VersaMax 读板机 用于96孔板格式的可调波长读板机
基于ARE-Nrf2的皮肤致敏体外检测方法及其在样品检测中的应用
基于ARE-Nrf2的皮肤致敏体外检测方法及其在样品检测中的应用刘春凤; 张丽婷; 李小林; 施镇; 张子龙; 李健; 陈田; 邱璐【期刊名称】《《中国比较医学杂志》》【年(卷),期】2019(029)012【总页数】8页(P23-30)【关键词】ARE-Nrf2; 皮肤致敏; 替代方法; 混合物成品【作者】刘春凤; 张丽婷; 李小林; 施镇; 张子龙; 李健; 陈田; 邱璐【作者单位】上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海 200135; 上海家化联合股份有限公司启初研究中心上海 200082; 上海国际旅行卫生保健中心上海200335【正文语种】中文【中图分类】R-33由皮肤过敏引起的过敏性皮炎占皮肤相关疾病的15%～20%[1],因此对接触皮肤的化学品及化妆品进行过敏性测试是安全性评价的重要项目。
现在大部分皮肤致敏测试仍然依赖于动物测试,小鼠局部淋巴结检测(LLNA)作为一种替代方法,以淋巴结的T细胞增殖定量测定代替皮肤临床症状观察[2],可以减少实验动物的使用量,可取代传统动物实验：豚鼠的经典方法、几内亚猪最大化试验(GPMT)和Buehler试验(OECD TG 406),但没有实现完全替代。
随着2013 年欧盟相关法规实验动物禁令的推行[3-5],样品检测对体外方法的需求越来越多。
致敏检测体外方法的研发基于有害结局路径(Adverse Outcome Pathway,AOP)的概念,将皮肤致敏的过程分为四个关键事件,基于每一个关键事件的分子起始事件都有对应的体外测试方法被开发,有些已被列入世界经济合作和发展组织(OECD)测试指南TG442,如直接多肽反应试验(direct peptide reactivity assay,DPRA)[6]、ARE-Nrf2 荧光素酶方法[7]、人细胞系活化实验(human cell line activation test, h-CLAT)[8]等。
扎伊尔埃博拉病毒糖蛋白泛MHC Ⅱ限制性表位预测及验证
308细胞与分子免疫学杂志（Chin J Cell M ol Immunol)2021，37(4)•论著•文章编号：1007-8738(2021 )04>0308"07扎伊尔埃博拉病毒糖蛋白泛m h c n限制性表位预测及验证刘洋1A，孙昊1△，陆振华2,兰明福、许家豪、孙报增\姜东伯杨琨W(空军军医大学，基础医学院免疫学教研室，2军事预防医学系军队防疫与流行病学教研室，陕西西安710032)[摘要]目的生物信息学预测获得埃博拉病毒（E B0V)糖蛋白泛主要组织相容性复合体n(MHC I I)限制性优势表位，分析 其特征并筛选鉴定可用于疫苗研制的候选对象。
方法通过IEDB分析预测EBOV糖蛋白的优势表位，并对优势表位进行聚类 分析，保守性分析和分子对接。
同时，利用编码糖蛋白DNA的质粒PVAX-GP免疫小鼠，酶联免疫斑点试验（ELISpot)验证预测 获得的表位。
结果在构成人群覆盖率达99%的人类白细胞抗原n(HLA I I)超家族限制性15表位肽预测中筛选获得19个优 势表位，H-2筛选获得13个优势表位。
ELISpot结果显示PVAX-GP可诱导小鼠脾细胞产生针对合成优势表位的细胞免疫反应，其中表位LFLRATTELRTFSIL和GYYSTTIRYQATGFG在C3H小鼠体内具有显著激活细胞免疫反应的效果。
保守性分析结果中 存在种间和种内均保守的优势表位，不存在种内不保守而种间保守的优势表位。
分子对接显示实验鉴定的两条优势表位可在 人HLA II类超家族分子中均可获得良好的对接分数，进一步肯定其在人群免疫中应用的可行性。
结论多肽LFLRATTELRTFSIL 和GYYSTTIRYQATGFG 可作为EB0V 表位疫苗的候选表位。
[关键词]扎伊尔埃博拉病毒(EB0V);泛主要组织相溶性复合体II (pan-MHC II )限制性表位；表位预测；保守性分析；分子对接 [中图分类号]R373.9, R392. 1[文献标志码]APrediction and verification of pan-MHC II restricted epitopes in the glycoprotein of Zaire Ebola virusLIU Yang I A,SUN Hao1A ,LU Zhenhua', Lan Mingfu' ,XU Jiahao1,SUN Baozeng' ,JIANG Dongbo1*, YANG Kun'*1 Department of Immunology, School of Basic Medicine, 2Department of Epidemiology, School of Public Health, Air Force Medical University, X i’an 710032，China* Corresponding authors, E-mail：*******************.cn；**************************[A b s tra c t] Objective To analyze the characteristics of pan-MHC n restricted dominant epitopes of Ebola virus glycoprotein and identify candidate epitopes for vaccine development by bioinformatic prediction and downstream analysis. Methods The dominant epitopes of Zaire Ebola virus glycoprotein were predicted by using lEDB-recommended prediction tool and analyzed by cluster analysis, conservation analysis, and molecular docking. Mice were immunized with the plasmid pVAX-GP encoded glycoprotein DNA, and the predicted epitopes were verified by ELISpot assay. Results There were 19 and 13 dominant epitopes obtained from the prediction of restricted 15-mer epitopes binding to the HLA n superfamily with 99% population coverage and the H-2, respectively. ELISpot assay showed that pVAX-GP induced mouse spleen cells to produce cellular immune responses against synthetic dominant epitopes, among which epitopes LFLRATTELRTFSIL and GYYSTTIRYQATGFG significantly activated cellular immune response in C3H mice. The results of conservation analysis showed that there were dominant epitopes of inter-species conservation and intra-species conservation, yet there were no dominant epitopes of inter-species conservation but no intra-species conservation. Molecular docking showed that the two dominant epitopes identified in the experiment obtained good docking scores in binding to HLA n superfamily molecules, which further confirmed the feasibility of their application in human immunity. Conclusion The polypeptides LFLRATTELRTFSIL and GYYSTTIRYQATGFG can be used as candidates for the Ebola virus epitope vaccine.[Key words] Zaire Ebola virus (EBOV) ；pan-MHC II restricted epitope；epitope prediction；conservation analysis；molecular ctocking收稿日期：2021 >014)3;接受日期：202(M)3-10基金项目：国家自然科学基金（82073154, 81772763)作者简介：刘洋（丨996-),女，陕西西安人，硕士研究生T el：155****0301；E-mail：844702157@A同为第一作者* 通讯作者，杨現，E-mail: yangkunkun@fm m ;姜东伯，E-mail: **************************4期刘洋，等.扎伊尔埃博拉病毒糖蛋白泛M HC n限制性表位预测及验证309扎伊尔埃博拉病毒（Zaire Ebola virus)通常称为 埃博拉病毒（£1)〇13^〇«,£80¥),是一种非节段负链RNA病毒。
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渠道科技集团Channel Technology Group LimitedEnvironmental Pollution Monitoring Instrumentsc生态仪器网站：综合仪器网站：渠道科技集团Channel Technology Group Limited渠道科技多年来专业致力于土壤、植物、环境、水文、气象和动物等生理生态、环境水文领域的教学、科研和应用仪器的销售、研发和服务，是全球几十家同类仪器生产商在中国的销售服务中心。
我们有一支理论扎实，技术过硬的市场和技术人员队伍，并聘请了部分研究院的专家、教授为我们的长期技术顾问，我们可以根据客户的需求和项目特点，为其推荐、整合或集成满足用户需要的仪器设备或系统。
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各潜在供应商
各潜在供应商：
河南省科教仪器设备招标有限公司受委托，拟对一批教学设备进行招标采购，现将各设备的技术参数及要求上网公示，请各潜在供应商对是否针对某一品牌、是否有明显的排他性等内容提出有关意见。
所有意见应于2010年6月18日12：00（北京时间）前以书面形式（注明联系人、联系电话并加盖单位公章）递交至河南省科教仪器设备招标有限公司，逾期不予受理。
联系人：冯美禄
河南省科教仪器设备招标有限公司
2010年6月13日
包A：
包B：
包C：
包D：
包E：
包F：
1、非线编设备
2、教师用机
3、其它配套设备
4、以上设备均按装箱单进行标准供货，质保3年。
ACT活化凝血时间检测仪技术要求
★参数3
电源输出:最高的电压≥345V , 0.1 V/cm 增量, 连续可调
2.4
★参数4
转换角度: 0-320°，0.5°增量
2.5
★参数5
具有多状态矢量变量功能:≥10 向量/脉冲周期, 可定义每个角度, 电压和持续周期等多种参数。每个模块都具有独立的分离参数
2.6
参数6
具有结合了包括 CHEF, PACE, FIGE and AFIGE等全面的脉冲场技术
配置1
主机
4
售后服务
4.1
保修年限
≥3年
4.2
出现故障回应时间
维修到达现场时间≤ 6小时（本地）
维修到达现场时间≤24小时（外地）
4.3
维修支持
配件供应时间≥10年
4.4
耗材及零配件
提供耗材及主要零配件目录（含报价）
4.5
维修资料
提供详细操作手册、维修保养手册、安装手册等
4.6
维修工具
提供维修专用工具1套
2.13
参数13
最高电泳时间：≥990小时/每个模块
3
配置需求
（一行只写一个配置）
3.1
配置1
电泳槽主机(含外盖安全联锁装置，灌胶台，15孔梳子，聚乙烯软管等)一套
3.2
配置2
冷却循环水系统一套
3.3
配置3
Yeast DNA标准品一个
3.4
配置4
一次性包埋模具（50个样本）一套
3.5
配置5
操作手册1套
2.7
参数7
最大电流:≥0.5 amperes
2.8
参数8
延迟起动 :最高≥50 小时
2.9
酶标仪的说明书
当前设置好的格式显示在屏幕的上部，按“COLUMN MATRIX BOTH”下面的软键来改变报告格 式，系统会自动保存更改后的格式。 按“ENTER”键进入“SAMPLES ON COLUMN REPORT”屏幕。（如下图）
按“YES”打印在普通格式下的报告模式。按“NO”忽略。 按“ENTER”键进入“PRINT CURVE-FIT”屏幕。（如下图）
贝登提供 品质保证
当前设置的格式显示在屏幕的上部，按“YES”或“NO”来改变格式。 按“ENTER”返回“SELECT UTILITY OPTION”屏幕。 3．4 读数选项 在“SELECT UTILITY OPTION”屏幕，按“READ”下面的软键进入读板参数选项。按“YES” 进入标本鉴定和读数领域，提示如下： 在每次选择后按“ENTER”键进入选定界面。
值。液晶下行显示的 READ DEFINE REPORT 和 UTIL 可分别由对应的 4 个功能键选择。
（初始化已完成 下午 1：30
2004 年 10 月 9 日）
（测量） （定义）
（报告） （综合）
贝登提供 品质保证
图 3-2 主菜单
（测量） （定义） 图 （报告） （综合） 图 3-3 主菜单在孵育模式仪器上的显示
安图酶标仪
12
一.安全性保证
——全程监控标准化工作流程
实时监控的工作台面
LED 指示灯
门控感应器
一旦报警时，安全门锁自动打开。报警并提示用户该如何处理；试剂不足时提前提示添 加试剂。任何处理都会自动纪录信息，并有完整的运行历史记录。
13
二. 准确性保证
经典液压推动系统——众多大型设备的首选
25
四.强大的样品处理能力
多样的工作模式
A． 批量工作模式（Batch Mode）：同批次测量项目相同
B． 工作列表模式（Worklist Mode）：可为任意标本选择任意项目
C． 双向网络传输模式（ASTM Mode）：检验科与临床科室的结果双向传输
瑞士TECAN Freedom EVOlyzer
-----全球最先进的EIA微孔板分析系统
瑞士Tecan ---全球最专业的酶免制造商
具有20年以上酶免分析自动化经验
在全国拥有近400家用户，集中在各省/市血液中心、三级甲等医院
拥有酶免分析自动化的最高水平
2
Freedom EVOlyzer--Tecan‘s EIA分析的最新家族系列
26
五.自动化、网络化管理
率先支持的ASTM双向通讯工作模式将完全改观传统烦琐的工 作模式 非ASTM的工作模式：
1.确认各标本所要进行的试验 2.根据所做的试验挑选标本 3.对标本进行排序，编号 4.按顺序录入标本信息
ASTM的工作模式：
1. 将标本放入仪器（无须整理排序） 2.自动识别各标本的试验项目，试验结束后
3
Freedom EVOlyzer 模块组成说明
Molecular Devices EMax Plus微平板读器安装指南说明书
5032019COctober2018
EMax® PlusMicroplateReader
InstallationGuideEMaxPlusMicroplateReaderInstallationGuide
25032019CThisdocumentisprovidedtocustomerswhohavepurchasedMolecularDevicesequipment,software,reagents,andconsumablestouseintheoperationofsuchMolecularDevicesequipment,software,reagents,andconsumables.Thisdocumentiscopyrightprotectedandanyreproductionofthisdocument,inwholeoranypart,isstrictlyprohibited,exceptasMolecularDevicesmayauthorizeinwriting.Softwarethatmaybedescribedinthisdocumentisfurnishedunderanon-transferrablelicense.Itisagainstthelawtocopy,modify,ordistributethesoftwareonanymedium,exceptasspecificallyallowedinthelicenseagreement.Furthermore,thelicenseagreementmayprohibitthesoftwarefrombeingdisassembled,reverseengineered,ordecompiledforanypurpose.
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FilterMax F3和F5多模式微平板读数器解包和安装指南说明书
FilterMax F3and F5Multi ‐Mode Microplate ReadersUnpacking and Setup GuideBefore unpacking and setting up the FilterMax™ F3or FilterMax™ F5Microplate Reader,prepare a dry,flat work area that has sufficient space for the instrument,host computer,and required cables.Unpacking the InstrumentThe packaging is specifically designed to protect the instrument during transportation.A transport lock is placed on microplate drawer to protect the instrument from damage during shipping.The transport lock must be removed before powering on the instrument.Note:The shipping box and all packaging materials,including the transport lock,should be retained in case of future transport needs.Do not use tools that can damage the packaging or the instrument.To unpack the instrument:1.Inspect the box for visible damage that occurred during transportation.In case of damage,inform the supplier immediately and keep the damaged packaging.2.Open the box lid and remove the accessories box.3.Carefully lift the instrument out of the box by the molded foam packaging encasing it.4.Gently place the instrument on a dry,flat area.5.Remove the molded foam packaging from the instrument and place the foam back in the shipping box.6.Remove the plastic surrounding the instrument and discard the plastic.For research use only.Not for use in diagnostic procedures.The trademarks mentioned herein are the property of Molecular Devices,LLC or their respective owners.These trademarks may not be used in any type of promotion or advertising without the prior written permission of Molecular Devices,LLC.Patents:/productpatents5016209BDecember 2014FilterMax F5and F3Multi ‐Mode Microplate Readers Unpacking and Setup Guide25016209B7.Gently pull the plastic tab protruding from the microplate chamber door.The door opens,revealing thetransport lock that fastens the microplate drawer to the internal frame of the instrument.The microplate drawer door must be held open manually while removing the transportlock.Note:Be careful not to tear the plastic tab.It must remain attached to the transport lock to make it easier to open the microplate chamberdoor.e the provided 2.0 mm hex key to loosen screw #1in the upper ‐left corner of the transport lock untilthe lock disconnects from the instrument frame.The screw is equipped with a retaining washer that prevents it from being removed from the lock.e the provided 2.0 mm hex key to loosen screw #2and screw #3until the lock disconnects from themicroplate drawer.The screws are equipped with retaining washers that prevent them from being removed from the lock.10.Gently close the microplate chamber door.11.Save the original carton,foam inserts,accessories box,and transport lock in case the instrument mustbe shipped in the future.FilterMax F5and F3Multi ‐Mode Microplate Readers Unpacking and Setup Guide5016209B 3Setting Up the InstrumentSetting up the instrument includes selecting a suitable work area,installing excitation and emission filter slides,connecting the host computer,and installing the software that controls all actions performed by the instrument.To set up the instrument:1.Place the instrument and host computer on a dry,flat work area with sufficient space for both devicesand the required cables.To ensure sufficient ventilation and provide access for disconnecting power from the instrument,maintain a 20 cm to 30 cm (7.9 in.to 11.8 in.)gap between the rear of the instrument and the wall.2.Connect one end of the RS ‐2329‐pin serial cable to the RS ‐232serial port on the computer.If the computer does not have an RS ‐232serial port,then connect the supplied USB to RS ‐232adapter cable to a USB port on thecomputer.Note: Use only the original RS ‐2329‐pin serial cable or the USB to RS ‐232adapter cable suppliedwith the instrument.Other serial cables with identical connectors might not establishcommunication between the instrument and computer.3.Connect the other end of the RS ‐2329‐pin serial cable to the RS ‐232serial port on the back of theinstrument.4.Connect the power cable to the power port on the back of the instrument and to the wall socket.FilterMax F5and F3Multi ‐Mode Microplate Readers Unpacking and Setup Guide45016209B 5.Turn on the power switch on the back of the instrument.The instrument performs an initialization procedure that moves the optics and the microplate drawer to home positions.6.Remove the excitation filter slide from the toolbox supplied with the instrument.Excitation filter slides are identified by the EX or EXP printed on the slide tab.7.Open the filter compartment door on the front of theinstrument.8.Hold the excitation filter slide vertically by the tab with the gear teeth on top,facing to the left of theinstrument.9.Align the slide in the track,and gently push it into the filter compartment until the motor automaticallyretracts it into position.10.Remove the emission filter slide from the toolbox supplied with the instrument.Emissions filter slides are identified by the EM or EMP printed on the slide tab.11.Hold the emission filter slide horizontally by the tab with the gear teeth on the right,facing up.12.Align the slide in the track,and gently push it into the filter compartment until the motor automaticallyretracts it into position.13.Close the filter compartment door completely to ensure the accuracy of measurements.14.Turn on the power to the host computer.15.Install the SoftMax®Pro Microplate Data Acquisition and Analysis Software on the computer.16.Start the SoftMax Pro Software.It might be necessary to install hardware drivers before starting thesoftware.For more information,see the SoftMax Pro Software application help or user guide and the FilterMax F3and F5Multi ‐Mode Microplate Readers User Guide installed with the software.。
人CD4_CD25_调节性T细胞的体外培养扩增_孙磊
第48卷 第12期 V o.l 48 N o.12 山 东 大 学 学 报 (医 学 版)J OU RNA L O F SHA NDO NG U N I V ER SITY (HEA LTH SC IE N CES)2010年12月D ec .2010收稿日期:2010-08-13作者简介:孙磊(1977-),女,主治医师,博士研究生,主要从事糖尿病及其并发症的机制研究。
E -m a i :l s un lei 1@m edm ai .l co 通讯作者:陈丽(1957-),女,博士研究生导师,主要从事内分泌代谢性疾病的机制及治疗研究。
E-m a i :l chen l@i m ed m ai.l co 文章编号:1671-7554(2010)12-0001-04#内分泌与代谢疾病研究#人CD4+CD25+调节性T 细胞的体外培养扩增孙磊1,吴静静2,易寿南2,陈丽1(1.山东大学齐鲁医院内分泌科,济南250012;2.悉尼大学west m ead 医院CTRR,N S W 2145,悉尼,澳大利亚)摘要:目的 建立人CD 4+CD 25+T reg 细胞的分离和体外扩增方法,并检测扩增细胞的表型及体外免疫抑制功能。
方法 免疫磁性分离(M AC S)方法分离人CD 4+CD 25+T reg 细胞,加入刺激因子与之共培养扩增,用台盼蓝染色法和流式细胞法检测细胞的活性和纯度,流式细胞法检测细胞主要表型标记,实时定量PCR 检测T reg 核心标记Fox p3的表达,混合淋巴细胞反应试验分析其免疫抑制功能,EL ISPO T 方法检测产生细胞因子的细胞数目。
结果 扩增2~3周的CD 4+CD 25+T reg 细胞数目达到新鲜细胞的3500倍,活性>97%,纯度>96%;扩增的细胞与新鲜的细胞保持了相似的表型、Fo xp3表达,其抑制功能略强于新鲜的CD 4+CD 25+T reg 细胞,其差异具有统计学意义(71%v s 51%,P <0.05),可能与其产生抑制性细胞因子的细胞数目增加有关。