发酵法制备透明质酸的研究进展
透明质酸发酵工艺原理综述
透明质酸发酵工艺原理综述引言透明质酸是一种重要的天然高分子化合物，具有优异的生物活性和生理功能。
近年来，随着人们对健康和美容的关注度逐渐提高，透明质酸在医学、化妆品和食品等领域的应用日益广泛。
为了满足市场需求，在透明质酸的生产中，发酵工艺被广泛应用。
本文将对透明质酸发酵工艺的原理进行综述。
透明质酸发酵工艺的基本原理透明质酸发酵工艺是指利用微生物发酵代谢途径生产透明质酸。
发酵是一种基于微生物代谢活动的生物转化过程，其中微生物利用可再生资源合成有用产物。
透明质酸发酵工艺的基本原理可以概括如下：1.选择合适的微生物菌株：发酵过程中使用的微生物菌株是决定透明质酸产量和质量的关键因素。
常用的菌株包括发酵霉菌、乳酸杆菌和葡萄球菌等。
2.提供合适的培养基：微生物菌株需要适当的培养基来生长和合成透明质酸。
培养基中的营养物质包括碳源、氮源、无机盐、维生素和生长因子等。
3.发酵条件的调控：透明质酸的产量和质量受到发酵条件的影响。
调整发酵温度、pH值、搅拌速度和氧气供应等参数，可以达到最佳的发酵效果。
4.生物反应工程的应用：生物反应工程技术可以优化透明质酸发酵工艺，提高产量和纯度。
调控物质的输送、床层颗粒大小和固体浸泡比等参数可以改善反应过程。
透明质酸发酵工艺的主要步骤透明质酸发酵工艺通常包括以下主要步骤：1.复苏和预培养：从冷冻保存的透明质酸菌株中取出适量的菌种，进行复苏和预培养。
这个步骤有助于提高菌株的活力和适应性。
2.母液发酵：将预培养的菌种移植到透明质酸发酵的母液中，通过合适的培养条件进行发酵。
发酵过程中，菌株利用底物合成透明质酸。
3.分离和纯化：发酵母液中的透明质酸需要进行分离和纯化，以得到高纯度的透明质酸产品。
常用的分离纯化方法包括沉淀、离心、浓缩和脱盐等。
4.后处理：对纯化的透明质酸产品进行后处理，包括干燥、打粉和包装等步骤。
这些步骤可以提高透明质酸产品的稳定性和使用便利性。
透明质酸发酵工艺的优缺点透明质酸发酵工艺具有如下优点：1.生物可再生资源：透明质酸发酵工艺利用微生物代谢活动合成透明质酸，减少了对传统化石能源的依赖。
透明质酸的微生物发酵及下游提取工艺的研究
河北农业大学硕士学位论文透明质酸的微生物发酵及下游提取工艺的研究姓名：刘金龙申请学位级别：硕士专业：发酵工程指导教师：张伟20070609河北农业大学硕士学位（毕业）论文由图８可以看出，从０时刻起发酵液中溶氧开始下降，从第８小时ＤＯＴ开始急速下降，直至降为０，此时由于菌体生长进入对数期，耗氧量增加，使得发酵液中溶氧急剧下降，从第１０小时一直到第１６小时，ＤＯＴ值一直维持在０水平上，推测此时的通氧和搅拌水平已无法满足菌体急剧生长所需的供氧量，而ＤＯＴ值在第１６小时后逐渐回升，推测可能是由于发酵液黏度过高导致发酵液不能有效混匀，部分气泡滞留其中（见图９），这时的溶氧电极读数已不能代表发酵液中的真实的溶氧情况了．田９拍摄于发酵１６ｈＦｉｇ．９Ｓａｔｅｎａｔｔｈｅｌ６ｔｈｈｏａｒｄｕｒｉｎｇｔｈｅ∞ｕｍｏｆｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ本试验采取以下４种不同策略对搅拌和通氧的调控进行了尝试，其他条件均一致，４种策略如下，Ｉ整个发酵过程采取３００ｒ／ｍｉｎ的搅拌速度，５Ｌ／ｍｉｎ的通气速率。
ＩＩ整个发酵过程采取６００ｒ／ｍｉｎ的搅拌速度，５Ｌ／ｍｉｎ的通气速率。
Ⅲ整个发酵过程保持５Ｌ／ｍｉｎ的通气速率；采取３００ｒ／ｍｉｎ的搅拌速度，当ＤＯＴ值降至０时采取６００ｒ／ｒａｉｎ的搅拌速度一直到发酵结束．Ⅳ整个发酵过程保持１０Ｌ／ｒａｉｎ的通气速率：发酵起始阶段采取３００ｒ／ｍｉｎ的搅拌速度，当ＤＯＴ值降至０时采取６００ｒ／ｍｉｎ的搅拌速度一直到发酵结束。
整个发酵过程中，定期取样检测ＨＡ的含量，结果如下图１０和表１１所示：河北农业大学硕士学位（毕业）论文具体操作为将上一步中得到的沉淀离心后，抽走上清，向沉淀物中加入高浓度的氯化钠溶液，开动搅拌，使沉淀溶解。
这一步骤的关键点是氯化钠浓度的确定，本试验选择不同浓度的氯化钠进行了尝试，结果如下表所示（ａ、ｂ、Ｃ、ｄ、ｅ代表一组呈逐级递增的等差数列的一组数据）。
当氯化钠的浓度达到Ｃｍｏｌ／Ｌ时，ＨＡ的收率为８８．１％，在此基础上再增加氯化钠的浓度，收率提高并不明显，因此选择ｃｍｏｉ／Ｌ为适宜氯化钠浓度。
微生物发酵法生产透明质酸
微生物发酵法生产透明质酸郭学平透明质酸（hyaluronic acid, HA）,又名玻璃酸，是一种酸性黏多糖，广泛存在于脊椎动物的各种组织细胞间质中，如皮肤、脐带、关节滑液、软骨、眼玻璃体、鸡冠、鸡胚、卵细胞、血管壁等，其中以人脐带、公鸡冠、关节滑液和眼玻璃体含量较高。
透明质酸价格昂贵，在日本有“白金”之称，目前的生产方法有发酵法和提取法两种。
1 透明质酸的发展1934年美国Meyer等首先从牛眼玻璃体中分离出该物质。
20世纪70年代，Balazs等从鸡冠和人脐带提取HA，并配制成眼科手术用黏弹性辅助剂—NIF-HA,开创了HA医学应用的先河。
由于HA优良的保湿和润滑性能，20世纪80年代初开始用于高档护肤化妆品，其需求量大幅度增加。
受原料限制，从人脐带和鸡冠提取的HA产量低、成本高，不能满足市场需求。
为了寻找HA的新来源，降低生产成本，研究了发酵法生产HA。
工业化发酵生产HA是日本资生堂最早开始研究的，他们借鉴前人对某些链球菌产生HA这一重要发现，利用现代发酵技术和设备，以提高HA产率为目的，对发酵生产HA进行了较全面地研究。
80年代中期，日本已有发酵生产的HA上市，价格大大低于从动物原料提取的产品。
提取法和发酵法生产HA的比较见表1。
表1 提取法和发酵法生产HA的比较项目提取法发酵法存在状态在原料中与蛋白质和其它多糖形成复合体，分离精制复杂在发酵液中游离存在，分离精制容易分子量与保湿性小于1.0×106,保湿性差大于1.5×106，保湿性强品质与产量取决于动物原料的品质与数量品质稳定，产量大价格（化妆品用） 2.2万元/kg 1.6万元/kg应用价格昂贵，化妆品中的添加量受到制约能增加化妆品中的添加量发酵法生产HA方面的研究主要集中在日本、英国和美国也有少量报道。
国内从1980年开始研究从鸡冠和人脐带提取纯化HA，在1990年前后化妆品用HA和医药用HA先后研制成功并生产。
发酵法生产透明质酸的研究进展
第６ 期 （ 总第 ３ ８ ６期） ２ ０ １ ５年 ６月
农产 品加工
Ｆ ａ ｒ ｍ Ｐｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｓ Ｐ ｒ ｏ ．
文 章 编 号 ：１ ６ ７ １ — ９ ６ ４ ６（ ２ ０ １ ５ ）０ ６ ｂ 一 ０ ０ ７ ４ — ０ ２
一
酶的基因引入乳酸乳球菌进行表达 ，均得到高产 Ｈ Ａ 的基 因工程菌 。其 中，任瑶瑶等人 从牛鼻黏膜 中分 离纯 化得 到 １ 株 生产 透 明质 酸的菌 株 ，接着 对 透 明 了研究 ，新疆克拉玛依市独山子公司生产主要 用于 质 酸产 生 菌用 １ ６ Ｓ ｒ Ｄ Ｎ Ａ分 析鉴 定 该 菌 为马 链 球 菌 马 化 妆 品 的透 明 质 酸 ，其 产 量 将 达 ４ ｔ ，位 居 国 内 第 亚种 ，该 菌摇瓶发 酵生产透 明质 酸的产量可 达 ３ ． ０ ｇ ／ Ｌ 。 １ 位。但是人们仍需要药用级的透明质酸 ，以现在的 ２ 培 养基 和培 养条件 生 产 状 况 还远 远 不 能 满 足需 求 ，因此 对 发 酵 方 法 生 产 透 明质酸 的研 究非 常迫 切 。 培 养 基 和 培 养 条 件对 透 明 质 酸 的发 酵 生 产 非 常 重 要 ，以 主要 生 产 透 明质 酸 的 兽 疫链 球 菌对 培养 基 １ 菌 种选 育 和 培 养 条件 要 求 非 常 严 格 ，因 为 兽 疫链 球 菌代 谢 途 对产 Ｈ Ａ菌种进行传统 的诱 变育种 改 良，主要 径 会 严 格受 到培 养 基 的配 方 以及 比例 的 影 响 ，同 时 是用化学诱变剂亚硝基胍 （ Ｎ Ｔ Ｇ ） 以及 物理 诱 变 剂 兽 疫 链 球 菌对 氧 气 的供 给 比较 苛 刻 ，因此 发 酵 过 程 紫外线 、６ Ｏ Ｃ ｏ 射线或单独或联合使用进行诱变 ，可 中搅 拌 桨 的转 速 和通气 量要受 到严 格控 制 。 反 复 多次诱 变 ，从 而 达到 高 产透 明质 酸 的生 产 水平 。 目前 ，宋 磊圈 对 高产 透 明质 酸 的兽 疫链 球 菌 进 行
发酵法生产透明质酸工艺研究
１ ． 菌株 兽疫链球菌 ： ．１ １ 江南大学提供菌种 ， 经诱变得到高产菌株 ， ：Ｈ ３ １ ． 编号 Ｌ ０ ０８ １１ 培养基 葡萄糖、 ．． ２ 酵母粉 、 硫酸镁 、 磷酸二氢钠、 维生素 Ｂ ， ｌ优化方案配成培养基。
兽疫链球菌发酵法生产透明质酸
吉林大学
硕士学位论文
兽疫链球菌发酵法生产透明质酸
姓名：***
申请学位级别：硕士
专业：微生物与生化药学
指导教师：滕利荣;刘兰英
20031201
吉林大学硕士学位论文兽疫链球菌发酵法生产透明质酸于酶解过程中，仍有部分细胞壁残留，而裸露的质膜部分则相互粘连。
Ｆｉｇ．４ｍｗｉｌｄｂａｔｅｒｉａｓｂｅｆｏｒｅ
ＦｉｇｓＴｈｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓａｆｔｅｒｅｎｚｙｍｅｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇｅｎｚｙｍｅｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇ
３．２激光诱变
激光可产生光、热、压力、电磁场等效应，作用于微生物细胞时，生物分子吸收光子或在激光的电磁场作用下分子内发生能级跃迁，达到一定的振动能并产生自由基，引起生物分子的分解、断裂，导致分子激活或损伤，在修复过程中有可能发生变异。
原生质体对激光敏感性较强，可在较小剂量下产生突变，得到较高正突变率。
由图６可见，随激光照射时间的延长，每一种功率密度下致死率均上升。
当照射时问为３００ｓ，功率密度为４０ｍＷ／ｃｍ２时，致死率为９９．８８％。
将存活的菌株经发酵培养，筛选透明质酸高产菌株。
兽疫链球菌的改良及其发酵生产透明质酸论文
兽疫链球菌的改良及其发酵生产透明质酸论文摘要透明质酸作为一种重要的生物高分子化合物，具有广泛的应用价值。
然而，其传统的生产方法存在一些问题，如成本高、产量低等。
因此，本论文旨在研究兽疫链球菌的改良及其在透明质酸生产中的应用。
通过优化兽疫链球菌的培养条件、改良发酵工艺等方法，提高透明质酸的产量并降低生产成本，从而推动透明质酸产业的发展。
引言透明质酸是一种多糖酸，是由葡萄糖和N-乙酰葡萄糖胺通过β-(1,3)和β-(1,4)的糖苷键连接而成。
它具有很高的黏性和保水性，被广泛应用于医药、化妆品和食品等领域。
传统的透明质酸生产主要依赖于动物组织的提取，这种方法成本高昂且资源有限。
因此，寻找更加经济、高效的透明质酸生产方法具有重要意义。
兽疫链球菌是一种常见的细菌，广泛存在于土壤、水体等环境中。
它具有很强的代谢能力和适应性，可以利用多种底物产生透明质酸。
因此，通过改良兽疫链球菌的生理特性和发酵工艺，可以提高透明质酸的产量和质量，并降低生产成本，从而推动透明质酸产业的发展。
兽疫链球菌的改良兽疫链球菌的改良主要包括改良菌种、优化培养条件和遗传工程改造等方面。
改良菌种传统的透明质酸生产菌种主要为野生兽疫链球菌，但其透明质酸产量较低且生长较慢。
因此，研究人员通过随机诱变和遗传工程等方法，改良了菌种的生理特性。
例如，选育出透明质酸高产菌株，能够在较短时间内产生大量的透明质酸。
优化培养条件透明质酸的产量受到兽疫链球菌的培养条件的影响较大。
研究人员通过优化培养基的组成、调节培养条件等方式，提高透明质酸的产量。
例如，添加适当的氮源和碳源可以促进兽疫链球菌的生长和代谢，从而提高透明质酸的产量。
遗传工程改造通过遗传工程改造兽疫链球菌，可以大幅提高其透明质酸产量。
研究人员利用基因工程技术，将透明质酸合成相关基因导入兽疫链球菌中，从而增强其透明质酸合成能力。
此外，通过基因敲除、基因表达调控等方法，也可以调控透明质酸产生相关基因的表达水平，提高透明质酸的产量。
兽疫链球菌发酵生产透明质酸过程控制与优化的开题报告
兽疫链球菌发酵生产透明质酸过程控制与优化的开题报告一、研究背景透明质酸（hyaluronic acid, HA）是一种广泛应用于医药、化妆品等领域的高分子复合物质。
兽疫链球菌（Streptococcus equi subsp. Zooepidemicus, SEZ）是HA的主要生产菌株之一。
目前，通过发酵方法生产HA已经成为主流工艺，但是在过程控制和优化方面仍存在一些待解决的问题。
二、研究目的本研究旨在深入探究SEZ发酵生产HA过程中的关键控制参数及其对产品质量的影响，建立SEZ发酵生产HA的优化方法，提高产品质量和产出效能。
三、研究内容1. SEZ菌株选育及其特性研究通过SEZ的基本特性研究，了解其生长特征、代谢产物、发酵条件等相关信息。
2. SEZ发酵生产HA过程控制通过实验室规模下设计实验，研究SEZ发酵生产HA过程中关键的控制参数，探究对产品质量和收率的影响。
3. SEZ发酵生产HA过程优化基于上述实验结果，建立SEZ发酵生产HA的优化方法，以提高产品质量和收率。
四、研究方法1. 实验室小规模发酵过程研究对SEZ发酵生产HA过程中的关键控制参数进行分析，探究其对产品质量和收率的影响。
2. 数据分析通过分析实验结果，建立数学模型，预测SEZ发酵生产HA过程中的关键控制参数及其对产品质量的影响。
3. 优化方案设计基于数学模型，设计SEZ发酵生产HA过程优化方案，以提高产品质量和收率。
五、研究意义本研究将为SEZ菌株的应用和HA生产的工业化提供重要的理论和技术支持。
同时，通过优化发酵生产HA的过程，可提高产品的质量和产出效率，为行业的健康发展提供重要的参考依据。
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源能提供不同的生长因子进行疆补，事Ｊ于细胞生长．奖明麓１１９Ｉ在ＵＶＤ．３４透明质睃产生菌的发酵培养基中 添加复合囱．桃氰源ｆｍ（虽良陈）：ｍ（酵母膏）：ｍ（牛肉罾声ｌ：Ｉ：ｌ】．ＨＡ的产置可达４．５９，Ｌ。安海平等ｌ驯发 现．餐臼胨是马疫链球菌Ｎ２５０６最好的氰源。丽商海军等｝１７】发现酵母粉是兽疫链球ｉ滴Ｈ２３最好的簸源．这 可能是因为随种不同，其最佳氮源也不同。
物来源麴致ｊ南璃邀污染豹冠狳．所产ＨＡ白－型籀的产缀和分子鼹等傀点，因此微生物发酵法生产融逐步取
代传统的从动物组织中提取ＨＡ的方法成为制蔷ＨＡ的警要方法［６１． 发酵法生产透明质酸并挠淼箕产量和控制毵分子量的研究内容主要有：菌株筛选，发酵条件优化积分
作者简介：熊越（１９８５－）。鹦，研究饿，燕璺研究力－辩为食赫徽饿钫孥
Ｐｒｏｇｒｅｓｓ
ｏｎ
Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ Ａｃｉｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ
ＸＩＯＮＧ Ｙｕｅ，ＨＥ Ｚｈｉｆｅｉ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｍｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４００７ １ ５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｓｔｕｄｉｅｓ ａｉｍｅｄ ａｔ ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｓ仃ａｉｎ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ａｎｄ弘Ｄ∞ｓｓ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｈｙａｌｕｒｏｎｉｅ ａｃｉｄ
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发酵法制备透明质酸的研究进展
熊越
贺稚非
（西潦大学食品科学学院，重庆４００７１５）
摘要：对笈酵滋制备透明质酸的攘种选育．工．芑傀化等方面的研究进艇连行了综述，重点讨论了强度，ｐＨ值、 揽拌转遂，发辨时问以及培养方式等发醛拳件对透嚼质酸产蟹耜分予量的影响，并对发酵竣生产透明质醴的发震 前景进行了展鞠，馋在为发酵弦嚷产透明质陵的发酵条件的嗣ｆ究搀供参考和借壤． 关键调ｔ透ｌｉＩ！ｌ魇艘；发酵；蔚疫链球莳
离纯化。优良的荫种是发酵法生产透明质酸的基础．当菌种确定焉，发酵条件成为影响ＨＡ的产童和分子 量的枣要冈素。因此。优化培养基和发酵条件是发酵法生产ＨＡ的关键步骤。本文对蔺种选育、培养基的 营养条件及发酵工艺的优化进行了综述，以期能指导透明质酸的发酵生产．
１菌种选育
高产ＨＡ麓种的选育是提菇发酵法生产ＨＡ产量的先决条件，产透明质酸的蔼种主要是链球菌属的Ａ群 和Ｃ群。Ａ群主要是酿脓链球菌等。由于Ａ群致病性较强．较少使用．放多采用致病性较弱的Ｃ群，主要肖
株无溶阻性藤株ＮＣＩ １５０．并在此基础上继续ｆ｝ｌ够ｃｏ吖射线辐照诱变樽到产篮较高的菌株ＮＣｌ６８，使透明质 黢产量与出发蒲株ＮＣＩ １５０相比提商７ １０１％。２００９年．邓静ｌｌ２Ｊ蒋人比较了紫外、硫酸二乙酯（ＤＥＳ）、微 波、温度等不同诱变方法攀独和复合诱燮对兽痰链球灞产透明质酸的影响，发现复合诱蹙比单一诱变效果 好．丽摄优条件。Ｆ得别的蔼株的ＨＡ产量捆对予ｊ霹ｉ始鞘株增加了７２％。
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Ｉｌ研等人在马疫链球黼豹生物反应器中。加入５０扎的蔗糖．１０玑酪蛋白承解物．经ＪＳｔ２４．－－２８ｈ后，产出５－－６８
约ＨＡ，ＨＡ的到收率怂蔽终物质的６５％。分子匿为４ｘ ＩＯ％。
生产ｌ认的培莽蔟巾常用的氮源为蛋白胨，簿母裔绒授出粉、牛肉浸膏等的复含氮源。因为复配豹瓴
ｉ：｝ｉ ｌ株溶斑鬃和透明质酸酶双缺陷型掰产ＨＡ的突变请株ＦＪ－２３．使ＨＡ产璧提裔５倍。魏甲乾ｉｌｏｉ等人利掰重离
子和紫外线辐照诱变相结合的方法对耪疫链球麓Ｃｙ‘’ｃ１９１７进行７诱变处理。获得ｌ橡产ＨＡ能力提商３僻多
的高产透明质酸菌株Ｈ－７。缸痢大学的陈永浩等人ｌｌｌＪ以通过紫外线和弋。吖射线辐照诱变码链球菌。碍剜～
３发酵条件
发酵条件是影响ＨＡ产量和分子盈的荚键因鬃．适宜的发酵条件不仅有利予菌体的生长．砸且可以提 离微生物台成产物的能力．下晒分别就发酵条件（温发、ｐＨ值，转速，发酵时问、培养方式翻漆加捌簿）对 ＨＡ的产鼍和分子墨的彩响进行综述。
３．１温度对ＨＡ产量和分予璧的影响
溢艘髓影响微生物机体内酶的沂性、细胞质腔｝ｌ勺流动性以及物质的溶解缱，因ｉｉｉｉｉ温度豹变化会对微生 物的牛长和代谢过程产簪影响１２ ｎ］．一般来说荫种的域适嗽长潺度与最适产酸温度不一致，所以在不同的阶 段往往采用不同的温度，在种子培养阶段和发酵的初期．３７℃培养可使篱体较恢的生长繁殖。发酵中后明 瓤适当改变温度．搬撒通通过变温可搜镯萄镛的代谢方向囱合成蘸体细胞缀转向合成ＨＡ，从而可以提高 产率。通过考察翁种的生长曲线对ＨＡ的影响。初步确定分阶段控温董艺．可鸯ＥＨＡ产量有一定程度豹提高． Ｋｉｍｌ＝！认为对于马链球落ＫＦＣＣｌ０８３０。３７＇Ｃ时。ＨＡ的分子赞町达翻３．窖ｘ１０｛６ Ｕ。Ａｒｍｓｔｒｏｎ９１２３ｌ簿发现，温 度商予域低予３７℃时，ＨＡ的产量和分子熬挪会下降。另外许多研究者认为目前用予生产ＨＡ的链球耩大多
ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ＨＡ
ｆ孤ｅｎ枷明．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ，ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ，Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ７Ｊ的ｐｉｄｅｍｉｃｕｓ
透明质黢《ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉ也ＨＡ）是由Ｄ－葡萄撼醛酸和Ｄ童“Ｚ。鬣氮毖葡籀耱的双糖筚位以肛１１３和争ｌ＇４ 糖嚣键反复交赣连接蜥成鹇链状商分子酸性黏多糖。因为其最早由Ｍｅｙｅｒ和Ｐａｌｍｅｒ在１９３４年从牛隈玻璃 体巾分离得到，所以又名玻璃隈【ｌ】。ＨＡ分子中的羧基和极性基丽可与承形成氧键，从而可以吸收与保持 自身体霆千倍以上的水分，是嘲际上公认的离黼质｛｜ｉｉ｝湿钠。由予其独特的生物适应性，豢水性和黏弹性，． 透明质酸被成用予促迸伤口愈合【２Ｉ，治疗骨关节炎【３】张傲药物裁体【４】。在化妆晶和食品原料中ｆ５】。ＨＡ的 斑用也很广泛。通常，低分子擞的｝执用作食品原辩，中等分子爱的｝执用于化妆赫，而高分子麓的ＨＡ在 睚擘｝：使用较多． ｝纸广泛存在予动物的各种组织闻质中，如皮肤、脐带、眼玻璃体、鸡冠、荚节滑渡、软骨、卵细胞 鄯雁Ｌ镑髓等，其巾以人脐带、鸡冠、关节滑液和玻璃体含擞较崧。传统的｝ｌＡ提取方法就链１２置这些动物组 织为联辩进行提取。但这照动物组织来源圈罐、价格昂贵、：：：Ｉ＝艺复杂、产品得韶ｌ瓯魏耪制嘲娥。而微生物 发酵法与动物缎纵提取法榴比．具钉原料不受限制．勃≯分勰纯化，成本低，易于形贼规模化生产。晃动
时，ＨＡ的分子援随转速的升蕊望现先增后酶的趋势。知ｍｇ虹∞ｆ硼将搅拌速度从３０帖Ｉｏｏｏ疗ｒａｉｎ进行变化，
ＨＡ豹分子蟹簇本没有改燮。
３．４发酵时闻对ＨＡ产量和分子量的影响
发酵避稷中选择合适盼培养时阀对整个发酵工艺不仅节省了时闯，而毽降低了发酵成本。冯建成Ｉ硎 认为，码疫链球蔺ＳＩ－Ｉ－２程疑酵轴精明进入对数期．菌体慧与ＨＡ的产鬣嘲步急铡增长，在４４ｈ时ＨＡ的产基
数怒来自呐乳动物体内的细蒲，因此，甏程体外培养啦产匿多的姒，需提供袋儆悔内生长的人王培弊环
境，其生长适宜激度与宿主体温３７１ｃ相近。
３．２
ｐＨｌ暄嘲。ＨＡ产量和分子量的影响
链球麓是～种乳黢蒴。产生乳毅、乙酸等小分子有机璇．发酵过穰巾需要用碱液进行中和玖维持适当
的ｐＨ值。报错Ｍｉｃｈａｅｌｌ２４１等人的研究，ｐＨ蔓ｊ６．７如．２时．ＨＡ产璺最商．Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ［２剐等人也认为ｐＨ对ＨＡ的 产率和产璺彩晌较大，在ｐＨ为６．７时．最有利于兽疫链球翁生产ＨＡ，ｉ峨＇Ｈ对ＨＡ的分子篮基本ｊ墼肖彩响． 罗瑙明１２ｊ１认为ｐＨ值对龋体合成ＨＡ和乳陵有不同的影响．ｐｈｉ９７．５时最迂予细胞生长，也最适予ＨＡ的合成。 葡萄精消耗也鳢彻底，弧ｐＨ镪巍０：８时对乳酸台成有利。
＆即协删缈嘲觎嚣豹ＨＡ产生纂因ｓ曲ａ蚺导入煎缀足∞疗中，得到了分子跫３．５ｘｌ旷列１．９ｘＩ旷Ｄ荔的ＨＡ，显
示了熏组尼瑚作为ＨＡ生产落的潜力。
２培养基组分
良好盼培葬基是微牛物发黪的基础，帑养基的舷质对发静孛产起蕾楚关重要的作用。难产ＨＡ发酵的 培养纂一般包括碳源、氯源、无机盐、维生素， 其次为蔗糖和麦芽精．这是因为绝大多数微生物对单槠的利用速度委比双错和多搪快．Ｖｉｄｈｙａ Ｒａｎｇａｓｗ硼ｙ
０１１
ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌ越ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ ＨＡ ｗｅｒｅ ｅｍｐｈａｓｉｚｅｄ，ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｐｒｏｓｐｅｃｔ ｏｆ ＨＡ
ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｓｏｍｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ
ｐｃⅨｌｕｃｔｉＯｎ ｂｙ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ。ｉｎｔｅｎｄｉｎｇ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ
鲧生质体诱变使用豹诱变剂避常有物理和化学２大类．滕利荣１１３嗨发现，经过激光诱赍后，蒋疫链球
菌的鲧生质体存活的菌株｝认产率绝犬部分都有所提高，这为发醉法生产ＨＡ提供了一种获褥高产馥椿的新 途径。 随菥龠成ＨＡ关键酶旗闼的克降，构建旗因工释翁成为提高产量并挖翩分予璧的研究热点。与体统发 酵撼棚比．錾囡ｊＩ：程荫难产ＨＡ的貔势耋蟹钉：（１）何提商｝ＩＡ产燕；（２）不产生对人体有密豹物质｛《３）＋卜游 分离过程糨ｊｃ雪简化。嘲内外学者对透明质陵台成酶的空间雅掏和能化性能进行了犬缀研兜，取得了一熙进 怒．织尚有许多未麓之谜。与阉外棚比，隔内在分予机制研究也起步较娩，ｌ；；Ｉ新生要蓿力予提离ＨＡ发酵 产量。提高ＨＡ产量和分子量的策略源自多项肇础研究的成果。单一手段难予达到磁镌效粜【ｌ棚。郝宁［１５ｌ等 将兽疫链球藏ＨＡ的合成纂因ｈａｓＡＢＣ以及合成透明颧荫赢缎蛋白的ｖｇｂ蒸因插入网性荫寝达质牧ｐＥＵ３０８ 中．遴过电转化导入兽痰链球蒴中．得到了透明颇陵血红蛋臼豹袭达。使ＨＡ产量增加３１％。此法生产的 ＨＡ有相对分子质量相对均一、分数性小孵特点。Ｈｕｉｍｉｎ