骨组织脱钙改良方法介绍
兔股骨头组织大切片实验标本脱钙技术
１３ 固定兼 脱 钙混 合 剂 ： ． 甲醛 １ ０ｍｌ 甲 酸 ８ １ ０ ， Ｏｍ ，
盐 酸 ７ ， 氯 化 铝 ６ 冰 醋 酸 ２ ， 理 盐 水 ０ｍ１ 三 ０ｇ， ５ｍ１ 生
１ ０ ｍ ｌ ０ ０ 。
脱 钙 后 还 需 充 分 水 洗 中 和 进 入 组 织 中 的 酸 ， 利 于 以 以 后 的脱 水 、 明 、 蜡 和 染 色 ， 水 洗 又 易 造 成 固 透 埋 而
定 不 良 组 织 的 膨 胀 变 形
２ ４ 对 于 小 块 脱 钙 不 好 骨 组 织 或 骨 组 织 中 含 有 的 ． 小 钙 化 灶 ， 在 石 蜡 包 埋 组 织 块 修 切 后 采 用 ５ 盐 可 酸 简 单 处 理 ， 达 到 快 速 脱 钙 的 目 的一 而 对 于 普 通 以
８ 乙 醇 １ ９ 乙 醇 ｉ 无 水 乙 醇 Ｉｉ 无 Ｏ ４ｈ， ５ ０ ｈ， ０ ｈ， 水 乙 醇 Ｉｉ 丁 香 油 ｉ 正 丁 醇 １ 二 甲 苯 Ｉ ０ ｈ； ０ｈ； ４ ｈ； ｉｈ， 甲苯 Ⅱｉｈ； 蜡 ｉ 切 片 厚 ６ ｍ 二 浸 ０ｈ； ｐ
馏 水 ５ ０ｍｌ ０ 。
用 脱 钙 技 术 可 有 效 解 决 这 方 面 的难 题 ２ ３ 脱 钙 方 法 有 多 种 ０ 。 类 单 纯 脱 钙 技 术 临 床 应 ． ］酸 用 比较广 泛 ， 钙 液便 于配 制 ， 格 便宜 ¨。 是 ， 脱 价 但 弱
酸脱 钙需 时较长 ， 酸 脱钙 对组织 的破坏 程度较 大 ． 强
参 考 文献 ：
表 ｌ 两 种 脱钙 液脱 钙 效 果 比较
［ ］ 郭 文 君 ， 亦 进 ． 尊 哲 ． ． 寨 诱 发 成 年 兔 段 骨 头 坏 死 的 形 １ 王 王 等 敲 态 计 量 学 研 究 ［］ 中 国件 视 学 与 图 像 分 析 ．０ ０ ５ １ ：５１． Ｊ． ２０ ， （ ）１ －８ ：： 吕 荣 ， ２ 杨 光 ． 料 不 脱 钙 石 蜡 包 埋 ． 脏 侵 泡法 对 骨 组 织 塑 明
制作骨骼组织切片的新脱钙液
制作骨骼组织切片的新脱钙液
王淑兰
【期刊名称】《延安大学学报（医学科学版）》
【年(卷),期】2009(007)003
【摘要】目的制作人体骨骼组织脱钙及脱钙组织的病理切片.方法用日常病理技术工作中常用的脱钙液与新的脱钙液对人体不同部位骨骼组织同时进行脱钙处理后,制作的病理切片显微镜下观察.结果新脱钙液制备的骨骼组织切片完整,染色鲜艳,组织结构清晰;而旧脱钙液制作的骨骼组织切片不平整,染色偏红,切片整体效果不佳.结论新的脱钙液脱钙速度快,对组织损伤小,切片染色效果好,试剂配制方法简单,值得临床推广应用.
【总页数】2页(P155-156)
【作者】王淑兰
【作者单位】延安大学附属医院病理科,陕西,延安,716000
【正文语种】中文
【中图分类】R36
【相关文献】
1.甲酸脱钙液的浓度对骨组织脱钙后切片染色效果的研究 [J], 黄勋福;韩福兰;吴燕杏;房惠琼;李启明;毛荣军
2.一种用于制作骨骼组织切片的新脱钙液 [J], 魏国联;沈贵华;孙耘田
3.混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析 [J], 吴拮;孙立国;赵成相;李静;郭国峰;吕荣
4.改良脱钙液制作脱钙骨石蜡切片与传统方法的比较 [J], 谢玲;邹丽宜;张志平;崔红晶;林坚涛
5.甲酸脱钙液的浓度对骨组织脱钙后切片染色效果的研究 [J], 黄勋福; 韩福兰; 吴燕杏; 房惠琼; 李启明; 毛荣军
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甲酸脱钙液
甲酸脱钙液简介：在组织切片过程中，一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。
这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片。
对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。
然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。
用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。
在有机酸中，甲酸、乙酸比较适合于骨髓组织脱钙。
甲酸脱钙液是一种使用范围广泛的脱钙剂，但是该法脱钙速度太慢，不适合密皮质骨的脱钙。
Leagene 甲酸脱钙液主要由甲酸、福尔马林等组成。
其优点：①对细胞核染色结果较好；②兼具脱钙和组织固定的作用；③适用于小块组织和牙齿的脱钙。
其缺点：①脱钙速度比较慢，不适合常规标本脱钙使用；②不适合密皮质骨脱钙使用；③脱钙后需要硫酸钠溶液进行碱处理。
组成：自备材料：1、 PBS2、 蒸馏水3、 5%硫酸钠溶液操作步骤(仅供参考)：1、 骨组织脱钙时，取材不易过厚。
2、 组织固定后，用PBS 清洗。
3、 组织用蒸馏水洗清洗。
4、 组织转移至甲酸脱钙液中，脱钙3～10天或更长时间。
如有必要，更换新的甲酸脱钙液继续脱钙直至终点，多数组织脱钙1周即可。
5、 用蒸馏水冲洗数次。
6、 组织立即入硫酸钠溶液进行碱处理。
7、 充分流水冲洗。
8、 常规脱水、包埋。
编号 名称 DD0012 Storage 甲酸脱钙液 500ml RT 避光 使用说明书 1份注意事项：1、厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙3~10天即可。
2、脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。
脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。
3、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。
4、每隔一段时间检测一次脱钙程度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
脱钙骨基质产品技术要求(一)
脱钙骨基质产品技术要求(一)脱钙骨基质产品技术要求1. 产品定义•脱钙骨基质产品是一种用于骨组织修复和再生的生物医药材料，具有良好的生物相容性和生物活性。
2. 材料要求•应选用经过科学处理和消毒的高纯度骨组织，确保产品的安全和有效性。
•骨组织应通过特殊的酸碱处理方法去除大部分无机成分，保留天然骨基质的生物活性。
•产品要求制备过程中使用无菌环境和无菌设备，确保产品的无菌性。
3. 物理性能要求•产品应具备一定的强度和韧性，能够支持和保护骨组织，促进骨修复。
•组织结构应具有良好的孔隙结构，有利于细胞侵入、血管生长和新骨形成。
•孔隙度和孔径大小应符合临床需求，能够提供适宜的生长环境。
•产品应具备一定的吸附性，能够吸收和释放生长因子，促进骨细胞活化和分化。
4. 生物活性要求•产品应能够诱导和促进骨细胞黏附、增殖和分化，促进新骨生成。
•具备良好的生物相容性，不会引发明显的异物反应或排斥反应。
•钙离子释放速率应适中，能够调节细胞信号转导通路，促进骨细胞活动。
5. 临床应用要求•产品应符合相关法规和规范，具备合法的生产销售许可证明。
•应经过临床验证，证明其有效性和安全性。
•使用方法清晰明确，便于医务人员操作，减少潜在风险。
示例作为一个资深创作者，我曾参与过一个脱钙骨基质产品的研发项目。
根据上述技术要求，我们选用了经过科学处理和消毒的高纯度骨组织作为原料，通过特殊酸碱处理去除无机成分，并保留了天然骨基质的生物活性。
制备过程中使用了无菌环境和无菌设备，确保了产品的无菌性。
在物理性能方面，我们设计了一种具备强度和韧性的结构，能够支持和保护骨组织，并且具有良好的孔隙结构。
这些孔隙有助于细胞侵入、血管生长和新骨形成，而且孔隙度和孔径大小也符合临床需求。
生物活性方面，我们的产品能够诱导和促进骨细胞的黏附、增殖和分化，从而促进新骨生成。
同时，产品具备良好的生物相容性，不会引发明显的异物反应或排斥反应，钙离子的释放速率适中，能够调节细胞信号转导通路，促进骨细胞的活动。
骨组织病理制片三种脱钙液的比较
骨组织病理制片三种脱钙液的比较
白直成;鲁萍;顾栋桦;平金良;董吉顺
【期刊名称】《中国现代医生》
【年(卷),期】2011(49)29
【摘要】目的比较三种文献报道的改良脱钙液的效果,获得简单、便捷、适用于临床病理制片的脱钙液.方法考察在常温及37℃恒温条件下,三种改良脱钙液对骨组织的脱钙及染色效果.结果常温条件下,三种改良脱钙液的脱钙时间为72h左右,组织结构损伤小,改良脱钙液Ⅰ、Ⅲ染色效果佳；37℃恒温条件下,三种改良脱钙液的脱钙时间为8～14h,改良脱钙液Ⅰ镜下组织结构破坏,改良脱钙液Ⅱ组织结构破坏且染色效果不佳,改良脱钙液Ⅲ组织结构损伤小,染色效果佳.结论37℃恒温条件下,改良脱钙液Ⅲ是较适合于临床病理制片的脱钙溶液.
【总页数】2页(P75-76)
【作者】白直成;鲁萍;顾栋桦;平金良;董吉顺
【作者单位】浙江省湖州市中心医院病理科,浙江湖州313000;浙江省湖州市中心医院病理科,浙江湖州313000;浙江省湖州市中心医院病理科,浙江湖州313000;浙江省湖州市中心医院病理科,浙江湖州313000;浙江省湖州市中心医院病理科,浙江湖州313000
【正文语种】中文
【中图分类】R361+.2
【相关文献】
1.三种脱钙液对骨组织脱钙后切片染色效果分析 [J], 连丽琴;夏凌志;钟惠霞
2.骨组织制片中改良脱钙液与传统脱钙液的比较 [J], 王彦芳;王宪治
3.三种不同脱钙液在骨组织石蜡切片中的应用比较 [J], 杜洪;金荣
4.骨组织病理制片三种脱钙液的比较 [J], 张婉仪;阮君;丘展龙
5.骨组织病理制片三种脱钙液的比较 [J], 张婉仪;阮君;丘展龙
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三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响
三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。
方法选择12例骨组织，随机分为3组。
A组用14%硝酸脱钙液进行处理，B、C组分别用EDTA 脱钙液、PLANK脱钙液进行处理，同时对CD3、CD68、Ki—67 和TTF—1染色。
结果室温条件下，硝酸脱钙液的脱钙时间最短，但对组织损伤最大。
PLANK 脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好，组织结构完整，形态清晰，免疫组化染色较好。
结论室温条件下，三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。
但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长，PLANK 脱钙液脱钙均匀，速度快，更适合用于临床病理检查。
硝酸脱钙液脱钙最快，但是免疫组化染色效果较差。
标签：脱钙液；骨组织；免疫组化染色骨组织内含有大量无机钙盐，结缔组织坚硬，难以直接制片[1]。
如果强制切片，在蓝色钙盐背景下，往往无法看清细胞结构，所以需要选择一种能保持骨组织形态结构和染色后有利于保持细胞结构清晰度和对比度的脱钙液。
本文研究14%（体积分数）硝酸脱钙液、EDTA脱钙液、PLANK脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响，以期寻找一种效果比较理想的脱钙液，对病理诊断工作提供帮助。
1 材料与方法1.1 标本选择12例骨组织标本均来源于我院，切成1 cm×1 cm×0.3 cm的骨块，在福尔马林中性液内固定24 h，用于脱钙及免疫组化染色实验。
1.2 三种脱钙液①脱钙液Ⅰ：14%（体积分数）硝酸脱钙液，配制方法为14 mL浓硝酸加入86 mL蒸馏水；②脱钙液Ⅱ：EDTA脱钙液，配制方法为EDTA10 g，蒸馏水100 mL，加NaOH充分搅拌溶解，在用10 mol/L的HCl调pH为8.0，最后加入4%甲醛15 mL。
③脱钙液Ⅲ：PLANK脱钙液，配制方法为氯化铝10 g，甲酸50 mL，10%福尔马林10 mL，冰乙酸1.5 mL，加蒸馏水至总体积100 mL。
同种异体脱钙骨基质
同种异体脱钙骨基质同种异体脱钙骨基质是一种用于骨组织工程和骨再生的生物材料，具有广泛的应用前景。
本文将从同种异体脱钙骨基质的定义、制备方法、特点及应用等方面进行阐述。
一、同种异体脱钙骨基质的定义同种异体脱钙骨基质是指从同种动物体内提取的骨组织经过脱钙处理后得到的一种生物材料。
它具有保留了骨组织的基本成分和结构，但去除了骨钙化物质，从而降低了免疫原性和抗原性，减少了排异反应的可能性。
同种异体脱钙骨基质的制备过程主要包括以下几个步骤：首先，从同种动物的骨组织中获取骨材料，并进行初步处理，如去除软组织和骨髓。
然后，将骨材料进行脱钙处理，通常采用酸性溶液或酶解法来去除骨钙化物质。
最后，对脱钙后的骨基质进行杀菌处理，并冷冻保存，以备后续使用。
三、同种异体脱钙骨基质的特点1. 保留了骨组织的基本成分和结构：同种异体脱钙骨基质在脱钙过程中能够较好地保留骨基质的胶原蛋白、糖胺聚糖等成分，以及骨小梁、骨小室等基本结构，使其具有良好的生物相容性和生物活性。
2. 降低了免疫原性和抗原性：脱钙处理能够显著降低同种异体脱钙骨基质的免疫原性和抗原性，减少了异体移植时的排异反应和免疫排斥反应的发生。
3. 促进骨再生和修复：同种异体脱钙骨基质具有良好的生物活性，能够提供一个良好的细胞外基质环境，促进骨细胞的黏附、增殖和分化，从而促进骨再生和修复。
四、同种异体脱钙骨基质的应用同种异体脱钙骨基质在骨组织工程和骨再生领域具有广泛的应用前景。
它可以作为骨修复植入物用于骨折的治疗和骨缺损的修复，能够提供一个良好的支架结构，促进新骨的生成和骨缺损的愈合。
此外，同种异体脱钙骨基质还可以应用于种植体的固定和牙槽骨增量等领域。
总结：同种异体脱钙骨基质作为一种生物材料，在骨组织工程和骨再生中具有重要的应用价值。
通过去除骨钙化物质，同种异体脱钙骨基质降低了免疫原性和抗原性，保留了骨组织的基本成分和结构，具有良好的生物相容性和生物活性。
它可以促进骨细胞的黏附、增殖和分化，促进骨再生和修复。
大鼠关节组织硝酸＼EDTA脱钙对石蜡制片的影响及比较
大鼠关节组织硝酸＼EDTA脱钙对石蜡制片的影响及比较标签：大鼠关节组织;硝酸脱钙;EDTA脱钙;石蜡制片骨组织脱钙技术是病理实验室常用技术之一。
它的应用,使难以切片或不能完整制片的骨或软骨组织达到完整制片的目的。
适用组织化学、免疫组化等技术的染色。
大鼠关节组织制片的关键步骤是脱钙,其直接影响到制片的成败。
现在大鼠关节组织石蜡制片实验中,分别用10%硝酸和乙二胺四乙酸二钠(EDTA)复合液进行脱钙处理后,石蜡包埋、制片、染色。
对用两种方法脱钙处理的大鼠关节组织石蜡制片后染色,镜下观察形态及着色效果。
1 材料与方法1.1 材料大鼠30只、出生10周,平均体质量400 g(购自中山大学动物实验)。
雌雄不限,随机分组。
在麻醉状态下经心脏注射生理盐水及1%多聚甲醛处死动物,取关节组织、标本置10%甲醛固定液中固定24 h。
10%的硝酸脱钙液。
EDTA脱钙液,微波炉。
1.2 方法10%硝酸脱钙液的配制及脱钙方法将1份的硝酸溶液加入到9份的蒸馏水中搅拌均匀即可。
将大鼠关节组织放入是组织体积20倍量的10%硝酸溶液中,浸泡16～18 h,浸泡中无需更换脱钙液,用针能刺入即可。
取出组织置流水中冲洗碱化2 h。
取材,入脱水机石蜡包埋、切片、染色。
1.3 EDTA脱钙液的配制及脱钙方法用PBS缓冲液(pH7.2)100 ml、加NaOH 搅拌溶解至饱合状态,再加入EDTA10 g溶解后用1 mol/L Hcl调节pH值至7.2,加甲醛15 ml即可。
把脱钙液装入小烧杯中,将大鼠关节组织放置其中,脱钙液需充足。
放入微波炉中调节微波功率50℃,微波照射50 s即可达到脱钙的目的。
取出无需流水冲洗、直接取材、入脱水机、石蜡包埋、切片、染色。
2 结果10%硝酸脱钙处理的大鼠关节组织切片组织结构尚完整,组织块也能顺利连续切片,镜下:细胞形态、结构尚清,HE着色较淡,有时细胞核仁及膜边界不太清晰,分界不清,对比度不强。
在特殊染色和免疫组化染色中,着色较困难,效果欠佳。
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骨组织脱钙改良方法介绍
骨组织脱钙是指骨骼中的钙质流失，导致骨质疏松和骨折的风险增加。
为了改善这种情况，以下是几种常用的骨组织脱钙改良方法：
1. 运动：适量的有氧运动，如步行、跑步、游泳等，可以刺激骨骼细胞增生和钙的吸收，有助于强化骨骼。
2. 饮食：饮食中应该摄取足够的钙和维生素D，这些营养物质有助于骨骼的形成和维持。
食物中含有丰富的钙质，如牛奶、豆腐、芝士、鱼类等。
3. 改善生活习惯：避免熬夜和过度劳累，保持充足的睡眠，可以减轻骨骼负荷和压力，有利于骨骼健康。
4. 补钙：如果饮食中无法满足钙的需求，可以通过补钙剂补充。
补钙剂应该在医生的指导下使用，以确保安全和有效。
以上是骨组织脱钙改良的几种方法，可以根据个人情况选择合适的方法进行预防和治疗。