生物制药技术实验中的材料准备方法
《生物制药技术》实验指导-实验三、四
《生物制药技术》实验指导实验三四环素、金霉素的薄层层析鉴定（验证型）实验目的：掌握薄层层析的原理，四环素族抗生素的定性鉴定方法。
实验原理：层析（色谱，chromatograpby）是相当重要、且相当常见的一种技术，在把微细分散的固体或是附着于固体表面的液体作为固定相，把液体（与上述液体不相混合的）或气体作为移动相的系统中（根据移动相种类的不同，分为液相层析和气相层析二种），使试料混合物中的各成分边保持向两相分布的平衡状态边移动，利用各成分对固定相亲和力不同所引起的移动速度差，将它们彼此分离开的定性与定量分析方法，称为层析，亦称色谱法。
用作固定相的有硅胶、活性炭、氧化铝、离子交换树脂、离子交换纤维等，或是在硅藻土和纤维素那样的无活性的载体上附着适当的液体。
将作为固定相的微细粉末状物质装入细长形圆筒中进行的层析称为柱层析（column chromatography），在玻璃板上涂上一层薄而均的支持物（硅胶、纤维素和淀粉等）作为固定相的称为薄层层析（thin layer chromatography），或者用滤纸作为固定相的纸上层析。
层析根据固定相与溶质（试料）间亲和力的差异分为吸附型、分配型、离子交换型层析等类型。
但这并不是很严格的，有时常见到其中间类型。
此外，近来也应用亲和层析，即将与基质类似的化合物（通常为共价键）结合到固定相上，再利用其特异的亲和性沉淀与其对应的特定的酶或蛋白质。
分配层析在支持物上形成部分互溶的两相系统。
一般是水相和有机溶剂相。
常用支持物是硅胶、纤维素和淀粉等亲水物质，这些物质能储留相当量的水。
被分离物质在两相中都能溶解，但分配系数不同，展层时就会形成以不同速度向前移动的区带。
一种溶质在两种互不混溶的溶剂系统中分配时，在一定温度下达到平衡后，溶质在固定相和流动相溶剂中的浓度之比为一常数，称为分配系数。
当欲被分离的各种物质在固定相和流动相中的分配系数不同时，它们就能被分离开。
分配系数大的移动快（阻力小）。
生物制药技术实验中的规范操作要求
生物制药技术实验中的规范操作要求生物制药技术是一门关键的生物科学领域，涉及研究、开发和制造药物及其他医疗产品。
在实验室中进行生物制药技术实验时，规范的操作要求尤为重要，以确保实验结果的可靠性和实验者的安全性。
本文将讨论生物制药技术实验中的规范操作要求，包括实验室准备工作、操作步骤、安全措施和质量控制等方面。
首先，在进行生物制药技术实验之前，实验室应符合相关的卫生和安全要求。
实验室必须保持清洁、整洁，并定期进行消毒。
所有实验器材和试剂都应储存妥善，并按照要求保持正确的温度和湿度。
此外，实验室操作台和周围区域也应保持干净并且没有杂物。
接下来，在实验操作过程中，实验者必须穿着适当的实验服和个人防护装备。
实验服应包括实验袍、手套、安全镜和鞋套，以避免任何可能的交叉污染和伤害。
在进入实验室之前，实验者应洗手并确保双手彻底干燥。
此外，实验者应遵循操作流程的规定，严禁随意更改实验步骤或使用过期或过期的试剂。
在实验操作过程中，实验者应注意实验条件的严密控制。
例如，在细胞培养实验中，实验者应确保培养物的pH、温度和湿度等参数保持稳定，并遵循所选细胞系的特定培养要求。
另外，实验者应准确记录和报告实验过程中的变化或异常结果，以帮助分析实验结果的可靠性和一致性。
在生物制药技术实验中，实验者应严格遵守好实验室操作规范（Good Laboratory Practice，GLP）。
这是一种国际通用的实验室管理和操作原则，旨在确保实验的可重复性、可比较性和可验证性。
实验室应建立相应的质量管理体系，包括文件管理、仪器校准、标准化程序和数据分析等方面。
所有试剂和材料都应有明确的标识和记录，以确保实验过程的可追溯性。
此外，实验结果应进行统计和合理的数据处理，以获取准确和可靠的结论。
为确保生物制药技术实验中的安全性，实验者应遵守实验室安全操作规范。
这包括正确使用实验室设备和试剂、遵循化学品安全操作要求，并了解和采取适当的应急措施。
实验者还应接受相关的安全培训并熟悉实验室安全设备的使用方法，如紧急淋浴和吸入式泄漏控制装置。
2第二章--生物制药工艺基础
第二节 微生物制药工艺技术基础
一、菌种的分离与筛选
1．含菌样品收集 2. 富集培养：“投其所好”，“取其所抗” 3. 菌种纯化：（1）平板划线法 （2）稀释平板法 4. 性能测定（菌种复筛）
（1）平板划线法
是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀 释而达到分离的目的。固体培养基四区划法接种法步骤：
二、菌种的选育与保藏
1．自然选育
依据自发突变原理，通过不断分离、筛选，除去 衰变菌落，从中选择维持原有生产水平的菌株或高产 突变株，达到纯化、复壮、稳定生产目的。
单孢子菌悬液的制备→分离→单菌落培养→筛选
2．诱变育种
指有意识地将生物体暴露于物理的、化学的或生物的一种 或多种诱变因子，促使生物体发生突变，进而从突变体中 筛选具有优良性状的突变株的过程。
优点是生产规模大、蒸发温度低、速度快， 目的是除去挥发性溶剂，保持物料生物活性， 加速蒸发原理是使液体形成薄膜，增加气化表面
积。
世界上最大的具有80m2蒸发面 积的薄膜蒸发器。
实验室常用真空旋转蒸发仪。
薄膜蒸发器
2.干燥
使物质从固体或半固体状经除去存在的水分或它种 溶剂，从而获得干燥物品的过程。
第二章 生物制药工艺技术基础
Basis of biopharmaceutical technology
生化制药工艺技术基础 微生物制药工艺技术基础 生物技术制药工艺技术基础 生物制药中试放大工艺设计 生物药物的研究与新药申报
本章学习目标
掌握：生化活性物质的提取、分离和纯化； 微生物菌种选育和培养。
②pH；
③盐；
④表面活性剂。
四、生化活性物质浓缩与干燥
1.浓缩方法： 生化活性物质的热不稳定性 ①盐析，中性盐硫酸铵沉淀蛋白（酶）； ②有机溶剂沉淀，生物大分子溶液
制药工程专业微生物实验讲义
（怀化学院微生物学课程组）微生物学实验室学生要求为了营造一个安全有效、秩序良好的实验室环境，达到“科学、规范、安全、高效”的目的，特对进入微生物学实验室进行实验的学生作如下要求。
1.按已分好的班级组次，按时参加实验，并完成实验项目。
2.进入实验室前，要求穿戴整齐，需穿好实验服，不能穿人字拖类拖鞋进入实验室。
3.上课前要求上交当堂课程的实验预习报告。
4.要求独立或以小组为单位完成实验项目，实验期间保持实验室安静，不能大声喧哗，并及时记录好实验数据。
5.实验完成后及时对实验结果进行分析并完成实验报告。
6.实验完成后需及时清洗实验器皿，清洁和整理实验台，做好卫生，保持实验室干净整洁。
授课教师：刘卫今、黎晓英（以下实验内容仅供参考，具体内容以相应教材为准）实验一培养基的制备与灭菌一、实验目的1．掌握培养基配制的原理。
2．通过对牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基、马铃薯培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。
3．解高压蒸汽灭菌的基本原理及操作方法。
二、实验原理1．什么是培养基，一般培养基应具备哪些营养要素？2．培养基有哪些类型，为什么培养不同的微生物需要的培养基不同，培养基为什么要调节pH 值，配制好的培养基为什么要立即灭菌？3．高压蒸汽灭菌的原理是什么？三、实验材料和用具牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖（或蔗糖）、链霉素、1mol/L NaOH、1mol/LH Cl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O 试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、线绳、纱布和玻璃漏斗等。
四、操作步骤(一)牛肉膏蛋白胨培养基的配制牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
其配方如下:牛肉膏3g，蛋白胨l0g，NaCl5g，琼脂15-20g, 水1000mL，pH 7.4～7.61. 称量：按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。
湿热灭菌实验报告资料(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解湿热灭菌的原理和方法。
2. 掌握湿热灭菌实验的操作步骤。
3. 评估湿热灭菌的效果。
二、实验原理湿热灭菌是一种利用高温高压水蒸气进行灭菌的方法。
在湿热条件下，微生物的蛋白质和核酸容易变性凝固，酶系统容易被破坏，从而使微生物死亡。
湿热灭菌的穿透力比干热灭菌大，杀伤力强，是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：细菌培养液、无菌培养皿、无菌棉签、湿热灭菌器、温度计、计时器等。
2. 实验仪器：湿热灭菌器、高压蒸汽灭菌器、显微镜、培养箱等。
四、实验方法1. 实验分组：将实验分为实验组和对照组。
2. 实验操作：- 将细菌培养液均匀涂布于无菌培养皿上，晾干后制成待灭菌样品。
- 将待灭菌样品分为实验组和对照组。
- 将实验组样品放入湿热灭菌器内，对照组样品不进行灭菌处理。
- 调整湿热灭菌器温度至121℃，持续灭菌30分钟。
- 灭菌完成后，取出样品，置于37℃培养箱中培养48小时。
- 观察并记录实验组和对照组的菌落生长情况。
3. 结果分析：- 通过观察实验组和对照组的菌落生长情况，评估湿热灭菌的效果。
五、实验结果与分析1. 实验结果：- 实验组样品在37℃培养箱中培养48小时后，未观察到菌落生长。
- 对照组样品在37℃培养箱中培养48小时后，观察到明显的菌落生长。
2. 结果分析：- 实验结果表明，湿热灭菌可以有效杀灭细菌，达到灭菌效果。
六、实验讨论1. 湿热灭菌是一种高效、经济的灭菌方法，在药物制剂生产过程中应用广泛。
2. 实验过程中，应注意以下几点：- 确保实验操作符合规范，避免污染。
- 控制灭菌时间和温度，确保灭菌效果。
- 选择合适的灭菌方法和设备，提高灭菌效率。
七、结论本实验通过湿热灭菌方法，成功杀灭了细菌，证明了湿热灭菌在药物制剂生产过程中的有效性。
在今后的工作中，应继续深入研究湿热灭菌技术，提高灭菌效果，确保产品质量。
八、实验总结1. 本实验成功掌握了湿热灭菌的原理和方法。
制药用水微生物限度检验方法学确认2015.11
制药用水-微生物限度检验方法学确认目录一、引言1、概述2、验证的目的二、验证方法合格标准三、主要材料确认1、仪器设备确认2、辅助材料确认3、人员确认4、商品培养基及灭菌培养基确认5、菌种及菌液的制备四、样品制备1、稀释液2、供试液制备3、操作方法五、方法验证1、需氧菌总数的计数方法验证2、计算菌回收率公式六、验证结果及评价七、再验证周期八、验证结论批准一、引言1、概述：根据《中国药典》2015年版三部通则“1105 非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”（以下简称《药典》）的要求，对内控标准中有“微生物限度”检查项的产品进行该项验证。
根据《中国药典》2015年版三部纯化水进行方法学确认。
2、验证目的：确保药品微生物限度检查实验的准确性，在建立药品的微生物限度检查法时，应进行需氧菌总数计数方法的验证，以确认所采用的方法适合于该样品的需氧菌总数的测定。
二、验证方法合格标准1.前提条件：培养基适用性实验应符合规定，即：被检R2A培养基上菌落平均数与对照培养基上菌落平均数比值应为0.5~2，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致。
2.计数方法适用性试验：在3次独立的平行试验中，若试验组的菌回收率（试验组的平均菌落数减去供试品对照组的平均菌落数的值与菌液对照组的平均菌落数的比值）均在0.5～2范围内，照该供试液制备方法和计数法测定供试品的需氧菌总数。
三、主要材料确认1、仪器、设备确认检查结果：检查人：复核人：日期：2、辅助材料确认2.1移液器、接种环、酒精灯、记号笔、酒精棉球、试管架、试管、玻璃平皿、止血钳等2.2需灭菌物品见《微生物限度检查法验证记录》2.3一次性无菌用具见下表检查结果：检查人：复核人：日期：3、人员确认化验员经设备操作、微生物检验技术和实验室生物安全等方面的培训，考核合格后上岗。
4、商品培养基及灭菌培养基4.1 所用培养基均不得有结块、吸潮、异味、颜色发生改变等现象。
培养基检查结果，如下检查结果：检查人：复核人：日期：4.2已灭菌培养基的检查结果及结论见《微生物限度检查法验证记录》。
生物制药工艺学实验
生物制药工艺学实验指导（12个实验，36学时）焦飞生物技术教研室实验一健胃消食片配方及片剂的制备一、实验目的1.掌握压片机压片的方法及影响片剂成型的主要因素；2.学会片剂处方的调配。
二、实验材料和仪器太子参，陈皮，山药，麦芽（炒），山楂，蔗糖粉，糊精，硬脂酸镁，粉碎机，干燥箱，制片机三、实验原理健胃消食片为内科伤食类非处方药品，主治健胃消食，用于脾胃虚弱，消化不良，脾胃虚弱所致的食积，症见不思饮食，暖腐酸臭，脘腹胀痛。
健胃消食片的配方如下，太子参228.6g，陈皮22.9g，山药171.4g，麦芽（炒）171.4g，山楂114.3g，蔗糖糊精适量，值得片剂为淡棕黄色的片或薄薄膜片，气略香，味微甜，酸。
制作方法：太子参半量与山药粉碎成细粉，其余陈皮三味药及剩余的太子参置于烧杯，加3倍量水，煎煮1小时，滤过，合并两次煎液，减压浓缩至浸膏，干燥。
将蔗糖粉糊精和生药粉以3：1：1的混合粉与浸膏混合制成软材，软材的软硬应适当，以“手握成团，轻压则散”为宜。
采用挤出制粒的方法制成颗粒，颗粒在60-80摄氏度干燥，干燥时应逐渐升温，以免因颗粒表面干燥过快结成硬壳而影响内部水分的蒸发。
颗粒整粒后加入1％硬脂酸镁混合后压片。
四、实验步骤1.称取太子参22.8g，陈皮2.3g，山药17.1g，山药17.1g，麦芽17.1g，山楂11.4g2.太子参山药用粉碎机粉成细粉。
3.将上述药材放入烧杯中，加入3倍量的水，煎煮半小时，重复两次，将上清液合并，减压浓缩至浸膏，将所得浸膏放入烘箱中80度干燥。
4.将蔗糖粉糊精和干燥后的粉末以3：1：1的比例混合制成颗粒软材，将软材放入烘箱中逐渐升温干燥。
5.干燥后的软材加入1％硬脂酸镁放入压片机中压片。
实验二溶菌酶结晶的制备一、实验目的1.掌握盐析法提取蛋白质的原理和过程；2.学会溶菌酶的结晶和精制方法。
二、实验材料与仪器新鲜鸡蛋，氯化钠，1 mol/L 氢氧化钠溶液，醋酸缓冲液，烧杯，玻璃棒，布氏漏斗，干燥箱。
生物制药包装的生产流程
生物制药包装的生产流程生物制药是一种利用生物技术生产药物的方法，而生物制药包装则是指将生物制药产品进行包装，以保护药品的稳定性和质量。
下面将介绍一种常见的生物制药包装的生产流程。
首先，在进行生物制药包装之前，需要准备包装材料。
常见的生物制药包装材料有玻璃瓶、注射器、软管、塑料瓶等。
这些材料需经过严格的筛选和检测，确保其无污染、耐压、耐腐蚀等特性符合药品包装的要求。
其次，准备好的包装材料需要进行清洗和消毒处理。
清洗是为了去除材料表面的杂质和污染物，一般采用高温清洗和热气灭菌的方式。
消毒是为了杀灭材料表面的微生物，常用的消毒方法有辐射灭菌、高温蒸汽灭菌等。
然后，进行包装材料的检测。
包装材料的检测主要包括外观检查、尺寸检测、耐压试验等。
外观检查是为了检查包装材料是否有明显的破损、裂纹等缺陷；尺寸检测是为了确保包装材料的尺寸符合要求；耐压试验是为了检测包装材料是否能承受一定的压力而不破裂。
接下来，进行包装工艺。
首先是装药，即将生物制药产品注入到包装材料中。
这一过程要求操作人员具备一定的技术和经验，以免药品泄漏或被污染。
然后是密封，即将包装材料进行封口，以防止药品的外泄和污染。
密封方式可以是焊接、贴合、旋盖等。
最后是标签贴附，即在包装材料上贴附相应的标签，标明药品的名称、规格、批号、生产日期等信息，以便追溯和识别。
最后，进行包装品质检验。
包装品质检验是为了确保包装的药品符合相关的质量标准和法规要求。
检验项目包括外观检查、标签完整性检查、包装材料的透明度和密封性检查等。
只有通过了包装品质检验的药品才能被放行，并进行储存、运输等后续工作。
综上所述，生物制药包装的生产流程包括准备包装材料、清洗和消毒、包装材料的检测、装药、密封、标签贴附和包装品质检验等环节。
这个流程的目的是确保生物制药产品在包装过程中不受污染，保证药品的稳定性和质量，以确保药品的安全性和有效性。
同时，这个流程也需要有高度的操作规范和严格的质量管理体系的支持，以提高包装效率和降低包装风险。
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生物制药技术实验中的材料准备方法
生物制药技术的发展对于医药行业的进步和人类健康的改善起到了至关重要的
作用。
在生物制药技术的研究和实验过程中，准备好适当的材料是实验成功的关键之一。
本文将介绍生物制药技术实验中常用的材料准备方法。
1. 培养基的制备
培养基是生物制药实验中最基本的材料之一。
通常情况下，培养基由营养物质、生长因子、氨基酸、维生素等多种组分构成。
制备培养基的方法如下：
(1) 按照配方准备需要的化学品和溶液。
如：葡萄糖、硫酸镁(7H2O)、磷酸根、硫酸铵等。
(2) 精确称量需要的化学品，并按照所需浓度溶解。
(3) 使用适当体积的溶液将配方中的化学品混合，确保其均匀混合。
(4) 通过过滤消毒等步骤，确保培养基无菌。
2. 细胞培养的材料准备
细胞培养是生物制药技术中常用的一种实验方法。
在进行细胞培养前，需要准
备以下材料：
(1) 细胞培养基：根据所需的细胞类型和培养目的，选择适当的培养基。
可以
使用已购买的商用培养基，也可以自行调配培养基。
(2) 细胞：根据实验需要选择合适的细胞系并进行扩培。
细胞可以通过购买或
者实验室中的细胞库中获得。
(3) 无菌实验室：细胞培养需要在无菌操作条件下进行。
因此，需要准备一个
无菌的实验室，并在实验操作时采取无菌操作。
3. 重组DNA的材料准备方法
重组DNA技术是生物制药中常用的一种技术手段，用于改造和生产重组蛋白等。
在进行重组DNA实验前，需要准备以下材料：
(1) DNA片段：根据实验需要，选择适当的DNA片段，可以通过基因克隆等方法获得。
(2) 扩增酶：选择适当的扩增酶，如聚合酶链反应(PCR)所需的DNA聚合酶。
(3) 反应缓冲液：根据不同的扩增酶选择适当的反应缓冲液，如PCR反应常用的Taq DNA聚合酶缓冲液。
(4) 热循环仪：PCR反应需要使用热循环仪进行温度梯度变化，以便进行DNA 的扩增。
4. 蛋白质纯化的材料准备方法
蛋白质纯化是生物制药技术中非常重要的步骤，用于从复杂的混合物中纯化目标蛋白。
在进行蛋白质纯化实验前，需要准备以下材料：
(1) 层析树脂：根据目标蛋白的特性选择适当的层析树脂，如亲和层析、离子交换层析等。
(2) 层析缓冲液：根据层析树脂的要求和实验操作的需要，准备适当的层析缓冲液。
(3) 蛋白样品：准备含有目标蛋白的样品，可通过表达重组蛋白或从天然样品中提取蛋白。
5. 非细胞试验的材料准备方法
在生物制药实验中，还有一些非细胞试验需要进行。
这些实验通常需要准备以下材料：
(1) 酶：根据实验需要选择适当的酶，如DNA酶、RNA酶等。
(2) 试剂盒：根据实验需要选择相关的试剂盒，如ELISA试剂盒、蛋白质测定
试剂盒等。
(3) 仪器设备：根据实验操作的需要选择适当的实验仪器设备，如分光光度计、酶标仪器等。
综上所述，生物制药技术实验中的材料准备方法是实验成功的重要环节之一。
通过正确地准备和选择材料，我们可以确保实验的可靠性和结果的准确性。
因此，在进行生物制药技术实验之前，仔细研究和掌握所需材料的准备方法是至关重要的。
只有确保了材料的准备正确性和实验操作的无菌性，才能获得可靠的实验结果，进一步推动生物制药技术的发展。