同型半胱氨酸酶法和色谱法

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同型半胱氨酸(HCY)检测试剂方法学比较

同型半胱氨酸(HCY)检测试剂方法学比较
同型半胱氨酸(hcy)检 测试剂方法学比较
目录
Contents
• 同型半胱氨酸(Hcy)简介 • 同型半胱氨酸(Hcy)检测试剂的种
类 • 各种Hcy检测试剂的比较 • Hcy检测试剂的应用场景 • Hcy检测试剂的发展趋势和展望
01 同型半胱氨酸(Hcy)简介
Hcy的生理功能
参与蛋氨酸循环
同型半胱氨酸是蛋氨酸循环的重要中 间产物,参与细胞内甲基化反应,对 维持细胞功能具有重要作用。
电化学检测法
总结词
电化学检测法是一种快速、简便的检测方法,适用于临床常 规检测。
详细描述
电化学检测法利用电化学原理,通过测量同型半胱氨酸在电 极上的氧化还原反应产生的电流来定量检测同型半胱氨酸的 浓度。该方法具有快速、简便、准确度高等优点,适用于临 床常规检法是一种高灵敏度的检测方法,具有较好的稳定性和准确性。
详细描述
随着人们对Hcy认识的深入,对Hcy检测的灵敏度和特异性 要求越来越高。高灵敏度检测技术的研究和应用,能够更 准确地检测低浓度Hcy,避免漏检和误检,提高临床诊断 的准确性。
多指标联合检测的研究
总结词
多指标联合检测是Hcy检测试剂的另一个重 要发展方向,能够同时检测多种与Hcy相关 的指标,提供更全面的诊断信息。
04 Hcy检测试剂的应用场景
临床诊断
01
辅助诊断心血管疾 病
同型半胱氨酸(Hcy)水平升高与 心血管疾病风险相关,Hcy检测 试剂可用于辅助诊断相关疾病。
02
预测脑卒中风险
03
评估肾脏功能
高Hcy水平与脑卒中风险增加有 关,通过检测试剂可预测个体脑 卒中风险。
Hcy水平与肾脏功能有关,检测 试剂可用于评估肾脏功能状况。

同型半胱氨酸速率法检测说明书

同型半胱氨酸速率法检测说明书

同型半胱氨酸速率法检测说明书I. 介绍同型半胱氨酸(Homocysteine,简称Hcy)是体内一种重要的氨基酸,它在蛋氨酸代谢过程中形成。

近年来,研究发现Hcy与多种心血管疾病、神经系统疾病以及某些遗传代谢病的发生发展密切相关。

因此,准确、快速地检测Hcy的水平对于疾病诊断与治疗具有重要意义。

II. 检测原理同型半胱氨酸速率法检测基于同型半胱氨酸在特定条件下与酶的催化作用,通过测定反应体系中底物和产物的生成速率来间接测定Hcy的浓度。

该方法的原理简单,操作方便,能够准确地测定Hcy的水平。

III. 检测设备与试剂1. 检测设备:同型半胱氨酸速率法检测仪2. 试剂:- 试剂A:同型半胱氨酸标准品- 试剂B:底物溶液- 试剂C:酶溶液IV. 检测步骤1. 样本处理:- 取适量样本,加入适量去蛋白液混匀,沉淀离心,取上清液作为待测样本。

2. 准备工作:- 分别将试剂A、试剂B和试剂C室温静置至室温。

- 预热同型半胱氨酸速率法检测仪至37°C。

3. 检测步骤:a. 取一定体积的底物溶液加入反应池中。

b. 加入一定体积的试剂A并混匀。

c. 加入一定体积的待测样本混匀。

d. 加入一定体积的试剂C并立即混匀。

e. 将反应池放入预热好的同型半胱氨酸速率法检测仪中进行反应。

f. 按照仪器指示记录一定时间内反应速率的变化。

g. 通过与同型半胱氨酸标准品的比对,计算出待测样本中Hcy的浓度。

V. 结果解读根据检测结果得出的Hcy浓度,可以用作评估患者的心血管疾病和神经系统疾病的风险。

一般来说,Hcy的浓度越高,表示患相应疾病的风险越大。

但具体的标准值要根据医生的指导和临床实际情况来确定。

VI. 注意事项1. 检测前应严格按照说明书的要求储存试剂及设备,避免高温、湿度等不利因素。

2. 操作过程中应注意实验室内无任何污染物干扰,避免误差。

3. 操作时需穿戴个人防护装备,做好安全防护工作。

4. 检测结果仅供医生参考,不能用于自我诊断和自我治疗。

同型半胱氨酸的检测及临床意义

同型半胱氨酸的检测及临床意义

同型半胱氨酸的检测及临床意义一、同型半胱氨酸同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)是一种人体内的含硫氨基酸,为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物,部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在,微量以还原型同型半胱氨酸存在,大部分通过二硫键与白蛋白结合而存在。

大量对Hcy的研究表明Hcy是心脑血管疾病的独立危险因素,危险度随着浓度的升高而增加。

Boushey等的研究结果显示,血浆总Hcy水平每升高5umol/L,相当于胆固醇升高500umol/L。

伴有血浆Hcy升高(>10umol/L)的原发性高血压定义为H型高血压。

二、影响血液Hcy水平的因素1、遗传因素:C667T点突变可引起Hcy升高。

CBS基因多态性。

蛋氨酸合成酶基因多态性。

2、性别与年龄:国内外不少研究发现,Hcy随年龄增长而升高,而且男性>女性。

女性在绝经前的水平较低,绝经后显著升高,认为其机制可能与雌激素水平的变化有关。

3、营养因素:①VitB6、VitB12、叶酸等Hcy代谢辅酶摄入不足时,则Hcy升高。

②饮酒:长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成酶活性下降,从而造成Hcy血症。

③饮食中蛋氨酸过高:有报道认为高动物蛋白饮食可能是Hcy血症的危险因素之一。

三、同型半胱氨酸致病机理1、内皮毒性作用。

2、刺激血管平滑肌细胞增生。

3、致血栓作用:Hcy可促进血栓调节因子的表达,激活C蛋白和凝血因子Ⅻ、Ⅴ,血小板内前列腺素合成增加,从而促进血小板粘附和聚集。

4、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱:Hcy可促进脂质沉积于动脉壁,泡沫细胞增加,还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结构,促进斑块钙化。

5、干扰谷胱甘肽的合成:谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂,它能防止很多细胞成分的氧化互相作用,对血管产生保护作用。

Hcy干扰谷胱甘肽的合成,从而对机体造成危害。

6、影响体内的转甲基化反应:Hcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲基化过程,甲基化能力的降低影响细胞的发育及分化,这可能是Hcy致病的关键因素。

同型半胱氨酸的检测及临床意义范文

同型半胱氨酸的检测及临床意义范文

同型半胱氨酸的检测及临床意义一、同型半胱氨酸同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)是一种人体内的含硫氨基酸,为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物,部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在,微量以还原型同型半胱氨酸存在,大部分通过二硫键与白蛋白结合而存在。

大量对Hcy的研究表明Hcy是心脑血管疾病的独立危险因素,危险度随着浓度的升高而增加。

Boushey等的研究结果显示,血浆总Hcy水平每升高5umol/L,相当于胆固醇升高500umol/L。

伴有血浆Hcy升高(>10umol/L)的原发性高血压定义为H型高血压。

二、影响血液Hcy水平的因素1、遗传因素:C667T点突变可引起Hcy升高。

CBS基因多态性。

蛋氨酸合成酶基因多态性。

2、性别与年龄:国内外不少研究发现,Hcy随年龄增长而升高,而且男性>女性。

女性在绝经前的水平较低,绝经后显著升高,认为其机制可能与雌激素水平的变化有关。

3、营养因素:①VitB6、VitB12、叶酸等Hcy代谢辅酶摄入不足时,则Hcy升高。

②饮酒:长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成酶活性下降,从而造成Hcy血症。

③饮食中蛋氨酸过高:有报道认为高动物蛋白饮食可能是Hcy血症的危险因素之一。

三、同型半胱氨酸致病机理1、内皮毒性作用。

2、刺激血管平滑肌细胞增生。

3、致血栓作用:Hcy可促进血栓调节因子的表达,激活C蛋白和凝血因子Ⅻ、Ⅴ,血小板内前列腺素合成增加,从而促进血小板粘附和聚集。

4、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱:Hcy可促进脂质沉积于动脉壁,泡沫细胞增加,还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结构,促进斑块钙化。

5、干扰谷胱甘肽的合成:谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂,它能防止很多细胞成分的氧化互相作用,对血管产生保护作用。

Hcy干扰谷胱甘肽的合成,从而对机体造成危害。

6、影响体内的转甲基化反应:Hcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲基化过程,甲基化能力的降低影响细胞的发育及分化,这可能是Hcy致病的关键因素。

同型半胱氨酸检测方法学及评价的某些进展

同型半胱氨酸检测方法学及评价的某些进展

同型半胱氨酸检测方法学及评价的某些进展摘要:同型半胱氨酸( HCy)又称高半胱氨酸(HHcy),是一种含硫氨基酸,它不属于组成蛋白质的20种氨基酸,本身不参与蛋白质的合成,也没有特异的3个DNA碱基对其进行编码,在体内不能合成,它是由蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中产生的重要的中间产物,只能来源于蛋氨酸的分解代谢。

血浆Hcy是一个总称,指血浆中所有形式的Hcy,包括还原型Hcy,双硫Hcy,混合双硫半胱氨酸Hcy和混合双硫蛋白质Hcy,正常情况下游离Hcy很少,主要以蛋白质形式存在。

很多因素如遗传、营养、肾功能不全、药物、激素等因素均可能影响体内同型半胱氨酸的代谢,造成高Hcy血症。

近年来大量研究证明高Hcy血症是心脑血管疾病的一个新的独立危险因素。

还与糖尿病、肾衰、老年痴呆等高度相关,危险度随Hcy浓度的升高而增加[1]。

现就Hcy的检测方法及评价做一简述。

1放射免疫分析法:该方法灵敏度高,特异性强,但操作繁琐且有放射污染,同时同位素易衰变及对人体有危害限制了使用,为推广使用。

2气湘色谱质谱法(GC-MS) 1987年首先报道了GC-MS法联用测定Hcy,该法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点。

但因需要的设备昂贵,难以适合常规临床化学实验时使用门,但操作十分复杂,耗时长,仪器设备要求高,很难普及。

3高效液相色谱法(HPLC) 是目前公认的参考方法,基本分析原理:先使用还原剂使血样中所有形式的Hcy转变成还原形式,然后与荧光试剂进行衍生生成Hcy-荧光物质复合物[2],将衍生后的样品进行色谱分析。

因色谱固定相对不同物质的吸附力不同,因此流动相将其洗脱下来的次序也不同,根据这一原理将样品中的不同物质分开,以荧光检测器检测洗脱下Hcy-荧光物质复合物的荧光强度,将其与标准品/内标的比值进行比较和计算,就可以测定血中Hcy的水平。

此方法灵敏度高,准确度和精密度好,但由于其操作繁琐复杂,耗时耗费,不适用于临床应用,主要用于实验研究。

常规生化检验的酶转换法对血清同型半胱氨酸的检测分析

常规生化检验的酶转换法对血清同型半胱氨酸的检测分析

常规生化检验的酶转换法对血清同型半胱氨酸的检测分析杨微【期刊名称】《中国继续医学教育》【年(卷),期】2015(000)021【摘要】目的:常规生化检验的酶转换法对血清同型半胱氨酸的检测分析。

方法选取我院临床血清样本开展血清同型半胱氨酸的检测工作,将其检测结果和相应的指标结果进行分析对比。

结果本研究采用酶转换法、荧光偏振免疫法以及高效液相色谱法检测,每一种检测方式都得出了线性检测关系式,其相应检测结果值和酶转化法的检测结果值两两对比存在显著差异(P <0.05)。

结论对血清样本开展血清同型半胱氨酸的检测工作,采用酶转换法有较高的检测准确性,可以保证检测线性范围比较广,检测精度高。

%Objective Normal biochemical tests of enzymatic conversion method of serum homocysteine detection analysis. Methods To choose the hospital clinical serum samples of serum homocysteine detection work, the test results and the corresponding measure results are analyzed. Results This study adopts the enzymatic conversion method, fluorescence polarization immunoassay method and high performance liquid chromatography (HPLC) method to detect, each a way of testing the linear detection equation is obtained, and the corresponding test results and the test results of enzyme catalysis value two contrast exists significant difference (P<0.05), with statistical significance. Conclusion The serum samples of serum homocysteine detection work, by enzymatic conversion method has high detectionaccuracy, can be tested to ensure wider linear range and detection precision is high, is worth popularizing in clinical application.【总页数】2页(P34-35)【作者】杨微【作者单位】132001 吉林市人民医院【正文语种】中文【中图分类】R446.11【相关文献】1.常规生化检验中循环酶法检测血清同型半胱氨酸的临床分析 [J], 徐连强;曹毅;曾玉琼;王慧敏2.酶转换法检测血清同型半胱氨酸在常规生化检验中的应用评价 [J], 梁释予;扈剑飞3.常规生化检验中循环酶法检测血清同型半胱氨酸的临床分析 [J], 金卫民4.酶转换法检测血清同型半胱氨酸在常规生化检验中的评价 [J], 张晓坤;黎文成;古雅珏;杨晓仪5.常规生化检验中的血清同型半胱氨酸酶转换法检测价值研究 [J], 余安乐因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

同型半胱氨酸的测定及应用

1 Hc 化 性 质 y理
(D ) L L 反应经吞 噬细胞 吞 噬 , 细胞 “ 碎 ” 积 于血 管壁 , 破 沉 通 过一 系列 反应并有副产物氧化放 出 , 损伤血管壁后 , 平滑肌细 胞 分裂修补造成“ 痕” r c onl 瘢 。D. D ne指出 H y M c 改变凝血 因 子水 平 , 造成血小板 聚集 在血管 壁的粥 样硬化 处等 等。f 旺床 上 , 跟踪 5年 近 150个 高 H y的男性 中发现 , 除其他 因 在 0 c 排
H y 甲硫氨酸代 谢 的中间产物 , c是 其形成 必须有 B胱 硫醚合 一
成 酶和 N , N旷亚甲基四氢 叶酸还 原酶 以及 维生 素辅 助 因子
评价 , 法 检测 H y最低 浓 度 为 1 m L , c 度 在 6 此 c o /L Hy浓 m LL~ 6 mo/ 围内有 良好 的线 性结果 ; 昭亨等 o/ 10 LL范 孟
利用 H I 前 衍 生化 法 测 定 H y的最 小 检 出 量 为 0 15 PC柱 c . 2
( P C及 G — S 、 HL C M ) 免疫测定等方法 。 2 1 同位素法 由 R f m等… 18 . eu s 95年建 立 , 方法灵 敏度 该
素后 , 心脏病 的概率增加 3 其 倍 。每增加 5 mLLH y o c 浓 / 度与胆 固醇升高 0 5m  ̄L一样 , 冠状动脉疾病发生具 有 . mo 对 相同的危险 性 , 中年男 性 局部 缺 血性 心 脏疾 病 机会 增 加 1 / 3[ 许多研究 表明高 Hc 8 3 y血症 与颈 动脉 粥样 硬化 相关 , 随 着颈动脉硬化 、 狭窄的加重 , 清 H y水 平随之 升高 , 血 c 且男 性 的水平高于女性 , 这可能 与雌激 素对 H y 谢 的影 响 以及 男 c代

hcy综述资料

同型半胱氨酸测定试剂盒(酶法)综述资料1、产品的预期用途:1.1产品的预期用途同型半胱氨酸测定试剂盒(酶法)用于定量测定人体血清或血浆中同型半胱氨酸的含量。

1.2与预期用途相关的临床适应症背景情况同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)又称高半胱氨酸,是蛋氨酸去甲基后形成的一种含硫氨基酸,属于蛋氨酸循环的中间产物。

有关其代谢紊乱的报道最早来源于先天性胱硫醚合成酶缺乏导致出现同型半胱氨酸尿患者的观察。

此后,又相继发现其他几种参与HCY代谢的酶或辅酶改变所引起的代谢紊乱。

近几年来,随着测定技术方法的改进,已经能够对正常人血浆中以各种形式存在的HCY进行测定,并且发现在心、脑及外周血管疾病、慢性肾功能不全、牛皮癣、维生素B12缺乏等疾病的患者中存在HCY的代谢紊乱。

对同型半胱氨酸的研究始于20世纪70年代,1969年首次提出高同型半胱氨酸血症可致动脉粥样硬化并可形成血栓后,人们逐渐发现人体血清中同型半胱氨酸的含量与冠心病、脑血管疾病、外周血管疾病和静脉血栓的发生和发展有着密切的关系,而且随着同型半胱氨酸含量的增加发生血管疾病的危险也呈递增趋势。

高同型半胱氨酸通过氧自由基介导引起血管内皮损伤,不同浓度的血清Hcy还可通过抑制内皮细胞DNA的合成,影响内皮功能及细胞形态改变,并促使血管平滑肌细胞增殖,导致动脉粥样硬化。

血清Hcy可使血小板受损,使血小板的黏附性和聚集性增加。

血清HCy尚能改变花生四烯酸代谢,使血栓素A2合成增加,血栓素A2具有收缩血管和促血小板聚集的作用。

血清Hcy还通过抑制凝血酶调节蛋白在内皮细胞表面的表达及活性,进一步抑制蛋白C的激活,影响凝血酶的灭活。

血清Hcy还能增加组织因子的活性,激活凝血酶,导致血管系统的血栓少形成。

目前越来越多的资料显示Hcy与脑血管病有着紧密的联系。

甚至有人认为Hcy水平升高是脑血管病的一项独立危险因素和重要危险因子。

研究分析表明,随着血浆Hcy水平的增高,患缺血性脑血管病的相对危险度逐渐增加,与非Hcy患者相比,Hcy患者患缺血性脑血管病相对危险度增加。

同型半胱氨酸不同检测方法结果分析


b  ̄ t l i n ,Z H O NG K u n ,W A N G Z h i g u o . ( N a t i o n a l C e n t e r f o r C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,B e r i n g H o s p i t a l , Mi n i s t r y o fH e a l t h ,
( 北 京 医院卫 生部 临床检 验 中心 , 北京 1 0 0 7 3 0 )
摘要 : 目的 评价并分析同型半 胱氨酸( H c y ) 项 目不同检测方法 的结果。方法 采用 卫生部 临床 检验 中心
( N C C L ) 的室 内质量控制 ( I Q C) 监测 系统调查分析全 国 1 1 O家实验室 H c y检测项 目的不精 密度 水平 [ 即变异 系 数( C V ) ] 。再利用 N C C L基于 We b的室 问质量评价 ( E Q A) 系统评估 2 0 1 2年全 国 1 1 0家实验室 H c y检测的偏倚 ( B i a s ) 。引入我 国 目前的 E Q A评价标 准( T E a=2 0 %) 进 行评 价 , 并 通过公 式西格玛 ( o)=( T E a—B i a s ) / C V计
w a s c o l l e c t e d .T h e i m p r e c i s i o n[ c o e ic f i e n t o f v a r i a t i o n( C V ) ]o f H c y w a s a n a l y z e d .B i a s w a s e s t i m a t e d a c c o r d i n g t o

9 2 . 3 %。 结论

同型半胱氨酸临床意义及检测方法

同型半胱氨酸临床意义及检测方法摘要】本篇着重介绍检测同型半胱氨酸的重要性。

高同型半胱氨酸血症是心脑血管疾病的一个独立的危险因素,与其发病率和死亡率关系密切。

临床上必须重视其临床意义、检测方法、影响因素等。

未来对同型半胱氨酸的研究应该侧重于前瞻性研究,需要多学科、多部门之间的配合,就一定能在降低动脉硬化性疾病尤其是心脑血管疾病的发病率和死亡率方面一定能够取得新的进展。

【关键词】同型半胱氨酸临床意义检测方法【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2013)51-0020-021 同型半胱氨酸的概述同型半胱氨酸( homocysteinemina,HCY)是上个世纪30年代最早由Vincent duVigheaud从结石中分离出来,1969年Mc Cully博士最早提出来同型半胱氨酸与动脉硬化可能存在关联性的观点。

同型半胱氨酸含有硫氨基酸,由蛋氨酸脱甲基生成,在维生素B12和四氢叶酸的参与下,HCY可以脱甲基生成蛋氨酸。

当HCY 代谢受阻时,就会在细胞内聚集,随之进入血液系统,HCY在血中仅占1%,血浆中HCY以氧化型和还原型两种形式存在,氧化型占绝大多数,即同型胱氨酸,大部分同型半胱氨酸与蛋白结合,小部分与自身结合形成二聚体,还有小部分(5%~10%)与半胱氨酸结合形成混合型同型半胱氨酸二硫化物[1]。

还原型以单体形式存在,仅占1%。

一般情况下,我们一般测定血清中总的HCY的含量。

2 临床意义从Mc Cully博士最早提出高同型半胱氨酸血症与动脉粥样硬化相关连,重度的高同型半胱氨酸血症产生的原因一般指胱硫酶合成酶和亚甲基四氢叶酸还原酶出现缺陷。

高同型半胱氨酸血症的患者除了会出现早发性的动脉粥样硬化,还会出现智力的异常和动静脉栓塞。

随着医学的进步,人们逐渐认识到HCY与心血管病有很大的关联性。

大量的临床研究资料显示高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化所致心血管病的一个独立的危险因素。

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同型半胱氨酸酶法和色谱法
同型半胱氨酸的检测方法主要有两种,分别是酶法和色谱法。

1.酶法:氧化型的Hcy被还原为游离Hcy,游离的Hcy 在Hcy-甲基转移酶催化下与S-腺苷甲硫氨酸(SAM)反应生成甲硫氨酸和S-腺苷同型半胱氨酸(SAH),SAH被SAH-水解酶水解形成腺苷和Hcy,形成的Hcy进入Hcy-甲基转移酶催化的转化反应,形成循环反应,这个循环反应导致了检测信号的明显放大,形成的腺苷立即脱氢转化为次黄苷和氨,氨进一步在谷氨酸脱氢酶催化下和NADH反应,将NADH转变为NAD+。

在340nm处检测NADH减少造成的吸光度下降量与样品中同型半胱氨酸的浓度成比例。

2.色谱法:高效液相色谱法(HPLC)是测定血中Hcy的水平的方法。

因色谱固定相对不同物质的吸附力不同,因此流动相将其洗脱下来的次序也不同,根据这一原理将样品中的不同物质分开,以荧光检测器检测洗脱下Hcy-荧光物质复合物的荧光强度,将其与标准品/内标的比值进行比较和计算,就可以测定血中Hcy的水平。

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