微生物设计方案
微生物检验室、理化检验室设计方案
1。
微生物检验一、微生物实验室概况食品微生物实验室主要负责各类微生物项目的检测,主要检测项目有菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、双歧杆菌、罐头商业无菌、致病菌（如沙门氏菌、志贺氏菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等）。
微生物实验室由准备室、洗涤室、灭菌室、无菌室、恒温培养室和普通实验室六部分组成。
这些房间的共同特点是地板和墙壁的质地光滑坚硬，仪器和设备的陈设简洁，便于打扫卫生。
二、微生物实验室功能分区（一）准备室准备室用于配制培养基和样品处理等。
室内设有试剂柜、存放器具或材料的专柜、实验台、电炉、冰箱和上下水道、电源等。
（二）洗涤室洗涤室用于洗刷器皿等.由于使用过的器皿已被微生物污染,有时还会存在病原微生物。
因此,在条件允许的情况下，最好设置洗涤室。
室内应备有加热器、蒸锅,洗刷器皿用的盆、桶等，还应有各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
(三）灭菌室灭菌室主要用于培养基的灭菌和各种器具的灭菌，室内应备有高压蒸汽灭菌器、烘箱等灭菌设备及设施。
（四）无菌室无菌室一般为4 - 5 平方米、高 2。
5 米的独立小房间(与外间隔离)，专辟于微生物实验室内。
无菌室也称接种室，是系统接种、纯化菌种等无菌操作的专用实验室.在微生物工作中,菌种的接种移植是一项主要操作，这项操作的特点就是要保证菌种纯种,防止杂菌的污染。
在一般环境的空气中，由于存在许多尘埃和杂菌，很易造成污染，对接种工作干扰很大。
1。
无菌室的设置无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。
其基本要求有以下几点：（1）无菌室应有内、外两间,内间是无菌室,外间是缓冲室。
房间容积不宜过大，以便于空气灭菌.最小内间面积2×2.5＝5m2，外间面积1×2＝2m2，高以2.5m以下为宜,都应有天花板。
（2）内间应当设拉门，以减少空气的波动,门应设在离工作台最远的位置上;外间的门最好也用拉门,要设在距内间最远的位置上。
（3）在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上，应开一个小窗,作接种过程中必要的内外传递物品的通道，以减少人员进出内间的次数,降低污染程度。
微生物检验室理化检验室设计方案
微生物检验室理化检验室设计方案1.实验室布局微生物检验室和理化检验室可以分开布局，也可以合并在一个大实验室内。
合并布局的好处是节省空间和资源，并能促进不同实验室之间的合作。
无论是分开还是合并布局，都需要考虑实验室的通风、照明、消防等基本设施，并根据实验室的规模和需求确定实验室的大小和平面布置。
2.实验台和仪器设备实验台是实验室的核心部分，实验台的设计应符合实验操作的需求，方便实验人员进行操作。
实验台需要考虑到微生物检验和理化检验所需的设备和试剂的存放，同时还需要有足够的空间布置仪器设备，如显微镜、培养箱、分析仪器等。
此外，实验室设计还应考虑实验台的结构和材料的选择，以方便实验室的清洁和消毒。
3.空气净化系统微生物检验室和理化检验室都需要考虑空气净化系统，以确保实验室环境的洁净度。
空气净化系统应能过滤空气中的微生物和颗粒物，确保实验室内的空气质量符合相关的标准。
此外，还需要考虑实验室内的压力差，以防止实验室内的空气污染影响到周围环境。
4.水处理系统实验室内的水处理系统对于微生物检验和理化检验都是必要的。
水处理系统应能提供高质量的水源，包括纯水和蒸馏水，以保证实验结果的准确性。
同时，还需要配备合适的水质监测设备，确保水质符合实验要求。
5.安全设施实验室的安全设施包括紧急安全淋浴器、安全柜、防爆设备等。
实验室设计应考虑这些安全设施的位置和布局，以便实验人员在发生意外情况时能迅速采取应对措施，保证实验人员的安全。
6.废弃物处理系统综上所述，微生物检验室和理化检验室的设计方案需要考虑实验室布局、实验台和仪器设备、空气净化系统、水处理系统、安全设施和废弃物处理系统等方面的要求。
只有充分考虑到这些因素，才能确保实验室的安全、高效和科学。
以上只是一个简要描述，实际的设计方案还需要根据具体实验室的需求和要求进行详细的规划和设计。
微生物实验设计方案
分离及鉴定土壤中产生α-淀粉酶的菌种一．实验目的1、学习从土壤中分离、纯化微生物的原理与方法。
2、学习、掌握微生物的鉴定方法。
3、对提取的土样进行微生物的分离、纯化培养，并进行简单的形态鉴定二. 实验原理α-淀粉酶是一种液化型淀粉酶，它的工业产生菌芽孢杆菌，广泛分布于自然界，尤其是在含有淀粉类物质的土壤等样品中。
土壤是微生物生存的大本营，所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。
采集含菌样品前应调查研究一下自己打算筛选的微生物在哪些地方分布最多，然后才可以去采集土壤样品。
纯种分离的方法很多，主要有：平板划线分离法、稀释涂布平板法、平板菌落计数法等。
三．实验材料1、器材：培养皿、载玻片、盖玻片、显微镜、量筒、滴管、吸水纸、无菌水试管5支（每支4.5mL 水）、烧杯、三角瓶、电炉、玻璃棒、接种环、镊子、恒温培养箱、高温灭菌锅、移液枪、天平、滤纸、pH试纸等。
2、试剂：配制牛肉膏蛋白胨培养基的原料、锥虫蓝（0.01——0.005g/L）、葡萄糖（淀粉的1%）、可溶性淀粉0.2g、结晶紫染液、番红染液、95％乙醇、无菌水等。
3、土样：山上土壤四．实验方法步骤1、采集土样带上小铁铲和无菌袋到土豆地采集较细碎土壤2、样品稀释在无菌纸上称取样品1g，放入100mL无菌水的三角瓶中，手摇10分钟使土和水充分混合。
用1mL无菌吸管吸取0.5mL注入4.5mL无菌水试管中，梯度稀释至10-6。
3、分离用稀释样品的同支吸管分别依次从10-6、10-5、10-4样品稀释液中，吸取lmL，注入无菌培养皿中，然后倒入灭菌并融化冷至50℃左右的固体培养基，小心摇动冷凝后，倒置于37℃温箱中培养48小时。
培养基的配制—称取蛋白胨 1.0g； NaCl 0.5g；牛肉膏 0.3g；琼脂1.5g；pH6.4左右；100ml水定容。
4、初步鉴定对多种菌进行形态特征的观察，简单染色、革兰氏染色以及芽孢染色观察，记录结果。
5、α-淀粉酶鉴定1)实验原理：细菌能否产生α-淀粉酶主要依据是鉴定有能否分解淀粉。
微生物发酵废液的综合利用方法与设计方案
图片简介:本技术涉及一种微生物发酵废液的综合利用方法，包括如下步骤：(1)将微生物发酵液经膜分离，制得发酵废液和清液，发酵废液中固体体积占总发酵废液体积的百分比不低于30％，清液用于分离提纯目标产物；(2)酸化发酵废液，将其升温至7090℃后，再将其降温至室温后，过滤，制得的滤渣用于制备饲料，滤液回收利用到发酵过程。
本技术无需添加絮凝剂，仅通过酸化、升温、降温和过滤处理，即可实现固液分离，且分离时间短，分离效果好。
技术要求1.一种微生物发酵废液的综合利用方法，其特征在于，包括如下步骤：将微生物发酵液经膜分离，制得发酵废液和清液，发酵废液中固体体积占总发酵废液体积的百分比不低于30％，清液用于分离提纯目标产物；酸化发酵废液，将其升温至70-90℃后，再将其降温至室温后，过滤，制得的滤渣用于制备饲料，滤液回收利用到发酵过程；或者将酸化发酵废液降温至5-10℃，再将其升温至70-90℃后，再降温至室温后，过滤，制得的滤渣用于制备饲料，滤液回收利用到发酵过程。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微生物发酵液为氨基酸发酵液，优选所述氨基酸选自丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、瓜氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、络氨酸、缬氨酸的任一种或其组合。
3.如权利要求1-2中任一项所述的方法，其特征在于，所述膜分离选自纳滤膜分离、超滤膜分离、普通滤膜分离、陶瓷膜分离、离子交换膜分离的任一种或其组合。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，对所述微生物发酵液进行灭活处理后再进行膜分离，优选灭活处理方式为干热灭菌、湿热灭菌、高压灭菌、等离子体灭菌的任一种或其组合，优选步骤(1)中，对微生物发酵废液降温至50℃以下后再进行膜分离。
5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，酸化发酵废液的pH1-6，优选pH 3-4，优选所述步骤(2)中的酸性溶液为浓硫酸、浓盐酸、浓硝酸、草酸的一种或几种。
微生物实验设计报告
一、实验原理肠道杆菌的细菌为革兰氏阴性菌，大多数有鞭毛，能运动。
少数无鞭毛不能运动，不产生芽孢，需氧或兼性厌氧，在普通培养基上，一般都生长良好，均能发酵葡萄糖产酸或产气，触酶试验阳性，氧化酶试验阴性，还原硝酸盐。
这类细菌是人类和动物肠道中的细菌，有的引起腹泻、肠炎、肠热症和痢疾等。
有的为条件致病菌，有时也可引起身体各个部位的感染。
二、实验材料1.病鸡：怀疑被大肠杆菌或沙门氏菌感染2.培养基：半固体培养基麦康凯平板三糖铁高层斜面蛋白胨水葡萄糖蛋白胨水3.革兰式染色试剂：草酸铵结晶紫溶液、革兰氏碘溶液、95%酒精，沙黄水溶液4. 生化管：葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、枸橼酸盐、H2S、尿素5. 生化试剂：吲哚试剂， MR 、VP 试剂7.药敏实验试剂：青霉素、复方新诺明、氯霉素三、实验内容及其安排（一）、制备培养基：麦康凯、半固体、三糖铁高层斜面、蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水。
（二）、解剖实验动物，细菌分离培养：病料抹片，染色镜检。
划线接种麦康凯或S·S琼脂平板。
（三）、观察细菌培养性状，选择可疑菌落进行纯培养。
普通琼脂平板、伊红美兰琼脂平板、三糖铁琼脂斜面。
（四）、观察细菌纯培养结果，细菌抹片，革兰氏染色镜检，观察细菌抹片及纯培养情况，。
（五）做生化试验、药敏试验。
（六）观察实验结果，写实验报告。
第一天：制备培养基解剖实验动物、病料抹片、细菌分离培养1.S.S培养基：50g S·S培养基+800ml蒸馏水，煮沸溶化浇平板（15ml/块平板），无需高压2.麦康凯培养基3.三糖铁琼脂4.葡萄糖蛋白胨水：1.25g蛋白胨+1.25g葡萄糖+1.25g磷酸氢二钾+250ml水，加热溶解，调pH至7.6，分装40根短试管高压（3指半高，约5-8ml）5.蛋白胨水：1.25g蛋白胨+0.625gNaCl+125ml水，调pH至7.6，分装40根短试管，捆扎，高压，121℃15分钟（2指高，约2-4ml）6.半固体：分别称取蛋白胨5g、牛肉膏2.5g、氯化钠2.5g、磷酸氢二钾0.5g、蒸馏水500ml，加热溶解，调pH7.6，过滤称琼脂粉2g+肉汤500ml,煮沸，待琼脂粉完全溶化，分装短试管（2指高，约2-4ml）病鸡剖检的方法和步骤一、剖检要求：剖检鸡最好在死前或濒死期进行。
《来自微生物的威胁作业设计方案》
《来自微生物的威胁》作业设计方案一、背景介绍微生物是一类微小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
虽然微生物在自然界中起着重要的生态作用，但有些微生物也会给人类健康和生活带来威胁。
在平时生活中，我们需要了解微生物的种类、发展环境以及威胁，以便有效预防和应对微生物带来的风险。
二、教学目标1. 了解微生物的分类和特点；2. 掌握微生物对人类健康和生活的威胁；3. 学会预防微生物带来的风险；4. 培养学生的科学素养和危机认识。
三、教学内容1. 微生物的分类和特点；2. 常见微生物对人类健康的威胁；3. 预防微生物感染的方法；4. 案例分析：近些年来的疫情爆发及防控措施。
四、教学活动设计1. 观察实验：通过显微镜观察不同种类的微生物，了解它们的形态和特点；2. 分组讨论：讨论常见微生物对人类健康的风险，并提出预防措施；3. 角色扮演：扮演医生、护士、病人等角色，模拟疫情防控过程；4. 实地考察：参观当地卫生防疫机构，了解他们的工作内容和防控措施。
五、评判方式1. 参与度评判：根据学生在活动中的表现和参与度进行评判；2. 作业评判：安置相关作业，包括实验报告、讨论总结等；3. 考试评判：进行期末考试，考察学生对微生物知识的掌握水平。
六、教学资源1. 教材：《微生物学导论》；2. 实验器械：显微镜、培养皿等；3. 参考资料：相关疫情防控资料、科普文章等。
七、教学环节安排1. 第一周：介绍微生物的分类和特点；2. 第二周：讨论微生物对人类健康的影响；3. 第三周：进修预防微生物感染的方法；4. 第四周：进行案例分析和总结。
八、教学效果评估通过教学后的问卷调查和学生表现评判，了解学生对微生物知识的掌握情况和对疫情防控的认识水平，进一步完善教学内容和方法，提高教学效果。
以上是《来自微生物的威胁》作业设计方案的具体内容，希望通过这样的教学活动能够让学生更加深入地了解微生物的威胁，提高他们的防范认识和科学素养。
感谢您的阅读！。
微生物复合菌剂及其处理方法和应用与设计方案
本技术涉及一种微生物复合菌剂，该微生物复合菌剂包括分解餐厨垃圾的复合菌体和固体发酵辅料，其中：分解餐厨垃圾的复合菌体包括纤维素降解菌10～15份，淀粉降解菌15～30份，蛋白质降解菌15～20份，油脂降解菌15～20份，枯草芽孢杆菌10～15份，铜绿假单胞菌5～15份；固体发酵辅料配比为麸皮50～60kg、豆粕15～20kg、硫酸镁0.4～0.6kg、磷酸二氢钾0.4～0.6kg、磷酸氢二钠0.1～0.2kg、葡萄糖8～10kg；该分解餐厨垃圾的复合菌体接种固体发酵辅料时接种量为0.8%～1%，经固体发酵得到该微生物复合菌剂。
该复合微生物菌剂，不仅对油脂、蛋白、纤维类物质具有良好的分解效果，而且可以耐受一定浓度的盐分。
最优时，降解率可达到90%以上。
技术要求1.一种微生物复合菌剂，所述微生物复合菌剂由分解餐厨垃圾的复合菌体和固体发酵辅料制备而来，其中，所述分解餐厨垃圾的复合菌体包括纤维素降解菌10～15份，淀粉降解菌15～30份，蛋白质降解菌15～20份，油脂降解菌15～20份，枯草芽孢杆菌10～15份，铜绿假单胞菌5～15份；所述固体发酵辅料配比为麸皮50～60kg、豆粕15～20kg、硫酸镁0.4～0.6kg、磷酸二氢钾0.4～0.6kg、磷酸氢二钠0.1～0.2kg、葡萄糖8～10kg；所述分解餐厨垃圾的复合菌体接种所述固体发酵辅料时接种量为体积重量比0.8％～1％；其中，所述纤维素降解菌为CICC23686，所述淀粉降解菌为产淀粉酶枯草芽孢杆菌CICC10066，所述蛋白质降解菌为产蛋白酶枯草芽孢杆菌CICC10071，所述油脂降解菌为产脂肪酶地衣芽孢杆菌CICC21085，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌CICC10210，所述铜绿假单胞菌为铜绿假单胞菌CICC21100。
2.一种权利要求1所述微生物复合菌剂的制备方法，所述方法包括：(1)分别培养所述纤维素降解菌，淀粉降解菌，蛋白质降解菌，油脂降解菌，枯草芽孢杆菌，铜绿假单胞菌，其中，所述纤维素降解菌为CICC23686，所述淀粉降解菌为产淀粉酶枯草芽孢杆菌CICC10066，所述蛋白质降解菌为产蛋白酶枯草芽孢杆菌CICC10071，所述油脂降解菌为产脂肪酶地衣芽孢杆菌CICC21085，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌CICC10210，所述铜绿假单胞菌为铜绿假单胞菌CICC21100；(2)按所述比例混合所述培养的纤维素降解菌，淀粉降解菌，蛋白质降解菌，油脂降解菌，枯草芽孢杆菌，铜绿假单胞菌；(3)将步骤(2)中所述混合后的复合菌体加入固体发酵辅料中，经固体发酵，制得所述微生物复合菌剂。
微生物的培养和应用教学设计
我的想法：基于以上教学内容和学情分析，我力图创设一个大课题背景，想通过问题引领任务驱动，带领学生分步落实课标的具体要求。即：教室的一块窗纱大概有多少类细菌？1cm2约有多少个细菌？不同的细菌对临床常用的几种抗生素有没有抗药性？学生在问题的驱动下，设计方案、实施实验、逐步达成课标要求。
①窗纱中不同细菌数量不同，稀释倍数较低时所有细菌类型基本都能出现；稀释倍数高时，数量少的细菌菌落不能出现。且稀释倍数升高，细菌数量减少，生存斗争减小，菌落较大。
在没有杂菌污染的前提下，出现的菌落类型都计数。
②菌液摇匀与否、接种量不等、涂布不均、多人操作存在个体差异等因素都会造成数据差距较大；由一人严格按操作要求操作，多次实验，才可能出现较为准确的数据。
实施者
周潜英
顺义区第一中学
指导者
乔秀芹
李晓伶
顺义教育研究考试中心
顺义教育研究考试中心
其他参与者
马会放
顺义区第一中学
指导思想与理论依据
“倡导探究性学习”是高中《生物课程标准》提出的重要理念之一。倡导探究性学习，力图促进学生学习方式的变革，教师应首选现实环境，使学生身临其境，动手动脑，主动参与探究过程。通过实验等实践活动，帮助学生更好地理解和掌握相关知识，提高学生在实验操作、科学思维、分析和解决问题以及交流与合作等方面的能力，促进学生形成尊重事实、坚持真理的科学态度。
教学背景分析
教学内容分析：《微生物的培养与应用》是人教版选修1《生物技术实践》模块的一个独立专题。课标对此专题的具体要求是：1.进行微生物的分离和培养；2.测定某种微生物的数量；3.研究培养基对微生物的选择作用；4.探讨微生物的利用。教材针对课标要求制定了三个课题：课题1微生物的实验室培养；课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数；课题3分解纤维素的微生物。
微生物学实验 课题设计方案
海南师范大学从环境中分离放线菌实验设计方案专业：生物科学班级：2010级一班组长：陈丽娟组员：李万蕊、曹露露、朱嘉宁时间：2012年5月24日一、实验目的1、学习从土壤中分离放线菌的方法。
2、练习、掌握微生物接种、移植和培养的基本技术。
掌握无菌操作技术。
3、掌握无菌操作技术。
二、实验原理放线菌是原核生物，是重要的抗生素产生菌，在土壤中的数量仅次于细菌，尤其在有机质丰富、透气性好的中性到微碱性土壤中的数量较多[1]。
土壤颗粒的分散程度对于分离放线菌也有影响。
钱恒段等[2]报道，用胆酸钠处理土壤悬液后土壤分散效果较好，且优于纯蒸馏水。
这可能是因为胆酸钠对土壤腐殖质具有较强的结合能力从而有利于破坏土壤团聚结构。
据杨宇容等[3]报道,重铬酸钾对土壤真菌、细菌的抑制作用较明显，然而对放线菌并无抑制作用。
而且其价格低廉，如安德荣等[4]报道其可作为理想的放线菌分离抑制剂。
徐成勇等[5]实验证明酵母膏、SDS（十二烷基硫酸钠）也有抑菌的作用。
本实验所用方法为综合徐成勇等[5]及钱恒段等[2]实验结果所得。
三、实验材料1、样品干燥的营养基质丰富的苗圃土2、仪器铲子、牛皮纸、搪瓷杯、锥形瓶、玻璃棒、烧杯、小试剂瓶、标签纸、移液管、接种环、试管、记号笔、酒精灯、电子天平、电炉、恒温培养箱、加压蒸汽灭菌锅、电热干燥烘箱3、培养基及试剂配制（1）培养基（高氏一号琼脂+重酪酸钾培养基)配制:配方：可溶性淀粉20g、K2HPO4 0.5g、1mol/LNaOH、MgSO4•7H2O 0.5g、NaCl 0.5g、FeSO4•7H2O 0.01g、琼脂20g、蒸馏水1000ml、250mg重酪酸钾、PH7.2~7.4。
步骤：用搪瓷杯先量取500ml自来水在电炉上加热。
根据配方，依次称取各种药品加入搪瓷杯中，搅拌均匀。
可溶性淀粉称入烧杯中，加入50ml 自来水调成糊状，待培养液煮沸时加入淀粉糊，边加边搅拌，防止糊底。
之后，加入琼脂煮沸至完全溶化，补足1000ml水量。
微生物学实验设计[方案]
实验背景：某细菌肥料是由相关的不同微生物组成的一个菌群并通过混合培养得到的一种产品。
活菌数的多少是质量好坏的一个重要标志之一，请设计一个实验方案来检测该细菌肥料的质量？在实验过程中为减少实验误差提高数据的可靠性，应该注意那些操作步骤？我们的思路：①题目分析②实验设计③解题总结一、题目分析某细菌肥料是由相关的不同微生物组成的一个菌群并通过混合培养得到的一种产品。
活菌数的多少是质量好坏的一个重要标志之一，请设计一个实验方案来检测该细菌肥料的质量？在实验过程中为减少实验误差提高数据的可靠性，应该注意那些操作步骤？从题目我们可以看出该题目的要求是检测单位质量细菌肥料中的活菌数；减少实验误差。
因此，必须考虑以下几个问题：1、该细菌肥料中的不同微生物有哪几种？通过查找资料我们了解到细菌肥料，一般有瘤菌剂、固氮菌剂、磷细菌剂、抗生菌剂和复合菌剂等分成。
由此，我们推断该细菌肥料中大概有细菌、真菌和放线菌。
2、如何分离纯培养这些微生物？选择性培养基培养；用平板分离法分离。
3、怎样减少实验误差？解决方法采用平板培养计数法要求操作熟练、准确，否则难以得到正确结果。
要求样品成分混匀，保证每个活细胞都能分别形成菌落；尽可能选用选择性培养基，保证计数菌落围有效菌落。
思考之后，鉴于，以上几点我们综合考虑，最终决定采用稀释涂布平板法分离纯化微生物并测定样品中活菌数。
二、实验设计1、实验目的检测单位质量样品细菌肥料中的活菌数。
2、实验原理利用选择培养基，分离培养样品中的不同微生物。
不同的培养基，由于营养成分不同，因此具有选择性，适合改培养基的微生物就可以生长；反之，则不能生长，根据不同的选择培养基，我们可以分离出样品中的不同微生物。
平板菌落计数法，是种统计物品含菌数的有效方法。
方法如下：将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液涂布到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞；统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
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设计方案
学院：生命科学学院
年级：2010级
班级：生科（2）班
指导老师：黄循吟 何滨
时间：14周—16周
实验准备
①采样样品
发霉，长绿毛的橘子皮。
②培养基
马铃薯葡萄糖琼脂培养基
③ 试剂
马铃薯 琼脂 葡萄糖 浓盐酸
④仪器与设备
（1）电子天平，电炉，恒温培养箱，高压蒸汽灭菌器，超净台，光
学显微镜，4℃冰箱
（2）100ml量筒，培养皿，试管，接种环，酒精灯，三角瓶，棉塞，
报纸，绳子
一．采样
1.分离微生物的特点：
青霉菌是真菌的一种，属多细胞，营养菌丝体无色、淡色或
具鲜明颜色。菌丝有横隔，分生孢子梗亦有横隔，光滑或粗糙。
基部无足细胞，顶端不形成膨大的顶囊，其分生孢子梗经过多次
分枝，产生几轮对称或不对称的小梗，形如扫帚，称为帚状体。
分生孢子球形、椭圆形或短柱形，光滑或粗糙，大部分生长时呈
蓝绿色。有少数种产生闭囊壳，内形成子囊和子囊孢子，亦有少
数菌种产生菌核。青霉菌的种类很多，通常生于柑桔类水果上，
蔬菜、粮食、肉类、皮革和食物上也常有分布常呈灰绿色。本实
验是从腐烂的苹果上采集青霉菌在适宜的条件下进行分离纯化培
养，经镜检后用斜面试管进行保藏。
2.采样方法：
（一）基本原理：霉属于丛梗抱科, 广泛分布于空气、土壤
和各种物品上, 常生长在腐烂的柑橘皮及其他水果上, 而使柑橘
皮等呈青绿色。利用青霉极易在柑橘皮上生长的特征, 可以从橘
子皮上分离青霉, 用来进行生物学的实验。
（二）操作方法：取橘子皮若干,剪成小块,置于不加盖的灭菌培
养皿中,在28℃温箱培养,温箱中可放1个烧杯,烧杯中放少量水保持湿
润,或置湿润处室温培养3—7d后会长出菌丝体,成熟后产生分生抱子
穗和分生抱子,呈青绿色,即为青霉菌,挑取少许菌丝体在显微镜下观
察,分生抱子穗呈扫帚状的即可确认为青霉菌。
（三）注意问题：为了更好地培养青霉菌，采集的样品要有普
遍性，要尽可能避免杂菌感染。
3.处理样品
（一）原理：采集的橘子皮在28℃恒温箱培养。
（二）方法：取橘子皮若干,用无菌刀剪成小块,置于不加盖的灭
菌培养皿中,在28℃温箱培养,温箱中可放1个烧杯,烧杯中放少量水保
持湿润。
二．分离（方法和步骤）
1. 青霉的培养（原理）
取橘子皮若干,剪成小块,置于不加盖的灭菌培养皿中,在28℃温
箱培养,温箱中可放1个烧杯,烧杯中放少量水保持湿润,或置湿润处室
温培养3—7d后会长出菌丝体,成熟后产生分生抱子穗和分生抱子,呈
青绿色,即为青霉菌,挑取少许菌丝体在显微镜下观察,分生抱子穗呈
扫帚状的即可确认为青霉菌。也可取苹果(皮)、梨(皮)等放人塑料袋
中加少量水保持湿润,置于28℃培养,3—7d后有青绿色菌丝体生成的
即为青霉菌,可挑取菌丝镜检确认;或直接寻找生长青绿色菌丝体的橘
子皮、苹果(皮)、梨(皮)等直接挑取菌丝在显微镜下确认。
2. 配置马铃薯葡萄糖琼脂培养基
称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1200ml煮沸半个小时，纱
布过滤，取100ml于三角瓶中，再加2g葡萄糖和2g琼脂，加热充分溶
解后用浓盐酸调PH=6.0。
3.方法
（一）灭菌
无菌水，试管，培养皿,移液管分别用报纸包好，配置好的培养
基，置于灭菌仪器中121℃下灭菌20min。
（二）倒平板
将灭菌后取出的培养皿和配置的培养基移至超净工作台中，将培
养基趁热倒入培养皿中，然后将培养皿静置使培养基凝固。
从橘子皮样品上直接刮取一定量青绿色接种于经灭菌处理的平
板培养基上，使其在培养基上分布均匀（无菌条件下操作），28℃恒
温箱中培养24h后观察。
（三） 纯化
待平板上长出菌落后，选取菌落均匀，表面成絮状、绒毛状和蜘
蛛网状菌落。在分离培养基上进行划线，待划线结束后，将培养皿倒
置于28℃恒温下培养24h，继续观察马铃薯培养基上长出的菌落以及
出现的现象即可得到纯种青霉。
三.鉴定
（一）原理：整个霉菌菌落生长已经较标准，当形成了非常典型
的菌落后镜检就可以了。经过涂片、染色进行显微镜检查简便、迅速、
无须特殊药品和器材等。
（二） 方法：
镜检 制片：取载玻片滴1滴乳酸石炭酸棉蓝染液，用尖
头镊子从马铃薯培养基上夹取培养好的青霉置于染液中央，用接种环
拨动染液中的菌丝使其散开，盖上盖玻片，置于显微镜下观察。
（三）结论：在显微镜下可见菌丝、分生抱子梗、小梗、分生抱
子等结构。青霉的菌丝有横隔，分生抱子梗顶端不膨大，无顶囊，经
多次分枝，产生几轮对称或不对称小梗，小梗顶端产生成串的青色分
生抱子。由分生抱子梗、小梗、分生抱子等构成分生抱子穗，分生抱
子穗呈扫帚状。最清晰的就是成串的青绿色分生抱子。