谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性检测试剂盒说明书 微量法
还原型谷胱甘肽（reducedglutathione,GSH）试剂盒说明书
还原型谷胱甘肽（reducedglutathione,GSH）试剂盒说明书货号：QS1200 规格：50管/48样还原型谷胱甘肽（reduced glutathione, GSH）试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：GSH是细胞内最主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。
还原型与氧化型比值（GSH/GSSG）是细胞氧化还原状态的主要动态指标。
因此，测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
测定原理：DTNB与GSH反应生成复合物，在412nm处有特征吸收峰；其吸光度与GSH含量成正比。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。
粗酶液提取：1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。
8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清等液体：直接测定。
GSH测定操作：1. 分光光度计预热30min，调节波长到412 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二置于25℃（一般物种）或者37℃（哺乳动物）水浴中保温30min。
3. 空白管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL蒸馏水，700μL 试剂二，200μL试剂三，混匀静置2min后测定412 nm吸光度A1。
谷丙转氨酶(GPT)活性测定试剂盒说明书
货号: QS1900 规格：50管/24样谷丙转氨酶（GPT）活性测定试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：GPT（EC 2.6.1.2）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸代谢中具有重要作用。
此外，哺乳动物肝细胞GPT活性很高，当肝细胞坏死，GPT释放到血液中，血清GPT活性显著增高。
因此，GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。
测定原理：GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应，生成丙酮酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基苯肼溶液，不仅终止上述反应，而且与酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在碱性条件下呈红棕色，可以在505nm读取吸光值并计算酶活力。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：提取液：30mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体5 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体5 mL×1瓶，4℃避光保存；试剂三：液体50 mL×1瓶，4℃保存；样品测定的准备：1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定操作表：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至505nm，蒸馏水调零。
谷胱甘肽过氧化物酶
谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）试剂盒
微量法100T/96S
测定意义：
GSH-Px是谷胱甘肽氧化还原循环中催化还原型谷胱甘肽（GSH）氧化的主要酶之一。
GSH-Px不仅能够特异地催化还原型谷胱甘肽与ROS反应，生成氧化型谷胱甘肽GSSG，从而保护生物膜免受ROS的损害，维持细胞的正常功能；而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。
测定原理：
GSH-Px催化有机过氧化物氧化GSH，产生GSSG；谷胱甘肽还原酶（GR）催化NADPH还原GSSG，再生GSH，同时NADPH氧化生成NADP+；NADPH在340 nm有特征吸收峰，而NADP+没有；通过测定340 nm光吸收减少速率来计算GSH-Px活性。
临床谷胱甘肽还原酶试剂盒反应原理及临床意义
临床谷胱甘肽还原酶试剂盒反应原理及临床意义谷胱甘肽还原酶 (GR) 是人体氧化还原体系中最为重要的酶之一，广泛存在于人体肝、肾、心红细胞、单核巨噬细胞等组织细胞中。
它可及时地清除人体代谢过程中产生的氧自由基（OFR），是维持细胞中还原型谷胱甘肽（GSH）含量的主要黄素酶。
谷胱甘肽氧化还原系统稳态能维持细胞正常生理过程，维护巯基蛋白和酶的活性，而 GR 是唯一能将氧化型谷胱甘肽（GSSG）转化为GSH 的酶。
在预防血管内皮损伤方面，GR 可以及时清除人体代谢过程水平的中产生的活性氧，有助于预防高浓度活性氧造成的血管内皮损伤。
谷胱甘肽还原酶试剂盒的反应原理紫外酶法：在 NADPH 存在下，谷胱甘肽还原酶高度特异性催化降解氧化型谷胱甘肽 GSSG，NADPH 被氧化成为NADP+，该反应引起340 nm 处的吸光度值减少，谷胱甘肽还原酶的活性可通过测定 340 nm 处吸光度值减少的速率来测定。
临床意义生理性升高：剧烈运动、进餐、饮酒、新生儿 GR 水平生理性增高。
病理性增高或降低：肝胆疾病、物性肝损伤等会引起 GR 水平的增高，维生素 B2 缺乏症、缺铁性贫血、心脑血管疾病和糖尿病等引起 GR 水平的降低、使用还原型谷胱甘肽制剂抑制 GR 而降低。
GR 参与反应生成的还原型谷胱甘肽对保护肝细胞膜完整具有重要意义。
还原型谷胱甘肽是一种常用的保肝药物，在肝细胞受到有害物质和病毒侵袭初期，机体内大量产生 GR，参与肝细胞膜的修复过程。
不同于丙氨酸转氨酶（ALT）和天门冬氨酸转氨酶（AST）在肝细胞膜破裂和线粒体破裂时才能检测出来，GR 可以填补肝细胞受损早期自我修复阶段至破裂进程中诊断的空白，将更有利于早期肝炎的诊断和治疗。
急性肝炎早期阶段，血清谷胱甘肽还原酶敏感性高，相关研究显示，血清 GR 水平每增加 1U/L，肝损伤风险升高 1.086 倍[1]。
GR 比转氨酶更早增加达到峰值，是判断早期肝脏损伤的指标。
gst亲和层析步骤
gst亲和层析步骤GST（谷胱甘肽S-转移酶）亲和层析是一种常用的蛋白质纯化技术，它基于谷胱甘肽S-转移酶与谷胱甘肽结合的高亲和力，可用于纯化含有GST标签的蛋白质。
第一部分：材料准备在进行GST亲和层析之前，需要准备一些实验材料。
以下是常见的实验材料列表：1. 细菌表达系统：常用的细菌表达系统包括大肠杆菌（E. coli）和酵母菌等。
选择适当的表达系统，并确保表达系统中含有GST融合蛋白的基因。
2. 培养基和抗生素：根据表达系统的需求，准备适当的培养基，并添加相应的抗生素以选择含有GST融合蛋白的菌落。
3. 细胞破碎缓冲液：根据实验需求选择适当的细胞破碎缓冲液，如PBS（磷酸盐缓冲液）或Tris缓冲液，并添加辅助试剂如EDTA（乙二胺四乙酸）和PMSF （苯甲磺酰氟）等。
4. 融合蛋白纯化缓冲液：准备一系列用于融合蛋白纯化的缓冲液，包括洗脱缓冲液、结合缓冲液、平衡缓冲液等。
常用的缓冲液成分包括PBS、NaCl（氯化钠）、DTT（二硫苏糖醇）和Tween-20等。
5. GST树脂：选择合适的GST亲和树脂，如GST-Sepharose或Glutathione Agarose等。
6. 色谱柱：选择合适的色谱柱，如预装的柱子或自制的柱子，并进行消毒和平衡。
7. 蛋白质测定试剂盒：用于测定蛋白质的浓度，如BCA（双硫苏糖酸）蛋白定量试剂盒。
第二部分：GST融合蛋白的表达和纯化1. 转化细菌：将含有GST融合蛋白基因的质粒DNA转化到表达宿主细胞中，如E. coli。
通过热激冷冻法、电穿孔法或化学法等方法将质粒DNA导入细菌细胞内。
2. 培养细菌：将转化后的细菌菌落接种到含有适当抗生素的培养基中，并在适当的条件下培养细菌，如温度、pH值和搅拌速度等。
3. 蛋白表达诱导：当细菌培养达到适当的生长阶段时，添加适当浓度的诱导剂，如IPTG（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷），以诱导GST融合蛋白的表达。
4. 细胞收获：在蛋白表达诱导后一定时间，收集细菌细胞。
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求科美
γ-谷氨酰基转移酶（GGT）测定试剂盒(GCANA底物法)适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中的γ-谷氨酰基转移酶（GGT）的活性。
1.1包装规格1.2主要组成成分试剂1主要组分：双甘肽125mmol/L 试剂2主要组分：L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺14mmol/L2.1外观2.1.1试剂1应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。
2.1.2试剂2应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：GGT试剂盒在波长395～415nm处测定试剂的空白吸光度值，应不大于0.7。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：GGT试剂盒在波长395～415nm处测定试剂的空白吸光度变化率，每分钟的变化值应不大于0.005。
2.4分析灵敏度测试50U/L的γ-谷氨酰基转移酶时，吸光度变化率应不小于0.01。
2.5准确度测定国家标准物质GBW（E）090283，相对偏差应不超过15%。
2.6精密度2.6.1重复性重复测试（50±5）U/L的样本，所得结果的变异系数CV应不大于5%；2.6.2批间差测试（50±5）U/L的样本，所得结果的批间相对极差应不大于10%。
2.7线性范围GGT试剂盒在（10，450）U/L范围内，线性相关系数（r）应不小于0.990；在(10，50］U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±5U/L；在(50，450)U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为12个月。
在GGT试剂盒有效期满后2个月内，分别检测2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项，结果应符合各项目的要求。
谷胱甘肽s-转移酶的功能
谷胱甘肽s-转移酶的功能
谷胱甘肽s-转移酶（glutathione S-transferase，GST）是一类重要的酶，在生物体内起着多种重要的功能。
该酶主要作用在细胞内，参与细胞代谢过程中的许多关键反应，具有显著的生物学意义。
在生物体内发挥着重要的作用，包括抗氧化、解毒、细胞保护等多种作用。
首先，在抗氧化方面，谷胱甘肽s-转移酶可以通过转移底物中的谷胱甘肽，帮助清除自由基和有害代谢产物，从而减少氧化应激对细胞的伤害。
自由基是细胞内的危险分子，会导致细胞损伤和生物体老化，而谷胱甘肽
s-转移酶的存在能够有效地减少氧化损伤，维护细胞健康。
其次，在解毒方面，谷胱甘肽s-转移酶可以通过结合有毒底物，将其转化为水溶性代谢产物，从而使其更容易被排泄。
这种解毒作用对维持生物体内环境的稳定性至关重要，有助于预防毒素对生物体的损害。
此外，谷胱甘肽s-转移酶还参与了多种重要的生物化学反应，如脂质代谢、氨基酸代谢等。
在脂质代谢中，谷胱甘肽s-转移酶可以通过调节脂
质代谢途径，维持细胞内脂质平衡，有助于维持细胞健康。
在氨基酸代谢中，谷胱甘肽s-转移酶参与氨基酸的代谢和转运，有助于碱基的合成和蛋白质
的合成，是维持细胞正常功能的关键酶类。
让我们总结一下本文的重点，我们可以发现，谷胱甘肽s-转移酶在生物体内的功能多样且重要，与细胞代谢和生物体内环境的平衡密切相关。
通
过对其功能的深入研究，可以更好地了解细胞内代谢的调控机制，为预防和治疗多种疾病提供理论基础。
未来的研究还需深入探讨谷胱甘肽s-转移酶在细胞信号转导、疾病发生发展等方面的作用机制，以期揭示其更多的生物学功能及临床应用潜力。
谷胱甘肽S_转移酶综述
search of typing,structure of cytosolic glutathione S-transferease has been discussed in this paper.
【
】Glutathione S-transferease
1 GSTs 分型
GSTs(EC 2 .5 .1 .18)是广泛存在于各种生物体 内的由多个基因编码的、具有多种功能的一组同工 酶，分子量为 23 ～ 29 KDa。有膜结合和胞液两种 形式，以胞液 GSTs 为主。依据酶活性、序列、基序 和结构特征，膜结合 GSTs (如微粒体 GSTs) 现归于 类花生酸类物质和谷胱甘肽代谢的膜相关蛋白
由于 GST- 既能在组织中检测到又可在血清 中检测到，而其它许多肿瘤标志物只能在组织中检 测到。并且检测血清中的 GST- 对机体无侵袭性， 大大方便临床的应用［8］。随着 GST- 表达与肿瘤的 关系的研究的深入，它很有可能成为肿瘤而不只是 肝癌的标志物。
3.2 GSTs 的多态性与肿瘤的关系
GSTs 基因家族是一个巨大的超基因家族，就表 型而言，每一类同工酶中又包括很多亚型；就基因 型而言，每一类都有很多不同基因位点。到目前为 止，GSTs 的 4 种基因，即 GSTM1，GSTM3，GSTP1 和 GSTT1 已证实具有多态性，基因的多态性可引起酶 活性的改变，导致对潜在致癌物代谢能力的差异， 这种差异是构成个体肿瘤易感性的遗传基础之一［9-11］。
其余氨基酸以 5 或 6 股 螺旋构成 -末端氨基 酸结构域，是亲电子物质即底物结合位点(H 位点)。 在不同型 GSTs 间差别较大，如 、型 GSTs 包含 5 个 螺旋，型 GSTs 包含 6 个 螺旋。不同型 GSTs 在 -末端氨基酸结构域的差异可以解释 、、之 间的底物特异性的差异。
谷氨酰胺酶(GLS) 活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
谷氨酰胺酶(GLS)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1450规格：50T/24S产品内容：提取液：液体70mL×1瓶，4℃保存；使用前37℃预热。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL提取液溶解。
试剂二A：液体1mL×1支，4℃保存。
试剂二B：液体4mL×1瓶，4℃保存；临用前将试剂二A倒入试剂二B中混匀（A:B=1：4比例），或者根据样本所需，按照体积比试剂二A：试剂二B=1:4现配现用。
试剂三：液体5mL×1瓶，常温保存。
标准品：液体1mL×1支，10µmol/mL氮标准液，4℃保存；使用前37℃预热。
产品说明：GLS（EC3.5.1.2）主要存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
本试剂盒利用靛酚蓝比色法测定GLS催化谷氨酰胺生成的氨来计算其酶活性。
试验需自备仪器和用品：台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和双蒸水。
操作步骤：一、粗酶液提取：1.组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5-10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液），冰上匀浆后于4℃，12000g离心15min，取上清置于冰上待测。
2.细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万个细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后4℃，12000g离心15min，取上清置于冰上待测。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至630nm，蒸馏水调零。
2、将标准溶液用提取液稀释32倍得0.3125μmol/mL的标准溶液。
3、样品测定（在EP管中加入下列试剂）试剂名称（µL）测定管对照管标准管空白管样品8080--提取液-320-400试剂一320---混匀，37℃水浴1小时--标准液--400-试剂二80808080试剂三60606060蒸馏水460460460460混匀，室温放置30min，630nm处读取吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管，计算ΔA=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。
还原型谷胱甘肽 (reduced glutathione,GSH)含量测定试剂盒使用说明
还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）含量测定试剂盒使用说明产品简介：GSH/GSSG是细胞内最重要的氧化还原对之一。
因此，测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
DTNB与GSH反应生成复合物，在412nm处有特征吸收峰；其吸光度变化与GSH含量成正比。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1ml比色皿、双蒸水产品内容：试剂一×1支，充分溶解于100ml双蒸水，4℃保存试剂二×1支，充分溶解于50ml试剂一中，4℃保存试剂三×1支，充分溶解于10ml双蒸水中，4℃避光保存操作步骤：一、样品前处理：取组织约0.1g，加1ml试剂二，冰上充分研磨，8000rpm4℃离心10min，取上清。
（如上清不清澈，再离心3min）GSH测定操作：测定前将试剂一于25℃水浴20min按每100mg组织加入1000µL生理盐水的比例进行匀浆。
8000g4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
对于非哺乳动物组织：按每100mg组织加入1000µL提取液的比例进行匀浆。
8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
（2）血清（浆）样品：直接检测。
二、测定操作表：测定管空白管样本0.1ml/试剂一0.7ml0.7ml蒸馏水/0.1ml试剂三0.2ml0.2ml 迅速混匀，于412nm测吸光值，并记录第60s的OD值GSH含量计算：GSH标准曲线公式：y=0.0015x+0.0818（x为GSH浓度，y为吸光值）液体中GSH（µmol/L）=[（OD测定管-OD空白管）-0.0818]/0.0015×样品稀释倍数组织中GSH计算：①GSH（µmol/mg prot）=[（OD测定管-OD空白管）-0.0818]/0.0015×样品稀释倍数÷样品蛋白浓度（Cpr）②GSH（µmol/g mass）=[（OD测定管-OD空白管）-0.0818]/0.0015×样品稀释倍数÷样品质量（g）注意事项：（1）样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力，以免影响其活力测定时，除试剂一外，其它试剂均需放置在冰上；（2）样本测定前先取1-2个样做预实验，如吸光值太高（超过标准曲线范围，即y ＞0.2时），应先用试剂二稀释到适当倍数，使得吸光值在标准曲线范围内。
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谷胱甘肽S-转移酶（GST）活性检测试剂盒说明书微量法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0355
规格：100T/96S
产品内容：
试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体22mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加2mL蒸馏水溶解。
产品说明：
GST是一种具有多种生理功能的蛋白质家族，主要存在于细胞质内。
GST是体内解毒酶系统的重要组成部分，主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合，使亲电化合物变为亲水物质，易于从胆汁或尿液中排泄，达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。
因此，GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。
此外，因为GST具有GSH-Px活性，亦称为non-Se GSH-Px，具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。
注意，GST催化的反应减少GSH含量，但是不增加GSSG含量。
GST催化GSH与CDNB结合，其结合产物的光吸收峰波长为340nm；通过测定340nm波长处吸光度上升速率，即可计算出GST活性。
自备仪器和用品：
低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外-可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂
一）进行冰浴匀浆。
8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入
1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清等液体：直接测定。
二、测定：
1.分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到340nm，用蒸馏水调零。
2.试剂二放在25℃（一般物种）或者37℃（哺乳动物）保温。
3.空白管：取微量石英比色皿，加入20μL试剂一，180μL试剂二和20μL试剂三，迅速混匀后于340nm 测定10s吸光度记A1，37℃水浴5min后，快速取出测定吸光度记A2。
4.测定管：取微量石英比色皿，加入20μL上清液，180μL试剂二和20μL试剂三，迅速混匀后于340nm 测定10s吸光度记A3，37℃水浴5min后，快速取出测定吸光度记A4。
三、GST活性计算：
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按蛋白浓度计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每毫克蛋白每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活性单位。
GST（U/mg prot）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×106×V反总÷(Cpr×V样)÷T
=0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)]÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每克样品每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活性单位。
GST（U/g鲜重）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×106×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)]÷W
（3）按细胞数量计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每104个细胞每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活单位。
GST（U/104cell）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×106×V反总÷(500×V样÷V样总)÷T
=0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)]÷500
（4）按液体体积计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每毫升液体每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活单位。
GST（U/mL）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×106×V反总÷V样÷T
=0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)]
ε：产物摩尔消光系数，9.6×103L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；106：1mol=1×106μmol；V反总：反应体系总体积，220μL=2.2×10-4L；Cpr：上清液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定，建议选用本公司生产的BCA蛋白质浓度测定试剂盒；W：样品质量，g；V样：加入反应体系中上清液体积，20μL=0.02 mL；V样总：试剂一体积，1mL；T：反应时间（min），5min；500：细胞数量，500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下
（1）按蛋白浓度计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每毫克蛋白每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活性单位。
GST（U/mg prot）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×106×V反总÷(Cpr×V样)÷T
=0.38×[(A4－A3)－(A2-A1)]÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每克样品每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活性单位。
GST（U/g鲜重）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×106×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=0.38×[(A4－A3)－(A2-A1)]÷W
（3）按细胞数量计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每104个细胞每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活单位。
GST（U/104cell）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×106×V反总÷(500×V样÷V样总)÷T
=0.38×[(A4－A3)－(A2-A1)]÷500
（4）按液体体积计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每毫升液体每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活单位。
GST（U/mL）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×106×V反总÷V样÷T
=0.38×[(A4－A3)－(A2-A1)]
ε：产物摩尔消光系数，9.6×103L/mol/cm；
d：96孔板光径，0.6cm；106：1mol=1×106μmol；
V反总：反应体系总体积，220μL=2.2×10-4L；
Cpr：上清液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；
W：样品质量；
V样：加入反应体系中上清液体积，20μL=0.02mL；
V样总：加入试剂一体积，1mL；
T：反应时间（min），5min；
500：细胞数量，500万。
注意事项：
1.样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力；
2.细胞中GST活性测定时，细胞数目须在300万-500万之间，细胞中GST的提取时可加试剂一后研磨或超声波处理，不能用细胞裂解液处理细胞；
3.测定前先用1～2个样做预实验，如5min内反应不成线性，须对样品用蒸馏水稀释，计算结果乘以稀释倍数；
4.若样品测定吸光度大于1，建议对样品用蒸馏水稀释，计算时结果乘以稀释倍数；
5.测定反映的温度对测定结果有影响，请控制在25℃或者37℃（哺乳动物）；。