HPLC法同时测定丹参药材中6种活性成分的含量
高效液相色谱法测定丹参胶囊脂溶性和水溶性成分含量＊
高效液相色谱法测定丹参胶囊脂溶性和水溶性成分含量＊张珺;程月发;张爱兵【摘要】目的：采用高效液相色谱法分别建立同时测定丹参胶囊中脂溶性成分二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I及丹参酮IIA和水溶性成分丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B及丹酚酸A的含量的方法。
方法：脂溶性成分：采用Welch ultimate XB-C18（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱，以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，流速1 mL·min-1，检测波长为270 nm。
水溶性成分：采用Thermo Syncronis C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱，以甲醇-乙腈-0.02%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，流速1 mL·min-1，检测波长为286 nm。
结果：丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA分别在0.472-9.44μg（r=0.9998）、0.352-7.04μg（r=0.9999）、0.244-4.88μg（r=1.0000）、2.268-45.36μg（r=0.9999）、0.168-3.36μg（r=0.9999）、0.088-1.76μg（r=0.9999）、0.18-3.6μg（r=0.9999）、0.208-4.16μg（r=0.9999）和0.17-3.4μg（r=0.9999）呈良好的线性关系；加样回收率在97.48%-98.59%之间。
结论：该方法稳定，重复性好，可用于丹参胶囊含量的测定。
%This study was aimed to establish a HPLC method for the content determination of liposoluble components, such as dihydrotanshione I, croptotanshinone, tanshinone I and tanshinone IIA, as well as the content determination of water-soluble components, such as danshensu, protocatechuic aldehyde, rosmarinc acid, salvianolic acid B,and salvianolic acid A in Danshen capsule simultaneously. For liposoluble components, the determination was performed on a Welch ultimate XB-C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) by gradient elution usingacetonitrile-water as the mobile phase. The flow rate was 1 mL·min-1. And the detection wavelength was set at 270 nm. For water-soluble components, the determination was performed on a Thermo SyncronisC18 column (250 mm × 4.6 mm, 5μm) by gradient elution using methanol-acetonitrile-0.02%phosphoric acid as the mobile phase. The flow rate was 1 mL·min-1. And the detection wavelength was set at 286 nm. The results showed that there were good linear relationships between components of peak areas and the ranges were 0.472-9.44 μg (r = 0.999 8) for danshensu,0.352-7.04 μg (r = 0.999 9) for protocatechuic ald ehyde, 0.244-4.88 μg (r =1.000 0) for rosmarinc acid,2.268-45.36 μg (r = 0.999 9) for salvianolic acid B, 0.168-3.36 μg (r = 0.999 9) for salvianolic acid A, 0.088-1.76 g(r=0.999 9) for dihydrotanshione I, 0.18-3.6μg (r=0.999 9) for croptotanshinone, 0.208-4.16μg (r=0.999 9) for tanshinone I, and 0.17-3.4μg (r=0.999 9) for tanshinone IIA. Average recoveries of the method were between97.48%and 98.59%. It was concluded that the analysis was stable and reproducible, which can be used as a method for the analysis of Danshen capsule.【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2014(000)012【总页数】6页(P2740-2745)【关键词】丹参胶囊;脂溶性成分;水溶性成分;高效液相;含量测定【作者】张珺;程月发;张爱兵【作者单位】河北联合大学冀唐学院唐山 063300;河北联合大学冀唐学院唐山063300;河北省唐山市药品检验所唐山 063000【正文语种】中文【中图分类】R284.1丹参胶囊作为临床常用中成药，具有活血化瘀的功效。
HPLC法测定复方丹参片中三七含量的探讨
ＨＰＬＣ法测定复方丹参片中三七含量的探讨目的：建立复方丹参片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rbl含量测定的HPLC 法。
方法：采用Venusil-XBP-C18色谱柱(250×4.6mm，5μm)，以乙腈(A)和水(B)为流动相梯度洗脱，流动相梯度：0min(20％A)→12min(20％A)→60min(36％A)。
流速：1.0ml.min-1，柱温：30℃，检测波长：203nm。
结果：三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rbl线性范围分别为0.99～4.95ug、3.14～15.7μg、2.27～11.35μg。
该方法加样回收率：三七皂苷R199.8％、人参皂苷Rgl为99.5％、人参皂苷Rb1,为99.8％，RSD分别为0.87％、0.62％、0.90％。
结论：本法操作简便、结果准确、灵敏度高，重复性好，能有效的控制复方丹参片的质量。
标签：复方丹参片；HPLC;三七皂苷Rl；人参皂苷Rg1；人参皂苷Rb1；含量测定复方丹参片由丹参、三七、冰片组成，具有活血化瘀、理气止痛的功效。
用于气滞血瘀所致的胸痹。
《中国药典》规定测定丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量，未对三七进行质量控制。
笔者认为，三七在复方丹参片中是主要成分，为了有效控制其产品质量，应对其进行质量控制。
本文采用高效液相色谱法测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1,的含量，结果表明，本法简便、迅速、结果准确，现报道如下。
1仪器试剂与材料1．1仪器高效液相色谱仪(日本岛津)，LC－10ATVP泵，SPD－10PVP紫外一可见检测器，CTO－10ASVP柱温箱，SCL－10A VP系统控制器，CLASS－VPLC工作站。
1．2试剂对照品：三七皂苷R1、人参皂苷Rgl、人参皂苷Rb1,分别由中国药品生物制品检定所提供(批号分别为：110745-200312 110703-0200322 110704-200318)。
乙腈、甲醇为色谱纯；水为超纯水。
HPLC法测定药典方丹参片中丹参酮ⅡA及丹酚酸B的含量
ＨＰＬＣ法测定药典方丹参片中丹参酮ⅡＡ及丹酚酸Ｂ的含量作者：柳涛来源：《中国医药导报》2008年第23期[摘要] 目的：完善药典方丹参片的质量标准，测定制剂中丹参酮ⅡA及丹酚酸B的含量，考察制备工艺中有效成分的转移率。
方法：采用HPLC法进行含量测定。
丹参酮ⅡA，以甲醇-水（80∶20）为流动相，检测波长为270 nm；丹酚酸B以甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)，检测波长为286 nm。
结果：3批丹参片平均含丹参酮ⅡA 2.83 mg/g，转移率为42.3%；丹酚酸B含量为 51.8 mg/g，转移率为50.9%。
结论：建立了丹参片中丹参酮ⅡA 的含量测定方法，可以更好地控制丹参片的质量。
[关键词] 丹参片；丹参酮ⅡA；丹酚酸B；HPLC[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）08（b）-030-03Quantitative determination of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in pharmacopoeial prescription Danshen Tablets by HPLCLIU Tao(Center for Certification and Evaluation, Shanghai Food and Drug Administration, Shanghai 200020, China)[Abstract] Objective: To determine tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in Danshen Tablets quantitatively. Methods: HPLC with Hypersil ODS column was used in the content determination. For tanshinoneⅡA , the mobile phase was composed of methanol-water (80∶20) and the detective wavelength was at 270 nm. For salvianolic acid B, the mobile phase was composed of methanol-acetonitrile-formic acid-water (30∶10∶1∶59) and the detective wavelength was at 286 nm. Results: The average contents of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in three batch of tablets were 2.83 mg/g and 51.8 mg/g respectively. The extraction rate of the preparation processes were 42.3% and 50.9% respectively. Conclusion: The method is available with a good reproducibility and can control the quality of Danshen Tablets effectively.[Key words] Danshen Tablets；TanshinoneⅡA；Salvianolic acid B；HPLC丹参片为《中国药典》2005版一部收载的成方制剂，是单味丹参提取制得的片剂，功能活血化瘀，主要用于冠心病心绞痛等疾病[1]。
采用高效液相色谱法同时测定复方丹参滴丸中的多成分含量
采用高效液相色谱法同时测定复方丹参滴丸中的多成分含量摘要目的：采用高效液相色谱法（HPLC法）同时测定复方丹参滴丸中的7种成分。
方法：应用Diamonsil C18色谱柱，以乙腈-甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，在柱温35 ℃下使用205、270和285 nm三波长同时检测。
结果：7种成分的峰面积与浓度的线性关系良好，平均回收率在94.3%～101.3%间，加样回收率符合要求。
结论：该方法简单、准确可靠且重现性好，可用于该制剂的质量控制。
关键词复方丹参滴丸HPLC法含量测定Quantitative determination of multi-components in Compound Danshen Dripping Pill by HPLC methodYao Lin1*，Cheng Wei-ming2**（1. Shanghai Food and Drug Packaging Material Control Center，Shanghai，201203；2. Zhejiang Institute for Food and Drug Control，Hangzhou，310004）Abstract Objective: To establish an HPLC method for the simultaneous determination of 7 components in Compound Danshen Dripping Pill. Method: Diamonsil C18 was used as the solid phase，and acetonitrile-methanol-0.1% (v/v) phosphoric acid as the mobile phase for the gradient elution. The column temperature was 35℃，and the detective wavelengths were set as 205，270 and 285 nm. Results: the linearities of the 7 components were all good in the range of the test concentration，and the average recoveries were between 94.3% and 101.3%. Conclusion: the method was simple，reliable and reproducible，which could be used as quality control for the determination of Compound Danshen Dripping Pill.Key words Compound Danshen Dripping Pill；HPLC；content determination中药成分的含量测定是中药现代化研究的重要组成部分之一，而中药复方多成分含量的同时测定研究还可为中药复方的质量控制提供必要的基础和方法。
HPLC法测定复方丹参片中丹参脂溶性成分的含量
HPLC法测定复方丹参片中丹参脂溶性成分的含量张海江;胡静雅;袁日琴【摘要】运用液质联用技术分析复方丹参片中的丹参脂溶性成分组成,并建立了四种丹参脂溶性成分的HPLC含量测定方法.采用Agela-Venusil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水-乙酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为280 nm.通过质谱解析以及与对照品比较,鉴定了隐丹参酮、二氢丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA,并建立了HPLC分析方法同时测定这四种成分的含量.方法的重复性RSD小于2.0%,平均回收率为97.3～101.6%.本方法操作简便快速,分析结果准确可靠.【期刊名称】《淮阴工学院学报》【年(卷),期】2011(020)001【总页数】5页(P59-63)【关键词】复方丹参片;丹参;脂溶性成分;液质联用;质量控制【作者】张海江;胡静雅;袁日琴【作者单位】淮阴工学院生命科学与化学工程学院,江苏淮安223003;淮阴工学院生命科学与化学工程学院,江苏淮安223003;淮阴工学院生命科学与化学工程学院,江苏淮安223003【正文语种】中文【中图分类】S1310 引言复方丹参片由中药丹参、三七及冰片所组成，具有活血化瘀、调经止痛、安神宁心的功效，临床主要用于治疗冠心病心绞痛及急性心肌梗死。
丹参脂溶性成分被认为是复方丹参片的活性成分之一，主要有隐丹参酮、二氢丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA，并已有文献对这些成分的HPLC含量测定方法进行了研究。
中国药典以丹参酮IIA作为丹参脂溶性成分的标示化合物进行复方丹参片的质控，难以准确反映复方丹参片的质量。
现有的复方丹参片中丹参脂溶性成分含量测定方法的研究仅针对其中的二至三种，同时测定以上所有四种成分的分析方法尚未见文献报道。
本文首先采用液质联用技术分析复方丹参片中的丹参脂溶性成分组成。
在此基础上，建立了HPLC含量测定方法，同时测定隐丹参酮、二氢丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA的含量。
HPLC同时测定紫丹参药材中8种成分含量
HPLC同时测定紫丹参药材中8种成分含量 管小军1，厉君2，黄娜娜1，浦滇1，邓雪琪1，3，李凤仙1，李嘉新1，李俊1，31.云南中医药大学，云南昆明 650500；2.云南楚雄天利药业有限公司，云南楚雄 651208；3.云南省民族特色养生理论与健康产品工程实验室，云南昆明 650500摘要：目的 建立同时测定紫丹参药材中丹参素钠、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA含量的方法，为紫丹参药材的质量评价提供参考。
方法 采用ACE Neptune-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱，流速1.0 mL/min，检测波长275 nm，柱温25 ℃，同时测定10批紫丹参药材中丹参素钠，迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的含量。
结果 丹参素钠、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA进样量分别在0.041 2～0.412 0、0.030 8～0.308 0、0.056 8～0.568 0、1.010 0～10.100 0、0.015 9～0.159 0、0.035 2～0.352 0、0.016 4～0.164 0、0.042 0～0.420 0 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（R2为0.999 4～0.999 8），平均加样回收率为97.79%～102.33%（RSD＜3%）。
结论 本研究建立的方法灵敏、准确、可靠、重复性好，可用于紫丹参药材的质量评价。
关键词：紫丹参；多成分同时测定；含量测定；高效液相色谱法中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2020)09-0082-05DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.202002080 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Simultaneous Determination of 8 Components in PurpleSalviae Miltiorrhizae et Rhizoma by HPLCGUAN Xiaojun1, LI Jun2, HUANG Nana1, PU Dian1, DENG Xueqi1,3, LI Fengxian1, LI Jiaxin1, LI Jun1,31. Yunnan University of Chinese Medicine, Kunming 650500, China;2. Tianli Pharmaceutical Co., Ltd, Chuxiong651208, China; 3. Yunnan Provincial National Health Preservation Theory and Health Product EngineeringLaboratory, Kunming 650500, ChinaAbstract:Objective To establish a method for the simultaneous determination of tanshinone sodium, rosemary acid, shikonic acid, salvianolic acid B, dihydrotanshinone Ⅰ, cryptotanshinone, tanshinone , tanshinone IIⅠA in purple Salviae Miltiorrhizae et Rhizoma; To provide reference for its quality evaluation. Methods An ACE Neptune- C18 column (4.6 mm × 250 mm, 5 μm) was used. Gradient elution with acetonitrile-0.1% phosphoric acid aqueous solution was set as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min. The detection wavelength was 275 nm. The column temperature was 25 ℃. Contents of tanshinol sodium, rosemary acid, shikonic acid, salvianolic acid B, dihydrotanshinone , cryptotanshinone, tanshinone and tanshinoneⅠⅠⅡA in 10 batches of purple Salviae Miltiorrhizae et Rhizoma were detected. Results The mass concentration of tanshinol sodium, rosemary acid, shikonic acid, salvianolic acid B, dihydrotanshinone ,Ⅰcryptotanshinone, tanshinone and tanshinoneⅠⅡA were 0.041 2‒0.412 0, 0.030 8‒0.308 0, 0.056 8‒0.568 0, 1.010 0‒10.100 0, 0.015 9‒0.159 0, 0.035 2‒0.352 0, 0.016 4‒0.164 0, 0.042 0‒0.420 0 μg, respectively, which showed a good linear relationship with the peak area (R2 were 0.999 4‒0.999 8), and the average sample recovery was among 97.79%‒102.33% (RSD<3%). Conclusion This method is sensitive, accurate, reliable and reproducible, which can be used for the quality evaluation of purple Salviae Miltiorrhizae et Rhizoma.Keywords: purple Salviae Miltiorrhizae et Rhizoma; multi-component simultaneous measurement; content determination; HPLC基金项目：云南省重大科技专项（2018ZF001）通讯作者：李俊，E-mail：****************紫丹参始载于《滇南本草》，为唇形科植物云南鼠尾草Salvia yunnanensis C. H. Wrigh的干燥根和根茎，又名滇丹参、云南鼠尾草、丹参、小丹参、山槟榔、小红参、小红党参、小红草乌、奔马草等，彝族称为呆乃色，为多年生草本植物，主要分布于云南、贵州、四川等地[1]，1974年起收载于《云南省药品标准》。
RP-HPLC测定丹参五味子片中丹参酮ⅡA和五味子甲素的含量
RP-HPLC测定丹参五味子片中丹参酮ⅡA和五味子甲素的含量目的：运用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测丹参五味子片中丹参酮ⅡA、五味子甲素的含量。
方法：色谱柱选择Phenomenex KinetexC18 (250 mm×4.6 mm，5 μm)，以甲醇-水为流动相，甲醇∶水为85∶15，流速设定为每分钟1 ml。
丹参酮ⅡA的检测波长为270 nm，五味子甲素的检测波长为254 nm；色谱柱温度设定为28 ℃；每次进样量为25 μg；色谱柱量程为1.0 AuFS。
结果：丹参酮ⅡA和五味子甲素的线性范围分别为0.323 2~1.616 μg与0.525 ~2.625 μg，平均回收率分别是99.08%、98.37%，RSD测定值分别为0.42%、0.73%。
结论：运用反相高效液相色谱法可准确快速地对丹参五味子片中丹参酮ⅡA及五味子甲素的含量进行测定，操作简便，重复性好。
[Abstract] Objective：To set up a determination of tanshinoneⅡA and deoxyschizaadrin in danshenwuweizi tablet by RP-HPLC.Methods：Two components were separated through Kromasil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)column with methanol-water(85∶15)by volume as a mobile phase.The flow rate was 1 ml/min and the detection wavelength were 270 nm(tanshinoneⅡA)and 254 nm(deoxyschizandrin).Results：The linear range of tanshinoneⅡA and deoxyschizandrin were 0.323 2-1.616 μg and 0.525-2.625 μg，respectively. The average recovery was 99.08% with RSD 0.42% for tanshinoneⅡA and 98.37% with RSD 0.73% for deoxyschizandrin respectively.Conclusion：The method is simple，accurate and rapid with good reproducibility.It can be used for the quality control of danshenwuweizi tablet.[Key words] RP-HPLC；Danshnewuweizi tablet；Tanshinone ⅡA；Deoxyschizandrin丹参五味子片在中医临床上常用于治疗冠心病、神经衰弱、急性肝炎、慢性肝炎等疾病，其主要成分有丹参、五味子、甘草、刺五加、田七等中药材，临床功效主要为活血化瘀，扶正祛邪、理气开窍等。
HPLC同时测定丹参中丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量
为简便而全面地控制丹参药材 的质量提供更为有效
的分 析方 高 效液 相色谱仪 （ 日本 岛津公 司 ， 型号 Ｌ － Ａ ） 岛津 Ｓｌｉ 液相工作站 ， Ｃ２ Ｂ ， ０ ｏ ｔｎ ｕｏ 电子 天平 （ 上 海 民桥科学仪器有 限公司 ， 型号 ｓ — ， ＬＮ） 干燥箱（ 浙 江省金坛市正基仪器有 限公司 ， 型号 Ｃ － ２ ， Ｓ ０ ） 电热 ２
恒温水浴锅 （ 北京 长安科学仪器 厂 ， 型号 Ｈ １— Ｈ Ｓ１ ２， ）超声仪（ Ｕ Ｏ ＣＥ Ｃ ， Ａ Ｔ Ｓ ＩＮ Ｅ 型号 Ａ １０ ） Ｓ５５ Ａ 。
１２ 试 剂 和试 药 ． 丹 参 酮 ⅡＡ， 酚 酸 Ｂ（ 国药 丹 中
品生物制 品检定所 提供 ） 甲醇 （ ， 上海正 兴化工一 厂， 色谱纯 ） 乙腈 （ ， 上海正兴化工一厂 ， 色谱纯 ）其 ，
和 丹酚 酸 Ｂ的含 量 。
关键词 ： 丹参 ； 丹参酮 Ⅱ 丹酚酸 Ｂ 高效液相 色 法 Ａ； ； 谱 中图分类 号 ：９７２ 文献标 识 码 ： 文章编 号 ：００—２ １ （０７ ０ ０４ ０ Ｒ２． Ａ １０ ２９ ２０ ）３— ０ ７— ４
丹 参 为 唇 形 科 植 物 丹 参 Ｓ ｒｉ ｌｏｒｉ ａｖａ ｍｉｉ ｈｚ ｔｒ ａ Ｂ ｅ的干 燥根 及根 茎 ， 参 味苦 ， 微寒 ， ｇ． 丹 性 归心 、 肝二 经 ， 活 血 化 瘀 、 血 消痈 、 心 除 烦 之功 效 。其 主 具 凉 清 要 成分 为 二萜 醌 类 （ 参 酮 Ｉ、 参 酮 Ⅱ和 隐 丹 参 丹 丹 酮等） 和酚 酸类 （ 丹酚 酸 ＡＪ丹参 素 、 －、 原儿 茶 酸等 ） ，
他试 剂 为分 析纯 。丹 参 （ 于安 徽 省毫 州 沪 谯饮 片 购
HPLC测定丹参分散片中有效成分含量
祛瘀止痛，活血通经 ，清心除烦之功效… 。现代研 究表明丹参的药理作用主要是对心血管系统 ，能扩 张血管 ，加快血 流 ，改 善微循 环 ，改 变血液 黏滞 性 ，增加心肌 供血 量 、供 养量 ，降低心 肌耗 氧量 等 。丹参 中的有效部位包括丹参 酮类化合 物 、 ］ 丹酚酸 Ｂ４ ［ 和丹参素 等 ，但是丹参 中丹参酮类化 合物和丹参素 ，在水中的溶解度低 ，若采用直接 口 服给药途径 由于吸收效率和生物利用率较低而影响 其药效 的发挥。将药物制成分散片可增加药物 的崩 解及溶 出速率 ，提高药物生物利用度 ，所 以作者制 备 了丹参分散 片，采用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ对其 中的丹参酮 Ⅱ 、 丹酚酸 Ｂ和丹参素 的含量进行 了测定 ，方法简便 、 准确。
含量测定法 。
［ 关键 词］Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ；丹参分散 片 ；有效成分 ；含量 测定
丹参为唇形科 鼠尾草属植物丹参 Ｓｌａｍｌ ｒ ａ ｉ ｉｉ － ｖ ｔ ｏ
ｒｉ ｇ．的 干燥 根 及 根 茎 。性 微 寒 ，味苦 ，具 有 ｈｚ Ｂ ｅ ａ
甲醇 和 乙腈均 为色 谱纯 （ 山东 禹王 实业 总 公 司化工 厂） ；甲酸和 醋 酸均 为 分 析 纯 （ 山东 禹王 实业 总公 司化 工厂 ） ；蒸 馏水 为重 蒸水 。
（．５ ｍ）滤过 ，取滤 液 ，即得测定 丹参 酮 Ⅱ ０４ 含
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Ｈ张丽 惠。 ，相会欣 ，邹瑜 ，佟志清 张春媛 王淑君 ，承伟 ， ２ ０ １ ．沈 阳药科 大学 ，辽 宁 沈 阳 １０ １ ； ０ ６ １ （．辽 宁医学院 ，辽 宁 锦 州 １ １０ ；２ １
１， Ｓ Ｏ Ｔ Ｍ ２ ／ ｌ ．Ｃ Ｎ
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２ ２２供试 品 溶 液 制 备 取 样 品 约 ０ ４ ，精 密 称 ．． ．ｇ
高效液相色谱法同时测定丹参中6种化学成分的含量
高效液相色谱法同时测定丹参中6种化学成分的含量程茜菲【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2016(31)6【摘要】Objective To establish a method for the simultaneous determination of rosmarinic acid,salvianolic acid B,dihydrotanshi-none Ⅰ,clyptotanshinon,tanshinoneⅠand tanshinone ⅡA in Radix Salviae miltiorrhiza .Methods The chromatograhic separa-tion was performed on Thermo C1 8 column (250 mm×4.6 mm,5 μm);the column temperature was maintained at 30 ℃;the sepa-ration was achieved by a linear gradient elution;the moblie phase was a mixture of solvent A(acetonitrile)and solvent B(formic acid aqueous).The flow rate was 1 mL·min-1 ;the UV detection wavelength was 270 nm.Result Rosmarinic acid,salvianolic acid B,dihydro-tanshinoneⅠ,clyptotanshinon,tanshinoneⅠand tanshinone ⅡA showed good linearity in the ranges of 0.336-3.36 μg(r=0.999 9),and 4.772-47.72 μg(r=0.999 8),0.01 9 3-0.1 92 8 μg(r=0.999 8),0.072-0.72 μg(r=0.999 7),0.077 2-0.772 μg (r=0.999 8 ),and 0.1 74 4-1.744 μg (r = 0.9999 ),respectively.The average recoveries were 100.2%(1.58%),100.4%(1.25%),98.6%(1.09%),100.0%(1.21%),99.3%(1.10%),and 99.1%(1.06%),respectively.Conclusion The present meth-od is simple and has satisfactory efficacy;it could be used for simultaneously determing rosmarinic acid,salvianolic acid B,dihydro-tanshinoneⅠ,clyptotanshinon,tanshinoneⅠand tanshinone ⅡA components in Salvia miltiorrhiza .%目的：建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定丹参中迷迭香酸、丹酚酸 B、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA 含量的方法。
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度洗脱 ， 洗脱程序见表 １ ， 流速 １ ． ０ ｍｌ Ｍｍ ｉ ｎ ； 柱温 ３ Ｏ℃ ； 检测
波长 ２ ８ ０ ｎ ｍ， 进样量 ｌ ０ Ｌ 。
表 １ 梯度洗脱程序
ⅡＡ含量为两大类成分的代表物 ， 分别测定 ， 所采用 的色谱 系 统及样 品的前处理方法等各不相同 ， 操作繁琐 ， 不能全面反映
２ 方 法 与 Βιβλιοθήκη 果 成分为丹酚酸 Ｂ 、 丹参素、 原儿茶醛 ， 脂溶性 的丹参酮类 的主 要成分为迷迭香酸、 二氢丹参酮 、 隐丹参酮 、 丹参酮 Ｉ、 丹参酮 ⅡＡ。现代药理学研究表明 ， 丹参中酚酸类 和丹参酮类成分均 具有显著 的生物活性 ， 因此 可以通过 测定这些 化合物 的 含量来全面评价丹参的质量 。《 中华人 民共 和国药典》 （ ２ ０ １ ０
版） 中对丹参 含量 的控制 方法 ， 只以丹酚酸 Ｂ含量和丹参 酮
２ ． １ 色谱条件
色谱柱 ：Ｓ ｈ ｉ ｍ ｐ ａ ｋ Ｃ ｌ ８ （４ ． ６ ｎ ｌ ｌ ｎ ×１ ５ ０ ｍ ｍ， ５ ｌ ａ ， ｍ） ； 流动
相： Ａ为 ０ ． ２ ％ 甲酸的乙腈溶液 ， Ｂ为 ０ ． ２ ％ 甲酸的水溶液 ， 梯
药材 中多个活性成分的含量 以及成分间的相关性 。本研究采
用高效液相色谱 （ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ） 法， 建 立 以同一色谱 条件 和样 品前
处理方法 ， 同 时测定 丹参 中多 个活 性成 分 （ 丹 参素 、 原 儿 茶
醛、 丹酚酸 Ｂ 、 隐丹参 酮、 丹参酮 Ｉ和丹参酮 ⅡＡ等 ） 的分析 方 法， 操作简便 易行 ， 并对 ６个不 同产地丹参药材 中活性成分 进
脂溶性丹参 酮类 和水溶性丹 酚酸类 ， 水溶性丹 酚酸类的主要
分析仪器有限公司产 品） ； Ｒ Ｕ Ｃ一 ５ ２ ０ ０型超声 波清洗 机 （ 上 海睿祺公司产品） 。
药 品与试剂 ： 对照品丹参 素钠 、 原儿 茶醛 、 丹酚 酸 Ｂ 、 隐 丹参酮 、 丹参酮 Ｉ、 丹参酮 ⅡＡ均购 自于中国药品生物制品检 定所 ， 乙腈 为色谱纯 ， 水为超纯水 ， 其余试剂均为分析纯。
中图分 类号 ： Ｒ ２ ８ ４ ． １ 文献标 志码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ２—１ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ７— ０ ３ １ ２—０ ２
丹参为唇 形科 鼠尾草属 植物 （ Ｓ ａ ｌ ｖ ｉ ａ ｍ ｉ ｌ ｔ ｉ ｏ ｒ ｒ ｈ ｉ ｚ ａ Ｂ ｇ ｅ ． ） ， 丹参的干燥根部及根茎 ， 具有活血化瘀 ， 凉血消肿 ， 清心除烦 的功效” 。临床上证 实 ， 丹参具有扩 张血 管、 降血脂 、 抗动脉 粥样硬化、 抑制血小板凝 聚、 抗血栓形成 、 保护心肌 、 增加冠脉 流量 、 抗菌消炎 、 抗 肿瘤 等作用 。丹 参 的活性成 分可 分为
刘 臣
（ 苏州市职业大学 ， 江苏苏州 ２ １ ５ １ ０ ４ ）
摘要 ： 本研究 目的是建 立同时测定丹参药材 中 ６种活性成分丹参素 、 原儿茶醛 、 丹酚酸 Ｂ 、 隐丹参酮 、 丹参酮 Ｉ、 丹 参酮 ⅡＡ含量 的高效液相色谱法。以不同产地 的丹参药 材为样本 ， 用Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法测 定。色谱条件 为 ： Ｓ ｈ ｉ ｍ ｐ ａ ｅ ｋ Ｃ 。 。 色谱 柱（ １ ５ ０ ｍ ｍ ｘ ４ ． ６ ｍ ｍ， ５ ｌ ａ ， ｍ） ； 以０ ． ２ ％ 甲酸的乙腈溶 液 一 ０ ． ２ ％甲酸的水溶液体 系为流动相进行 梯度洗脱 ； 紫外 检测 器， 检测波 长为 ２ ８ ０ ｎ ｍ； 流速为 Ｉ ． ０ ｍ ｌ Ｍｍｉ ｎ ； 进样量 １ ０ Ｉ Ｌ Ｌ ； 柱温为 ３ ０℃ 。 结果表 明， 在优化条件下 ， ６种成分 的进样量 范 围分别为丹参素 ０ ． １ ５～１ ． １ ６ Ｉ ． ｚ ｇ 、 原儿茶醛 ０ ． ０ ６ ７～ ０ ． ５ ４ Ｉ ｘ ｇ 、 丹酚酸 Ｂ ： ０ ． ３ ４— ２ ． ７ ６ ｇ 、 隐丹参酮 ０ ． ０ ４～ ０ ． ３ ２ ｇ 、 丹
参酮 １ ０ ． ０ ０ ９ — ０ ． ０ ７ ４ Ｉ ｘ ｇ 、 丹参 酮 Ⅱ Ａ ０ ． ０ １ ０—０ ． ０ ８ ２ ｌ ａ ， ｇ ， 该 范 围内进 样量 与色谱峰面积 之间 的线性 关系 良好 （ ／ ． ２ ＝
０ ． ９ ９ ９ ４— ０ ． ９ ９ ９ ７ ） ； 加标 回收率在 ９ ８ ． ９ ０ ％ ～ ９ ９ ． ４ １ ％； Ｒ Ｓ Ｄ均小于 ｌ ％ 。该方 法简便 、 快速、 准确 ， 可用于野 生丹参和 栽培丹参 中水溶性及脂溶性活性成分的质量控制。 关键词 ： Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ； 丹参 ； 活性成分 ； 含量
一
３ １ ２一
江苏农业科学 ２ ０ １ ３年第 ４ １ 卷第 ７期
刘 臣． Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法 同时测定丹参药材 中６种活性成分 的含量［ Ｊ ］ ．江苏农业科学， ２ ０ １ ３ ， ４ １ （ ７ ） ： ３ １ ２— ３ １ ４
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法 同时测定丹参药材 中 ６ 种 活性成分 的含量
行了含量测定 ， 旨在全 面控制丹参药 材的质量 。
１ 材料 ２ ． ２ 对 照 品溶 液 的 制备
１ ． １ 供试丹参 购 自黑龙 江省 哈尔滨市 中药材批发站 。
１ ． ２ 仪 器与 试 剂
分别精密称取适量对照品 ， 置１ ０ ｍ Ｌ量瓶 中， 分别 以甲醇 为溶剂 ， 配制成单组 分对照 品溶 液 ， 再 配制成混 合对 照品溶 液， 其 中含丹参素 ０ ． ０ ５ ８ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ 、 原儿茶 醛 ０ ． ０ ２ ７ ｍｇ ／ ｍ Ｌ 、 丹 酚酸 Ｂ ０ ． １ ３ ８ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ 、 隐丹参酮 ０ ． ０ １ ６ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ 、 丹参酮 １ ０ ． ０ ０ ３ ７ ｍｅ ， ／ ｍ Ｌ 、 丹参酮 ⅡＡ０ ． ０ ０ ４ １ ｍｇ ／ ｍ Ｌ 。