高出检测限浓度的肿瘤标志物的准确值检测
肿瘤标志物类定量检测试剂注册申报资料指导原则
附件7：肿瘤标志物类定量检测试剂注册申报资料指导原则一、前言本指导原则旨在指导注册申请人对肿瘤标志物类定量检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。
本指导原则是对肿瘤标志物类定量检测试剂的一般要求，申请人应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化，并依据产品特性确定其中的具体内容是否适用。
本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要提供详细的研究资料和验证资料。
应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将进行适时调整。
二、适用范围肿瘤标志物类定量检测试剂是指利用各种方法学对人血清、血浆或其他体液中的肿瘤标志物进行体外定量分析的试剂。
本指导原则适用于进行首次注册申报和相关许可事项变更的产品。
从方法学考虑，本文主要指利用基于抗原抗体反应原理的免疫学方法对肿瘤标志物进行定量检测的体外诊断试剂，如酶免疫法、化学发光法或微粒子酶免法等（不限于上述方法学），而不包括组织受体检测、生物化学方法、免疫组化染色法、分子生物学方法类检测试剂，有利之处可参考执行。
三、基本要求（一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、有关生物安全性的说明、研究结果的总结评价以及同类产品上市情况介绍等内容，应符合《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》（以下简称《办法》）和《体外诊断试剂注册申报资料基本要求》（国食药监械〔2007〕609号）的相关要求，下面着重介绍与肿瘤标志物类定量检测试剂预期用途有关的临床背景情况。
理想的肿瘤标志物应具有以下特性：灵敏度高，便于肿瘤的早期发现；特异性好，便于良、恶性肿瘤的鉴别；良好的器官特异性；与病情严重程度、 肿瘤大小或分期有直接关系；监测治疗效果，肿瘤标志物浓度增高或降低与治疗效果相关；预测复发，疾病复发时肿瘤标志物水平明显异常。
CA50
CA50CA50Marker)，是反映肿瘤存在的化学类物质。
它们或不存在于正常成人组织而仅见于胚胎组织，或在肿瘤组织中的含量大大超过在正常组织里的含量，它们的存在或量变可以提示肿瘤的性质，借以了解肿瘤的组织发生、细胞分化、细胞功能，以帮助肿瘤的诊断、分类、预后判断以及治疗指导。
CA50是一种唾液酸酯和唾液酸糖蛋白，正常组织中一般不存在，当细胞恶变时，糖基化酶被激活，造成细胞表面糖基结构改变而成为CA50标志物。
正常血<20 μg/L，许多恶性肿瘤患者血中皆可升高，如66.6%的肺癌、88.2%的肝癌、68.9%的胃癌、88.5%的卵巢或子宫颈癌、94.4%胰或胆管癌，其他如直肠癌、膀脏癌等皆有70%以上是升高的。
[1]一.概述TSGFTSGF全称Tumor Supplied Group of Factors,中文译作恶性肿瘤相关物质群（肿瘤特异性生长因子）是数种国际公认的与恶性肿瘤生长相关的糖类物质和代谢物（脂蛋白、酶、氨基酸）的统称。
当肿瘤产生时，血液中肿瘤相关物质含量升高，是肿瘤的早期发现、术后及放、化疗、转移、复发的重要线索。
临床试验证明，测定血清中肿瘤相关物质的含量，将为肿瘤的早期发现、筛查，良性肿瘤的鉴别和患者病情变化的动态检测提供有效的参考依据。
TSGF的检测可为临床检验恶性肿瘤提供一个较为理想的指标，运用现代生物化学分析技术，达到了快速、准确、早期发现肿瘤的目的。
在国家药品监督管理局组织专家鉴定，根据全国数百家医院临床研究报告评审确定为：敏感性可以达到86%，特异性达到97%以上。
通过对大量健康人群的调查发现其特异性达到99.35%。
TSGF检测对各种恶性肿瘤早期及治疗后的复发，其发现能力强，特别适合做人群的健康防癌检查和对病人术后及放、化疗后的早期检测的检测作用。
与其他常见的肿瘤检测标志物不同的是，TSGF的检测物在肿瘤形成的早期浓度就已经很高。
我院采用的BXTM试剂是根据恶性肿瘤发生发展过程中，由于基因突变导致血液中多种与肿瘤相关生化物质改变的机理。
关于肿瘤标志物糖类抗原125(ca125)检验结果的临床意义
关于肿瘤标志物糖类抗原125(CA125)检验结果的临床意义肿瘤标志物通常指细胞癌变过程中所产生的正常细胞缺乏或含量极微的特异性和相对特异性的物质，也有可能是宿主细胞针对癌细胞所产生的正常细胞成分，但在量和质上与正常状态或良性疾病时明显不同。
存在于肿瘤细胞表面、血液或体液中。
肿瘤标志物对于早期诊断和发现肿瘤；提示肿瘤发生的部位和组织来源；肿瘤的的鉴别诊断；肿瘤治疗的疗效观察和预后判断；监测肿瘤复发，起很重要的作用。
CA125的检验参考范围，正常血清<35μg/L，绝经期女性<25μg/L。
CA125测定的影响因素，（1）女性在检查CA125时应避开经期和孕期，以免出现假阳性；（2）送检标本不能用肝素抗凝，以免影响结果。
CA125是一种糖蛋白，广泛存在于间皮细胞组织中，是很重要的卵巢癌相关抗原，在非黏液性卵巢癌和上皮细胞性卵巢癌细胞株上表达，正常或两性卵巢组织不表达，卵巢浆液性腺癌患者阳性率为82%，Ⅲ～Ⅳ期的病变阳性率可达100%，黏液性卵巢癌CA125不升高。
CA125升高可先于临床症状出现之前，因此是观察疗效的良好指标。
CA125阳性患者在手术、化疗及免疫治疗有效时，CA125浓度可在1周后逐渐降至正常水平。
若不能恢复，则提示治疗无效或有残存肿瘤存在。
还应注意到由于18%的卵巢癌患者CA125值在参考范围内，诊断时应结合临床和其他诊断手段一起使用。
其他非卵巢恶性肿瘤也有部分CA125阳性，乳腺癌40%、胰腺癌50%、胃癌47%、肺癌41.1%、结肠直肠癌34.2%，其他妇科肿瘤43%。
某些良性疾病如肝硬化、慢性胰腺炎、肝炎、子宫内膜异位、子宫肌瘤、子宫肌腺症、卵巢囊肿和盆腔炎症等疾病时都可见CA125升高。
其中子宫肌腺症患者CA125的阳性率可达80%。
肝硬化是血清中的CA125大幅度升高，阳性率可达90%，而腹腔积液中的CA125浓度更高。
心功能减退时，CA125可大幅度升高，胸部疾病所致的胸腔积液中的CA125浓度异常升高。
肿瘤标志物7项联合检测
一、恶性肿瘤与肿瘤标志物在2010年国际抗癌联盟举办的世界抗癌大会上，我国卫生部部长陈竺表示，在过去30年里，中国癌症死亡率升高了80%，恶性肿瘤已成为我国城乡居民的第一死因。
我国癌谱目前兼具发展中国家和发达国家的共同特征，排名前五的癌症种类分别为：肺癌、肝癌、胃癌、食管癌和结肠癌，如图1。
癌症发病状况十分严峻，因而需要准确高效的检测诊疗手段使病情及早被发现。
肿瘤标志物（TM）是目前最被看好的这类检测指标之一。
涵盖我国前五项癌症的TM主要包括AFP、CEA、CYFRA21-1、NSE、CA125、CA242及free-β-hcG等。
二、指标意义free-β-hcG: 生殖细胞肿瘤的特异性指标，对于原发性肝癌的诊断也有重要提示作用。
AFP：原发性肝癌的特异性最好的指标，在其他消化道癌和胚胎瘤中也有浓度异常。
CEA：广谱性的TM，对消化道癌、肺癌及乳腺癌具有较高的灵敏度。
CYFRA21-1：非小细胞肺癌（NSCLC），尤其是肺鳞癌的特异性TM，对食管癌也有较高的检出率。
NSE：小细胞肺癌（SCLC）和神经内分泌细胞肿瘤的特异性指标，常用于区分NSCLC和SCLC。
CA125：广谱性的TM，对肺癌和卵巢癌具有较高的特异性。
CA242：胰腺癌和消化道恶性肿瘤的特异性指标，准确性比CA199好很多。
目前临床上尚未有单个TM指标能够兼顾对灵敏度和特异性的要求，因而国际权威的肿瘤学术机构推荐用合适的几项指标组合、联合检测。
因此，通过AFP、CEA、CYFRA21-1、NSE、CA125、CA242及free-β-hcG这7项指标联合检测，即可实现对我国发病率最高的前5项恶性肿瘤（覆盖率85%的恶性肿瘤）可靠的诊断筛查。
三、基于流式荧光平台的七项肿瘤标志物联检技术优势1、严谨科学的指标组合肺癌TM指标（CYFRA21-1+NSE+CEA+CA125）其中CYFRA21-1是NSCLC的最敏感指标，NSE针对于SCLC，CEA+CA125则对疗效进行检测并进行预后评估。
利用酶联免疫法定量检测肿瘤标志物Hsp90α
利用酶联免疫法定量检测肿瘤标志物Hsp90α深圳职业技术学院 12药学1 XXX一、定量检测Hsp90α的临床应用价值肿瘤标志物（Tumor marker，TM）是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或是由机体对肿瘤反应而异常产生和升高的，反映肿瘤存在和生长的一类物质。
理想的肿瘤标志物应灵敏度高，特异性好，能够明确地区分肿瘤患者与非肿瘤患者；针对某一种肿瘤，具有组织器官特异性，能对肿瘤进行定位；与病情严重程度、肿瘤大小或分期有关；能监测肿瘤治疗效果和肿瘤的复发。
热休克蛋白（Heat shock proteins，Hsp）90α是一个伴侣蛋白，能够辅助蛋白折叠和维持细胞内多种信号传导蛋白的稳定，从而促进细胞存活和生长。
在肿瘤细胞中，Hsp90α能够使过度激活或突变的信号传导蛋白保持活性，加速了肿瘤细胞的恶性转变。
研究发现Hsp90α的分泌水平随肿瘤细胞侵袭程度的增加而升高，表明分泌型Hsp90α与肿瘤的侵袭呈正相关[1]，随后，Hsp90α作为肺癌相关肿瘤标志物被证明，可用于肺癌患者的病情监测和疗效评价[2]，亦可作为诊断肺癌尤其是早期肺癌诊断的参考。
另外，由于目前常用的肿瘤标志物既存在于肿瘤中，也存在于正常人群和非肿瘤病人的血液和体液中，不能单凭肿瘤标志物超过参考范围确诊患癌。
因此，人们期待通过“一滴血”或“一泡尿”早期确诊肿瘤的技术还有待进一步研究。
二、定量检测Hsp90α的背景在肿瘤标志物出现之前，肺癌的诊断及肺癌患者的疗效评价常有影像学方法尤其是CT检查常用于确定肿瘤的部位、大小及与周围组织的毗邻关系，是肿瘤诊断、分期及治疗方式选择的重要依据，也可做大致的定性诊断；病理学检查，其结果准确性高，但是因为需要取得足够的组织标本用于检查，常常需要多点取材或多次取材，而且部分患者因为病变部位等原因无法成功获得组织标本，最后需行手术切除方能明确诊断，过程繁琐。
支气管镜活检，对中央型肺癌的诊断结果准确，但该方法为侵袭性操作，部分患者不愿接受或不能耐受。
肿瘤标志物CEA、CA199、CA242及CA724联合检测在早期胃癌中的诊断价值
- 62 -*基金项目：2022年度福建省中青年教师教育科研项目（JAT220119）①福建医科大学肿瘤临床医学院（福建省肿瘤医院） 福建 福州 350001肿瘤标志物CEA、CA199、CA242及CA724联合检测在早期胃癌中的诊断价值*周旭升① 林青① 肖燕萍① 【摘要】 目的：分析肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、糖类抗原199（CA199）、糖类抗原242（CA242）及糖类抗原724（CA724）联合检测早期胃癌的诊断价值。
方法：选取2021年6月—2023年6月在福建医科大学肿瘤临床医学院收治的疑似早期胃癌患者56例作为观察组，另选取同期本院收治的良性胃病患者40例作为对照组，对比两组患者CEA、CA199、CA242及CA724的水平，并分析四项单独检测及联合检测的诊断价值。
结果：观察组CEA、CA199、CA242及CA724水平均显著高于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。
观察组56例疑似早期胃癌患者中，阳性48例，其中乳头状腺癌25例，管状腺癌23例；阴性8例，其中胃溃疡5例，慢性胃炎3例。
CEA、CA199、CA242及CA724联合检测的敏感度为93.75%，准确率为92.86%，均高于4项单独检测的敏感度和准确率，差异有统计学意义（P <0.05），联合检测的特异度和4项单独检测的特异度比较，差异无统计学意义（P >0.05）。
结论：肿瘤标志物CEA、CA199、CA242及CA724联合检测早期胃癌的诊断价值较高，显著优于各项单独检测，可为早期胃癌的快速筛查和诊断提供重要的理论参考。
【关键词】 肿瘤标志物 癌胚抗原 糖类抗原199 糖类抗原242 糖类抗原724 诊断价值 doi：10.14033/ki.cfmr.2023.31.016 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2023）31-0062-04 Diagnostic Value of Combining Tumor Markers CEA, CA199, CA242 and CA724 in Early Gastric Cancer/ZHOU Xusheng, LIN Qing, XIAO Yanping. //Chinese and Foreign Medical Research, 2023, 21(31): 62-65 [Abstract] Objective: To analyse the diagnostic value of combining tumor markers carcinoembryonic antigen (CEA), carbohydrate antigen 199 (CA199), carbohydrate antigen 242 (CA242) and carbohydrate antigen 724 (CA724) in early gastric cancer. Method: From June 2021 to June 2023, 56 suspected early gastric cancer patients admitted to Clinical Oncology School of Fujian Medical University were selected as the observation group. In addition, 40 patients with benign stomach diseases admitted to in the same period were selected as the control group. The levels of the tumor markers CEA, CA199, CA242 and CA724 were compared between the two groups, and the diagnostic value of the above four tumor markers were tested alone and in combination was analyzed. Result: The levels of CEA, CA199, CA242 and CA724 in observation group were significantly higher than those in control group, the differences were statistically significant (P <0.05). Among the 56 suspected early gastric cancer patients in the observation group, there were 48 positive cases (25 papillary adenocarcinoma cases, 23 tubular adenocarcinoma cases) and 8 negative cases (5 gastric ulcers cases, 3 chronic gastritis cases). The results showed that the sensitivity and accuracy of the combined detection of CEA, CA199, CA242 and CA724 were 93.75% and 92.86%, which were higher than the sensitivity and accuracy of the four separate tests, and the differences were statistically significant (P <0.05). There was no significant difference between the specificity of the combined test and that of the four separate tests (P >0.05). Conclusion: The combined detection of tumor markers CEA, CA199, CA242 and CA724 has high diagnostic value, which is significantly superior to each single detection, and can provide an important theoretical reference for the rapid screening and diagnosis of early gastric cancer. [Key words] Tumor markers CEA CA199 CA242 CA724 Diagnostic value First-author's address: Clinical Oncology School of Fujian Medical University, Fuzhou 350001, China 胃癌属发病率较高的消化系统恶性肿瘤，在病因学研究中，其发病与幽门螺杆菌感染、遗传因素、饮食习惯不良、慢性胃病等因素有关。
临床检验方法学评价常用指标
临床检验方法学评价常用指标临床检验是医疗诊断和治疗过程中不可或缺的重要环节，其结果的准确性和可靠性直接影响着医疗决策的制定。
为了评估临床检验方法的性能和质量，需要使用一系列的指标进行评价。
这些指标能够帮助实验室工作人员选择合适的检验方法，确保检验结果的准确性和一致性，从而为临床医生提供有价值的诊断依据。
一、准确性准确性是指检验结果与真实值之间的接近程度。
在临床检验中，通常使用偏差来衡量准确性。
偏差是指测定值与真值之间的差异，偏差越小，准确性越高。
例如，在测定血清葡萄糖浓度时，如果已知真实值为 50 mmol/L，而某种检验方法测定的结果为 48 mmol/L，那么偏差就是－02 mmol/L。
为了获得准确的偏差估计，需要使用参考方法或参考物质来确定真值。
二、精密度精密度反映的是在相同条件下多次重复测定结果的接近程度，通常用标准差（SD）或变异系数（CV）来表示。
标准差是一组数据离散程度的度量，标准差越小，说明测定结果越集中，精密度越高。
变异系数则是标准差与均值的比值，消除了测量值大小对精密度的影响，更便于不同测量值之间精密度的比较。
比如，对同一血清样本进行 10 次胆固醇测定，得到的结果分别为52、53、51、52、54、51、53、52、52、53 mmol/L，计算其均值为523 mmol/L，标准差为 008 mmol/L，变异系数为 153%。
精密度又可分为重复性和再现性。
重复性是在相同条件下（同一操作者、同一仪器、同一实验室、短时间内）对同一样品进行多次测量的精密度；再现性则是在不同条件下（不同操作者、不同仪器、不同实验室、较长时间间隔）对同一样品进行测量的精密度。
三、特异性特异性指的是检验方法在检测目标物质时，不受其他非目标物质干扰的能力。
例如，在检测乙肝表面抗原时，检验方法应只对乙肝表面抗原产生阳性反应，而对其他类似的抗原或物质不产生反应。
如果一种方法对其他类似的物质也产生阳性反应，就会导致假阳性结果，降低检验的特异性。
走进肿瘤指标CA199的世界她升高了是怎么回事？
⾛进肿瘤指标CA199的世界她升⾼了是怎么回事？今⽇上午，⼤家像往常⼀样忙碌的⼯作着，这时窗⼝来了⼀位⽼年⼥性拿着化验单向我们咨询化验结果，我便过去了解了⼀下。
原来这位患者健康查体时，别的结果都很正常，唯独CA199⾼，65U/ml。
我们医院做肿瘤标志物检测使⽤的仪器是雅培ARCHITECT，参考值0--37U/ml，显然她的CA199结果增⾼。
进⼀步询问得知，这位患者健康查体CA199⾼，⾃⼰也很是担⼼，于是去了另⼀家三甲医院复查了CA199，结果呈现正常了，她⾃⼰很⽭盾，不知道该相信哪个结果，所以来咨询我们。
这让我想起了很久之前遇到的⼀个病例，⼤约两年前，⼀位患者因“腹痛，便秘”去医院做检查，肠镜检查提⽰为结肠癌，⼀个⽉后进⾏了结肠切除术。
术前查CA199（ROCHE⽅法）24.9U/ml，术后20天左右复查CA199（ROCHE⽅法）4.3U/ml，⼀⽇后开始化疗治疗，之后每⽉随访，CA199（ROCHE⽅法）⼀直波动在3.1—8.3U/ml，后来，此患者因来我院路程⽅便，遂来我院每⽉复检，⼤约⼀年后的⼀次复查中，CA199结果为98.1U/ml（雅培ARCH⽅法），⽽同样⼀管⾎拿到ROCHE机器复查为26.9U/ml，此时做CT没有任何异常。
仅两个⽉后的复查中，ROCHE⽅法的CA199达到了139.0U/ml，⽽⽤雅培ARCH⽅法CA199已经达到了528.6U/ml，做CT已显⽰有肝转移。
再回到开篇提到的来咨询的患者，她去复查CA199的医院，我正好有同学在，后来问了⼀下，果然是不同机器，也许是结果本就如此，亦或者由于不同⽅法，才导致呈现两个截然不同结果。
在保证质控在控、试剂、⼈员操作各⽅⾯⽆误的情况下，确保了结果的准确性，我们只好向患者解释了不同机器间⽅法不⼀样，灵敏度和特异性存在⼀定差异，建议继续随访复查。
对于CA199的相关知识，我们来简单了解下。
1.什么是CA199？我们都知道CA199，即糖类抗原19-9，是⼀种黏蛋⽩型的糖类蛋⽩TM，因由⿏单克隆抗体116NS19-9识别⽽命名，为细胞膜上的糖蛋⽩，其抗原决定簇为唾液酸岩藻糖神经节苷脂，即唾液酸化Lewis a抗原。
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高出检测限浓度的肿瘤标志物的准确值检测【摘要】目的为得到一个高出检测限浓度肿瘤标志物的具体值,而选择一种更好的稀释液对样本进行稀释,以满足临床对疗效观察的需求。
方法分别采用三种不同的稀释剂:①美国雅培AXSYM全自动化学发光仪配套的第4号缓冲液;②生理盐水;③肿瘤标志物的阴性血清(每种被测肿瘤正常值低90%以下的血清),对美国雅培AXSYM全自动化学发光仪所测的高浓度肿瘤标志物CEA,CA125,T-PSA,进行稀释,与仪器自动稀释的结果和在仪器检测限内检测结果进行比较。
结果手工稀释的结果与机器自动稀释的结果比较,CA125:4号缓冲液稀释与仪器自动稀释结果无显著差异,而用生理盐水和用阴性血清稀释与仪器自动稀释有统计学差异;CEA和T-PSA:三种稀释液与仪器自动稀释均无显著性差异。
结论美国雅培AXSYM全自动化学发光仪配套的4号缓冲液,对超高浓度即仪器已经不能自动稀释的那部分肿瘤标志物的血清稀释的结果最好。
CA125阴性血清由于基础值高,则不能用来对CA125进行稀释,但可以对CEA和T-PSA进行稀释,但是结果不如4号缓冲液和生理盐水准确。
【Abstract】Objective In order to meet the needs of the clinical observation on the therapeutic effect,we have to seek a kind of buffer which we can use to dilute the samples,and then we can get the values of the serum concentration of tumor markers which are too higher than the detection limit of testers.Methods With three various of diluents solutions:①NO.4 buffer,②normal saline,③negative serum of tumor markers.the tumor markers:CEA,CA125 and T-PSA,detected by the United States Abbott AXSYM automatic chemiluminescent instrument which were higher in serum concentration were diluented by hand.Results Comparison with the automatic dilution by the instrument,the difference of 4 buffer,saline and negative serum,there was significant statistic difference between the samples diluted with saline and negative serum when tested CA125.And there was no significant statistic difference between the other groups.Conclusion The no.4 buffer as the corollary reagent of the United States Abbott AXSYM automatic chemiluminescent instrument has the best delution effect.Although the negative serum has the poorest effect,it can be used to dilute CEA and T-PSA.各种肿瘤的发生发病随着环境污染,食品污染,工作压力等等的因素呈上升趋势[1,2]。
而肿瘤标志物的广泛应用,其对肿瘤的诊断及疗效监测越来越重要[3]。
但由于仪器的线性范围有限,高出检测限浓度的肿瘤标志物结果的准确报告显得尤为重要。
本实验对CEA、CA125、T-PSA三种肿瘤标志物高出检测限的标本进行不同稀释剂的稀释,从中选择一种最为准确的稀释剂,而更加准确地报告肿瘤标志物的具体检测值。
满足临床医生对疗效地监测和观察。
1 资料与方法1.1 标本来源15份标本为中山大学附属第五医院2009年12月至2010年元月住院及门诊患者,已经用美国雅培AXSYM全自动化学发光仪测得的高浓度肿瘤标志物的血清,即高浓度的CEA,CA125,T-PSA,的血清标本。
阴性血清为:检测当天的健康体检血清标本,CEA＜0.2 ng/ml,取女性T-PSA＜0.015 ng/ml。
1.2 实验仪器及方法仪器:美国雅培AXSYM全自动化学发光仪,加样枪(上海大龙医疗设备有限公司)试剂:美国雅培AXSYM全自动化学发光仪配套试剂及配套4号缓冲液,生理盐水。
1.3 标本采集用一次性真空抽血管抽取全血3 ml,分离血清待测。
1.4 统计学方法统计学处理采用SPSS 11.5软件统计与分析,采用t检验。
2 结果2.1 不同稀释液稀释样品后测定CA125的浓度,比较测定结果,见表1。
表1不同稀释液处理样品CA125浓度的比较(U/ml)样品编号仪器自动稀释4号缓冲液生理盐水阴性血清1743.92746.00715.50978.502630.40632.40600.00845.103850.90853.20810.401132.3041689.351680.541598.501965.2052380.462375.252248.402983.604号缓冲液、生理盐水、阴性血清稀释样品的测定结果与仪器自动稀释测定的结果进行双侧配对t检验,所得P4号缓冲液=0.544＞0.05,P生理盐水=0.034＜0.05,P阴性血清=0.011＜0.05。
可见用4号缓冲液稀释与仪器自动稀释结果无显著差异,而用生理盐水和用阴性血清稀释与仪器自动稀释用统计学差异,不宜用这两者稀释样品以获得高出检测限的样品CA125浓度。
2.2 不同稀释液稀释样品后测定CEA的浓度,比较测定结果,见表2。
表2不同稀释液处理样品CEA浓度(ng/ml)的比较样品编号仪器自动4号缓冲液生理盐水阴性血清1182.56185.20189.71192.502256.14253.46260.35262.193310.25311.58312.70294.684358.23357.28355.10358.105427.13428.00430.35410.524号缓冲液、生理盐水、阴性血清稀释样品的测定结果与仪器自动稀释测定的结果进行双侧配对T检验,所得P4号缓冲液=0.807,P生理盐水=0.173,P阴性血清=0.583。
三者均＞0.05,表明用这三种稀释液稀释高出检测限的样品CEA浓度与仪器自动稀释均无显著性差异。
2.3 不同稀释液稀释样品后测定T-PSA的浓度,比较测定结果,见表3。
表3不同稀释液处理样品T-PSA浓度的比较(ng/ml)样品编号仪器自动稀释4号缓冲液生理盐水阴性血清175.1274.3678.2379.562120.12119.80118.36124.563210.45209.95209.45206.484350.70351.64350.56353.705460.43458.90453.10468.454号缓冲液、生理盐水、阴性血清稀释样品的测定结果与仪器自动稀释测定的结果进行双侧配对T检验,所得P4号缓冲液=0.340,P生理盐水=0.448,P阴性血清=0.181。
三者均大于0.05,表明用这三种稀释液稀释高出检测限的样品T-PSA 浓度与仪器自动稀释均无显著性差异。
3 讨论由于CEA＞500 ng/ml仪器不能自动稀释,T-PSA和CA125虽然可以自动稀释10倍,但是检测上限分别只有500 ng/ml和6000 U/ml,还是不能够满足临床的需要,本实验对这三种肿瘤标志物分别用美国雅培AXSYM全自动化学发光仪配套的第4号缓冲液,生理盐水,阴性血清(CEA＜0.5 ng/ml)(T-PSA＜0.015)稀释检测,由于CA125正常男女性测量值通常都落在(5.0~30.0)U/ml之间,作为稀释剂本底太高。
而CEA、T-PSA用正常人的血清作为稀释剂本底低影响就比CA125小很多,所以CEA,T-PSA用4号液和生理盐水及阴性血清稀释的效果都在可接受范围,但是用4号液稀释的结果最接近仪器自动检测和自动稀释的结果,且方便易得,生理盐水次之,阴性血清随着所取的阴性血清的测量值越低就越接近仪器自动检测和自动稀释的结果,但还是比前两种误差大。
且获得要求的阴性血清较获得4号液和生理盐水来的麻烦,且误差也大于前两者,综上所诉:4号缓冲液是最好的稀释剂,不建议使用阴性血清稀释。
还有CA153,CA199等项目医生对之也有具体值的要求,我们会在今后的工作中逐步试验完善。
参考文献[1] 粟爽,李万甫.恶性肿瘤的姑息治疗.现代医药卫生,2008,1(24):86-87.[2] 王进军,刘占旗,古晓娜.环境致癌物的健康风险评价方法.国外医学卫生学分册,2009,1(36):50-58.[3] Bjerner J,Hogetveit A,Wold Akselberg K et al.Reference intervals for carcinoembryonicantigen(CEA),CA125,MUC1,Alfa-foeto-protein(AFP),neuron-specificenolase(NSE)and CA19.9 from the NORIP study.Scand J Clin Lab Invest,2008,68(8):703-713.。