免疫亲和柱 柱容量 afb1
免疫亲和固相萃取柱
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MS-Clean黄曲霉毒素B1免疫亲和柱
MS-Clean黄曲霉毒素B1免疫亲和柱
概要：
黄曲霉毒素是谷类及其他农作物常见的真菌毒素，是由黄曲霉和寄生曲霉产生的一类低分子化合物，对动物、植物和微生物具有很强的毒性，致癌力最强，还能引起突变和导致畸形。
世界各国对食品及饲料中的黄曲霉毒素都有严格的限量标准。
测定原理：
此免疫亲和柱以抗体-抗原特异性反应为基础，含有和黄曲霉毒素B1抗体结合在一起的凝胶。
上样时，经提取、过滤、稀释后的样品缓慢地通过黄曲霉毒素B1免疫亲和层析柱，在柱内黄曲霉毒素B1与抗体结合，其他物质不会结合而直接流出。
此后洗涤免疫亲和柱，完全除去未结合的其他物质。
最后加入甲醇，将黄曲霉毒素B1释放并洗脱，再注入到分析仪器中进行检测。
适用范围及用途：
黄曲霉毒素B1免疫亲和柱适用于基质复杂、限量要求低的样品中黄曲霉毒素B1检测的净化。
可以进行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA等定量分析，适合谷物、食品和饲料等样品。
液相色谱测定条件：
检测器：荧光检测器
激发/发射波长：360 nm/440 nm 流动相：甲醇:水 = 45:55
流速：0.8 mL/min
进样量：20 uL
柱温：30 ℃
反应时间：10 min
用进样器吸取20 uL黄曲霉毒素标准工作溶液注入高效液相色谱
仪，在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值（峰高或峰面积），得到黄曲霉毒素标准溶液的高效液相色谱图。
产品参数及规格：。
免疫亲和色谱柱制备方法
Instructions 71-7086-00 AF Affinity mediaGE Healthcare CNBr-activated Sepharose™ 4B CNBr-activated Sepharose 4B is a pre-activated medium for immobilization of ligands containing primary amines. It provides a very convenient way to immobilize ligands by the cyanogen bromide method. The coupling reaction is spontaneous, rapid and easy to carry out. The application area covers immobilization of proteins, peptides and nucleic acids.通用电气医疗集团CNBr-activated琼脂糖™4 b CNBr-activated琼脂糖4 b是固定地激活介质的包含一级胺配体。
它提供了一个非常方便的方法固定溴化氰配体的方法。
偶联反应是自发的,快速和容易执行。
应用领域涵盖固定的蛋白质、多肽和核酸。
Table 1. Medium characteristics.Bead structure: 4% agaroseSpacer: NoneCoupling capacity: 25–60 m g α-chymotrypsinogen/ml drained medium Bead size range: 45–165 μmAverage bead size: 90 μmMax linear flow rate*: 75 cm/h at 25°C, HR 16/10 column, 5 cm bed heightpH stability**:表1。
IAC315-VB12维生素B12亲和柱说明书
IAC-SEP®维生素B12免疫亲和柱（产品编号：IAC315）使用对象IAC-SEP®维生素B12亲和柱能够特异性的纯化样品中的维生素B12，它采用了柱状琼脂糖凝胶作为固相载体，琼脂糖凝胶与维生素B12抗体偶联形成免疫吸附剂，装柱制成免疫亲和柱。
它能够特异性的纯化样品中的维生素B12。
维生素B12亲和柱广泛地应用于饮料、牛奶和奶粉，饮料等样品的提取，该方法速度快、操作简单、准确性高，对提高食品的质量和安全性起到十分重要的作用。
维生素B12家族中有四大成员：氰钴胺、甲钴胺、腺苷钴胺和羟钴胺. 自然界中，微生物生物合成的维生素B12最终形式为甲钴胺、腺苷钴胺和羟钴胺;但是由于它们性质不太稳定，所以在工业提纯过程中人为地加入氰化钠，使天然形式的维生素B12转化为性质更为稳定的氰钴胺。
我们俗称的维生素B12，是指氰钴胺，我们食品中添加的维生素B12为氰钴胺，因此我们检测食品中的维生素B12只需检测氰钴胺。
该说明书方法应用亲和柱方法检测食品中维生素B12（氰钴胺）的检测方法。
如需检测氰钴胺、甲钴胺、腺苷钴胺和羟钴胺总量的方法，请参考以下两种方法进行样品的前处理，然后再应用本亲和柱进行净化：AOAC2014.02:Improved_AOAC-FirstAction 2011.08 for the Analysis of Vitamin B12 in Infant Formula and Adult Pediatric Formulas First Action 2014.02(2)GB 食品安全国家标准：GB 5009.285-2022 食品安全国家标准食品中维生素B12的测定GB/T 5009.217-2008 保健食品中维生素B12的测定T/NAIA 048-2021 功能性饮料中维生素B12的测定液相色谱-质谱/质谱法原理维生素B12免疫亲和柱能够特异性的纯化样品中的维生素B12，将样品与提取液混合、提取、过滤，然后将滤液通过免疫亲和柱。
赭曲霉毒素免疫亲和柱操作说明书
百奥思科赭曲霉毒素A免疫亲和柱操作说明书【概要】赭曲霉毒素A （Ochratoxin A）是曲霉属和青霉属的真菌形成的次级代谢产物，属烈性的肾脏毒和肝脏毒，广泛存在于各种食物中，谷物及其副产品是赭曲霉毒素A的主要来源。
动物实验表明摄入了被这种毒素污染的饲料后，会发生急性或慢性中毒症。
防止污染赭曲霉毒素A的食品和饲料直接或间接地进入人类食物链，加强对赭曲霉毒素A的检测十分重要。
【适用范围及性能】本公司真菌毒素免疫柱系列产品测试形式是一个高性能的免疫亲和柱，设计用于在进行HPLC（高效液相色谱法）、GC-MS（气相色谱-质谱联用仪）、ELISA（酶联免疫吸附剂测定）之前清理（净化）或浓缩样本。
用于定性、定量检测谷物、酒类等食品和饲料等样本中的赭曲霉毒素A时的样品前处理。
柱容量：≥200ng回收率：≥90%【试验原理】本产品的测定的基础是抗原抗体反应，赭曲霉毒素A单克隆抗体连接在柱内凝胶上，样品中的赭曲霉毒素A经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢的通过赭曲霉毒素A 免疫亲和层析柱，在免疫亲和柱内，赭曲霉毒素A与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。
用甲醇洗脱赭曲霉毒素A，然后注入到分析仪器中用于检测。
【包装组成】25支/盒，3mL柱管/支产品说明书1份【需要而未提供的设备及试剂】设备：┅┅高速均质器或组织匀浆机┅┅粉碎机┅┅200ml/50ml量筒┅┅天平：感量0.1g┅┅微量移液器：单道100μl～1000μl┅┅槽纹滤纸（折叠快速定性或定量滤纸）┅┅玻璃微纤维滤纸（1.5μm孔径）┅┅50ml漏斗┅┅一次性玻璃试管┅┅泵流操作架（包括空气泵，不同容积的玻璃注射器等）试剂：┅┅甲醇（色谱级）┅┅蒸馏水或去离子水┅┅pH7.0磷酸盐缓冲溶液（PBS缓冲液）：称取8.0g氯化钠，1.2g磷酸氢二钠，0.2g磷酸二氢钾，0.2g氯化钾，用990mL纯水溶解，然后用浓盐酸调节pH值至7.0，最后用纯水稀释至1000mL┅┅清洗缓冲液：25g 氯化钠+5g碳酸氢钠+0.1mL吐温-20 用纯水稀释至1000 mL【试剂配制】样品提取液：配制甲醇-水（8：2）溶液作为样品提取液【样本处理步骤】（一）花生，玉米，大米，小麦及其制品和饲料┅┅称取20g粉碎的样品于100mL容量瓶中，加入5.0g氯化钠，以甲醇-水（8：2）溶液定容；┅┅转移到均质杯中，以均质器高速搅拌，提取2分钟；┅┅4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤；┅┅取10mL滤液并加入40mLPBS缓冲液稀释，用玻璃微纤维滤纸过滤，取过滤后液体待测；┅┅将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。
抗黄曲霉毒素M1免疫亲和柱的制备
抗黄曲霉毒素M1免疫亲和柱的制备（黑龙江八一农垦大学食品学院，黑龙江省大庆市 163319）（齐齐哈尔大学食品与生物工程学院，黑龙江省齐齐哈尔市 161006）（北京华安麦科生物技术有限公司，北京市 102200）摘要：【目的】制备黄曲霉毒素M1污染样品的净化前处理免疫亲和柱。
【方法】利用无血清培养基制备的高纯度抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体和溴化氰活化的Sepharose 4B进行偶联、装柱后通过IC-ELSIA对免疫亲和柱的性能评价确立了最佳反应条件。
【结果】免疫亲和柱的有效柱容量为500ng, 经添加回收试验测定的平均回收率为92.46%,变异系数2.3%～7.2%。
【结论】利用高纯度抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体和溴化氰活化的Sepharose 4B制备的免疫亲和柱可应用于乳制品等食品中黄曲霉毒素M1污染度测定的样品快速前处理。
关键词：黄曲霉毒素M1；免疫亲和柱；无血清培养基Preparation of Immunoaffinity Column for Anti-AFM1Sun Xing-Rong1，Pei Shi-Chun2，Liu Jia-Peng3，Wang Ying4(1 Food Science College, HLJ August First Land Reclamation University, Daqing 163319, China)(2 Food and Biological Engineering College, Qiqihar University, Qiqihar 161006, China)(3，4Beijing Huaan Magnech Bio-Tech Co., Ltd.,Beijing 102200, China) Abstract:[objective] preparation of aflatoxin M1immunoaffinity column for clean-up contaminated samples. [Method] prepared high-purity anti-aflatoxin M1monoclonal antibody with serum-free medium and coupled with CNBr Activated Sepharose 4B, the column has been evaluated through IC-ELISA and established the optimum reaction conditions. [Results] the capacity of immunoaffinity column was 500 ng , the average recovery of aflatoxin M1was 92.46 %,the variation coefficients were 2.3% ~ 7.2%. [Conclusions] the immunoaffinity columns was prepared by coupling high-purity anti-aflatoxin M1 monoclonal antibody with CNBr Activated Sepharose 4B can be applied to detect contamination samples fast, such as aflatoxin M1 in dairy products.Keywords: aflatoxin M1, immunoaffinity column, serum-free medium黄曲霉毒素(Aflatoxin, AF）是食品中广泛存在的一种高致癌性真菌毒素，是Asperillus flavus 和Asperillus parasiticus 的二次代谢产物, 黄曲霉毒素M1（Aflatoxin M1, AFM1）是动物摄入黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1, AFB1)后在体内经羟基化而形成的产物，主要存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类等，其中以乳最为常见[1-3]。
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免疫亲和柱柱容量 afb1
免疫亲和柱（Immunaffinity Column）是一种常用的柱层析技术，用于富集和纯化特定的分子或化合物。
本文将以AFB1（黄曲霉毒素B1）为例，介绍免疫亲和柱的原理、应用和优势。
AFB1是一种由黄曲霉菌产生的黄曲霉毒素，对人和动物具有较高的毒性。
由于其对人体健康的潜在危害，监测和分析AFB1在食品和环境样品中的含量变得尤为重要。
传统的分析方法包括高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC），但这些方法需要复杂的前处理步骤和昂贵的设备，且分离效果有限。
而免疫亲和柱作为一种快速、高效的富集和纯化技术，被广泛应用于黄曲霉毒素的检测和分析。
免疫亲和柱的原理是利用特定的抗体与目标分子之间的高度选择性结合。
在免疫亲和柱中，固定化的抗体通过特异性结合与目标分子相互作用，从而将目标分子从复杂的样品基质中富集出来。
免疫亲和柱的填料通常是以高纯度的抗体固定在固定相上，形成高效的亲和层析柱。
使用免疫亲和柱进行AFB1的富集和纯化，通常包括以下步骤：首先，将样品与免疫亲和柱进行接触，使目标分子与柱上的抗体结合。
随后，通过洗脱步骤将非目标分子洗去，使得目标分子得以富集。
最后，从柱上洗脱目标分子，用于进一步的分析和检测。
免疫亲和柱在AFB1的分析中具有许多优势。
首先，免疫亲和柱具有
高度的选择性和特异性，可以有效地富集和纯化目标分子，减少样品基质的干扰。
其次，免疫亲和柱具有较高的富集效率和灵敏度，可以在短时间内获得较低浓度的目标分子。
此外，免疫亲和柱操作简便，无需复杂的前处理步骤，适用于不同类型的样品。
然而，免疫亲和柱也存在一些局限性。
首先，柱容量是免疫亲和柱的重要参数之一，它决定了柱富集目标分子的能力。
较低的柱容量可能导致目标分子无法完全富集，影响后续的分析结果。
其次，免疫亲和柱的使用寿命有限，经过多次使用后，抗体的活性和选择性可能会下降，影响分析结果的准确性。
总结而言，免疫亲和柱是一种重要的分离和纯化技术，在AFB1等目标分子的富集和纯化中具有广泛的应用前景。
随着技术的不断发展和改进，免疫亲和柱将进一步提高分析的效率和准确性，为食品安全和环境监测提供有力的支持。