抗心磷脂抗体的检测和临床意义课件

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抗磷脂综合征及实验室诊断ppt课件

抗磷脂综合征及实验室诊断ppt课件
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抗磷脂综合征的主要抗体 抗心磷脂抗体
▪ APS患者体内的aCL与心磷脂结合时需要β2-GPI的参 与,β2-GPI的存在使aCL与心磷脂的结合增强,称为β2GPI依赖的aCL。而在一些感染性疾病如梅毒时, aCL可 直接与心磷脂结合,β2-GPI的存在使其结合受到抑制,称 为非β2-GPI依赖的aCL。 ACA是动脉血栓形成的危险 因素,与静脉血栓形成的相关性较小
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抗心磷脂抗体(anticardiolipin,ACA)的实验室检 测
▪ 抗心磷脂抗体(anticardiolipin,ACA)是一种以血小板和内皮细胞 膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体.
▪ 常规采用ELISA检测,其优点在于避免了凝血因子缺乏与抗凝 剂的影响。在同种型中C以IgM最临床意义,IgG次之,IgA几 无临床意义。
▪ GPI高亲和力受体,在β2GPI存在时,抗β2GPI可通过β2GP
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▪ 与Annexin-2结合黏附于内皮细胞表面,激活内皮细胞表 达黏附分子[7]。Annexin-5具有很强抗凝活性,对磷脂有 高的亲和力,可与凝血因子竞争磷脂结合位点,从而阻止 细胞膜磷脂表面的凝血反应。APL通过与Annexin-5竞 争磷脂结合位点,干扰Annexin-5与带负电荷的磷脂的结 合,使其不能发挥抗凝作用。
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抗磷脂综合征诊断标准
▪ 该标准包括临床和实验室两方面内容: ①临床指标有血管血栓形成和(或)妊娠丢失或新生儿异 常; ②实验室指标包括狼疮抗凝物( LA)和(或)IgG类或IgM类 抗心磷脂抗体( aCL)阳性。 至少同时符合一项临床指标和一项实验室指标才能诊 断为APS。
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抗磷脂综合征诊断标准
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抗磷脂综合征的主要辅助因子及抗体 β2GPI及抗β2GPI抗体

抗磷脂抗体检测临床应用

抗磷脂抗体检测临床应用
• 9. 参考值:(1)定性检测:建议使用非参数的百分位数方法建立临界(cut off)值,推荐采用99的百分位数(99%),大于临界(cut off)值判断为阳 性;(2)定量检测:可参照CLSI EP28-a3c的要求,募集至少120例表观健 康人群的血浆标本建立参考区间,临床实验室可采用20~60例表观健康人群 验证该参考区间。
三、aPLs检测
(二)aCL抗体、抗β2GPⅠ抗体
• 1. 标本要求:建议使用血清标本,避免热灭活、溶血及脂血标本。血清标 本2~8 ℃可保存2~3 d,-20 ℃及以下温度能更长时间保存,避免反复冻融。
• 2. aCL抗体、抗β2GPⅠ抗体的不同亚型:建议检测aCL-IgG和aCL-IgM抗体、 抗β2GPⅠ-IgG和抗β2GPⅠ-IgM抗体,若aCL、抗β2GPⅠ抗体的IgG和IgM亚 型阴性,但临床疑似APS时,建议检测aCL、抗β2GPⅠ抗体的IgA亚型。
三、aPLs检测
(二)aCL抗体、抗β2GPⅠ抗体
• 3. 靶抗原:aCL抗体检测的靶抗原应包括心磷脂和β2GPⅠ,抗β2GPⅠ抗体 检测的靶抗原应采用包括全部氨基酸序列区域(结构域Ⅰ~Ⅴ)的人源性 β2GPⅠ。
• 4. 检测方法:ELISA作为aCL、aβ2GPⅠ抗体的常规检测方法,目前在临床 上广泛应用。但ELISA方法存在标准化的缺乏、实验操作的影响因素较多、 实验室间检测结果的变异系数大等缺陷。而化学发光法(CLIA)检测aCL、 抗β2GPⅠ抗体与ELISA比,具有较高的敏感性和特异性,能实现实验操作 简单、快速、自动化、急诊模式进样、定量检测及变异系数小等。
三、aPLs检测
(二)aCL抗体、抗β2GPⅠ抗体
• 5. 检测结果单位:aCL-IgG、aCL-IgM检测单位建议使用GPL、MPL(即1个 GPL、MPL单位分别为1 μg/ml纯化的IgG、IgM型aCL结合抗原的活性)。 抗β2GPⅠ抗体检测结果的国际单位正在进行有效性研究。使用国际单位可 促进检测结果在不同实验室、方法学间的一致性和可比性。

抗磷脂抗体综合征诊断与治疗PPT

抗磷脂抗体综合征诊断与治疗PPT

皮肤病: 使用抗炎 药物,如 非甾体抗 炎药、糖 皮质激素 等
治疗进展
药物治疗:抗凝血药物、免疫抑 制剂等
辅助治疗:物理治疗、康复治疗 等
手术治疗:血管成形术、血管内 支架植入术等
研究进展:新型药物、新型治疗 方法的研究与开发
抗磷脂抗体综合征的预防
章节副标题
预防措施
保持良好的生活 习惯,如合理饮 食、适量运动、 充足睡眠等
家庭护理指导
保持良好的生活习惯,如规律作 息、合理饮食等
定期进行身体检查,及时发现并 治疗疾病
避免过度劳累和压力,保持心情 愉快
加强锻炼,提高身体素质,增强 免疫力
THEME TEMPLATE
感谢观看
定期检查
定期进行血液检 查,监测抗磷脂 抗体水平
定期进行心脏超 声检查,监测心 脏功能
定期进行血脂检 查,监测血脂水 平
定期进行肾功能 检查,监测肾功 能状态
预防复发
定期体检:定期进行血液 检查,监测抗磷脂抗体水 平
健康饮食:保持均衡饮食, 避免高脂肪、高糖、高盐 食物
适量运动:保持适当的运 动量,增强体质,提高免 疫力
章节副标题
诊断标准
临床表现:反复出现血栓形成、习惯性流产、血小板减少等 实验室检查:抗磷脂抗体(APL)阳性 影像学检查:血管造影、超声等 诊断流程:病史采集、体格检查、实验室检查、影像学检查等
实验室检查
抗磷脂抗体 检测:包括 抗心磷脂抗 体(ACA)、 抗β2-糖蛋白 I抗体(β2-
GPI)等
康复训练
运动疗法:进行适当的运动,如散步、游泳等,以增强体质和免疫力 心理疗法:进行心理辅导,帮助患者调整心态,减轻心理压力 饮食疗法:合理饮食,避免摄入过多脂肪和糖分,多吃蔬菜和水果 药物疗法:根据病情,在医生指导下使用药物进行治疗,如抗凝血药物、免疫抑制剂等

抗磷脂抗体综合征pptPPT课件

抗磷脂抗体综合征pptPPT课件
3、血小板减少
血小板减少是APS表现之一,APL是直接针对细胞膜的抗体, 可引起自身免疫性溶血性贫血,有报道特发性血小板减少性紫癜 的患者中30%APL阳性,APL与血小板膜磷脂结合,能激活血小板 ,使其集聚加速,从而导致血小板减少。ACA引起血小板减少的 机制:ACA与血小板内膜磷脂结合,增加单细核巨噬细胞系统对血 小板吞噬和破坏,导致血小板减少;ACA促使血小板激活,从而易 于形成血栓,同时血小板消耗性减少。
四、诊断
Alarcon-Segovia 等对APS的诊断标准
——————————————————————————— • 肯定的诊断
1.有2个或2个以上的下列临床表现: (1)复发性自发性流产 (2)静脉血栓 (3)动脉闭塞 (4)下肢溃疡 (5)网状青斑 (6)溶血性贫血 (7)血小板减少
2.伴有高水平的ALP抗体(IgG和IgM>5SD) • 可能的诊断
抗磷脂综合征
(antiphospholipid syndrome,APS)
抗磷脂综合征
抗磷脂综合征(anti-phospholipid syndrome,APS )是指由抗磷脂抗体(APL抗体)引起的一组临床 征象的总称,主要表现为血栓形成,习惯性流产 及血小板减少等。在同一患者可仅有上述一种表 现,也可同时有多种表现。APS是一种自身免疫性 疾病。APL抗体包括狼疮抗凝物(LA)和抗心磷脂 抗体(ACA) ,在临床上由于抗心磷脂抗体( ACA)的特异性更强,与上述临床表现关系更密 切,因而也称为抗心磷脂综合征(anti-cardiolipin syndrome,ACS)。
PAPS可能。
• 动脉血栓多见于脑部及上肢,还可累及肾脏、肠系膜及冠状 动脉等部位。
三 、临床表现

抗心磷脂体抗体检测

抗心磷脂体抗体检测

抗心磷脂体抗体检测1. 检验目的用于体外定性检测人血清或血浆中抗ACA-IgG、IgM、IgA的水平。

2. 方法原理包被纯化的心磷脂抗原与待测样品中的ACA-IgG、IgM结合,加入酶标抗体后,形成复合物,后者与底物作用呈显色反应,在450nm处测定其吸光度(OD)值,反映样品中ACA-IgG、IgA、IgM水平是否正常。

3性能参数阴性参考品血清、阳性参考品血清应符合阴阳性参考品血清要求,最低检测限符合最低检出限的检出要求,精密度CV(%)不高于15%,37℃放置6天产品性能稳定。

4.始样品系统4.1标本类型:血清或血浆4.2采血严格按照静脉采血的通用规则。

4.3样本在离心前,须凝固充分。

4.4不能使用在室温下放置超过8小时的样本。

4.5如果检测不能在8小时内完成,要将瓶盖紧闭,并存于2—8℃保存。

4.6如果样本在48小时内不检测,将样本血清冻存于-20℃。

4.7样本只能冻融一次。

4.8加样前样本须无纤维、气泡及其它物质。

4.9标本的拒收:严重溶血、脂血、血量不够、三查三对不合格者拒收。

5容器和添加物的类型5.1无抗凝剂的红色或黄色胶头真空试管。

5.2EDTA、肝素抗凝的紫色、绿色胶头真空试管。

6设备和试剂6.1分析仪器:酶标分析仪:TECAN公司移液器:5μl~450μl移液器恒温水浴箱:上海一恒公司的CU420微孔振荡器:分析试剂: ASKI ELISA法检测试剂盒6.2 组成:6.2.1 纯化抗原包被反应条:室温平衡30分钟方可拆开包装6.2.2 酶结合物:用于酶联反应6.2.3 阳性对照:用于阳性对照反应6.2.4 阴性对照:用于阴性对照反应6.2.5 样本稀释液:用于稀释样本6.2.5 浓缩洗涤液:用前以蒸馏水作30倍稀释6.2.6 底物A:用于显色反应6.2.7 底物B:用于显色反应6.2.8 终止液:用于终止显色反应6.3 试剂保存与有效期6.3.1 新购试剂保存于2-8℃,勿冷冻,在有效期内使用。

抗磷脂抗体谱检测PPT

抗磷脂抗体谱检测PPT
•APS实验室检查应包括LA和 固相aPL
推荐
➢ 血清:避免溶血和脂血 血浆:产品说明书注明抗凝剂类型,乏血小
板 (<10,000/μ l )
➢IgG和IgM型aCL和β2GPI阴性但临床高度怀疑APS 时,检测IgA型
推荐
推荐
aCL采用半定量方法: 阴性:低于cutoff值 弱阳 性:介于95-99百分位数 阳 性:介值-80GPL/MPL 强阳 性≥ 80GPL/MPL
LA
▪ 具有体外抗凝活性的一组异质性抗体 ▪ 抗原:结合于阴离子磷脂上的血浆蛋白
▪ 可与心磷脂、其他磷脂、β2–GPⅠ或其他磷脂结合蛋白 (如凝血酶原)反应
▪ 仅有50%的LA阳性个体符合美国风湿病协会SLE诊断标准 ▪ LA 与血栓形成、病态妊娠以及SLE患者中血栓症的相关性
强于aCL
LA的检测
APS的非特异性临床症状
网状青斑*
自身免疫性溶血性贫血 心脏瓣膜病变* 多发性硬化样综合征和其
他脊髓病
非定位性神经症状 舞蹈病
恶性血管闭塞综合征* 肺动脉高压 肾功能不全
抗磷脂抗体谱
Antiphospholipid Antibodies(aPL)
概述
▪ aPL是一组能与多种含有磷脂结构的抗原物质发生反应 的 抗体,一族针对带负电荷磷脂或带负电荷磷脂与蛋白复 合物 的异质性抗体
▪ 自身免疫性疾病 高滴度I gG型aCL, β2–G P Ⅰ 依赖
▪ 非自身免疫性疾病 低滴度I gM型aCL, 非β2–GPⅠ依赖
β2 糖蛋白-Ⅰ(β2-GPⅠ)
▪ 50KD ,血浆中浓度大约200ug/ml
▪ 补体调节蛋白超家族
▪ 磷脂结合蛋白,可结合多种带负电荷磷 脂

抗磷脂抗体综合征副本 ppt课件

抗磷脂抗体综合征副本 ppt课件

血栓前状态
两大致病因素
病因
先天性:由于凝血和纤溶有关的基因突变
凝血因子Ⅴ突变 凝血酶原基因突变
检查方法
• 实验室检查: • 1.梅毒血清假阳性试验(BFP-STS)和VDRL试验 BFP-STS试验
在狼疮或其他结缔组织疾病的阳性率为5%~19%。这两种 试验的主要抗原成分为心磷脂、磷脂酰胆碱(卵磷脂)和胆 固醇的混合物,因此对于血栓形成,这两种试验方法的敏 感性和特异性均不高。 • 2.狼疮抗凝物质(LA) 白陶土凝集时间(KCT)是LA筛选试验中 较敏感的方法,对妊娠期的LA物质检测有重要的意义。 • 3.抗磷脂抗体、抗心磷脂抗体 APL抗体如LA、ACL抗体等阳 性,其滴度高时,临床意义更大。数次国际标准化专题研 讨会制订了统一的ELISA法检测APL的程序,该方法可对APL 的IgG、IgA、IgM类进行定量或半定量测定。现在推荐以阴 性、低度、中等、高度阳性来表达APL实验结果,以此提 高各实验室检测结果的一致性和重复性。
管血栓形成及胎盘梗死导致胎盘的功能下降所致。流产的 发生与IgG型抗磷脂抗体关系密切,IgM和IgA型抗磷脂抗体 阳性者流产的发生率极低。抗磷脂抗体综合征在妊娠期间
的其他表现还有:先兆子痫、妊娠高血压、胎儿生长发育 迟缓、胎儿窘迫及早产等,它们的发生率大概均为30%左 右。这些临床表现在妊娠期间易加重。少数非抗磷脂抗体 综合征孕妇血清高滴度的IgG抗磷脂抗体可使流产的风险 增加,但是否引起其他的妇产科并发症的增加尚不清楚。
症状体征
• 1.血栓形成 血栓是抗磷脂抗体综合征最主要的临 床表现。体内任何部位的血管均可出现血栓形成 ,常受累的有外周血管、脑血管及心、肺、肾等 脏器的血管,血栓一般为单发。血栓的发生与血 清抗磷脂抗体滴度的变化无明显关系,但有时大 血栓的形成常伴有抗体滴度的下降。

抗磷脂抗体综合征ppt课件

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鉴别诊断
血管炎 原发性血栓形成 白塞病的血栓形成 动脉粥样硬化斑快形成 Nhomakorabea治疗
抗凝:肝素(普通肝素 低分子肝素钠),华法令,阿 司匹林
由于APS有反复血栓形成的倾向,有动静脉血 栓者,应长期服用华法令或阿司匹林等药物。
控制原发病是治疗本病的关键,对于血栓倾向 的患者,抗凝治疗亦很重要。
抗磷脂抗体综合征
定义
磷脂抗体综合征(Antiphospholipid syndrome, APS)是一种以反复血 管栓塞、流产或胎死宫内的综合征。 在一些患者可出现心瓣膜赘生物、 网状青斑以及Coombs试验阳性的溶 血性贫血。
分类
⑴ 原 发 性 : ⑵继发性:当
有磷脂综合 征表现而无
上述表现出现 于系统性红斑 狼疮或其他自
例2
患者赵X男19岁, 因持续血小板减少1年,查 体无明显阳性体征,骨穿行骨髓细胞学检查: 骨髓造血未见异常,查尿常规无异常,肝肾功 无 异 常 , ANA-,aENA-,adsDNA-,ACL-, 给 予 升 血小板药物治疗无效,建议患者到北京某大医 院就诊
住院第二天患者即出现胸闷憋气、咳嗽、咳血 痰,急行V/Q显像证实为肺栓塞,立即给予溶 栓并抗凝治疗,病情得到控制,继之抗凝加激 素及免疫抑制剂治疗已经3年,病情尚稳定。
例3
患者张XX男16岁,因头痛失语1天1999 年6月住入当地医院,CT示脑血栓形成,
急症转入我院神经外科治疗,查血常规示血小 板偏低(80×109L),怀疑脑血管畸形行 脑血管造影,
彩超证实髂总静脉血栓形成,因当时不认识 “抗磷脂综合症”可发生多部位血栓形成这一 临床特点,不能给予患者家属一个完整的解释, 患者及家属坚决要求赔偿,只好赔付6万余元, 我科就诊查ACL-、LA-,给予调整方案继续抗 凝并加用激素免疫抑制剂治疗,已4年病情稳 定。
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<12 阴性 ≥ 12 阳性
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结果判读
关于单位:
相对单位 百分位
心磷脂抗体IgA/G/M RU/ml
心磷脂抗体IgM
PL-IgM-U/ml
心磷脂抗体IgG
PL-IgG-U/ml
心磷脂抗体IgA
PL-IgA-U/ml
经亲和层析从标准血清纯化得 到1微克/ml抗心磷脂IgA抗体 结合心磷脂的活性
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第三部分
抗心磷脂抗体的临床意义
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aPL实验室检测的适应症
• 所有发生自发性静脉血栓病变者 • 对于小于50岁的人群或没有其他明显危险因
素的老年人,发生中风或者外周动脉栓塞事 件者 • SLE或其他自身免疫疾病并发血栓病变者 • 反复流产或伴有早产的妊娠并发症的患者 • 不明原因的血小板减少患者
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结果判读
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结果判读
半定量:按照以下公式将对照血清或患 者样本的吸光度值比上标准品2的吸光 度值,通过比值半定量估计结果。
对照或患者样本的吸光度值 比值=
标准品2的吸光度值

a-2-GPI)
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抗心磷脂抗体
抗磷脂抗体
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抗心磷脂抗体
*抗心磷脂抗体(aCL) 属于IgG/IgM型的自身抗体,通
常使用ELISA方法测定,其中IgG被 认为与血栓形成和习惯性流产有很 强的相关性。
第一部分小结
①自身抗体
抗心磷脂抗体 (aCL)
②抗磷脂抗体 ③与一些疾病相关
≈ 抗心磷脂综合征
抗磷脂综合征
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第二部分
抗心磷脂抗体的检测
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方法学
标准化检测采用 ELISA法,分为IgG 、IgM和IgA型
APS是一种自身免疫性疾病,目前公认的诊断 标准是病人具有下列临床特点之一:全身各脏 器动、静脉血栓:复发性流产;胎儿死亡以及 由于胎儿宫内窘迫提前分娩致新生儿死亡;自 身免疫性血小板减少,上述临床表现同时伴有 病人血清中出现抗心磷脂抗体(aCL)和/或狼 疮凝血因子(LA)。
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检测流程
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注意事项
1. 样本:血清或EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝的血浆 2. 酶结合物使用前需混匀,稀释后需在4小时内使用 3. 所有试剂使用前需在室温(18-25℃)平衡30min 4. 底物液对光敏感,需避光显色
抗心磷脂抗体的定义
1.自身抗体是指针对自身组织,器官、细胞 及细胞成分的抗体;
23..人自体身抗有免心完疫整反磷的应自,脂身产免生抗疫自耐身体受抗(机体制;a的n维ti持c;ardiolipin,aCL) 4。.正常是人一体血种液中以可以血有低小滴板度的和自身内抗体皮细胞膜上带负
电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体 。常见于系统性红斑狼疮(SLE)及 其他自身免疫性疾病。该抗体与血栓 形成、血小板减少、习惯性流产或宫 内死胎关系密切。
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*狼疮抗凝物
抗 (Lupus anticoagulants,LA)
磷 脂 抗
*抗心磷脂抗体 (Anticardiolipin antibodies,aCL)
体 *抗 2-糖蛋白I 抗体
(Anti-2-glycoprotein-I antibodies
老年人。
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抗心磷脂综合征与aCL
抗磷脂综合征(anti-phospholipid syndrome, APS )是指由抗磷脂抗体(APL抗体)引起的一组 临床征象的总称,主要表现为血栓形成,习惯 性流产,血小板减少等。在同一患者可仅有上 述一种表现,也可同时有多种表现。
抗心磷脂抗体
研究证实,许多因素与aCL产生密切相关,常 见的原因有:
(1)自身免疫性疾病:如系统性红斑狼疮( SLE)、类风湿性关节炎(RA)、硬皮病等;
(2)病毒感染:如腺病毒、风疹病毒、水痘病 毒、腮腺炎病毒等感染;
(3)其它疾病:如支原体系统疾病等; (4)口服某些药物:如氯丙嗪、吩噻嗪等; (5)少数无明显器质性疾病的正常人,特别是
欧蒙建议按照以下原则解释结果: 比值<1.0 阴性 比值 ≥ 1.0 阳性
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结果判读
定量检测:分别以3份标准血清浓度和 其吸光度为横、纵坐标,以点对点的方 式绘制标准曲线,根据标准曲线求出患 者血清中的抗体浓度。
欧蒙建议对结果 做如下解释:
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提纲
1 什么是抗心磷脂抗体 2 抗心磷脂抗体的检测方法 3 抗心磷脂抗体的临床意义
(抗磷脂综合征)
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第一分部
什么是抗心磷脂抗体?
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抗心磷脂抗体
抗心磷脂是 pangborn 1来自41年从牛的 心肌中分离出来的一种具有抗原性的磷 脂,并加以命名
抗心磷脂抗体的免疫学分型有IgG和 IgA和IgM三类,其发生率男女无明显差 异。
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