蓝舌病病毒7型毒株的分离与分子鉴定
动物传染病学复习题
一、名词解释传染(infection)：病原微生物侵入动物机体，并在一定部位定居，生长繁殖，从而引起机体一系列病理反应的过程传染病（Infectious disease）：由病原微生物引起，具有一定的潜伏期和临诊症状，并具有传染性的疾病持续性感染（persistent infection）：指动物长期持续的感染状态慢病毒感染（chronic infection）：又称长程感染，是指潜伏期长，发病呈进行性且最后常以死亡为转归的病毒感染。
疫源地：有传染源及其排出的病原体存在的地区。
传染源(Source of infection)：只有某种病原体在其中寄居、生长、繁殖，并能排除体外的活的动物机体。
传染期：水平传播(horizontal transmission)：传染病在群体之间或个体之间以水平形式横向平行传播。
垂直传播(vertical transmission)：从亲代到其子代之间的纵向传播方式。
检疫：是指利用各种诊断和检测方法对动物及其相关产品和物品进行疫病、病原体或抗体检查。
预防性消毒：结合平时的饲养管理对畜舍、场地、用具和饮水等进行定期消毒，已达到预防传染病的目的。
临时消毒：在发生传染病时，为了及时消灭刚从传染源排出的病原体而采取的消毒措施。
终末消毒：在患病动物解除隔离、痊愈或死亡后，或者在疫区解除封锁之前，为了消灭疫区内可能残留的病原体而进行的全面彻底的大规模消毒。
紧急接种：在发生传染病时，为了迅速控制和扑灭疫情而对疫区和受威胁区尚未发病的动物进行的应急性计划外的免疫接种。
预防接种：在经常发生某些传染病的地区，或有某些传染病潜在的地区，或经常受到邻近地区某些传染病威胁的地区，为了防患于未然，在平时有计划地给健康动物进行的免疫接种。
免疫程序(vaccination program)：指一定地区，养殖场或特定动物群体内传染病的流行状况、动物健康状况和不同疫苗特性，为特定动物群体制定的接种计划。
兽医微生物学-双股RNA病毒
① ARV具有典型的呼肠孤病毒形态 ②无血凝性 ③对热稳定：卵黄中的病毒能耐56℃ 24h或 60℃8~10h。 ④能在鸡胚的卵黄囊、绒尿膜增殖， 也能在原 代鸡肝、肺、肾和睾丸等细胞培养物上生长。
3、致病性：主要发生于肉用仔鸡，以关 节炎和腱滑膜炎为特征，偶
主要引起 可致腱断裂。
9、防控 ①肠道局部免疫比全身免疫更有保护作用。
初乳抗体至关重要
②灭活疫苗接种母畜可使新生畜从初乳 及乳液获得有效的被动免疫保护
③患病的牛犊应停止吸奶30h，改喂含抗 生素及糖的电解质
（二）禽正呼肠孤病毒（Avian orthoreoviruses, ARV）
1、分类地位：呼肠孤病毒科/正呼肠孤病毒属
第四章 双股RNA病毒 双股RNA病毒是指： ✓核酸为线状双股RNA、分节段的病毒。 ✓多无囊膜。 主要包括病毒：
第一节 呼肠孤病毒科 第二节 双RNA病毒科
双股RNA病毒部分特性
核酸 节段 RNA总 直径 衣壳 对称
分子量 （mm)
型
呼肠弧 双股 10~12 （10~12）80
病毒科 RNA
×104
4、具有血凝性：
可凝集人O型、豚鼠、绵羊、马等红细胞。
5、抵抗力较强：
耐乙醚和弱酸，在-20℃可以长期保存， 56℃ 1小时可被灭活。
6、可在猴肾原代细胞中传代和繁殖。
或一般选用MA-104细胞（恒河猴肾细 胞系）分离培养
7、致病性：
普通轮状病毒主要侵犯幼畜，引起病毒性胃肠炎 ✓粪-口是传播途径，经粪污染的饲料、水 或奶也可传染
禽病毒性关节炎综合症 或暂时性消化系统紊乱。
（三）蓝舌病毒（Blue tongue viruses， BTV）
兽医传染病学网上作业题
兽医传染病学网上作业题作业题（一）第一章、第二章•填空题1.依据病原体的种类和先后顺序可将感染分为（）（）（）（）2.国际兽医局规定的A类传染病有（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）3.家畜传染病发展的阶段包括（）（）（）（）4.动物传染病在流行过程中的主要表现形式包括（）（）（）（）5.采取隔离封锁的基本原则（）（）（）（）•名词解释1.感染1.生物安全1.传染病1.检疫1.隔离1.自然疫源性疾病1.慢病毒感染1.紧急接种1.假定健康动物1.地方流行性•简答题1.简述造成动物传染病流行的基本环节？1.简述动物传染病不同的传播方式？1.实施动物检疫的主要内容？1.简述传染病在流行过程中表现出季节性的原因？1.什么是病原携带者？并简述其类别？•论述题1.试述造成疫苗免疫失败的原因？2、当发生国际兽医局规定的A类传染病时应采取哪些措施？作业题（二）第三章•填空题1.口蹄疫的七个血清主型有（）（）（）（）（）（）（）。
2.大肠杆菌可引起猪的传染病有（）（）（）（）。
3.狂犬病的临床症状分为三期，即（）（）和（）。
4.“疯牛病”又称（）是由（）引起的牛的一种传染性脑病，该病原还可以引起那些疾病（）（）（）（）。
5.写出下列疾病的病原，结核病的病原是（）、AI的病原是（）、猪水肿病的病原是（）。
•名词解释1、“虎斑心”2、“珍珠病”3、传染性变态反应4、炭疽5、Q热6、钩端螺旋体病7、附红细胞体病8、莱姆病三、简答题1、简述牛结核病的变态反应诊断方法？2、简述布鲁氏菌病的防治措施？3、OIE判定高致病性禽流感的标准是什么？4、狂犬病的主要传播突进是什么？如何预防？四、论述题试述口蹄疫的流行病学？作业题（三）第四章猪的传染病一、填空题1、在猪的病毒性传染病中，可引起繁殖障碍性有：（）、（）（）（）（）。
2、由病毒引起的猪的消化道重要传染病主要有：（）（）（）（）。
3、猪瘟是由（）病毒引起的，该病毒属于（）科（）属，其野毒株独立差异很大，有强、（）（）（）以及（）之分。
TCID50和PFU的换算公式
1、PFU:plaque forming unit，空斑形成单位：感染性滴度的单位一般表示为PFU/ml。
由于测定pfu往往重复性较差，因此近些年许多研究又开始采用TCID50方法来计算病毒的感染单位。
因此建议也可使用TCID50法。
2、MOI :multiplicity of infection，感染复数：传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的研究。
其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值，也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。
噬菌体的数量单位为pfu。
一般认为MOI是一个比值，没有单位，其实其隐含的单位是pfu number/cell。
后来MOI被普遍用于病毒感染细胞的研究中，含义是感染时病毒与细胞数量的比值。
然而，由于病毒的数量单位有不同的表示方式，从而使MOI产生了不同的含义。
能产生细胞裂解效应的病毒例如单纯疱疹病毒等习惯上仍用pfu表示病毒数量，因此其MOI的含义与传统的概念相同。
传统意义上的MOI的测定，其原理是基于病毒感染细胞是一种随机事件，遵循Poisson分布规律，可计算出感染一定比例的培养细胞所需的感染复数（MOI）。
其公式为：P = 1- P(0) ,P(0) = e-m 或m = -InP（0）。
其中：P 为被感染细胞的百分率P(0)为未被感染细胞的百分率m为MOI值例如，如果要感染培养皿中99%的培养细胞，则：P(0) = 1% = 0.01m = -In(0.01)= 4.6 pfu/cell。
(一)原理病毒感染细胞后，由于固体介质的限制，释放的病毒只能由最初感染的细胞向周边扩展。
经过几个增殖周期，便形成一个局限性病变细胞区，此即病毒蚀斑。
从理论上讲，一个蚀斑是由最初感染细胞的一个病毒颗粒形成的，因而该项技术常用于病毒颗粒计数和分离病毒克隆。
但在实际操作中，常出现几个病毒颗粒同时感染一个细胞的情况，影响滴定的准确性和克隆的纯一性，为此，接种的病毒液要充分分散和稀释。
对于细胞结合性病毒，如MDV，需用单层细胞；对细胞释放性病毒，即可用固相介质悬浮的细胞，也可用单层细胞，但后者需用琼脂等固体介质盖在细胞上，以防释放的病毒在液体介质中流动。
兽医传染病学-答案
东北农业大学网络教育学院第一章、第二章练习题参考答案一、填空题1、依据病原体的种类和先后顺序可将感染分为单纯感染混合感染原发感染继发感染2、国际兽医局规定的A类传染病有口蹄疫水疱性口炎猪水疱病猪瘟非洲猪瘟非洲马瘟牛瘟牛传染性胸膜肺炎蓝舌病小反刍兽疫裂谷热疙瘩皮肤病绵羊痘和山羊痘高致病性禽流感鸡新城疫3、家畜传染病发展的阶段包括潜伏期前驱期症状明显期转归期4、动物传染病在流行过程中的主要表现形式包括散发流行地方性流行大流行5、采取隔离封锁的基本原则早快严小二、名词解释1、感染：病原微生物侵入动物机体，并在一定的部位定居，生长繁殖，从而引起机体一系列病理反应，这个过程称为感染。
2、生物安全：主要是采取必要的有效措施，最大限度地消除各种理化和生物性致病因子对人和动物的危害，是动物生产中的一种安全保障体系。
3、传染病：凡是由病原微生物引起，具有一定的潜伏期和临诊表现，并具有传染性的疾病，称为传染病。
4、检疫：是指利用各种诊断和检测方法对动物及其相关产品和物品进行疫病、病原体和抗体的检查。
5、隔离：将不同健康状态的动物严格分离、隔开、完全、彻底切断其间的来往接触，以防疫病的传播、蔓延即为隔离。
6、自然疫源性疾病：有些病原体在自然条件下，即使没有人和动物的参与，也可以通过传播媒介感染宿主造成流行，并且长期在自然界循环延续其后代，人和动物疫病的感染和流行，对其在自然界的保存来说不是必要的，这种现象称为自然疫源性，具有自然疫源性的疾病，称为自然疫源性疾病。
7、慢病毒感染：又称长程感染是指潜伏期长，发病呈进行性且最后常以死亡为转归的病毒感染。
8、紧急接种：紧急接种是在发生传染病时，为了迅速控制和扑灭疫病的流行，而对疫区和受威胁区尚未发病的畜禽进行的应急性免疫接种。
9、假定健康动物：在有传染病疫情发生时，疫区内除了患病动物和可疑感染动物以外，其它易感动物都属于假定健康动物。
10、地方流行性：在一定的地区和畜群中，带有局限性传播特征的，并且是比较小规模流行的家畜传染病，可称为地方流行性三、简答题1、简述造成动物传染病流行的基本环节？答：家畜传染病的流行过程，就是从家畜个体感染发病发展到家畜群体发病的过程，也就是传染病在畜群中发生和发展的过程。
第十章 双链RNA病毒
第十章双链RNA病毒1 呼肠孤病毒科（Reoviridae）分类按病毒的宿主范围和致病性不同分为12个属，其中对脊椎动物致病的有6个属：正呼肠孤病毒属（禽呼肠孤病毒）轮状病毒属（轮状病毒）环状病毒属（蓝舌病病毒、非洲马瘟病毒）科州蜱传热病毒属（科州蜱传热病毒）东南亚十二节段病毒属（版纳病毒）水生呼肠病毒属（草鱼出血热病毒）科的特征无囊膜，球形病毒粒子，直径60-80nm，双层衣壳（三层），内层衣壳呈二十面体对称，内壳体与核酸构成核心。
基因组为双股RNA，分为10-12个节段，总碱基数18-23kb，总分子量为12-20×106D。
有6-10种结构多肽，细胞浆内复制，某些种有血凝性。
禽呼肠孤病毒（Avian reovirus, ARV)属于呼肠孤病毒科、正呼肠孤病毒属病毒形态与理化特性无囊膜、球形病毒粒子对热有较强的抵抗力，能耐受60℃8-10h，56℃22-24h，37℃可达13-16周，22℃为48-51周，4 ℃为3年以上。
对乙醚不敏感，对2%来苏儿、3%甲醛等有抵抗力无血凝活性，能诱导细胞融合病毒基因组结构特征根据电泳迁移率的不同，可将ARV的双链RNA基因组分为10个节段，这10个节段又可分为L(大）、M（中）、S(小）三个组正链(+)基因节段的5’段有帽子结构，而且每个dsRNA节段的3’端均露出羟基，这种dsRNA 节段完全能够抵抗单链特异性的核酸酶S1的降解ARV的致病性流行于鸡、鸭、火鸡、鹅、鹦鹉等禽类主要引起感染鸡的病毒性关节炎/腱鞘炎和吸收障碍综合征，感染番鸭时多见肝、脾肿大及表面出现白色小坏死点可水平传播，也可垂直传播发病率高，但死亡率比较低。
临床上常见于鸡马立克氏病毒、传染性法氏囊病毒感染的病例，混合感染可加剧病情和死亡。
蓝舌病毒（Bluetongue virus)病毒的基本特性蓝舌病病毒（Bluetongue virus)，属于呼肠孤病毒科，环状病毒属，双股RNA病毒基因组为10个双股RNA。
兽医传染病学模拟习题+参考答案
兽医传染病学模拟习题+参考答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.鸡传染性法氏囊病的特征性剖解是（）。
A、肝出血B、肺出血C、法氏囊充血、出血、坏死D、脾脏出血E、肾脏出血正确答案：C答案解析：死于传染性法氏囊病的鸡表现脱水，腿部和胸部肌肉出血。
法氏囊的病变具有特征性：法氏囊充血、水肿、变大、浆膜覆盖有淡黄色胶冻样渗出物，法氏囊由正常的白色变为奶油黄色，严重出血时，呈紫黑色，似紫葡萄状。
切开囊腔后，黏膜皱褶多混浊不清，黏膜表面有出血点或出血斑，腔内有脓性分泌物；5d后法氏囊开始萎缩，8d后仅为原来的1/3左右，此时法氏囊呈纺锤状；有些慢性病例，外观法氏囊的体积增大，囊壁变薄，囊内积存干酪样物。
腺胃和肌胃交界处有条状出血。
肾肿大苍白，呈花斑状：肾小管和输尿管有白色尿酸盐沉积。
2.某猪场5月龄猪发病，表现为体温升高，弓背，行走摇晃，病初便秘，后期腹泻，四肢末端皮肤有出血点，发病率约15%；剖检可见脾脏边缘梗死，盲肠纽扣状溃疡。
最可能引起本病的病原是（）。
A、猪瘟病毒B、猪流感病毒C、猪细小病毒D、伪狂犬病病毒E、猪传染性胃肠炎病毒正确答案：A答案解析：发生急性型猪瘟时，脾脏表面及边缘可见出血性梗死，最具有猪瘟诊断意义；另外，盲肠、回盲瓣口及结肠黏膜出现大小不一的圆形纽扣状溃疡；喉头、会厌软骨、膀胱黏膜以及心外膜等出现出血点或出血斑都可作为猪瘟的诊断依据。
3.病犬在康复期出现角膜混浊的常见传染病是（）。
A、犬瘟热B、犬传染性肝炎C、犬细小病毒病D、犬冠状病毒性腹泻E、犬副流感病毒感染正确答案：B答案解析：犬传染性肝炎是由犬腺病毒感染犬引起的一种急性、高度接触传染性、败血性的传染病，患病犬多在2周内死亡或康复，部分患病犬在康复期可出现角膜混浊，呈白色或蓝白色，经过2～3d可自然恢复。
4.牛肺疫的病原体是（）。
A、蓝舌病病毒B、支气管败血波氏杆菌C、丝状支原体D、大肠杆菌E、牛巴氏杆菌正确答案：C答案解析：牛传染性胸膜肺炎又称牛肺疫，是由丝状支原体引起的一种急性或慢性、接触性传染病，以纤维素性胸膜肺炎为特征。
双股RNA病毒
微生物学诊断
❖ 1、病原的分离鉴定 （1）病料采取：除脑外多数器官都含有病毒，其中法
氏囊和脾中的含毒最高，其次为肾脏。 （2）病毒分离培养：绒尿膜接种9~11日龄鸡胚，鸡胚
常在3~7d死亡。
❖ 2、血清学诊断 （1）琼脂扩散试验(AGP) （2）病毒中和试验(VNT) （3）免疫荧光试验(IF) （4）酶联免疫吸附试验(ELISA)
禽正呼肠孤病毒 （Avian orthoreovirus）
❖ 正呼肠孤病毒属成员 ❖ 无血凝活性，抗原性不与哺乳动物毒株交叉 ❖ 8个血清型 ❖ 对热稳定，卵黄中病毒能耐56℃ 24h，60 ℃8-10h ❖ 能抵抗乙醚、氯仿和pH3的酸性环境 ❖ 能在鸡胚卵黄囊、绒尿膜上增殖，也能在原代鸡肝、
肺、肾和睾丸等细胞培养物上生长。
致病性
❖ 引起多种疾病 病毒性关节炎/腱鞘炎、矮 小综合征、呼吸道疾病、肠道疾病、吸收不 良综合征。
症状
❖ 食欲减退，不远走动，喜卧伏 ❖ 腓肠肌断裂，腿变形、外旋、跛行 ❖ 严重者瘫痪
病理变化
❖ 肌腱肿胀、出血 ❖ 腱鞘增生肥厚、硬化、坏死，周围纤维素
沉着
微生物学诊断
防控
❖ 疫苗效果较差，种鸡可用弱毒疫苗饮水免疫，在18 周龄产蛋前接种灭活疫苗。
❖ 感染IBDV的囊组织制成的灭活疫苗具有较好的免 疫效果。
❖ 病羊舌部发绀，因而称之为蓝舌病。 ❖ BTV主要通过库蠓等吸血昆虫传播
Hale Waihona Puke 诊断❖ 结合临床症状和病毒分离才能确诊，用补体 结合、荧光抗体或琼脂扩散等试验检测群特 异抗体。
防控
❖ 消灭库蠓 ❖ 检测并淘汰病畜，就地烧毁或深埋 ❖ 疫苗使用需针对当地血清型，注意：弱毒苗
存在返强危险。
兽医传染病学考试题及答案
兽医传染病学考试题及答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、预防猫泛白细胞减少症最有效的方法是（）。
A、注射猫细小病毒高免血清B、接种猫细小病毒疫苗C、高免血清与疫苗联合应用D、注射免疫球蛋白E、严格环境消毒正确答案：B答案解析：免疫接种是预防猫泛白细胞减少症最为有效的方法。
可根据各地猫泛白细胞减少症流行病学情况和疫苗特性制定切实可靠的免疫程序，一般1月龄进行免疫，以后每隔6个月加强免疫一次。
2、母猪怀孕期间可感染细小病毒，并引起各种形式的繁殖障碍，其中，怀孕50～60天感染的母猪主要出现（）。
A、流产B、产死胎C、产木乃伊胎D、难产E、正常产仔正确答案：B答案解析：猪细小病毒病的主要临诊症状是母猪的繁殖障碍。
不同孕期感染时，对胎儿的影响有所不同。
在怀孕后50～60d感染主要产死胎。
3、猪传染性萎缩性鼻炎的临床表现为（）。
A、打喷嚏、鼻塞、颜面部变形或歪斜，病猪生长缓慢B、咳嗽、气喘C、呼吸急促，腹式呼吸，夹杂阵发性痉挛咳嗽D、病猪呼吸极度困难，常作犬坐姿势，伸长头颈呼吸E、以上都是正确答案：A答案解析：感染猪传染性萎缩性鼻炎，病初为鼻炎症状，表现为打喷嚏和呼吸困难，进一步发展，病猪出现鼻涕、鼻塞、气喘，出现“泪斑”；感染2～3个月后，病猪出现鼻甲骨萎缩，导致鼻腔和面部变形。
病猪体温一般正常，生长停滞，成为僵猪。
4、犬细小病毒疫苗，首次免疫时间一般应在（）。
A、1.5～3月龄B、4～5月龄C、6～7月龄D、8～9月龄E、10月龄以上正确答案：A答案解析：犬细小病毒病又称犬传染性出血性肠炎，是由犬细小病毒引起犬的一种急性传染病。
临诊表现为肠炎型和心肌炎型，肠炎型以剧烈呕吐、血水样腹泻、脱水、白细胞显著减少、小肠出血性坏死性肠炎为特征；心肌炎型以急性非化脓性心肌炎为特征。
其流行特点为各种年龄和品种的犬均可感染。
断乳前后的仔犬易感性最高，往往以同窝暴发为特征。
3～4周龄犬感染后呈急性致死性心肌炎的为多；8～10周龄的犬则以肠炎为主。
执业兽医资格考试免疫学8病毒各论
五、鸭瘟病毒（Duck plague virus）
形态 分子特征 抗原特性：病毒只有一个血清型，但毒力有差异 致病特性 肠炎、脉管炎及广泛的局灶性坏死。 诊断 荧光抗体，分离病毒等；特征性症状:食道黏膜上 有呈条纹纵向排列的黄色假膜
第4节 腺病毒科 （Adenoviridae）
痘病毒科 非洲猪瘟病毒科 疱疹病毒科 腺病毒科 细小病毒科 圆环病毒科 反转录病毒 科呼肠孤病毒科 双RNA病毒
副黏病毒科 弹状病毒科 正黏病毒科 冠状病毒科 动脉炎病毒科 微RNA病毒科 嵌杯病毒科 黄病毒科 朊病毒
非洲猪瘟病毒科
痘病毒科
虹彩病毒科
细小病毒科
多瘤病毒科科
基因组为线状双股DNA 痘病毒科 非洲猪瘟病毒科 疱疹病毒科 腺病毒科 虹彩病毒科
环状双股DNA病毒 线头病毒科 杆状病毒科 多瘤病毒科 乳头瘤病毒科
痘病毒科 绵羊痘病毒与山羊痘病毒 黏液瘤病毒 非洲猪瘟病毒科 非洲猪瘟病毒
疱疹病毒科 伪狂犬病毒 牛传染性鼻气管炎病毒 马立克氏病病毒 禽传染性喉气管炎病毒 鸭瘟病毒
自然感染仅感染山羊， 形态： 分子特征：单股RNA 抗原特性 致病特性 诊断：琼扩
三、马传染性贫血病毒
形态：有囊膜 分子特征：单股RNA 抗原特性：8个血清型 致病特性： 诊断：补体结合试验，琼扩
第8节
呼肠孤病毒科ຫໍສະໝຸດ 禽正呼肠孤病毒 蓝舌病毒 质型多角体病毒
一、禽正呼肠孤病毒
第1节
痘病毒科（Poxviridae）
绵羊痘病毒与山羊痘病毒 黏液瘤病毒
一、绵羊痘病毒与山羊痘病毒
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畜牧兽医学报
2017，48（7）:1281-1287
ActaVeterinariaetZootechnicaSinica
doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.07.012
蓝舌病病毒7型毒株的分离与分子鉴定
吕敏娜1#，杨 恒2#，孙铭飞1，李 娟1，林栩慧1，张健騑
1
，
廖申权1，戚南山1，吴彩艳1，李华春2*，陈琴苓
1
*
（
1.
广东省农业科学院动物卫生研究所广东省兽医公共卫生公共实验室
广东省畜禽疫病防治研究重点实验室
，广州510640；2.云南省畜牧兽医科学院，昆明650224）
摘 要
：为监测广东省蓝舌病流行状况，2014年从广东省某一奶牛场采集血液样品，检测虫媒病病原，
对经
RT-
PCR
检测蓝舌病病毒核酸阳性的样品进行病毒分离并鉴定。经鸡胚静脉接种后取肝，研磨后离心取上清转接
C6
/
36
细胞和BHK-21细胞，出现CPE，RT-PCR检测蓝舌病病毒的VP7基因并进行序列比对，电镜观察病毒粒子，证
实分离到蓝舌病病毒
，命名为GD/ST2014。进一步扩增VP2基因，进行系统发育树分析，以及血清中和试验，
表明
此分离株为血清型
7型。这是国内首次报道牛源蓝舌病病毒血清型7
型的分离鉴定
。
关键词
：蓝舌病病毒；分离；鉴定；血清型；
序列分析
中图分类号：S852.659.4 文献标志码：A 文章编号
：0366-6964（2017）
07-1281-07
收稿日期
：
2016-11-15
基金项目
：公益性行业（农业）科研专项（201303035）；广东省科技计划项目（2015A020209075；2015A020209084）
作者简介
：吕敏娜（1967-），女，广东潮州人，副研究员，硕士，主要从事预防兽医学研究，E-mail:gdczmn@163.com；杨 恒（1978-），男，
四川西
昌人
，副研究员，博士，主要从事动物虫媒病毒研究。
#
并列第一作者
*通信作者：李华春，E-mail:lihuachun@hotmail.com；陈琴苓，E-mail:544021009@
qq
.com
IsolationandIdentificationofBluetongueVirusSerotype7FieldIsolate
LÜMin-na1#，YANGHeng2#，SUNMing-fei1，LIJuan1，LINXu-hui1，ZHANGJian-fei
1
，
LIAOShen-quan1，QINan-shan1，WUCai-yan1，LIHua-chun2*，CHENQin-lin
g
1
*
（1.GuangdongOpenLaboratoryofVeterinaryPublicHealth，
GuangdongProvincial
KeyLaboratoryofAnimalDiseasePrevention，InstituteofAnimalHealth，Guangdon
g
AcademyofAgriculturalSciences，Guangzhou510640，China
；
2.YunnanAnimalScienceandVeterinaryInstitute，Kunming650224
，China）
Abstract:In2014，cattlebloodsampleswerecollectedfromGuangdongprovinceandvector-borne
pathogenscontainedinthemweredetectedinthepresentstudy.Samp
leswhichweredetectedas
BTVpositivebyquantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction（qRT-PCR）were
isolatedandidentified.Embryonatedchickeneggsweresubsequentlyinoculatedandtheirlivers
wereharvestedtopassageonC6/36andBHK-21cells，respectively.Extensivecytopathicchan-
geswereobserved.AsubsequentqRT-PCRassaytargetwithVP7g
eneandSEMobservationre-
sultsfurtherconfirmedthepresenceofBTV，andnamedasGD/ST2014.Inaddition，VP2gene
fragmentwasusedforgenotyping.AndcombinedwithVNTtestresults，thegenotypeofthe
isolateobtainedinthepresentstudywereidentifiedasBTV-7.Thiswasthefirstreportthat
bluetonguevirusserotype7fieldisolatewasisolatedfromcattleinChina.
Keywords:bluetonguevirus；isolation；identification；serotype；sequenceanalysis
蓝舌病（bluetongue，BT）是由蓝舌病病毒（bluetonguevirus，BTV）引起，经雄性库蠓通过吸