食品中18种氨基酸检验方法
甲醛滴定法测定食品中的氨基酸酸含量
食品中氨基酸含量的测定————甲醛滴定法一、原理氨基酸是具有氨基和羧基的氨基酸，在溶液中以两性离子形态存在，当向溶液中加入碱时，氨基上的氢离子解离出来与羟基结合生成水。
使溶液ph不会急剧上升，但当氨基上的氢离子全部解离时则溶液的pH急剧上升，氨基上氢离子的解离常数值通常在9以上，滴定终点pH在12以上，没有适当的指示剂，为此，可用甲醛与氨基酸作用，氨基上的两个氢原子被甲醛取代生成氨基酸的二羟甲基衍生物。
由于氨基上的氢被取代，氨基上氢离子的解离常数降至7左右，滴定终点pH在9左右，这样就可以用酚酞做指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定氨基上的氢离子。
此法滴定的是α-氨基的含量，准确度仅达氨基酸理论含量的90%。
二、材料仪器与试剂1、材料：白豆油或浅色饮料，色深样品需进行脱色处理2、仪器：锥形瓶、滴定管、10ml量筒和移液管，20ml量筒或移液管，100ml 容量瓶。
3、试剂：中性甲醛，酚酞指示剂（0.5%）（0.5克酚酞定容100毫升），0.01N 氢氧化钠溶液。
三、操作步骤1、制样：根据样品颜色及氨基酸含量将样品进行适当稀释，一般吸取20ml样品，稀释定容到100m l。
色泽深的样品先加入50ml水和活性炭5g，加热煮沸，过滤，用30ml水洗涤活性炭，洗涤水与滤液合并，然后转移至100ml容量瓶中定容至刻度。
固体样品需粉碎后称取5~10g，加50ml水和活性炭5g，加热煮沸，过滤，用30ml水洗涤活性炭，洗涤水与滤液合并，然后转移至100ml容量瓶中定容至刻度。
2、测定：准确吸取已稀释的样品溶液10ml于三角瓶中，加入10ml中性甲醛，滴加2~3滴酚酞指示剂，用0.01mol/L氢氧化钠溶液滴定至溶液呈微红，30秒不褪色（8.2～10.0）即为终点。
3、空白滴定：用去除二氧化碳的蒸馏水替代样品进行滴定。
四、计算氨基氮（mg/ml或g样品）=[（V-V O）×C×0.14008]/10×100M或VC----氢氧化钠的当量浓度V-----滴定样品时消耗的氢氧化钠溶液的体积（ml）V O------滴定空白时消耗的氢氧化钠溶液的体积（ml）0.14008----氮的毫克当量。
食醋中多种氨基酸检测方法的研究——离子色谱法
摘
要
采 用 离子 色谱 法对食 醋 中 １ ８种氨 基酸检 测 方 法进 行 了研 究。样 品前 处理 采 用蒸馏 法提 取 ，用强 阳
食品中一般成分分析—蛋白质和氨基酸的测定
反应原理
电位滴定法是靠电极电位的突跃来指示滴定终点。 在滴定到达终点前后，滴液中的待测离子浓度往往变 化很大，引起电位的突跃，被测成分的含量仍然通过 消耗滴定剂的量来计算。
反应原理
因此，电位滴定准确度和精密度高，可用于滴定 突跃小或不明显的滴定反应，也可用于有色或浑浊试 样的滴定，电位滴定装置简单、操作方便，可自动化。 使用不同的指示电极，电位滴定法可以进行酸碱滴定， 氧化还原滴定，配合滴定和沉淀滴定。
食品中通常含有多种氨基酸，因此需要测定氨基酸的总 量，不能以氨基酸百分率来表示，只能以氨基酸中所含的 氮即氨基酸态氮的百分率来表示。
氨基酸含量一直是某些发酵产品如调味品的重要质量指 标，也是目前许多保健食品的质量指标之一。
与蛋白质中氨基酸结合状态不同，呈游离状态的氨基酸 的含氮量可直接测定，因此称为氨基酸态氮。
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营养学分类
（2）半必需氨基酸或条件必需氨基酸 人体虽能够合成精氨酸和组氨酸，但通常不能满足 正常的需要，因此，又被称为半必需氨基酸或条件必需 氨基酸，在幼儿生长期这两种是必需氨基酸。 （3）非必需氨基酸 指能由简单的前体合成，不需要从食物中获得的氨 基酸。例如甘氨酸、丙氨酸等氨基酸。
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化学结构分类
仪器及试剂
仪器及试剂
1.仪器 分光光度计、容量瓶、具塞刻度试管、移液管、恒温水浴锅等； 2.试剂 （1）20g/L茚三酮溶液 称取茚三酮1g置于盛有35mL热水的烧杯中使 其溶解，加入40mg氯化亚锡，搅拌过滤作为防腐剂。滤液放置于棕色 瓶中冷暗处过夜，加水至58.04 磷酸盐缓冲溶液 准确称取磷酸二氢钾4.5350g于烧杯中，用少量蒸馏水溶解，移入500mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用； 准确称取磷酸氢二钠11.9380g于烧杯中，用少量蒸馏水溶解，移入 500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用； 取上述配制好的磷酸二氢钾溶液10mL与190mL磷酸氢二钠溶液混匀即为 pH8.04磷酸盐缓冲溶液。
氨基值测定
氨基值测定氨基值测定是一种常用的分析方法，用于确定物质中的氨基含量。
氨基值是指单位质量或体积物质中所含氨基的数量。
这个值通常用于评估食品、药品和化妆品的质量和安全性。
本文将介绍氨基值测定的原理、方法和应用。
一、原理氨基值测定是基于氨基与某些化学试剂之间的反应进行的。
常用的氨基值测定方法包括纳氏试剂法、二氮试剂法和二吡啶碘化法。
这些试剂与氨基反应生成有色产物，通过测定产物的光吸收值或电导性来确定氨基含量。
二、方法1. 纳氏试剂法：将样品与纳氏试剂反应，生成有色化合物。
通过分光光度计测定产物的吸光度，根据标准曲线计算出氨基值。
2. 二氮试剂法：将样品与二氮试剂反应，生成有色化合物。
通过分光光度计测定产物的吸光度，根据标准曲线计算出氨基值。
3. 二吡啶碘化法：将样品与二吡啶碘化试剂反应，生成有色化合物。
通过分光光度计测定产物的吸光度，根据标准曲线计算出氨基值。
三、应用氨基值测定在食品、药品和化妆品行业中有着广泛的应用。
1. 食品：氨基值可以用于评估食品中蛋白质的含量和质量。
蛋白质是人体所需的重要营养物质，其含量和质量对于保持健康非常重要。
通过测定食品中的氨基值，可以判断食品中蛋白质的含量是否达到标准要求。
2. 药品：氨基值可以用于评估药品中氨基酸的含量。
氨基酸是构成蛋白质的基本单位，药品中的氨基酸含量与其功效密切相关。
通过测定药品中的氨基值，可以判断药品中氨基酸的含量是否符合规定标准。
3. 化妆品：氨基值可以用于评估化妆品中胶原蛋白的含量。
胶原蛋白是皮肤的重要成分，对于保持皮肤的弹性和光泽具有重要作用。
通过测定化妆品中的氨基值，可以判断化妆品中胶原蛋白的含量是否符合要求。
总结：氨基值测定是一种重要的分析方法，用于评估物质中的氨基含量。
通过不同的方法可以测定样品中的氨基值，并应用于食品、药品和化妆品等行业中。
准确测定氨基值对于评估产品质量和安全性非常重要，因此这一方法在实验室和工业生产中得到了广泛应用。
食品中氨基酸含量检测
食品中氨基酸含量检测作为机体内第一营养要素的蛋白质，它在食物营养中的作用是显而易见的，但它在人体内并不能直接被利用，而是通过变成氨基酸小分子后被利用的。
因此，食物蛋白质经消化分解为氨基酸后被人体所吸收，抗体利用这些氨基酸再合成自身的蛋白质。
人体对蛋白质的需要实际上是对氨基酸的需要。
科标可依照ISO、ASTM、DIN、GB、HB等标准完成食品、饲料、药品、纺织品、农业、高分子材料、生物产品、建筑材料以及微生物产品理化性能、力学性能、电气性能等测试。
科标检测中心通过了CMA实验室认证认可，能出具权威的第三方检测报告。
氨基酸是食品中常见营养成分，科标分析检测中心参考国标GB/T5009.124-2003，利用氨基酸自动分析仪能有效地分析检测食品中常见17种氨基酸含量。
食品中氨基酸含量检测一、实验原理科标化工分析检测中心参照国标GB/T5009.124-2003食品中氨基酸的测定，试样蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸，经氨基酸自动分析仪的离子交换柱分离后，与茚三酮溶液产生颜色反应，再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。
二、仪器和试剂L-8900氨基酸自动分析仪，DHG-9203J型恒温干燥箱，DZF-6050型真空干燥器，真空泵；高纯氮气（纯度为99.99%）。
三、试验方法1、称样样品经粉碎后，用电子天平准确称量样品，精确到0.0001g（使样品蛋白质含量10mg~20mg 范围内），将称好的样品放于水解管中。
2、水解在水解管中加入6mol/L盐酸15mL，加入新蒸馏的苯酚3~4滴，再将水解管放入冰水中，冰冻3~5min，再接到真空泵的抽气管上，抽完真空后冲入高纯氮气；再抽真空充氮气，重复三次后，在充满氮气的状态下封口。
将已封口的水解管放在110℃±1℃的恒温干燥箱内，水解22h后，取出，冷却。
打开水解管，将水解液过滤后，用去离子水多次冲洗水解管，将水解液全部转移到50mL容量瓶内，用去离子水定容，吸取滤液1mL于5mL容量瓶内，用真空干燥器在40℃~50℃干燥，残留物用1~2mL水溶解，再干燥，反复进行两次，最后蒸干，用1mLpH2.2的缓冲液溶解，供仪器测定用。
食品理化检验分析 第九章 蛋白质和氨基酸的测定
二、 自动凯氏定氮法 1、原理及适用范围同前 2、特点：
（1）消化装置用优质玻璃制成的凯氏消化瓶，红 外线加热的消化炉。 （2）快速：一次可同时消化8个样品，30分钟可消 化完毕。 （3）自动：自动加碱蒸馏，自动吸收和滴定，自 动数字显示装置。可计算总氮百分含量并记录，12 分钟完成1个样。
5.计算： 氨基酸态氮=〔 c×（V2-V1）×0.014×100 ） 〕/W×100 V1——用中性红为指示剂时，碱液所消耗 的体积 V2——用百里酚酞乙醇液为指示剂时标液 消耗量
0.014——氮的毫摩尔质量，g/mmol。
（二）茚三酮的比色法
原理：氨基酸在一定条件下与茚三酮起反应，生 成蓝紫色化合物，可比色定量。（570nm）
一.双缩脲法 1.原理 脲（尿素）NH2—CO—NH2 加热至150~160℃时 ，两分子缩和成双缩脲。 NH2—CO—NH2 + NH2—CO—NH2 NH2—CO—NH—CO—NH2 + NH3 双缩脲能和硫酸铜的碱性溶液生成紫红色络和 物，此反应叫双缩脲反应。（缩二脲反应） 蛋白质分子中含有肽键（ —CO—NH—），与双缩 脲结构相似。在同样条件下也有呈色反应，在一定 条件下，其颜色深浅与蛋白质含量成正比，可用分 光光度计来测其吸光度，确定含量。（560nm）
3．双指示剂：
① 40%中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示剂，用 氢氧化钠将40%甲醛中和至淡蓝色。
② 0.1%百里酚酞乙醇溶液，（9.4～10.6）
③ 0.1%中性红 50%乙醇溶液，（6.8～8.0） ④ 0.1 mol/L 氢氧化钠标准溶液。
4．操作：
取相同两份样品20～30mg→分别于250ml三角瓶→各 加50ml蒸馏水 一份加中性红3滴→用0.1mol/L NaOH 滴定终点（由红变琥珀色），记录用量，另一份加百里酚 酞乙醇液3滴加中性甲醛20ml→摇匀→用0.1mol/L NaOH 滴至淡兰色。分别记录两次所消耗的碱液ml数。
食品分析与检验蛋白质与氨基酸的测定
食品分析与检验蛋白质与氨基酸的测定蛋白质与氨基酸的测定在食品分析与检验领域中具有重要意义。
蛋白质是食品中重要的营养组分，而氨基酸是构成蛋白质的基本单元，对于评价食品的品质和安全性具有重要意义。
本文将介绍蛋白质与氨基酸的测定方法及其在食品分析与检验中的应用。
蛋白质的测定方法主要有几种：生物测定法、光谱法和色谱法。
其中，生物测定法主要是通过测定食品中的氮元素含量来间接测定蛋白质含量。
常用的方法有凯氏氮法、造浆法和改良Kjeldahl法等。
光谱法主要是通过根据蛋白质的特征光吸收谱测定其含量。
常用的方法有紫外-可见光谱法、荧光光谱法和红外光谱法等。
色谱法是通过分离和检测蛋白质的各种成分来测定其含量。
常用的方法有凝胶过滤层析法、液相色谱法和气相色谱法等。
氨基酸是构成蛋白质的基本单元，对于评价蛋白质的营养价值和品质具有重要作用。
氨基酸的测定方法主要有色谱法和生物传感器方法。
其中，色谱法是目前最主要的氨基酸定量方法，其主要包括高效液相色谱法和气相色谱法。
高效液相色谱法常用于氨基酸的定性和定量分析，具有灵敏度高、选择性好和分析速度快的特点；气相色谱法通常用于氨基酸的定性分析，具有高分离能力和分析速度快的优势。
生物传感器方法是一种新兴的氨基酸测定方法，通过利用生物传感器对氨基酸的选择性响应来测定其含量。
生物传感器方法具有灵敏度高、反应快和操作简便等特点。
在食品分析与检验中，蛋白质与氨基酸的测定具有广泛的应用。
首先，蛋白质含量是评价食品营养价值的重要指标之一、通过测定食品中蛋白质的含量，可以评估其蛋白质营养价值和食品质量。
其次，氨基酸是判定食品蛋白质种类和品质的重要指标。
通过测定食品中各种氨基酸的含量，可以评价蛋白质的品质和营养价值。
此外，蛋白质与氨基酸的测定还可以用于食品的伪标问题的检验，如检验食品中是否含有非法添加的蛋白质或氨基酸衍生物。
综上所述，蛋白质与氨基酸的测定在食品分析与检验中具有重要意义。
通过选择合适的测定方法，可以准确、快速地测定食品中的蛋白质含量和氨基酸组成，从而评价食品的品质、安全性和营养价值。
食品中氨基酸含量的测定
实验九食品中氨基酸含量的测定――茚三酮比色法1、目的通过实验，掌握茚三酮比色法测定氨基酸的方法。
2、原理凡含有自由氨基的化合物，如蛋白质、多肽、氨基酸的溶液与水合茚三酮共热时，能产生紫色化合物，可用比色法进行测定。
氨基酸与茚三酮的反应分两个步骤。
第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛、茚三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮与另一个茚三酮分子和NH3缩合生成有色物质。
3、实验材料与仪器3.1材料大豆、奶粉、火腿肠等(1) 0.2mol/L柠檬酸缓冲液，pH5.0(2) 80%乙醇(3) 10mmol/L KCN：称取0.1638gKCN溶于蒸馏水中，稀释至250ml备用（注意：KCN剧毒！）(4) KCN－乙二醇甲醚－茚三酮溶液：称取1.25g重结晶茚三酮溶于25ml经重蒸馏的乙二醇甲醚中使成5%溶液。
将2.5ml10mmol/L KCN溶液用乙二醇甲醚溶液稀释至125ml充分混合。
然后将125mlKCN—乙二醇甲醚溶与25ml茚三酮－乙二醇甲醚溶液相混合，置试剂瓶待用，正常情况下应为浅黄色。
(5 )标准氨基酸溶液：称取亮氨酸20mg溶于10ml蒸馏水中，则得浓度为200μg/ml的母液。
上述所有试剂必须放在草酸保护的干燥器中，以免被空气中的NH3所污染。
(6) 乙二醇甲醚(CH3OCH2CH2OH, methyl cellusolve)的处理：将5g硫酸亚铁加在500g乙二醇甲醚中，振摇1─2小时。
过滤除去硫酸亚铁（若滤液混浊没有关系），再在蒸馏瓶中蒸馏，收集沸点121─125℃部分，此时应为透明无色液体。
KCN－乙二醇甲醚－茚三酮溶液配制后必须隔夜才能应用。
配制后1星期内稳定，若超过1星期则灵敏度降低，不宜作定量。
(7) 茚三酮重结晶：即使AR级的茚三酮，由于保管不当，常带微红色，配成溶液后也带红色，影响比色测定，故需重结晶一次方可应用。
5g茚三酮溶于15ml热蒸馏水中，加入0.25g活性炭，轻轻摇动，若溶液太稠不易操作，可酌量加水5─10ml，30分钟后用滤纸过滤，滤液放冰箱中过液，次晨即见微黄色结晶出现，过滤，再以1ml冷水洗涤结晶，置于干燥器中干燥，最后装入棕色试剂瓶中保存。
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食品中18种氨基酸检验方法
食品中氨基酸是构成蛋白质的重要成分之一。
氨基酸的检验方法能够帮助我们了解食品中氨基酸的含量和种类，对于食品的营养价值评估和质量控制具有重要意义。
本文将介绍18种常见氨基酸的检验方法。
1. 色谱法：色谱法是检测氨基酸含量的常用方法之一。
通过将样品中的氨基酸分离出来，并利用色谱柱分离各个氨基酸，再利用紫外检测器检测各个氨基酸的含量。
2. 毛细管电泳法：毛细管电泳法是一种高效、快速的氨基酸分析方法。
通过将样品中的氨基酸在电场作用下在毛细管中迁移，再利用紫外检测器检测各个氨基酸的含量。
3. 高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种常用的氨基酸分析方法。
通过将样品中的氨基酸在液相中分离，并利用紫外检测器检测各个氨基酸的含量。
4. 离子交换色谱法：离子交换色谱法是一种常用的氨基酸分离和检测方法。
通过将样品中的氨基酸在离子交换柱上分离，并利用紫外检测器检测各个氨基酸的含量。
5. 高温液相色谱法：高温液相色谱法是一种适用于疏水性氨基酸检测的方法。
通过将样品中的氨基酸在高温条件下分离，并利用紫外
检测器检测各个氨基酸的含量。
6. 酶法：酶法是一种常用的氨基酸分析方法。
通过将样品中的氨基酸与特定的酶反应，生成可测定的产物，并利用酶活性的变化来测定各个氨基酸的含量。
7. 比色法：比色法是一种简单、快速的氨基酸分析方法。
通过将样品中的氨基酸与特定的试剂反应，生成具有特定颜色的产物，并利用比色计测定各个氨基酸的含量。
8. 紫外分光光度法：紫外分光光度法是一种常用的氨基酸检测方法。
通过测量各个氨基酸在紫外光波长下的吸光度，来测定各个氨基酸的含量。
9. 荧光分析法：荧光分析法是一种敏感、高效的氨基酸检测方法。
通过测量各个氨基酸在激发光波长下的荧光强度，来测定各个氨基酸的含量。
10. 质谱法：质谱法是一种高灵敏度的氨基酸分析方法。
通过将样品中的氨基酸转化为气相离子，并利用质谱仪测定各个氨基酸的含量。
11. 核磁共振法：核磁共振法是一种非破坏性的氨基酸分析方法。
通过测量各个氨基酸在核磁共振谱图上的峰值面积或峰值积分，来测定各个氨基酸的含量。
12. 免疫分析法：免疫分析法是一种快速、灵敏的氨基酸检测方法。
通过将样品中的氨基酸与特定的抗体结合，在光学或电化学信号下测定各个氨基酸的含量。
13. 高效薄层层析法：高效薄层层析法是一种简单、快速的氨基酸分析方法。
通过将样品中的氨基酸在薄层层析板上分离，并利用显色剂显色后测定各个氨基酸的含量。
14. 气相色谱法：气相色谱法是一种高分辨率的氨基酸分析方法。
通过将样品中的氨基酸在气相色谱柱上分离，并利用检测器测定各个氨基酸的含量。
15. 电喷雾质谱法：电喷雾质谱法是一种高灵敏度的氨基酸检测方法。
通过将样品中的氨基酸转化为气相离子，并利用质谱仪测定各个氨基酸的含量。
16. 毒性试验法：毒性试验法是一种常用的氨基酸分析方法。
通过将样品中的氨基酸与特定的细胞或动物进行接触，观察细胞或动物的生长、发育或生理指标的变化，来评估各个氨基酸的含量。
17. 活性测定法：活性测定法是一种常用的氨基酸检测方法。
通过将样品中的氨基酸与特定的酶反应，测定酶活性的变化，从而间接测定各个氨基酸的含量。
18. 生物传感器法：生物传感器法是一种新兴的氨基酸检测方法。
通过将样品中的氨基酸与特定的生物传感器相互作用，利用传感器的信号变化来测定各个氨基酸的含量。
总结：食品中氨基酸的检验方法有多种多样，每种方法都有其特点和适用范围。
在食品营养价值评估和质量控制中，选择合适的氨基酸检验方法非常重要。
通过对18种氨基酸检验方法的介绍，希望能够对读者有所启发，提高对食品中氨基酸的检测和评估能力。