第二章 药物鉴别技术

二、相对密度测定法
（一）基本原理
是指在相同的温度、压力条件下，某物质的密度与水的密度之比。一 般规定温度为20度。纯药物的相对密度在特定条件下为不变的常数，药 物的纯度改变，相对密度也随之改变，测定相对密度，可以区别或检查 药物的纯杂程度。
（二）测定方法
中国药典相对密度测定法有两种，即比重瓶法和韦氏比重秤法。测定
（三）注意事项 1.比重瓶必须洁净、干燥 2.装过供试品的比重瓶必须冲洗干净 3.避免产生气泡 4.水中取出时，应手指拿瓶颈 5.采用纯化水
6.环境温度低于20度
三、熔点测定法 （一）基本原理 熔点是指一种物质由固体融化成液体的温度、熔融同时分解的温度或 在融化时自初熔至全熔的一段温度范围。熔点是固体物质的物理常数，
二、药物鉴别实验的分类
（一）一般鉴别实验
一般鉴别实验是依据某一类药物的化学结构及其理化性质的特征，
通过化学反应来鉴别药物真伪。
对无机药物是根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应，对有机药 物则大多都采用的典型的官能团反应进行鉴别。
2015年版药典四部通则收载的一般鉴别项目有以下几类：
1. 芳香第ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ胺类
对象均是液体药物。 比重瓶法是常用方法，特点是所需供试品量小，准
确度高，适用于一般液体。
• 1.仪器 比重瓶
比重瓶B 比重瓶A
2.操作方法 操作流程：称比重瓶重量，装满供试品，20度恒温水浴，称重 （比重瓶+供试品），洗干净比重瓶并装满水，20℃恒温水浴，称重。（ 比重瓶+水）
3.计算 供试品的相对密度=供试品重量/水重量
（二）测定方法 1.仪器 测定使用PH酸度计 分为PH测量电池和PH指示器 2.操作方法 （1）酸度计校正 （2）测定供试液
酸度计校正常用的3种标准缓冲液及配制方法
1.苯二甲酸盐标准缓冲液（20℃，PH 4.00) 2.磷酸盐标准缓冲溶液（20℃，PH 6.88） 3.硼砂标准缓冲溶液（20℃，PH 9.23）
种药物单体，最终达到确证药物真伪的目的。
三、药物鉴别的方法 化学药物常用的鉴别方法有化学辨别法、光谱鉴别法、色谱鉴 别法、生物学法等，对于中药材及其提取物，制剂常用的鉴别方 法还有显微鉴别法和特征图谱或指纹图谱鉴别法。 (一）化学鉴别法 化学鉴别法是根据药物与规定的化学试剂在一定的条件下发生 的化学反应所产生的颜色、沉淀、气体等现象鉴别药物真伪的方 法。化学鉴别法有一定的专属性和灵敏性，简便易行，所以化学 鉴别法是最常用的鉴别方法之一。 化学鉴别法要注意鉴别实验的条件，否则会影响结果的判断。 影响鉴别反应的因素主要有溶液的浓度、温度、酸碱度，反应时 间和共存的干扰物质等。此外，在选择化学鉴别反应时要注意其 反应的灵敏性和专属性。
（二）专属鉴别实验
药物的专属鉴别实验是证实某一种药物的依据，是根据每一种药物
的依据，是依据每一种药物的结构特点和理化特性，选用某些特有的灵 敏度高的反应，来鉴别药物的真伪。 如巴比妥类药物可以根据母核5,5位上不同取代基所具有的不同的 化学性质鉴别不同的药物。苯巴比妥有苯环，能与硫酸-亚硝酸钠发生
(三）注意事项 1.测定熔点时，应注意毛细管的规格大小。毛细管应由中性硬质玻璃 管制成，管长9cm以上，内径0.9~1.1mm，壁厚0.10~0.15mm，一段熔 封。 2.温度计必须经过校正。 3.传温液 熔点在80℃以下者，用水；熔点在80℃以上者，用硅油或液 状石蜡。 4.应以熔点测定管内供试品开始局部液化（出现明显液滴）时的温度， 作为初融温度；供试品全部融化（液体完全澄清）时的温度作为全融 温度。 5.测定熔点过程中遇有“发毛”、“收缩”、“软化”及“出汗”等 现象，均不作初熔判断。 6.熔点读书时，宜估计到0.1℃。记录时应按修约间隔0.5进行修约， 即0.1~0.2℃舍去，0.3~0.7℃修约为0.5℃,0.8~0.9℃进为1℃
导学情景
情景描述： 某制药公司购买了一批阿莫西林原料，怀疑是假药，要 求质量部判断药物的真伪，质量部小王接到任务，按药典 要求进行检验，最后给出药物真伪的结论。 学前导语： 药物鉴别是药品检验工作的首要任务。通过本章的学习 和实训，同学们将会学会药物鉴别的操作、计算，并能根 据结果判断药物的真伪。
鉴别药物的真伪，检查药物的纯杂程度。
（二）测定方法 根据药物的性状不同，中国药典（2010年版）中收载有三种熔点测 定的方法： 第一法 用于测定易粉碎的固体药物。 第二法 用于测定不易粉碎的固体药品。
第三法 用于测定凡士林或其他类似的物质。
1.仪器 传温液用容器、具有0.5℃刻度的分浸型温度计、熔点测 定用毛细管、加热器、传温液 2.操作方法 （1）取供试品适量，研称细粉，按照规定条件进行干燥，备用。 （2）分取供试品适量，置一端熔封的毛细管中，借助长约60cm 的洁净玻璃管（垂直放在表面皿或其他适宜的硬质物体上），将 装有供试品的毛细血管放入玻璃管上口使其自由落下，反复数次， 使供试品密集在毛细管的熔封段，装入高度3mm，如图2-3中A图 （3）将温度计垂直悬挂于加热用容器中，使温度计汞球部的底 端与容器的底部距离在2.5cm以上。 （4）容器中加入适量的传温液，并使传温液受热后的液面恰在 温度计的分浸线处，如图2-3中B图。 （5）将传温液缓缓加热，待温度上升至较规定熔点的底线约底 10℃时，将装有供试品的毛细管进入传温液，贴附在温度计上， 位置须使毛细管的内容无恰好在温度计汞球中部，如图2-3中C图； 继续加热调节升温速率为每分钟上升1.0~1.5℃，加热时需不断 搅拌使传温液温度保持均匀，记录供试品在初熔至全熔时的温度， 重复测定3次，取其平均值，即得。
供试品+盐酸+亚硝酸钠+碱性β 萘酚，出现橙黄到猩
红色沉淀。
2.丙二酰脲类 （1）硝酸银试液反应：供试品+碳酸钠+硝酸银+过量硝酸银，沉淀不溶 解。 （2）铜吡啶试液反应：供试品+吡啶+铜吡啶，显示紫色沉淀。 3.水杨酸盐 （1）三氯化铁反应：加三氯化铁，显示紫色
（2）沉淀反应：供试品+盐酸,白色水杨酸沉淀。
（三）一般稳定性 一般稳定性是指与药物贮藏有关的是否具有引湿、风化、遇 光变质等性质。 例如盐酸氯丙嗪的性状稳定性的记载：有吸水性，遇到光 易变色；有的还描述酸碱性，如盐酸氯丙嗪的酸碱性的记载为： 水溶液显示酸性反应。 （四）物理常数 物理常数是可以鉴别药物真伪，还可以检查药物的纯度。常 见的物理常数有相对密度、熔点、沸点、比旋度、遮光性、吸 收系数、PH等。
。
第二节 药物的鉴别实验
一、药物鉴别实验的特点 定义：药物鉴别实验是根据药物分子结构和理化性质，利用化学、物理 化学或生物学方法来判断药物的真伪，是药品质量检验工作的首项任务 ，只有在药物鉴别无误的情况下，进行药物的杂质检查和含量测定才有
意义。
特点：（1）确证实验 （2）个别分析 （3）互相印证及综合判断
t D
（二）测定方法 1.仪器：旋光仪 2.操作方法 一般规定为20摄氏度，使用波长钠光谱D线。先校 正，再将管用供试液冲洗数次，然后缓缓注入供试液适量，置于 旋光仪内检测并读书，即得供试液的旋光度。
[ α]
t D
= 100α /（LC）
α ：试验测得旋光度 L：测定管的长度 C：100ml中所含的溶质的重量
（三）注意事项 1.仪器定位后，再用第二种标准缓冲液核对仪器示 值，误差不大于0.02PH单位。 2.每次更换更换标准液或供试液前，应洗涤电极。 3.应使用纯化水 4.标准缓冲液可以保存2-3个月，如发现浑浊等现象， 不能继续使用。
（四）应用 PH值测定法在药品检验中广泛应用于对PH有严格 要求的注射剂、滴眼剂和供配制注射剂用的原料药 的酸碱度检查。
点滴积累
1.药物的性状包括外观、溶解度、一般稳定性和物理常数等。 2.相对密度是指相同的温度、压力条件下，某物质的密度与水 的密度之比。一般液体的相对密度用比重瓶法。 3.熔点是指一种物质按规定方法测定，由固体融化成液体的温 度、熔融同时分解的温度或在融化时自初熔至全熔的一段温度 范围。 4.比旋度为物理常数，测定比旋度可以鉴别药物。 5.PH值测定啊是测定水溶液中氢离子活度的方法，药典采用 电位法测定。
（二)光谱鉴别法
1.紫外-可见分光光度法 是通过测定药物在紫外-可见光区的吸收光 谱特征对药物进行鉴别的方法。鉴别的主要依据是具有共轭体系的 有机药物在紫外光区或可见光区有明显的特征吸收，根据吸收光谱 特征如最大吸收波长的吸收系数进行鉴别。但是具有相同或者相似 共轭体系结构的不同药物，常表现一些特征吸收，故本法用于药物 鉴别，专属性不如红外光谱法。 常用的鉴别方法有： 1% （1）对比吸收系数的一致性 E 1 cm 吸收系数是吸光物质的物理常 数，可以用于药物的鉴别。如：药典2015年版规定贝诺酯加无水乙 醇制成每1ml约含7.5ug的溶液，在240nm的波长处有最大吸收；在 240nm处测定吸光度，按干燥品计算：吸收系数为730-760
亚硝基化反应来进行专属鉴别；司可巴比妥具有双键,能与碘试液发生
加成反应而鉴别。
一般鉴别试验是指某类药物的共同化学结构为依据，根据其相 同的理化性质进行药物真伪鉴别，其目的是区别不同类别的药物。 专属鉴别实验是在一般鉴别实验的基础上利用各种药物化学结构的 差异来鉴别药物，其目的是区别同类药物或具有相同化学结构的各
四、旋光度测定法 （一）基本原理 某些有机药物分子结构中具有不对称的手性碳原子，具有旋光现象，即当 平面偏振光通过其液体或溶液时，使偏振光的平面向左或向右发生旋转，偏 转的度数称为旋光度。用符号α表示，常以“+”表示右旋，“－”表示左旋。 当偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长和 温度下测得的旋光度称为比旋度，用符号【α 】 表示 比旋度为旋光物质的物理常数，测定物质的比旋度可以区别不同的药物 或检查药物的纯杂程度。一定条件下与浓度呈线性关系，采用旋光法测定法 可以进行含量测定。