四大类微生物培养时间
微生物学(周德庆版)第四章 微生物的营养和培养基
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2．鉴别性培养基（differential medium） 培养基中加能与某一菌的无色代谢产物发
生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使 该菌菌落与外形相似的它种菌落相区分的 培养基，就称鉴别性培养基。
丙酮酸+P-HPr
HPr是一种低分子量的可溶性蛋白，结合在 细胞膜上，具有高能磷酸载体的作用。
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2、糖被磷酸化后运入膜内
膜外环境中的糖先与外膜表面的酶2结合，再
被转运到内膜表面。这时，糖被P-HPr上的
磷酸激活，并通过酶2的作用将糖-磷酸释放
到细胞内。
酶2
P-HPr+糖 糖-P +HPr
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以纤代糖 以国代进
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二、4 种方法
生态模拟 参阅文献 精心设计 试验比较
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二、培养基的种类
培养基种类繁多，根据其成分、物理状态和用
途可将培养分成多种类型。
一类利用动、植物或微生物体或其提取物制
（
成的培养基，是一类营养成分复杂,难以说
一 ）
天然培养基
出其确切成分的培养基。
按
牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基
(NH4)2SO4, NH4NO3等 KNO3等 空气
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按氮源的不同生物可分为： 氨基酸自养型生物：能利用尿素、铵盐、硝酸盐甚至氮 气的生物 氨基酸异养型生物：现成氨基酸
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3.能源 能源：能为微生物的生命活动提供最初能量来源营养 物或辐射能，称为能源。
无机物：化能自养菌的能源：NH4+、NO2-、S、H、H2S、Fe2+等。 单功能营养物、双功能营养物、三功能营养物
微生物学简答题
微生物学简答题1、G+菌和G-菌细胞壁结构和组成上有何差别，以及与革兰氏染色反应的关系。
结构：G+菌细胞壁厚，仅1层；G-菌细胞壁薄，有多层。
组成：G+菌细胞壁含有肽聚糖且含量高、磷壁酸；G-菌细胞壁薄含有肽聚糖但含量低，不含磷壁酸，但含有脂多糖、膜蛋白等。
与革兰氏染色反应的关系：G+菌细胞壁含有肽聚糖且含量高，经酒精脱色时，失水网孔变小，能够阻止结晶紫和碘复合物被洗脱；而G-菌细胞壁的外膜易被酒精洗脱，内层肽聚糖层薄，不能够阻止结晶紫和碘复合物被洗脱。
2、什么是糖被，其成分是什么，有何功能。
成分：多糖和糖蛋白；功能：保护作用，贮藏养料，作为透性屏障和离子交换系统，表面附着作用，细菌间的信息识别作用，堆积代谢废物；3、试述一位著名的微生物学家对微生物学的主要贡献？你从中有何启发。
XXX：发酵的实质；否定了生物的自然发生说；巴斯德消毒法；疫苗生产法。
启发：勇于实践，实践－理论－实践。
勤奋。
不畏权威。
4、简述原核微生物和真核微生物的主要区别?原核微生物：是指一大类细胞核无核膜包裹，只要称为核区的袒露的DNA的原始的单细胞生物，包括古细菌和真细菌两大类。
真核微生物：是指细胞核具有核膜，能进行有丝分裂，细胞质中存有线粒体或同时存在叶绿体等多种细胞器的微生物，包括真菌、微藻类、原生动物、地衣等。
原核微生物与真核微生物的主要区分：比较项目真核微生物原核微生物细胞大小较大（通常直径＞2微米）较小若有壁，其主要成分纤维素、几丁质多半为肽聚糖细胞膜中甾醇有无（支原体例外）细胞膜含呼吸和光组分无有细胞器有无鞭毛结构如有则粗而庞大（9+2型）如有则细而简单核膜有无DNA含量底（约5％）高（约10％）组卵白有少核仁有无染色体数一般大于1一般为1有丝分裂有无减数分裂有无鞭毛举动方式挥鞭毛旋转马达式遗传重组方式有性生殖、准性生殖转化、转导、接合繁育方式有性、无性等多种一般为无性（二平分裂）5、试述革兰氏染色方法步调及道理。
微生物学复习资料
微生物学复习资料第一章原核微生物的形态、构造和功能伴孢晶体：少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规那么形的碱溶性蛋白质晶体，称为伴孢晶体〔即ð内毒素〕。
L型细菌：在某些环境条件下〔实验室或宿主体内〕通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。
1．没有完整而坚韧的细胞壁，细胞呈多形态，有些能通过细菌滤器，故又称“滤过型细菌〞。
对渗透敏感，在固体培养基上形成“油煎蛋〞似的小菌落〔直径在左右〕古生菌：又称古细菌，是一个在进化途径上特别早就与真细菌和真核生物相互独立的生物类群，要紧包括一些独特生态类型的原核生物，如产甲烷菌及大多数嗜极菌。
革兰氏染色机制：结晶紫液初染和碘液媒染：在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。
乙醇脱色：G＋细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密且不含类脂，把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其维持紫色；G-细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，结晶紫与碘复合物的溶出，使细胞退成无色。
复染:G-细菌呈现红色，而G+细菌那么仍维持最初的紫色。
重要性:革兰氏染色有着十分重要的理论与实践意义。
通过这一染色，几乎可把所有的细菌分成革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌两个大类，因此它是分类鉴定菌种时的重要指标。
又由于这两大类细菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异，因此任何细菌只要通过简单的革兰氏染色，就可提供许多其他重要的生物学特性方面的信息。
第二章真核微生物的形态、构造和功能1子实体：是指在其里面或上面可产生无性或有性孢子，有一定外形和构造的任何菌丝体组织2菌物界：指与动物界，植物界相并列的一大群无叶绿素，依靠细胞外表汲取有机养料，细胞壁一般含几丁质的真核微生物3二级菌丝：又称气生菌丝，由基内营养菌丝长出培养基外伸向空间的菌丝。
它是担子菌中由相应的异性的初生菌丝进行体细胞接合而形成的菌丝。
微生物复习——精选推荐
1、何为微生物？具有哪些特点？微生物是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。
特点：①体积小，比表面积大；②吸收多，转化快；③生长旺，繁殖快；④适应性强，易变异；⑤种类多，分布广。
2. 何为三域学说（三原界分类系统）？三域学说（三原界分类系统），认为所有生物存在一个共同祖先，由它分三条进化路线，形成了三个域（原界）：古细菌域（原界）、真细菌域（原界）和真核生物域（原界）。
3. 在微生物学发展过程中，巴斯德和柯赫有哪些贡献？何为柯氏法则？（1）巴斯德：微生物学奠基人之一，彻底否定了微生物“自生说”学说；完善预防免疫接种；证实发酵是由微生物引起的；发明巴斯德消毒法等。
（2）柯赫：微生物学奠基人之一，建立了微生物学的基本研究技术；对病原细菌的研究做出了突出的贡献，提出了柯赫原则（柯氏法则）。
（3）柯氏法则：是证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则，内容如下①在每一病例中都出现这种微生物；②必须能自原寄主分离出这种微生物，并在培养基中培养出来；③用已纯化的纯培养微生物人工接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会重复发生；④从试验发病的寄主中能再度分享并培养出这种微生物。
10月30日1. 解释名词：（1）细菌：是一类细胞型、细而短、结构简单、细胞壁坚韧、以二等分裂方式繁殖和水生性较强的原核微生物。
（2）L-型细菌：指那些实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株。
（3）原生质体：指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹着的圆球状渗透敏感细胞，一般由G+形成。
（4）球状体（原生质球）：指用溶菌酶处理细胞，还残留部分细胞壁的球状体，一般由G-形成。
（5）质粒：指原核生物基因组外具有独立复制能力的闭合环状的双链DNA。
（6）原核：指原核生物所特有的无核膜结构、无固定形态的原始细胞核。
2. 阐述G＋菌及G－菌的细胞壁结构差异，并由此说明革兰氏染色的原理。
微生物的知识,知识题
第六章微生物的生长及其调控一、填空题1．微生物群体的生长可用其、、或2．测定微生物生长量有直接法的和，间接法的3．在测微生物生长量的生理指标法中，最重要的是，另、、和等等作指标来测定。
4．在光学显微镜下使用可直接对、的细胞以及___ 和的孢子进行计数，但计数值是数。
5．酵母菌经作活体染色后，活细胞在光学显微镜下呈色，死细胞呈色；细菌经染色后，活细胞在紫外光显微镜下会发出色荧光，死细胞则发出色荧光。
6．用平板菌落计数法作活菌计数，通常可用两种制作平板的方法：①，适合于对进行计数；②，适合对——进行计数。
菌落计数的单位一般用cfu表示，其英文全称是。
7．获得微生物同步生长的方法主要有两类：①，如等；②，如等。
8．典型生长曲线是以——的对数值作纵坐标，以作横坐标而绘成的曲线，由、、和四个阶段组成。
9．丝状生长的真菌在定容积的液体培养基中的生长规律是一条不典型的生长曲线，与典型生长曲线相比，它缺乏，与此相当的仅是一段，其特点是与成直线关系。
10．影响延滞期长短的因素主要有、、和四种。
11．典型生长曲线中的指数期主要有三个特点：①，②，③。
12．指数生长期有三个重要参数，即、和。
13．K．coli的代时约为min，一个细胞经2h繁殖后，可变为个；Saccharomyces cerevisiae的代时约为min，一个细胞经6h分裂后，可变为个。
14．影响指数期微生物代时长短的主要因素有四个：①，②，③____和④。
15．生长曲线中稳定期到来的四个主要原因是；①，②，③，④_____等。
16．在微生物的生产实践中，为获得优良接种体(“种子”)，多取用期的培养物；为获得大量菌体，多取用期的培养物，为取得高产量的次生代谢产物，多取用____ 期的培养物。
17．在生产实践中，为缩短微生物生长的延滞期，所采用的主要措施为和。
18．在典型的生长曲线中，细胞形态多变是在期，细胞浓度最高是在____期，细胞RNA含量最高是在期，代时最短是在期，细胞体积最大是在_____期。
沈萍微生物学第二章
放线菌形态
放线菌生活史
放线菌孢子丝
2、古细菌
3. 原核生物的细胞大：纳米（nm10－9m） 细胞大小的形象比较
大肠杆菌：0.5×2um 芝麻：3mm
常见细菌的大小
球菌：直径 0.5×2um 杆菌：宽×长 0.5～1×1～5um 螺形菌：宽×长 0.5～1×1～50um
六，微生物的保藏技术 1.保藏的目的 2.保藏的原理 3.保藏的方法 传代培养 4℃ 冷冻保藏 -196℃， - 70℃ ， -20~-30℃ 干燥保藏 沙土管，安瓿管 其他方法
第三节
显微镜下的微生物
一， 细菌
细菌的定义： 以二分裂为主要繁殖方式的单细胞原核 微 生物。 1.细菌的形态和排列 三种基本形态：
杆菌
杆菌的基本形态
短杆状、长杆状、棒杆状、梭状杆状、月亮状、竹节状 等；按杆菌细胞繁殖后的排列方式则有链状、栅状、 “八”字状等
杆菌细胞的排列方式
链杆、栅状、八字状、鞘衣包裹的丝状等
短杆菌
长杆菌
梭状芽孢杆菌
Scanning electron micrographs illustrating external features of the rodshaped bacterium E. coli.
球状
一个分裂面 二个分裂面 三个分裂面 无定向分裂面
单杆，链杆，栅状 ，八字 弧菌，螺旋菌
杆状， 螺旋状
单球菌
细胞分裂沿一个平面进行， 新个体分散而单独存在. 如尿素微球菌
显微镜下示意图
双球菌
细胞沿一个平面分裂， 新个体成对排列. 如肺炎双球菌
四联球菌
细胞分裂是沿两个相垂直的平 面进行，分裂后每四个细胞特 征性地连在一起，呈田字形. 如四联微球菌
13常见微生物的培养特征
放线菌的菌落特征
菌落较小，表面丝绒状有皱折，或粉末状，干燥、较厚，不透明 菌落与培养基结合紧密，菌落正反面、中心与边缘颜色常不一致，常具泥腥味
酵母菌的菌落特征
菌落大而厚，圆形，边沿齐整，表面、湿润、粘稠，质地均匀，色泽多 为红色或乳白色，菌落与培养基结合不紧密，常具酒香味
种；颗粒状的典型菌落，菌落的正反面颜D色：往游往动不一放致线，菌菌；落
D：边卡缘那培养霉基素的链平霉面菌有变；形现象；有特E殊：气小味单（胞土霉菌气；味）
E：等除。虫链霉菌；
F：皱双孢马杜拉放
在 F：生液磺体酸培链养霉基上菌：集结成团，有些线沿菌试管壁生长形成菌
膜，也有沉淀，无混浊。
酵母？菌（菌株？？？）在 查氏琼脂平板上25 ℃培养 7d 后菌落直径18~19mm ， 圆形，边缘齐整不蔓延，表 面丝绒状并具放射状沟纹， 较厚，中央稍凸起，，菌丝 初为浅黄褐色近于淡粉红色， 老后颜色变深，有黄色渗出 液，背面呈黄褐色。
四大类细胞型微生物的菌落特征
细菌的菌落特征
基酵呈母菌浑菌浊落 状态。
细菌菌落
二、霉菌的菌落特征
由粗而长的分枝状菌丝组成,菌落疏松, 呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状,比细菌菌落大几 倍到几十倍,有的没有固定大小。
各种霉菌,在一定培养基上形成的菌落大 小、形状、颜色等相对稳定,所以菌落特征也 为分类依据之一。
基质中（培养基中）未知菌落所属微 生物类群的初步鉴别
四大类微生物培养特征观察
一、培养基分类 （一）液体培养基
（二）、半固体 培养基：
沿穿刺线生长
扩散生长
意义：用于鉴别细菌有无动力。
选修一2.1微生物实验室培养(上新课用)
⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当
⑶适宜的pH值：加入缓冲剂 细菌偏碱，真菌偏酸。
细菌培养基pH中性或偏碱性pH为：6.5-7.5，霉菌培 养基呈酸性pH为：5.0-6.0。放线菌pH为：7.5-8.5。
二 、无菌技术：
• （看教材15页回答）
• 1.获得纯净培养物的关键是什么？ • 2.无菌技术包括哪四大方面？ • 3.消毒与灭菌有什么区别？
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅 在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养 微生物吗？为什么？
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养 基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
四、大肠杆菌的纯化培养
分散成单个细胞,形成单个菌落
1.定义： 单个 固体培养基上 或少数菌体 大量繁殖
子细胞群体
酒紫8精0外℃、线、氯1气5m、in石炭酸等
物高压品蒸，汽16灭0～菌170℃ 1培～养2小基时，
100KPa、
121℃、15～30min
3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min 或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……
二、无菌技术 防止外来杂菌的污染
2.消毒与灭菌：
消毒
灭菌
较为温和理化方法， 强烈的理化方法， 定义 杀死部分有害菌体 杀死所有微生物
（不包括芽孢、孢子） （包括芽孢、孢子）
煮沸消毒法
灼烧灭菌
方法 巴10氏0℃消、毒5法~6min 化70学~7药5℃剂、30min
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四大类微生物培养时间
微生物的培养是生物学研究的一个核心技术，它具有解析微生物的
多样性、了解微生物的生长和代谢动态、以及鉴定新菌株的重要意义。
微生物的培养可以大致分为四大类：厌氧培养、真菌培养、气态培养
和兼容性培养。下面我们一一来看这些培养的时间。
一、厌氧培养
厌氧培养是最常见的微生物培养，其主要就是利用特定的厌氧生物质
培养基将厌氧革兰氏阴性菌筛选分离出来。在厌氧培养时，强烈抑制
其活性氧种类，使得厌氧条件下的革兰氏菌可以被有效分离，一般厌
氧培养大约耗时2-3天。
二、真菌培养
真菌培养是指将一些真菌类微生物培养在添加合适的碳源、氮源、矿
物质和湿度的生物基础进行培养。真菌培养要求培养基必须是密封的，
只有在规定的温度、高度适宜的湿度条件下才能培养出真菌，一般真
菌培养耗时3-4天。
三、气态培养
气态培养也叫作空气培养，指将散偶联微生物，如乙烯氧致病芽孢杆
菌、细菌和真菌等，培养在没有包装的营养培养基上，室内空气中即
可培养出来，一般气态培养时间为2-3天。
四、兼容性培养
兼容性培养又称为兼态培养，是一种混合培养，它以真菌原形生物为
主，而兼容性则是以真菌的酵母菌形式存在的。在兼容性培养中，培
养基由抗生素和氮源组成，抗生素可以防止其它微生物的污染，而氮
源则可以使真菌生长，一般兼容性培养耗时4-5天。
总结：
1、厌氧培养耗时2-3天；
2、真菌培养耗时3-4天；
3、气态培养耗时2-3天；
4、兼容性培养耗时4-5天。
微生物的培养是生物学研究中不可缺少的一部分，而四大类微生物培
养也是十分重要的，上面就是简单地介绍了它们的培养时间。希望对
您有所帮助。