谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的调节控制

合集下载

生物工程概论期末考试题

生物工程概论期末考试题

发酵工程复习题一、选择题:1.厂用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸,结果代谢产物没有谷氨酸而产生乙酰谷氨酰胺,其原因是()A.温度控制不适 B.通气量过多 C. pH呈酸性 D.溶氧不足2.青霉素生产的叙述,正确的是( B)B.用紫外线、激光、化学诱变剂处理青霉菌再经筛选的方法可以选育高产菌种3.有关谷氨酸棒状杆菌的生长和谷氨酸发酵的叙述.错误的是( B)B.菌体能合成各种生长因子,不需要从外界补充4.属于生长因子的是( D )D 维生素5.菌培养液中常含有一定浓度的葡萄糖,但当葡萄糖浓度过高时,反而会抑制微生物的生长,原因是(A )A.碳源供应太充足6.作为生产菌种和科研材料的细菌群体,应该是代谢旺盛、个体形态和生理特性比较稳定的。

所以应选择在它的(B )B 对数期7.与调整期缩短有关的因素中,最全面的一组是(C )①用与菌种相同的培养基②营养丰富的培养基③稳定期获得的菌种④对数期获得的菌种⑤接种时间提前⑥接种量加大⑦接种量减少⑧接种种类增多C.①④⑥8.谷氨酸发酵过程中,如果环境条件控制不当,则可能使代谢产物成为乳酸,那么乳酸是下列哪种条件下的产物( D )D.溶氧不足9. 能影响发酵过程中温度变化的因素是( D)A.微生物分解有机物释放的能量B.机械搅拌C.发酵罐散热及水分蒸发D.A、B、C都对10.应用发酵工程生产的产品不包括( D)D.目的基因二、名词解释:1.发酵工程(fermentation engineering):研究发酵工业生产过程中,各个单元操作的工艺和设备的一门科学。

发酵工程具体包括菌种选育、菌体生产、代谢产物的发酵以及微生物机能的利用等2.培养基 : 原料其化学成分明确、稳定适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律培养基营养单一,价格较高,不适合用于大规模工业生产3.培养基: 80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分,是发酵工业大规模使用的培养基。

4.生理性酸性物质;生理性碱性物质经微生物生理作用(代谢)后能形成酸性物质的营养物叫生理酸性物质,若菌体代谢后能产生碱性物质的营养物称为生理碱性物质5.连续培养指在向反应器中添加培养基的同时,从容器中放出等体积的培养液,就可以形成一个生产细胞的连续过程,即在培养器中所形成的新细胞数量与从容器中流失的细胞数目相等,反应体系达到稳态;菌的积累速率=生长速率-流出速率,6.抗生素:是生物在其生产活动过程中所产生,并能在低微浓度下有选择性地抑制或杀灭其他微生物或肿瘤细胞的有机物。

氨基酸类药物的发酵生产—谷氨酸的发酵生产

氨基酸类药物的发酵生产—谷氨酸的发酵生产

生物素的来源:氨基酸生产上可以作为生物素来源的原料 有玉米浆、麸皮水解液、糖蜜及酵母水解液等,通常选取 几种混合使用。例如,许多工厂选择纯生物素、玉米浆、 糖蜜这三种物质来配制培养基。各种原料来源及加工工艺 不同,所含生物素的量不同。玉米浆含生物素500μg/kg, 麸皮含生物素300μg/kg,甘蔗糖蜜含生物素1500μg/kg。
操作简单 周期长,占地面积大。
直接常温等电点法工艺流程
发酵液
起晶中和点(pH4-4.5) 育晶(2h)
盐酸
菌体及细小的 谷氨酸晶体
等电点搅拌pH3-3.22 静置沉降4-6h 离心分离
成品
母液
干燥
湿谷氨酸晶体
2、离子交换法
可用阳离子交换树脂来提取吸附在树脂上的谷氨 酸阳离子,并可用热碱液洗脱下来,收集谷氨酸 洗脱流分,经冷却、加盐酸调pH 3.0~3.2进行结 晶,之后再用离心机分离即可得谷呈棒形或短杆形; 革兰氏阳性菌,无鞭毛,无芽孢;不能运动; 需氧性的微生物; 生物素缺陷型; 脲酶强阳性; 不分解淀粉、纤维素、油脂、酪蛋白、明胶等;
发酵中菌体发生明显形态变化,同时细胞膜渗透性改变; 二氧化碳固定反应酶系强; 异柠檬酸裂解酶活力欠缺或微弱,乙醛酸循环弱; α-酮戊二酸氧化能力微弱; 柠檬酸合成酶、乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶活
有机氮丰富有利于长菌,因此谷氨酸发酵前期要 求一定量的有机氮,通常在基础培养基中加入适 量的有机氮,在发酵过程中流加尿素、液氨或氨 水来补充无机氮。
(3)无机盐
磷酸盐 :工业生产上可用K2HPO4·3H2O、KH2PO4、 Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O等磷酸盐,也可用磷酸。 过高:代谢转向合成缬氨酸。 过低:菌体生长缓慢。

高中生物:5.2《微生物的营养、代谢和生长》名师精选教案(1)(旧人教版选修)

高中生物:5.2《微生物的营养、代谢和生长》名师精选教案(1)(旧人教版选修)

第2节微生物的营养、代谢和生长知识方面(1)使学生学会应用微生物所需的碳源、氮源、生长因子等营养物质的概念、功能及主要来源的知识;培养基配制的原则及培养基种类的知识;微生物代谢调节方式、实例以及生产实践中微生物代谢的人工控制的知识;(2)使学生理解微生物细胞内产生的代谢产物的种类和功能,发酵概念及种类,微生物群体生长的规律及其生产实践中应用和微生物生长的影响因素;(3)识记测定微生物群体生长的方法。

重点(1)微生物所需的碳源、氮源和生长因子的来源、功能;(2)培养基的种类及配制原则;(3)微生物代谢的调节、代谢的人工控制;(4)微生物群体生长规律及影响微生物生长的环境因素。

难点(1)不同微生物所需的碳源、氮源不同。

(2)微生物代谢的人工控制。

(3)细菌生长曲线的分析。

1.由人体营养物质与营养的概念引出微生物的营养物质与营养的概念,导入本课题。

2.由组成生物体的化学元素引出微生物的化学组成,并以下表“C、H、O、N、P、S在不同微生物体内含量(占细胞的质量分数/%)”,证明微生物与其他生物在化学组成的统一性以及不同的微生物化学组成的差异性。

3.组成微生物的化学元素分别来自微生物生长所需的营养物质,营养物质按照它们在机体中的生理作用,将它们区分为碳源、氮源、生长因子、水和无机盐。

4.碳源和氮源。

(1)阅读教材第85~86页相关内容。

(2)教师提供研究课题,学生交流讨论,深化知识理解,拓展学生思维,提高运用知识的能力。

研究课题一:关于自养微生物和异养徽生物碳源的利用和能量的来源。

归纳:①自养微生物以二氧化碳或碳酸盐为惟一碳源进行代谢生长;异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。

②自养微生物生命活动所需的能源:一种类型是利用光能,如蓝细菌等着色细菌;一种类型是依靠物质氧化过程释放能量,如硝化细菌。

异养微生物生命活动所需的能源主要依靠物质氧化分解放能,碳源是异养微生物的主要能源物质,即碳源对于异养微生物来说,不仅可为机体提供构成细胞的物质,而且为机体提供完成整个生理活动所需的能量;某些异养微生物也可以光能作为能源,例如红螺菌,它不能以二氧化碳作为主要或惟一碳源,而需要有机物参与,才能利用光能将二氧化碳还原成细胞物质,这种营养类型称为光能异养型。

微生物发酵技术习题(含参考答案)

微生物发酵技术习题(含参考答案)

微生物发酵技术习题(含参考答案)一、单选题(共40题,每题1分,共40分)1、青霉素结晶时,需加入()A、乙醇B、甲醇C、丙醇D、丁醇正确答案:D2、关于机械消泡,错误的说法是()A、减少杂菌污染B、对提取无任何副作用C、不能从根本上消除引起泡沫的因素D、消沫效果明显正确答案:D3、()是发酵工业大规模使用的培养基,它有利于氧和物质的传递。

A、液体B、半固体C、固体正确答案:A4、抗生素的合成是在微生物生长的()A、稳定期B、对数生长期C、延滞期D、衰亡期正确答案:A5、青霉是哪种类型的微生物()A、放线菌B、霉菌C、细菌D、酵母菌正确答案:B6、青霉素萃取的常用萃取剂为()A、乙酸丁酯B、丙酸丙酯C、乙酸乙酯D、乙酸丙酯正确答案:A7、发酵罐内维持()可以防止外界空气中的杂菌侵入而避免污染,以保证纯种的培养。

A、正压B、负压C、平压D、常压正确答案:A8、连续灭菌与分批灭菌相比,优点不包括()A、时间短B、灭菌效果好C、设备利用率高D、适合自动控制正确答案:B9、不是生物工程技术用于环境监测和治理的内容是()A、DNA探针监测引用水中的病毒B、培养分解四种烃类的超级细菌C、制造单细胞蛋白.D、用酶传感器快速测定水中的酚正确答案:C10、链霉素分子结构上没有()基团A、胍基B、醛基C、羧基D、甲氨基正确答案:C11、在实验室种子培养阶段,对于产孢子能力不强及孢子发芽慢的菌种可采用()液体培养法制备菌丝体作为种子罐的种子。

A、摇瓶B、任意器皿C、种子罐D、扁瓶正确答案:A12、为使淀粉和纤维素进行代谢而提供能量()A、它们必须第一步变成脂肪分子B、它们的葡萄糖单位必须被释放C、所有微生物都可以D、遗传密码必须起促进作用正确答案:B13、所有的α-氨基酸(脯氨酸除外)都能与茚三酮发生颜色反应,生成()化合物A、蓝紫色B、黄色C、棕色D、白色正确答案:A14、草酸能将链霉素发酵液中的()去除掉A、钙离子B、镁离子C、铵离子D、铁离子正确答案:A15、直接发酵法生产氨基酸的菌株中,抗氨基酸结构类似物突变是为了()A、改变生物合成方向B、加速微生物的代谢C、解除产物的反馈抑制D、改变代谢支路正确答案:C16、尿素用来制备培养基,这里的尿素是做为()A、碳源B、诱导剂C、消泡剂D、氮源正确答案:D17、()空气除菌流程可将空气冷却至露点以上,适宜内陆和北方比较干燥的地区使用A、高效前置空气过滤除菌流程B、将空气冷却至露点以上的空气除菌流程C、利用热空气加热冷空气的空气除菌流程D、两级冷却、分离、加热的空气除菌流程正确答案:B18、由于污染的杂菌好氧性不同,产生溶氧异常的现象也是不同的。

谷氨酸发酵知识完全总结

谷氨酸发酵知识完全总结

谷氨酸的性质及基本介绍147.129261.538主要用途简介:(一)食品工业:谷氨酸钠俗称味精,是重要的鲜味剂,对香味具有增强作用。

(二)日用化妆品:谷氨酸作为营养药物可用于皮肤和毛发。

N—酰基谷氨酸钠系列产品是由谷氨酸缩合而成的性能优良的阴离子表面活性剂,广泛用于化妆品、香皂、牙膏、香波、泡沫浴液、洗洁净等产品中。

焦谷氨酸钠(味精脱水生成的产物)具有极强的吸湿性,能保持皮肤湿润,防止干燥,并增强皮肤和毛发的柔软和弹力。

日本己有以谷氨酸钠(或谷氨酸)为原料生产的高级人造革、化妆品和洗涤剂等产品。

(三)医药行业:谷氨酸作有较高的营养价值,医学上主要用于治疗肝性昏迷,还用于改善儿童智力发育。

(四)农业:谷氨酸与某些激素配合,可制成柑桔增甜剂;还可作为微肥的载体,在氮磷钾基本满足的条件下,作为叶面喷洒的微肥具有投入少、效益高等特点。

谷氨酸钠既是西红柿保护性杀菌剂,又是防治果树腐烂病的特效杀菌剂。

氨基酸铜是目前生产上良好的杀菌剂,有机铜比无机铜的应用效果好。

特殊说明:(一)谷氨酸晶体为白色结晶或结晶性粉末,味微酸。

(二)吸湿性温度50℃,其临界湿度在90%以上。

谷氨酸生产水平与市场分析生产水平:谷氨酸棒状杆菌-生物素敏感型高产菌株:采用生物素亚适量工艺,发酵32h,产酸达140g/L以上,糖酸转化率达62%以上,国内同类研究的领先水平。

谷氨酸棒状杆菌-谷氨酸温度敏感型突变株:在最佳发酵条件下,发酵24h,产酸达到160g/L,糖酸转化率达72%,国际同类研究的先进水平。

市场分析:我国味精工业的产量稳居世界第一位,2007年全国味精产量达190万吨。

味精工厂的味精平均销售价格为7,800元/吨,成本为7,000元/吨。

按照上述产量计算,我国味精工业中纯味精的总产值约150亿元,加上相当于上述总值30%的副产品(主要是饲料蛋白、化肥、液态肥料)的产出,我国味精工业年生产总值约为200亿元人民币。

从市场需求来看,2007年国内谷氨酸年产量约190万吨,国内人均消费味精仅1kg,与日本、香港、台湾、东南亚等国家及地区的味精消费水平(1.5kg)相比,还是较低的。

谷氨酸棒状杆菌发酵工艺流程

谷氨酸棒状杆菌发酵工艺流程

谷氨酸棒状杆菌发酵工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!谷氨酸棒状杆菌发酵工艺流程一、准备工作阶段在进行谷氨酸棒状杆菌发酵之前,需要进行一系列准备工作。

谷氨酸棒杆菌发酵原理

谷氨酸棒杆菌发酵原理

谷氨酸棒杆菌发酵原理
谷氨酸棒杆菌(Lactobacillus brevis)是一种常见的乳酸菌,广泛应用于酒类、啤酒、面包等食品的发酵过程中。

谷氨酸棒杆菌发酵制品味醇香、口感丰富、均衡度好,深受消费者的喜爱。

谷氨酸棒杆菌发酵原理主要包括产酸、产乳酸、产二氧化碳和发酵剖分四个方面。

一、产酸
谷氨酸棒杆菌是一种嗜酸性乳酸菌,能够在低pH值环境下生存和繁殖。

它通过代谢糖类和蛋白质来产生有机酸,主要酸种为乳酸。

乳酸可以降低食品的pH值,增强口感和保鲜效果。

谷氨酸棒杆菌通过乳酸发酵过程,将葡萄糖和其他碳水化合物转化为乳酸。

这个过程分为两步:
(1)糖类分解:谷氨酸棒杆菌分泌酶类,将多糖和双糖分解为简单糖(葡萄糖、半乳糖等)。

(2)乳酸代谢:简单糖被代谢成乳酸,同时产生能量。

乳酸的产生使pH值下降,抑制其他有害微生物的生长繁殖。

三、产二氧化碳
谷氨酸棒杆菌在繁殖过程中产生大量的二氧化碳(CO2),使食品膨胀并形成气孔。

这个过程称为二氧化碳发酵。

二氧化碳的产生也使食品柔软松散,口感更佳。

四、发酵剖分
发酵剖分指发酵过程中所发生的化学反应,涉及到物质的转化和能量的消耗。

谷氨酸棒杆菌引起的发酵剖分过程如下:
(1)生长期:菌量增长,主要代谢糖分。

(2)发酵期:菌量稳定,糖分代谢增加,有机酸和二氧化碳产生。

谷氨酸发酵进展

谷氨酸发酵进展

谷氨酸发酵进展氨基酸的制造是从1820 年水解蛋白质开始。

1866 年德国的立好生博士利用硫酸水解小麦面筋,分离出一种酸性氨基酸,依据原料的取材,便将此氨基酸命名为谷氨酸。

随后,日本有一教授在探讨海带汁液的鲜味时,提取了谷氨酸,并在1908 年开始制造商品味之素——味精。

1910 年日本味之素公司用水解法生产谷氨酸,与食盐配合出售。

但是这种方法生产谷氨酸耗粮太多,成本太高。

二次世界大战后不久,美国有人提出用发酵法生产谷氨酸的报告。

日本也相继开始了研究,1956 年日本协和发酵公司分离出一种新的细菌,它可以利用100 克葡萄糖转化为40 克以上的谷氨酸。

1957 年发酵法味精正式商业性生产,这标志着氨基酸发酵工业的诞生。

氨基酸的制备方法发酵法:发酵法又可分为直接发酵法与添加前体的发酵法。

添加前体法是以氨基酸的中间产物为原料,用微生物法转化为相应的氨基酸。

提取法:将蛋白质原料用酸水解,然后从水解液中提取氨基酸。

目前,胱氨酸、半胱氨酸和酪氨酸仍用提取法生产。

酶法:利用微生物细胞或微生物产生的酶来制造氨基酸。

合成法:用化学合成法制造的氨基酸有DL-蛋氨酸、DL-丙氨酸,甘氨酸和苯丙氨酸。

生产氨基酸的大国为日本和德国。

日本的味之素、协和发酵及德国的德固沙是世界氨基酸生产的三巨头。

它们能生产高品质的氨基酸,可直接用于输液制剂的生产。

日本在美国、法国等建立了合资的氨基酸生产厂家,生产氨基酸和天冬甜精等衍生物。

国内生产氨基酸的厂家主要是天津氨基酸公司,湖北八峰氨基酸公司,但目前无论生产规模及产品质量还难于与国外抗衡。

在80年代中后期,我国从日本的味之素、协和发酵以技贸合作的方式引进输液制剂的制造技术和仿造产品,1991年销售量为二千万瓶,1996年达六千万瓶,主要厂家有无锡华瑞,北京费森尤斯,昆明康普莱特,但生产原料都依赖进口。

2000年,世界氨基酸产值达45亿美元,占生物技术市场的7%,国内的氨基酸产值达40亿元,占全国发酵产业总产值的12%。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的调节控制
1 菌种的选育
目前工业上应用的谷氨酸产生菌有谷氨酸棒状杆菌、黄色短杆菌、噬氨短杆菌等。我国常
用的菌种有北京棒状杆菌、纯齿棒状杆菌等。在谷氨酸发酵中,如果能够改变细胞膜的通透性,
使谷氨酸不断地排到细胞外面,就会大量生成谷氨酸。研究表明,影响细胞膜通透性的主要因
素是细胞膜中的磷脂含量。因此,对谷氨酸产生菌的选育,往往从控制磷脂的合成或使细胞膜
受损伤入手,以提高细胞膜对谷氨酸的通透性,如生物素缺陷型菌种的选育。
发酵中原料要消耗在如下三个方面:第一、供菌体增殖, 生成足够量的菌体, 使其干重占
到发酵液的1.0%1.5%, 这是产酸前提与基础。第二、生成谷氨酸。第三、由于菌体代谢多支路
及发酵条件控制不当而产生的一些其他副产物如乳酸、酮酸、其他氨基酸等等及一些原料被分
解而随空气逸出。【1】

2 糖液质量是发酵的基础
糖液质量是发酵成功的基础" 这是氨基酸发酵业界同仁的共识。氨基酸发酵所需的糖液不同
于麦芽糖、结晶糖。 有它自身特点,其糖液DX、DE、透光率高而且经糖谱分析,糖(及以上的)
值要低,防止发生复合反应。为达到上述要求,作出符合发酵所需要的优质糖液, 可按以下条
件实施生产调控:
2.1一次喷射双酶法%
2.2选用高效优质酶和喷射器-水热器);
2.3 液化:调浆ph5.8~6.0 液化维持温度100~95%;液化维持时间100~120min
2.4糖化:ph4.1~4.3 糖化温度60% 糖化时间32~36h
2.5过滤:高液位压差法

3 接种量和种子培养扩大级数
为提高发酵罐中菌的增殖速度,菌体数尽快达到高峰,使产物的合成时间提前,力争采用
较大种量。
大种量可使发酵时间缩短,但种量过大,也使菌体生长过快,料液粘度增加,导致DO不足,
影响产物合成。同时要消耗过量的糖和营养,致使糖酸转化率下降。
一般常用接种量,谷氨酸发酵为5%~10%赖氨酸为10~15%更高者达20%
代谢产物的合成是靠菌来完成,菌体量越多自然产量越大,但菌体的活力必须保持在最佳
状态。为提高单位容积内菌体数量可采用高细胞密度培养方式。但要防止种龄过长,菌体过早
衰退。
为提高种量,缩短种龄,增强菌体活力,赖氨酸和谷氨酸发酵也可采取三级种子扩大培养
方法。如谷氨酸发酵罐" 一级种瓶→二级4m³种罐→三级40m³种子罐→386m³发酵罐" 多一级种
子扩大,应重视对染菌的控制。
4 溶氧水平和生物素用量
。理论上,对于生物索缺陷型菌株,增大用量可提高菌体浓度,在适当的发酵控制下,当菌体
内生物素
被消耗至“贫乏”水平,菌体可大量合成谷氨酸,从而达到提高代谢产物浓度的目的。但是,
谷氮酸产生菌的生长和代谢往往还受到其它因素影响,在目前的发酵条件下,发酵罐的溶氧条
件就是制约因素之一
为提高生物素缺陷型菌株发酵生产谷氨酸的单罐产量,对发酵罐搅拌器和高生物素谷氨
酸发酵工艺进行研究。试验结果表明:将 100 in 发酵罐原有 6弯叶圆盘涡轮搅拌器改造为 6
半圆叶 圆盘涡轮搅 拌 器,并 对其尺 寸进行优 化 。发酵罐的溶氧系数提高了147%;通过
在最终改造的发酵罐中进行发酵试验,其适宜的初始生物素浓度和单罐谷氨酸产量均达到最高,
分别为 12.2 L和 l1.65 t,比搅拌器改造前分别提高了56%和25%。因此,提高发酵罐的
溶氧系数,有利于提高生物素的适宜用量,最终促进了单罐谷氨酸产量的显著提高。
5

谷氨酸棒杆菌 Corynebacterium glutamicum 是40年来世界氨基酸生产的主要菌株。最
近 Coryne2 bacterium glutamicum ATCC 13032 的基因组测序工作已经完成 。该项工作的完
成促进和方便了国内外研究人员采用分子生物学的方法对棒杆菌做更深入的研究。按照以往总
结出的有关谷氨酸生产菌株的特点 ,乙醛酸循环为必需的代谢途径 ,这是因为以糖质原料发酵
生产谷氨酸时 ,在谷氨酸发酵的菌体生长期 ,菌体需要它来提供部分能量和生物合成反应所需
的中间产物 ,但同时指出 ,在菌体生长期后的谷氨酸合成期 ,为了大量生成和积累谷氨酸 ,最
好封闭乙醛酸循环途径。这是因为如果三羧酸循环中的四碳二羧酸100 %地由 CO2 固定反应供
给 ,则糖酸转化率为 87.1 %;如果四碳二羧酸 100 %地由乙醛酸循 [2 - 3]环供给 ,则糖酸转
化率只有 54.4 % 。所以我们可以乙醛酸循环途径缺失这方面来入手。
方法步骤有以下一些:
5.1 乙醛酸循环途径缺失的谷氨酸棒杆菌突变株的构建
5.2 细胞生长曲线的绘制
5.3 摇瓶发酵及其葡萄糖和谷氨酸的测定
5.4 粗酶液的制备
5.5 细胞内异柠檬酸裂解酶( ICL) 活性的测定
5.6 酶蛋白定量
上法能够得到乙醛酸循环途径缺失的谷氨酸棒杆菌突变株,然后我们将其和野生型菌株一桶进
行培养,从图可知,当野生型菌株和乙醛酸循环途径缺失的谷氨酸棒杆菌突变株在以葡萄糖为唯
一碳源的基本培养基上生长时,它们的生长速度几乎相同,说明当以葡萄糖为碳源进行培养时谷
氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum 不需要乙醛酸循环为其提供生长所需的能量和代谢中
间产物。当在以乙酸为唯一碳源的基本培养基上培养时, 菌株由于缺乏乙醛酸循环途径而不能
生长;野生型菌株与以葡萄糖为碳源进行生长时比较,迟缓期延长约15h。
从表2 可知异柠檬酸裂解酶基因被敲除的突变株WTΔA 没有异柠檬酸裂解酶活性。而野生型出
发菌株WT 生长在以葡萄糖为唯一碳源的基本培养基上时有微弱的异柠檬酸裂解酶活性。但是在
以乙酸盐为唯一碳源的基本培养基上生长时由于受到乙酸盐的诱导作用而酶活大增。
虽然乙醛酸循环途径是谷氨酸棒杆菌谷氨酸合成的中心代谢途径之一,但是有关谷氨酸棒
杆菌的乙醛酸循环途径的作用并不明确。

6 温度对发酵的影响与调控
发酵温度升高,酶反应速率增大,生长代谢加快,但菌体易衰老,影响最终产酸。不同氨
基酸的发酵适宜温度也是不同的。例如谷氨酸发酵前期33%~34%;中期35%~36%;后期38%~
39%.
发酵过程,由于菌体增殖和生物合成代谢产物而产生热量(发酵热)使发酵液温度升高,
须及时冷却,以难持适宜的发酵温度。
不同氨基酸发酵热是不同的。谷氨酸发酵热约3.5×104 (KJ/m³·h)赖氨酸的发酵热约为5.0
×104(KJ/m³·h)。而且发酵温度也比较低,所需要的冷却面积和冷却水水量都高于谷氨酸。
生产上根据温度变化!用冷却水进行调控,一般采用数显指示,手段调节。 最好使用pt电
阻温控气动阀自动调节.

相关文档
最新文档