紫外-可见分光光度计的使用
UV1000紫外-可见分光光度计操作规程
UV1000紫外-可见分光光度计操作规程一、开机开机前将样品室内的干燥剂取出，确认电源是否连接。
打开仪器电源开关，等待仪器自检通过，自检过程中禁止打开样品室。
二、使用自检结束后（7个项目均出现OK字样），仪器进入主界面，屏幕显示如下四个功能项：1.光度测量；2.定量测量；3.动力学；4.系统应用。
仪器经20min 热稳定后，就可以进入正常测量。
1.光度测量在主界面上选中[光度测量]项后，按[ENTER]键进入光度测量主界面→ 按[SET]键进入测量模式选择界面选择相应的模式→ 按[ENTER]键确认→ 按[RETURN]键返回光度测量主界面→按[GOTOλ]键进入波长设置设定界面，用数字键输入你所需的波长值→ 按[ENTER]键确认→ 屏幕提示：请稍等……，仪器自动将波长移动到你所需测定的波长值→按[RETURN]键返回光度测量主界面→打开样品室盖，将空白溶液和待测样品分布放置比色皿架上，关上样品室盖→按[ZERO]键进行自动效零，屏幕提示：请稍等…… → 把待测试样拉入光路，按[START]键进入测量界面→再次[START]键，可在当前工作波长下对样品进行测量，并记录相应的数据。
2.定量测定建立浓度曲线，直接测定样品的浓度主菜单中选中[定量测定]项后，按[ENTER]键进入定量测量主界面。
（1）工作曲线法：测量已知浓度的一系列标准样品吸光度，建立工作曲线来测定未知浓度在定量测量主界面选择●“工作曲线法”，按[ENTER]键确认进入工作曲线法界面→按[GOTOλ]键设定所需的波长→按[RETURN]键返回工作曲线主界面→打开样品室盖，在当前光路的比色皿架位中放入空白样品，关上样品室盖→ 按[ZERO]键调零→ 按[SET]进入设定测量参数界面→ 选择●浓度单位→ 按[ENTER]键进入浓度单位设定界面→ 按数字键输入所需的浓度→按[ENTER]键确认→按[RETURN]键返回设定界面→ 选择●标样数→按[ENTER]键进入标样数设定界面→按数字键输入标样数→ 按[ENTER]键确认→ 将标准样品从低到高放入比色皿架，关上样品室盖→按[RETURN]键返回设定界面→按[ZERO]键调零→选择●标样浓度→ 按[ENTER]键进入标样浓度设定→ 按数字键输入标样浓度值→按[ENTER]键确认，测量标样的吸光度，系统进入下一个标样的设定界面，→ 把待测标样拉入光路，用同样的方法测量所有标样的吸光度→ 按[ENTER]键确认，待所有标样测定以后，按[RETURN]键返回●“工作曲线法”→ 按[ENTER]键进入工作曲线界面可查看（或选定）已经生成的工作曲线→ 将样品按浓度从低到高放入比色皿架中→ 按[START]键进入测量结果显示界面→再次按[START]键，将参比拉入光路→ 按[ZERO]键进行调零→ 将待测样品依次拉入光路。
紫外可见分光光度计的使用(自用)详解
4. 用完后先关程序，再关仪器开关，关电源，关闭计算机。 5. 正确登记，将仪器及实验台擦干净。
溶液对光吸收过程
仪器组成单光束分光光度计
光源
0.575
单色器
检测器 显示
吸收池
双光束分光光度计
光源 单色 器
比
光束分裂器
值
吸收池
检测器
显
示
组成：光源、单色器、样品池、检测器
1．光源： ①能提供连续的辐射；②光强度足够大；③在整个光谱区 内光谱强度不随波长有明显变化；④光谱范围宽；⑤使用 寿命长，价格低。 钨灯——可见光区 320～2500nm 氢灯或氘灯——紫外光区 195－375nm
利用一定频率的紫外--可见光照射分析物，它将有选择 地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。
物质对光的选择性吸收－溶液对光的作用
溶液对光的作用示意图
光吸收遵循朗伯-比尔定律：
A lg T lg I 0 bc
I
I0 入射光辐射强度 I 透射光辐射强度
T 透射比
a 吸光系数
ε 摩尔吸光系数
使用前后应将洗手池洗净，测量时不能用手接触 窗口。
已匹配好的比色皿不能用炉子和火焰干燥，不能 加热，以免引起光程长度上的改变。
3. 测量条件的选择： ▪ 选择适宜波长的入射光:由于有色物质对光有选择性吸收,
为了使测定结果有较高的灵敏度,必须选择溶液最大吸收波 长的入射光。
▪ 控制吸光度A的准确的读数范围:由朗伯-比耳定律可知,吸 光度只有控制在0.2~0.7读数范围内时,测量的准确度较高.
(完整版)紫外可见分光光度计--原理及使用
应用分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。
常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。
基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息，可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即A= kcl式中比例常数k与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。
c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。
组成各种型号的紫外－可见分光光度计，就其基本结构来说，都是由五个基本部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。
1.光源在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类：热辐射光源和气体放电光源。
热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。
2．单色器单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。
单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。
色散元件常用棱镜和光栅。
3.吸收池吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。
吸收池的种类很多，其光径可在0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。
4、检测器检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。
现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。
5、信号显示系统常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。
操作步骤操作之前1.1开启电源进行初始化开启主机电源，分光光度计将按屏幕所显示的项目进行自检和初始化，如下图所示。
所有项目检测完毕，初始化结束，整个过程大约需要4min（若使用多池检测需5min）。
每个项目进行初始化操作时将被加亮显示，当初始化完成后，该项右边的星标也将加亮显示。
紫外-可见分光光度计操作规程
7230分光光度计操作规程本规程规定了7230分光光度计的使用方法和注意事项、确保检测结果的准确性。
1.技术指标：波长范围：330-900NM 波长准确度： 2NM波长重复性：2NM 100%?（T）稳定性： 0.5?（T）/3分钟透射比(透过率)准确度:<1.5%t（T）透射比重复性:0.5t（T）透射比范围:0.0%?（T）--110.0%t（T）吸光度范围:-0.041-1.999波长范围:0.000-9999 (T)A转换精度:0.1%t（T）2.步骤2、1 启动电源开关，仪器显示"F7230"，预热30分钟。
2、2 调节波长旋钮使波长移到所需之处。
2、3 按"CLEAR"键，仪器显示"YEA"2、4 按"MODE"键，使显示?（T）状态或A状态。
2、5 四个比色皿，第一个放入参比试样，其余三个放入待测试样，将比色皿放入样品池内的比色皿架上，夹子夹紧，盖上样品池盖。
2、6 将参比试样推入光路，按"100%?" 键，至显示"T100.0"或"A0.000" .2、7 打开样品池盖，按"0%?"键，显示"T0.0"或"A E1".2、8 盖上样品池盖,按"100%?"键,至显示"T100.0"或"A0.000"2、9 将待测试样推入光路,显示试样的?（T）值或A值.2、10 按 "PRINT"键打印数据.3. 注意:3、1 每次测量前,检查波长是否所需值.3、2 比色皿在盛装样品前，应用所盛装样品冲洗两次，测量结束后比色皿应用蒸馏水清洗干净后放起。
若比色皿内有颜色挂壁，可用无水乙醇浸泡清洗。
5、3 向比色皿中加样时，若样品流到比色皿外壁时，应以滤纸點干，镜头纸擦净后测量，切忌用滤纸擦拭，以免比色皿出现划痕。
TU-1901紫外可见光分光光度计操作规程
1 仪器的使用1.1 依次打开打印机、计算机、主机电源。
1.2 打开测试程序，仪器开始初始化，如果自检各项都“OK”则初始化成功，预热30分钟。
如不成功对照未自检通过项进行排查，如自己无法解决报仪器设备管理员处理。
1.3 在样品池放上黑挡块，点击暗电流校正按钮进行暗电流校正。
1.4 清洗比色皿备用。
在一侧透光面做好标记。
1.5 光谱扫描：点击光谱扫描按钮，进入光谱扫描对话框。
设置波长范围[从长波到短波]、测光方式、扫描速度、采样间隔、记录范围等参数。
将参比池和样品池中放入参比溶液，合上样品仓门，点击基线校正按钮进行基线校正。
在样品池的比色皿中依次更换测试样品溶液，合上仓门，点击测试按钮“RUN”进行扫描，扫描完成后，可检出图谱的峰、谷波长值及吸光度Abs值。
1.6 光度测量：设置波长数、相应波长值[从长波到短波]、测光方式、重复次数等参数。
将参比池和样品池中放入参比溶液，合上样品仓门，点击“ZERO”按钮进行零点校正。
在样品池的比色皿中放入样品溶液，合上仓门，点击测试按钮“RUN”即可测出样品的吸光度Abs值。
1.7 定量测量：设置测量模式、测量波长、参考项输入[标准样品个数][对应的标样浓度][是否插入零点][选择曲线方式]等参数。
将参比池和样品池中放入参比溶液，合上样品仓门，点击“ZERO”按钮进行零点校正。
在样品池的比色皿中依次放入测量标准溶液，点击测试吸光度值，仪器自动绘制工作曲线，确认线性大于0.9999。
在样品池的比色皿中依次放入样品溶液，点击测试样品吸光度值，计算样品浓度。
1.8 测试完毕退出操作系统，依次关掉主机、计算机、打印机。
1.9仪器使用开始前和结束后，操作人员应对仪器的状态进行检查，并认真填写使用记录。
2 仪器的维护和保养2.1 仪器应安装在清洁，干燥，无尘，无腐蚀性气体，较暗的平稳工作台上。
2.2 比色皿每次更换液体，应用蒸馏水洗净，用专用擦镜纸擦拭避免损坏透光面。
测试完成将其清洗干净倒置晾干，存放于比色皿的盒子里。
岛津UV-1800紫外可见分光光度计操作规程(仪器版)
岛津UV-1800紫外可见分光光度计操作规程(仪器版)操作规程：岛津UV-1800紫外可见分光光度计一、操作步骤1.开启主机电源，进行自检和初始化。
2.初始化结束后，进入“模式菜单”。
3.在“模式菜单”下，选择测定样品吸光度的单波长模式或制作标准曲线和样品测定的定量模式。
二、单波长下，样品吸光度的测定1.在单波长模式下，按下“___”键，输入测定波长。
2.若需要空白校正，先放置空白样品，按下“AUTO ZERO”键。
3.放入样品，按下“START/STOP”键，完成样品吸光度的测定。
三、标准曲线的制作1.在定量模式下，进入“测量参数配置屏幕”，设置测量参数选项。
2.选择“1λ”测量方法，输入测量波长。
3.选择定量法，手动输入K、B值制作曲线或根据实际输入标准样品数目，校准曲线方程的次数和零截距条件。
4.设置重复测量次数和样品浓度单位。
5.按下“START/STOP”键，输入标样浓度和吸光度值，进行一次空白调零，消除皿差。
6.查看校准曲线和标准曲线方程和相关系数是否符合要求，保存测量参数和校准曲线。
四、样品的测定按照单波长或定量模式操作，放入样品，进行测定。
1.在测量前，将比色皿放在吸收池样品侧和参考侧，盛有蒸馏水，进行空白校正。
然后按下【AUTOZERO】键，将测量值设为“0ABS(100%)”。
2.在“模式菜单”下，选择【3.定量】键，进入“测量参数配置屏幕”，引用上一次的标准曲线。
如果标准曲线有改变，在“模式菜单”下，按下【F1】键调入需要的标准曲线。
接着按下【F3】键，进入样品测量屏幕，或在参数配置屏幕下按下“START/STOP”键进行样品测量。
3.样品测量后，按下【F4】键保存测量数据，或按下【CE】清除当前数据。
4.最后按下【RETURN】键返回“模式菜单”，关闭主机电源。
5.在测定或100%T（0Abs）校准时，保持样品室盖闭合。
6.定量测定完毕后，多次按下RETURN键返回至“测定参数设置”界面，系统显示“是否删除数据”，选择“是”。
上海元析UV5100紫外-可见分光光度计的使用
UV/VIS5100紫外-可见分光光度计的使用UV5100是由上海元析仪器有限公司生产的紫外-可见分光光度计，因波长范围是：200～1000nm的连续光谱，所以能在紫外、可见、近红外光谱区区域对样品物质作定性和定量分析。
一、UV/VIS-5100型分光光度计的性能指标波长范围：200nm-1000nm光谱带宽：4nm波长精度：≤±2nm波长重复性：≤0.5nm光度准确度：±0.5%T光度重复性：0.3%T稳定性：0.003A/h杂散光：≤0.2%T数据输出：USB打印输出：并行口显示系统：128×64位液晶显示器光源：钨灯、氘灯透射比范围：0.0－200%(T)吸光度范围：-0.3－3（A）浓度显示范围：0-9999（C）外形尺寸：430×300×160mm二、仪器的外部结构功能键描述：按钮功能用于测量模式（T，A，C，F）切换用于系统参数设定用于波长设置校空白键，用于调0.000Abs和100.0%T用于打印测试结果及数据删除上键，选择向上移动下键，选择向下移动返回上级菜单和停止键确认键，用于数据和菜单的确认三、仪器的基本操作1、开启和自检（1）仪器开启用电源线连接上电源，打开仪器开关（位于仪器的后右侧），仪器开机后进入系统自检过程。
（2）系统自检在自检状态，仪器会自动对滤光片、灯源切换、检测器、氘灯、钨灯、波长校正、系统参数和暗电流进行检测。
注：如果某一项自检出错，仪器会自动鸣叫报警，同时显示错误项，用户可按任意键跳过，继续自检下一项。
（3）系统预热仪器开机后，因电器件需要预热一定的时间后方可达到稳定状态；另外氘灯周围环境也需要一定时间方能达到热平衡，所以仪器需要预热约20分钟后，方可正常使用。
自检结果后，仪器进入预热状态，预热时间为20分钟，预热结束后仪器会自动检测暗电流一次。
预热时可以按任意键跳过。
（4）进入系统主菜单仪器自检结束后进入主界面。
详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项
详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项紫外可见分光光度计是一种科学仪器，它可以测量物质分子吸收光谱。
它还可以用来测量样品中物质的含量，以及检测物质的结构和化学性质。
作为一种重要的分析工具，它在化学、生物学、制药等领域中都得到了广泛的应用。
本文详细解析了紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项。
紫外可见分光光度计是一种原理上可以让用户对紫外线和可见光源中某些分子作出反应、精确测量样品中物质含量的仪器。
它是专业用来测量物质分子吸收光谱的仪器。
根据吸收光谱，用户可以精确测量样品中物质的含量，以及计算出样品的结构和化学性质。
它的使用对于科学研究和制药领域都有很重要的意义。
紫外可见分光光度计的使用非常简单，但需要遵循一些基本的步骤和注意事项。
首先，使用者要正确安装、组装紫外可见分光光度计，其次，要确保紫外可见分光光度计处于稳定的工作状态。
仪器应该置于室内，且要保持不变温，以避免对测量结果造成干扰。
其次，使用者要根据实验要求调整紫外可见分光光度计的参数，以获得最真实的测量结果。
最后，使用者要按照说明书的要求进行定期的维护保养。
另外，在使用紫外可见分光光度计过程中，还应注意以下几点：1.不要将样品放置在仪器上方，以免影响读数的准确性。
2.使用前应将样品放置在室温下2小时以上以便读数准确。
3.实验中所用样品不能带有油脂、杂质等物质，以免影响测量结果。
4.使用高温时，应注意样品具有一定的稳定性，以免受温度的影响而产生误差。
5.实验中如遇到仪器故障，及时反馈给生产厂家，以便及时进行维修。
综上所述，紫外可见分光光度计的正确使用对于科学研究和制药领域都具有重要的意义。
因此，使用者在使用紫外可见分光光度计时一定要遵守上述步骤和注意事项。
只有正确使用，才能得到更准确、更可靠的测量结果，以提高科学研究和制药水平。
紫外-可见分光光度计使用、维护的标准操作规程
紫外-可见分光光度计使用、维护的标准操作规程
【目的】保证紫外-可见分光光度计的正常使用。
【适用范围】紫外-可见分光光度计。
【规程】
1.使用方法
（1）接通电源，打开紫外分光光度计的开关，预热半小时。
（2）打开工作站电脑，在桌面上打开UVPC 图标。
（3）在 UVPC工具栏中的configure中选择parameter 中进行参数设置。
（4）在 UVPC工具栏中的configure中的PC CONFIGURE中PHOTOMETER。
（5）在 UVPC工具栏中的configure中的UTILITY点ON开始参数检测。
（6）检测完毕显 OK即可开始工作。
（7）检测时应放入空白对照及样品杯。
（8）检测结束后，关闭电源。
2.维护
（1）使用完毕，应及时用适当溶剂清洗石英比色杯，最后用无水乙醇冲洗。
（2）将干燥袋放入比色腔，保持仪器清洁。
3.校准每年由计量部门专人校准，合格后使用。
紫外可见分光光度计的使用
紫外可见分光光度计的使用
• 分光光度计的结构类型:单光束分光光度计和双光束分光 光度计 • 不同相态样品的分析 • 比色皿的使用常识 • 吸光度读数范围 • 吸收波长的选择 • 参比溶液的选择 • 狭缝大小的选择 • 重复测定次数和波长扫描速度 • 测定波长间隔 • 标准曲线法和标准加入法 • 时间扫描功能
无吸收 无吸收 有吸收 有吸收
外加试剂 吸收情况
无吸收 有吸收 无吸收 有吸收
参比溶液 选择
纯溶剂空白 试剂空白 试液空白 加入掩蔽剂的溶液
狭缝的选择
• 狭缝的大小会影响到仪器的信噪比和标准曲线的 线性范围。 • 狭缝过大，通常会使线性范围变小，特别是当不 在最大吸收波长位置测定时更是如此。 • 狭缝过小，造成入射光能量过小，信噪比变差， 基线平直度和测量数据的重复性会变差。 • 此外，还需要考虑样品吸收峰宽度的影响。通常 单波长测定时，一般选择在最大吸收波长位置， 线性范围容易满足，可选择较宽的狭缝（1-2nm） 多波长测定时，很难同时在所有波长都满足线性 范围要求，应选择较小的狭缝。
• 在扫描光谱时需要选择，可根据样品吸收 峰的宽度进行选择，峰宽较大时，可选择 较大的波长间隔。反之亦反。通常每个正 常的吸收峰应该用不少于30个数据点表示 出来。
重复测定次数和波长扫描速度
• 对吸光度不是很大的样品，或者狭缝不是 很小，这时检测器检测的光信号的强度是 比较大的，重复性较好，可选择较少的重 复次数。相反，如果样品吸光度很大，狭 缝很小，选择较大的重复次数可获得更好 的结果。 • 一般可以用快速扫描，当信噪比较差，谱 峰窄且多时用慢速扫描。
测定波长间隔
• 原始待测溶液(含有Fe2+及其它共存组分)