菠菜中色素的提取分离
实验2-菠菜中色素的提取和分离
实验2■菠菜中色素的提取和分离实验2菠菜中色素的提取和分离扬州大学化学化工学院张磊091301223一.实验目的：1 •了解分离与提纯过程在科学研究和生产生活中的应用；2.掌握分离与提纯实验设计的一般思路和方法;3.掌握菠菜中色素提取的原理，步骤和影响因素；二•实验原理：1.叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂中，所以用石油醚、乙醇等能提取色素。
2.本实验选用的是吸附色谱，氧化铝作为吸附剂（极性），色素提取液为吸附液，色素提取液中各成分极性大小为：叶绿素 b （黄绿色）＞叶绿素a （蓝绿色）＞叶黄素（黄色）＞3■类胡萝卜素（橙色）。
3.柱层析法的分离原理是根据物质在氧化铝上的吸附力不同而使各组分分离。
一般情况下极性较大的物质易被吸附，极性较弱的物质不易被吸附，所以由上到下为：叶绿素 b （黄绿色），叶绿素a （蓝绿色），叶黄素（黄色），伕类胡萝卜素（橙色）。
三、实验材料：仪器：研钵、分液漏斗、层析柱（20 x 10 cm），表面皿，普通漏斗，量筒试剂：石油醚、乙醇（95%）、菠菜叶、丙酮（化学纯）、中性氧化铝，无水硫酸钠四、实验步骤与内容【探究：菠菜（或青菜）的I I处理方式】（1）小组讨论处理菠菜的各种方式，然后按照“手撕”，“划几刀，再手撕”，“剪成丁状”，“剪碎后稍加研磨”，“研磨成浆”共五种方式分为五组进行实验，最后确定控制菠菜叶取25克，加入有机溶剂15mL （9mL石油醚+6mL乙醚），浸泡时间取25min为统一条件；（2）开始分组实验，各自处理好各组的菠菜，放置在烧杯中，加入15mL有机溶剂并盖上表面皿浸泡25min。
（3）在浸泡的时间内开始装柱，首先在滴管下口装上橡皮管并夹上弹簧夹（夹紧），在管的出口处放入一小撮棉花，在棉花上放置已剪好的和滴管内径一般大小的圆形滤纸，然后用普通漏斗往里面装入中性氧化铝，最后在氧化铝上再加上和滴管内径一般大小的圆形滤纸，夹在铁架台上备用。
实验十二-菠菜色素的提取和分析
菠菜色素的提取和分离一、实验目的1、通过绿色植物色素的提取，学习天然物质的提取方法；2、通过薄层色谱分析，掌握有机物色谱分析的原理和方法。
二、实验原理1 菠菜色素的提取绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C 55H 72O 5N 4Mg)和叶绿素b(C 55H 70O 6N 4Mg)，其差别仅是叶绿素a 中一个甲基被甲酰基所取代从而形成了叶绿素b 。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a 的含量通常是b 的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素（C 40H 56）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，即 -胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-胡萝卜素，其中β-胡萝卜素含量最多，也最重要。
在生物体，β-胡萝卜素受酶催化氧化形成维生素A 。
目前β-胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素A 使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（C 40H 56O 2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
N N NNH 3CCHCH 2RCH 2CH 3CH 3H 3COCO 2CH 3CH 2CH 2OO3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg叶绿素a （R = CH 3） 叶绿素b （R = CHO ）H 3C CH 3RCH 3H 3CRH 3CCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3β-胡萝卜素（R = H ） 叶黄素（R = OH ）H 3CCH 3CH 3CH 2OHCH 3CH 3维生素A2 薄层色谱原理常用TLC 表示，又称薄层层析，属于固液吸附色谱。
样品在薄层板上的吸附剂（固定相）和溶剂（移动相）之间进行分离。
由于各种化合物的吸附能力各不相同，在展开剂上移时，它们进行不同程度的解吸，从而达到分离的目的。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇实验报告一：菠菜中提取叶绿素的方法比较1.引言叶绿素是一种重要的植物色素，它在光合作用中承担着捕获光能和转化化学能的重要角色。
菠菜是叶绿素含量较高的植物之一，因此本实验旨在比较不同方法提取菠菜中的叶绿素，探索最有效的提取方式。
2.材料与方法2.1 材料：- 新鲜菠菜叶片- 无水乙醚- 丙酮- 高速离心机- 比色皿2.2 方法：- 方法一：无水乙醚提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中，加入适量的无水乙醚，用摇床震动片刻，使叶绿素溶解于乙醚中，然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法二：丙酮提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中，加入适量的丙酮，用摇床震动片刻，使叶绿素溶解于丙酮中，然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法三：乙醇提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中，加入适量的乙醇，用摇床震动片刻，使叶绿素溶解于乙醇中，然后离心10分钟收集上层液体。
3.结果在三种提取方法中，通过观察可以发现，方法一和方法二提取的叶绿素溶液呈现绿色，而方法三提取的叶绿素溶液呈现黄绿色。
利用分光光度计测定三个试管中叶绿素溶液的吸光度，发现方法一和方法二提取的叶绿素吸光度较高，而方法三的吸光度较低。
4.讨论方法一使用无水乙醚作为提取溶剂，乙醚能有效溶解叶绿素，并且在离心过程中上层液体的分离效果较好。
方法二使用丙酮作为提取溶剂，丙酮也能有效溶解叶绿素，并且丙酮相对于乙醚来说更易于购买。
方法三使用乙醇作为提取溶剂，乙醇对叶绿素的溶解能力较差，导致提取的叶绿素溶液吸光度较低。
5.结论通过对菠菜中提取叶绿素的实验比较，我们发现使用无水乙醚和丙酮作为提取溶剂的方法能够较好地提取菠菜中的叶绿素，并且吸光度较高。
因此，在菠菜中提取叶绿素的实验中，建议使用无水乙醚或丙酮作为提取溶剂。
实验报告二：叶绿素在光合作用中的作用研究1.引言叶绿素是植物体内最重要的色素之一，它在光合作用中起着关键作用。
本实验旨在研究叶绿素在光合作用中的功能和重要性。
菠菜叶中叶绿素的提取和分离
菠菜叶中叶绿素的提取和分离一、实验目的本实验旨在探究菠菜叶中叶绿素的提取和分离方法，通过对实验数据的分析，了解叶绿素的组成、性质和含量，为植物光合作用研究和食品营养学研究提供实验依据。
二、实验原理叶绿素是植物叶片中最重要的色素之一，它能够吸收太阳光能，通过光合作用将光能转化为化学能，为植物的生长和发育提供能量。
叶绿素主要分为叶绿素a和叶绿素b两种，其中叶绿素a是主要的捕光色素，叶绿素b是辅助色素。
本实验通过提取和分离菠菜叶中的叶绿素，了解其组成和性质。
三、实验步骤1.准备实验材料：新鲜菠菜叶、研钵、称量纸、电子天平、离心机、分光光度计、计时器、实验数据记录表等。
2.预处理菠菜叶：选取新鲜菠菜叶，去除杂质和枯叶，用自来水冲洗干净，再用去离子水冲洗一遍。
3.提取叶绿素：将洗净的菠菜叶剪成小段，放入研钵中加入适量石油醚-乙醇混合液（体积比1:1），研磨成匀浆。
将匀浆倒入离心管中，加入适量去离子水，摇匀后放入离心机中离心10分钟（转速为4000转/分钟）。
离心后，将上层绿色液体小心地吸出，转移至另一个离心管中，再次离心5分钟，去除沉淀物。
4.分离叶绿素：将绿色液体倒入硅胶G薄层板（5×10 cm）中，用玻璃棒均匀涂布。
将薄层板放入层析缸中，用石油醚-丙酮混合液（体积比6:4）进行层析。
每隔10分钟观察一次颜色变化，并记录实验数据。
当组分被分离时，用分光光度计分别测定各组分的吸光度。
5.数据记录与分析：根据实验数据记录表记录各组分的吸光度，计算各组分的含量百分比。
通过对实验数据的分析，了解菠菜叶中叶绿素的组成、性质和含量。
四、实验结果与分析1.实验数据记录表：2.实验数据分析：根据实验数据记录表可知，菠菜叶中主要含有叶绿素a和叶绿素b两种色素，其中叶绿素a的含量较高，占总量的70%，叶绿素b的含量相对较低，占总量的30%。
这说明菠菜叶中的主要捕光色素是叶绿素a。
此外，实验过程中还可能分离出其他组分，但它们的含量较低。
从菠菜中提取色素的实验报告
从菠菜中提取色素的实验报告（菠菜浸泡时间的不同）【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作，加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg }；胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯，有三种异构体；叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时，从上到下颜色依次为：黄绿色，蓝绿色，黄色和橙色。
【实验仪器】研钵，色谱柱，丙酮，乙醇，乙醚，中性氧化铝，菠菜叶，烧杯，漏斗，玻璃棒，滤纸，剪刀，脱脂棉，纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶，用剪刀剪碎，放入研钵中研磨，研磨时放入少量碳酸钙，防止研磨过猛破坏叶绿素结构，研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中，加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，盖上表面皿，防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间，填充色谱柱，在最下面垫入脱脂棉，再盖上一个小滤纸片，装入氧化铝至4/5处，再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中，转入分液漏斗，加入10mL水洗涤，除去水层（下层），再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中，加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器，收拾实验室，打扫卫生。
【实验记录】虽然分层现象不是非常明显，但是还是可以看得见分层现象。
【结果与讨论】1、做这个实验的时候，我觉得不应该用纱布挤干，因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了，导致后来的实验现象没有很明显，经过对比，没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。
2、有机溶剂往往比较容易挥发，所以加入后要盖上表面皿。
3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显，因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的，15分钟足矣。
修订实验三菠菜中的色素提取分离及鉴定
修订实验三 菠菜中的色素提取、分离及鉴定一、实验目的1、通过绿色植物色素的提取，了解天然物质的分离提纯方法；2、熟悉薄板层析的用途及用法；3、通过柱色谱分离操作，加深了解有机物色谱分离鉴定的原理；4、从菠菜中提取出叶绿素、胡萝卜素、叶黄素等色素并加以分离。
二、实验原理1、叶绿素简介绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。
它们在把光能转变为化学能的光和作用中起着重要作用。
本实验从菠菜中提取上述各色素，并通过柱层析进行分离。
叶绿素存在两种结构相似的形式——叶绿素a （C 55H 72O 5N 4Mg ）以及叶绿素b （C 55H 70O 6N 4Mg ），其差别仅是a 中一个甲基被b 中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a 的含量通常是b 的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素（C 40H 56）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，即a-，β-和γ-胡萝卜素，其中β-异构体含量最多，也最重要。
在生物体内，β-异构体受酶催化氧化即形成维生素A 。
目前β-胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素A 使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（C 40H 56O 2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
N N N N H 3C CHCH 2R CH 2CH 3CH 3H 3C O CO 2CH 3CH 2CH 2O O CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg叶绿素a （R = CH 3） 叶绿素b （R = CHO ）H3C CH3R CH3H3CH3C CH3CH3CH3CH3CH3β-胡萝卜素（R = H）叶黄素（R = OH）H3C CH3CH3CH2OHCH3CH3维生素A菠菜中各色素的理化性质β-胡萝卜素，叶黄素，叶绿素a和叶绿素b四种色素在叶绿体中的含量比约为2:1:3:1。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇从菠菜中提取叶绿素实验报告一【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作，加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg }；胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯，有三种异构体；叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时，从上到下颜色依次为：黄绿色，蓝绿色，黄色和橙色。
【实验仪器】研钵，色谱柱，丙酮，乙醇，乙醚，中性氧化铝，菠菜叶，烧杯，漏斗，玻璃棒，滤纸，剪刀，脱脂棉，纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶，用剪刀剪碎，放入研钵中研磨，研磨时放入少量碳酸钙，防止研磨过猛破坏叶绿素结构，研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中，加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，盖上表面皿，防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间，填充色谱柱，在最下面垫入脱脂棉，再盖上一个小滤纸片，装入氧化铝至4/5处，再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中，转入分液漏斗，加入10mL水洗涤，除去水层（下层），再用10mL 水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中，加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器，收拾实验室，打扫卫生。
【实验记录】虽然分层现象不是非常明显，但是还是可以看得见分层现象。
【结果与讨论】1、做这个实验的时候，我觉得不应该用纱布挤干，因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了，导致后来的实验现象没有很明显，经过对比，没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。
2、有机溶剂往往比较容易挥发，所以加入后要盖上表面皿。
3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显，因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的，15分钟足矣。
[论文]菠菜中色素的提取与分离
[论文]菠菜中色素的提取与分离菠菜中的色素提取与分离食品11—2班李薇 110424228 一、实验目的1 、通过对菠菜中色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法,2 、通过柱色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
二、实验原理绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素,绿,、胡萝卜素,橙,和叶黄素,黄,等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素 a(C HONMg) 557254和叶绿素b(CHONMg),其差别仅中一个甲基被b中的甲酰基所55764取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a的含量通常是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素(CH )是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体,4056即a-,β -γ-胡萝卜素,其β-异构体含量最多,也最重要。
在生物体内,β-体受酶催化氧化即形成维生素A。
目β-胡萝卜素已可进行工业生产,可作为维生素A 使用,也可作为食品工业中的色素。
叶黄素(CHO)是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量40562通常是胡萝卜素的两倍。
与胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
柱色谱,柱色谱法,又称层析法.是一种以分配平衡为机理的分配方法.色谱体系包含两个相,一个是固定相,一个是流动相.当两相相对运动时,反复多次的利用混合物中所含各组分分配平衡性质的差异,最后达到彼此分离的目的。
柱色谱是在一根玻璃管或金属管中迸行的色谱技术,将吸附剂填充到管中而使之成为柱状,这样的管状柱称为吸附色谱柱。
使用吸附色谱柱分离混合物的方法,称为吸附柱色谱。
这种方法可以用来分离大多数有机化合物,尤其适合于复杂的天然产物的分离。
分离容量从几毫克到百毫克级,所以,适用于分离和精制较大量的样品。
1. 装柱色谱柱的大小规格由待分离样品的量和吸附难易程度来决定。
菠菜色素的提取与分离
实验目的
1、学习从植物中提取色素的方法。 2、学习薄层色谱和柱色谱的原理及其操 作方法。
实验原理
绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿 色) 、胡萝卜素(橙黄色)和叶黄素(黄色)等 多种天然色素。 通过柱色谱和薄层色谱对菠菜叶中的上 述几种色素进行分离。
实验原理
薄层色谱，常用TLC表示，属于固－液 吸附色谱。化合物在薄层板上的吸附剂（固 定相）和溶剂展开剂（流动相）之间进行分 离，由于各种化合物的吸附能力各不相同， 在展开剂上移时，它们进行不同程度的解吸， 从而达到分离的目的。也就是在反复的吸附 解析吸附过程中，吸附能力较弱的溶质，首 先被展开剂解析下来，随展开剂推向前去； 而吸附能力强的溶质解析较慢，被展开剂推 移不愿，从而达到分离的目的。
溶剂的洗脱能力按下列次序递增：
石油醚、四氯化碳、甲苯、苯、二氯甲烷、 氯仿、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、丙醇、乙醇、 甲醇、水、吡啶、乙酸。
实验原理
前沿线
色斑
起始线
实验原理
薄层色谱的用途： 1、化合物的定性检验 2、快速分离少量物质 3、跟踪反应进程 4、化合物纯度的检验
实验原理
柱色谱是通过色谱柱来实现分离的。在 色谱柱内装有固体吸附剂(固定相)如氧化铝 或硅胶。液体样品从柱顶加入，当液体流经 吸附剂时，由于吸附剂表面对液体中各组分 吸附能力不同而按一定的顺序吸附。然后从 柱顶加入洗脱剂(流动相)，样品中的各组分 随洗脱剂按一定的顺序从色谱柱下端流出， 根据不同颜色分段收集。
薄层层析
2、展开
在层析缸中加入配好的展开剂， 使其高度不超过1cm。将点好的 薄层板小心放入层析缸中，点样 一端朝下，浸入展开剂中。盖好 瓶盖，观察展开剂前沿上升到一 定高度时取出，尽快在板上标上 展开剂前沿位置。
柱色谱法分离菠菜色素
柱色谱法分离菠菜色素
柱色谱法是一种常用的分离技术，在生物化学实验中经常用于分离和纯化化合物。
在分离菠菜色素时，柱色谱法也是一种常用的方法。
首先，将泥土或菠菜样品提取并制备成色素溶液。
然后将色素溶液注入色谱柱中，色谱柱中的填料会根据分子大小、极性、亲水性等特性，将色素分子分离出来。
通过梯度洗脱或其他分离方法，可以将目标色素分离出来并收集。
柱色谱法分离菠菜色素的优点在于分离效果好，纯度高，且操作简单易行。
同时，柱色谱法还可以用于分离其他天然色素、药物等物质，具有广泛的应用前景。
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菠菜中的色素提取、分离及鉴定
一、实验目的
1、通过绿色植物色素的提取，学习天然物质的提取方法；
2.了解菠菜中主要色素的基本性质，通过菠菜色素的提取和分离，了解天然物质
分离提纯方法及原理
3、通过薄层色谱分析，掌握有机物色谱分析的原理和方法。
二.实验原理
绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等
多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素
b(C55H70O6N4Mg)，其差别仅是叶绿素a中一个甲基被甲酰基所取代从而形成了
叶绿素b。它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需
的催化剂。植物中叶绿素a的含量通常是b的3倍。尽管叶绿素分子中含有一些
极性基团，但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素（C40H56）是具有长链结构的共轭多烯。它有三种异构体，即-
胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-胡萝卜素，其中β-胡萝卜素含量最多，也最重要。
在生物体内，β-胡萝卜素受酶催化氧化形成维生素A。目前β-胡萝卜素已可进
行工业生产，可作为维生素A使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡
萝卜素的两倍。与胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
色谱法是一种物理的分离方法，其原理是利用混合物中各成分的物理化学性
质的差异，当选择某一条件使混合物中各成分流过支持剂或吸附剂时，各成分可
因其物理性质不同而分离。分离效果的好坏关键在于条件的选择。
薄层色谱是在玻片上涂布固体吸附剂，利用样品对固体吸附剂的吸附能力
不同，选择对样品溶解（解附）能力不同的溶剂，将混合物各成分按照极性大小
不同随溶剂前进速度不同而分开的方法。
应用：薄层色谱可以用来分离、鉴别化合物，也可以用于跟踪反应进程。
Rf值与分子结构的关系
Rf值越大，样品与固体吸附剂吸附越紧，即样品与固体吸附剂分子间作用
力越大，说明样品极性越强或分子量越大。
本实验利用有机溶剂将菠菜中的色素浸提出来，利用柱层析和薄层层析法将
色素分离开来，根据各色素的颜色、分子极性与Rf值的关系、吸收光谱、荧光
对分离出的色素进行鉴定归属，讨论结构对Rf值、吸收光谱的影响。
三、主要试剂及主、副产物的物理常数
名称 分子量 性状 相对密度 熔点 沸点
溶解度
水 醇 醚
石油醚 无色透明液体，有煤油气味 0.64-0.66
-37 40-80 不溶 溶 溶
乙醇 46.07 无色透明液体，易挥发，有刺激性 0.79 -114.3 78.4 溶 溶 溶
丙酮 58.08 无色液体，易挥发，辛辣甜
味
0.8 -94.7 56.5 溶 溶 溶
饱和氯化钠 58.44 无色透明立方晶体，白色粉
末，味咸
2.130 801 1413 溶
无水NaSO4 142.04 白色粉末，无臭，味咸 884 1700 溶 不溶
四、主要试剂规格及用量
名称 规格 用量 摩尔数
菠菜叶
5g
五、实验装置
六、实验步骤
称取5克洗净晾干水分的新鲜的菠菜叶，用剪刀剪碎，放在锥形瓶中，加
入30 mL 2﹕1（v/v）的石油醚和乙醇混合溶剂，浸没菠菜叶片，用玻棒搅动数
分钟，以利于菠菜叶的细胞破裂，色素浸出。布氏漏斗抽滤，将菠菜汁转入分液
漏斗，分去水层，分别用等体积的饱和食盐水和蒸馏水洗涤两次，以除去萃取液
中的乙醇（洗涤时要轻轻旋荡，以防止产生乳化）。弃去水-乙醇层，石油醚层用
无水硫酸钠干燥后滤入锥型瓶，置于暗处备用。
用吸管吸取菠菜萃取液，小心慢慢滴在制铺好的薄层板上，滴入在硅胶板
上的萃取液要成一条直线，直线离板下沿约1.5~2厘米，晾干。放入装有2﹕1.5
﹕2的石油醚-丙酮-苯（v/v）混合展开剂的层析缸内，于暗处室温展开，得五
条色带。取出，待溶液挥发后，测量各色带及溶剂前沿到原点的距离，计算Rf
值。
七、实验数据记录
溶剂前沿至原点中心的距离/cm:
菠菜叶片色素色谱分析数据
编号 颜色 溶质的最高浓度中心至 原点中心的距离 Rf值
1
2
3
4
5
八、思考与讨论
1. 薄层的展开为什么要在密闭容器中？
答：展层剂易挥发，所以在密闭容器中防止展层剂挥发。
2. 点样时如样品斑点过大有什么坏处？若将样品斑点浸入展开剂中会有什么后
果？
答：因溶液太稀或样点太小,可重复点样.但应在每次点样的溶剂挥发后,方可重
点,以防样点被溶解掉.点样过大易造成拖尾,扩散等现象,影响分离效果；若将样
品斑点浸入展开剂中，会无法确定展开剂上升高度,即无法求得Rf值和准确判断
各组分在薄层板上的相对位置.
3. 比较叶绿素、胡萝卜素、叶黄素三种色素的极性，说明为什么胡萝卜素在氧
化铝中移动最快？
答：叶绿素、叶黄素、胡萝卜素极性依次减少，因为它们分子结构中的极性含氧
基团依次减少，因为化合物的吸附能力与他们的极性成正比，胡萝卜素极性最小，
与氧化铝的作用力最小，从而随着溶剂下移的速度最快。