香菇多糖分离纯化技术研究
香菇多糖提取与纯化新工艺
香菇属变温结实性菌类，传统产区主要分布在南方各省。北方地区气候变化剧烈， 昼夜温差大，适合香菇生长发育，尤其是夏季７￣９月份南方高温季节，香菇生产受到影 响，市场香菇供不应求。北方地区具备生产香菇的条件，特别是黑龙江省独特的气候和 自然资源优势，为夏季发展香菇生产提供了保证“１． 香菇的生产有两种方法。一是固体培养子实体，二是通过深层发酵生产，前者生
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目前已报到的纯化精制香菇多糖的方法有有机溶剂沉淀法离心沉淀色谱法阴第一章绪论阳离子交换树脂法酶解法凝胶层析法高速逆流色谱法盐析法季胺盐沉淀法金属络合物法以及制备性区域电泳法制备性高效液相层析超滤法和亲和层析法王卫国等嘲通过正交试验法找到了一种在多糖香菇多糖分离纯化过程中新的脱蛋白方法
北京化工大学 硕士学位论文 香菇多糖提取与纯化新工艺 姓名：张佳 申请学位级别：硕士 专业：发酵工程 指导教师：陈劲春 20070601
香菇多糖的提取纯化方法
香菇多糖的提取纯化方法吕红常秀莲*（烟台大学生命科学院，烟台264005）摘要：香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质，具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力等多种功能，在保健食品和药品开发方面具有广阔的应用前景。
概括介绍当前常用的热水浸提法、酶解法、微波提取法和深层发酵培养法等6种香菇多糖的提取方法。
并简单比较香菇多糖提取的这几种方法并介绍了超滤-渗滤法和活性炭联合陶瓷膜超滤法这两种香菇多糖的纯化方法。
关键词：香菇多糖; 提取; 纯化; 抗癌;抗病毒Extraction and purification of LentinanLvhong changxiulian*(Yantai university life academy of sciences, Yantai 26005)Abstract: Lentinan was isolated from mushrooms with an important physiological activity of substances with anti-virus, anti-cancer, enhance immunity and other functions. It has broad application prospect s in health food and drug’s development. Give overview of the current formulation used in hot water, enzymatic method, microwave extraction and deep fermentation method 6 kinds of mushroom polysaccharides method, And Introduced theUltrafiltration-filtration method and the Activated carbon ceramic membrane joint ultrafiltration method of Lentinan purification.Keywords: Mushroom polysaccharide ; Separation ; cancer ; antiviral1引言香菇多糖(Lentinan) 是一种β-1,3-葡聚糖, 是从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖，能治疗癌症, 抗恶性肿瘤, 抗病毒, 抗感染, 提高人体免疫力等多种生理功能。
香菇多糖的分离与鉴定课件
10
15
吸光度
y = Ax + C，R2 =
0.8
0.6
0.4
0.2
0 0
10 15 20 25 30 35 40 45 Glucose Concentration (μg/mL)
20
25
30
35
香菇多糖
样品 1
吸光度
测得浓度 （μg/mL）
含糖量 %
样品 2
样品 3
含糖量 % = 测得浓度 / 配制浓度 × 100 %
香菇多糖的分离与鉴定
生物物质分离工程
Name Affiliation
Start
Registered
多糖
抗肿瘤
免疫 调节
抗氧化 降血脂
香菇多糖的分离与鉴定
学习目标
（1）掌握对香菇多糖的提取和分离方法 （2）掌握香菇多糖的总糖含量、单糖组成
和相对分子质量的测定方法
学习内容
（1）多糖的提取 （2）多糖的总糖含量测定 （3）多糖的单糖组成测定 （4）多糖的相对分子质量的测定 （5）多糖的酶解
=
%
3
分子量的测定
实验步骤
高效尺寸排阻色谱法分析香菇多糖相对分子质量 ➢ 配制50mmol/L乙酸铵溶液作为流动相，0.45μm膜过滤，超声30min脱气 ➢ 称取5mg香菇多糖，加1mL水，于60℃ 30min充分溶解，0.45μm膜过滤 ➢ 采用尺寸排阻色谱柱TSKgelG5000 与TSKgelG3000串联，连接蒸发光散射仪，
开速率快、混合物易分离、可平行分析多个样品，酶解后的样
品不需要处理即可点样。
致谢
汕头大学教学改革项目（38030210） 广东省教育创新计划项目（18219114）
超滤膜分离香菇多糖的研究
收稿日期:2003-03-04基金项目:三明学院科研基金项目(№B0202)作者简介:念保义(1963-),男,福建平潭人,副教授,主要从事生物化工教学和天然产物有效成分提取、分离及应用开发的研究工作。
超滤膜分离香菇多糖的研究念保义1,陈 铭2,王铮敏1(1.三明学院化生工程系,福建三明 365004;2.福建耀隆化工集团质检部,福建福州 350011) 摘要:以本地劣质香菇为原料,利用超滤膜装置对浸提的香菇多糖进行分离。
同时对超滤过程的阻力及传质特性进行分析,并建立超滤过程的修正凝胶极化模型。
经过实验获得香菇多糖提取率5.7%,多糖质量分数89.2%,说明利用超滤方法分离浓缩香菇多糖是有效的工艺手段。
关键词:香菇多糖;超滤;传质特性;凝胶极化模型中图分类号:TQ02818 文献标识码:A 文章编号:1006-7906(2003)04-0027-03 香菇(Lentinus )是一种木生伞菌,伞菌目、侧耳科。
它不仅是色、香、味俱佳的美味食用菌,而且还具有相当高的药用价值。
香菇香气浓郁、味道鲜美、营养丰富、保健作用显著,具有高蛋白、低脂肪、低能量、多种维生素、多种氨基酸并存的特点。
常食香菇有降低胆固醇,防止血管硬化,增强人体免疫功能和防治癌症的作用。
其中能显著增强患者抵抗力的生理活性物质为香菇多糖。
香菇多糖还具有抗恶性肿瘤、抗病毒、抗感染、调节人体内部环境的稳定性等生理功能[1]。
有关香菇多糖的提取、分离纯化、生产工艺以及医药生理功能的研究报道越来越多,并不断地趋于完善。
目前多采用热水提取、醇析的工艺提取香菇多糖,该工序繁杂,不易获得多糖粗品,且得糖率低[2]。
而利用超滤分离技术,易获得多糖粗品,得糖率高,工艺流程简单,工序少,提取时间短。
本实验利用超滤膜分离装置,对香菇多糖浸提液进行分离、浓缩,并通过对工艺过程的阻力及传质特性的分析与计算,建立了凝胶极化模型,为后期香菇多糖的提取与纯化打下基础。
超滤法分离与纯化香菇多糖
超滤法分离与纯化香菇多糖范云鹏1,李十中13,刘冬梅1,王星云2,熊先锋2Ξ(11天津大学化工学院,天津 300072;21禹城福田药业有限公司,山东禹城 251200) 香菇L en tinus ed od es(B erk1)Sing1是一种食药用菌,其主要药用成分为香菇多糖,含量约为1218m g g[1]。
相对分子质量为400000～800000的香菇多糖具有抗癌活性,通过调节胞质分裂增强身体免疫系统功能[2]。
而且香菇多糖还对艾滋病有一定疗效[3] 香菇多糖的纯化主要采用有机溶剂分级沉淀法[4],色谱法[5]等。
但有机溶剂法易引入有害物质,色谱法设备昂贵、复杂,产率低,成本太高。
近年来有采用超滤法[6]提取香菇多糖的研究,可以降低成本,提高产率,但产品纯度较低。
为充分发挥膜分离技术的优势,探索多糖分离纯化的新方法,本研究采用超滤2渗滤法改善产品纯度,并引入冷冻干燥技术,改进香菇多糖的提取纯化工艺,以期提高产品收率、降低成本。
1 材料与方法111 材料与仪器:香菇由福建省古田县福佳食品有限公司提供。
超滤膜(截流相对分子质量为50000、20000、10000和4000的高分子合金膜,滤膜的有效面积为43c m2)由中国科学院上海原子核研究所提供。
PB3032N型电子精密仪器天平[梅特勒・托利多(上海)有限公司],752型紫外光栅分光光度计(上海第二光学仪器厂),5—DX傅立叶变换红外光谱仪(N ico let,美国),L GJ—10冷冻干燥机(北京四环科学仪器四厂)。
112 方法:称取10g香菇,粉碎后用乙醇浸泡除去杂质,按固液比10∶1加入蒸馏水,于90℃水浴恒温搅拌浸提6h,4000r m in离心分离除去大部分固体物质,然后采用015Λm膜微滤得到香菇多糖提取液。
2 结果与讨论211 多糖溶液中相对分子质量的分布:在室温、013 M Pa下,把香菇多糖的提取液依次用截留相对分子质量为50000、20000、10000和4000的滤膜进行渗滤,多糖溶液则被分为5份,然后用硫酸2蒽酮法测定每段溶液中总糖的含量,提取液中糖的相对分子质量分布见图1。
香菇多糖的研究进展香菇多糖的制备香菇俗名香菌香蕈平庄菇
香菇多糖的研究进展香菇多糖的制备香菇俗名香菌、香蕈、平庄菇（广东）、椎茸（日本），是世界第二大食用菌，也是我国特产之一。
在分类中隶属担子菌纲、伞菌目、白蘑科、香菇属。
干燥的香菇中含有碳水化合物(58-60%)、蛋白质(20-23%)、纤维素(9-10%)、脂肪(3-4%)和灰分(4-5%)。
香菇是著名的食用兼药用真菌，味道鲜美，香气沁人，营养丰富，其味甘，性平，有“植物皇后”美誉。
多糖的提取：香菇多糖存在于香菇子实体细胞壁中，香菇的细胞壁包含两种重要的高分子物质，几丁质和β-葡聚糖。
这两种分子中的单链通过氢桥连接形成共价键。
多糖的提取方法是根据其结构和水溶性的不同而确定，其基本原则是在中性或弱酸弱碱条件下从外层到内层破坏细胞壁。
水提醇沉法是提取多糖最常见的方法，用酸或碱溶液提取可提高提取率，但酸性或碱性较强可能引起糖苷键的断裂。
为了提高多糖的得率，可增加一些物理或生物的辅助手段，如酶解、超声、微波、超高压、高压脉冲电场等多种方法。
多糖的分离：多糖提取液中含有许多杂质，主要是色素、无机盐、低分子量有机物，高分子量的蛋白质等，需逐一除去。
低分子量的物质可用透析法除去。
多糖的纯化：香菇多糖的分离纯化方法主要有分级沉淀法、色谱分离法、膜分离法等。
色谱分离法主要包括离子交换色谱法和凝胶色谱法两种，离子交换色谱法的原理是离子交换和吸附与解吸附，可以分离各种酸性、中性多糖。
凝胶色谱法是根据多糖分子大小和形状不同而分离的方法，常用的凝胶有葡萄糖凝胶、琼脂糖凝胶等，洗脱剂是不同浓度的盐和缓冲液。
香菇多糖的结构多糖的结构在其一级结构基础上,其主链间以氢键结合的形式形成二级结构,各种聚合体又在二级结构基础上,糖单位间的非共价键相互作用形成有序而粗大的构象,形成多糖的三、四级结构因此多糖的结构分析较其他物质更加复杂。
多糖在水溶液中会表现出无规则卷曲、单螺旋结构、双螺旋结构、三螺旋结构、聚集和球形构象等，这些构象的形成与多糖分子间和分子内的氢键有关。
香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究
香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究白玉静, 佟丽华( 佳木斯大学化与药学院, 黑龙江佳木斯154007)关键词: 香菇多糖; 提取工艺; 测定方法中图分类号: Q 949. 329+. 89 文献标识码: A 文章编号: 1008- 0104 (2006) 01- 0055- 02食用真菌是人类在长期的实践活动中认识得最早、但并未得到充分利用的一类微生物。
因其具有种类繁多、分布广泛 1 、营养成分丰富、药用保健价值高 2 等优点, 目前已成为国内外学者研究的热点。
有些食用菌中具有能抗癌和增强癌症患者抵抗力的生理活性物质, 称为食用菌多糖, 食用菌多糖的生理功能、化学结构以及构效关系正成为多糖研究的前沿阵地, 取得了很大进展, 其中香菇多糖是研究的比较多的一类食用菌多糖。
香菇多糖是香菇中的主要活性成分。
香菇[L en t i n u s edo de s (B e rk ) S o n g ]为担子菌亚门, 担子菌纲, 伞菌目, 口蘑科, 香菇属真菌, 因其口味鲜美, 香味浓郁, 营养丰富, 有显著的药用及滋补作用而被誉为“蘑菇皇后”、“抗癌新兵”、“菌中之秀”3 、“诸菌之冠蔬菜之魁”, 它的学名很多, 有香蕈、冬菇、花菇、香草、香信等。
常食香菇有降低胆固醇、防止血管硬化、增强人体免疫功能和防治癌症的作用4 。
香菇多糖(L en t in an, LN T ) 是一种天然人体免疫调节剂, 具有抗肿瘤、抗感染和调节免疫力等作用。
由于香菇多糖的特殊活性作用, 因此, 建立高效、经济的香菇多糖的提取方法以及含量测定方法具有重要的现实意义。
现对香菇多糖的提取工艺和含量测定方法进行综述。
1 香菇多糖的提取工艺香菇多糖是一种以Β- D 1 →3 葡聚糖残基为主链, 侧链为(1→6) 葡聚糖残基的葡聚糖5 。
传统香菇多糖的提取方法有水提醇沉法、稀碱浸提法、稀酸浸提法和酶法等, 随着对香菇研究的不断深入, 又出现超滤法、微波辅助浸提法以及超声波法等。
香菇多糖的分离纯化流程
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