实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定
论蛋黄卵磷脂的纯化及含量的测定
摘要：采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。
结果表明，从蛋黄提取的卵磷脂粗品经柱层析纯化，精制卵磷脂的纯度达99.6。
用消化定磷法可以准确测定卵磷脂的含量，有较高的准确度。
关键词：卵磷脂；纯化；含量；测定1引言卵磷脂又称为磷脂酰胆碱，是磷脂酸的衍生物，由甘油与脂肪酸和磷酸胆碱结合而成。
卵磷脂广泛分布于动物、植物和酵母中。
卵磷脂是构成细胞等生物膜、脑组织和神经组织的重要组成成分[1]，对酶的活性也起重要的作用，而且也是乙酰胆碱的重要供给源[2]。
卵磷脂因为其乳化特性和安全性，可用于生产人工血浆、脂乳剂。
临床上可用于治疗动脉粥样硬化、脂肪肝、神经衰弱、营养不良、胆固醇结石的防治药物及静脉注射脂肪乳的乳化剂。
在食品、化妆品和医药领域有着广泛的用途。
目前，卵磷脂的来源主要是从鸡蛋黄、大豆和猪脑中提取。
传统提取卵磷脂的几种方法，如用二甲醚从生蛋黄中提取卵磷脂、用乙醇和酸类从生蛋黄中提取卵磷脂、用丙酮提取卵磷脂和冷冻蛋黄，用乙醇和己烷将卵磷脂与中性脂进行分离，提取卵磷脂等方法，这些方法提取的卵磷脂达不到食品和医用的高纯度[3]，因此，必须对粗产品或市售的卵磷脂进行纯化。
在本工作中，作者采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯（自提）；化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。
2实验部分2.1试剂和仪器蛋黄卵磷脂（卵PC）中性三氧化二铝（200-300目）；硅胶G；氯仿（AR）；甲醇（AR）；乙醚（AR）；浓硫酸（AR）；钼酸铵（AR）；30过氧化氢（AR）；磷酸二氢钾（AR）；层析柱（Ф15cm，L40cm）；紫外检测仪（自制）；台式平衡记录仪（上海大华仪表厂）；分光光度计（日本岛津）；EYELASB-20xx 旋转蒸发仪（上海EYELA有限公司）。
2.2实验方法和结果2.2.1蛋黄卵磷脂的提取取12克蛋黄置于150mL的锥型瓶中，加入35mL乙醚，搅拌10min，放置20min，过滤，于45oC的条件下，用旋转蒸发仪蒸干乙醚，再放入真空干燥器减压干燥20min，彻底除尽乙醚，粗提取物离心10min，取出下层的卵磷脂，约为2克。
实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
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（2）脂肪酸的检查 取棉花上沉淀少许，加5mL水，搅
拌，有无泡沫生成？过滤，得滤液，以浓 硝酸酸化后加入数滴10％醋酸铅溶液，观 察有何现象?
蒸去乙醇
乙醇溶液
油状物
脂肪
卵磷脂
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氯仿
丙酮
油状物
氯仿溶液
卵磷脂
脂肪
脂肪 卵磷脂
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【实验步骤】
1．卵磷脂的提取
（1）取1个熟的鸡蛋黄，置于研钵中研细，加 入
15mL 95％乙醇溶液，研磨，搅拌均匀。减压过滤，
收集滤液。将漏斗的残渣移入研钵内，加15mL 95 ％乙醇溶液，研磨，过滤(滤液应完全透明)，将 两次滤液合并于蒸发皿内。
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（2）将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇，至 干，得到黄色油状物。
（3）冷却后，加入2mL～3mL氯仿，搅拌使 油状物溶解。
（4）在搅拌下慢慢加入10mL～15mL丙酮， 即有卵磷脂析出，搅动使其成团粘附于 玻棒上，溶液倒入回收瓶内。
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2．卵磺脂的水解及其组成鉴定 （1）卵磺脂的水解
滴95%乙醇溶液，用硝酸酸化，加1mL钼 酸铵试剂，观察有何现象产生？最后直接 用火加热5min～10min，观察有无黄色磷 钼酸铵沉淀生成？
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注意事项
乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好
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思考题
加丙酮之前为何要加少量的氯仿？
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卵磷脂的提取实验报告
一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。
2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。
3. 学会使用各种实验仪器，如离心机、紫外分光光度计等。
4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。
二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂，由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有多种生物学功能，如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。
本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂，通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤，得到高纯度的卵磷脂。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。
2. 实验试剂：无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。
四、实验步骤1. 卵磷脂的提取（1）称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄，加入30mL温热的95%乙醇，边加边搅拌均匀。
（2）将混合液冷却至室温，用漏斗过滤，收集滤液。
（3）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂粗制品。
2. 卵磷脂的纯化（1）将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚，溶解后过滤。
（2）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂纯制品。
3. 卵磷脂的鉴定（1）三甲胺的检验：取少量卵磷脂，加入2～5mL氢氧化钠溶液，水浴加热15min，观察红色石蕊试纸是否变蓝，并嗅其气味。
（2）不饱和性检验：取少量卵磷脂，加入3%溴的四氯化碳溶液，振摇观察是否褪色。
（3）磷酸的检验：取少量卵磷脂，加入5～10滴95%乙醇溶液和5～10滴钼酸铵试剂，水浴加热5～10min，观察是否产生蓝色沉淀。
（4）甘油的检验：取少量卵磷脂，加入0.2g硫酸氢钾，小火加热，观察是否有水蒸气放出，嗅其气味。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验，成功从蛋黄中提取出卵磷脂，得到白色蜡状物质。
2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀，得到高纯度的卵磷脂。
3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验，验证了提取的卵磷脂纯度较高。
卵磷脂的提取和纯化
剂中，在密闭的层析缸中展层。
由于各种物质的结构和性质的不同，其在吸附 剂表面的吸附能力各异。吸附力大的易被吸附剂吸
附，而较难被展层剂所解吸。吸附力小的则不易被
吸附剂吸附，而易被展层剂携带至较远的距离。这
样，各种物质在吸附剂和展层剂之间反复多次的被
吸附与解吸附，就表现出不同的迁移率而得以分离， 并可以通过与显色剂的显色反应而得到鉴定与区分。
7、显色：用喷雾器向薄层板上均匀喷洒1%碘液溶
液，热风吹干至色斑显现。
五、实验结果
1、卵磷脂收率 卵磷脂收率 = 卵磷脂粗品重量 / 蛋黄重量×100% 2、计算各组分的Rf 值 3、判断卵磷脂粗提物的组分 四种磷脂标准品的Ｒf值分别为:溶血卵磷脂0.18；神 经鞘磷脂0.33；卵磷脂0.65；磷脂酰乙醇胺0.96
胆
碱
HO
二、实验原理
（一）卵磷脂的提取和纯化
磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿，部分溶于乙醇，极难溶于丙酮； 卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂，但不溶于 丙酮； 丙酮能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。
因此，本实验用乙醇、乙醚为溶剂，丙酮为沉淀剂，干燥后
获得卵磷脂。新提取得到的卵磷脂为 白色蜡状物 ，与空气接 触后因所含不饱和脂酸被氧化而呈 黄褐色 。卵磷脂中的胆碱，
将本试 验的4个 因素依 次放在 L9表的 第1，2， 3，4列， 再将各 列的水 平数用 该列因 素相应 的水平 写出来， 就得到 上表的 试验安 排。
（二）薄层层析
薄层层析（TLC）是一种微量而快速的层析方法。 其层析是在吸附剂（固相支持物）均匀涂布的的薄 层上进行的，故称薄层层析。而待分析的样品，是 点加到薄层板的一端，然后将该端浸入适宜的展层
表1
抽提物、温度、时间和料液比4因素3水平
蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测 实验报告
实验申请实验项目：蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测实验原料：鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂实验试剂： 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇，均为分析纯试剂.实验仪器： 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、电子天平。
辅助器材：毛细管（两支）、玻璃棒、滤纸、100ml 量筒（2个）、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。
实验目的：1. 掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。
2. 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。
3. 巩固抽滤等基本操作。
4. 了解薄层层析色谱法的原理及操作。
实验原理：卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中，蛋黄中含量较高，约10％。
可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质，从蛋黄中分离得到。
吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。
在硅胶薄层板上，样品中的两成分是两种结构近似的染料，在展开剂四氯化碳的作用下。
在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸，再吸附，再解吸，由于极性不同从而分离，展开结束以后，会在薄层板上形成斑点，混合物中的成分得以分离。
参考文献： 刘宝全，所给实验资料.tpml-1实验操作实验操作步骤实验一卵磷脂的制备与提取1.取四个煮熟的鸡蛋，分别将其刨壳，把四个鸡蛋的总的蛋壳，蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。
2.将所得蛋黄全部放入烧杯中，用筷子捣碎，取100ml丙酮倒入其中，搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤，收集滤渣。
3.将滤渣再次放入烧杯，取100ml丙酮倒入杯中，重复上步操作，收集滤渣。
4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。
用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇，放入烧杯中混合均匀。
5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中，搅拌30min后用布氏漏斗抽滤，收集滤液。
6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中，再取100ml混合液浸泡搅拌30min，然后抽滤，将所有滤液收集，倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发，旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。
【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定一、实验目的1.了解卵磷脂的结构与性质；2.熟练掌握蛋黄中卵磷脂的提取和鉴定方法；3.通过提取和鉴定，初步了解卵磷脂的含量。
二、实验原理1.卵磷脂介绍卵磷脂是一类含有疏水性脂肪酸、酯等亲脂性成分和疏水性羟基等亲水性成分的复合脂类，具有良好的亲水性和亲油性能。
卵磷脂是细胞膜的组成成分之一，并参与了许多生命过程的调节和控制。
由于分子结构中含有类似细胞膜的磷酸基和羟基，因此卵磷脂可以与水和油相溶液中间的界面上，形成磷双层结构和微乳液，从而可以作为乳化剂、增稠剂、抗氧化剂等在食品、化妆品、医药等领域应用。
2.实验步骤将去壳的新鲜鸡蛋取出蛋黄，用盐水洗净表面的蛋白质，然后压成泥，称取25g，加入160 ml乙醇和70 ml氯仿，振荡提取24h，滤去蛋黄泥，得到提取液。
用氮气吹干提取液，再用5 ml碘化铵溶液的Ninhydrin试剂涂抹于硅胶薄层板上，加热显色，可以看到卵磷脂的蓝色斑点。
通过比对标准卵磷脂反应斑点和实验过程得到的反应斑点，可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量。
三、实验操作3.1 实验仪器和药品仪器：薄层色谱仪、干燥箱、氮气吹口等。
药品：鸡蛋、碘化铵溶液、Ninhydrin试剂。
三、实验注意事项1.实验过程中要避免阳光直射和空气流通；2.对于采用氮气吹干的提取液，需要注意气压和吹干时间，以免造成温度过高或时间过长的现象；3.在硅胶薄层板上涂斑注意均匀和用量的控制，避免溢出或浓度过高导致显色结果出现异常；4.硅胶薄层板在干燥箱中加热时要控制温度和时间，尽量保证试验中硅胶薄层板上出现的斑点的颜色鲜艳而稳定；5.硅胶薄层板上的斑点大小和颜色的变化需要通过标准试验和实验操作的对比来确定实验结果。
四、实验结果分析通过本实验，我们可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量，并通过对标准试剂和实验结果的对比，也可以得到质量较好的卵磷脂含量。
通过初步检测，我们可以确定卵磷脂含量的多少，并初步判断蛋黄的质量。
卵磷脂的提取和鉴定实验报告
卵磷脂的提取和鉴定实验报告卵磷脂是一种重要的生物分子，广泛存在于动植物细胞膜中，对细胞膜的结构和功能起着重要的作用。
本实验旨在通过提取和鉴定卵磷脂，了解其提取方法和鉴定技术，为进一步研究和应用提供参考。
1. 提取卵磷脂的方法。
首先，我们需要准备卵黄，将卵黄破碎并加入氯仿-甲醇混合溶剂，使卵磷脂从卵黄中溶解出来。
然后，通过离心将上清液和沉淀分离，将上清液转移到锥形瓶中，加入等体积的0.9%氯化钠溶液，摇匀后放置于4℃冰箱中沉淀。
最后，将沉淀离心，得到卵磷脂。
2. 卵磷脂的鉴定。
为了鉴定卵磷脂的纯度和结构，我们可以利用薄层色谱和质谱技术。
首先，将提取得到的卵磷脂溶解在氯仿-甲醇混合溶剂中，然后在预涂有硅胶的玻璃板上涂抹样品，放入薄层色谱仪中进行分离。
通过比色试剂或者紫外灯照射，我们可以观察到卵磷脂的斑点，并计算Rf值来确定其纯度。
另外，质谱技术也是一种常用的鉴定方法，通过质谱仪的分析，我们可以得到卵磷脂分子的质谱图，进而确定其分子结构和质量。
3. 实验结果与讨论。
经过提取和鉴定，我们成功得到了卵磷脂，并通过薄层色谱和质谱技术进行了鉴定。
通过比色试剂和紫外灯照射，我们观察到了卵磷脂的斑点，并计算出了其Rf值，证明了其纯度。
同时，质谱图显示了卵磷脂分子的质谱峰，进一步确认了其结构和质量。
在实验过程中，我们也发现了一些问题，比如提取过程中可能会受到其他成分的干扰，导致提取得到的卵磷脂不够纯净。
因此，在今后的实验中，我们需要进一步优化提取方法，提高卵磷脂的纯度。
4. 结论。
通过本次实验，我们成功提取和鉴定了卵磷脂，了解了其提取方法和鉴定技术。
同时，我们也发现了一些问题，为今后的研究提供了一定的参考和借鉴。
希望通过我们的努力，能够更好地理解和应用卵磷脂这一重要的生物分子。
实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
实验过程中，我们遇到了许多困难和挑战，如提取效率不高、鉴定结果不稳定等。通过不断尝试和改 进，我们逐渐找到了解决问题的方法，提高了实验技能和解决问题的能力。
实验不足与改进建议
实验不足
在实验过程中，我们发现提取卵磷脂的 效率不够高，且鉴定结果有时不够准确 。此外，实验过程中也存在一些操作不 规范的问题。
02
常用的提取溶剂有氯仿-甲醇混合 溶剂、石油醚等，通过反复提取 可提高卵磷脂的提取率。
卵磷脂的鉴定原理
通过红外光谱法、核磁共振法、质谱法等现代分析手段对提取的卵磷脂进行结构 分析，确定其化学组成和分子结构。
通过色谱法（如薄层色谱法、高效液相色谱法）对提取的卵磷脂进行纯度鉴定， 确定其中所含杂质和溶剂残留量。
讨论
根据分析结果，与前人研究进行比较， 提出可能的改进措施和未来研究方向。
结论总结
总结
对整个实验过程和结果进行总结，概述实验的主要发现和结论。
展望
提出实验的局限性和不足之处，以及对未来研究的建议和展获与体会
实验收获
通过本次实验，我们成功地从蛋黄中提取了卵磷脂，并对其进行了鉴定。实验过程中，我们掌握了卵 磷脂的提取和鉴定方法，加深了对卵磷脂性质和作用的理解。
展望
未来，卵磷脂的研究将继续深入开展，探索 其在生物体内的生理功能和作用机制。同时， 随着人们对健康饮食的关注度不断提高，卵 磷脂在食品、保健品等领域的应用也将得到 更广泛的发展。我们相信，随着研究的不断 深入和应用领域的拓展，卵磷脂将会为人类 健康事业做出更大的贡献。
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学习卵磷脂的鉴定技术
薄层色谱法
利用薄层色谱法分离和鉴定卵磷脂中 的主要成分，了解其组成和比例。
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实验五：蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定一、实验目的⏹掌握从鲜鸡蛋中提取卵磷脂的方法与原理。
⏹卵磷脂鉴定的方法与原理。
⏹加深了解磷脂类物质的结构和性质。
二、实验内容磷脂是一类含有磷酸的脂类，机体中主要含有两大类磷脂，由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂（phosphoglyceride）；由神经鞘氨醇构成的磷脂，称为鞘磷脂（sphingolipid）。
其结构具有由磷酸相连的取代基团（含氨碱或醇类）构成的亲水头（hydrophilic head）和由脂肪酸链构成的疏水尾（hydrophobic tail）。
在生物膜中磷脂的亲水头位于膜表面，而疏水尾位于膜内侧。
磷脂是重要的两亲物质，它们是生物膜的重要组分、乳化剂和表面活性剂。
磷脂依照氨基醇的不同可分：（1）磷脂酰胆碱（卵磷脂）（PC），分布：植物主要有大豆等，动物主要有脑、精液、肾上腺、红细胞，蛋卵黄（8-10%）。
其主要作用是控制肝脂代谢，防止脂肪肝的形成；（2）、磷脂酰乙醇胺（脑磷脂）（PE），参与血液凝结；（3）、磷脂酰丝氨酸（PS）；（4）、磷脂酰肌醇（PI）；（5）、磷脂酰甘油（PG）；（6）、二磷脂酰甘油（心磷脂）。
蛋黄磷脂属动物胚胎磷脂，含有大量的胆固醇和甘油三酯及许多人体不可缺少的营养物质和微量元素。
卵磷脂是生命的基础物质，人类生命自始至终都离不开它的滋养和保护。
卵磷脂存在于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要器官。
卵磷脂也被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。
蛋黄卵磷脂可将胆固醇乳化为极细的颗粒，这种微细的乳化胆固醇颗粒可透过血管壁被组织利用，而不会使血浆中的胆固醇增加。
三、实验原理、方法和手段原理一：卵磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心、卵等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
原理二：卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
四、实验组织运行要求根据本实验的特点、要求和具体条件，采用“采用集中授课形式，分组试验进行”的组织运行模式。
五、实验条件1、实验材料：鲜鸡蛋2、仪器与器皿：蛋清分离器、恒温水浴锅、蒸发皿（每组一个）、漏斗（每组一个）、铁架台、磁力搅拌器（每组一个）、天平、25mL量筒（每组一个）、100mL量筒（每组一个）、干燥试管（每组四支）、玻棒2支、小烧杯大小各2个。
3、试剂：95％乙醇（每组50mL）、乙醚（每组20mL）、丙酮（每组30mL）、ZnCl2、无水乙醇（每组40mL）、滤纸（2张）、10%氢氧化钠（每组30mL）、3% 溴的四氯化碳溶液（每组10mL）、红色石蕊试纸（每组二张）、硫酸氢钾（每组10mL）、钼酸铵溶液（每组10mL, 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中，加入5mL 浓氨水，另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后再用）。
六、实验步骤1）、卵磷脂的提取方法一、蛋黄10g放入洁净的带塞三角瓶中，加入95%乙醇40ml，搅拌15min后，静置15min；然后加入10ml的乙醚，搅拌15 min后，静置15min；过滤；滤渣进行二次提取，加入乙醇与乙醚(体积比为3：1)的混合液30ml，搅拌、静置一定时间；第二次过滤，合并二次滤液，加热浓缩至少量，加入一定量丙酮除杂，卵磷脂即沉淀出来，即得到卵磷脂粗品。
方法二、称取10g 蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。
如滤液仍然混浊，可再次过滤至滤液透明。
将滤液置于蒸发皿内，于水浴锅中蒸干（或用加热套蒸干，温度可设140℃左右），所得干物即为卵磷脂。
（为了减少或尽可能不用乙醚，实验采用方法二）2）、卵磷脂的纯化取一定量的卵磷脂粗品，用无水乙醇溶解，得到约10% 的乙醇粗提液，加入相当于卵磷脂质量的10% 的ZnCl2水溶液，室温搅拌0.5h；分离沉淀物，加入适量冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌1h，再用丙酮反复研洗，直到丙酮洗液为近无色止，得到白色腊状的精卵磷脂；干燥；称重。
3）、卵磷脂的溶解性试验卵磷脂的溶解性：取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实验现象。
4）、卵磷脂的鉴定4.1 三甲胺的检验取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 10%氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。
将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。
4.2 不饱和性检验取干净试管一支，加入10滴上述滤液，再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振摇试管，观察有何现象产生。
4.3 磷酸的检验取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴钼酸铵试剂，观察现象；最后将试管放入热水浴中加热5～10min，观察有何变化。
4.4 甘油的检验取干净试管一支，加入少许卵磷脂和0.2g 硫酸氢钾，用试管夹夹住并先在小火上略微加热，使卵磷脂和硫酸氢钾混熔，然后再集中加热，待有水蒸气放出时，嗅有何气味产生。
七、思考题与作业1) 卵磷酯的用途？卵磷脂是生命的基础物质，存在每个细胞中，更多的是集中存在于脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要器官中。
卵磷脂也被称为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。
蛋黄卵磷脂可将胆固醇乳化为极细的颗粒，这种微细的乳化胆固醇颗粒可透过血管壁被组织利用，而不会使血浆中的胆固醇增加。
具体的功能有：(1) 保护肝脏：磷脂中的胆碱对脂肪有亲和力，若体内胆碱不足，则会影响脂肪代谢，造成脂肪在肝内聚集，形成脂肪肝甚至发炎肿胀。
卵磷脂不但可以用于预防脂肪肝，还能促进肝细胞再生，也可降血清胆固醇含量，防止肝硬化并有助于肝功能的恢复。
（2）健康心脏：卵磷脂能调节胆固醇在人体内的含量、有效降低固醇，高血脂对心脏人冠心病的发病率，对心脏健康有积极作用。
（3）有益大脑：对人的记忆力和婴儿智力发育很重要。
（4）清洁血管：卵磷脂具有乳化、分解油脂的作用，可增血液循环，改善血清脂质，清除过氧化物，使血液中胆固醇及中性脂肪含量降低，减少脂肪在血管内膜损伤。
服用卵磷脂对高血脂和高胆固醇具有显著的功效，因而可预防和治疗动脉硬化症。
（5）调整血糖：磷脂不足会使胰脏机能下降，无法分泌充分的胰岛素，不能有效地将血液中的葡萄糖运送到细胞中。
服用卵磷脂对糖尿病的恢复相当显著。
（6）消融结石：体内过多胆固醇会发生沉淀，从而形成胆结石，胆结石90%是由胆固醇组成。
胆汁中主要成分是卵磷脂，可将多余的胆固醇分解，消化及吸收，使胆汁中的胆固醇保持液体状。
（7）神经发育：卵磷脂可促进大脑神经系统与脑容积的增长、发育。
（8）养颜润肤：人体内含有许多毒素，含量过高会随血液循环沉积皮肤上卵磷脂能分解体内过多的毒素，并经肝脏和肾脏的处理排除体外。
卵磷脂还有一定的亲水性，并有增加血红素的功能，能为皮肤提供充分的水分和氧气，使皮肤变得光滑柔润。
（9）延缓衰老：脑部的神经传导物质（乙酰胆碱）减少是引起老年痴呆的主要原因，乙酰胆碱是神经系统信息传递时的必要化合物。
且“胆碱”是卵磷脂的基本成分，卵磷脂的充分供应将保证机体内有足够的胆碱与人体中的乙酰结合为“乙酰胆碱”，从而成为大脑提供充分的信息传导物质，大脑能直接从血液中摄取卵磷脂及胆碱，并很快转化为乙酰胆碱。
（10）调剂心理：经常补充卵磷脂，可使大脑神经及时得到营养补充，保持健康的工作状态，利于消除疲劳，激化脑细胞，改善因神经紧张引起的急躁、易怒，失眠等症。
2）医药工业中制备卵磷酯的方法？(1)方法一：溶剂法（纯度较低且不适合大规模工业化生产）该工艺利用卵磷脂在不同溶剂中的溶解度差异来萃取卵磷脂。
如：先将蛋黄与丙酮充分混匀，静置后充分去丙酮层，将所余物料与乙醇充分混匀，静置后取出乙醇层，蒸发脱去乙醇后即得卵磷脂产品。
（2）方法二：乙醇溶剂萃取+超临界二氧化碳萃取法（纯度较高且比较适合大规模工业化生产）第一步用有机溶剂（乙醇）萃取蛋黄粉，得到中性脂质、卵磷脂和乙醇的液体混合物，用减压蒸馏将乙醇除去，得到含磷脂的蛋黄脂质。
第二步用SC_C将蛋黄脂质中的中性脂质除去，最后剩下的就是高纯度的卵磷脂。
3）本实验有哪些步骤可以改进？（1）做卵磷脂的溶解性试验时，丙滴加的量适当增加，现象会比较明显。
（2）利用95%乙醇粗提取卵磷脂时，可以分三次提取，效果较佳。
（3）三甲胺的检验时，氢氧化钠溶液的浓度或者用量可尝试改变，以使检验现象比较明显。
4）文字与照片记录实验过程的重要性？可以使实验过程更加直观，使实验思路更加清晰，实验结果更明了。
5）通风橱的重要性？（可以不作答）八、实验报告实验步骤一卵磷脂的提取：（用蛋清分离器分离出蛋黄，取10g左右的蛋黄）（加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀）（过滤）(将滤液置于蒸发皿内,用加热套蒸干，温度可设140℃)（所得干物即为卵磷脂，为黄色物质）二卵磷脂的纯化：（取一定量的卵磷脂粗品，无水乙醇溶解，得到约10% 的乙醇粗提液，加入相当于卵磷脂质量的10% 的ZnCl2水溶液）室温搅拌0.5h；分离沉淀物（留下黄色的沉淀物）冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌1h再用丙酮反复研洗，洗液为近无色止得到白色腊状的精卵磷脂；干燥；称重。
三卵磷脂的溶解性试验；取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL实验现象：加入丙酮后可明显看到烧杯中会不断形成白色絮状物质生成，到了一定的量也后，沉淀不会再增加）四卵磷脂的鉴定：41．三甲胺的检验取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 10%氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察石蕊试纸变蓝，气味有一种腥味。
4.2 不饱和性检验取干净试管一支，加入10滴上述滤液，再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振摇试管，实验现象；出现分层，溴的四氯化碳在下面，呈油滴状4.3 磷酸的检验取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴钼酸铵试剂，观察现象；最后将试管放入热水浴中加热5～10min，实验现象：加热前溶液浑浊，加热后溶液变澄清了甘油的检验取干净试管一支，加入少许卵磷脂和0.2g 硫酸氢钾，用试管夹夹住并先在小火上略微加热，使卵磷脂和硫酸氢钾混熔，然后再集中加热，待有水蒸气放出时，嗅有何气味产生。