植物组织切片技巧
细胞生物学实验⑤植物组织切片的制备
二甲苯(5min)→二甲苯(5min)→二甲苯；乙醇(1min)→二甲苯；乙醇(1min)→二甲苯；乙醇(1min)→100%乙醇(1min)→95%乙醇(1min)→90%乙醇(1min)→80%乙醇(1min)→70%乙醇(1min)→50%乙醇(1min)→番红染色(40min)→50%乙醇(1min)→70%乙醇(1min)→80%乙醇(1min)→90%乙醇(1min)→95%乙醇(1min)→
切片染色后经封藏可制作成永久制片。
实验步骤：
1)取材、固定与抽气：
本实验用蚕豆根、向日葵茎、夹竹桃叶为材料，制作横切片观察其内部结构。用刀片切取所需根和茎的部位3-4㎜为一段，叶应取叶片中部主脉约4㎜宽的叶片。小组各取5-6块，立即用FAA固定液固定。固定过程中必须进行抽气。
2)洗涤与保存：
教师代做。
植物组织切片的制备
生物122xx实验目的：
通过石蜡切片法了解和掌握动物和植物材料切片制作的基本原理和一般方法。
实验原理：
进行组织学和细胞学研究，必须把新鲜的组织或器官制作成切片，以便在显微镜下观察。
制作生物制片要求尽量保持细胞结构的完整性和真实性。
石蜡切片法是一种较常用的制片法。一般操作步骤是：
取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→烤片→脱蜡→复水→染色→脱水→透明→封藏。其原理是将样品固定后，包埋于石蜡中，使其具有一定的硬度，便于在石蜡切片机上切片成足够薄的切片。
0.5%固绿(1min)→95%乙醇(1min)→100%乙醇(1min)→二甲苯；乙醇(1min)→二甲苯；乙醇(1min)→二甲苯；乙醇(1min)→二甲苯(1min)→二甲苯(1min)。
10)封片：
将切片从二甲苯中取出，用滤纸擦去材料周围的二甲苯。在材料中央滴加一滴加拿大树胶，然后用镊子轻轻加盖盖玻片。
植物细胞学分析之组织切片技术
植物细胞学分析之组织切片技术一、试剂（1）卡诺氏固定液：无水乙醇与冰醋酸按体积比为3:1混合配制。
（2）1mol／L盐酸溶液：取浓盐酸（比重1.19）82.5ml，加入蒸馏水917.5ml。
（3）醋酸洋红染液：4-5g洋红，冰醋酸45ml，蒸馏水55ml，先将冰醋酸加入蒸馏水中煮沸，然后将火移去，立刻加入洋红，用玻璃棒搅匀溶化，冷却后过滤即成。
（4）70%酒精；95%酒精。
二、细胞分析方法1．有丝分裂全过程的染色体制片方法步骤：取材-预处理-固定-根尖解离1mol/L HCL-醋酸洋红染色-压片（1）发根挑选每份黑麦种子材料25粒，经流水冲洗，放于培养皿内温水浸泡24h。
置于25℃恒温箱中发根。
待根长到1～2cm时，于适宜时间用蒸馏水洗净，将水吸干，剪取根尖0.5～1cm进行预处理。
为获得尽可能多的分裂相，根尖以上午9～10时剪取为宜。
（2）预处理为了有利于有丝分裂中，染色体的观察和计数，通常要对材料进行不同的预处理。
预处理主要通过抑制和破坏纺锤丝的形成，来获得更多的中期分裂相，同时还可以改变细胞质的粘度，促使染色体缩短和分散，便于压片和观察。
将根尖浸于蒸馏水内，1-4℃低温处理24h。
（3）固定材料经预处理后，用流水冲洗2次，然后投入卡诺液（3份甲醇∶1份冰乙酸）中固定26h，用95％的乙醇洗两次，转入70％乙醇中保存备用（4℃）。
固定的目的是：①迅速防止细胞死亡后的变化，如自溶、腐败等，尽量保持生长状态结构。
②使细胞中的蛋白质、脂肪等成分转变为不溶性物质，以保持生前的形态。
③使组织内各种物质成分产生不同的折光率，便于观察和鉴定。
④使不同组织成分对染料有不同的亲和力，便于染色。
⑤防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。
（4）解离常用酸解法：从70％乙醇中取出固定好的根尖，用蒸馏水冲洗后，吸水纸吸干，放入盛有1 mol/L的HCl的1.5ml离心管中，60℃水浴，恒温条件下解离10min。
植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用，分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体，因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离，这一操作称为解离。
3植物组织切片技术
花青素
取洋葱鳞茎，用刀将其纵剖为6-8片， 选择1片，在外表皮紫色较深处用镊子 撕取一小块表皮，放在载玻片上的清水 中，盖上盖玻片显微镜观察。洋葱细胞 花青素呈淡紫色，均匀地溶解于细胞液 中。
洋葱表皮细胞
质体观察
用刀片从红辣椒果肉上刮去一小块， 涂布在载玻片中央，加清水1滴，盖上盖玻 片，不染色，在显微镜下观察。果肉细胞 中有许多橙色的颗粒，即有色体。
淀粉粒
用新鲜马铃薯切口处的浆液制成临时装片，显微
镜下可见细胞内含许多卵圆形或椭圆形颗粒，即为
淀粉粒。 高倍镜下将光线适当调暗，可见马铃薯淀粉粒依 脐点和轮纹不同有单粒、复粒和半复粒三种类型。
淀粉粒分单粒、半复粒和复粒
作业题
绘制观察到的洋葱表皮细胞、辣椒质 体、土豆淀粉颗粒3幅图。
加盖盖玻片
徒手切片法
最重要的是，切下一小片平而薄的组织结构。 （1）左手拇指食指及中指夹住材料，拇指要略
低于食指并使材料稍稍突出于手指之上约3mm;
（2）用右手拇指和食指横向平握刀片，置于左
手食指之上，刀口向内，与材料的纵轴垂直。
切取的标本徒手切片法来自表皮细胞的基本结构
取洁净的载玻片，在中央加一滴水。 取洋葱肉质鳞片，用刀片在鳞片内表皮划 一个3～5mm2小格，用镊子撕下薄膜状的内 表皮，迅速将其置于载坡片中央的水滴中 (表面朝上)，展平，盖上盖玻片。
洋葱新鲜红绿椒新鲜马铃薯块茎洋葱新鲜红绿椒新鲜马铃薯块茎显微镜镊子刀片显微镜镊子刀片11临时制片方法徒手切片法压片制片临时制片方法徒手切片法压片制片22植物真核细胞基本结构观察洋葱细胞植物真核细胞基本结构观察洋葱细胞基本结构
一 植物组织制片技术
一、实验目的
实验植物细胞切片的制作
9）封片：将载玻片自二甲苯中取出，立 即滴一滴用二甲苯溶解的加拿大树胶于 材料之上，加盖盖玻片。置玻片标本于 烘箱中烘干即可。
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1、显微镜、尖嘴镊子、刀片、载玻片 、盖玻片、吸水纸、解剖针、纱布、 碘液。
2、蚕豆（芹菜）茎和叶
3、洋葱或玉米根尖纵切永久制片
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三、内容与方法
（一）临时切片制作
１、徒手切片法（重点） ２、整体装片 适合于植物体形小而扁
平的材料。如菌丝、孢子束、藓类。
３、涂抹法 用于极小的植物体或组织。
选取待观察的植物材料，初步 切取大约3cm长的小块，再依切片 的具体要求，将组织块修整为 0.5cm的材料块。
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2、切片
1）以左手夹住材料，用右手平稳地握住刀 片。
2）使刀片与材料的断面保持平行，刀口自 左上方斜向右下方，动作要均匀有力。
3）材料与刀片须常以水湿润。 4）切下的薄片，立即用毛笔蘸水后粘取，
4）番红复染色：400 ml 1%番红酒精（水 液）再染色2h。回收染液， 并用自来水 洗去多余的染液。
5）继续脱水：用30%、50%和70%酒精 400 ml各处理30s～1 min，并回收各液 。
6）固绿复染：用0.1%固绿的95%酒精 24/11/26
7）再继续脱水：用95%酒精和两次纯酒 精彻底脱水，每次10 s～1 min，回收各 液。
2）切片：调整切片机的切片厚度为8～14 μm,
切取石蜡块薄片。 2024/11/26
4、粘贴展平
选取洁净的载玻片，于中央用火柴棒粘取明
一款制作植物组织永久切片的简单工序
一款制作植物组织永久切片的简单工序制作植物组织永久切片的简单工序___________________________________________植物的永久切片是由植物学家和生物学家制作的一种技术，可以用来观察植物细胞的结构和形态，从而获得有关植物生长、发育、适应性等的重要信息。
制作植物永久切片的工序简单易行，但需要一定的技术。
下面介绍了制作植物组织永久切片的简单工序：### 一、准备材料要制作植物组织永久切片，需要准备如下材料：1. 植物样本：通常是取自健康的植物，尽量避免使用伤口或染色体变异的植物；2. 水和盐水：用于浸泡样本；3. 一把实验剪刀：用来剪取植物样本；4. 盐酸：用于脱落去除样本表面的死细胞和细胞外物质；5. 水溶性胶：用于将样本固定在显微镜片上；6. 水溶性染料：用于染色切片；7. 显微镜片：用于观察切片；8. 盐水：用于保存切片。
### 二、准备样本1. 将样本浸泡在水中或盐水中10-15分钟，以便其表皮和内部的细胞均匀地膨胀；2. 使用剪刀剪取样本的一小部分，然后放入盐酸中浸泡5-10分钟，以去除表皮死细胞和外部物质；3. 用凉水冲洗样本，直至表皮无法剥离。
### 三、固定样本并制作切片1. 将样本放入水溶性胶中浸泡10-15分钟，以将样本固定在显微镜片上；2. 使用一把实验剪刀将样本剪成3-4微米厚的切片；3. 将制作出的切片放入盐水中浸泡5-10分钟，以保证细胞不被剪断。
### 四、染色并观察切片1. 将样本切片浸泡在水溶性染料中10-15分钟，以使其形成彩色染色效果；2. 将彩色的样本切片放入显微镜下观察，以获得关于植物生长、发育、适应性等信息。
### 五、保存切片1. 将彩色的样本切片取出后用凉水冲洗干净；2. 将冲洗后的样本切片放入盐水中保存。
通过以上步骤就可以完成一份优秀的植物永久切片。
在制作过程中要尽量避免使用伤口或变异的样本，以便得到真实而准确的信息。
植物组织切片制作以及注意事项
植物组织石蜡切片的制作以及注意事项1 植物组织石蜡切片的制作方法⑴固定：用50%或70% FAA固定液（50%或70%酒精：甲醛：冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA；老的材料用70%的FAA），置于4℃固定24 h。
⑵脱水：将固定液倒去，加入50%乙醇，室温静置30 min；重复一次，室温静置20 min。
换成1%番红O溶液(用70%酒精配制)，室温脱水染色过夜。
次日继续脱水，酒精浓度梯度和时间依次为：80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min（2次）。
⑶透明：1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h，纯二甲苯1h、40 min（2次）。
最后加入少量二甲苯（浸没材料即可）和碎蜡，放入38℃温箱中过夜。
⑷浸蜡：将温箱温度调至56℃，计时1h；换成二级蜡1h；三级蜡（3次）各1h、1h、40min（从温度上升到56℃开始计时）。
⑸包埋：将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中，迅速放入冰水中使蜡凝固，防止气泡产生，以及凝蜡不匀。
⑹切片：修整蜡块，用Lica RM2126切片机切片，厚度5-10 μm。
⑺贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂，将切好的蜡带放入温水中，捞至载玻片上，最后置于37℃恒温箱过夜烤片。
⑻脱蜡及染色：①番红-固绿对染ⅰ脱蜡：二甲苯60min，二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。
ⅱ染色：80%乙醇5 min，1%固绿（用95%酒精配制）迅速蘸一下，大约10s，直接放到95%乙醇5min 、无水乙醇5min、无水乙醇5min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min（2次）。
②甲苯胺蓝染色ⅰ脱蜡：二甲苯60 min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。
植物切片制作
植物组织制片技术是随着显微镜的出现而发展起来的技术,是人们认识植物体结构的有效手段，已成为植物生物学的重要组成部分.植物制片技术已建立了许多方法，现简要介绍如下几种最常见的制片技术:徒手切片法、滑走切片法、离析法、压片法、石蜡制片法和冰冻切片法。
徒手切片法徒手切片法是指手拿刀片把植物新鲜材料切成薄片，所作的切片通常不经染色或经简单染色后，制成临时的水装片用于观察，亦可以通过脱水与染色制成永久制片。
优点：简单、方便，不需要复杂的设备，不经过化学药物的处理，基本上保留了植物活体的状态。
用品与材料显微镜、载（盖)玻片、刀片、毛笔、培养皿、吸水滤纸、滴管、ddH2O或清水、1％番红水溶液、菜叶、胡萝卜、马铃薯实验材料对于软硬适中,便于手持的材料，可将实验材料截成适当小块,一般以长2~3cm,切片断面不超过3～5mm2为宜。
对于过于柔嫩的器官（如叶片等），一般可选用胡萝卜根、土豆块茎等作为支撑物，包被住材料后再进行切片。
有时也可将叶片卷成圆筒后再进行切片. 实验步骤1、在小培养皿中放入ddH2O或清水。
2、用左手拇指、食指和中指拿住材料，拇指略低于食指与中指，并使材料略为突出在指尖上面。
3、右手持刀，将刀片平稳地放在左手食指之上，与材料切面平行，然后以均匀的动作,自左前方向右后方，斜着向后拉切，切时用臂力而不用腕力。
4、切下许多薄片后，用湿毛笔将这些薄片放人培养皿中.用毛笔挑选透明的薄片,放在载玻片上，用吸管滴一滴水在载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片进行观察。
注意事项1、在切片前，要不断地用水湿润材料和刀片。
2、切片时，两只手应该保持活动状态，不要使它们紧靠身体或实验台，且用力不要过猛,不能用刀片挤压材料或来回切割材料。
3、动作要敏捷,材料要一次切下，不要追求切片形状的完整。
简单的组织化学染色经徒手切片法切下的薄片，可以进行简单的组织化学染色，这样更容易分辨细胞的结构，同时可以观察到细胞各部分的化学成分。
一款制作植物组织永久切片的简单工序
一款制作植物组织永久切片的简单工序
植物组织永久切片，是一种实验室常用的技术，它能够精确地显示出细胞结构和组织关系，为进一步的生物学研究提供重要的实物参考。
本文将介绍一种简易的制作植物组织永久切片的工序。
1. 收集静态干燥的植物组织样品，若有生长的植物组织，可使用锋利的剪刀将其剪成稍细的片段，然后将其放入焦磷酸盐纸中，处理到它们在纸中能够保持它们的原形；
2. 将其从焦磷酸盐纸中取出，放入70%甲醇中浸泡5分钟，然后将甲醇沥干；
3. 将该块片段放入离心瓶中，倒入脱水甲醇，再加入2-3滴甲醇衍生物，然后像正常甲醇操作一样在37℃处理一小时；
4. 将片段放入脱模剂中浸泡5分钟，然后抽出片段，放入彻底的脱水甲醇中，处理2-3分钟；
5. 用混合85%醇，5％玻璃胶和10％蓝指甲油的溶液将片段放入，加热至60-65℃，处理五分钟；
6. 将处理过的植物片段放入原位置，放入含石蜡的贴片切片机中，切片，厚度约为4-5微米；
7. 将切好的片段放入石蜡胶片中，再放入至少5％氢氧化钾溶液中浸泡；
8. 胶片冷却到室温后，用正常的洗涤法洗涤，再用100％乙醇洗涤；
9. 用染料渗透染色，准备放大装配的抛光膜，细腻制作，就可以得到完美的植物组织永久切片了。
本方法均为视个体样品的不同而定，步骤或配方可调整。
作出完美切片不仅需要操作工具与药剂的加减，还需要有足够的经验和技能，只有经过细致的操作，才能将植物组织永久切片做得完美。
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植物组织切片技巧
植物组织切片技巧是生物学研究中非常重要的一项实验技术，它能够帮助我们观察和研究植物的细胞结构、组织构成以及生理功能。
本文将介绍一些常用的植物组织切片技巧，希望能够对读者有所帮助。
1. 样品采集与固定
在进行植物组织切片之前，首先需要采集新鲜的植物样品，并将其固定。
样品的选择应根据研究目的而定，可以是植物的叶片、茎、根等部位。
固定样品的目的是保持其原有的形态和结构，常用的固定剂有福尔马林、醋酸乙酯等。
固定时间一般为数小时至数天，具体时间根据样品的大小和组织结构而定。
2. 组织切片的准备
在进行组织切片之前，需要将固定的样品进行处理和准备。
首先，将样品进行脱水处理，这可以通过逐渐将样品浸泡在浓度递增的酒精溶液中来实现。
脱水的目的是去除样品中的水分，以便后续的切片操作。
接下来，将样品进行透明化处理，这可以通过将样品浸泡在透明剂（如苯酚、甘油等）中来实现。
透明化的目的是使样品变得透明，以便于观察切片。
3. 切片的技巧
在进行组织切片时，需要使用显微镜和切片刀。
首先，将透明化的样品取出并放置在显微镜玻片上。
然后，使用切片刀将样品切成薄片，薄片的厚度一般为几十至几百微米。
切片时需要保持手稳定，刀片锋利，以免损坏样品或者切出不理想的切片。
切片完成后，将切片放置在显微镜玻片上，并加入一滴适当的显微镜溶液，以保持切片的湿润。
4. 切片染色与观察
为了更好地观察和研究植物组织的细胞结构，可以对切片进行染色处理。
常用的染色剂有甲苯胺蓝、伊红等。
染色的目的是使细胞和组织的结构更加清晰可见。
将染色剂滴在切片上，静置片刻后，用纸巾轻轻吸去多余的染色剂。
然后，将切片放置在显微镜下观察。
可以调节显微镜的放大倍数和焦距，以获得更清晰的图像。
总结起来，植物组织切片技巧是一项需要细心和耐心的实验技术。
在进行植物组织切片之前，需要采集和固定样品，然后进行脱水、透明化和切片处理。
最后，可以对切片进行染色处理，并使用显微镜观察和研究植物组织的细胞结构。
通过掌握这些技巧，我们可以更好地了解植物的生理功能和组织构成，为植物科学研究提供有力的支持。