医院PCR核酸扩增荧光检测实验和结果分析标准操作程序
人民医院基因扩增实验室EB病毒核酸定量检测标准操作程序
人民医院基因扩增实验室EB病毒核酸定量检测标准操作程序1 项目名称单纯疱疹病毒Ⅱ型核酸定量检测2 检验方法名称TaqMan荧光定量检测3 方法学原理用一对EB病毒特异性引物和一条EB病毒特异性荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个荧光报告基团（R）和一个荧光淬灭基团（Q）。
探针完整时，R基团发射的荧光信号被Q基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使R荧光基团和Q荧光基团分离，Q基团对R基团的抑制吸收作用消失，荧光监测系统就可接收到R基团的荧光信号。
每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成。
被切割产生的荧光分子数与PCR产物的数量成比例，这样就实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
因此根据PCR反应液的荧光强度即可计算出初始模板的数量。
4 标本要求4.1 适用标本类型：全血。
4.2 标本采集a ) 全血：用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2毫升，注入含EDTA（乙二胺四乙酸二钠）或枸橼酸钠抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5～10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，密闭送检。
5 试剂5.1 试剂名称：EB病毒病毒核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针法）5.2 生产厂家：中山大学达安基因股份有限公司；5.3 试剂货号：#DA-B065；5.4 包装规格：20人份/盒；5.5 试剂成份：5.6 试剂储存条件：保存于—20℃，有效期6个月。
6 仪器ABI 7500全自动基因扩增检测仪7 操作步骤7.1 DNA提取7.1.1 阴性质控品处理a ) 取出阴性质控品，8,000rpm离心数秒，吸50μl至0.5ml灭菌离心管中，加入50μl DNA提取液充分混匀，100℃恒温处理10±1分钟；b ) 12000r/min离心5min，备用。
7.1.2 标本处理7.1.2.1 全血a ) 取全血1ml至干燥玻璃试管中，加入生理盐水1ml轻摇混匀；b ) 取干燥玻璃试管卷入500µl淋巴细胞分离液；c ) 将稀释好的全血用加样枪缓慢加入加有淋巴细胞分离液的试管中（注意沿管壁，速度要慢）；d ) 2000rpm离心20min；e ) 吸取白细胞层（从上而下的第二层），加入1.5ml离心管，12000rpm离心5分钟；12,000 rpm离心5分钟；f ) 去上清，沉淀中加入50μl DNA提取液充分混匀，100℃恒温处理10±1分钟；g ) 12000r/min离心5min，备用。
PCR实验操作流程
1 PCR 实验操作流程（TB/LP/MPCP ）一、标本的核酸提取（痰标本）1、痰液液化：痰液加入四倍体积的4%NaOH ，摇匀静置30min ；（样本编号，离心管编号）2、将液化后的液体0.5ml 转至1.5ml 离心管中，再加入0.5ml 4%NaOH ，混匀静置10min 继续液化，13000rpm 离心5min ，去上清；3、加入1ml 生理盐水洗一次，振荡器震荡混匀，13000rpm 离心5min ，上清去除干净；4、沉淀直接加入100μl 核酸提取液（提取液使用之前混匀），混匀数秒，干热仪100℃加热10min ，然后13,000rpm 离心5min ，取上清4μl 作为PCR 反应模板。
二、试剂配制、加样三、PCR 扩增设置扩增循环参数设置：37℃×2min ，94℃×2min ，循环一次；93℃×15s ，60℃×60s ，循环40次，荧光检测在60℃×60s ，荧光通道FAM 和VIC 通道。
反应体系40μl 。
四、结果判断MPCP ：FAM 通道Ct ≤38，报告MP 为阳性；VIC 通道Ct ≤38， 报告CP 为阳性；如果Ct 值在38-40之间，复检一次，如果Ct 显示仍在38~40之间，则判断为低于检测线，判为阴性LP ：FAM 通道Ct ≤38，报告LP 为阳性；如果Ct 值在38-40之间，复检一次，如果Ct 显示仍在38~40之间，则判断为低于检测线，判为阴性TB ：FAM 通道Ct ≤38，报告TB 为阳性；如果Ct 值在38-40之间，复检一次，如果Ct 显示仍在38~40之间，且扩增曲线呈典型的S 型，则判断为阳性；若非典型S 型曲线，则判断为低于检测线，判为阴性。
荧光测定pcr实验报告
荧光测定pcr实验报告引言聚合酶链反应（PCR）是一种常用的分子生物学技术，可以在短时间内扩增DNA 目标序列。
PCR扩增过程中，荧光标记的探针可以用来监测DNA模板的定量。
本实验旨在通过荧光测定PCR的方法，对指定DNA序列进行定量分析。
实验设计与方法实验设计1. 收集样本：收集待测DNA样本。
2. 准备试剂：准备PCR反应体系所需的试剂，包括PCR缓冲液、dNTPs、引物、荧光标记的探针等。
3. 试剂配置：按照实验设计，配置合适浓度的试剂稀释液。
4. PCR反应：根据实验设计，进行PCR反应，在PCR仪中设置加热曲线。
5. 荧光测定：在PCR反应过程中，通过荧光实时监测相应信号。
实验方法1. 收集样本：收集待测DNA样本，保证样本的纯度和完整性。
2. 准备PCR反应体系：按照实验设计，配置PCR反应体系，包括PCR缓冲液、dNTPs、引物、荧光标记的探针等，保证试剂的浓度和质量。
3. 试剂配置：根据实验设计，配置合适浓度的试剂稀释液，保证试剂的稳定性和反应效果。
4. PCR反应：将待测DNA样本和试剂混合，在PCR管中进行适当的温度变化，进行PCR反应。
PCR反应的参数包括初始变性、循环变性、退火、延伸等步骤。
5. 荧光测定：在PCR反应过程中，监测PCR反应产生的荧光信号。
通过荧光实时监测，可以定量分析PCR扩增的产物。
结果与分析荧光测定PCR结果在本实验中，通过荧光测定PCR的方法成功扩增了目标DNA序列。
在PCR反应过程中，实时监测到荧光信号的增强，表明DNA扩增的过程正常进行。
荧光信号定量分析结果通过荧光信号的实时监测，可以进行PCR扩增产物的定量分析。
扩增产物的荧光信号强度与初始模板DNA的浓度成正比，因此可以通过荧光信号的强度来估计初始模板的浓度。
数据处理与统计分析对实验得到的数据进行处理和统计分析，可以得到PCR扩增产物的浓度。
通过与标准曲线的比较，可以确定PCR产物的浓度。
结论本实验成功使用荧光测定PCR的方法扩增了目标DNA序列，并进行了定量分析。
核酸实验室操作步骤流程
核酸实验室操作步骤流程
核酸实验室是进行核酸提取、扩增和检测的重要场所，其操作
步骤流程严谨而复杂。
下面将详细介绍核酸实验室的操作步骤流程。
首先，进行核酸提取。
提取核酸是核酸实验室的第一步，通常
使用化学方法或者机械方法进行。
在进行核酸提取时，需要注意保
持实验室的清洁和无菌环境，避免外源DNA的污染。
提取核酸的样
本可以是血液、组织、唾液等。
接着，进行核酸扩增。
核酸扩增是为了增加核酸的数量，以便
进行后续的检测和分析。
常用的核酸扩增方法有PCR、RT-PCR等。
在进行核酸扩增时，需要准备好扩增试剂盒、引物、模板DNA等材料，并按照扩增方案进行操作。
然后，进行核酸检测。
核酸检测是为了确定核酸的序列和浓度，通常使用凝胶电泳、实时荧光PCR等方法进行。
在进行核酸检测时，需要注意实验条件的控制和结果的准确性，避免假阳性或假阴性结
果的出现。
最后，进行数据分析和结果解读。
在核酸实验室中，数据分析
和结果解读是至关重要的环节，需要对实验结果进行统计分析和生
物信息学分析，以确定实验的可靠性和结果的可信度。
同时，还需
要根据实验结果进行结果解读，判断实验是否成功并得出相应的结
论。
总的来说，核酸实验室的操作步骤流程包括核酸提取、核酸扩增、核酸检测、数据分析和结果解读等环节，每个环节都需要严格按照操作规程进行操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。
核酸实验室的操作步骤流程复杂而繁琐，需要实验人员具备扎实的实验技能和严谨的实验态度，以保证实验的成功进行和结果的可靠性。
PCR-HPV-DNA荧光定量检测标准操作程序
P C R-H P V-D N A荧光定量检测标准操作程序(总4页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除1.目的：明确高危型人乳头瘤病毒核酸定量检测的操作规程，指导检验人员正确进行巨细胞病毒核酸定量的检测。
2.适用范围：适用于进行高危型人乳头瘤病毒核酸定量检测的检验人员。
适合仪器：LightCycler480型核酸扩增荧光检测仪方法原理：采用PCR方法结合荧光探针的扩增技术样品要求：宫颈脱落细胞3.职责：实验操作人员应严格按操作规程进行实验。
4.试剂来源：潮州凯普生物化学有限公司高危型人乳头瘤病毒核酸定量检测试剂盒。
5.质控物：阴性、阳性对照及阳性参控品系列均来源于试剂盒6.标准操作：试剂准备（在试剂准备区操作）将试剂盒及其它所需试剂置室温解冻（临用前取出，用后立即放回冰箱，反复冻融不可超过三次），取出PCR MIX,室温下避光解冻，上下颠倒混匀后，8000转/分钟10s从试剂盒中取出DVA聚合酶，8000转/分钟lOs。
根据当次实验标本量，取出相应试剂（1管= MIX + DVA聚合酶）总的需求量于一管中（其余随即放回原温度保存），如所需要的管数为n (n=标本数+1空白管对照+1管阳性对照) 取PCR反应管转移至样本制备区。
样本处理(在样本处理区进行)取宫颈脱落细胞样本0. 5ml~1ml(如果细胞数量少可以加大体积到2m1)13000转/分钟离心1分钟弃上清，加入细胞保存液重悬细胞13000转/分钟离心1分钟，尽量弃干净上清每样本加入50ul细胞裂解液，充分振荡重悬细胞，煮沸10分钟。
13000转/分钟离心10分钟，保留上清备用(上清中为释放的DNA)。
取上清作为PCR扩增的模板，其余保存于一20℃在对应的PCR反应管中分别加入2ul处理好的样本DVA,空白对照、阳性对照，盖紧管盖，稍做离心(反应总体积为2o u 1/人份，每次反应需要设置一个阳性对照以及一个空白对照)。
结核分枝杆菌核酸扩增荧光定量检测标准操作规程
结核分枝杆菌核酸扩增荧光定量检测标准操作规程采用一对PCR引物和一个荧光双标记的探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，从而将PCR技术和荧光检测技术结合起来，实现了对TB核酸的自动化检测；检测灵敏度为10个TB菌/毫升，反应管在PCR循环结束后无需开盖；采用了dUTP-UNG酶防污染采用一对PCR引物和一个荧光双标记的探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，从而将PCR技术和荧光检测技术结合起来，实现了对TB核酸的自动化检测；检测灵敏度为10个TB菌/毫升，反应管在PCR循环结束后无需开盖；采用了dUTP-UNG酶防污染系统。
可用于可疑结核病患者经处理的痰液标本结核分支杆菌核酸的定性检测，可用于结核病的辅助诊断。
1、储存条件及有效期本试剂盒贮存于-20℃的条件下有效期为12个月（请于有效期内使用）2、自备试剂 4% NaOH、灭菌生理盐水3、样本采集3.1 以清晨第一口痰为宜。
3.2 先用清水漱口，嘱患者用力咳出深部的痰于无菌样本保存管，密封送检。
4、样本存放 4.1 待测样本在2-8℃保存不应超过24小时。
4.2 -20℃保存不超过三个月；。
4.3 -70℃以下长期保存。
4.4 应避免反复冻融。
5、样本运输采用冰壶加冰或泡沫箱加冰密封进行运输。
6、扩增试剂准备（PCR前准备区） 6.1 从试剂盒中取出TB PCR反应液、Taq 酶及UNG，室温融化并振荡混匀后，2,000rpm离心10sec。
6.2 设所需要的PCR反应管管数为n（n = 样本数 + 1管阴性对照 + 1管阳性对照），每个测试反应体系配制如下表： 6.21 Roche LightCycler ,Roter-Gene2000/3000仪器，准备相应数量的毛细管试剂TB PCR反应液Taq酶UNG 用量17.8 ul 0.2 ul 0.03 ul 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积离心管中，充分混合均匀，2000rpm离心10sec，向设定的n个Roche毛细管(LightCycler)中或普通PCR反应管(Roter-Gene2000/3000)中分别加入18ul，转移至样本处理区。
PCR室SLAN型核酸扩增实时荧光定量仪操作和维护程序
PCR室SLAN型核酸扩增实时荧光定量仪操作和维护程序1.目的保证SLAN型核酸扩增荧光定量检测仪的正确和正常使用。
2.适用范围本规程适用于SLAN型荧光定量PCR仪分析的所有实验过程。
3.制定依据SLAN型核酸扩增荧光定量检测仪器操作使用说明书4.职责由经培训合格的临床基因扩增实验室技术人员操作仪器。
5．操作程序5．1开机前的准备5．1．1确认电源线插头已可靠插入电源插座中；5．1．2电源线接地可靠。
5．1．3接口线两端插头已分别可靠插入。
5．1．4打开稳压器电源，打开电脑主机、显视器、打印机、SLAN电源开关。
5．2“核酸扩增检测系统”的启动☆可以在【开始】/【程序】菜单中点击“SLAN PCR检测系统”启动。
☆也可直接在桌面上双击快捷键启动。
计算机系统启动SLAN PCR检测系统程序，进入荧光定量PCR检测系统界面5．3样品容器的放置5．3．1如何正确打开机盖：用手向后推开机子顶端机盖。
5．3．2样品容器的放入：正确打开机盖后，将0.2ml管放入模块中。
注意：①为保证样本升温和降温的均一性，样本管必须与模块完全接触，②将0.2ml管放入模块前应先检查（样本中有气泡或粘在管盖、管壁上都会严重影响实验结果）5．3．3如何正确关闭机盖：用手向前拉动机盖5．4实验设计：5．4．1温度参数设置：设置一个由三个程序组合的DNA荧光检测程序如下：①进入[温度参数]界面，鼠标左键单击扩增程序中的程序名处，输入程序名A，循环数1。
②设置此程序的温度点，按[添加]键增加温度点，输入目标温度930C，恒温时间120秒，“读取荧光”选择“否”，其它参数按默认值不变。
这样第一个程序设置完成。
③设置第二程序，在扩增程序逻辑界面中，按[添加]输入程序名B，循环数10。
④设置第二程序的温度点，按[添加]增加温度点，输入目标温度930C，恒温时间45秒，“读取荧光”选择“否”，再按[添加]增加温度点，输入目标温度550C，恒温时间60秒，“读取荧光”选择为“否”。
乙肝病毒核酸扩增荧光检测操作规程
乙肝病毒核酸扩增荧光检测操作规程1. 目的：规范乙肝病毒核酸扩增荧光检测，保证HBV -DNA检测结果准确、可靠。
2. 范围：适用于HBV -DNA的TaqMan荧光定量检测，标本类型为血清。
3. 职责：操作人负责按照本操作规程进行乙肝病毒核酸扩增检测。
4. 程序：4.1检验方法：4.1.1 DNA 提取（样本制备区）将待测样本、阳性定量参考品、阴性质控品、HBV 强阳性质控品、HBV 临界阳性质控品进行同步处理。
4.1.1.1 取200μl 样品，加入450μlDNA 提取液I 和4μl 的内标溶液，用振荡器剧烈振荡混匀15 秒，瞬时离心数秒。
100℃恒温处理10±1 分钟；4.1.1.2 12000g 离心5 分钟，备用。
4.1.2 PCR 试剂准备（试剂准备区）直接使用HBV-PCR 反应管。
4.1.3 加样（样本制备区）往上述HBV 反应管中用带滤芯吸嘴分别加入提取后的待测样本核酸、HBV 阴性质控品、HBV 强阳性质控品、HBV 临界阳性质控品和阳性定量参考品的上清各20μl。
盖紧管盖，8,000rpm 离心数秒后转移至扩增检测区。
4.1.4 PCR 扩增（扩增和产物分析区）4.1.4.1打开“Setup”窗口，按样本对应顺序设置阴性质控（NTC）、阳性质控以及未知样本（Unknow）、阳性定量参考品（Standard），并在“Sample Name”一栏中设置样本名称；探针检测模式设置为：Reporter Dye1：FAM，Quencher Dye1：none；Reporter Dye2：VIC ，Quencher Dye2：none；Passive Reference：Rox。
4.1.4.2 打开instrument窗口，设置循环条件如下：93℃2 分钟，93℃45 秒→55℃60 秒→10 个循环，93℃30 秒→55℃45 秒→30 个循环。
保存文件，运行。
4.2 结果分析反应结束后自动保存结果，根据分析后图像调节Baseline 的Start 值、End 值以及Threshold 值（用户可根据实际情况自行调整，Start 值可以在3～15、End 值可设在5～20，在Log 图谱窗口设置Threshold 的Value 值，使基线位于扩增曲线指数期,调整阴性质控品的扩增曲线平直或低于阈值线），点击Analysis 自动获得分析结果，在Report 界面察看结果，记录未知样本数值（C）。
PCR实验室程序管理文件及标准化操作程序
程序文件的管理和维护制度1. 目的：基因诊断程序文件是指导临床基因扩增检验活动的法规性文件，属内部受控文件，不得擅自修改、涂改，不得遗失、外借翻印。
为保持其现行有效和持续适应性，并确立因条件变化进行修改的程序。
2．编写依据：2.1 ISO/IEC170250－1999《检测和校准实验室能力的通用要求》因卫生部《临床基因扩增检验实验室技术验收表（check list）》是根据ISO/IEC17025而设计2.2 卫生部《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》及《临床基因扩增检验实验室工作规范》3．适应范围：临床检验标本4．内容5．编制及职责：程序文件由PCR实验室负责人主持编写、修订、审核并保持它的现行有效性。
由科主任批准和颁布实施，并负责解释。
6．发放与持有者责任：程序文件由科主任批准发放，发放与回收要登记签字，由PCR实验室负责人保管，并组织全室工作人员认真学习，了解内容，熟悉其中各项规定，程序文件执行情况纳入实验室目标管理，与奖惩挂钩。
持有者调任时，要收回该程序文件。
7．修订：科室任何工作人员均可提出对程序文件的修改建议，文件修改须经有关人员讨论，PCR实验室负责人根据条件变化提出是否修改的决定，如作小的修改则可在修改页上进行，修改文件经科主任审核批准后，并填写入程序文件修改页。
如果文件须作重大修改，PCR实验室负责人可进行改版。
新版程序文件经科主任批准后生效，收回旧版，并予以销毁，登记签字后发出新版，保证工作现场只有唯一的，最新的使用版本。
实验室内务管理及清洁制度1 目的：保证实验室日常内务管理及清洁工作顺利进行。
2 范围：实验室相关人员及医院清洁工人。
3 内务管理及清洁制度3.1 内务管理制度a.实验人员要有强烈的时间观念，按时上下班，不迟到、早退。
b.进入实验室的工作人员必须遵守实验室的单一流向的规定，禁止逆向走动。
c.非本室工作人员未经允许不得进入实验室。
d..实验室工作人员应严格遵守各项规章制度和操作规程。
新冠核酸检测扩增检测操作规程
新冠核酸检测扩增检测操作规程一、实验室准备工作：1.确保实验室环境清洁、整洁，并进行必要的消毒处理。
2.检查实验室设备、试剂和耗材的质量和有效期，确保其正常运转和可靠性。
3.建立样本接收、登记和保管的规范流程，确保样本信息准确无误。
二、样本处理：1.使用符合规定的个人防护装备，如手套、口罩、防护眼镜等。
2.从接收到的样本中提取核酸，可以采用自动提取仪或手动提取的方法。
3.打开样本进行提取时，注意避免交叉污染，严格按照操作规程进行操作。
4.使用质量控制样本进行质检，确保提取出的核酸质量良好。
三、扩增检测：1.制备反应体系，包括引物、酶、试剂等，确保反应体系的组分和浓度正确。
2.将提取出的核酸样本与制备好的反应体系混合，进行PCR扩增反应。
根据需要的扩增循环数和条件进行设定。
3.缺少模板对照、阴性对照和阳性对照的样本，用来进行质控，确保反应的准确性和可靠性。
4.操作过程中，注意反应混合物的温度和时间控制，确保反应体系在恒定的温度和时间下进行。
5.反应结束后，分析PCR产物的扩增曲线，根据扩增曲线的特征判断样本是否为阳性、阴性或无效。
四、结果解读与报告：1.根据分析结果，判断样本是否为新冠病毒阳性。
阳性样本需进一步进行序列分析，确认其是否为新冠病毒感染。
2.缺乏阳性扩增结果的样本，需进行二次扩增或其他检测手段进行确认。
3.结果解读完毕后，及时填写样本报告，包括样本信息、实验结果和解读、操作人员等相关信息。
4.样本报告的结果应及时通知相关部门和个人，做好信息的追踪和记录工作。
以上就是新冠核酸检测扩增检测操作规程（之江）的主要内容。
在进行实验室操作时，需要注意严格遵守操作规程，确保操作的准确性和安全性。
另外，在操作过程中，要加强个人防护，保护自身的健康。
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医院PCR核酸扩增荧光检测实验和结果分析标准操作程序
1 目的
保证扩增及结果分析的标准化、规范化。
2 使用范围
使用LightCycler型扩增仪的核酸扩增荧光检测实验室。
3 操作人
XXX
4 标准程序
4.1 核酸提取、纯化、扩增、产物分析的具体操作见项目SOP
文件及仪器使用SOP文件；
注：目前，SOP文件的主要依据是生产厂家提供的检测试
剂盒说明书。
4.2 核酸提取、纯化、加模板在样本处理区完成；
4.3 扩增反应体系的配制、分装在试剂处理区进行；
4.3 制备好的扩增混合液由传递窗转移至扩增区，上机扩
增；
4.5 扩增程序的编程：日常检测活动中，操作者必须遵循仪
器使用SOP文件规定的路径。编程或修改路径参照仪器
说明书；
XX医院 临床基因扩增检测实验室 核酸扩增荧光检测 实验和结果分析 标准操作程序 编号：C009
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4.6 标本标识的传递：以标本唯一性标识中的“序列号”作
为检测过程中的“检验号”进行传递；
4.7 工作安排：每一项目每周至少完成一个批次的检测；
4.8 在移取所需体积的血清及痰液后，立即盖紧原始标本管
盖，将标本继续保存于-20℃冰箱；
4.8.1原始标本保存一周后丢弃；
4.8.2如患者及医生对标本结果有异议，则需在一周内及时
提出意见，以便重新检测复核结果；
4.9结果分析标准程序
对于LightCycler结果曲线的分析，应按以下步骤进行：
全部曲线——阴性对照——阳性对照——阳性室内质控品
——阳性标准品——逐个分析（标出阳性标本和可疑标本）
——调整参数，获得较好的标准曲线，显示定量结果——登
记，发报告。
4.9.1 整体曲线的观察
将所有曲线选中进行整体观察
a）观察是否存在污染情况（包括标本污染和试剂污染），
特别应注意大量曲
线在同一Ct值出现上涨的情况。
b）观察是否有光路传导阻滞或电压波动等机器原因形成
的异常曲线。
4.9.2 阴性对照的分析
阴性对照：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知
阴性标本。
作用：用以监测实验室和前处理过程中是否存在污染。
4.9.3 阳性对照的分析
阳性对照：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知
阳性标本。
作用：用以监测实验能否正常检出阳性标本，避免假阴
性的出现。
4.9.4 阳性室内质控品的分析
阳性室内质控品：试剂中加入与待检标本进行同样处理
的已知或未知浓度的阳性室内质控血清。
作用：用以监控日常实验的精密度。
4.9.5 阳性标准品的分析
a）各梯度曲线的分布是否均匀，若各梯度曲线均未分开，
则表明阳模稀释可能存在问题，提示实验中存在较大人为
误差。
b）观察各曲线的Ct值是否在平日的正常位置。
情况1：若出现低拷贝标准品做不出，而各曲线Ct 值均
后移，则判断是否
为试剂扩增效率下降（如试剂过期或保存条件不合格）。
情况2：出现低拷贝标准品做不出，而高拷贝曲线Ct值
均正常，则提示可能存在低拷贝阳性标准品的降解情况。
c）每日必做103标准品，用作以下三方面监控：
一是否存在操作误差，如加样量过少等原因导致103标准
品未能检出；二是否存在稀释后的梯度放置过久，低拷贝标
准品降解的情况；三是若高拷贝标准品出现Ct值后移，且
能排除情况a、b，则判断是否为试剂灵敏度下降。
4.9.6 单个曲线的判断
逐个分析每条曲线，判断曲线的阴阳性或属可疑曲线。
（可疑标本是指曲线在37个Ct值后出现上涨且平台趋势不
明显或上涨幅度比较低的标本。可疑标本要第二天重做，两
次结果一致则报阳性，否则结果报阴性。）曲线观察内容：
在基线选择2～8时观察△Rn值大小（是否有三期特征）。在
基线选择0～0时观察Rn值曲线形状。
4.9.7 得出定量结果
调节基线和阈值以得到一较好的标准曲线。电脑据此曲
线给出阳性结果值。此时应排除某些阴性标本因荧光曲线假
性上扬而得出的假阳性结果和某些弱阳性标本因终末荧光
值过低而显示的假阴性。
4.9.8 发放报告
及时登记检测结果记录，发放临床报告。
5 本SOP的变动程序
本SOP的变动，可由任一使用该文件的工作人员提出，
报上级负责人决定。如通过则公布实行。
起草人 批准人 启用日期
XXX XXX