中华补血草抗氧化活性研究

hhh中华补血草抗氧化活性研究曲有乐1,高 欣1,崔宇鹏2(1 浙江海洋学院食品与药学院舟山316000;2 佳木斯大学佳木斯154007)摘要:中华补血草 L imoniu m sine nse (Girard)Kuntze 是一种极具观赏价值的传统植物,同时以其重要的药用价值而受到人们的广泛关注。

其化学成分种类多,含有多种的蛋白质、多糖、氨基酸、维生素、矿物质,还有少量的黄酮类、皂苷、有机酸、生物碱和鞣质等。

研究发现,中华补血草不但具有止血、祛湿、清热等作用,更有良好的抗氧化活性,普遍认为与其含有丰富的多酚、黄酮类物质有关。

关键词:中华补血草;抗氧化活性;化学成分;多酚;黄酮中图分类号:R969 4 文献标识码:B 文章编号:1006-3765(2012)-12-0033-04作者简介:曲有乐,男(1960 7-)。

毕业于佳木斯医学院。

职称:教授。

Study on the antiorideat activity of Limonium sinense (Girard)kuntzeQU You -le 1,GAO Xin 1,CU I Yu -peng 2(1 Zhejiang Ocean U niversity,Zhoushan 316000,Chin a;2 Jiamusi U niver -sity,Jiamu si 154007,China)ABSTR ACT:The L imonium sinense (Girard)Kuntze is a traditional plant and have highly ornamental value w ith has important m edicinal value and be paid much attention It has kinds of chemical constituents,contains a variety of protein,polysaccharide,am ino acids,vitamins,minerals,and a small amount of flavonoids,soap tw o,organic acids,alkaloids and tannins,etc Researchs found that the L imonium sinense (Girard)Kuntze can not only has the effect of hemostasi 、Wet spleen 、clearing heat,but also has antiox idant activity ,w hich releted to its rich poly phe -nols,flavonoidsKE Y WORD S:L imonium sinense (Girard)Kuntze;Antiox idant;Chemical composition;Polyphenols;Flavonoids中华补血草(Limonium sinense (G irard)Kuntze)属白丹花科补血草属植物,又名匙叶草、盐云草、海菠菜、海赤芍等。

中华补血草为多年生泌盐草本植物,喜生于盐渍化的低洼湿地上,广泛分布于我国东北、华北、华东等地区,尤以江苏、福建、浙江省沿海滩涂分布甚广。

据不完全统计,全世界约有补血草180种,我国现存仅4属7种,江苏沿海分布3种(1 中华补血草 Limonium sinense (G irard)Kuntze ;2 二色补血草(L imonium bicolor );3 紫花补血草(L imonium r anchetii )。

由于近年来,我国人口增长速度加快,人们对保护资源意识匮乏,过度利用湿地,导致这些盐生和湿生的植物数量减少,种群退化,有的植物甚至悄然消失。

为了保存体系,保护好盐生植物资源、推进生物多样性保护,加强对盐生植物-中华补血草的研究和保护工作,具有十分重要的意义 1。

据记载,人们最初以中华补血草作为妇女产后补血品服h用,并兼治产后外感、头痛、胃溃疡,后来发现其更具有止血、祛湿、清热等作用。

民间采集后水煎服用,对治疗贫血,特别是急性失血性贫血有显著疗效 2 。

近年来,已有报道分析中华补血草的有效成分及药理作用,包括其止血、祛湿、清热、抗癌,保肝及抗氧化等作用,为中华补血草的合理开发利用提供图1 中华补血草了有力的依据。

1 中华补血草基本成分分析1 1 基本成分含量 1991年,肖振发等2 对中华补血草进行了基本的成分分析,结果表明,中华补血草中含有多种的蛋白质、多糖、氨基酸、维生素、矿物质,还有少量的黄酮类、皂贰、有机酸、生物碱和鞣质等。

其中,氨基酸种类高达18种以上,包括人体所需的必需氨基酸及非必需氨基酸,其中谷氨酸、脯氨酸含量较高,而蛋氨酸、半胱氨酸含量较低。

无机元素中,常量元素K 、N a 、Ca 、M g 含量较大,K 、N a 含量最高。

微量元素Ni 、Zn 、Cr 和Co 含量较高。

但是,其中Pb 的含量超过FA O/WHO 食品标准委员会规定的限量 3。

中华补血草含有丰富的维生素C 、B 1、B 2、B 12和类胡萝卜素 维生素C 含量高达12mg/100g 以上。

实验结果表明,中华补血草含有丰富的维生素C 、B 1、B 2、B 12和类胡萝卜素 维生素B 2、B 12、C 是红血细胞的造血物质,推测中华补血草富含各类维生素与其补血功能有关系。

值得注意的是,中华补血草富含维生素B 12,维生素B 12对恶性贫血、失血性贫血有特殊疗效早已为有关研究和临床所证实。

1 2 中华补血草化学成分分析 1994年,郭洪祝 4 等采用回流提取的方法,对中华补血草地上部分的化学成分进行了分析,共得到4个化合物,根据理化常数测定,波谱分析及与有关图谱的对照,分别鉴定为杨梅树皮素-3-O - -D -葡萄糖苷(I),杨梅树皮素-3-O - -L -鼠李糖苷( ),槲皮素-3-O - -L -鼠李糖苷( )和槲皮素( )。

这4种化合物系首次由该植物中分得。

据文献报道,杨梅树皮素-3-O - -L -鼠李糖苷具有升高血压,兴奋心脏及抗炎利胆的作用 5 ,槲皮素-3-O - -L -鼠李糖苷具有抗病毒、抗炎和利尿的作用 6 ,槲皮素亦具有降低血压,增加冠脉流量、抗自由基抗氧化作用,此外还具有抗癌作用 7 。

上述成分可能是中华补血草祛风、清热、散痕的有效成分。

因其有效成分均有抗氧化活性,推测其具有良好的抗氧化活性。

2 中华补血草生物活性研究Lin LC 等 8 发现从中华补血草根乙醇提取物中分离得到的10种黄酮类化合物均能抑制HSV -1(herpes simplex virus t ype 1)病毒在V eto (绿猴肾细胞)中的复制,其中化合物1((-)-epig allocatechin 3-0 g allate,IC 50=11 4 M )、化合物2(samar angenin B,IC 50=38 6 M )的抑制能力最强,比阳性对照抗疱疹病毒剂无环鸟昔(Acydovir,IC 50=55 4 M )具有更高的抑制活性。

Kuo Y C 等 9 通过进一步的研究阐明了samarang enin B 抑制HSV 1复制的分子机制,samar angenin B 通过抑制HSV -1a 基因、ICP0(infected cell protein 0)和I CP4(infected cell pr otein 4)基因的表达,阻止 转录,从而遏制HSV -1DNA 的合成以及Veto 结构蛋白的表达以阻止HSV -1病毒的复制。

Chanung S S 等 10研究发现中华补血草根水提取物及叶甲醇提取物对CCl 4和D G aIN 诱导的小鼠肝损伤具有保护作用,试验小鼠经过两种提取物处理后,血清中的谷草转氨酶(SG OT )和谷丙转氨酶(SGPT )水平均显著降低,甘油三酸酯水平则显著提高,体外试验研究进一步发现叶甲醇提取物经氯仿萃取分级后的部分对人肝癌细胞(Hep3B)具有潜在的细胞毒性。

汤新慧等 11 研究了中华补血草根水提取物对小鼠急性肝损伤的防护作用及药理机制,发现提取物能有效抑制CCl 4引起的小鼠天冬氨酸转移酶(AST )及丙氨酸转移酶(ALT )活性的上升、减轻肝损伤引起的小鼠肝脏线粒体形态结构的破坏、抑制线粒体膜电位的降低以及线粒体对外加高钙诱发肿胀敏感性的下降,其药理机制可能与其对线粒体的保护作用有关。

目前,有关中华补血草化学成分的研究主要集中在黄酮类化合物,活性主要是抗病毒、抗癌及对小鼠肝损伤的保护作用等,而抗氧化等方面的作用有待更加系统的研究。

3 中华补血草根提取物抗氧化活性的研究2008年,李均 12 等对中华补血草根提取物的抗氧化活性进行了初步研究。

实验利用还原能力、DP PH 法、T EA C 法和脂质体过氧化法评价了中华补血草根提取物的抗氧化活性。

3 1 中华补血草根提取物总酚、黄酮及原花青素质量分数的测定 实验分别采用Folin -ciocalteu 试剂比色法 13 、N aNO 2-Al(N O 3)3-N aOH 比色法14 、香草醛-浓H 2SO 4法 15 测定了其总酚、黄酮和原花青素的质量分数。

结果显示,中华补血草根提取物中总酚(包括简单酚、单宁)质量分数很高,达55 55%,其中简单酚质量分数为26 68%,占48 04%;黄酮和原花青素的质量分数很接近,分别为24 60%、23 86%。

3 2 中华补血草根提取物还原力的测定3 2 1 实验采用Oyaizu(1986) 16 的方法对中华补血草根提取物的还原能力进行评价。

结果表明,中华补血草根提取物的还原能力随样液质量浓度的增大而增强,在检测的质量浓度范围内呈现明显的量效关系(P <0 01)。

当提取物质量浓度为0 20mg mL -1时,其在700nm 处的吸光值为1 472,高于相同质量浓度下的对照品槲皮素的吸光值(1 310)。

3 2 2 DPPH 法是目前使用最为广泛的检测自由基清除能力的方法之一。

结果显示,DPPH 溶液加入样液(0 20mg mL -1)后,在0~4min 内,A517nm 值下降很快,且降幅明显,4~16min 内趋缓,16~20min 内基本稳定,吸光值不变。

由此确定20min 作为最佳反应时间。

中华补血草根提取物对DP PH 自由基的清除率随样液质量浓度的增大而增大,当质量浓度达到0 20mg mL -1时,中华补血草根提取物对DPPH海峡药学 2012年 第24卷第12期自由基的清除率达到93 23%,略低于同质量浓度的对照品VitC对DP PH自由基的清除率(清除率为93 33%)。