗体。
酶联免疫 吸附试验 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 、 蛋 白芯片法［ １ ０ 】 、 金标法及 流式细胞 术【 ｌ 】 】 等， 但临床应用最为广泛的还 是 Ｉ Ｉ Ｆ和 Ｉ Ｂ Ｔ 。 ３ ． １ 间接免疫荧光法 该方 法是公认进行 Ａ Ｎ Ａ筛查 的首 选方法 。早在 １ ９ ５ ７年 ， Ｈｏ ｌ ｂ ｏ ｒ ｏ ｗ和 Ｆ ｒ ｉ ｏ ｕ等首先 以啮齿动物组
胞核各种成分的 自身抗体 ，是 自身免疫风 ｆ 生 疾病 （ ａ ｕ ｔ ｏ ｉ ｍ ｍｕ ｎ ｅ ｒ ｈ ｅ ｕ ｍ ａ ｔ ｉ ｃ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｓ ， Ａ Ｒ Ｄ） 诊 断 中重要 的血 清学标 志物 『 １ ・ ２ １ ， 其是
一
Ｊ ｏ 一 １ 抗体多见于肌炎 ， 且与合并肺间质纤 维化相关 。此外 ， 某
ｉ ｍ ｍｕ ｎ ｉ ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ， Ｉ Ｉ Ｆ ） 、 免 疫 印迹 法 （ ｉ ｍｍ ｕ ｎ ｏ ｂ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｅ ｓ ｔ ， Ｉ Ｂ Ｔ ） 、
抗核抗体检测及临床意义
抗Sm抗体
30%的SLE病人可检测到抗-Sm抗体，在肾 炎病人和某些中枢神经严重损伤的病人也可检 测到。
抗SSA抗体
在SLE、风湿性关节炎（RA）、干燥综
合症病人血清中常常、新生儿红斑性狼疮（NLE）
病人也可检测到。
抗SSB抗体
在SLE、风湿性关节炎(RA）、 干燥综合症病人血清中常常可以检测到 SS-B抗体，在硬皮病、新生儿红斑性狼 疮（NLE）病人也可检测到。SS-B抗体一 般与SS-A抗体同时出现。若病人血清中 可检测到SS-A抗体而不伴有SS-B抗体的 出现，此病人继发肾炎的风险较大。
一簇抗体，与疾病活动性大多无相关
抗ENA抗体检测方法
免疫双扩散法(ID) 对流免疫电泳法( CIE) 免疫印迹法(IBT) 酶联免疫吸附法(ELISA) 蛋白芯片（Protein chip）
38KD
29KD 28KD
1 6 .5 KD 15KD 1 3 .5 KD
86KD 73KD
60KD 52KD 45KD 38KD 32KD 29KD 28KD
新月体肾炎。
ANA检测方法-IIF法
ANA滴度 ANA核型
荧光显微镜下ANA的染色型别
均质型 颗粒型 核膜型 核仁型 着丝点型 胞浆型 混合型等
核均质型
核粗颗粒型
• HEp-2：间期细胞核呈 颗粒样荧光，核仁阴性； 分裂期细胞浓缩染色体 阴性，染色体周围呈颗 粒样荧光
• 肝片：肝细胞核呈颗粒样 荧光。核仁阴性；荧光强 度与HEp-2基本一致
抗Jo-1抗体
20-30%的多发性肌炎/皮肌炎，30-40%的多 发性肌炎患者和高达60%的多发性肌炎伴有间质 性肺疾病患者血清中可检测到抗-Jo-1抗体。其 它胶原性疾病中很少检出此抗体。
抗核抗体组合(新3)检查内容
抗核抗体组合(新3)检查内容全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：抗核抗体组合(新3)检查是一种用于检测人体免疫系统中的抗核抗体水平的检测项目。
抗核抗体是一类针对细胞核内成分的抗体，其存在可以反映出人体免疫系统的异常情况。
这项检查主要用于辅助诊断自身免疫性疾病、风湿免疫性疾病、系统性红斑狼疮等疾病，并且可以帮助医生评估疾病的严重程度和预后。
本文将介绍抗核抗体组合(新3)检查的内容、意义、操作方法以及注意事项。
一、检查内容抗核抗体组合(新3)检查主要包括以下几个方面的内容：1. 抗核抗体(ANA)检测：ANA是一种特异性抗体，主要反应人体免疫系统对细胞核内成分的异常免疫反应。
阳性结果可能提示自身免疫性疾病的存在。
2. 抗双链DNA抗体（anti-dsDNA）检测：抗双链DNA抗体是一种特异性抗体，其阳性结果常见于系统性红斑狼疮等风湿免疫性疾病患者。
3. 抗核RNP抗体（anti-RNP）检测：抗核RNP抗体是一种特异性抗体，其阳性结果可能提示结缔组织病等自身免疫性疾病的存在。
二、检查意义抗核抗体组合(新3)检查的结果可以帮助医生进行以下方面的判断：1. 辅助诊断自身免疫性疾病：抗核抗体组合检查是自身免疫性疾病的辅助诊断手段之一，对于系统性红斑狼疮、风湿关节炎等疾病的诊断具有重要意义。
2. 评估疾病的严重程度：抗核抗体组合检查结果可以帮助医生评估疾病的活跃程度和严重程度，指导治疗方案的制定。
3. 预测疾病的预后：阳性的抗核抗体组合检查结果可能提示疾病的预后不佳，需要进行及时干预和治疗。
三、检查操作方法进行抗核抗体组合(新3)检查时，需要注意以下操作方法：1. 采血：医生将利用针头采集患者的静脉血进行检测。
2. 送检：采集的血样将被送往实验室进行检测，检测结果将在数天内出具。
3. 诊断：医生将根据实验室检测结果对患者进行诊断，制定相应的治疗计划。
四、注意事项进行抗核抗体组合(新3)检查时，需要注意以下事项：1. 遵医嘱：在进行检查前应咨询医生，根据医生的指导进行相关检查。