结肠癌组织及细胞中miR-92a的表达变化及其意义

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microRNA在结肠癌组织的表达及其临床意义

microRNA在结肠癌组织的表达及其临床意义

N:远端正常结肠组织;T:结肠癌组织上升的pm一面RNA 图3 定量PcR检测发生结肠癌时p咒-miRNA的变化情况
real.time qRT—PCR晒say.The potential biomarker utibty 0f miRNA profiling w鹪revealed by PAM analy-
sis,which applied a modest number of dysregulated llliRNAs硒Pmmising出agnostic biomarke瑙for c010n
miR_22l、miR一222、miR.223 miR.224。所有结果均以元 ±s用柱状图表示,数据用student t—t检验进行比较分 析,表示8P<O.05,表示oP<0.ol。
3.Northem blot:根据定量PCR实验结果,我们随 机挑选了miR-21,做Northem blot实验,证明IIliR-21 在发生结肠癌时上调(图2)。研究结果与RT-PCR的 结果一致。
miR—lOb、miR—16、miR.17-3p、miR-17-5 p、miR一18a、llliR—
19a、miR_20a、miR-21、miR以、miR-25、miR-27a、miR-
3l、miR一34a、miR.92、miR-93、miR一103、miR一106a、miR— 106b、miR—107、miR.126宰、miR一128a、miR—128b、miR一 132、miR一141、miR-142.3p、miR一142-5p、miR一146b、miR一 148a、miR.155、miR一18la、miR—181b、miR—188、miR- 189、miR一196a、miR—199a、miR.199b、miR.200a、miR一 200b、miR一200c、miR-203、miR-205、miR-2lO、miR-219、

血清miR-21、miR-92联合检测对结直肠癌诊断效能分析及术后复发的预测价值

血清miR-21、miR-92联合检测对结直肠癌诊断效能分析及术后复发的预测价值
关 键 词 :结 直 肠 癌 ;微 小 RNA一21;微 小 RNA ̄2;受 试 者 工 作 特 征 曲 线 doi:10.3969/j.issn.1002 ̄66X.2018.08.024 中 图分 类 号 :R735.3 文 献 标 志 码 :B 文 章 编 号 :1002 ̄66X(2018)08 ̄081 3
癌胚 抗原 (CEA)、糖类 抗 原 CA199是 目前 临床 上结 直肠 癌早 期筛 查及术 后 复发 或转 移监测 的常用 肿 瘤 标 志 物 ,但 其 诊 断 结 直 肠 癌 的 敏 感 性 仅 为 50% ~65% ,且 预测术 后 复发 的效果 亦不 理想 ,远 不 能满 足 临床需 求 ¨ 。微小 RNA(miRNA)是 一组 高 度保 守 的 单 链 非 编 码 小 分 子 RNA,可 通 过 结 合 到 mRNA的 3 非 翻译 区来 调节 其 转 录 或 降解 ,从 而 影 响细胞 增 殖 、分 化 、凋 亡 等 生 物 学 行 为 _3]。miRNA 不仅 存在 于细 胞 中 ,还 可 以 cell-free miRNA形 式 存 在于血 液 中,被称 为循 环 miRNAl4-6 3。循 环 miRNA 在反 复冻融 条件 下 仍 能保 持 稳 定 ,有 作 为肿 瘤 标 志 物 的潜 能。。 “J。miR-21、miR ̄2是 miRNA家 族 中 的 成 员 。 miR一21 的 编 码 基 因 定 位 于 染 色 体 17q23.2¨ 。miRNA ̄2 是 近 年 新 发 现 的 一 种 miRNA,其编码 基 因定 位 于 染 色 体 13q31.3l】引。 已 有研究 证 实 ,结 直 肠 癌 患 者 外 周 血 miR-21、miRO2 水平上 调 ¨ 。但二 者 能 否 作 为 结 直 肠 癌 筛查 的 肿

下调miR92a对非小细胞肺癌细胞增殖及血管生成因子表达的影响

下调miR92a对非小细胞肺癌细胞增殖及血管生成因子表达的影响

NSCLC早期发现及治疗提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料 人 NSCLC细胞株 A549、正常人支气管 上皮(humanbronchialepithelial,HBE)细胞由中国 科学院上海生科院细胞资源中心提供,高糖 DMEM 培养 液、胎 牛 血 清 购 于 杭 州 四 季 青 研 究 所,Lipo fectamine2000、无意义小干扰 RNA(scsiRNA)和特 异性 干 扰 miR92a基 因 的 小 干 扰 RNA(miR92a siRNA)购自上海吉玛制药公司;RNA提取试剂盒、 反转录试剂盒、RTPCR试剂盒、蛋白提取试剂盒均 购自 Sigma公司。PTEN、血管内皮生长因子(vascu larendothelialgrowthfactor,VEGF)、PI3K、Akt一 抗、二抗,均购自上海安妍公司。 1.2 方法 1.2.1 细胞培养、转染及分组 将人 NSCLC细胞 株 A549和正常 HBE细胞分别置于含 10%胎牛血 清的高糖 DMEM培养液中,在 37℃ 5%CO2无菌培 养 箱 中 培 养。 取 对 数 生 长 期 的 A549细 胞,用 025%胰蛋白酶消化后,离心,加入新鲜培养液重悬 细胞,以每毫升 2×105个细胞的密度接种于 6孔板 中,过夜生长,待细胞 80%融合后进行转染。分别 将 scsiRNA和 miR92asiRNA加入适量 无 血 清 培 养基中稀释,静置 5min加入 Lipofectamine2000混
汤建华1,冯 平2,张志华2,王 布2
摘要:目的 探讨 miR92a下调对非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)细胞增殖及血管生成的影响。方法 将 NSCLC中 A549细胞分为三组培养:A549组(未转染 A549细胞)、scsiRNA组(转染 scsiRNA的 A549细胞)、miR92asiRNA 组(转染 miR92asiRNA的 A549细胞)。分别采用 RTPCR和 Westernblot检测 A549细胞和正常人支气管上皮(humanbron chialepithelial,HBE)细胞中 miR92a相对表达量、PTEN、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)蛋白相 对表达水平。采用活细胞计数法和结晶紫染色实验检测各组 A549细胞的增殖能力。结果 miR92a在 A549组细胞中的相 对表达量高于 HBE细胞(P<005);A549组细胞中 PTEN蛋白表达水平低于 HBE细胞(P<005),VEGF蛋白表达水平高于 HBE细胞(P<005);miR92asiRNA组细胞中 miR92a相对表达量降低(P<005),PTEN蛋白表达水平升高(P<005), VEGF蛋白表达水平降低(P<005);miR92asiRNA组细胞中 PI3K和 Akt蛋白表达水平均下降(P<005);miR92asiRNA 组细胞数目减少,细胞增殖能力减弱。结论 NSCLC中 A549细胞的 miR92a表达明显上调,miR92a基因沉默能明显抑制细 胞增殖、血管生成,PTEN和 VEGF相关 PI3K/Akt信号通路可能在此过程中发挥重要作用。 关键词:肺肿瘤;非小细胞肺癌;A549细胞;人支气管上皮细胞;miR92a;细胞增殖;血管生成 中图分类号:R7342 文献标志码:A 文章编号:1001-7399(2019)01-0038-05 doi:10.13315/j.cnki.cjcep.2019.01.009

结肠癌患者血清miRNA表达谱分析

结肠癌患者血清miRNA表达谱分析

结肠癌患者血清miRNA表达谱分析荣维;宋丽芳;朱旭;宋丽萍【摘要】Objective To profile the miRNA expression pattern in the serum of patients with colon cancer, and to explore the potential molecular marker for the diagnosis of colon cancer. Methods The 12 serum samples of colon cancer patients were collected and miRNA chips were used to analyze the miRNA profile of colon cancer (the study group). The 12 serum samples of normal persons were collected as control (the control group). And then the sam-ples of colon cancer and control were extended to 40 cases and 45 cases respectively. Real-time PCR was used to fur-ther validate the expression level of miRNA in samples of colon cancer. Results Compared to the control group, the miRNA profile of the study group represented obvious changes, with 3 miRNAs up-regulated and 21 miRNAs down-regulated. The results of real-time PCR showed that the expression levels of miR-508 and miR-502-5p were down-regulated significantly in the study group compared to the control group. Conclusion miR-508 and miR-502-5p can be explored as potential diagnosis marker for colon cancer.%目的:探讨结肠癌患者血清中miRNA分子的表达差异,寻找潜在的结肠癌诊断分子标记物。

miR-92a通过下调RAB3B表达促进肝癌细胞增殖、迁移的机制分析

miR-92a通过下调RAB3B表达促进肝癌细胞增殖、迁移的机制分析
目前临床上控制和治疗哮喘最有效的药物是糖皮 质激素,它不仅对炎性细胞迁移和活化、细胞因子的生 成以及炎症介质的释放有抑制作用,同时使平滑肌细胞 受体的反应性增高,从而抑制炎性反应。但长期口服糖 皮质激素会产生很多不良反应。本实验结果表明,白藜 芦醇对 IL-6的抑制作用低于地塞米松,而香青兰总黄 酮与地塞米松的抑制作用无显著差异;白藜芦醇与地塞 米松对 TNF-α的抑制作用无显著差异,而香青兰总黄 酮与地塞米松间有显著差异,但香青兰总黄酮为中药提 取物,在不良反应方面可能比地塞米松更优越,但还需 进一步分析研究。地塞米松、白藜芦醇和香青兰总黄酮 药用后,哮喘小鼠体重均降低,而使其降低的具体原因 和机制尚不清楚,后续可深入研究讨论。移的机制分析
单留群 方征 刘洪 罗昆仑 (中国人民解放军联勤保障部队第九四医院普通外科 江苏 无锡 214000)
【摘要】 目的 分析 miR-92a通过下调 RAB3B表达促进肝癌细胞增殖、迁移的机制。方法 将 miR-92amimics 及 miRNAcontrol分别转染至肝癌细胞 SKHep-1,分别设为 miR-92a组及 miR-92aNC组,未经转染的 SKHep-1细 胞为对照组。采用荧光素酶报告基因检测 miR-92a与 RAB3B的靶向关系,利用实时荧光定量 PCR(qPT-PCR)分析 各组细胞 miR-92a与 RAB3B的表达水平,MTT法检测细胞增殖情况,划痕实验分析细胞迁移,Westernblot检测各蛋白 表达水平。结果 RAB3B是 miR-92a的下游靶基因。相比较于对照组及 miR-92aNC组,miR-92a组细胞 miR-92a 表达量明显升高,而相应的 RAB3B表达量明显降低(P <0.05)。miR-92a组细胞不同时间细胞增殖数及划痕愈合率 均明显高于对照组及 miR-92aNC组(P <0.05)。相比较于对照组及 miR-92aNC组细胞,miR-92a组细胞中 RAB3B蛋白表达量明显降低(P <0.05),而 Ki67、VEGF、MMP-2及 MMP-9蛋白对表达量明显升高(P <0.05)。结

微小RNA-92与恶性肿瘤关系的研究进展

微小RNA-92与恶性肿瘤关系的研究进展
有 研 究 表 明[5],原 发 性 乳 腺 癌 中 miR一92 与 ER131的 表达 成 负 相 关 ,抑 制 miR-92,ER1 31的 表 达 增加 ,过表 达 miR-92,ER 的 表 达 下 降 ,miR一92通 过直 接作 用 于 ERJ31的 3’UTR,下调 ERI3 的表达 。 推测 ,miR一92通 过 抑 制 ER口 的 表 达 ,促 进 乳 腺 癌 的 发 生 。
许多 miRNAs的 表 达 具 有 时 序 性 和 组 织 特 异 性 ,尤 其 是那 些涉 及调 节机 体生 长 发育 的 miRNAs。 研 究 表 明 ,老 鼠 的 干 细 胞 中有 miR一92的表 达 。这 些 全 能 细 胞 代 表 着 哺 乳 动 物 发 展 的 早 期 阶 段 。 miR一92亦 被发 现在 完 全 分 化 4天 的 细 胞 以及 成 人 的组 织细 胞 内表达 。如 果 一个 miRNA 在生 命 的各 个 阶段都 表 达 ,这 样 的 miRNA 对 于 调 节 细 胞 生 理 机 能 的各个 方 面都 起 到 重 要 作 用 。研 究 表 明 ,miR一 92在细 胞 的信 号 传 导 ,细 胞 周 期 、增 殖 及 凋 亡 等 各 方 面都 有 调节 作用 。 2 miR-92作 用 的 靶 基 因
研究 表 明 miR~92在 包 括 肝 癌 、膀 胱 癌 、肺 癌 在 内的许 多其 他癌 症 中 都 异 常 表 达 ,其 可 能 通 过 调 节 细胞 的增 殖 、凋 亡 、侵袭 和 转移 等多 种机 制参 与 癌症 的 发 生 发 展 ,并 影 响 癌 症 患 者 的 预 后 。 3.1 miR-92与 肝 癌
基 金 项 目 :吉 林 省科 技 发展 计 划 项 目(20150101163JC);吉 林 大 学 课 题 (3R217E593428)

结直肠癌患者血清miR-92a-3p表达水平及其临床意义

结直肠癌患者血清miR-92a-3p表达水平及其临床意义

结直肠癌患者血清miR-92a-3p表达水平及其临床意义温淑娴;温旺荣【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2015(33)10【摘要】目的分析miR-92a-3p在体检健康者、结直肠腺瘤息肉患者以及结直肠癌(CRC)患者手术前后血清中的相对表达水平,探讨其在CRC临床诊断中的应用价值.方法用Trizol法分别对30例体检健康者、25例结直肠腺瘤息肉患者和40例CRC患者术前及术后的血清进行总RNA提取,用实时荧光定量PCR检测miR-92a-3p的相对表达水平,分析其在各组中的表达差异及其与CRC临床病理参数的关系,以受试者工作曲线确定血清miR-92a-3p的CRC诊断效能.结果 CRC术前组血清miR-92a-3p的表达水平高于结直肠腺瘤息肉组(Z =4.75,P<0.01)、CRC术后组(Z=4.28,P<0.01)和健康人对照组(Z=8.00,P<0.01);健康人对照组血清miR-92a-3p的表达水平低于CRC术后组(Z=4.08,P<0.01)和结直肠腺瘤息肉组(Z=2.70,P=0.01);结直肠腺瘤息肉组和CRC术后组的血清miR-92a-3p的表达水平差异无统计学意义(Z =0.99,P=0.32);血清miR-92a-3p鉴别CRC的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.899 (95% CI:0.840~0.959),当cut off值为2.75时,敏感性和特异性均为80%;血清miR-92a-3p的高低与CRC的浸润深度(Z=2.14,P=0.03)、淋巴结转移(Z=2.86,P=0.04)、TNM分期(Z=2.93,P<0.01)等临床病理参数关系密切.结论血清miR-92a-3p可能为临床上CRC的筛查、病情监测等方面提供实验室依据.【总页数】4页(P756-759)【作者】温淑娴;温旺荣【作者单位】暨南大学附属第一医院临床检验中心,广州510632;暨南大学附属第一医院临床检验中心,广州510632【正文语种】中文【中图分类】R735.3【相关文献】1.结直肠癌患者血清基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1及趋化因子配体21表达水平及临床意义 [J], 贾冬梅;刘萍;陈桦;张采欣2.结直肠癌患者血清和组织中EGFR、HER-2表达水平及临床意义 [J], 俞华;陈骏毅;周凌;柳汉荣3.溃疡性结肠炎和结直肠癌患者血清MUC1的表达水平及临床意义 [J], 邓磊;何松;赵晓莉4.结直肠癌患者血清中免疫相关因子的表达水平及临床意义 [J], 郭小艳5.结直肠癌患者血清HPSE及VEGF表达水平检测及临床意义研究 [J], 吴火友;向高;吴祖蛟;穆建成;余桂华;魏金凤因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

内皮细胞缺氧后miR-210、 miR-92a、miR-126表达及意义

内皮细胞缺氧后miR-210、 miR-92a、miR-126表达及意义

内皮细胞缺氧后miR-210、 miR-92a、miR-126表达及意义刘芬;娄远蕾;阮琼芳;谢安;李勇;崔苏萍;汪泱【摘要】目的进一步探讨缺氧后血管新生的调控机制.方法常规方法培养人微血管内皮细胞,低氧培养箱制备内皮细胞缺氧模型(观察组),正常细胞作为对照组.采用real time PCR法检测两组内皮特异性microRNA (miR-210、miR-92a、miR-126)表达变化.结果与对照组比较,miR-210、miR-92a、miR-126分别上调了(5.19±0.99)、(3.02±0.88)、(3.87±0.83)倍,P均<0.05.结论缺氧可促使内皮细胞特异性microRNA表达改变,此可能为缺氧后血管新生的主要调控机制.%Objective To investigate the control mechanism of angiogenesis after hypoxia. Methods Human micro-capillary endothelial cells(HMEC)were cultured commonly, and hypoxia model of endothelial cells was prepared with hypoxia incubator( observed group) , the normal cells was taken as control group. The expression of miR-210, miR-92a, miR-126 were detected by real time PCR method. Results It showed a significant up-regulation of miR-210, miR-92a, miR-126 in observed group compared to control group, about 5.19 ±0.99, 3.02 ±0.88 and 3.87 ±0. 83 fold changes respectively. Conclusion Hypoxia can promote the changes of specific microRNA in endothelial cells, which maybe the main control mechanism of angiogenesis after hypoxia.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2011(051)039【总页数】2页(P4-5)【关键词】miR-210;miR-92a;miR-126;人微血管内皮细胞【作者】刘芬;娄远蕾;阮琼芳;谢安;李勇;崔苏萍;汪泱【作者单位】南昌大学第一附属医院,南昌330006;南昌大学第一附属医院,南昌330006;南昌大学第一附属医院,南昌330006;南昌大学第一附属医院,南昌330006;南昌大学第一附属医院,南昌330006;南昌大学第一附属医院,南昌330006;南昌大学第一附属医院,南昌330006【正文语种】中文【中图分类】R331.3研究证实,脏器缺血缺氧后可出现代偿性的血管新生;microRNA与血管新生密切相关。

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山东 医药 2 0 1 5年第 5 5卷第 2 2期
结肠 癌组 织及 细胞 中 m i R . 9 2 a的 表 达 变 化 及 其 意 义
柳辰 昊 , 谭 志军
( 1天 津 医科 大学一 中心临床 学院 , 天津3 0 0 0 7 0; 2天 津 市第一 中心 医院 )
摘 要: 目的
a n d t o e x p l o r e i t s c l i n i c a l s i g n i i f c a n c e .Me t h o d s ① T h e r e l a t i v e e x p r e s s i o n l e v e l s o f m i R - 9 2 a i n t h e t i s s u e s o f 7 5 p a —
u s i n g t h e e q u a t i o n 2
<0 . 0 5 ) , 细胞凋亡率高于其余三组 ( P均 < 0 . 0 5 ) 。结论
细 胞 化 疗 敏 感 利 铂 ; 细胞 凋 亡
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 0 0 2 - 2 6 6 X. 2 0 1 5 . 2 2 . 0 0 6
结肠癌组织 中 m i R - 9 2 a表达水平 升高。结 肠癌患者术
后 局 部 复 发 及远 处 转 移 与 结 肠 癌组 织 中 mi R - 9 2 a相对 表 达 量 有 关 。抑 制 结 肠 癌 细 胞 中 m i R - 9 2 a 表 达 可增 加结 肠 癌
中 图分 类 号 : R 7 3 5 . 3
仪上读取各组波长为 4 5 0 n m处的吸光度 ( A ) 值。转染 4 8 h后加 5 0 g / m L奥沙利铂作用 2 4 h , 采用 T U N E L法测算
达 水 平 与 患者 性 别 、 年龄 、 肿瘤 部 位 、 浸 润深 度 、 有无 淋巴结转移 、 脉管癌栓和病 理分化程度无 关( P均 > 0 . 0 5 ) , 与 术 后 局部 复 发 及 发 生 远处 转 移 有 关 ( P< 0 . 0 5 ) 。H T - 2 9细 胞转 染 后 2 4 、 4 8 、 7 2 h实 验 组 A值 均 低 于 其余 三 组 ( P均
' ⅣG C h e n . h a o .T A N Z . i u n
( e F i r s t C e n t r a l C l i n i c a l C o l l e g e o f T i a n j i n Me d i c a l U n i v e r s i t y , T i a n j i n 3 0 0 0 7 0 , C h i n a )
观察结肠癌组织及结肠癌细胞 中 m i R - 9 2 a 表 达变化 , 并探讨其 临床意义。方法
①选择 Ⅱ期 合
并高危 因素及 Ⅲ期结肠癌患者 7 5例为研究对象 , 采用实时荧光定量 P C R方法和 2
法测算结肠癌组织 mi R - 9 2 a
的相对表达量 , 分析 m i R - 9 2 a相对表达量与患者临床病理参数的关系。② 取常规培养的结肠癌细胞株 H T . 2 9接种 于9 6孑 L 板, 设实验组 、 阴性对 照组 、 脂 质体组和对照组 , 各 3个复孔 。实验组转染 m i R - 9 2 a 抑制剂 , 阴性对 照组转染
t i e n t s w i t h s t a g e s I 1 w i t h h i g h r i s k f a c t o r s o r s t a g e sⅢ c o l o n c a n c e r w a s d e t e c t e d b y r e a l - t i me q - P C R a n d w a s c a l c u l a t e d b y
文 献标 志 码 : A
文章编号 : 1 0 0 2 — 2 6 6 X ( 2 0 1 5 ) 2 2 - 0 0 2 0 - 0 4
E x p r e s s i o n c h a n g e s o f mi R- 9 2a i n c o l o n c a n c e r t i s s u e s a n d c e l l s a n d i t s s i g n i f i c a n c e
对照寡核苷 酸 , 脂质体组转染脂 质体 , 对照组不作 任何 处理 , 转染后检 测 m i R - 9 2 a 表 达以验证转染效果 , 转染次 日
细胞贴壁生长后加 5 O 各组细胞凋亡率 。结果 m L奥沙利铂作用 2 4 h , 分别在 2 4 、 4 8 、 7 2 h加入 1 O I x L C C K . 8溶液 , 3 7℃孵育 2 h , 在酶标 结肠癌组织 中 mi R - 9 2 a 相对表达量显著高于癌旁正 常组织 。结肠癌组织 中 mi R - 9 2 a的表
A b s t r a c t : 0b j e c t i v e T o o b s e r v e t h e e x p r e s s i o n c h a n g e s i n l e v e l s o f mi R 一 9 2 a i n t h e c o l o n c a n c e r t i s s u e s a n d c e l l s
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