谷胱甘肽S_转移酶综述
医学生化各种酶汇总
肝的生物转化Ⅰ
胺、O2、H2O
醛、NH3、H2O2
脱氢酶系：肝细胞醇脱氢酶
肝的生物转化Ⅰ
乙醇
乙醛
脱氢酶系：醛脱氢酶
肝的生物转化Ⅰ
乙醛
乙酸
硝基还原酶
肝的生物转化Ⅰ
硝基化合物
氨基化合物
偶氮还原酶
肝的生物转化Ⅰ
偶氮化合物
二氢偶氮化合物（裂解）
水解酶系
肝的生物转化Ⅰ
酯类\酰胺类\糖苷类化合物、H2O
磷酸二羟丙酮、H+
α-磷酸甘油
NADH、H+
α-磷酸甘油脱氢酶*
α-磷酸甘油穿梭
α-磷酸甘油、CoQ
磷酸二羟丙酮、QH2
FAD、Fe-S
过氧化氢酶
线粒体外氧化体系
H2O2
H2O、O2
过氧化物酶
线粒体外氧化体系
H2O2、R
H2O、RO
超氧化物歧化酶（SOD）
线粒体外氧化体系
H+O2-
H2O2、O2
胰脂酶
原卟啉Ⅸ
血红素
二磷酸甘油酸变位酶
2,3-BPG支路
1,3-二磷酸甘油酸
2,3-BPG(2,3-二磷酸甘油酸)
标志酶
二磷酸甘油酸磷酸酶
2,3-BPG支路
2,3-BPG(2,3-二磷酸甘油酸)、H20
3-磷酸甘油酸、Pi
复合体Ⅰ：NADH-Q还原酶
呼吸链
NADH、H+、CoQ
QH2、NAD+
FMN、Fe-S
软脂酸、CO2、H2O、ADP、Pi
NADPH、H+
（人）脂肪酸去饱和酶
不饱和脂酸合成
饱和脂肪酸
谷胱甘肽-琼脂糖凝胶 4B（GST 标签纯化树脂）说明书
谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B （GST 标签纯化树脂）说明书货号：P2020规格：5mL/10mL/25mL/50mL保存：4℃保存，有效期至少一年。
产品简介：pGEX 载体表达的外源蛋白与谷胱甘肽S-转移酶融合，因此可以通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析进行纯化。
GSTs 是一类以谷胱甘肽（γ-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸）作为底物，通过形成硫醇尿酸失活毒性小分子的酶。
由于GST 对底物的亲和力是亚毫摩尔级的，因此谷胱甘肽固化于琼脂糖形成的亲和层析树脂对GST 及其融合蛋白的纯化效率很高。
可以用含游离谷胱甘肽的缓冲液洗脱结合GST 融合蛋白。
树脂用3mol/L NaCl 的缓冲液再生。
谷胱甘肽琼脂糖对GST 融合蛋白的结合能力很强（每毫升柱床体积的树脂能结合8毫克融合蛋白）。
特性:粒度：45-165µm流速：75cm/h 工作PH ：4-10耐压：0.3Mpa载量：＞5mg 谷胱甘肽S-转移酶使用说明：谷胱甘肽树脂的处理:1.轻轻颠倒盛有谷胱甘肽-琼脂糖树脂的容器，将树脂混成匀浆。
2.取部分匀浆放入15mL 聚丙烯管（每100mL 细菌培养物大约需要2mL 匀浆）。
3.4℃500g 离心5分钟，小心去掉上清。
4.在树脂中加入10倍柱床体积预冷的PBS ，颠倒数次混匀，4℃500g 离心5分钟，小心去掉上清。
5.每毫升树脂加入1毫升冷的PBS ，制成50%匀浆，颠倒数次，混合均匀，悬液冰上放置待用。
制备细胞抽提物：6.每100毫升培养物的细胞沉淀重悬于4mL PBS 缓冲液中。
7.加入溶菌酶至终浓度为1mg/mL,冰上放置30分钟。
8.用针筒将10mL 浓度为0.2%的TritonX-100强行注入黏稠的细胞裂解物中，剧烈振动数次混匀。
加入DNase 和RNase 至终浓度5ug/mL,4℃振动温育10分钟，4℃3000g 离心30分钟，去除不溶性细胞碎片，上清转移到一只新管中，加入DTT 至终浓度1mmol/L 。
谷胱甘肽化修饰组学
谷胱甘肽化修饰组学全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：谷胱甘肽化修饰组学（GSH-omics），是一种研究谷胱甘肽（glutathione，GSH）在生物体内广泛调控蛋白分子活性和功能的修饰组学方法。
谷胱甘肽是一种重要的抗氧化剂，在抗氧化应激、解毒代谢、细胞凋亡等生命活动过程中发挥着关键作用。
通过研究谷胱甘肽的修饰作用及其调控机理，可以深入了解细胞内化学环境的动态变化，以及相关蛋白质分子在生命活动中的功能及其调控路径。
谷胱甘肽化修饰组学的研究内容包括谷胱甘肽对蛋白质的直接修饰和间接调控等方面。
谷胱甘肽可以通过氧化还原反应直接修饰蛋白分子，如巯基（-SH）的氧化形成二硫键（-S-S-）等。
这种修饰能够改变蛋白质的结构和功能，从而影响细胞内的代谢调控和信号传导等生理过程。
谷胱甘肽还可以通过调控一系列与蛋白质修饰相关的酶类和蛋白质，间接影响蛋白质的修饰状态和功能。
这种间接调控方式主要包括对谷胱甘肽代谢酶（如谷胱甘肽过氧化物酶、硫氧还蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶等）的调控，进而影响谷胱甘肽的平衡及其代谢产物的积累，最终影响细胞内的氧化还原平衡和代谢调控。
谷胱甘氨酸、半胱氨酸和甘氨酸分别形成谷胱甘肽，也称谷胱甘肽，是机体内一种重要的抗氧化剂，对抵御自由基损害和细胞氧化损伤具有重要作用。
在人体内，谷胱甘肽除用作抗氧化外，它还可通过收缩二硒氨酸作用于氧化蛋白或矿物质，还能用作基因和蛋白质的合成，与免疫系统密切相关，它是免疫系统的基础。
谷胱甘肽还能将中性和活性的有机物质连键，使可溶性的中性有机物质向水中极化了，增强了人体中对有毒物质的输送能力。
研究表明，谷胱甘肽和谷胱甘肽体系与体内细胞的生长和衰老密切相关。
有人认为它可以解释生长和衰老这两个生理现象之一。
在提高谷胱甘肽含量和活性方面，是预防衰老的一个重要的环节。
谷胱甘肽的作用范围很广泛，近年来，研究发现谷胱甘肽还有一种生物调控机制。
研究发现谷胱甘肽在细胞生产、发育过程中的重要角色，而且对生物的高级功能有很大贡献。
nmn能修复胰岛细胞吗,细胞修复NMN,综述详解
nmn能修复胰岛细胞吗，细胞修复NMN，综述详解nmn能修复胰岛细胞吗，细胞修复NMN，综述详解！近年来，NMN在生物医学领域发展如火如荼，而尿糖病作为NMN重要研究应用方向，受到国内外学术界广泛关注。
科研工作者们以NMN作为针对尿糖病的药剂靶点，开展了大量动物研究与人体临床试验，取得一些突破性研究进展。
nmn能修复胰岛细胞吗，多项动物实验验证：日本W+NMN25000增强胰岛素敏感性，改善胰岛功能障碍1、外源性补充日本W+NMN，改善T2D（2型糖尿病）小鼠NAD+生物合成和葡萄糖代谢缺失，增强肝脏胰岛素敏感性，改善年龄诱导的T2D小鼠的葡萄糖和脂质代谢缺陷。
Exogenous W+NMN supplementation improved NAD+ biosynthesis and glucose metabolism defects in T2D (Type 2 diabetes) mice, enhanced liver insulin sensitivity, and improved glucose and lipid metabolism defects in age-induced T2D mice.2、研究人员给果糖喂养的小鼠服用NMN（日本W+NMN），发现外源性补充NMN可以防止促炎细胞因子介导的小鼠胰腺功能受损，纠正炎症引起的胰岛功能障碍。
The researchers administered W+NMN to fructose-fed mice and found that exogenous NMN supplementation prevented pro-inflammatory cytokine mediated impairment of pancreatic function in mice and corrected inflammatory islet dysfunction.上述动物实验表明，通过补充NMN（日本W+NMN）可提高NAD+水平，改进葡萄糖耐受、胰岛素敏感性和胰岛β细胞功能，长期补充NMN（日本W+NMN）则可缓解小鼠与年龄相关的胰岛素抵抗。
第二篇药物代谢
C2H5O
C2H5O P O
S
NO2
C2H5O
C2H5O P O
O
NO2
S-氧化反应
S
S
N
SCH3
N
CH3
硫
利
达
嗪
O
N
SCH3
N
CH3
醇和醛的氧化
[O
]
[O
]
伯
醇
醛
羧
酸
醇
脱
氢
酶
含
醇
羟
基
羰
基
化
合
物
仲
醇
酮
二、还原反应
还原酶系组成：
细胞色素P450酶系（CYP450）、醛-酮还
原酶、谷胱甘肽还原酶、醌还原酶
Ⅱ相代谢
药物或代谢产物在酶的作用下、极性基团与内源
性的小分子结合
–葡萄糖醛酸、硫酸盐、某些氨基酸，等
–以酯、酰胺或苷的方式
结合物大都有极好的水溶性
可通过肾脏经尿排出体外
一、葡萄糖醛酸结合
具可离解的羧基（pKa 3.2）和多个羟基
–通常成半缩醛
–无生物活性，易溶于水
能与含羟基、羧基、氨基、巯基的小分子结合
如同时使用会因酶的诱导或抑制产生相互影响
常见的肝内P450P450家族及其诱导剂和抑制剂
二、药物代谢在新药开发中的应用
1、利用药物的活性代谢物得到新药
2、利用代谢活化改变药物的药代动力学性质
3、利用药物代谢避免药物的积蓄副作用
4、避免代谢影响药物作用
死。胎儿和新生儿缺乏结合代谢酶系，对环氧化物的解毒无能
为力。故孕期和哺乳期妇女用药，要避免使用能产生环氧化物
cytivagst亲和层析柱中文说明书
cytivagst亲和层析柱中文说明书CyTiva GST亲和层析柱是一种常用的色谱柱，用于蛋白质的纯化和分离。
亲和层析是一种基于蛋白质与特定配体之间的非共价相互作用而进行的纯化方法。
本文将详细介绍CyTiva GST亲和层析柱的原理、优点、使用方法和注意事项。
一、原理CyTiva GST亲和层析柱采用谷氨酸-S-转移酶(Glutathione-S-Transferase，GST)作为亲和配体。
GST是从谷胱甘肽(glutathione)中分离得到的一种蛋白质。
该配体与GST融合的蛋白质有很高的亲和力，可被其特异性地捕获。
在层析过程中，样品与柱填料表面的GST结合形成复合物。
通过洗脱缓冲液中pH、盐浓度或添加特定配体等的调节，使复合物分离并得到目标蛋白质。
二、优点1.高选择性：CyTiva GST亲和层析柱具有很高的选择性，可以高效地分离和纯化GST融合的目标蛋白质。
2.高纯度：层析过程中，非特异性结合蛋白质可被洗脱掉，从而得到高纯度的目标蛋白质。
三、使用方法1.准备工作：柱前洗脱，根据柱填料要求进行预处理。
2.样品处理：目标蛋白质表达并纯化后，与GST融合的载体进行融合。
此后，将样品溶液等体积注入已平衡的柱中。
3.洗脱条件的选择：根据样品的属性，选择适宜的洗脱缓冲液，进行洗脱。
可以按照pH、盐浓度、添加特定配体等来调节洗脱条件。
4.目标蛋白质洗脱：将目标蛋白质从柱中洗脱出来，收集洗脱液。
四、注意事项1.样品的处理：目标蛋白质应表达和纯化得到GST融合蛋白质。
2.柱前处理：根据柱填料的要求，进行柱前洗脱处理。
3.洗脱缓冲液的调节：根据样品的特性和所需的洗脱条件进行调节。
常用的洗脱条件包括调节pH、盐浓度、添加特定配体等。
4.洗脱收集：在洗脱过程中，及时收集洗脱液。
总结：CyTiva GST亲和层析柱是一种常用的蛋白质纯化和分离工具，基于GST与目标蛋白质的非共价相互作用。
它具有高选择性和高纯度的优点，可广泛应用于生物医药研究领域。
利用谷胱甘肽检测植物对胁迫的响应机制研究
利用谷胱甘肽检测植物对胁迫的响应机制研究谷胱甘肽（glutathione，简称GSH）是植物中非常重要的一种天然抗氧化物质，可以维持细胞内环境的稳定和正常代谢。
在植物生长发育过程中，GSH不仅可以参与抗氧化防御，还能够调节植物对不利环境的适应性和抗性。
因此，研究植物对胁迫的响应机制，特别是探究GSH在其中的作用，对于揭示植物的适应性和防御机制具有重要意义。
1. GSH代谢途径GSH是由γ-谷氨酰基丙氨酸、半胱氨酸和甘氨酸三种氨基酸通过GSH合成酶催化而成。
在植物体内，GSH与谷胱甘肽-S-转移酶（GST）共同参与细胞内环境的维持和代谢调节。
GST是一类含有GSH结合位点的酶，可以通过酰化和S-转移反应将GSH与一些生物活性分子连接起来，形成GSH-S-转移产物，从而将其转化成较为稳定的代谢产物。
同时，GST还能够转移抗氧化的活性物质到GSH分子上，使GSH变成抗氧化物质，从而减轻细胞内环境的氧化压力。
2. GSH在植物抗氧化调节中的作用植物生长发育过程中，GSH与谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和谷胱甘肽还原酶（GR）共同参与抗氧化修复。
GPx可通过传递电子给H2O2形成活性氧（ROS）的稳定物质，避免ROS进一步损伤细胞内结构和代谢，起到保护作用。
同时，GR则负责GSH还原为glutathione disulfide（GSSG），从而再生能量的GSH，为GPx提供备用的GSH，维持抗氧化修复的持续性。
另外，在环境中存在过氧化物、重金属、盐、温度等胁迫因子时，GSH还可以参与ROS代谢过程中的信号转导，调节植物对不利环境的适应性和抗性。
3. 谷胱甘肽检测技术在胁迫响应研究中的应用近年来，随着GSH测量技术的不断发展，利用高效液相色谱、气相色谱和高分辨质谱等分析技术已经成为植物生理学、分子生物学和细胞生物学等研究领域的重要手段。
其中，利用荧光素-5-硫酸钠（o-phtahlaldehyde）、紫外吸收、液质联用等方法可以定量分析GSH和GSSG的含量，GSH/GSSG比值则被视为反映细胞内氧化还原状态的指标。
污染物在生物体内的代谢和毒性
污染物在生物体内的代谢和毒性随着工业化的不断发展和城市化的加速推进，环境污染成为人们日益关注的话题。
尤其是化学污染物，因其在环境中长期存在、难以降解等特点，对人类健康和生态系统带来严重影响。
而当这些化学污染物进入到生物体内时，其代谢和毒性更是备受关注。
一、化学污染物的代谢化学污染物可以进入生物体内，通过体内代谢来解除其毒性。
生物体内的代谢过程主要包括肝脏代谢、肠道代谢和细胞内代谢。
肝脏是化学污染物代谢的主要场所。
化学污染物一般经过肝脏代谢成为水溶性代谢物质，经过胆汁排泄后通过肠道进入外界。
在此过程中，主要参与的代谢酶包括细胞色素P450酶、谷胱甘肽S-转移酶、谷甘肽过氧化物酶等。
其中，细胞色素P450酶是肝脏中最为重要的代谢酶，能够将脂溶性的化学污染物氧化成为其水溶性代谢产物，如将苯转化为苯酚、苯乙烯转化为苯甲醇等。
而谷胱甘肽S-转移酶则可以将氧化代谢产物与谷胱甘肽结合形成相应的代谢产物排出体外。
而谷甘肽过氧化物酶则具有较强的氧化作用，能够将某些化学污染物代谢成为更为易挥发的代谢产物。
除了肝脏代谢以外，肠道代谢也是化学污染物代谢的重要方式。
一些化学污染物不能被肝脏代谢，而是通过肠道菌群的代谢作用来降解其毒性。
如四氯化碳、丙烯等化合物可以被肠道内的微生物代谢成为二氧化碳、水等无毒物质。
此外，还存在一些化学污染物可以在细胞内进行代谢作用。
如环氧乙烷可在细胞内形成环氧乙烷代谢物，通过葡萄糖偶联酶及其他酶的作用最终切断为丙烯酰胺，进而被肝脏代谢为天然物质。
二、化学污染物的毒性效应化学污染物如果无法被代谢，则会带来毒性效应。
其毒性效应主要包括急性毒性、慢性毒性和生殖毒性。
急性毒性指化学污染物一次性高剂量暴露给生物体后可引起立即或近期内的严重中毒反应，这些反应包括呕吐、腹泻、疼痛、抽搐等症状。
通常情况下，急性毒性的毒性效应决定于化学污染物的剂量、暴露时间和暴露方式等因素。
慢性毒性是指化学污染物反复或长时间低剂量地暴露给生物体后，引起生物体内一系列的器官损伤和生化代谢异常的效应。
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谷胱甘肽 S-转移酶综述
张 飚 1，李 永清 2*，高 轩 1 （1．河北农业大学动物科技学院，河北 保定 071000；2．北京市农林科学院畜牧兽医研究所， 北京 100089）
【摘 要】谷胱甘肽 S-转移酶(glutathioneS-transferases，GSTs)是由多个基因编码、具有多种功能的超基因家族酶，
通常，GSTs 催化 GSH 与亲电子物质结合形成 硫醇尿 酸，经肾脏排出 体外。其亦 可作为转 运 蛋 白 转运亲脂化合物，如胆红素、胆酸、类固醇激素和不 同的外 源性化合物。其通过酶促和 非酶促反 应 ，解 除化学诱变剂、促癌剂以及脂质和 DNA 氢过氧化 物的毒性，保护正常细胞免受致癌和促癌因素的影 响，在抗诱变及抗肿瘤中起重要作用[6] 。
6 GSTs 与寄生虫的关系
血吸虫生活史各期中以虫卵所致的损害最为 严重，虫卵沉着于肝、肺等组织，并释放可溶性虫卵 抗原(SEA)，刺激各种淋巴因子的大量产生，引起机 体Ⅳ型 变态反应。形成虫卵肉芽肿 、门静脉 高 压 等 一系列病理反应，对机体造成损害。血吸虫 GSTs 蛋白作为疫苗除可诱导较强的免疫保护外，还可有 效减少成虫数量和产卵数，一些复合型的疫苗蛋白 如 Sm14-3-3 或 Sj14-3-3 与 GST 组成融合蛋白可激 发机体 23%～ 32%的补 体介导的细胞毒作用 ， ［14，15］ 调节细胞因子的分泌，使致炎因子的分泌减少而使 IL-10 和 IgG1 升高，从而减轻Ⅳ型变态反应 [16] ，使 得虫卵肉芽肿的病理损害程度有所减轻。
ZHANG Biao,LI Yong-qing,GAO Xuan (1.College of Animal Science and Technology Hebei Agricrltural University. Baoding Hebei 071000;2.Animal Science and veterinary research institute Agriculture and forestry academy of science. Beijing 100089)
search of typing,structure of cytosolic glutathione S-transferease has been discussed in this paper.
【
】Glutathione S-transferease
1 GSTs 分型
GSTs(EC 2 .5 .1 .18)是广泛存在于各种生物体 内的由多个基因编码的、具有多种功能的一组同工 酶，分子量为 23 ～ 29 KDa。有膜结合和胞液两种 形式，以胞液 GSTs 为主。依据酶活性、序列、基序 和结构特征，膜结合 GSTs (如微粒体 GSTs) 现归于 类花生酸类物质和谷胱甘肽代谢的膜相关蛋白
由于 GST- 既能在组织中检测到又可在血清 中检测到，而其它许多肿瘤标志物只能在组织中检 测到。并且检测血清中的 GST- 对机体无侵袭性， 大大方便临床的应用［8］。随着 GST- 表达与肿瘤的 关系的研究的深入，它很有可能成为肿瘤而不只是 肝癌的标志物。
3.2 GSTs 的多态性与肿瘤的关系
GSTs 基因家族是一个巨大的超基因家族，就表 型而言，每一类同工酶中又包括很多亚型；就基因 型而言，每一类都有很多不同基因位点。到目前为 止，GSTs 的 4 种基因，即 GSTM1，GSTM3，GSTP1 和 GSTT1 已证实具有多态性，基因的多态性可引起酶 活性的改变，导致对潜在致癌物代谢能力的差异， 这种差异是构成个体肿瘤易感性的遗传基础之一［9-11］。
【
】Glutathione S-transferases(GSTs) is a superenzyne encoded by several genes and possessing
multifunctions. It is also a major detoxification system in a number of organisms. The progress in the re-
2.2 功能
GSTs 是一组具有多种生理功能的蛋白质，在 机体有毒化合物的代谢、保护细胞免受急性毒性化 学物质攻击中起到重要作用，是体内代谢反应中Ⅱ 相代谢反应的重要转移酶。其生物学功能主要是 减少 GSH 的酸解离常数，使得其具去质子化作用 及有更多的反应性 GSTs 巯基形成，从而催化其与 亲电性 物质轭合［5］。
2 GSTs 的基本结构与功能
2.1 结构
至今报道的所有可溶性 GSTs 都有相似的三级 结构（图 1）。GSTs 是一种球状二聚体蛋白，每个亚 基有一个酶催化中心，分子量介于 23 ～ 29 KDa，由 200 至 240 个氨基酸组成。每个亚基的多肽链形成 两个结构域。
收稿日期：2006 － 04 － 25
3.3 GSTs 与肿瘤细胞耐药性的关系
自从 Wang 等首次报道 GSTs 同工酶的异常表 达与肿瘤细胞的耐药性有关以来，越来越多的研究 表明了此现象的普遍性，即GSTs 可代谢抗癌药物。 其中 GST- 是在肿瘤细胞系中分布最广泛的 GSTs 同工酶，已经证明GST- 的过量表达与肿瘤耐药性 有关 。 [12] 其机理可能与这些抗肿瘤药物具有亲电 子特性有关。GST- 催化 GSH 与这些化疗药物的 结 合 ，从 而 保 护 细 胞 免 受 化 疗 药 物 的 损 伤 ，其 实 质 是 机 体 防 御 机 制 的 一 种 体 现 。所 以 ，对 于 那 些 具 有 较高 GSH 和 GST- 活性的肿瘤组织，如果采取非 GST- 底物的化疗药物，有可能提高临床化疗水平。
是多种生物体内的主要解毒系统。本文综述了 GSTs 的分型、结构等方面的研究进展。
【关键词】谷胱甘肽 S-转移酶
【中图分类号】S852.2
【文献标识码】A
【文章编号】1672 － 207（8 2006）06 － 0011 － 03
Summarize of Glutathione S-transferases
近几年来发现GSTs 在清除体内氢过氧化物方 面也有很多作用。此外，GSTs 的同工酶还含有非 硒依赖性谷胱甘肽过氧酶的活性，能清除脂类自由 基，在 抗脂质过氧化反 应中起着重要作 用。此 酶 还 可促使白细胞三烯和前列腺素的转化。
3 GSTs 与肿瘤的关系
3.1 肿瘤标志物
许多致癌物质不能独立起作用，需经代谢后才 能成为致癌因素，这种反应过程中CYP450 是重要的
(Membrane Associated Proteins in Eicosanoid and Glutathione metabolism, MAPEG)的一个新的超家族[1]。
表 1 GSTs 的一些分类标准
分类标准
类别
一级结构比较
、、、 、、、
免疫印记
、、M IF、昆虫Ⅰ及Ⅱ型、肝片形吸虫
底物特异性/亲合力
激活酶，GST- 是重要的灭活酶，致癌物质的代谢 和平衡状态是致癌的关键。
自 Sato 等首次在大鼠胎盘中纯化得到 GST- ， 并认为是肝癌及其早期病变的标志物以来，又在多 种致癌物造成的肝癌模型和其他化学致癌模型中 证实了这一重要发现。GST- 的表达是除癌前病 变细胞结节中其他几种生化指标（如 -谷氨酰转肽 酶 ，-GT）表 达 外 的 又 一 种 变 化 ，并 认 为 是 一 种 新 的、更准确并优于 -GT 的肝癌标志酶[7] 。
4 GSTs 在分子生物学中的应用
在基因工程中，蛋白质的表达经常用到各种融 合表达系统。一个高性能的融合表达系统通常需 要 满 足 以 下 条 件 ：能 够 高 效 表 达 目 的 蛋 白 ，表 达 产 物 溶 解 性 良 好 ，产 物 易 于 分 离 纯 化 。在 现 有 的 融 合 表达系统中，谷胱甘肽 -转移酶(GSTs)融合表达系 统很好地满足了这些条件，因而越来越多地被运用 于基因工程研究。
图 1 GSTs 三级结构 -末端氨基酸结构域由 80 个氨基酸排列形
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11
专论综述
成 -折叠和三股 螺旋，是 GSH 结合位点(G 位点)， 而且存在一个相当保守的酪氨酸残基(Try)，该 Try-5 的-OH与 GSH的硫醇化阴离子形成氢键来稳定之， 从而在 催化反应中起重 要作用。值得一提的 是 ， 型 GSTs 存在于几种哺乳动物和秀丽新小杆线虫， 但与哺乳动物其他 GSTs 不同，其 -末端伸展与 末端邻 接形成一个新的 结构单位[3]。它们对 经 典 的 GSTs 底物 1-氯-2,4-二硝基苯 (1-chloro-2,4 -dinitrobenzene, CDNB)的活性非常低，对谷胱甘肽-琼脂糖 成型片(glutathione-agarose matrix)无结合亲合力，但 能结合 -乙基谷胱甘肽成型片，并显示有显著的谷 胱甘肽依赖的硫醇转移酶的活性 。 [4]
(theta)、 (omega)、、(kappa) 和 (Zeta) 等型 (表 1)[3]， 其中前五型是胞液 GSTs，同型的亚单位间才可以 形成同或异二聚体。
目前还没有根据序列相似性对GSTs 分型的明 确标准，通常公认氨基酸序列相似性大于 60%为同 型 GSTs，低于 30%则为不同型[2]。
、、、
抑制敏感性
、、
三级结构：活性中心
、、、 、、、
四级结构：杂合成二聚体的能力 、
四级结构：亚单位间的接口
/ / / 型的疏水的锁与钥匙结构、型的 极性接口
注:MIF-migration inhibitory factor 免疫抑制因子
据 氨基酸 /核苷 酸序列、免疫、动 力学和三 /四
级结构特征等不同标准，GSTs 分为 、、、(sigma)、
5 GSTs 与肝脏的关系