肠道寄生虫粪便病原学检查

肠道寄生虫粪便病原学检查

肠道寄生虫有不同的发育阶段，当其发育到一定阶段后就可以在粪便中被检测出来，例如：蠕虫的虫卵、幼虫、成虫和节片，原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊还有一些节肢动物的成虫或幼虫，这是临床上最常见的寄生虫检查方式，下面我们来了解一下肠道寄生虫粪便病原学的检查手段。

一、粪便标本采集的注意事项

首先，取样时应以含脓、血、黏液的部分为重点，尽量做到多部位取材，样本取材量应为5—10g，但若做自然沉淀或血吸虫毛蚴孵化检查法，取样量则需达到30g以上。另外，蠕虫成虫及绦虫节片的检查则要留存患者24小时内的粪便样本。

其次，保存粪便样本的容器必须清洁、干燥，取样后要进行密封保存，以免受到水、尿液、粉尘、药物或泥土的干扰，容器以硬纸盒为最佳，并在容器外贴好标签，用以识别。

最后，粪便样本要在采集后的24小时之内送检，送检后的半小时内完成检查，或可在35—37摄氏度的条件下进行保存，以确保检测到新鲜的粪便样本，尤其是在检查运动的滋养体时，例如：阿米巴、鞭毛虫、纤毛虫。

二、肠道寄生虫的粪便病原学检查方式

第一，直接涂片法。此法操作简便，检出率高，常用以检查蠕虫卵、原虫的包囊、滋养体以及卵囊。可分为生理盐水直接涂片法和直接涂片染色法。

生理盐水直接涂片法，是指滴适量生理盐水在载玻片的中央，然后使用竹签取米粒大小粪便样本与其充分混合，而后继续用竹签将混合物涂成膜，制成涂片后再置于显微镜下观察，重复此操作三次，分别进行观察，以提升检出率。

直接涂片染色法一般使用碘液进行染色，只需将生理盐水直接涂片法中的生理盐水换成碘液即可，同样需重复涂片观察三次。

第二，浮聚法。当原虫的包囊或虫卵处于比自身比重更大的溶液中时就会出现上浮并集中于液体表面现象。可分为饱和盐水浮聚法、硫酸锌离心浮聚法、蔗糖离心浮聚法以及氯化锌溶液浮聚法。

饱和盐水浮聚法，此法多应用于检查钩虫卵，这是因为饱和盐水的比重为

1.17-1.19，而钩虫卵的比重为1.085-1.09。操作步骤为，先用竹签在样本的不

同部位中取出黄豆大小的样本置于漂浮杯中，然后再在漂浮杯中加入少量的饱和

生理盐水，使用竹签进行碾碎、搅拌，将两者充分混合，然后继续加入生理盐水，近满时改用滴管，需加至高于杯口的程度，但要注意不能使之溢出。而后取一块

干净的载玻片，将其盖在液滴表面上，静止15—30分钟，到时间后，需将载玻

片水平提起、迅速翻转，并置于显微镜下仔细观察。

硫酸锌离心浮聚法则是将粪便样本与其10倍的蒸馏水混合在一起，混合时

需将粪便样本仔细碾碎，与蒸馏水充分混合，然后进行3—4次离心操作至上层

清液澄清，将上层清液倒去，先在粪沉渣中加入少许33%硫酸锌溶液，使两者充

分混匀，再继续加入硫酸锌溶液至管口1厘米处，接着再把试管做1分钟的离心

处理。完成离心后，用接种环挑取表面粪液在载玻片上，滴加一滴碘液，观察镜

下结果。

蔗糖离心浮聚法与硫酸锌离心浮聚法不同，是将5g与20ml水充分混合后，

在使用4层纱布过滤，将滤液进行离心后取上层清液进行实验的。其后续实验步

骤与饱和盐水浮聚法相同。此法用于检查隐孢子虫的卵囊，但需在1小时内进行

观察，以防卵囊脱水变形。

氯化锌溶液浮聚法是将黄豆大小的粪便样本置于5ml的离心管中，再加入

4ml的氯化锌溶液，离心后静置5分钟，然后取上层清液滴于载玻片上，用盖玻

片盖上后，置于镜下观察。

第三，沉淀法。所检物比重小于溶液是浮聚法，大于溶液则为沉淀法，分为

自然沉淀法及离心沉淀法。

自然沉淀法，是把粪便样本与蒸馏水相混合，使用纱布过滤出粪浆，在粪浆

中再加入蒸馏水，静置后，倒去上清液，重复2—3次至上清液澄澈后，再取沉

渣进行涂片镜检。

离心沉淀法是指将滤出的粪浆进行离心，再倒去上清液，再加入蒸馏水，再

重复离心，如此3—4次至上清液澄澈后，再取沉渣进行涂片镜检。

第四，漂浮沉淀法。由于比重的不同，在一种溶液中，有的虫卵会漂浮上来，有的则会沉淀下去，漂浮沉淀法就是利于比重的差别来对不同的虫卵进行分别集中。先用漂浮法集中出比重较小的虫卵，再倒掉上层清液，取沉渣进行比重大的

虫卵的涂片检查，此法主要应用于检查比重大小各异的寄生虫卵。

第五，拭子检查法。此法用于检查可在肛周、皮肤产卵或可在肛门附近发现

虫卵的寄生虫，例如：蛲虫、带绦虫，分为棉签拭子法和胶带拭子法。

棉签拭子法，需将棉签浸入生理盐水，挤去多余水分后，放入试管中杯中。

取样操作时，需将棉签沿肛周皮肤表面褶皱的一个方向滚动擦拭，取样后将棉签

放回试管中，向试管中倒入二分之一的生理盐水，用力震荡数分钟使其充分混合，迅速取出棉签在试管壁上挤掉多余水分，再用生理盐水加满试管，但不溢出，静

置20分钟后，用盖玻片轻沾试管口取样，用于镜检。

胶带拭子法则是贴在肛门处进行取样的，取样完成后再粘在载玻片上，用于

镜检。

第六，粪便内蠕虫幼虫检查法。包含检查网尾线虫和类圆线虫的幼虫分离法，检查圆形线虫目的粪便内虫卵培养法以及毛蚴孵化法。其中比较经典的是漏斗幼

虫分离法（贝尔曼法），巧妙的使用漏斗来分离粪便和水，又使大部分幼虫可以

游走于与漏斗下方相连的试管中。

三、总结

肠道寄生虫粪便病原学的许多检查方式既经典又有效，省时省力又不要求设备，一直沿用至今，但寄生虫的镜检多依赖于形态的主观判断，近年来免疫学检测与镜检的结合，大大提高了寄生虫的检测效率。