计算杀灭对数值的时候
消毒剂外科手消毒试验方法和要求
消毒剂外科手消毒试验方法和要求ICS ,GB/T中华人民共和国国家标准GB/T××××-2009消毒剂卫生手消毒试验方法和要求Test method and requirement ofHygienic hand antisepsis for disinfectants(送审稿)2009-××-××发布 2009-××-××实施中华人民共和国卫生部发布GB/T××××-2009前言本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准由中华人民共和国卫生部负责解释。
本标准负责起草单位:福建省疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所。
本标准参加起草单位:纳润(厦门)科技有限公司。
本标准主要起草人:林立旺、黄育红、张流波、陈路瑶、李新武、周游、陈祖毅、陈景川本标准为首次发布。
GB/T××××-2009消毒剂卫生手消毒试验方法和要求 1( 范围菌)杀灭(或清除)效果检本标准规定了用于卫生手消毒产品对手部外来污染菌(暂居测方法及其评价标准。
本标准适用于医学上或日常生活、工作中需要消毒情况下使用的卫生手消毒产品，包括涂抹、擦洗及免洗手产品。
2. 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本版本。
中华人民共和国卫生部(2002年版)《消毒技术规范》EN 1499 化学消毒剂和抗菌剂卫生洗手实验方法和要求EN 1500 化学消毒剂和抗菌剂卫生擦手实验方法和要求EN 12791 化学消毒剂和抗菌剂外科手消毒实验方法和要求WS/T 313 医务人员手卫生规范3. 定义3.1 卫生手消毒(hygienic hand antisepsis)一种手污染后处理过程，指涂抹或擦洗手消毒产品以达到杀灭(或清除)手部暂居菌而防止其传播的处理过程。
消毒剂消毒效果及有效期验证方案
目录1.概述2.验证范围3.验证目的4.验证参考文件5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容8.结论与评价9.再验证周期1.概述1.1.本公司的洁净区分为A级、B级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有三种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、2%甲酚皂溶液。
本次验证方案将选用以上3 种消毒剂分别进行验证试验。
1.3.作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。
1.4.为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。
实验室考察部分，定量悬浮试验法适用于浸泡或液封方式的消毒方法；表面实验法适用于擦拭或喷洒方式的消毒方法。
洁净区设施表面材质有不锈钢、镀锌板及玻璃三种，故表面试验法选用不锈钢载片、镀锌板及玻璃载片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
现场考察试验部分选择冻干车间的配液间（C级洁净区）、灌装间（A/B级洁净区）、灌装间操作人员手部消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。
1.5.A/B级洁净区使用的消毒剂需经0.22〃n除菌过滤。
2.验证范围本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
3.验证目的通过消毒剂消毒效果及有效期的确认，科学制订消毒程序，以保证各洁净级别的操作间及设备外表面、人员手部按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒防止污染的效果。
4.验证参考文件《药品生产验证指南》（2003版）；《医疗机构消毒技术规范》（2012年版）；《中国药典》（2010年版）；《药品GMP指南-无菌药品》、《现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术》。
5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容7.1.验证前参与实施验证的人员必须已经接受本方案的培训且考核合格。
灭菌参数
（三）灭菌法的几个重要参数指标
1. D值——耐热参数 2. Z值——灭菌温度系数 3. FT值——T温度下的灭菌时间 4. F0值——标准灭菌时间 5. 灭菌率L（Lethal rate）（致死
F =0
t2 L(t)dt
t1
即把每一时间点的灭菌率L叠加得到
F0值， t2
或 F0=
t L(t)
t1
△t：测定的间隔时间通常取1min。
t1：升温达到100℃的时间点。 t2：冷却达到100℃的时间点。
5．灭菌率L（Lethal rate）（致死率）
1）定义：指在温度T下，灭菌1min所获得 的标准（T=121℃）灭菌时间L=D121/DT
2）物理意义
温 度 为 121℃ 时 杀 灭 90% 微 生 物 需 D121=A min,温度T时，杀灭90%的微生 物需DT=B min。即121℃曝热A min与 T℃曝热B min的灭菌效力相当。
10 Z
L=
=0.794 T120 T121
120121
D 10 10 121
Z
10
DT
6．F0的计算
1）理想状态，灭菌过程中升温、降温瞬间完成，
灭菌温度恒定不变。
则可用公式计算： FT=DT×lgN0， F0=D121×lgN0 N0：灭菌前微生物数。 2）实际上，一个产品灭菌过程总有三个阶段： 升温、保温、冷却。即灭菌过程不是始终在恒 定温度下进行。（下图）
2）测定Z值 • 至少用3个不同温度，分别测出某一个微
干热灭菌fh值计算公式
干热灭菌fh值计算公式干热灭菌（Dry Heat Sterilization）是一种常用的灭菌方法，广泛应用于医疗、制药和食品工业等领域。
干热灭菌的关键在于控制温度和时间，以达到有效杀灭微生物的目的。
在干热灭菌过程中，fh值被用作评估灭菌的有效性和安全性。
首先，我们来了解一下干热灭菌的原理。
干热灭菌是通过高温使微生物的代谢受到抑制，细胞内的生物大分子如蛋白质、核酸和脂质因其离子键、氢键、范德华作用等非共价键的断裂而丧失其正常生物活性，从而达到杀灭微生物的效果。
干热灭菌的优点是操作简单、成本低廉、保持产品原有质量的同时，还能灭杀各种类型的微生物。
然而，要确保干热灭菌对微生物的杀灭达到安全的水平，则需要通过fh值的计算来进行验证。
fh值是干热灭菌过程中的一个重要指标，用来衡量杀灭细菌孢子的效果。
fh值的计算公式为：fh = (T - T0) / 10其中，T表示灭菌器内最高温度，T0表示微生物的最低死亡温度。
fh值越大，说明干热灭菌杀灭微生物的效果越好。
在进行fh值的计算时，我们需要注意以下几个方面。
首先，要选择适合的细菌孢子进行试验，常用的有芽孢杆菌、枯草杆菌等。
其次，要确保试验的环境和条件符合灭菌器的使用情况，包括温度、时间等。
同时，还需要进行多次试验取平均值，以提高评估的准确性和可靠性。
实际操作中，我们可以根据产品的特性和要求来确定fh值的目标范围。
一般来说，对于不同的产品，fh值会有不同的要求。
例如，对于医疗器械，通常要求fh值达到3以上才能被认为是有效的灭菌过程。
这样可以确保在使用过程中不会存在微生物污染的风险。
总之，干热灭菌是一种常用的灭菌方法，fh值的计算是评估其有效性和安全性的重要指标。
通过合理选择试验菌种、控制试验条件和多次试验取平均值，我们可以准确计算出fh值，从而确保干热灭菌过程的效果达到需求，有效保证产品的安全和质量。
利用SPSS软件计算杀虫剂的LC50
利用SPSS软件计算杀虫剂的LC50利用SPSS软件计算杀虫剂的LC50杀虫剂是一种用于控制和消灭害虫的化学物质。
在农业生产中，杀虫剂的使用已成为一种常见的做法，以保护农作物免受昆虫害虐。
然而，杀虫剂的使用也可能对环境和人类健康造成一定的风险。
因此，研究杀虫剂的毒性及其在环境中的寿命是十分重要的。
确定杀虫剂的毒性级别是评估其安全性的关键步骤之一。
在这个过程中，LC50（致死质量浓度的中位数）是常用的参数，用于表示某种化学物质对一定生物群体的毒性。
它是指在特定时间段内，该化学物质对一半生物体造成致死效应所需的浓度。
为了计算杀虫剂的LC50，首先需要进行毒性测试。
测试中，一定数量的昆虫被暴露在一系列不同浓度的杀虫剂溶液中，观察一定时间后死亡的数量。
根据观察到的死亡数量和浓度的相关性，可以利用SPSS软件生成一条死亡曲线。
在SPSS软件中，首先需要将实验数据输入到数据编辑器中。
数据编辑器是一个用于录入、编辑和管理数据的表格。
每行代表一个实验样本，每列代表一个变量。
在这个实验中，我们需要记录杀虫剂浓度和对应的昆虫死亡数量。
接下来，我们使用SPSS软件的统计功能来计算LC50值。
在“分析”菜单下选择“回归”，然后选择“曲线估计”。
在曲线估计对话框中，我们选择死亡数量（因变量）和杀虫剂浓度（自变量），然后点击“确定”。
SPSS软件将根据输入的数据和选择的模型，在图表上绘制出一条曲线。
曲线估计的结果中，我们可以得到代表LC50的浓度值。
该值表示杀虫剂对一半昆虫的致死浓度。
通过利用SPSS软件计算杀虫剂的LC50，我们可以更准确地评估其毒性水平。
这不仅有助于农业生产中对杀虫剂的使用和管理，还可以为保护环境和人类健康提供科学依据。
然而，值得注意的是，利用SPSS软件计算LC50值只是对杀虫剂毒性的初步评估。
在实际应用中，还需要综合考虑其他因素，如目标生物的特性、杀虫剂在环境中的分解和转化等。
此外，不同昆虫对杀虫剂的敏感性也会有所差异，因此在实际应用中也需要结合具体情况进行调整。
消毒剂消毒效果及有效期验证方案要点
1.概述2.验证范围3.验证目的4.验证参考文件5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容8.结论与评价9.再验证周期1.概述1.1.本公司的洁净区分为A级、B级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有三种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、2%甲酚皂溶液。
本次验证方案将选用以上3种消毒剂分别进行验证试验。
1.3.作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。
1.4.为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。
实验室考察部分，定量悬浮试验法适用于浸泡或液封方式的消毒方法；表面实验法适用于擦拭或喷洒方式的消毒方法。
洁净区设施表面材质有不锈钢、镀锌板及玻璃三种，故表面试验法选用不锈钢载片、镀锌板及玻璃载片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
现场考察试验部分选择冻干车间的配液间（C级洁净区）、灌装间（A/B级洁净区）、灌装间操作人员手部消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。
1.5.A/B级洁净区使用的消毒剂需经0.22pm除菌过滤。
2.验证范围本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
3.验证目的通过消毒剂消毒效果及有效期的确认，科学制订消毒程序，以保证各洁净级别的操作间及设备外表面、人员手部按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒防止污染的效果。
4.验证参考文件《药品生产验证指南》（2003版）；《医疗机构消毒技术规范》（2012年版）；《中国药典》（2010年版）；《药品GMP指南-无菌药品》、《现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术》。
5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容7.1.验证前参与实施验证的人员必须已经接受本方案的培训且考核合格。
见附表1。
灭菌f0值
灭菌f0值
灭菌f0值指的是在给定温度下，需要多长时间才能灭菌一份
生物负荷（例如细菌、孢子）的值。
f0值是一个衡量灭菌效
果的指标，常用于评估灭菌过程的有效性。
在灭菌过程中，常用的方法是使用热力灭菌（如蒸汽灭菌或干热灭菌）或化学灭菌剂（如乙醛或过氧化氢）。
对于热力灭菌，f0值是通过计算在给定温度下所需的时间来确定，以确保生
物负荷完全被杀灭。
计算f0值的公式为：f0 = (t-T)/z
其中，t是实际灭菌时间（以分钟为单位），T是参考温度
（以摄氏度为单位），z是生物指数。
生物指数是一个实验性的数值，代表了特定微生物杀灭速度的变化情况。
它可以由实验室的研究和数据分析确定，以确保灭菌过程的有效性和安全性。
医用超声探头表面消毒要求与效果评价方法
医用超声探头表面消毒要求与效果评价方法1范围本标准规定了医用超声探头表面消毒要求、消毒效果评价、消毒方法评价和消毒评价的检测方法本标准适用于各级各类医疗机构使用的医用超声探头。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注明日期的版本适用本文件。
凡是不注期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。
GB 15982《医院消毒卫生标准》WS/T327—2011消毒剂杀灭分枝杆菌实验评价要求WS/T367—2012医疗机构消毐技术规范《消毒管理办法》2002年原卫生部《消毒技术规范》2002年版原卫生部《基层医疗机构医院感染管理基本要求》（2013) 国家卫生和计划生育委员会3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1医用超声探头医学超声诊断仪将高频电能转换为超声机械能向外辐射并接收超声回波将声能转换为电能的一种声-电转换器件。
本标准所述的医用超声探头，包括医用超声诊断仪上所使用的所有类型的探头。
3.2医用超声探头感染风险程度分类本标准仅根据医用探头被污染和传播污染导致的风险程度将医用探头分为低度风险、中度风险及高度风险三类3.2.1低度风险医用超声探头接触完整皮肤的医用超声探头3.2. 2中度风险医用超声探头接触粘膜或者不完整皮肤的医用探头。
3.2.3高度风险医用超声探头接触无菌组织、器官或者无菌医疗操作区域的医用探头。
4 消毒要求 4 1 医用超声探头应实行一人一用一消毒，消毒作用时间应≤2min。
4.2 低度风险医用超声探头应在表面清洁的基础上进行消毒。
4.3 中度风险医用超声探头应在表面清洁的基础上进行高水平消毒并使用无菌保护套/膜。
4.4 高度风险医用超声探头应在表面清洁的基础上进行高水平消毒并使用无菌保护套/膜。
4.5 医用超声探头表面消毒使用的消毒产品应符合国家法律法规、规范和本标准要求，与医用超声探头有良好的生物相容性并对人体无伤害。
5 消毒效果评价5.1低度风险医用超声探头表面消毒效果应符合GB 15982要求，细菌菌落总数＜200CFU/件。
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计算杀灭对数值的时候
计算杀灭对数值的时候，取小数点后两位值，可以进行数字修约。
如果消毒试验组消毒处理后平均生产菌落数小于等于1时，其杀灭对数值，即大于等于试验前对照组平均活菌浓度的对数值。
（6）有机干扰物质：按30g牛血清白蛋白中加入1000ml蒸馏水的比例配制约100ml，溶解后用的无菌滤膜进行过滤除菌后使用，未用完的可于2-8℃冰箱中保存。
（1）菌试验组：取无菌大试管加入菌悬液，再加入的有机干扰物质，分别用无菌吸管吸取%的新洁尔灭消毒液，加入试管中，迅速混匀并立即计时。
待试验菌与%的新洁尔灭消毒液相互作用时，吸取试验菌与消毒剂的混合液，加于经灭菌的硫代硫酸钠-生理盐水溶液中，混匀。
试验菌与消毒剂混合液经硫代硫酸钠-生理盐水溶液作用10min 后，吸取样液，按活菌培养计数测定方法测定存活菌数，每管样液接种2个平皿即可。
如果菌液浓度较高时，可进行10倍系列稀释后，在进行活菌培养计数，作为试验组，其计数结果为CX。
（2）阳性对照组：用磷酸盐缓冲液代替的新洁尔灭消毒液与菌悬液、有机干扰物质混合后，取混合液与硫代硫酸钠-生理盐水溶液反应，作用10min后。
计数方法同试验组，计数结果为C0。
（3）阴性对照组：吸取此次试验用的纯化水、有机干扰物质、磷酸盐缓冲液混匀，混匀后取混合液与硫代硫酸钠-生理盐水溶液作用10min后，吸取混合液，按活菌培养计数测定方法测定存活菌数，作为阴性对照。
（4）培养：所有用细菌试验的样品均放入30-35℃培养箱中培养，培养48小时观察结果；用真菌试验的样品放入23-28℃培养箱中培养，培养72小时观察结果。
4、讨论
由结果可以看出通过中和剂中和效果试验可以确定，每升PBS缓冲液中加入10g组氨酸、50ml吐温-80、5g卵磷脂可以中和新洁尔灭消毒液的消毒效果，因此，在日常消毒中应
该避免以上物质的混入。
由消毒剂定量悬浮试验结果可以得出新洁尔灭消毒液能够在10分钟内使所有试验菌的数量至少下降%，说明该消毒剂的消毒效果能达到要求，能够用于使用环境日常的清洁消毒。
消毒剂对物体表面消毒效果验证
消毒剂对物体表面模拟现场鉴定试验
车间用于该消毒剂消毒的物体表面主要有不锈钢设备表面、地面、墙面以及呼吸袋，经过小试，将高浓度菌液（>104cfu/ml）涂抹于不锈钢设备表面、地面、墙面及呼吸袋，选择回收率较高的载体作为物体表面消毒效果试验室部分的试验载体。
判断标准：回收菌液浓度：>103cfu/ml。
（1）试验所需要用的试剂
中和剂：活菌计数用培养基：TSA培养基消毒剂配制用水：纯化水
（2）试验所需要用的仪器
刻度吸管、移液器、电动混匀器、计时器、培养箱、规格板（用不锈钢材料制备，中央留一×的空格作为采样部位）、无菌棉签、无菌接种环
（3）试验所需要用的菌种
本次试验主要是验证该消毒剂对物体表面微生物的消毒效果，故选择金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌作为试验菌
（4）试验所需要用的消毒液的浓度及作用时间
%的新洁尔灭消毒液作用30s
（5）试验所需要用到的场所
微生物实验室阳性间
（6）试验的操作步骤（以浓度为%的消毒剂对金黄色葡萄球菌作用30s为例）
菌悬液：浓度为5×105cfu/ml-5×106cfu/ml
试验组：取大小合适的无菌呼吸袋作为试验样本，将无菌规格板按压在样本上，用无菌棉签沾以菌悬液均匀涂抹被试验表面的6区块
（各区块25cm2）。
用%的消毒剂对三个区块表面进行喷雾消毒，喷雾的距离约为10cm，以尽量使喷到样本上的雾粒大小和数量一致，消毒后，将无菌棉签在5ml的中和剂试管中沾湿，分别对3个消毒区块进行涂抹采样，每区块横竖往返各8次。
采样后以无菌操作方式将棉签剪入原中和剂试管中，电动混匀器上混匀20s，吸取上述洗液，按活菌培养计数方法测定存活菌数，每管接种2个平皿，作为试验组，必要时进行稀释。
阳性对照组：从6个区块中选取其他3个区块，用磷酸盐缓冲液代替消毒剂对三个区块表面同法操作，之后将无菌棉签在5ml的中和剂试管中沾湿，分别对3个区块进行涂抹采样，每区块横竖往返各8次。
采样后以无菌操作方式将棉签剪入原中和剂中，电动混匀器上混匀20s，吸取上述洗液，按活菌培养计数法测定存活菌数，每管接种2个平皿，作为阳性对照组，必要时进行稀释。
阴性对照组：用一只棉签，分别蘸取同批纯化水，以无菌方式将棉签采样端剪入硫代硫酸钠-生理盐水溶液中，在混匀器上震荡20s，做适当稀释后，按活菌培养计数方法测定存活菌数，每管接种2个平皿，作为阴性对照。
培养：所有试验样本均在30-35℃培养箱中培养，培养48h观察最终结果。
（7）试验要求及计算
试验须重复三次，计算各组的活菌数（cfu/片），并换算为对数值（N），然后按计算公式杀灭对数值KL=对照组平均浓度的对数值（N0）-试验组活菌浓度对数值（NX）
（8）试验的判断标准
阴性对照组应无菌生长，阳性对照组菌数符合要求，所有样本的杀灭对数值均≥，即判定结果合格。
在每升PBS缓冲液中加入10g组氨酸，50ml吐温80，5g卵磷脂，分装，121℃、15min压力蒸汽灭菌后备用。
误差率（%）=【（?三组均数-第三组回收菌落数?+?三组均数-第四组回收菌落数?+?三组均数-第五组回收菌落数?）÷3】/三组均数
*100%
6、再验证周期
质量保证部根据验证结果确定再验证周期。
当环境监控的结果出现偏差时，应重新评估目前使用的消毒剂，必要时更换消毒剂的品种以及调整消毒剂的使用周期。
新消毒剂使用前均需经效果验证后方可使用。
4. 验证结论
验证完成之后，汇总所有检测数据，进行统计分析。
由验证部门起草验证报告，总结验证结论，并交由相关部门审核，批准。
当检测数据满足下列规定时，方可认为验证合格：
统计数据表明所有的检测数据均在规定的范围内；
如果检测数据不符合规定标准，经偏差调查发现是由与验证人员无关的因素造成的，并经审核批准。
5. 验证结果评价及建议
质量保证部负责收集各项验证、试验结果记录，根据验证、试验结果起草验证报告，报验证领导小组核对。
验证领导小组对验证结果进行综合评审，做出验证结论，发放验证证书，确认该再验证周期。
对验证结果的评审应包括：
（1）验证试验是否有遗漏。
（2）验证实施过程中对验证方案有无修改，修改原因、依据以及是否经过批准。
（3）验证记录是否完整。
（4）验证试验结果是否符合标准要求，偏差及对偏差的说明是否合理，是否需要进一步补充试验。
（1）75%乙醇：适用于一般物体消毒以及手和皮肤的消毒。
它无法杀灭细菌芽胞和病毒。
本次验证方案主要对新洁尔灭、75%乙醇等消毒剂的杀灭效果和残留进行确认验证。
消毒剂的使用要求
对于不同的消毒对象，应使用不同的消毒剂，并制定消毒程序，
消毒程序中应明确规定：（1）消毒剂的浓度及配制方法（2）消毒剂的使用条件
（3）消毒使用的设备和设施
（4）消毒操作的详细步骤
（5）消毒周期
（6）消毒效果的检测方法
但是不能杀灭细菌芽胞，属于低效消毒剂。