第9章常见植物的脱毒与快速繁殖技术
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植物的离体快繁
4、褐变现象
概念 褐变：指在组织培养过程中，由培养材料 向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐 渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而 死亡的现象。
褐变原因
由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，将酚 类化合物氧化成醌类物质，会抑制其它酶 的活性，从而影响所接种外植体的培养。
减轻褐变现象发生的方法：
三个选择：
在培养基中表现的症状
外植体接触培养基部位长菌 外植体损伤部位长菌 外植体生长不良或表现出缺绿
防治措施
接种前的工作： 1、 接种室的灭菌 2、超净工作台的灭菌 3、 接种器皿、用具的灭菌 4、工作人员接种前应做的准备工作 5、 材料的灭菌
1、接种室的灭菌
• 接种室的地面，墙壁要擦洗干净灯灭菌
3、玻璃化现象
定义：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些 培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水渍状，这 种现象通常称为玻璃化。 特点：外观形态有明显异常；体内含水量、矿质 元素、糖类、纤维、蛋白质等基本成分含量有变 化，一些酶活和内源激素含量有变化。
影响玻璃化苗发生的因素
1.培养材料：材料种类和外植体不同都有影响。
兰花的萌发
兰花的启动
兰花的增殖
兰花的分化
培养的兰花
五种器官发生方式优点、缺点比较：
（1）不定芽型：容易成苗，对培养基要求不 高，后代遗传性较为稳定，但取材受到一 定限制，仅限于具有明显顶端分生组织和 次生分生组织的物种。
（2）器官型和类胚体发生型：对培养基要求 高，器官发生条件苛刻。繁殖数量不如不 定芽型和器官发生型多，但遗传性稳定。
错
误
2、遗传稳定性
影响遗传稳定性的因素有： 1、基因型 2、继代次数 3、发生方式 4、激素浓度
植物脱毒方法
烟草花叶病毒的症状
俗称聋烟、疯烟、青花、油头。 烟草植株染病后，幼嫩叶片侧脉及 支脉组织呈半透明状，即明脉。叶 脉两侧叶肉组织渐呈淡绿色。病毒 在叶片组织内大量增殖，使部分叶 肉细胞增大或增多，出现叶片薄厚 不匀，颜色黄绿相间，呈花叶状。 后花叶斑驳程度加大，并现大面积 深褐色坏死斑，中下部老叶尤甚， 发病重的叶片皱缩、畸形、扭曲。 早期发病的植株节间缩短，严重矮 化，生长缓慢，不能正常开花结实。 并易脱落。能发育的荫果小而皱缩， 种子量少且小，多不能发芽。
不能合成自身需要的生长素，但下部叶原基能提供，因 而带叶原基的茎尖生长快，成苗率高。但茎尖越大，脱 毒效果差。
欧洲：前捷克斯洛伐克、丹麦、荷兰; 英国
亚洲：日本 西半球：美国 ；
大洋洲：澳大利亚论或经验。
必要时研究人员可在此基础上提出自己的观点、建议或 方案。
危害与症状
是造成郁金香种球退化的重要原因之一。
该病主要浸染郁金香的叶片及花冠。主要症 状表现在花上，同一朵花上花瓣的颜色产生 深浅不同的变化，有的颜色加深，有的颜色 维持正常，有的颜色变浅等，有的碎锦成斑 驳状，有的成条纹状。感病的叶片上出现浅 绿色或灰白色条斑，有时形成花叶。花瓣畸 型、单色花的花瓣上出现淡黄色、白色条纹 或不规则的斑点。感病的鳞茎退化变小，植 株生长不良、矮化，花变小、畸型。
一.病毒在植物体内的危害及分布
1.危害:
绝大多数植物都可以无性繁殖的, 容易受到多种病 原菌的侵染, 体内积累浓度相当高的病毒。 在无性繁殖的种类中，由于病毒通过营养体进行传 递，在母株内逐代积累，危害日趋严重。
病原菌的侵染不一定会造成植物的死亡, 却会大大 降低植物的生长发育及产量和质量,从而影响其栽培 的经济效益。
最多可见的植物病毒有下面的几个：
植物组织培养中的快繁与脱毒技术及其应用
植物组织培养是一种重要的生物技术，它能够实现植物的快速繁殖、脱毒和基因转化。
在植物学研究和植物育种领域，植物组织培养技术的应用非常广泛。
本文将深入探讨植物组织培养中的快繁与脱毒技术及其应用，以帮助读者更深入地理解这一重要领域。
1. 快繁技术在植物组织培养中，快繁技术是指利用植物体的一小部分组织或细胞，通过体外条件培养，实现植物的快速繁殖。
这种技术可以大大提高繁殖速度，缩短繁殖周期，是进行新种质创制、遗传改良和疫病防治的重要手段。
快繁技术的主要方法包括离体培养、愈伤组织培养和微繁殖等。
1.1 离体培养离体培养是将植物体表层（如幼叶、幼茎）或内部组织（如胚乳、子叶）分离出来，移入含有适当营养盐和植物生长调节物的培养基中培养。
通过控制培养条件和添加合适的植物生长激素，可以诱导组织分化和再生形成新植株。
1.2 愈伤组织培养愈伤组织是植物在受到外界刺激或损伤后，经过细胞分裂和组织再生形成的一种未分化的组织。
愈伤组织培养是利用这种特殊组织进行快速繁殖的一种方法，通过控制培养条件和添加植物生长调节物，可以诱导愈伤组织再生形成新植株。
1.3 微繁殖微繁殖是利用植物的微小芽或胚珠进行快速繁殖的方法。
通过培养条件的控制和植物激素的添加，可以诱导微小芽或胚珠快速生长并形成新植株。
2. 脱毒技术在植物组织培养中，由于植物体内可能携带病毒、细菌等病原体，因此会影响到组织培养的效果。
脱毒技术是为了解决这一问题而出现的一种重要技术。
脱毒技术能够有效地清除植物体内的病原体，提高组织培养的成功率和繁殖效率。
2.1 生物脱毒生物脱毒是利用生物制剂对植物体内的病原体进行清除的方法。
通过培养环境中添加含有特定菌株或真菌的生物剂，可以促进植物体内病原体的清除和组织的健康再生。
2.2 生理脱毒生理脱毒是利用植物自身的生理代谢特性进行脱毒的方法。
通过调节培养条件和添加特定的营养物质，可以激活植物的生理代谢活性，加速病原体的清除和组织的再生。
植物的快繁与脱毒培养PPT课件
16
第2节 植物快速繁殖的应用
• 1.大量繁殖珍稀或名 贵植物
• 如:佛肚兰,卡特丽亚 兰等工厂化育苗
• 2.茎尖培养脱毒及脱 毒苗的培养
• 无菌苗 • 有毒苗 • 脱毒苗
17
二，（茎尖培养）脱毒及其应用
• 1.病毒病及其危害 • 2.茎尖培养脱毒的原理 • 3.茎尖培养脱毒的过程 • 4.脱毒苗的鉴定和保存
– ②坏死，在叶片上常呈现坏死斑、坏死环和脉坏 死，在茎、果实和根的表面常出现坏死条等。
– ③畸形，器官变形，如茎间缩短，植株矮化，生
长点异常分化形成丛枝或丛簇，叶片的局部细胞
变形出现疱斑、卷曲、蕨叶及带化等。201.来自毒病的危害及症状 正常的番茄果
番茄厥叶，卷叶病毒
21
番茄病毒病（植株）
俗称虾蕉、葱蕉或蕉公)，病株一般 不抽花蕾，因近顶部叶片成束而得名。 是由病毒侵染植株而引起的, 是香蕉 致命病害,
蕉农称之为" 不治之症"。局部地区 蕉园发病率为2%～10%, 产量损失 30%～60%。
香蕉束顶病
22
1.病毒病及其危害（续）
• （1）症状:花而不实 • 花叶型马铃薯病毒：退化，叶片卷缩，产量逐年下降，
到PVS，PVA，PVM，PVX
• 卷叶型马铃薯病毒：PLRV • 香蕉束顶病：叶片越来越短小，植株矮缩，叶硬
18
1.病毒病及其危害
• 脱毒（virus elimination)培养： • 利用植物组织培养技术，脱除植物细胞中的
病毒，生产健康的无毒繁殖材料的过程。
19
1.2.植物病毒病及其危害
• 定义：由植物病毒寄生引起的病害。
• 症状：
– ①变色，叶片的叶绿素形成受阻或积聚，从而产 生花叶、斑点、环斑、脉带和黄化等。花朵的花 青素也可因而改变,使花色变成绿色或杂色等,常 见的症状为深绿与浅绿相间的花叶症如烟草花叶 病。
第2节 植物快速繁殖的应用
• 1.大量繁殖珍稀或名 贵植物
• 如:佛肚兰,卡特丽亚 兰等工厂化育苗
• 2.茎尖培养脱毒及脱 毒苗的培养
• 无菌苗 • 有毒苗 • 脱毒苗
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二，（茎尖培养）脱毒及其应用
• 1.病毒病及其危害 • 2.茎尖培养脱毒的原理 • 3.茎尖培养脱毒的过程 • 4.脱毒苗的鉴定和保存
– ②坏死，在叶片上常呈现坏死斑、坏死环和脉坏 死，在茎、果实和根的表面常出现坏死条等。
– ③畸形，器官变形，如茎间缩短，植株矮化，生
长点异常分化形成丛枝或丛簇，叶片的局部细胞
变形出现疱斑、卷曲、蕨叶及带化等。201.来自毒病的危害及症状 正常的番茄果
番茄厥叶，卷叶病毒
21
番茄病毒病（植株）
俗称虾蕉、葱蕉或蕉公)，病株一般 不抽花蕾，因近顶部叶片成束而得名。 是由病毒侵染植株而引起的, 是香蕉 致命病害,
蕉农称之为" 不治之症"。局部地区 蕉园发病率为2%～10%, 产量损失 30%～60%。
香蕉束顶病
22
1.病毒病及其危害（续）
• （1）症状:花而不实 • 花叶型马铃薯病毒：退化，叶片卷缩，产量逐年下降，
到PVS，PVA，PVM，PVX
• 卷叶型马铃薯病毒：PLRV • 香蕉束顶病：叶片越来越短小，植株矮缩，叶硬
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1.病毒病及其危害
• 脱毒（virus elimination)培养： • 利用植物组织培养技术，脱除植物细胞中的
病毒，生产健康的无毒繁殖材料的过程。
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1.2.植物病毒病及其危害
• 定义：由植物病毒寄生引起的病害。
• 症状：
– ①变色，叶片的叶绿素形成受阻或积聚，从而产 生花叶、斑点、环斑、脉带和黄化等。花朵的花 青素也可因而改变,使花色变成绿色或杂色等,常 见的症状为深绿与浅绿相间的花叶症如烟草花叶 病。
植物离体快速繁殖和脱病毒技术课件
➢ ④连续转接 对容易褐变的材料可间隔12~24h的培养 后，再转移到新的培养基上，这样经过连续处理7-l0d 后，褐变现象便会得到控制或大为减轻。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
➢ ③培养基成分 无机盐浓度过高、细胞分裂素的水平过 高等都会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而 使褐变现象加深。
➢ ④培养条件不当 如果光照过强、温度过高、培养时间 过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速褐 变程度。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
• 特点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高，省时省工； 可大量繁殖脱毒苗；利于种质资源的保存和交换等；节约 空间，不受季节限制，有利于植物的工厂化生产；在无菌 条件下进行，不受病虫害侵害。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
第5章 植物离体快速繁殖和 脱病毒技术
• 5.1 植物快速繁殖技术 • 5.2 无病毒植物的培养
5.1 植物快速繁殖技术
• 概念：所谓快速繁殖，就是将外植体在人工培养基和合适 的条件下进行培养，以在短期内获得大量遗传性一致的个 体的方法。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
➢ ③培养基成分 无机盐浓度过高、细胞分裂素的水平过 高等都会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而 使褐变现象加深。
➢ ④培养条件不当 如果光照过强、温度过高、培养时间 过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速褐 变程度。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
• 特点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高，省时省工； 可大量繁殖脱毒苗；利于种质资源的保存和交换等；节约 空间，不受季节限制，有利于植物的工厂化生产；在无菌 条件下进行，不受病虫害侵害。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
第5章 植物离体快速繁殖和 脱病毒技术
• 5.1 植物快速繁殖技术 • 5.2 无病毒植物的培养
5.1 植物快速繁殖技术
• 概念：所谓快速繁殖，就是将外植体在人工培养基和合适 的条件下进行培养，以在短期内获得大量遗传性一致的个 体的方法。
最新植物组织培养之草莓的脱毒与快速繁殖教案资料
一、草莓简介草莓是对蔷薇科草莓属植物的通称，属多年生草本植物。
草莓的外观呈心形，鲜美红嫩，果肉多汁，含有特殊的浓郁水果芳香。
草莓具有极其丰富的营养价值。
1、（丰富的胡萝卜素）草莓中所含的胡萝卜素是合成维生素A的重要物质，具有明目养肝作用;2、（滋补调理）草莓对胃肠道和贫血均有一定的滋补调理作用;3、（治病）草莓除可以预防坏血病外，对防治动脉硬化，冠心病也有较好的疗效;4、（防癌）草莓是鞣酸含量丰富的植物，在体内可吸附和阻止致癌化学物质的吸收，具有防癌作用;（回主页）草莓营养价值高，口味好，深受消费者喜爱，特别是近几年种植面积大幅提高。
但由于病毒病的传播感染，导致草莓品种种性退化，产量、品质下降，商品率降低，严重影响了草莓的发展。
下面就简单介绍几种草莓易得的病：二、草莓易得的病1、叶斑病：又称蛇眼病，主要为害叶片、叶柄、果梗、嫩茎和种子。
在叶片上形成暗紫色小斑点，扩大后形成近圆形或椭圆形病斑，边缘紫红褐色，中央灰白色，略有细轮，使整个病斑呈蛇眼状，病斑上不形成小黑粒。
2、白粉病：主要为害叶片，也侵害花、果、果梗和叶柄。
叶片上卷呈汤匙状。
花蕾、花瓣受害呈紫红色，不能开花或开完全花，果实不膨大，呈瘦长形；幼果失去光泽、硬化。
近熟期草莓受到为害会失去商品价值。
3、灰霉病：是开花后的主要病害，在花朵、花瓣、果实、叶上均可发病。
在膨大时期的果实上，生成褐色斑点，并逐渐扩大，密生灰霉使果实软化、腐败，严重影响产量。
4、根腐病：从下部叶开始，叶缘变成红褐色，逐渐向上凋萎，以至枯死。
支柱在中间开始变成黑褐色而腐败，根的中心柱呈红色。
5、黄萎病：该病是土壤病害，主要症状是幼叶畸形，叶变黄、叶表面粗糙无比。
随后叶缘变褐色向内凋萎，直到枯死。
6、除此之外，草莓还容易有一些病虫危害，例如：线虫危害：寄生在草莓组织中，危害叶柄、芽、根等，使被害器官变成红色，严重时植株枯死。
蛴螬危害：在草莓收获期和八九月份咬食根、茎，使植株枯死。
常见植物的脱毒与快速繁殖技术PPT共82页
谢谢！
常见植物的脱毒与快速繁殖技术
21、静念园林好，人间良可辞。 22、步步寻往迹，有处特依依。 23、望云惭高鸟，临木愧游鱼。 24、结庐在人境，而无车马喧；问君 何能尔 ？心远 地自偏 。 25、人生归有道，衣食固其端。
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 Байду номын сангаас 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
植物脱毒方法
寄主范围
有冰草属、雀麦属、马唐属、稗属、 黍属、大麦属、乱子草属、雀稗属、狼 尾草属、甘蔗、黑麦属、狗尾草属、高 梁属、小麦等数十种禾草和作物。在草 坪草中以奥古斯丁草受害严重。
甘蔗黑穗病
2006年，这一疾病能使作物的生长速度与收 成降低百分之三十，从而使澳大利亚昆州总值 十五亿澳元的蔗糖产业受到灾难性威胁。有关 方面还发现这一疾病已经传染至该农场中的许 多其它作物。
不能合成自身需要的生长素，但下部叶原基能提供，因 而带叶原基的茎尖生长快，成苗率高。但茎尖越大，脱 毒效果差。
防治方法
加强检疫，控制病害的扩展和蔓延。发现病株立即 拔除。避免和百合种植过近，防止相互传染。防治蚜 虫，定期喷洒杀虫剂，喷40%乐果乳油1000倍液，或 40%氧化乐果乳油1000倍液或2.5%鱼藤精800倍液防 治蚜虫。减少传播介体。
选择无毒植株作繁殖材料。切花时，对刀剪应加热 消毒或洗剂洗净后使用。 及时拔除病株并销。及时消 灭蚜虫，切断传播途径。定植时深栽鳞茎，以20厘米 为宜，可使碎色隐蔽。种植地点要远离百合。用茎尖 培养法除去病毒，栽培无毒种球。
最多可见的植物病毒有下面的几个：
❖ 烟草花叶病毒 ❖ 郁金香碎色花病毒 ❖ 大蒜E病毒 ❖ 禾草甘蔗花叶病毒病 ❖ 马铃薯病毒
是一种RNA病毒， 专门感染植物，尤其 是烟草及其他茄科植 物，能使这些受感染 的叶片看来斑驳污损， 因此得名。烟草花叶 病和番茄花叶病早为 一般所了解。叶上出 现花叶症状，生长陷 于不良状态，叶常呈 畸形。
防治方法
• 实行轮作 不与茄科植物问、套作，宜与禾本科作物轮作2—3
年。
• 加强田间管理 严禁将已发病的烟苗移入大田。应先健株后
病株顺序管理，操作过程中不宜吸烟，不宜在 烟田反复走动、触摸。充分施足氮、磷、钾肥， 及时喷施多种微量元素肥料，提高植株抗病能 力。移栽后适当炼苗，团棵末期浇临界水，促 进植株生长。出现花叶病，要及时追施速效肥、 培土浇水、促进开秸开片，减轻病害。有报道， 用0．1%的褐藻酸钠喷雾也有一定效果。此外， 还可选用2%宁南霉素水剂，用有效成分90一 120g/ha，采收前14天停止用药。
7.3植物组培快繁和脱毒技术
鉴定方法
1、直观测定法 2、指示植物法
利用病毒在其他植物上 出现症状的特征，作为 鉴别病毒种类的标准， 这种专门用以生产症状 的寄主植物即为指示植 物，又称鉴别寄主。
3、抗血清鉴定法
4、酶联免疫吸附法（ELISA） 5、电子显微镜检查法
6、免疫吸附电镜法
• 另一种是起源于苗基部切口处愈伤组织的上部，直接起源于中柱 鞘细胞，由于发生与茎的中柱相连，故利于移栽成活。
胚状体形成
• 概念： 离体培养下起源 于非合子细胞，经历 了胚胎发生和胚胎发 育过程所形成的类胚 结构。
原球茎形成
3、试管苗的增殖与继代培养
• 1）、试管繁殖速率及计算
• 理论计算：
接种一个芽或一块增殖的培养物，经一段时间的培养后看能 得到多少个芽或苗，从而推算理论上一年能繁殖出多少苗。
第一节 植物的离体快繁
植物离体快繁（Micropropagation） 又叫微型繁殖或试管繁殖，它是把植物 材料放在试管内，给予人工培养基和合 适培养条件，达到高速增殖，属离体无 性繁殖。
其特点是快速，每年能以千百万倍
一 .离体快繁的应用
良种快繁 脱毒良种苗快繁和无病毒苗大量快繁； 特殊育种材料快繁； 制种材料快速繁殖； 自然和人工诱变有用突变体的快繁； 基因工程植株的快繁；
四、离体快繁中的有关问题
• 培养物的增殖方式 • 外源生长调节物质对品种典 型性的影响 • 继代次数与变异
第二节 术
• 怎样脱毒？
植物的组培脱毒技
• 为什么要脱毒？
• 怎样鉴定无病毒植株？
病毒不仅使人患病，同样也侵害植物，使植物出现皱叶、黄 叶、落叶，以致品质变劣、花色变淡、花数减少、产量降低。 多数农作物，特别是无性繁殖作物，都易受到一种或多种病原 菌的周身浸染。病原菌的浸染不一定都会造成植物的死亡，很多病 毒甚至可能不表现任何可见症状。但在植物中病毒的存在会减少作 物的产量和降低作物的品质。
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1、形态特性 (1)根 根系由出生根和匍匐根组成。 (2)茎 分地上部分和地下部分。 (3)叶 全缘，心脏形。 (4)花 为聚伞花序。 (5)果实 浆果。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
2、 生物学习性
马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。 发芽适温为12~18℃。 地上茎叶生长温度为17~21℃。 块茎形成要求昼温14~24℃，夜温12~14℃。 结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥 沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表 面粗糙和薯形不整。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料
1、指示植物鉴定
•在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常
植物组织培养
第9章 常见植物的脱毒与快 速繁殖技术
大 家 好
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第9章 常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
本章主要内容(4学时)
蔬菜的脱毒与快繁 果树的脱毒与快繁 花卉植物的脱毒与快繁 农作物的脱毒与快繁 药用植物的试管快繁 树木的脱毒与快繁
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯试管苗
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
(3) 驯化
炼苗室温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。 炼苗具体方法：移植前7d左右，将长有3~5片叶、 高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培 养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管 苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。
我国的马铃薯平均单产仅为13.60吨/公顷，
是世界单产最高国这瑞士（48.80吨/公顷）
的1/4。最主要的因素就是种薯质量差，品
种布局不合理。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
1．脱毒种薯生产程序
微茎尖组织培养-----诱导出苗-----联免疫 吸附试验法或指示植物方法鉴定-----脱毒试 管基础苗。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯病毒的种类
危害有17种之多，如X病毒、S病毒、 Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤 形块茎病毒等。
马铃薯病毒可使块茎产量减少 50%~80%。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（一）、马铃薯特性和生物学习性
固体、液体培养基相结合-----扩繁基础 苗----在防虫网室栽植或封闭温室扦插----原原种（或称脱毒小薯）。原原种----原种 1代----原种2代----良种1代-----良种2代。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
2．茎尖培养脱毒
（1）茎尖消毒
一般在室内发芽，芽经热处理（38℃）2 周。然后取1厘米的茎尖，水洗干净，无菌 条件下先用70％的酒精浸组织15-20秒，再 用2％次氯酸钠溶液浸泡4--5min，然后用 无菌水冲洗3次。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
取材和接种
把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露 出圆滑的生长点，留1-2个叶原基，0.2— 0.3毫米，随即接种于MS液体培养基上， 每升加0.1mgNAA 、 0.2mgGA3、0.5BA， 2%蔗糖，p H值5.8。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
(4)掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术； (5)掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术； (6)掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快第繁9章技常见术植物。的脱毒与快速繁殖
技术
第9章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
第一节 蔬菜的脱毒与快繁
蕃茄
马铃薯
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
一、马铃薯的组织培养
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
微型薯
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯是一种全球性的重要经济作物。 适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输， 既是一种重要的粮食作物也是一种调节市 场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美 洲，当被发现可以食用后，很快传到世界 各地，成为栽培很广的一种作物。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（二）、马铃薯脱毒技术
通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体 内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、 PVM、PSW等病毒。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
我国马铃薯栽培现状
全国现有马铃薯播种面积300ห้องสมุดไป่ตู้万公顷， 每年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿 公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。
第9章 常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
本章教学目的与要求
(1)掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以及 马铃薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速繁 殖方法；
(2)掌握苹果的脱 毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技 术；掌握草莓的脱 毒与快繁技术；
(3)掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉 的生物学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法；
第一节 蔬菜脱毒与快繁
培养条件：
温度：21~25℃ 光照度：2000-3000 lx 光照时间：12h/d
2-3周长愈伤，4-5周长绿点，3--6月 长成2-3厘米小芽，越慢越好，出芽 很快的扔掉。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（2） 继代和生根
培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒） 鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次）采 用固体、液体培养基相结合方法扩繁。
取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培 养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发 育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此 法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种 在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯继代培养基：
MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙10，3%蔗糖； 20-25℃，3000-4000LX，14-16hr光照； 每3周继代一次，单芽茎段约1厘米； 原则试管苗用2年—3年。
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第一节 蔬菜脱毒与快繁
2、 生物学习性
马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。 发芽适温为12~18℃。 地上茎叶生长温度为17~21℃。 块茎形成要求昼温14~24℃，夜温12~14℃。 结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥 沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表 面粗糙和薯形不整。
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第一节 蔬菜脱毒与快繁
（三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料
1、指示植物鉴定
•在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常
植物组织培养
第9章 常见植物的脱毒与快 速繁殖技术
大 家 好
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
第9章 常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
本章主要内容(4学时)
蔬菜的脱毒与快繁 果树的脱毒与快繁 花卉植物的脱毒与快繁 农作物的脱毒与快繁 药用植物的试管快繁 树木的脱毒与快繁
第9章常见植物的脱毒与快速繁殖 技术
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第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯试管苗
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第一节 蔬菜脱毒与快繁
(3) 驯化
炼苗室温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。 炼苗具体方法：移植前7d左右，将长有3~5片叶、 高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培 养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管 苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。
我国的马铃薯平均单产仅为13.60吨/公顷，
是世界单产最高国这瑞士（48.80吨/公顷）
的1/4。最主要的因素就是种薯质量差，品
种布局不合理。
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第一节 蔬菜脱毒与快繁
1．脱毒种薯生产程序
微茎尖组织培养-----诱导出苗-----联免疫 吸附试验法或指示植物方法鉴定-----脱毒试 管基础苗。
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马铃薯病毒的种类
危害有17种之多，如X病毒、S病毒、 Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤 形块茎病毒等。
马铃薯病毒可使块茎产量减少 50%~80%。
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第一节 蔬菜脱毒与快繁
（一）、马铃薯特性和生物学习性
固体、液体培养基相结合-----扩繁基础 苗----在防虫网室栽植或封闭温室扦插----原原种（或称脱毒小薯）。原原种----原种 1代----原种2代----良种1代-----良种2代。
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2．茎尖培养脱毒
（1）茎尖消毒
一般在室内发芽，芽经热处理（38℃）2 周。然后取1厘米的茎尖，水洗干净，无菌 条件下先用70％的酒精浸组织15-20秒，再 用2％次氯酸钠溶液浸泡4--5min，然后用 无菌水冲洗3次。
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取材和接种
把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露 出圆滑的生长点，留1-2个叶原基，0.2— 0.3毫米，随即接种于MS液体培养基上， 每升加0.1mgNAA 、 0.2mgGA3、0.5BA， 2%蔗糖，p H值5.8。
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(4)掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术； (5)掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术； (6)掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快第繁9章技常见术植物。的脱毒与快速繁殖
技术
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第一节 蔬菜的脱毒与快繁
蕃茄
马铃薯
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一、马铃薯的组织培养
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微型薯
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马铃薯是一种全球性的重要经济作物。 适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输， 既是一种重要的粮食作物也是一种调节市 场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美 洲，当被发现可以食用后，很快传到世界 各地，成为栽培很广的一种作物。
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（二）、马铃薯脱毒技术
通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体 内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、 PVM、PSW等病毒。
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第一节 蔬菜脱毒与快繁
我国马铃薯栽培现状
全国现有马铃薯播种面积300ห้องสมุดไป่ตู้万公顷， 每年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿 公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。
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本章教学目的与要求
(1)掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以及 马铃薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速繁 殖方法；
(2)掌握苹果的脱 毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技 术；掌握草莓的脱 毒与快繁技术；
(3)掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉 的生物学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法；
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培养条件：
温度：21~25℃ 光照度：2000-3000 lx 光照时间：12h/d
2-3周长愈伤，4-5周长绿点，3--6月 长成2-3厘米小芽，越慢越好，出芽 很快的扔掉。
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（2） 继代和生根
培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒） 鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次）采 用固体、液体培养基相结合方法扩繁。
取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培 养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发 育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此 法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种 在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。
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马铃薯继代培养基：
MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙10，3%蔗糖； 20-25℃，3000-4000LX，14-16hr光照； 每3周继代一次，单芽茎段约1厘米； 原则试管苗用2年—3年。