高效液相色谱串联质谱
液相色谱-串联质谱法测定动物源性食激素类药物残留
-串联质谱法测定动物源性黄 婷(1.深圳市质量安全检验检测研究院，广东 深圳 518000；2.广东省市场监督管理局食用农产品监管重点糖皮质激素(glucocorticoid，GCS)又名“肾上腺皮质激素”，具有调节人体三大物质(糖、蛋白质、脂肪)代谢的生理作用，还能调节钾、钠和水的代谢，用来维持机体内外环境的平衡，是机体应激反应最主要的调节激素，也是临床上最常用和有效的抗炎、免疫抑制剂[1]。
常见的糖皮质激素类药物主要是地塞米松、倍他米松，若人长期使用可能会出现不良反应，还可能会降低机体免疫力，人类食用后可导致机体代谢紊乱和发育异常，或潜在致癌、致畸风险[2]。
目前，糖皮质激素常被用于治疗家畜的炎症反应、免疫性疾病、牛的酮病等，属于生产常用的药物。
糖皮质激素的非法用途是为了增加家畜的采食量，从而达到增重的目的。
因此，世界各国都制定了对于动物源性食品中各种激素的最大残留量，欧盟第96/22/EC 指令、美国食品与药品管理局、日本政府都禁止在食品源性动物中使用激素类药物[3]。
我国GB31650-2019 《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》规定，猪肉中地塞米松的最大残留量为1.0 μg/kg，倍他米松的最大残留量为0.75 μg/kg [4]。
目前，测定动物源性食品中糖皮质激素类药物残留的方法主要有酶联免疫法、高效液相色谱法[5]和液相色谱-串联质谱法。
其中，酶联免疫法只能用于筛查，液相色谱法的检测项目比较单一，灵敏度低，耗时长，选择性和特异性差，已达不到用于痕量兽药残留分析的要求。
液相色谱-串联质谱法是一种分析动物源性食品中痕量兽药残留的重要方法，具有灵敏度高、选择性和特异性好的特点，对低浓度样本有很好的检测率，还可用于测定不同基质中的糖皮质激素类药物。
针对动物源性食品，常用标准的前处理过程耗时长[6]，经济成本高，过程繁琐，不能满足目前对动物源性食品的高效、快速检测的需求。
为加强对动物源性食品兽药的监控，有效监督我国兽药滥用质量现状，我们对糖皮质激素类药物中的地塞米松、倍他米松进行检测，前处理过程操作简单，耗时短，中图分类号：S859.84 文献标志码：A 文章编号：1001-0769(2022)06-0107-04摘 要：本文建立了一种检测动物源性食品中糖皮质激素的液相色谱-串联质谱法，对所建立的方法进行了方法学的考察与验证，采用高效液相色谱-串联质谱进行分析。
液相色谱-质谱联用(LC-MS)
液相色谱-质谱联用(LC-MS)LCMS分别的含义是：L液相C色谱M质谱S分离（友情赠送：G是气相^_^）LC-MS/MS就是液相色谱质谱/质谱联用MS/MS是质谱-质谱联用（通常我们称为串联质谱，二维质谱法，序贯质谱等）LC-MS/MS与LC-MS比较，M（质谱）分离的步骤是串联的，不是单一的。
色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。
色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。
此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。
然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。
色谱法也由此而得名。
现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。
我们仍然叫它色谱分析。
一、色谱分离基本原理：由以上方法可知，在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。
色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。
使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。
当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。
与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。
二、色谱分类方法：色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。
从两相的状态分类：相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。
高效液相色谱-质谱联用期间核查操作规程
高效液相色谱-质谱联用仪期间核查操作规程1 目的为了确保高效液相色谱-质谱联用仪检测性能在仪器两次检定期间内处于正常状态，对仪器设备进行期间核查，以确保检测结果的准确性和有效性。
2 范围适用于高效液相色谱-质谱联用仪的期间核查。
3核查项目检测器：分辨力、信噪比、峰面积重复性、保留时间重复性。
4 核查依据JJF 1317-2011 液相色谱-质谱联用仪校准规范、液相色谱-质谱联用仪操作指导书。
5 核查方法5.1 测定条件：温度：15～30℃，相对湿度20～80%。
仪器室不得有明显的机械振动,无电磁干扰。
标准物质：利血平溶液标准物质，相对扩展不确定度由于5%（k=2）移液器或移液管：量程范围100uL或200uL，B级或以上；容量瓶：10mL或25mL，B级或以上。
5.2 分辨力将仪器运行稳定后，根据仪器说明书的推荐条件设置参数，将扫描范围设为606~612,直接注入，注入5ng利血平，观察质谱图，记录m/z为609质谱峰，并计算其50%峰高处的缝宽，得到W1/2，作为分辨力的结果。
5.3 信噪比根据附录B设定液相色谱条件并优化质谱条件，将检测离子的m/z设为表2中特征离子的m/z,经色谱柱注入相应量的利血平。
观察色谱图，记录其色谱峰峰高作为Hs。
同时记录信号峰后1min~3min时间内的基线输出信号的最大值与最小值之差，作为Hn。
根据公式计算信噪比S/N，连续测量6次，以6次测量S/N的平均值作为信噪比的结果。
S/N= Hs /Hn式中：Hs——为提取离子m/z的色谱峰峰高H n ——为基线噪声值信噪比测量条件表5.3 峰面积重复性与保留时间重复性：根据附录B 设定液相色谱条件并优化质谱条件，将检测离子的m/z 设为表2中特征离子的m/z,经色谱柱注入相应量的利血平。
连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按下述公式计算相对标准偏差RSD.RSD=1001)1/()(12⨯⨯--∑=x n x x ni i %6 评定标准6.1 三重四级杆串联质谱： 6.1.1 分辨力ESI+≤1u ；6.1.2 信噪比ESI+≥30:1；ESI-≥10:1；APCI+≥30:1 6.1.3 峰面积重现性≤10% 6.1.4 保留时间重复性≤1.5%； 7 核查周期在仪器设备两次检定之间，每六个月核查一次。
超高效液相色谱串联质谱法快速测定
超高效液相色谱串联质谱法快速测定贝类中3种腹泻性贝类毒素许均图，陈德斌，陈 燕，唐春玲（广州华鑫检测技术有限公司，广东广州 510663）摘 要：建立了应用EMR-Lipid小柱净化结合超高效液相色谱串联质谱法快速测定贝类样品中3种腹泻性贝类毒素的分析方法。
样品用80%乙腈溶液提取，以安捷伦Captival EMR-Lipid小柱净化，经超高效液相色谱串联质谱分析测定，采用大气压电喷雾负离子电离，选择反应监测模式，基质匹配外标法定量。
实验结果表明，3种腹泻性贝类毒素的检出限为0.5～1.0 μg·kg-1，回收率为82.6%～107.1%，相对标准偏差为3.5%～9.9%。
该方法操作简单、灵敏度高、回收率和精密度较好，适合应用于日常贝类样品中腹泻性贝类毒素的监测。
关键词：腹泻性贝类毒素；贝类；超高效液相色谱串联质谱Rapid Determination of Three Diarrhoeal Shellfish Poisons in Shellfish by Ultra-Performance Liquid ChromatographyTandem Mass SpectrometryXU Juntu, CHEN Debin, CHEN Yan, TANG Chunling(Guangzhou Huaxin Testing Technology Co., Ltd., Guangzhou 510663, China) Abstract: A method for rapid determination of three diarrhoeal shellfish poisons in shellfish samples by EMR-Lipid column purification combined with ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry was established. The sample was extracted with 80% acetonitrile solution, purified with Agilent Captiva EMR-Lipid column, analyzed by ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry, ionized by atmospheric pressure electrospray negative ions, selected reaction monitoring mode, and quantified by matrix matching external standard method. The results showed that the detection limits of three diarrhoeal shellfish toxins were 0.5～1.0 μg·kg-1, the recovery was 82.6%～107.1%, and the relative standard deviation was 3.5%～9.9%. The method is suitable for monitoring diarrhoeal shellfish poisons in shellfish samples because of the advantages of simple operation, goodsensitivity and recoveries.Keywords: diarrhoeal shellfish poisons; shellfish; ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry腹泻性贝类毒素（Diarrhetic Shellfish Poisoning，DSP）是由原甲藻属和有毒赤潮藻类鳍藻属的藻类产生的脂溶性多环醚类生物活性毒素[1]。
高效液相色谱-串联质谱法测定保健酒中西地那非含量
高效液相色谱 -串联质谱法测定保健酒中西地那非含量摘要：建立高效液相质谱法测定酒中违禁药品西地那非含量方法。
样品采用乙腈超声提取，经安捷伦ZORBAX Eclipse Plus C18分离，梯度洗脱，在LC-MS多反应检测MRM模式下进行定量分析。
结果表明西地那非在0~500ng/ml范围内呈良好的线性关系，回收率97.2-105.4%，RSD(n=5) :1.7%。
关键词：高效液相质谱法保健酒西地那非西地那非商品名为“万艾可”，用于治疗男性勃起功能障碍，属于处方药。
长期服用对人体具有一定危害，对患有心血管系统疾病、高血压、糖尿病患者的身体危害极大，严重者可致心肌梗死。
市场上保健酒品种多，2014年以来，湖北、广西多地就有酒厂因在保健酒中添加伟哥成分药物，称喝某品牌的一瓶125毫升的保健酒相当于吃两粒伟哥。
检验保健酒的检验方法和质量控制标准尚不完善，导致一些保健酒企业铤而走险，钻不规范空子。
”西地那非为处方药，在食品或保健食品等特殊食品中添加属于违法行为，必须予以打击。
因此，建立一种准确、快速的测定方法，为市场安全监管工作提供有效的技术支撑。
1实验部分1.1试药与仪器1.1.1试药：甲醇/乙腈（HPLC级，默克公司）；乙酸铵（优级，国药集团化学试剂）；水（Milli-Q Advantage A10超纯水机制备超纯水）；西地那非标准物质（ Panphy chemicals corporation）1.1.2仪器：液质联用仪 Agilent Technologies 6430 Triple Quad LC/MS1.2仪器条件色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18 3.0×100m m 1.8um波长230 nm；流速：0.2mL/min；柱温：30℃；进样量：3μL；流动相：甲醇+乙酸铵(0.1%乙酸)=35+65扫描模式：多反应监测（MRM）ESI+定量离子：475.2 定性离子：58.1 100.1 Frag(V)：1901.3实验方法1.3.1标准储备液的制备：标准物质来源: Panphy chemicals corporation精密称取10mg标准品置20ml容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，即0.5mg/ml。
QuEChERS-超高效液相串联质谱法同时测定蜂蜜中硝基咪唑类药物残留
QuEChERS-超高效液相串联质谱法同时测定蜂蜜中硝基咪唑类药物残留作者：刘兰霞解迎双寇宗红王波来源：《中国食品》2024年第06期为了治疗和预防孢子虫病在蜜蜂群体间的传播，降低蜜蜂的死亡率，硝基咪唑类药物曾被广泛应用于蜜蜂养殖过程中。
但硝基咪唑类药物的违用、滥用和误用现象导致蜜蜂体内产生药物残留，并以蜂蜜为媒介进入人体，对人体造成致癌、致畸、致突变作用和遗传毒性损害，因此各国已相继禁止硝基咪唑类药物在动物源性食品中的使用。
目前，检测硝基咪唑类药物残留的方法主要有气相色谱质谱法、液相色谱法等。
本研究建立了QuEChERS-超高效液相串联质谱法，以检测蜂蜜中多种硝基咪唑类药物的残留，对维护食品安全、保障消费者身体健康具有重要意义。
一、仪器与方法1.仪器与设备。
高效液相色谱仪，美国沃特世公司；多管涡旋振荡器，深圳逗点生物技术有限公司；低温冷冻高速离心机，德国Sigma公司。
2.试剂与材料。
甲醇、乙腈、甲酸、氨水（色谱纯），德国默克公司；丙基乙二胺（PSA）粉末、十八烷基键合硅胶（C18）粉末、石墨化炭黑（GCB）粉末，美国安捷伦公司；无水硫酸镁、无水氯化钠，国药集团化学试剂有限公司；超纯水，本实验室纯水仪制备；32种硝基咪唑类化合物（纯度＞99%），德国Dr.Ehrenstorfer公司；蜂蜜，购自当地农贸市场或超市，于-20℃冷冻保存，待用。
3.标准溶液配置。
（1）标准储备液（浓度100mg/L）。
精密称取32种硝基咪唑类化合物0.01g，用甲醇溶解后，定容至100mL容量瓶内，配制成质量浓度为100mg/L的单标准储备溶液，置于-20℃冰箱中保存6个月。
（2）混合标准工作液（浓度1mg/L）。
精密量取浓度为100mg/L的上述标准溶液100μL 于100mL容量瓶中，用甲醇-水（8∶2）定容，于4℃保存。
4.样品前处理。
（1）提取。
准确称取5.00g（精确至0.01g）蜂蜜样品于50mL具塞离心管中，加入5mL水，涡旋5min，使其充分混匀。
液质联用法
液质联用法液质联用法液质联用法（LC-MS）是一种分析技术，结合了高效液相色谱（HPLC）和质谱（MS）技术。
这种技术可用于分离和鉴定化合物，尤其是生物样品中的化合物。
液质联用法被广泛应用于药物代谢、蛋白质组学、代谢组学等领域。
一、HPLC1. HPLC基本原理高效液相色谱是一种基于分子间相互作用的分离技术。
它使用固定相和流动相来将混合物中的化合物分离开。
在HPLC中，混合物通过固定在柱子内部的填料。
填料通常是小颗粒状的，具有大量的表面积，这些表面积上吸附了流动相中的溶剂和溶质。
2. HPLC设备HPLC设备主要由以下几个部分组成：（1）泵：将流动相压入柱子中。
（2）进样器：将样品注入柱子。
（3）柱子：填料所在的管道。
（4）检测器：检测出来自柱子的化合物。
3. HPLC操作步骤（1）制备样品：将待测物质溶解在适当的溶剂中。
（2）选择填料：根据需要选择合适的填料。
（3）调整流动相：根据填料和待测物质的特性，确定最佳的流动相组成。
（4）注入样品：将样品注入进样器中。
（5）运行柱子：将流动相压入柱子中，让样品通过柱子并分离出化合物。
（6）检测化合物：使用检测器检测出从柱子中流出来的化合物。
二、MS1. MS基本原理质谱是一种利用分子离子在磁场和电场作用下进行分离、检测和鉴定的技术。
质谱仪通常由以下三部分组成：（1）离子源：将待测化合物转化为气态离子。
（2）质量分析器：将不同质量的离子分开，并记录它们的信号强度。
（3）检测器：将信号转换为电信号，并输出到计算机上进行处理和分析。
2. MS设备MS设备主要由以下几个部分组成：（1）离子源：通常使用电喷雾、MALDI等技术将待检化合物转化为气态离子。
（2）质量分析器：通常使用四极杆、飞行时间等质量分析器。
（3）检测器：通常使用离子倍增管或电荷耦合器件等检测器。
3. MS操作步骤（1）制备样品：将待测物质溶解在适当的溶剂中。
（2）选择离子源：根据待测物质的特性，选择合适的离子源。
超高效液相色谱-质谱联用法测定虫草素和腺苷
Determination of Cordycepin and Adenosine by Ultra High PerformanceLiquid Chromatography-mass SpectrometryWANG Guan-yu（Fushun Food Inspection and Testing Center ，Fushun 113000，China ）Abstract ：To expand detection range ，in order to meet the needs of the less cordycepin and adenosine testing ，the UPLC-MS /MS method was established for the determination of cordycepin and,adenosine in Cordyceps militaris products.The determination limit and recovery rate of cordycepin,adenosine and cordycepin in cordyceps militaris were verified simultaneously.The results showed that their linear ranges of 0.01μg ·L -1~5μg ·L -1were above 0.9995，The limit of detection lower was 0.05µg ·L -1.It has the characteristics and high sensitivity.Key words ：Cordyceps ；UPLC-MS/MS ；cordycepin ；adenosine超高效液相色谱-质谱联用法测定虫草素和腺苷王冠宇（抚顺市食品检验检测中心，辽宁抚顺113008）【摘要】为扩大检测范围，满足痕量虫草素和腺苷含量的检测，建立超高效液相色谱-质谱联用法测定蛹虫草制品中虫草素和腺苷的含量，同时对其进行测定低限及回收率的验证，结果表明其线性范围0.01µg·L -1~5µg·L -1的相关系数均能达到0.9995以上，虫草素和腺苷的测定低限均为0.05µg·L -1，并具有特异性显著，灵敏度较高等特点。
液相色谱-串联质谱法同时检测水产品中41种兽药残留
40 |陇科学股份有限公司)；甲酸、乙酸铵(HPLC 级，美国Fluka 公司)；无水硫酸钠(分析纯，西陇科学股份有限公司)；十八烷基硅烷(C18)(上海安谱实验科技股份有限公司)；Na2EDTA ·2H2O(分析纯，广东光华科技股份有限公司)；磷酸氢二钠、一水合柠檬酸(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；实验室用水为一级水(18.2 MΩ·cm)。
2 实验方法2.1 溶液配制标准储备液：对于固体标，分别称取相当于标准品10 mg (精确至0.01mg)置于10.0mL 容量瓶中，用乙腈溶解后定容至刻度，配制为浓度为1000mg/L 的标准储备液，-18℃避光保存。
标准工作溶液：准确吸取适量标准储备液，用乙腈逐级稀释配制成系列标准工作溶液，现用现配。
基质空白标准工作溶液：准确吸取适量标准储备液加入6份空白样品，同2.2.2处理配制成系列基质空白标准溶液，现用现配。
Na2EDTA-Mcilvaine 缓冲溶液(0.1 mol/L):准确称取37.2 g Na ２EDTA ·2H2O 、10.9g 磷酸氢二钠和12.9g 柠檬酸于烧杯内，加入一级水约900mL ，搅拌使其溶解，使用1mol/L 的氢氧化钠溶液调节pH 至4.0，定容至1000mL 容量瓶，摇匀即可。
酸化乙腈(含1%甲酸的乙腈溶液，V/V)：准确吸取1mL 甲酸于100mL 容量瓶中，用乙腈定容，混合均匀。
2.2 样品前处理称取5.0g(精确至0.1 g)样品于50mL 具塞塑料离心管中，加入100μL 50μg/L 内标溶液(MG-D5和LMG-D6)，加入2mL0 引言近年来，水产品的消费呈逐年递增趋势[1]，三苯甲烷类染料、氯霉素类、磺胺类、氟喹诺酮类和四环素类等是目前水产品养殖环节常用的病虫害防治药物。
按照我国相关食品安全标准，三苯甲烷类染料、氯霉素类由于毒性较强目前已经禁止在水产品养殖等环节使用。
高效液相色谱_串联质谱测定水产品中残留的喹乙醇代谢物
高效液相色谱 串联质谱测定水产品中残留的喹乙醇代谢物赵东豪,黎智广,杨金兰,黄 珂,陈培基,林 钦*(中国水产科学研究院南海水产研究所,广州510300)摘 要:建立了高效液相色谱 质谱(LC M S/M S)检测水产品中喹乙醇代谢物3 甲基 喹恶啉 2 羧酸(MQCA)的残留分析方法。
样品先用Pr o tease蛋白酶酶解,然后用乙酸乙酯萃取目标物,氮气吹干后用流动相溶解残渣,以甲醇、乙腈和0 1%甲酸溶液作为流动相,液相色谱串联电喷雾质谱在正离子模式下测定。
MQCA在1~100 g/kg范围内线性关系良好(r>0 999)。
在2、4、8 g/kg3个添加水平上,回收率在82 5%~87 5%,相对标准偏差为4 5%~5 1%(n=6),定量限为1 g/kg。
方法已用于水产品中喹乙醇代谢物的残留分析。
关键词:高效液相色谱 串联质谱;喹乙醇代谢物;3 甲基 喹恶啉 2 羧酸;残留;水产品中图分类号:O657 63 文献标识码:A 文章编号:1000 0720(2010)09 019 04喹乙醇(o laqu i n dox)又名奥喹多司,是一种合成的喹恶啉类药物,在动物生产上常作为抗菌促生长剂使用,能提高饲料转化率[1]。
其在动物体内吸收迅速,生物利用度高,原药排除速度快,但代谢产物3 甲基 喹恶啉 2 羧酸(MQCA)在组织内残留时间比较长[2],被人食用后具有潜在的危害性。
农业部规定了喹乙醇在猪肉和肝脏的最高残留限量[3],标志残留物即为MQC A,但其它畜禽类及水产品暂时没有明确的规定。
研究MQCA 的检测方法,可以有效地监控喹乙醇在动物生产中的应用,对保障食品安全具有重要意义。
当前检测喹乙醇的方法主要有酶联免疫法[4]、高效液相色谱法[5-9]、液相色谱串联质谱法等[10,11],但直接检测喹乙醇标志残留物MQCA 的方法比较少,难以对喹乙醇在动物生产方面的使用做到比较全面的监控。
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高效液相色谱串联质谱
液相色谱串联质谱(LC-MS)是生物分析学中一种常用的分析技术。
在最近
几十年中，液相色谱串联质谱技术已经发展成为分析各种微量和痕量物质的主要手段之一，在食品检测、农产品果实分析、药物分析等领域都有重要的应用价值。
液相色谱串联质谱技术在分析微量物质方面有着出色的性能，它对环境中各类
芳香烃具有极高的敏感度，可以检测低于几ppb水平的物质，它还能够实现高通量的检测，检测速度快，检测精度高。
液相色谱串联质谱是将液相色谱与质谱联用的技术，它的特点是高灵敏度、高
准确度和高分辨率，可以实现良好的平衡，使得液相色谱串联质谱在分析不易量化的少量物质方面表现优良。
其尤其适合检测混合物，可获得质谱分析中清晰突出的峰型，便于检测各成分的特征。
液相色谱串联质谱是一种高效、简便、精确的技术，通过其高灵敏度和准确性，随着许多研究项目的需求，这种技术的应用也会在不断推广，比如生物分析和医疗领域的各种检测任务，都可以采用液相色谱串联质谱来实现精准测试，也能有效解决检测部分微量物质过程中出现的困难。