Omentin-1对巨噬细胞ABCA1介导胆固醇流出及抗动脉粥样硬化的作用及机制
ABCA1的研究进展
ABCA1的研究进展作者：陈亭周建中来源：《医学信息》2015年第16期摘要：动脉粥样硬化（artherosclerosis，As）相关疾病严重危害人类身体健康，胆固醇逆转运（Reverse Cholesterol Transport，RCT）是机体过多胆固醇排出体外的重要途径，对维持细胞内胆固醇稳定、延缓As发生发展有着重要意义。
ATP结合盒转运子A1（ATP-binding cassette transporter A1，ABCA1）以 ATP为能源，促进细胞内游离胆固醇和磷脂外流，在RCT 过程中发挥着关键的作用。
本文主要对ABCA1基因、结构、突变、功能、表达调控等方面进行综述，希望能为AS相关疾病提供新的治疗靶点和途径。
关键词：ABCA1；胆固醇逆转运；As，肝X受体α内膜下过量沉积的脂质被巨噬细胞所吞噬，后者在动脉壁转变形成泡沫细胞，是As病变的起始机制和重要病理基础。
胆固醇逆转运（RCT）是指细胞内过量蓄积的胆固醇在特殊转运体的介导下，从细胞中流出，随着血液循环转运至肝脏，通过肝脏分解后，经肝胆管流入肠道，继而由粪便排泄至体外。
ATP结合盒转运子A1（ABCA1）是一种整合膜蛋白，它以 ATP 为能源，促进细胞内游离胆固醇和磷脂流出至细胞外[1]。
ABCA1基因突变的Tangier病（Tangier disease，TD）患者和ABCA1基因敲除的小鼠表现出细胞内胆固醇和磷脂外流障碍。
因此，ABCA1是调节细胞内胆固醇外流关键的限速蛋白，在RCT中发挥着十分关键的作用。
1 ABCA1基因的发现ABCA1基因的发现源于对TD的研究，TD是一种常染色体显性遗传病，患者表现为血浆HDL水平的显著降低、细胞内游离胆固醇外流障碍以及早发严重的冠心病[2]。
三个独立的研究小组于1999年在Nature Genetic杂志同一期分别撰文，证实ABCA1基因突变正是Tangier 病的病因所在。
2 ABCA1的结构及分布人类ABCA1基因位于9q31，编码着一个由2261个氨基酸组成的膜整合蛋白质。
氧化型低密度脂蛋白抑制小鼠巨噬细胞系1-磷酸鞘氨醇受体1的表达
氧化型低密度脂蛋白抑制小鼠巨噬细胞系1-磷酸鞘氨醇受体1的表达王建茹;刘萍【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2018(38)7【摘要】新观点认为,巨噬细胞的胞葬作用(efferocytosis)功能障碍所导致的斑块内凋亡细胞(apoptotic cells,ACs)聚集及继发性坏死是不稳定斑块形成和进展的重要因素[1-2]。
氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)病理过程中重要的危险因子,能够抑制巨噬细胞的胞葬作用[1-3]。
1-磷酸鞘氨醇受体1(sphingosine-1-phosphate receptor 1,S1PR1)参与了巨噬细胞的胞葬作用,ox-LDL能否抑制S1PR1的表达未见报道。
本次实验观察不同浓度的ox-LDL对巨噬细胞S1PR1表达的影响,探讨ox-LDL抑制巨噬细胞胞葬作用可能的分子机制。
1 材料与方法1.1 材料:小鼠巨噬细胞系RAW264.7(中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心);DMEM培养液和胎牛血清(Hyclone公司);ox-LDL(上海翊圣生物科技有限公司);PCR反转录和PCR反应试剂盒(TaKaRa公司);引物合成(上海生工生物工程有限公司);Anti-S1PR1抗体(Abcam公司);GAPDH和二抗(CST公司)。
【总页数】2页(P1007-1008)【作者】王建茹;刘萍【作者单位】上海中医药大学附属龙华医院心内科, 上海200032;上海中医药大学附属龙华医院心内科, 上海200032【正文语种】中文【中图分类】R541.1【相关文献】1.氧化型低密度脂蛋白调控MerTK受体表达抑制巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬2.槟榔碱抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞炎症因子表达及其机制3.激活视黄醇类X受体对氧化型低密度脂蛋白诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7凋亡的影响4.血红素氧化酶-1抑制氧化低密度脂蛋白诱导的THP-1源性巨噬细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1的表达5.葡萄糖和厄贝沙坦对单核巨噬细胞系凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体表达的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
ABCA1和ABCG1在胆固醇逆转运中作用的研究进展
ABCA1和ABCG1在胆固醇逆转运中作用的研究进展郭赟婧【摘要】胆固醇逆转运是机体排除过多胆固醇的唯一途径,对维持生物体胆固醇代谢稳态有着重大意义.ATP结合盒转运体A1(ABCA1)和ATP结合盒转运体G1(ABCG1)是ATP结合盒转运体家族中的一员,它们通过不同的机制在胆固醇逆转运中起着重要作用.关于ABCA1和ABCG1研究很多,而对于两者在胆固醇逆转运中的联合作用的文献较少.本文就国外ABCA1和ABCG1在胆固醇逆转运中的研究进展进行综述.【期刊名称】《国外医学（医学地理分册）》【年(卷),期】2012(033)003【总页数】5页(P213-217)【关键词】ATP结合盒转运体A1;ATP结合盒转运体G1;胆固醇逆转运;巨噬细胞【作者】郭赟婧【作者单位】长沙卫生职业学院,长沙,410100【正文语种】中文【中图分类】R363胆固醇逆转运(reverse cholesterol transport，RCT)的概念最早由Glomset提出，他将其描述为肝外胆固醇运回肝脏，通过胆汁消化，最终形成粪便排出体外的过程。
随后人们进行大量深入的研究，将经典胆固醇逆转运过程总结为：外周细胞胆固醇转运到载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I，apoA-I)和高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)上，HDL在卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin:cholesterol acyltransferase,LCAT)催化下酯化胆固醇，胆固醇转移至肝胆管，经肝胆管流入肠道，最后以粪便形式排除体外。
RCT是机体排除过多胆固醇的唯一途径，对维持生物体胆固醇代谢稳态有着重大意义，也是目前认为机体对抗动脉粥样硬化发生的主要机制之一。
ATP结合盒转运体A1(ATP binding cassette transporter A1，ABCA1)和ATP结合盒转运体G1 (ATP binding cassette transporter G1，ABCG1)是一类膜蛋白，是ATP结合盒转运体(ATP binding cassette transporter, ABC)超家族中的一员，通过消耗ATP介导蛋白质、胆固醇、磷脂等多种物质的跨膜转运。
ABCA介导载脂蛋白A调节巨噬细胞炎症反应及其机制
细胞因子的作用
巨噬细胞释放的细胞因子在炎症 反应中起重要作用，它们可以招 募和激活其他免疫细胞，形成正 反馈机制，放大炎症反应。
氧化应激反应
巨噬细胞在炎症反应中会产生大 量活性氧（ROS）和活性氮（ RNS），这些物质可以直接杀灭 病原体，但也会对周围组织造成 氧化应激损伤。
巨噬细胞炎症反应的调节因素
ABCA介导载脂蛋白A对巨噬细胞基因表达的调控作用
调控炎症相关基因 表达
影响胆固醇代谢相 关基因表达
ABCA介导的ApoA能够调控巨 噬细胞内炎症相关基因的表达 ，如TNF-α、IL-1β、IL-6等， 从而抑制炎症反应的发生和发 展。
ABCA还能够影响巨噬细胞内 胆固醇代谢相关基因的表达， 如ATP结合盒转运子A1（ ABCA1）、三磷酸腺苷结合盒 转运子G1（ABCG1）等，从 而调控细胞内胆固醇的含量和 分布。
ABCA介导的ApoA能够调控核因子-κB（NF-κB）信号通路 ，抑制NF-κB的激活和核转位，从而下调炎症因子的表达。
影响MAPK信号通路
ABCA还能够影响丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路 ，通过调控MAPK的磷酸化水平，进而影响炎症反应的进程 。
调控JAK-STAT信号通路
此外，ABCA介导的ApoA还能够调控Janus激酶-信号转导 子和转录激活子（JAK-STAT）信号通路，影响炎症因子的 转录和表达。
神经炎症性疾病
ABCA介导的载脂蛋白A在神经炎 症性疾病中也具有潜在的治疗作 用，如多发性硬化症、阿尔茨海 默病等。
存在的问题与挑战及未来发展方向
深入研究机制
尽管ABCA介导的载脂蛋白A在调 节巨噬细胞炎症反应方面表现出一 定的潜力，但其具体作用机制仍需 深入研究。
阿米洛利抑制载脂蛋白A1诱导小鼠巨噬细胞ABCA1的降解
阿米洛利抑制载脂蛋白A1诱导小鼠巨噬细胞ABCA1的降解莫显刚;王兰;洪伟;张莉;代陆军;蒋金【期刊名称】《中国动脉硬化杂志》【年(卷),期】2016(24)3【摘要】目的探讨钠氢交换体1抑制剂阿米洛利对载脂蛋白A1(Apo A1)诱导小鼠三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)降解的影响。
方法给小鼠静脉注射ApoA1后不同时间点收集腹腔巨噬细胞,定量实时聚合酶链反应及Western blot检测巨噬细胞ABCA1 mRNA及蛋白水平变化。
进而,Apo A1干预8 h小鼠给予腹腔注射阿米洛利或钙蛋白酶抑制剂ALLN,实验分为4组:对照组、阿米洛利组、ALLN 组及阿米洛利+ALLN组,Western blot检测巨噬细胞ABCA1蛋白水平,荧光法检测钙蛋白酶活性。
结果 Apo A1干预小鼠后ABCA1 mRNA无明显改变,而ABCA1蛋白水平迅速升高,8 h达高峰后逐渐降低。
阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组ABCA1蛋白水平均比对照组高;在0、4、8 h时间点,阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组间ABCA1蛋白水平差异无统计学意义;而在12、16 h时间点,阿米洛利+ALLN组ABCA1蛋白水平较阿米洛利组、ALLN组升高。
与对照组比较,阿米洛利组、ALLN组及阿米洛利+ALLN组钙蛋白酶活性均降低;阿米洛利组、ALLN组、阿米洛利+ALLN组3组组间比较,钙蛋白酶活性各时间点均无明显差异。
结论阿米洛利在活体内抑制Apo A1诱导ABCA1蛋白降解及钙蛋白酶活性,提示钠氢交换体1可能至少部分通过改变钙蛋白酶活性参与ABCA1的降解。
【总页数】5页(P234-238)【关键词】阿米洛利;钠氢交换体1;载脂蛋白A1;三磷酸腺苷结合盒转运体A1;钙蛋白酶;ALLN【作者】莫显刚;王兰;洪伟;张莉;代陆军;蒋金【作者单位】贵州医科大学附属医院老年病科;贵州医科大学分子生物学重点实验室;贵州医科大学附属医院病理科【正文语种】中文【中图分类】Q46【相关文献】1.载脂蛋白 A-I 模拟肽 D-4F 对巨噬细胞源性泡沫细胞清道夫受体 A1的抑制作用[J], 赵莉;王义围;秦树存;姚树桐;陈军;苗成;李严严;田华;周健;翟雷;桑慧2.IL-17A通过p38MAPK通路抑制巨噬细胞ABCA1蛋白的降解 [J], 马望歌; 周栋; 王丽君; 刘艳; 陈小莉; 郭宁; 周娟3.槲皮素抑制纤维蛋白纤维蛋白原降解产物诱导小鼠腹腔巨噬细胞释放白细胞介素-1 [J], 周斌;张俊平;刘宏;钱定华4.中药虎杖和山楂提取物对载脂蛋白E基因敲除小鼠巨噬细胞PPARγ、ABCA1及CD36 mRNA表达的影响 [J], 刘美霞;张文高;刘龙涛5.载脂蛋白A1诱导骨髓源性巨噬细胞向抗炎性M2型极化的作用 [J], 翟振丽;马维红;李全忠;申炜;阳跃忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
巨噬细胞炎症蛋白-1α与动脉粥样硬化斑块
巨噬细胞炎症蛋白-1α与动脉粥样硬化斑块
谭安安;夏豪
【期刊名称】《心血管病学进展》
【年(卷),期】2007(28)2
【摘要】巨噬细胞炎症蛋白-1α是一种CC亚族的趋化因子蛋白,它可以通过不同途径发挥多种的生物学效应.巨噬细胞炎症蛋白-1α在血管细胞的分布及其生理作用,对动脉粥样硬化的发生发展起到一定的作用.
【总页数】3页(P237-239)
【作者】谭安安;夏豪
【作者单位】武汉大学人民医院心血管内科,湖北,武汉,430060;武汉大学人民医院心血管内科,湖北,武汉,430060
【正文语种】中文
【中图分类】R5
【相关文献】
1.激活蛋白-1、巨噬细胞游走抑制因子与人颈动脉粥样硬化斑块的关系研究 [J], 吴世陶;刘恒方;王建平;刘田田;肖波;张敏;王兵;苗旺;郭亚培;高灵利
2.单核细胞趋化蛋白-1和核因子-κB与巨噬细胞浸润及动脉粥样硬化斑块形成的关系 [J], 李静;孙雷;庄永杰;唐建武;白璐璐;孙喜琢
3.2型糖尿病合并急性脑梗死患者糖化血红蛋白与血清相关炎症因子及颈动脉粥样硬化斑块的相关性研究 [J], 寿广丽;朱方方;许媛媛;李有中;赵宏
4.载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变进展过程中循环单核细胞亚群和斑块
内增殖巨噬细胞的动态变化 [J], 李宵;周欣;姬文婕;李玉秀;赵季红;李玉明
5.巨噬细胞炎症蛋白1α与冠状动脉粥样硬化斑块病变相关性 [J], 黄斌;曾高峰;雷长城
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《2024年载脂蛋白A1模拟肽对巨噬细胞泡沫化的抑制作用及机制》范文
《载脂蛋白A1模拟肽对巨噬细胞泡沫化的抑制作用及机制》篇一一、引言心血管疾病已成为全球性的公共卫生问题，而巨噬细胞泡沫化在动脉粥样硬化的形成与发展中扮演着重要角色。
载脂蛋白A1（ApoA1）是血浆高密度脂蛋白（HDL）的主要成分，其抗动脉粥样硬化的特性备受关注。
近年来，科学家们开始探索通过设计模拟ApoA1结构的肽来抑制巨噬细胞泡沫化。
本文将详细介绍载脂蛋白A1模拟肽对巨噬细胞泡沫化的抑制作用及其潜在机制。
二、巨噬细胞泡沫化与动脉粥样硬化巨噬细胞泡沫化是指巨噬细胞摄取大量脂质并积聚在细胞内，形成泡沫状结构的过程。
这一过程是动脉粥样硬化形成的关键步骤之一。
在动脉粥样硬化的过程中，低密度脂蛋白（LDL）通过内皮间隙进入血管内膜，被巨噬细胞摄取并转化为泡沫状巨噬细胞，从而进一步促进动脉粥样硬化的进展。
三、载脂蛋白A1模拟肽的研发与作用为了抑制巨噬细胞泡沫化并减缓动脉粥样硬化的进程，科学家们设计并合成了载脂蛋白A1模拟肽。
这些模拟肽在结构上与ApoA1相似，但具有更高的稳定性和生物利用度。
实验结果表明，这些模拟肽能够有效地抑制巨噬细胞对LDL的摄取，从而减少泡沫状巨噬细胞的形成。
四、载脂蛋白A1模拟肽对巨噬细胞泡沫化的抑制机制（一）促进胆固醇代谢载脂蛋白A1模拟肽通过激活胆固醇代谢的关键酶，如胆固醇7α-羟化酶，加速胆固醇的分解和排泄，从而降低细胞内胆固醇水平，减少巨噬细胞的脂质积聚。
（二）调节脂质代谢相关基因表达模拟肽能够调节巨噬细胞内与脂质代谢相关的基因表达，如ABCA1、SR-BI等，促进胆固醇流出和LDL受体表达，进一步降低细胞内胆固醇水平。
（三）抑制炎症反应炎症反应在巨噬细胞泡沫化和动脉粥样硬化的过程中起着重要作用。
载脂蛋白A1模拟肽能够抑制炎症因子的释放和表达，减轻炎症反应，从而抑制巨噬细胞泡沫化。
五、结论载脂蛋白A1模拟肽通过促进胆固醇代谢、调节脂质代谢相关基因表达以及抑制炎症反应等多种机制，有效抑制巨噬细胞泡沫化。
脂联素对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1及胆固醇含量的影响及机制
脂联素对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1及胆固醇含量的影响及机制郭晓红;边云飞;梁斌;白瑞;肖传实【摘要】Objective Effects of adiponectin on RAW264.7 macrophage derived foam cells and cholesterol content to ABCA1) objective and its possible mechanisms.Methods RAW264.7 cells cultured in vitro, joined the 20mg/L oxidized low density lipoprotein(ox-LDL) were incubated for 48 h, the induced into foam cells, with different concentrations(0,1,5,10 μg/mL)of adiponectin 24h expression of RT-PCR ABCA1 mRNA, determination, HPLC determination of intracellular cholesterol content. To observe the effects of adiponectin on the expression of ABCA1 in foam cells.ResultsThe expression of adiponectin was significantly increased in RAW264.7 macrophage derived foam cells in ABCA1 mRNA(P<0.05), and increased cellular cholesterol content, in a dose-dependentmanner(P<0.05).Conclusion Adiponectin can increase the macrophage derived foam cell ABCA1 transcription level, promote cholesterol efflux, delay the occurrence and development of AS.%目的：探讨脂联素对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1及胆固醇含量的影响及其可能的机制。
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Omentin-1对巨噬细胞ABCA1介导胆固醇流出及抗动脉粥样硬化的作用及机制动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)在全球的罹患率以及致死率都名居前列,严重危害人类的健康。
在动脉粥样硬化早期,其标志性病理特征是血管内皮下大量的巨噬细胞内脂质蓄积以及泡沫细胞的形成。
泡沫细胞最终坏死崩解,释放出细胞内的胆固醇,是构成动脉粥样硬化斑块的最主要成分,促进动脉粥样硬化的进一步进展。
因此,促进巨噬细胞内胆固醇流出及体内胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transport,RCT),从而抑制泡沫细胞形成和血管壁内脂质沉积,对动脉粥样硬化性的防治具有重要意义。
三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)是一个膜整合蛋白,其以ATP作为能源将胞内游离的胆固醇及磷脂转运至胞膜的外侧面,最终与贴附在细胞表面的载脂蛋白AI(apoprotein AI,apoAI)结合,从而形成新生的高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)。
这是HDL生成所必需的过程,也是促进巨噬细胞内过多的胆固醇外流以及rct的关键步骤。
abca1在巨噬细胞中的表达以及其活性往往受到转录及转录后水平的精细调控。
网膜素(omentin)是一类新发现的脂肪细胞因子,主要由网膜脂肪组织表达和释放。
值得注意的是,研究发现这种基因可调节葡萄糖摄取。
肥胖或肥胖相关疾病患者,包括2型糖尿病、内皮功能障碍、颈动脉粥样硬化和冠状动脉疾病,发现其血浆omentin-1水平降低了。
研究证明,omentin-1与高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)呈正相关,与葡萄糖和甘油三酸酯水平呈负相关。
代谢综合征(mets)初期患者循环omentin-1水平异常者其罹患糖尿病和心血管疾病的风险更高。
因此,omentin-1与代谢综合征密切相关,在代谢综合征患者的动脉粥样硬化发生发展中产生重要作用。
omentin-1在rct、脂质代谢和as中差异表达的发现为我们提供了新的途径和视角。
因此,omentin-1有望成为心血管保护因子和干预靶点之一。
然而,omentin-1在abca1表达及导致提高hdl功能和胆固醇逆向转运中的作用研究尚少。
本研究中,我们研究omentin-1对巨噬细胞abca1表达的作用和潜在的分子机制。
为了探讨omentin-1抗动脉粥样硬化的相关作用机制,我们首先在第一部分实验中观察omentin-1对thp-1巨噬细胞abca1表达、胞内胆固醇流出和脂质含量的影响。
在第二部分实验中我们探索了omentin-1介导thp-1巨噬细胞abca1表达及胆固醇流出的作用机制。
接着,我们在第三部分实验中,观察了omentin-1对apoe-/-小鼠的血脂水平、胆固醇逆向转运和动脉粥样硬化病变的影响。
最后,我们在第四部分实验中,观察了具有较强调脂作用的丹参酮iia(tanshinoneiia,tan)对巨噬细胞的omentin-1和abca1的表达、脂质代谢,以及对apoe-/-小鼠的动脉粥样硬化病变的影响,研究tan通过上调omentin-1发挥抗动脉粥样硬化的作用机制。
本研究揭示了omentin-1抗动脉粥样硬化的作用以及机制,也许为动脉粥样硬化性疾病提供新的防治靶点。
第1章omentin-1对thp-1巨噬细胞abca1表达及胆固醇流出的影响目的:观察omentin-1对thp-1巨噬细胞abca1mrna及蛋白表达水平、胞内胆固醇流出和脂质含量的影响。
方法:用omentin-1和/或lxrαsirna处理thp-1源性巨噬细胞后,用rt-pcr方法检测各个实验组细胞的abca1mrna的表达,westernblot检测abca1蛋白水平,hplc检测胞内总胆固醇(tc)游离胆固醇(fc)及胆固醇酯(ce)含量,液体闪烁计数仪检测胞内胆固醇流出,油红o染色观察胞内脂滴情况。
结果:omentin-1呈时间和浓度依赖性上调巨噬细胞abca1的表达,促进胞内胆固醇流出,降低胞内tc、fc和ce含量,抑制胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。
而abca1sirna与omentin-1共处理细胞后,明显抑制omentin-1促胆固醇流出的作用,胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成明显加剧。
结论:(1)omentin-1增加thp-1巨噬细胞abca1mrna和蛋白表达。
(2)omentin-1促进abca1介导的thp-1巨噬细胞脂质流出,抑制巨噬细胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。
第2章omentin-1介导thp-1巨噬细胞abca1表达及胆固醇流出的作用机制目的:探索omentin-1介导thp-1巨噬细胞abca1表达及胆固醇流出的作用机制。
方法:分别用omentin-1或和lxrαsirna、pi3ksirna、aktsirna、pi3k抑制剂ly2940029及akt抑制剂himo处理thp-1源性巨噬细胞24h后,westernblot检测abca1lxrα蛋白水平,hplc检测胞内总胆固醇(tc)游离胆固醇(fc)及胆固醇酯(ce)含量,液体闪烁计数仪检测胞内胆固醇流出,油红o染色观察胞内脂滴情况。
结果:omentin-1上调巨噬细胞abca1的表达,促进胞内胆固醇流出,降低胞内tc、fc和ce含量,抑制胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。
而分别加用lxrαsirna、pi3ksirna、aktsirna、pi3k抑制剂ly2940029及akt抑制剂himo与omentin-1共处理细胞后,明显抑制abca1的表达及其促胆固醇流出的作用,胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成明显加剧。
结论:(1)omentin-1通过pi3k/akt途径增加人thp-1巨噬细胞lxrα和abca1表达,促进脂质流出,抑制巨噬细胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。
第3章omentin-1对apoe-/-小鼠动脉粥样硬化的影响目的:探讨omentin-1对apoe-/-小鼠体内rct、血脂水平、主动脉壁的脂质沉积,以及对粥样硬化病变的影响和机制。
方法:采用高脂饮食(含15%猪油+0.25%胆固醇)喂饲的45只apoe-/-小鼠,并随机地分为三组,分别为:高脂对照组、omentin-1组、omentin-1+ly2940029组。
omentin-1组腺病毒转染omentin-1以1×108pfu/kg(pfu:空斑形成单位),ome+ly组小鼠再加以20mg/kgpi3k抑制剂ly2940029,溶入0.2ml的生理盐水中进行尾静脉注射,每2周注射一次,都用基础饮食加上高脂高胆固醇(15%猪油+0.25%胆固醇)喂养,直至实验结束,共处理8周。
采用液体闪烁计数以测定mpm来源的rct效率;采用酶氧化法检测甘油三酯(tg)、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)及低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)等血脂水平;采用苏丹Ⅳ染色以显示主动脉内膜的as病变情况;采用he染色显示主动脉窦的as病变情况;采用油红o染色以观察主动脉窦处脂质沉积的情况;采用masson三色染色以显示斑块中的胶原纤维;采用westernblot检测小鼠的主动脉abca1等蛋白的表达。
结果:输注了转染omentin-1的质粒明显增强了apoe-/-小鼠粪便中3h固醇的放射活性,并增高血浆的hdl-c水平,降低了ldl-c水平,使主动脉内膜的as病变面积减小,减少主动脉窦处的脂质沉积,增强as斑块的稳定性,增加了主动脉abca1的蛋白表达。
注射ly2940029则明显减少粪便中的固醇水平,增加主动脉壁内脂质沉积,促进动脉粥样硬化病变的发展,下调abca1蛋白表达。
结论:(1)omentin-1促进apoe-/-鼠体内rct和升高血浆hdl-c水平。
(2)omentin-1抑制apoe-/-鼠主动脉脂质沉积,延缓粥样硬化病变的进展。
(3)omentin-1增强apoe-/-鼠主动脉壁组织的abca1表达,并且其可能是通过pi3k/akt信号通路而起调节作用的。
第4章丹参酮iia对巨噬细胞omentin-1/abca1水平及apoe-/-小鼠主动脉病变的影响及其机制目的:观察丹参酮iia(tanshinoneiia,tan)对thp-1巨噬细胞中omentin-1和abca1表达,以及对apoe-/-小鼠体内血脂水平、rct、主动脉壁as病变的影响,并探讨tan抗as的作用机制。
方法:用tan处理thp-1巨噬细胞,并结合omentin-1sirna转染thp-1巨噬细胞后,采用实时荧光定量pcr以检测omentin-1和abca1水平,采用westernblot检测omentin-1和abca1蛋白表达;采用液体闪烁计数以测定荷脂THP-1巨噬细胞内的胆固醇流出情况,采用HPLC检测细胞内脂质的含量。
高脂饮食(含15%猪油+0.25%胆固醇)喂饲的45只apoE-/-小鼠被随机分为三组,分别为:高脂对照组、丹参酮IIA组和丹参酮IIA+Omentin-1 siRNA组。
采用液体闪烁计数以测定MPM来源的RCT效率,采用酶氧化法以检测TG、TC、HDL-c 和LDL-c等的血脂水平,采用苏丹Ⅳ染色以显示主动脉内膜的As病变情况,采用HE染色以显示主动脉窦As病变情况,采用油红O染色以显示主动脉窦处脂质的沉积情况,采用Masson三色染色以显示As斑块中的胶原纤维情况。
结果:观察到Tan可以呈剂量和时间依赖性地增强了THP-1巨噬细胞中Omentin-1和ABCA1蛋白的表达,增强细胞内胆固醇流出,并减少细胞内的FC、CE 和TC含量。
Tan可增强apoE-/-小鼠粪便中3H胆固醇的放射活性,并增高血浆HDL-c水平,降低LDL-c水平,增强主动脉Omentin-1和ABCA1表达,减少了主动脉内膜的As变面积,减轻了主动脉窦处的脂质沉积,增强了斑块的稳定性。
抑制Omentin-1表达后,则明显削弱Tan的上述作用。
结论:(1)Tan抗As的作用与增强巨噬细胞内胆固醇外流和体内的RCT功能密切相关。
(2)Tan抗As的作用机制与升高Omentin-1水平并进而增加ABCA1表达有关,并且可能是通过PI3K/Akt信号通路而起调节作用的。