D-半乳糖致衰老模型小鼠皮肤衰老的观察

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骨髓间充质干细胞对D-半乳糖衰老模型小鼠的实验研究

骨髓间充质干细胞对D-半乳糖衰老模型小鼠的实验研究
【 关键 词】骨髓 间充质 干 细胞 ; 老 ; 衰 D一半 乳糖 ; 氧 化 物歧 化 酶 ; 超 丙二 醛 ; 胱 甘 肽过 氧 化物 酶 谷 [ 中图分 类 号】 3 R一 3 【 献 标识 码】A 文 【 章 编号】 1 7 — 7 1 2 0 O b) O 5 0 文 6 4 4 2 ( 0 9) 4( 一 O — 3
【 sr c】ob et e oiv s gt h te o emarw mee c y lse e1 h v h ni a ig rl. to s Ab ta t jci :T net aew eh rb n r sn h ma tm c1 aetea t— 1n 0e Meh d : V i o s g A l e eb n r sn h ma s m e sw r v nt c yvn a d l t e o sijc 0 n — aats l g n o emamw mee cy 1 t c U ee e o mieb e ac u ai i mvn u ne t n ad D glc e 0 e sn i 0 w r netdit en u ctn o so c 0 ih e k . h n tea it f td f c , eb d eg tte ee jce not 印es b ua e u f mi fregt e s T e , h1yo u yo e t o yw ih , i h e w h i s mi h h
射 建立 衰 老小 鼠模 型 , 于模 型 建成 后 给 予 骨髓 间 充质 干 细胞 输 注 。检 测 间充 质 干 细胞 治 疗 前后 衰 老 相关 指 标 : 并 小 鼠体 重 , 免疫 器 官 重量 , 组 织 、 清 S 肝 血 0D活 力 和 MD 含量 , 血 GS P A 全 H— x活 力 的变 化 , 面 考察 骨髓 间充 质 干 细 全 胞 的抗 衰 老作 用 结果 : 骨髓 间 充质 干 细胞 能 对抗 D一 乳 糖所 致 小 鼠肝 组 织 和血 清 中 MD 半 A含 量 的 升 高 , 高 肝 和 提 血 清 S D、 血 G H— x的活力 , 0 全 S P 并对 抗 小 鼠体 重 、 胸腺 及 脾脏 指 数 下 降 。结论 : 骨髓 间 充 质干 细 胞能 改 善 D 半 乳 糖 一 衰 老模 型 小 鼠 的衰 老相 关 指标 , 提示 具 有抗 衰 老作 用 。

复方当归提取物对皮肤抗氧化作用实验研究

复方当归提取物对皮肤抗氧化作用实验研究

西安源森生物试验室: 复方当归提取物对D-半乳糖衰老模型小鼠皮肤抗氧化作用最新调查结果显示, 在含有抗氧化作用化妆品中, 含复方当归提取物产品显著更受女性消费者欢迎, 其原因在于, 当归本身所含有除皱、祛斑和美白功效在传统中医药领域已深受认同。

然而, 复方当归提取物可用作皮肤抗氧化具体原理是什么呢?此次试验, 西安源森生物试验室将针对此疑问, 选择优质含复方当归提取物乳、面膜等多个类型护肤品, 共同作用于D-半乳糖衰老模型小鼠皮肤, 测定其对小鼠皮肤超氧化物和含水量影响。

一、试验目、材料和方法【试验目】: 含复方当归提取物护肤品对皮肤抗氧化作用。

【试验方法】: 测试含复方当归提取物护肤品对D- 半乳糖衰老模型小鼠皮肤羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)以及皮肤含水量影响。

【试验对象】: ICR 3 月龄小鼠30 只。

【试验仪器】: FA/JA型电子天平, DY89-1 型电动玻璃匀浆机, 752N 型紫外分光光度计。

【试验用试剂】: 超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒, 羟脯氨酸(Hyp)试剂盒, 考马斯亮蓝蛋白测试盒, D- 半乳糖。

【受试药品】: 复方当归提取物由西安源森生物制剂中心制备。

DGCC为清洁乳、按摩霜、成型面膜及滋润霜, 由西安源森广州产品研究中心监制。

【试验步骤】:1. 动物分组、造模及给药:将30只小鼠随即分为三组, 每组10只。

正常对照组: 天天小鼠颈背部皮下注射等容量生理盐水;D-半乳糖组: 天天给小鼠颈背部皮下注射12.5% D- 半乳糖(1 000mg/kg);DGCC 组: 天天小鼠颈背部皮下注射12.5% D- 半乳糖(1000mg/kg), 并用剃毛器剃去背部被毛, 暴露大小约2cm×3cm 皮肤, 用DGCC 清洁乳涂抹和清水清洗, 再用DGCC面膜敷贴于暴露部位30min, 然后用DGCC 按摩膏按摩1min, 最终外涂DGCC 滋润霜。

2. 衰老小鼠皮肤SOD 活力和皮肤总羟脯氨酸含量测定:42天后, 将各组小鼠同时处死, 取背部脱毛部位皮肤组织块, 经预冷生理盐水漂洗, 除去皮下脂肪及结缔组织, 用滤纸拭干, 取0.5g置10ml 烧杯, 加预冷生理盐水, 眼科剪剪碎组织块后, 倒入匀浆管中, 加预冷生理盐水至5ml, 用电动玻璃匀浆机制成10%组织匀浆(在冰水中进行), 然后反复冻融3 次, 其完全破碎, 细胞内容物完全游离液相中。

草还丹、人参固本丸和二至丸对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗衰老作用的研究

草还丹、人参固本丸和二至丸对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗衰老作用的研究
Anti-aging effect of Caohuandan, Ginseng guben pills and Erzhi pills on D-galactose-induced aging mice FANG Zhe1,4, CHEN Suhong2, FANG Hui3,4, SU Jie4, LYU Guiyuan4. 1 Department of Medical Matters, Department of Pharmacy, Third People's Hospital of Hangzhou Y uhang District, Hangzhou, Zhejiang province, 311115, China; 2 Zhejiang University of Technology, Hangzhou, Zhejiang province, 310014, China; 3 The Chinese PeopleĽ Hospital, Hangzhou, Zhejiang province, 310013, China; 4 Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou, Zhejiang province, 310053, China
浙江中西医结合杂志 2019 年第 29 卷第 7 期 Zhejiang JITCWM(Vol.29 No.7 2019)
543
草还丹、人参固本丸和二至丸对 D-半乳糖 致衰老模型小鼠抗衰老作用的研究
方 哲 1,4 陈素红 2 方 慧 3,4 苏 洁 4 吕圭源 4
摘 要 目的 探讨草还丹、人参固本丸、二至丸对 D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用。方法 72 只 ICR 小鼠,随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(VE,0.05g/kg)、草还丹组(4.5g/kg)、人参 固本丸组(4.5g/kg)、二至丸组(4.5g/kg),每组 12 只,雌雄各半。除正常对照组外,其余各组采用颈背 部皮下注射 D-半乳糖(100mg/kg),建立小鼠衰老模型。造模同时,灌胃给予受试药,连续 42 天。观 察小鼠体征,测量自主活动、学习记忆能力、抓力。末次给药后各组禁食不禁水,12h 后摘眼球取血, 对小鼠骨强度、血脂、睾丸系数、精囊腺系数进行测定。结果 与模型组比较,三个复方组均能提高 衰老小鼠抓力、骨强度、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、睾丸、精囊腺系数,降低 Morris 水迷宫持续 时间和总路程、葡萄糖(GLU-OX)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)。草还丹组和人参固本丸组能提高小鼠自主活动。结论 草还丹、人参固本丸和二至丸可延缓 D-半乳糖所致衰老模型小鼠的衰老作用,改善精神萎靡、筋骨乏力、记忆减退、性腺萎缩等症状,该 作用特征可认为是这三种中药复方延缓衰老的共同规律。 关键词 小鼠;衰老;D-半乳糖;草还丹;人参固本丸;二至丸

鹿脑小分子活性肽对D-半乳糖所致衰老模型小鼠的保护作用

鹿脑小分子活性肽对D-半乳糖所致衰老模型小鼠的保护作用

鹿脑小分子活性肽对D-半乳糖所致衰老模型小鼠的保护作用※●陈克成1,4 魏 宇2 丁云录3 陈浩诚4 李庆杰3※※ 刘 爽1※※ (1.吉林金梓源生物科技有限公司 吉林 四平 136000; 2.吉林农业大学中药材学院 吉林 长春 130118; 3.长春中医药大学附属医院 吉林 长春 130021; 4.澳大利亚三叶草健康研究院 澳大利亚 悉尼 NSW 2000)摘要:文章研究了鹿脑小分子活性肽对D-半乳糖所致衰老模型小鼠的保护作用和机制。

试验分为正常对照组、模型对照组、阳性对照药组、鹿脑小分子活性肽设高、中和低3个剂量组,共6组,每组10只小鼠。

通过皮下注射150mg/kg D-半乳糖来构建小鼠衰老的动物模型,同时给予供试药物,试验周期为6周。

以学习记忆行为、脑病理组织观察、脏器指数、脑组织BDNF、NGF含量和BDNF蛋白表达为检测指标,结果发现鹿脑小分子活性肽100mg/kg、50mg/kg和25mg/kg三个剂量组逃避潜伏期显著缩短、穿台次数显著增加,胸腺指数有不同程度增加,脑组织中BDNF含量及蛋白表达明显升高;100mg/kg、50mg/kg两个剂量组小鼠脑组织中NGF含量明显升高,脑、脾脏指数均有不同程度增加,分别与模型对照组比较有显著差异(P<0.01或P<0.05);鹿脑小分子活性肽能明显改善脑组织病理改变。

研究表明鹿脑小分子活性肽具有明显的抗衰老作用,其机制可能与BDNF表达、提高机体免疫能力 有关。

关键词:鹿脑小分子活性肽;D-半乳糖;抗衰老;保护机制衰老伴随着记忆力下降、免疫力低下、细胞凋亡、氧化物水平升高以及脑、胸腺、脾脏、肝、肾等组织器官的退化及病变。

衰老是不可避免的,但减慢衰老的速度是可行的,因此找到具有确切效果且作用机制明确的抗衰老药物是非常重要的。

梅花鹿作为重要的药用动物资源已经被广泛研发和应用,药用及保健价值巨大,但鹿脑除了古人应用并记载其具有补骨髓、补虚劳、益脑等作用外,尚未在现代医药行业中见到对其研究和应用,为更好地利用鹿脑,本文对鹿脑小分子活性多肽进行了初步研究。

参七汤对D-半乳糖致衰老大鼠模型作用的实验研究

参七汤对D-半乳糖致衰老大鼠模型作用的实验研究

参七汤对D-半乳糖致衰老大鼠模型作用的实验研究参七汤对D-半乳糖致衰老大鼠模型作用的实验研究摘要:近年来,衰老成为全球关注的焦点之一。

D-半乳糖作为一种常见的含糖成分,与衰老密切相关。

本研究旨在探究参七汤在D-半乳糖致衰老大鼠模型中的作用,以期提供参七汤在抗衰老领域的临床应用指导。

方法:本实验使用40只雄性SD大鼠,将其随机分为4组:正常对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量参七汤处理组(C组)和高剂量参七汤处理组(D组)。

除对照组外,其余3组饮用30% D-半乳糖溶液喂养。

C组和D组分别在D-半乳糖喂养的同时口服低剂量和高剂量的参七汤提取物,实验持续8周。

采用各项生理指标、组织病理学和电镜观察方法来评估参七汤对D-半乳糖诱导的衰老模型的干预效果。

结果:与B组相比,C组和D组大鼠的体质量、皮肤弹性和毛发质量均得到明显改善。

经过血清生化分析,发现参七汤能显著提高血液中超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并降低丙二醛(MDA)和氢过氧化物(H2O2)的水平。

此外,C组和D组大鼠的心脏、肝脏和肾脏组织病理学改变较少,细胞色素C氧化酶活性也得到增强。

结论:本研究结果表明,在D-半乳糖致衰老大鼠模型中,参七汤可显著改善衰老鼠的生理指标,提高抗氧化酶活性,并抑制氧化应激,从而减轻衰老进程。

这为参七汤在抗衰老领域的临床应用提供了初步实验证据。

然而,进一步研究仍然需进行,以明确其具体的分子机制和剂量效应综上所述,本研究结果表明,在D-半乳糖诱导的衰老大鼠模型中,口服参七汤能有效改善生理指标,提高抗氧化酶活性,并抑制氧化应激反应,从而减轻衰老进程。

这些发现为参七汤在抗衰老领域的临床应用提供了初步实验证据。

然而,进一步研究仍需进行,以明确其具体的分子机制和剂量效应。

2024年注射D―半乳糖致大鼠衰老效应的评价

2024年注射D―半乳糖致大鼠衰老效应的评价

2024年注射D―半乳糖致大鼠衰老效应的评价D-半乳糖是一种广泛应用于动物衰老研究的试剂,通过注射D-半乳糖可以诱导实验动物产生类似自然衰老的生理和生化变化。

在本研究中,我们采用了连续注射D-半乳糖的方法,以制造大鼠衰老模型。

具体方法如下:首先,选择健康成年大鼠作为实验对象,并将其随机分为实验组和对照组。

实验组大鼠每天接受一定量的D-半乳糖溶液注射,而对照组则注射等量的生理盐水。

注射时间持续数周至数月不等,以便充分诱导衰老效应。

在注射过程中,我们严格控制了注射剂量和频率,以确保实验结果的可靠性和可重复性。

同时,我们还密切观察了大鼠的生长状况、体重变化以及行为表现,以便及时发现并处理可能出现的异常情况。

二、大鼠衰老指标评估为了评估D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响,我们选取了一系列衰老指标进行测定。

这些指标包括体重、毛发状况、皮肤弹性、肌肉力量、运动能力、记忆力和学习能力等。

通过定期测量大鼠的体重,我们发现实验组大鼠的体重增长速度明显减缓,甚至出现了体重下降的情况。

此外,实验组大鼠的毛发变得稀疏、干燥且失去光泽,皮肤弹性也显著下降。

这些外观上的变化表明D-半乳糖注射对大鼠的衰老产生了明显的影响。

在评估肌肉力量和运动能力方面,我们采用了抓握力测试和跑步机测试等方法。

结果显示,实验组大鼠的抓握力和运动能力均较对照组明显降低,表明其肌肉力量和运动能力受到了损害。

在记忆力和学习能力方面,我们使用了迷宫测试和条件性反射等方法进行测定。

实验组大鼠在迷宫测试中的表现较差,需要更长的时间才能完成任务;而在条件性反射测试中,实验组大鼠的反应速度和准确性也低于对照组。

这些结果表明D-半乳糖注射对大鼠的神经系统功能产生了负面影响。

三、组织病理学检查为了更深入地了解D-半乳糖注射对大鼠衰老的影响,我们进行了组织病理学检查。

通过采集大鼠的肝脏、肾脏、心脏和脑组织等样本,我们观察了这些器官的组织结构和细胞形态变化。

结果显示,实验组大鼠的肝脏和肾脏出现了明显的病理变化,如肝细胞脂肪变性、肾小球硬化等。

D半乳糖诱导生物体衰老与细胞衰老模型的实验研究

D半乳糖诱导生物体衰老与细胞衰老模型的实验研究
became,action slack and lagging,less of the wcight'hair scoch and less luster and had more sleeps.The results showed that MDA contents of normal control group,decreased more significantly than that in D-gal group,and the activity of SOD increased more significantly than that in D-gal group. 2.Cell Senesoence:After treatment with D-galatose,mesenchymal stem cells displayed morphological and biological changes of cell senescence with the senescenctive characteristic morphological markers;80 percents of cells are X-Gal dye masculine,singal cell gel electrophoresis show DNA damnification.flow cytometer shows 90 per cells stay in Go,G1,but S and Ge/M disapperd almost.While the comparison has not these senescencive phenomena.The results also showed that MDA contents of normal control group,decreased more significantly than that in D—gnl group,and the activity of SOD increased more significantly than that in

d-半乳糖模型鼠与自然衰老鼠的比较研究

d-半乳糖模型鼠与自然衰老鼠的比较研究

第6期刘克明,等.D一半乳糖模型鼠与自然衰老鼠的比较研究6872结果2.1细胞免疫功能迟发型变态反应(足趾增厚法)显示,虽然自然衰老组[(O.504±o.04)ram]和D.半乳糖模型组[(0.502±o.06)ram]小鼠攻击前后足趾厚度差值与其对照组[(O.544±o.08)衄]相比有所降低,但差异无显著性(P>0.05)。

2.2体液免疫功能2.2.1小鼠半数溶血值(HC。

)结果由表1可见,自然衰老组小鼠半数溶血值(HC。

)低于正常对照组(P<O.05),D_半乳糖模型组与正常对照组相比差异无显著性。

2.2.2小鼠抗体生成细胞试验结果由表1可见,虽然自然衰老小鼠和D一半乳糖模型小鼠抗体生成细胞数低于正常对照组,但经统计学分析各组间差异均无显著性(P>o.05)。

表1不同衰老小鼠半数溶血值(HCse)和抗体生成细胞结果TaMe1Theresultsofhalfhemolysisconcentrationandplaqueformingcelltestinthreemouseagingmodels(n=10。

王±s)注:与正常对照组比较(1)P<0.052.3不同衰老小鼠NK细胞活性结果自然衰老组和D-半乳糖模型组NK细胞活性[分别为(23.1±4.1)%和(26.2±3.9)%]与正常对照组[(25.9±3.9)%]相比,差异无显著性(P>0.05)。

免疫试验结果显示,自然衰老组体液免疫功能HC。

低于正常对照组(P<0.05)。

D一半乳糖模型组小鼠体液免疫功能较正常对照组降低不明显,提示由年轻鼠给予D一半乳糖造成的衰老模型免疫功能方面与自然衰老可能存在差异。

2.4小鼠肝组织SOD活性和MDA含量由表2可见,自然衰老组和D一半乳糖模型组SOD活性均低于对照组(P<0.01)。

自然衰老组和D一半乳糖模型组MDA含量均高于其对照组(P<0.05)。

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D-半乳糖致衰老模型小鼠皮肤衰老的观察
关键词: 皮肤衰老 半乳糖2008-07-14 00:00 来源:丁香园 点击次数:1741
[摘要] 目的 观察D-半乳糖连续皮下注射对小鼠皮肤衰老指标的影响。方法 3月龄KM雌性
小鼠60只,随机分为空白对照组(注射生理盐水)、D-半乳糖低剂量组(80mg/kg)和D-半乳糖
高剂量组(1000mg/kg),连续每日背部皮下注射42天后,观察小鼠皮肤中与衰老相关的生化指
标及组织病理学变化,并用计算机图像分析系统定量分析。结果 高剂量组小鼠真皮厚度
〔(624.5±48.5)μm〕较对照组〔(839.3±58.4)μm〕显著变薄(P<0.05),胶原纤维减少,排列疏
松,弹力纤维总面积亦显著减少(P<0.05);高剂量组皮肤中超氧化物歧化酶(SOD)活性
〔(131.2±11.5) U/ml〕、羟脯氨酸含量〔(0.57±0.13)μg/mg〕显著低于对照组的〔(178.1±20.7)
U/ml、(0.74±0.17)μg /mg,P<0.05〕,丙二醛(MDA)含量增加〔(9.4±1.5)nmol/g和
(6.8±1.5)nmol/g,P<0.05〕;而低剂量组上述改变则不显著。结论 每日1000mg/kg D-半乳
糖连续皮下注射42天,可导致小鼠皮肤的明显衰老,为抗皮肤衰老研究提供一个简便、稳定
的实验模型。

衰老是生物体在生命周期中随年龄增长而发生的全身组织、器官功能减退和稳态下降的过
程。随着世界人口加速老龄化,抗衰老研究已成为迅速崛起的一门应用科学。若在人体上进
行这一漫长衰老过程的研究及对抗衰老药物进行疗效观察是不易做到的,因此,人们根据衰
老的机制建立了许多动物衰老模型。目前,应用最多的是D-半乳糖所致的亚急性衰老模型,
它可引起心、肝、肾、脑等重要器官的代谢异常,类似人类自然衰老时的表现[1]。我们于2003
年1~6月采用KM雌性小鼠连续皮下注射D-半乳糖,建立小鼠亚急性衰老模型,观察衰老小
鼠皮肤中与衰老相关的生化指标及组织病理学变化,为皮肤抗衰老研究提供实验工具。

材料和方法
一、材料与仪器
1.实验动物:选用3月龄清洁级KM雌性小鼠60只(广东医学院实验动物中心提供),平均体重
(30±2)g,标准饲料饲养。

2.实验仪器:AE-240型电子分析天平(上海Mettler-Toledo仪器有限公司),JB-2型恒温磁力搅
拌器(上海雷磁仪器厂),SHHW21.600三用电热恒温水浴箱子(天津市华北实验仪器有限公
司),DHG-9070型电热恒温鼓风干燥箱子(上海医用恒温设备厂),752型紫外分光光度计(上
海第三分析仪器厂),内切式组织匀浆机(浙西机械厂);55P-72超速离心机(日本Hitacht公司);
计算机图象数字化分析系统(德国LEICA公司)。

3.主要试剂:D-半乳糖(上海试剂二厂);盐酸苄胺(上海试剂厂);硫代巴比妥酸(TBA,美国
Sigma公司);四乙二氧基丙烷(瑞士Fluka公司);L-羟脯氨酸(中科院上海生化所);DTNB(德国
Feinbiochemica公司);超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒(南京建成生物科技公司);考马斯亮蓝
G250(瑞士Fluka公司);其余试剂均为市售分析纯。

二、实验方法
1.动物分组、给药及处理:动物随机分为3组:空白对照组、D-半乳糖低剂量组和D-半乳糖高
剂量组,每组20只。对照组:每日背部皮下注射生理盐水0·2 ml。低剂量组:每日背部皮下注
射D-半乳糖80 mg/kg;高剂量组:每日背部皮下注射D-半乳糖1000 mg/kg,注射均按无菌操
作进行。42天后,所有小鼠摘眼球放血处死,立即检测全血中过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过
氧化物酶(GSH-Px)活力;取背部正中皮肤0.5 cm×0.5 cm大小,迅速放入10%中性福尔马林
液中固定,拟作组织切片进行组织形态学观察及定量分析;余背部皮肤取下后迅速冰冻保存,
拟作皮肤组织匀浆及测定皮肤羟脯氨酸之用。

2.10%皮肤匀浆的制备:取脱毛背部皮肤组织0.5 g,经预冷生理盐水漂洗,除去皮下脂肪和其
它结缔组织,滤纸拭干,称重,量筒量取该组织块9倍重量预冷生理盐水,用内切式组织匀浆机
制成10%组织匀浆(在冰水中),反复冻融3次,使细胞完全破碎,内容物全部游离在液相中。

3.全血CAT及GSH-Px活力测定:取新鲜30% H2O2液0.5 ml加蒸馏水50 ml混匀,从中取
出4 ml,加入pH7.0的0.05 mol/L磷酸盐缓冲液26 ml,紫外分光光度计测定其230 nm波长
处1 cm光路A值,调节A值在0.50~0.55之间,作为CAT底物液。25℃条件下,取底物液3 ml,
迅速加入1:50溶血液0.01 ml,230 nm波长处立即测定其A值,1min后再测其A值,同时测
定蛋白质含量。GSH-Px活力测定参照南京建成生物工程公司GSH-Px试剂盒说明书方法
测定。

4.组织切片染色法:参考文献(2)。弹力纤维染色采用Weigert's间苯二酚品红法;胶原纤维染
色采用Mallory-Heidenhain's改良法。

5.皮肤生化指标的测定:参照南京建成生物工程公司SOD试剂盒说明书方法测定SOD活力;
皮肤中丙二醛(MDA)含量测定、皮肤CAT活力测定、皮肤羟脯氨酸含量测定参见文献(3)。

三、统计学处理
数据采用均数±标准差表示,组间比较采用t检验。
结 果
一、全血CAT、GSH-Px活力检测结果
见表1。高剂量组血中CAT、GSH-Px活力较对照组显著降低,差异有显著性(P<0.05);而低
剂量组改变不显著。

二、皮肤组织病理学形态观察及定量分析
见表2及图1~6。与对照组比较,高剂量组小鼠真皮显著变薄,细胞层数减少,真皮胶原纤维排
列疏松;弹力纤维总面积显著减少,且增粗、变性、堆积。计算机图像定量分析,差异均有显著
性,而表皮厚度改变不明显。低剂量组皮肤组织形态学改变不明显。
三、小鼠皮肤生化指标检测结果
与对照组相比,高剂量组小鼠皮肤中SOD活力明显降低,MDA含量显著增多,而皮肤CAT活
力检测结果因各组标准差太大,无统计学意义;低剂量组皮肤组织生化指标改变不明显,见表
3。

讨 论
D-半乳糖所致的亚急性衰老模型系在一定时间内通过皮下连续注射D-半乳糖,使机体细胞内
半乳糖浓度增高,在醛糖还原酶催化下,还原成半乳糖醇,该物质不能在细胞内进一步代谢而
堆积,影响细胞正常渗透压,导致细胞代谢紊乱,自由基堆积,造成细胞损伤〔3〕;又由于糖代谢
在三大物质代谢中具有重要作用,糖代谢的紊乱进而影响到蛋白质、脂质的代谢,也影响到细
胞内抗氧化酶的合成,从而使细胞清除自由基的能力下降,细胞发生一系列退行性变化,呈现
衰老状态[4]。如青年鼠造模后,某些衰老指标检测可达21月龄的自然衰老小鼠的衰老程度
[1,5]

本实验结果显示,小鼠每日D-半乳糖(1000mg/kg)连续皮下注射42天可导致小鼠皮肤细胞代
谢紊乱,皮肤SOD活性明显降低,提示皮肤自由基防护功能下降;皮肤MDA含量较对照组显
著增多,表明脂质过氧化产物堆积;而皮肤羟脯氨酸含量较对照减少,表明小鼠皮肤胶原蛋白
含量减少,皮肤趋于老化;皮肤CAT活力检测结果因各组标准差太大,不宜作为皮肤抗衰老指
标。皮肤组织学显示,小鼠皮肤真皮层显著变薄,胶原纤维减少,排列疏松,弹力纤维变性、堆
积,皮肤处于衰老状态,该模型简便易行,结果稳定可靠,可作为抗皮肤衰老研究中皮肤衰老的
实验模型。

参 考 文 献
1 李文彬,韦丰,范明,等.D-半乳糖在小鼠上诱导的拟老化效应.中国药理学与毒理学杂
志,1995,9:93-95.

2 刘培辉,主编.病理染色技术.第2版.北京:人民卫生出版社,2000. 56-61.
3 徐叔云,陈修,主编·药理实验方法学.第3版·北京:人民卫生出版社,2002.1464-1472.
4 Chung JH, Seo JY, Choi HR, et al·Modulation of skin collagen metabolism in aged and
photoaged human skin in vivo.J Invest Dermatol,2001,117:1218-1224.

5 Frolkis VV.Aging, anti-aging, ontogenesis and periods of age
development.Gerontology,1999,45:227-232.

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