母种培养基的配制

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简述母种培养基的配置流程

简述母种培养基的配置流程

简述母种培养基的配置流程英文回答。

1. Sterilization of the medium and containers.Autoclave the agar medium at 121°C for 15 minutes.Autoclave the glass petri dishes or other containers at 121°C for 15 minutes.2. Preparation of the stock solution of antibiotics.Prepare a stock solution of antibiotics in distilled water.The concentration of the stock solution should be 1000 times higher than the final concentration in the medium.For example, if the final concentration of ampicillin is 100 µg/mL, the stock solution should be 100 mg/mL.3. Addition of antibiotics to the medium.Add the appropriate amount of antibiotics to the autoclaved agar medium.The final concentration of antibiotics in the medium should be the same as the desired concentration in the bacterial culture.4. Pouring the medium into the containers.Pour the agar medium into the autoclaved glass petri dishes or other containers.The thickness of the agar layer should be approximately 4-5 mm.5. Solidification of the medium.Allow the agar medium to solidify at room temperature.This will take approximately 1-2 hours.6. Storage of the plates.Store the plates at 4°C until use.The plates can be stored for up to 2 weeks.中文回答。

如何制作母种培养基

如何制作母种培养基

如何制作母种培养基母种培养基用于制备微生物的母种菌液,是微生物学实验中必不可少的基础实验操作。

下面将介绍如何制作母种培养基。

材料准备:1.蛋白胨:作为碳氮源,提供微生物生长所需的营养物质;2.洋葱提取液:洋葱经过搅拌或榨汁机榨汁后,过滤得到的提取液中含有富含维生素B群等对微生物生长有促进作用的物质;3.水解酵母提取物:提供微生物生长所需的氮源等营养物质;4.葡萄糖:提供微生物生长所需的碳源;5.磷酸二氢钾:作为缓冲溶液的成分,稳定pH值;6.硫酸镁:提供微生物生长所需的镁离子;7.水:用于稀释和溶解固体试剂。

操作步骤:1.称取适量蛋白胨和洋葱提取液。

蛋白胨的质量可根据实验需求适量调整,一般建议取10g。

洋葱提取液的用量一般为蛋白胨的1/100至1/10倍,可根据实验需求酌情调整。

2.将蛋白胨和洋葱提取液分别加入两个不锈钢锅或烧杯中。

3.加入适量的水,搅拌均匀溶解。

4.将其中一个容器中的溶液转移到另一个容器中,反复搅拌至均匀混合。

5.加入适量的磷酸二氢钾和硫酸镁,继续搅拌均匀。

6.加入适量的葡萄糖,再次搅拌均匀。

7.将锅或烧杯中的溶液加热至沸腾,持续煮沸1分钟,以去除可能存在的微生物污染物。

8.关火后,继续搅拌溶液,待其冷却至室温。

9.将制备好的母种培养基倒入已经消毒干净的试管或培养皿中。

试管可用瓶塞或铝箔封口,培养皿可用锡纸包裹封口。

11.将制备好的母种培养基存放在冰箱或低温冷藏室中,以延长其保鲜期。

注意事项:1.操作过程中需要注意无尘环境,以防止微生物污染。

2.蛋白胨和洋葱提取液的质量与用量可以根据具体实验需求进行调整。

3.母种培养基的制备过程中,需要进行高压灭菌以杀灭可能存在的微生物污染。

4.母种培养基制备完成后,需严格密封,避免污染和水分蒸发。

以上就是母种培养基的制备方法。

制备母种培养基是微生物学实验的基础步骤,掌握好制备方法可以为后续的微生物培养和研究提供良好的基础。

如何制作母种培养基?

如何制作母种培养基?

如何制作母种培养基?
母种培养基如何制作?
(1)马铃薯制备。

将马铃薯洗净,削去皮与芽眼,切成薄片。

加水1000毫升,煮沸后保持20分钟,用4~8层纱布过滤,取滤液补足水量至1000毫升。

(2)培养基制作。

继续用小火加热滤液,并准确称取其余各种药品。

过秤一种,校对一种,全部无误后,加入马铃薯汁中搅匀。

琼脂最后加入。

加入前先用冷水将琼脂条浸泡5~10分钟,捞起撕碎后慢慢加入锅中,边加入边搅动,直至完全溶化。

(3)分装试管。

将培养基趁热倒入漏斗中,分装试管。

每批要用大小一致的试管,装量要相同,约为试管长度的1/5。

分装时,注意不使管口沾上培养基。

分装好的试管立放在试管架上,待琼脂凝固后塞上棉塞。

然后每5~10支试管扎成一捆,棉塞部分用双层报纸包好防潮,竖着排放在手提式高压锅的消毒桶中准备灭菌。

(4)棉塞制作。

取一块完整的棉花,大小厚薄根据试管口直径而定。

做法是:左手握紧棉絮,从边缘往内卷成圆形,右手捏住棉絮光头,将毛头往试管口塞入2/3,外头留1/3,呈馒头形。

棉塞松紧适度,与管壁紧贴无缝隙。

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食用菌栽培技术

食用菌栽培技术

食用菌栽培技术一、菌种制备菌种制备包括母种、原种、栽培种三级菌种。

1、母种培养基的制作。

常用的主要有以下几种:(1)马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基(PDA培养基)。

马铃薯(去皮)200克,葡萄糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。

(2)猴头菌培养基。

黄豆芽250克加水1000毫升,煮沸15~20分钟,过滤取汁,补足失水至1000毫升。

加入葡萄糖30克、蛋白胨5克、酵母膏1克、琼脂20克,加热溶化,然后分装。

适用于猴头母种培养。

(3)玉米粉培养基。

玉米粉30克左右,葡萄糖20克,琼脂20克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁0.5克、蛋白胨0.5克。

玉米粉煮至70℃左右保持1小时,然后加上其余的成分。

2、原种培养基的制作。

常用配方:(1)棉耔壳培养基。

棉耔壳100斤,麦麸15斤,石膏粉1.5斤,料水比1:1.1~1.2。

该培养基适合于大多数食用菌品种。

(2)木屑培养基。

干木屑100斤,麦麸20斤,蔗糖1斤,石膏粉1.5斤,硫酸镁0.5斤,料水比按1:1.1~1.2。

该培养基适合于银耳、黑木耳、猴头、金针菇、平菇等原种培养。

(3)粪草培养基。

稻草63斤,玉米粉4斤,大豆粉3斤,干牛粪25斤,过磷酸钙3斤,硫酸镁2斤,料水比1:1.1~1.3。

适合于双孢菇原种培养。

其中牛粪也可以鸡粪等等畜粪来代替,只是所加的量根据其所含氮量而定。

(4)谷粒培养基。

选新鲜、无虫、无霉变的小麦、(大麦、谷子、高粱、玉米粒均可),淘洗干净,按1:2.0比例加水,煮沸30分钟,闷4~6个小时,沥去水分,标准是“煮透晾干”,再加入干料1%的石膏粉,0.5%的石灰拌匀、装瓶。

适用于平菇、双孢菇原种培养。

该种培养基发菌快,在时间紧迫的情况下采用此培养基可以大大的节省时间。

3、培养基灭菌。

(1)高压蒸汽灭菌法。

主要用于母种,灭菌的条件是0.11~0.12千帕。

原种灭菌一般是0.12千帕,1.5小时。

(2)常压蒸汽灭菌。

主要用于原种和栽培种。

灭菌的条件一般是灭菌器内达到100℃后保持8~10个小时。

母种培养基实训报告

母种培养基实训报告

一、实训目的本次实训旨在通过学习母种培养基的配制及接种技术,掌握母种培养基的制备方法、培养基成分的选择与配比、接种操作步骤等,为后续食用菌的栽培和繁殖打下基础。

二、实训内容1. 母种培养基的配制(1)材料与仪器:马铃薯、葡萄糖、琼脂、水、天平、烧杯、三角瓶、玻璃棒、量筒、试管、棉塞、高压灭菌锅等。

(2)操作步骤:①称量:按照配方比例准确称取马铃薯、葡萄糖、琼脂等原料。

②制滤液:将马铃薯洗净去皮,切成小块,加水煮沸20-30分钟,过滤取滤液。

③化琼脂:将滤液加热至沸腾,加入琼脂,不断搅拌至琼脂完全溶化。

④调整pH值:用10%盐酸或10%氢氧化钠调整培养基的pH值,使其达到适宜范围。

⑤分装:将培养基分装至试管中,装量占试管高度的1/5-1/4。

⑥塞棉塞:在试管口塞入棉塞,用皮筋固定。

2. 接种操作(1)材料与仪器:菌种、接种针、酒精灯、接种箱、无菌操作台等。

(2)操作步骤:①准备:在接种箱内进行无菌操作,确保环境无菌。

②点燃酒精灯:点燃酒精灯,保持火焰稳定。

③接种:用接种针蘸取菌种,在培养基表面划线或打点接种。

④盖塞:接种完成后,用无菌棉塞封口,并用皮筋固定。

三、实训结果与分析1. 母种培养基的制备通过本次实训,我们成功制备了母种培养基。

培养基的pH值、成分配比等均符合食用菌生长的要求,为后续的菌种繁殖提供了良好的条件。

2. 接种操作在无菌操作条件下,我们成功完成了菌种的接种。

接种后的培养基在适宜的温度、湿度条件下,菌丝生长旺盛,表明接种操作符合要求。

四、实训体会1. 母种培养基的制备是食用菌繁殖的关键环节,要求我们严格按照配方比例进行操作,确保培养基的质量。

2. 无菌操作是接种过程中的重要环节,要求我们在接种箱内进行操作,避免杂菌污染。

3. 接种操作要熟练,掌握正确的接种方法,以确保菌种在培养基上生长良好。

4. 通过本次实训,我们提高了对食用菌繁殖技术的认识,为今后从事食用菌生产奠定了基础。

五、总结本次母种培养基实训,使我们掌握了母种培养基的配制、接种技术,提高了我们的实际操作能力。

制做母种培养基的简易方法

制做母种培养基的简易方法

制做母种培养基的简易方法
制做母种培养基的简易方法
菇农在制作食用菌母种培养基时,一般要用到琼脂。

但琼脂价格较高,有些地区还不易买到,而且用琼脂来固化培养基,工序也较繁琐。

为此,下面介绍几种简易母种培养基的制作方法。

绿豆粉培养基
将新鲜、干燥、无霉变的绿豆粉放入锅内,加入适量的水煮沸,调成糊状,装入试管,装入量为试管容量的1/4--1/3,然后塞好棉塞,在15磅的压力下灭菌45分钟,取出后趁热摇散备用。

麦粒培养基
将小麦粒用温水浸泡2小时,捞出放入竹筛,每4小时淋浇1次清水。

经约24小时,当麦粒萌发出0.50厘米长的小芽时,放入锅内煮透(煮沸半小时)取出沥干,均匀拌入1%的石膏粉,再装入试管,装入量为试管的1/3--1/2,塞好棉塞,在15磅压力下灭菌45分钟,取出后趁热摇散备用。

大米饭培养基
将大米除杂后淘洗干净,加入1%的糖,按常规煮成米饭。

选用硬度大的饭粒,均匀拌入1%的米糠或干马粪,将米饭搓成粒状,再装入试管中,装入量为试管的1/3--1/2,塞好棉花,在15磅的压力下
灭菌45分钟。

玉米粒培养基
将玉米粒粉碎(或切碎)成绿豆大小,用水泡透,捞出沥干水分,拌入1%的碳酸钙粉晾散后装入试管,装入量为试管的1/3--1/2,塞好棉塞,在15磅压力下灭菌45分钟,取出后趁热摇散备用。

如果没有高压灭菌锅,可用家用高压锅蒸2小时或用普通锅蒸6小时灭菌,效果也很好。

以上几种培养基适合作蘑菇、风尾菇、平菇母种的培养基。

绣球菌栽培:母种制备工艺

绣球菌栽培:母种制备工艺

绣球菌栽培:母种制备工艺母种是指经规范方法选育后而获得的,具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物,以玻璃试管为培养容器和使用单位,通常又称为一级种或者试管种。

关于绣球菌原始母种的来源,在有条件的地方可以从子实体上自行提取,但是由于制作过程要求严谨,难度较高,所以一般的生产单位都是从国家认可的研究单位购买而来的。

买回后直接进行母种的扩繁就可以,首先来看一下母种培养基的制作。

母种培养基的制作制作母种培养基时所采用的配方为:复合糖蛋白30克,蛋白胨1克,大豆粉1克,KH2PO4(磷酸二氢钾)1克,琼脂粉20克,水1000毫升。

上面的材料都准备好以后,就可以制作了。

将准备好的培养基配方依次倒入锅内,琼脂粉先不要放入,边加热边搅拌,等到沸腾的时候再加入琼脂粉,并不断搅拌,直到琼脂粉完全融化,然后再将煮好的培养基倒入塑料杯内,这时需要注意的是,如果体积不足1000毫升还要加水补足。

试管分装整理好以后,要趁热将培养基倒入固定在铁架台上的漏斗内,用量筒量取10毫升的蒸馏水,倒入一支空试管内,做分装试管的对照。

将漏斗软管下端的玻璃管插入试管口约3厘米深处,用右手捏紧橡胶软管的止水夹,使培养基缓缓流入空试管内,直到液面与蒸馏水的液面持平为止,然后松开止水夹,让培养基停止流入,并将试管下移离开软管。

接下来,依次重复,直到将培养基全部分装到试管内,分装试管时需要注意的是,动作要迅速连贯,以防止培养基在漏斗内凝固。

分装完成后,每支试管都要用硅胶塞住。

接下来还要将试管进行扎捆。

试管包扎一般情况下,每7支试管作为一扎,先用橡皮筋将试管下端扎紧,再用牛皮纸将试管口处进行包裹,并用橡皮筋进行困扎。

下面就要进行灭菌的工作了。

培养基灭菌将包扎好的培养基试管垂直放入灭菌框内,再将灭菌框放入灭菌锅内,在120摄氏度的高温下进行灭菌30分钟。

待灭菌锅温度降至60摄氏度左右时,要及时取出试管,并将它们摆放成斜面。

摆放斜面斜面的长度以试管长度的1/2—2/3为好,当试管内培养基完全凝固后才可以将试管收起,制作好的母种培养基应放置在阴凉、通风、干燥处保存,留作备用。

简述母种培养基的配置流程

简述母种培养基的配置流程

简述母种培养基的配置流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
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母种培养基的配制
1.器具
试管刀天平铝锅棉塞纱布漏斗烧杯量筒
2.常用的母种培养基配方
①马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯(去皮)200g,葡萄
糖20g。

琼脂20g,水1000ml,{如果需要配制250ml的培养
基,那么马铃薯、葡萄糖、琼脂的比例是50:5:5},也可用蔗糖
取代葡萄糖,即为PSA培养基。

还可以添加磷酸二氢钾3g,硫
酸镁1.5g,维生素B1 10㎎,即为马铃薯综合培养基。

广泛适
用于各种食用菌母种的分离,培养和保藏。

②马铃薯玉米粉培养基:马铃薯(去皮)200g,蔗糖20g,玉米
粉50g,琼脂20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,水1000ml。

本配方适合于香菇、黑木耳、猴头菌的培养。

③马铃薯黄豆粉培养基:马铃薯200g,蔗糖20g,琼脂20g,黄
豆粉20g,碳酸钙10g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,水1000ml。

适用于蘑菇、草菇。

④葡萄糖蛋白胨琼脂培养基:葡萄糖20g,蛋白胨20g,琼脂20g,
水1000ml。

⑤蛋白胨、酵母、葡萄糖琼脂培养基:蛋白胨2g,酵母膏2g,
硫酸镁0.5g,磷酸二氢钾0.5g,磷酸氢二钾1g,葡萄糖20g,维生素B1 20㎎,琼脂20g,水1000ml。

具体步骤
1.计算。

按照选定的培养基配方,计算各种成分的用量。

2.称量。

用天平秤取各种物质,马铃薯去皮去芽眼,削掉青绿部分,
对不易称量的成分,可用玻棒和烧杯称重,微量元素等需要量少,难以称准时,可先配成较浓的原液,再从中取出需要的量。

3.配制。

若配制合成培养基,先量取蒸馏水,加入琼脂,加热溶化;
再加入称好的其他物质。

为避免发生沉淀造成营养损失,加入的顺序一般是先加缓冲剂,再依次加入主要元素、微量元素和维生素等;
若各种成分均不发生沉淀,也可一起加入。

4.煮汁,去滤液。

马铃薯切成1㎝见方的小块或2~3㎜厚的薄片,加
水约1200ml煮沸,再用文火保持20~30分钟、并适当搅拌,使营养物质充分溶解出来,然后用4层预湿的纱布过滤,取其滤液。

5.补足水量,加药品溶化。

补足水量至1000ml,然后往滤液中加入琼
脂,小火加热,搅拌至琼脂完全溶解,再加入葡萄糖和其他营养物质使其溶化后,用PH试纸检测其PH值,可根据需要使用氢氧化钠和盐酸,调整适宜的酸碱度,进行分装。

注意开锅搅拌,防止溢出或焦底。

6.分装试管。

制备好的培养基应趁热分装,可用玻璃试管,首先把较
大的玻璃漏斗固定在滴定架上,下接一段乳胶管和玻璃管,用弹簧夹夹住胶管。

手拿试管,分装量掌握在试管长度的四分之一。

注意分装时,培养基不能粘在试管口壁上,否则会污染棉塞。

7.赛棉塞。

注意要松紧适度8.高压锅灭菌30分钟。

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