西安枣园西汉早期墓葬出土古酒中菌害分析
2024届八省八校T8联考高三第二次学业质量评价 语文试卷(含答案详解)

2024届高三第二次学业质量评价(T8联考)高三语文试题卷一、现代文阅读(35分)(一)现代文阅读I(本题共5小题,18分)阅读下面的文字,完成1~5题。
长江和黄河虽然同为中华文化的母亲河,都取得了辉煌灿烂的成果,但从夏商周到西晋末,黄河流域经济文化发展水平超过长江流域。
然而,自东汉末年以来,中国北方多次遭到游牧民族的冲击,历次兵燹带来大规模北人南迁,而相对安定的长江流域随着生产力的发展和技术的进步,优越的自然条件日益凸显。
长江流域和黄河流域皆具水热条件,故成为中华文化的两大源头,而长江流域拥有更丰沛的水热资源。
但在原始社会末期至商末这一文明初始阶段的气候条件下,中国先民所能达到的生产力水平更适合开发北方黄河流域。
在全新世中期,全球气候变暖,长江、黄河流域较之现在更加温暖湿润。
黄河流域森林密布,受低温和干旱的威胁较轻;而气候炎热潮湿的长江流域则经常发生洪涝灾害。
当时的原始农业以木石农具为主,黄河中上游的粟作农业依托肥沃疏松的黄土和黄河及其大小支流的灌溉,通过精耕细作实现了蓬勃发展,各早期文明也借此绵延不绝并逐渐融合;而长江流域则因其红壤的土质较为紧密,水稻种植所需平整土地及引水灌溉的劳动量大、技术要求高,而当时人员、技术所能达到的稻作生产方式又较为粗放,且常受洪水威胁,故其农业产出量不及黄河流域。
这种农业生产上的差异在进入青铜时代后仍长期延续,直至铁质农具产生及其后一系列灌溉排水工具的出现、防洪手段和农业生产技术的进步,长江流域的水热优势才逐渐彰显。
另外需要指出的是,在这一农业生产重心的转变过程中,近5000年来的中国气候总体向干冷演变,这导致黄河流域生态系统趋向脆弱,而长江流域则变得更适宜人类居住和农业开发。
另外,黄河流域因过度开发而导致水土流失也起到了推波助澜的作用。
但总体而言,在当时及此后相当长的历史时期内,长江流域铁农具的推广和兴修水利工程的力度仍不及黄河流域,“火耕水耨”仍是南方水稻耕作的主要方式。
2024年高考真题——语文(北京卷)含答案

2024年普通高等学校招生全国统一考试·北京卷语文(答案在最后)限时150分钟满分150分一、本大题共5小题,共18分。
阅读下面材料,完成各题。
材料一气候的波动变化对文明发展产生了重要影响,重建古代气候变化过程具有重要意义。
由于缺乏合适的温度代用指标,我国古温度重建结果分辨率较低,且多以定性记录为主,定量的古温度重建相对较少。
全球历史温度变化曲线的重建主要借助冰芯、深海沉积物和树轮的记录,而我国是传统的农耕文明社会,陆地上的沉积记录才能更好地反映我国历史气候变化。
随着技术的革新,微生物分子化石的研究蓬勃发展,微生物分子化石中的一类化合物——brGDGTs(支链甘油二烷基甘油四醚酯)——被用于古气候研究。
brGDGTs是细菌细胞膜的组成部分,其分子结构中有4到6个甲基和0到2个环戊烷。
如同人天冷需要加衣、天热需要减衣一样,寒冷的气候条件下细菌倾向于合成更多的甲基,而温暖的环境下合成的甲基数量则减少。
微生物活体死亡后,细胞膜中的brGDGTs等大分子能在地质体中长期保留下来,可以通过brGDGTs结构中的甲基个数推断当时的温度。
六盘山北联池靠近中华文明核心区,由中国科学院、南京大学、兰州大学等单位的研究人员组成的联合团队选取这里的沉积物样品,借助brGDGTs,通过定量分析,重建了5000年以来我国北方更高分辨率的暖季(4月至10月)温度变化过程。
结合山西某地沉积物的孢粉重建的降水记录,联合团队获得了我国北方地区5000年以来完整的气候演变历程。
从重建的温度与降水结果来看,我国北方地区的气候呈现出不断变冷、变干的大趋势。
大约前3000年变化缓慢,之后的2000年变化加速。
这主要与太阳辐射变化有关,太阳辐射能量在过去5000年间持续下降。
另外,过去2000年以来的快速冷干现象还可能与太阳活动、局部火山活动等因素有关。
而且这一时期内区域植被中木本植物逐渐减少,导致地表反射率上升,也可能加快了气候变冷变干的速度。
何家村遗宝之谜(上下)(探索·发现2005-96)

何家村遗宝之谜上这里是陕西省西安市,1970年秋天,西安市南郊何家村省公安厅收容遣送站,一座两层高的楼房正在施工中。
10月5日这一天,基建工地一片忙碌,就在地基挖到深约0.8米的时候,施工人员挖到了一个陶瓮,打开陶瓮一看,里面竟是一堆金杯银碗,耀眼夺目。
一夜之间,陕西西安何家村吸引了考古界的目光。
这批金碧辉煌的金银器是施工人员从已经挖出的一个陶瓮和一只银罐中发现的,它们都埋藏在曾被人类扰动过的活土层中。
经清点登记,何家村基建工地挖出的两翁一罐中共有文物1000多件,有玛瑙器、水晶器、玻璃器、玉器、金箔、钱币、银铤、银饼、银板,还有朱砂、石英、琥珀、钟乳石等十几种名贵药材。
其中数量最多的是金银器,金器总重量一万四千九百多克,银器总重量十九万五千多克。
通过对这些金银器的器型和花纹进行分析,专家们确定这是一处唐代窖藏。
此前出土的唐代器物大多数是陵墓中的随葬品,而何家村这批稀世珍宝却充满了浓郁的唐代生活气息,它把千年以前古人的生活状态生动地展示在我们面前,透过这些精美绝伦的文物,我们仿佛穿越时空,回到那浪漫、开放、而璀璨的遥远年代。
它们是二十世纪以来唐代考古的一次重大发现,由于发现地点在陕西西安何家村,考古学家将它命名为“何家村遗宝”。
三十多年来,这批珍贵的文物一直珍藏在陕西历史博物馆内,吸引着千百万游客的目光。
自从这批遗宝出土后,一个问题摆在了考古学家面前。
数量如此之多的珍奇异宝它们是谁埋藏的?何家村遗宝发现地点是在唐代都城长安的兴化坊内。
唐长安城的北面是皇帝居住的宫城和中央行政机构所在的皇城,其余部分称为郭城,郭城的面积约占全城的八分之一。
一条宽155米的中轴线--朱雀大街纵贯南北,横竖相交的十字形街道将郭城划分为排列规整,如棋盘状的一百零八个方块,这一百零八块称为里坊,为居民居住。
兴化坊在郭城北面偏西的位置,靠近皇城附近,是王族贵戚和达官显要居住的黄金地段。
最初的考古发掘简报这样描述何家村遗宝的发现地点:“兴化坊的坊街以南,北距坊街五十五米,西距清明渠遗迹约二百四十米,在兴化坊中部偏西南部位”。
文物保护与修复

第二章1.商周时期已出现以瓷土做原料,烧制温度达1200℃的原始瓷器。
2.陶器的烧制温度比较低,一般在800-1000℃之间。
3.考古发掘出土的陶器中,有一部分带有彩绘,称为彩陶。
4.经分析得知原料的成分是:红色:辰砂(HgS)、朱砂(HgS)铅丹(pb3O4)。
褐色:赭石(Fe2O3)。
白色:铅白(2pbco3·pb(OH)2)、高岭土(H4AL2Si2O9)。
黑色(C)5.一般瓷器的烧制温度在1200~1500℃。
6.陶瓷文物常用的文物修补剂是由聚醋酸乙烯组成的A·T·K面团修补剂。
7.陶器的分类:陶器的种类很多,可按表面情况质地和颜色来分。
①按表面情况分为:素面陶、彩绘陶和粉彩陶。
②按质地可分为:细泥陶和夹砂陶。
③按颜色可分为:黑陶、灰陶、红陶和白陶。
8.表面有彩绘的陶器及干硬泥土的清洗:有彩绘的陶器的表面有一薄薄的含有金属氧化物颜料和动植物胶绘画成的膜。
这层膜与陶器粘结力本来就不是很强,加之地下水长期侵泡或陶器表面泥土干缩时的影响,粘结力会变得更弱,不宜用水泡洗,冲洗。
处理这种彩绘陶器表面的污垢时。
可用脱脂棉球蘸水或酒精等溶剂,局部将干硬泥垢侵润变软后,在用很薄的小竹片小心的剔除,最后用棉签蘸水轻轻粘洗掉绘画膜上少许易软化而不敢在用竹片剔除的泥土。
瓷器与砖瓦类文物上的干硬泥土,可用水将其软化,用毛笔或软毛刷蘸水轻轻刷洗干净。
9.陶瓷文物表面沉淀物的清洗:陶瓷器文物表面的沉淀物一般有石灰质、石膏质及硅质,这些沉淀物匀难溶于水及有机溶剂。
虽然因为沉淀物中各物质的性质不同,所用的清洗剂和清洗方法也不同,但清除沉淀物的原理基本分为两大类。
一种是分解沉淀物中的阴离子,如碳酸根,硅酸根,硫酸根。
另一种是利用螯合剂夺取沉淀物中的阳离子,如钙离子,铁离子,镁离子等。
而形成可溶性的金属螯合物水溶液,而沉积物中的阴离子则与螯合剂中的钠离子结合而形成可溶性盐,用水清洗即可。
10.陶瓷表面由炭黑和有机脂形成的污垢的清洗:清洗由炭黑和有机脂的污垢可用强氧化剂氧化处理,使炭氧化成二氧化碳,使有机脂化合物氧化变成小分子量的有机物,用水冲去即可。
第9课古代的商路贸易与文化交流(后附答案解析)

A.注重海上丝绸之路交流B.社会风俗出现显著变化C.与西域各地的联系密切D.经济作物种植面积扩大2.(2023·山东潍坊·高三山东省安丘市第一中学统考阶段练习)玄奘于627年(一说629年)自长安沿丝绸之路西行,经中亚进入印度佛教最高学府学习。
645年,玄奘回到长安,从印度带回佛经657部,后将其中的75部共1335卷译为汉语,这些佛经中的许多内容在印度已经失传,仅凭汉译本流传于世。
这说明()A.商路发展利于文化传承B.中印经济文化交流频繁C.佛教在中国渐趋本土化D.古代商路促进西学东渐3.(2023·山东潍坊·高三统考期末)明朝中后期,出现了大量关于商路知识的“商书”。
如《一统路程图记》《商程一览》《水陆路程》等,详细记载了由南北二京至各地、十三布政司至各地,以及各布政司之间的交通路线、所经站名、里程等内容。
这表明当时()A.区域性商人群体产生B.对外贸易日益发达C.全国性市场网络形成D.地理学知识的进步4.(2023·山东·模拟预测)塞万提斯的《唐·吉诃德》、薄伽丘的《十日谈》等都不同程度地受到阿拉伯著作《一千零一夜》的影响。
阿拉伯哲学家伊本·阿拉比著作中关于先知夜间旅行和登霄的说法,成为意大利诗人但丁《神曲》的先驱。
该材料说明()A.阿拉伯文化的西传促进了近代西欧文化的发展 B.欧洲文艺复兴的产生源自于阿拉伯文化的西传C.阿拉伯商人和旅行家是东西方文化交流的桥梁 D.阿拉伯文化是世界上最为悠久最为先进的文化5.(2023·山东日照·高三统考期末)新航路开辟之前,印度洋是当时世界上最活跃的商业贸易通道,主要商品是()A.咖啡、茶叶B.瓷器、香料C.烟草、丝绸D.白银、玉米6.(2022·山东潍坊·高三统考阶段练习)宋代以前的手工业著作主要有《周礼·考工记》《墨经》和炼丹书,宋金时期主要有《武经总要》《营造法式》《梦溪笔谈》《新仪象法要》《糖霜谱》《梓人遗制》《北山酒经》等著作。
2023届黑龙江省哈尔滨市三中高三四模语文试题(含答案)

(节选自葛兆光《思想史研究视野中的图像》,有删改) 材料二: 巫鸿在《武梁祠——中国古代画像艺术的思想性》一书中所采用的方法论表明的是, 图像并非单个的图像本身,诸多图像之间相互联结构成一个完整的叙事结构,其背后显 示出强大的文化逻辑与思想深度。巫鸿采用跨学科方法,以图像学方法为主,集合文化 学、历史学、考古学、形式主义和结构主义等多重理论路径进行研究。其主要采用了图 像志和图像学的方法,将艺术作品视为一种社会图像,并力图通过对图像进行文献和形 式的综合分析,进而考察汉代的社会结构和精神状况。在确定了石刻的来源之后,再进 行图像志描述与图像学阐释。巫鸿极为强调图像背后的文化依据,以具体材料为支撑, 将结论还原于当时的文化、社会以及历史背景中以保证结论的真实有效性。 仔细审视巫鸿的方法论不难发现,其关于图像的鉴别与整理总是以系列单元的形式 呈现,以凸显图像的宏观叙事力量,进而由图像重构历史。在“墙壁:人类的历史”这个 章节的开篇处,巫鸿先给读者提供了两条重要的信息:一是武梁祠墙壁上的画像石是按 照一定的顺序和阅读方式从右向左、从上到下排列的。二是石刻上的三组图像也是大致 按照时间顺序来安排的。这就表明,观看方式和图像的叙事方法、排列方式并不是巧合, 而是构图者或者说武梁个人有意安排的结果。这一连贯的动势其目的在于形象化地隐喻 历史的连续进程。 巫鸿还将武梁祠的图像叙事与司马迁的史观联系起来。他得出的结论是:“首先, 武梁祠墙壁上的画像描绘了从人类产生一直到汉代的中国‘通史’。其次,就像《史记》 一样,它通过精心挑选的个体人物来浓缩历史。再者,这些个体人物根据他们的政治关 系、生平德行以及他们的志向而分为几个系列或类别。最后,作为一个儒家学者同时极 为可能是这个祠堂的设计者,武梁的肖像出现在后部历史的结尾处。” 然而与《史记》最本质的不同是媒介的不同,这部历史是武梁祠图画在一个立体三 维的建筑结构中,而不是简单地被书写在简帛之上,在《史记》的非编年书写中事件通
2024年北京语文卷高考真题带答案带解析带分值文字版
2024年北京语文卷高考真题带答案带解析带分值文字版一、本大题共5小题,共18分。
阅读下面材料,完成1-5题。
材料一气候的波动变化对文明发展产生了重要影响,重建古代气候变化过程具有重要意义。
由于缺乏合适的温度代用指标,我国古温度重建结果分辨率较低,且多以定性记录为主,定量的古温度重建相对较少。
全球历史温度变化曲线的重建主要借助冰芯、深海沉积物和树轮的记录,而我国是传统的农耕文明社会,陆地上的沉积记录才能更好地反映我国历史气候变化。
随着技术的革新,微生物分子化石的研究蓬勃发展,微生物分子化石中的一类化合物——brGDGTs(支链甘油二烷基甘油四醚酯)——被用于古气候研究。
brGDGTs是细菌细胞膜的组成部分,其分子结构中有4到6个甲基和0到2个环戊烷。
如同人天冷需要加衣、天热需要减衣一样,寒冷的气候条件下细菌倾向于合成更多的甲基,而温暖的环境下合成的甲基数量则减少。
微生物活体死亡后,细胞膜中的 brGDGTs等大分子能在地质体中长期保留下来,可以通过brGDGTs结构中的甲基个数推断当时的温度。
六盘山北联池靠近中华文明核心区,由中国科学院、南京大学、兰州大学等单位的研究人员组成的联合团队选取这里的沉积物样品,借助 brGDGTs,通过定量分析,重建了5000年以来我国北方更高分辨率的暖季(4月至10月)温度变化过程。
结合山西某地沉积物的孢粉重建的降水记录,联合团队获得了我国北方地区5000年以来完整的气候演变历程。
从重建的温度与降水结果来看,我国北方地区的气候呈现出不断变冷、变干的大趋势。
大约前3000 年变化缓慢,之后的 2000年变化加速。
这主要与太阳辐射变化有关,太阳辐射能量在过去 5000年间持续下降。
另外,过去2000年以来的快速冷干现象还可能与太阳活动、局部火山活动等因素有关。
而且这一时期内区域植被中木本植物逐渐减少,导致地表反射率上升,也可能加快了气候变冷变干的速度。
研究人员将气候重建的结果与中国历史朝代相对应,发现不同历史时期的气候呈现出冷暖交替的特点。
四川省成都市第七中学2023届高三下学期三诊模拟语文含答案
成都七中2022~2023学年度下期高2023届三诊模拟考试语文试题考试时间:150分钟总分:150分一、现代文阅读(36分)(一)论述类文本阅读(本题共3小题,9分)阅读下面的文字,完成1~3题。
传统“正史”中,《史记》和《汉书》双峰并峙,影响深远。
概略地说,大约中唐之前,人们甲班乙马,宋以后,人们劣固优迁。
那么,唐宋间这个“史升汉降”的转变是如何发生的呢?中古中国是个贵族社会,典雅渊懿的《汉书》符合贵族阶层爱好骈文的审美口味。
唐以后,贵族社会向平民社会转变,随着市民文化的兴起,对散文的爱好逐渐成为主流,《史记》地位因此快速上升。
这个解释之外,胡宝国增加了史学内在理路的解释:这和史学从“重叙述”走向“重解释”的变化有关,《史记》贯穿了对历史的某种解释,当宋代以后人们逐渐重视历史解释的时候,《史记》自然就受到了推崇。
在“史升汉降”的转折点上,有一个人起了重要作用,这就是唐代的韩愈。
韩愈对《史记》推崇备至,他本人“雄深雅健”的风格也和司马迁一脉相承。
韩愈提倡古文运动,主张越过六朝的骈文时代,回到司马迁时代,以《史记》为古文典范,由此开始了《史记》的复兴与地位提升。
不过,精英人物在鉴赏品位上的引领固然重要,而社会阶层结构的变化则是文化变迁之基础,两者互动合拍才使某种品位成为主流阶层的文化标识。
历史思维的一个特点就是“据后以论前”,按历史哲学家阿瑟·丹托的看法,历史评论都是“据后以论前”的:立足于后面发生的事情,不断修正对前面发生事情的评价。
当这个历史叙述不断延展,每一次加入新著作,都会使得已经在这段历史中的原有经典著作挪动位置——哪怕是一点点的挪动。
胡宝国说:“宋代史家有追求会通的风气……他们从会通的角度看《史记》,自然会给司马迁以很高的评价。
”到唐初为止,除《史记》之外,可以说还没有一部成功的通史,到唐宋后出现“三通”、《资治通鉴》等出色的通史著作,长于会通的《史记》随之更受重视;后世纪传体越是蓬勃发展,纪传体鼻祖《史记》的地位自然会越来越高。
秦汉饮食文化
春秋战国、秦汉时期的饮食文化陈文华江西省中国农业考古研究中心《农业考古》2007年第4期空前发达的农业生产为各诸侯国争雄称霸提供了坚挺的后援,也为后来秦汉帝国的建立奠定了强大的物质基础,同时也为秦汉时期人们的饮食提供了丰富的食品资源,促进饮食文化向精致化的更高层次发展。
这种发展首先是反映在上层贵族生活奢侈化,也只有他们才有条件讲究饮食的精美和奢华。
《墨子·辞过》就指出:“古之民未知为饮食时,素食而分处。
故圣人作诲,男耕稼树艺,以为民食。
其为食也,足以增气充虚,强体适腹而已矣。
故其用财节,其自养俭,民富国治。
今则不然,厚作敛于百姓,以为美食刍豢,蒸炙鱼鳖,大国累百器,小国累十器,前方丈,目不能遍视,冬则冻冰,夏则饰饐。
人君为饮食如此,故左右象之,是以富贵者奢侈,孤寡者冻馁,虽欲不乱,不可得也。
”统治阶级的生活奢靡,固然是对社会物质财富的一种耗费,增加人民大众的负担,但在客观上也导致了当时烹饪技艺水平的提高,促进了饮食文化的进一步发展。
一.饮食结构春秋战国秦汉时期的饮食结构与商周一样,仍然是以谷物为主食,以蔬菜、肉类、水产、果类为副食。
主食总的来说,商周时期的粮食作物仍是战国秦汉时期的主食,但是比重有所变化,如商周时期文献中经常提到黍稷,到春秋战国时期则更多的是“粟菽”并重。
如:“菽、粟不足,末生不禁,民必有饥饿之色。
”(《管子·重令》)“贤者之治邑也,蚤出莫入,聚粟菽,是以粟菽多而民足乎食。
”(《墨子·尚贤中》) “贤人治天下,使菽粟如水火。
菽粟如水火,而民焉有不仁者乎?”(《孟子·尽心章句上》)粟是小米,自春秋战国以后日益占据主导地位,在汉代还成为口粮的代称,如《盐铁论·散不足》:“十五斗粟,当丁男半月之食。
”菽就是大豆,在粮食中的地位也比过去提高,这其中的原因之一就是石磨的发明,改变了大豆的食用方式。
过去是直接将大豆煮成豆饭吃,而大豆又是很难煮烂的,食用就很不方便。
《文物》2001—2002年度期刊
查询范围:《文物》2001—2002年度期刊查询人:高振宇查询内容如下西安发现的北周安伽墓(《文物》2001年第一期)发掘时间:2000年5—7月发掘地点:安伽墓位于西安市未央区大明宫乡炕底寨村西北约300米处,西距汉长安城遗址3.5公里,地处西安北郊龙首原。
发掘概况:出土一批罕见的浅浮雕贴金彩绘石刻,为研究袄教徒的葬俗及中国与西域文化的交流与融合提供了珍贵的资料。
出土有关中西文化交流的文物:石刻门额半圆形,高66,宽128厘米,正面减地刻绘袄教祭祀图案。
中部为承载于莲花三驼座上的火坛,骆驼站立于覆莲座上,背驮仰覆莲上承圆盘,盘内置薪火,火焰升腾。
火坛左右上方分别刻对称的伎乐飞天,头戴花冠,跣足,飘带飞扬,右侧者弹奏曲颈琵琶,左侧者抚弄箜篌。
飞天下方各有一人身鹰足神,卷发,深目,高鼻,络腮胡须,似戴口罩,胁下生双翼,长尾上扬,双手持神杖伸向供案。
案为三足,上置瓶、叵罗、盘等器皿,瓶内插莲花等吉祥花叶,叵罗可能用来盛酒。
高瓶贴金,其他器皿涂白,花叶贴金或涂绿彩,案涂黑色。
左右侧下角各跪一供养人,左侧者披发,身着圆领紧身衣,腰束带,左手置于贴金熏炉上;右侧者卷发,头戴虚帽,身着翻领紧身衣,右手置于熏炉上,左手持一方形物。
画面阴刻部分涂红彩。
左侧石屏长93、高68、厚8厘米,后端上部有摔(木住十)与后屏相应位置的卯相接。
刻绘的三幅图依次为:车马出行图、狩猎图及野宴图。
第1幅车马出行图可分上下两部分,上部刻绘牛车出行,下部为骑马出行。
牛车出行图中一辆牛驾大轮木车自右向左驶来,车的拱形篷顶向前出檐较长,檐下垂白色幕帘,帘内隐约可见人影。
车体涂黑色,轮涂红彩,黑色键牛驾车。
牛肥壮有力,双角斜出,额点金,鼻穿环,前腿跃起。
牛右一人着粉衣、黑裤、褐靴,右手持缓牵牛。
牛左一人着黑衣,双手举红色荷叶形华盖。
牛前一人着圆领对襟红袍,领、襟、袖口及下摆为褐色,腰系黑带,带缀金饰、系刀鞘,褐裤,黑鞋,回顾牛车。
车右饰奇花异草及吉祥云纹,车左为各色杂石。
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西北大学学报(自然科学版)2017 年 12 月,第47 卷第 6 期,Dec . ,2017,V 〇1.47,N 〇.6 Journal of Northwest University (N atural Science E d itio n )•化学与化学工程•西安枣园西汉早期墓葬出土古酒中菌害分析冯健1吴晨1赵凤燕1陈富林2李晶2(1.西安市文物保护考古研究院,陕西西安710068;.西北大学生命科学学院,陕西西安710069)摘要:针对2003年西安市文物保护考古所发现的西安奉园西汉早期墓葬出土古酒的菌 害,分析微生物群落,并对照其成份判断菌种来源,为制定稳妥的古酒灭菌方案提供科学 依据。
研究使用分子生物学方法,通过培养分离微生物群落,16S r D N ^18S r D N A 序列 分析,艮据同源性比对及系统发育树分析,鉴定出4种优势菌种,其中真菌为淡紫拟青霉 菌,3种细菌分别为微球菌、葡萄球菌和考克氏菌属细菌。
鉴定出的4种优势菌种与空气 微生物中的常见菌种一致;判定古酒菌害原因主要来源于外界空气的交流;提出通过菌落 滤除,隔绝空气,以有效抑制古酒中微生物滋生的防治对策。
该研究也是16S r D N A /18Sr D N A序列分析首次成功在酒类液体文物菌害成份鉴定中应用。
关键词:西汉古酒;菌害分析;16S r D N A /18S r D N A序列分析;保护与保存中图分类号:Q 93-331,K 876.9 文献标识码:AD O I : 10.16152/j . c n k i . x d x b z r .2017-06-011The microorganisms of wine excavated from a tomb of the earlyWestern Han Dynasty in Zaoyuan ,Xi'anFENG Jian1,WU Chen1, ZHAO Fengyan1, CHEN Fulin2,LI Jing2(1. X i’an Institute of Archaeology and Conservation on Cultural Heritage ,X i’an 710068,C hina ;2. College of Life Sciences,Northwest U niversity ,X i’an 710069,China )A b s t r a c t : In o rd e r to d e a l w ith th e m ic ro b ia l diseases fo u n d in th e a n c ie n th e to m b o f th e e a rly W e s te rn H a n D y n a s ty in X i ’n in 2003,th is s tu d y a n a ly z e d t h tio n b y u s in g th e m e th o d o f m o le c u la r b io lo g y , th e n d e te rm in e d th e s o u rce o f m ic ro o r a n d c u ltiv a tio n o f m ic ro o rg a n is m s , 16S r D N A /18S r D N A se q u en ce a n a ly s is ,a n d se q u en ce a lig n m e n t a nd p h y lo g e n e tic tre e a n a ly s is , P a e c ilo m y c e s lila c in u s ,K o c u r ia ,M ic ro c o c c u s a n d S ta p h y lo c o c c u s as th e d o m in a n t m ic ro o rg a n is m s are id e n tifie d . R e s u lts show ed th a t m a in reason o f a n c ie n t w in e m ild e w is e x ch a n g e o f a ir . F il te rin g o u t th e m ic ro o rg a n is m s , a n d c o n tro llin g e n v iro n m e n t s tr ic tly w ill b e th e e ffe c tiv e m w in e p ro te c tio n . T h e s tu d y is th e fir s t s u c c e s s fu l a p p lic a tio n o f 16S r D N A ^18S r D N A s d n t if ic a t i o n o f m ic ro o rg a n is m c o m p o s itio n in a lc o h o lic liq u id .K e y w o r d s :W e s te rn H a n D y n a s ty w in e ; m ic ro o rg a n is m a n a ly s is ; 16S r D N A ^18S r D N A se q u en ce a n a ly s is ; p ro te c tio n a n d re s e rv a tio n2003年6月,西安市文物保护考古所(现名 为:西安市文物保护考古研究院)在西安市北郊 文景路中段枣园工地发掘清理了一座西汉早期偏 晚大型长斜坡竖穴土圹墓[1],在其中一件大型凤鸟纹青铜锺中发现了重约为26公斤的西汉古酒 (见图1),这是迄今发现保存最好、存量最多的古酒[2]。
出土后的西汉古酒及沉淀物经过提取,分别收稿日期:2017-3-3基金项目:陕西省生物技术重点实验室基金资助项目(J 16S 108)作者简介:冯健,男,陕西西安人,副研究馆员,从事文物保护与文物科学研究。
■ 860 ■西北大学学报(自然科学版)第47卷存放在11个经过密封处理的试剂瓶里,放置在冷藏柜中于0〜4°C低温保存。
2012年底在其中一个试剂瓶内发现有漂浮的霉菌状异物(见图1),为明确污染物的微生物种类,本文应用16S r D N A/18S r D N A序列分析技术手段研究了古酒中的污染微生物真菌以及细菌种类,查明了造成污染的原因以制定科学的保护措施,为出土古酒保护与长期保存提供可靠经验。
A存放西汉古酒的鎏金青铜锺 B古酒形态色泽 C古酒中的霉状污染物图1出土古酒容器及形态Fig.1Vessel of ancient wine and liq u id form分子生物学技术在欧洲文物保护研究领域应用较为普遍[341]。
该方法在我国文物保护领域的应用起步较晚,2010年前、后逐渐有分子生物学在文物保护领域应用的文献报道[12_1]。
本研究则是首次使用16S r D N A/18S r D N A序列研究酒这一类液体文物中滋生出的菌害种类和来源。
1材料与方法1.1实验材料材料:真菌P D A固体培养基和细菌L B固体培养基高压灭菌后备用;基因组提取试剂盒购自O m ega公司(E.Z.N.A S o il D N A K i t);T a q D N A 聚合酶、缓冲液体系、引物定制均由In v itro g e n公司提供。
设备:微型离心机(美国贝克曼库尔特有限公司)、超低温冰箱(日本三洋电机株式会社)、全自动高压灭菌锅(上海博迅实业有限公司)、P C R 扩增仪(美国B i-R a d公司)、恒温培养箱(上海精诚分析仪器制造有限公司)、凝胶成像仪(上海复曰科技仪器有限公司)等。
1.2实验方法1-2.1样品采集在无菌操作台中,在灼烧的酒精灯下使用灭菌完全的药匙挑取古酒上层悬浮物放入灭菌离心管中,放入-4C冰箱中保存待用。
1.2.2菌种分离及形态观察在无菌操作条件下,用接种环挑取绿色悬浮物分别在P D A培养基和L B培养基上划线培养,并分别置于28C和37°C恒温培养箱中倒置培养3天;观察生长菌落挑取形态明显,颜色不同的菌落接种于另一新培养基上进行纯化培养,重复纯化3次直到培养出纯化单菌落,观察记录并保存。
1.2.3基因组D N A提取将纯化的菌株根据基因组D N A提取试剂盒提供的提取说明,抽提D N A并验证。
1.2.4 P C R扩增及测序真菌引物序列IT S1: 5,-T C C G T A G G T G A A C C T-3,,IT S4: 5,-T C C T C-C G C T T A T T G A T A T G C-3、细菌弓丨物J F^-C A-G A G T T T G A T A A T G G C T-,, 1540R: 5,-A G G A G G T-G A T C C A G C C G C A-3’。
P C R反应体系为 25^L,其中模板量为 V L(20ng/^L),10 x P C R B u ffe r2.5^L,10m m〇l/L d N T P0.5^L,T a q D N A 聚合酶0. 2^l L,引物 F(10^m〇l/L)0. 5^L,R(10^m〇l/L) 0.5^L,加无菌双蒸水至25^L。
P C R循环条件为94°C预变性4 m in;94°C 45s,55°C 45s,72°C l m i n,30个循环;最后72°C延伸10 m in,4°C终止反应。
P C R扩增完毕,产物用1% (质量分数)的琼脂糖凝胶电泳检测。
P C R产物送上海生工生物工程第6期冯健等:西安枣园西汉早期墓葬出土古酒中菌害分析■ 861 ■技术服务有限公司进行测序。
1.2.5序列比对及系统发育树的构建得到测 序结果后,将菌株的基因序列输入G e n B a n k 中进 行同源序列搜索(B L A S T s e a rc h ),并下载相关类 群微生物菌株序列,利用C lu s ta l X 软件分别对菌 株与模式菌株的序列进行比对,然后采用 M E G A 5.0软件进行多重序列比对,并构建N e ig h b o r-J o in in g 分子系统进化树。
2结果与讨论2.1菌种的分离纯化与形态观察经分离纯化,从古酒悬浮物中得到4株不同形态的菌种。