人外周血淋巴细胞微核测定
外周血淋巴细胞染色体标本制备的质量控制
表 1 水样中 Cd2+ 的测定结果 ( n = 7)
水样
平均测定值 ( g/m l)
R SD 加标量 测定值 回收率 ( % ) ( g /m l) ( g /m l) ( % )
井水 中游河水 污水水样
0 029 1 060
2 09 1 27
0 050 0 050 1 000
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
0 053 0 076 2 010
细胞遗传学指标 外周血淋巴细胞染色体 畸变和微核 分析, 是放射工作人员健康 监护 和评价 慢性 小剂量 受照 人员远 期医 学效应的重要观察指 标 [ 1, 2], 是最直接 反映辐射损伤的检查项 目之一 [ 3~ 5] 。细胞遗传 学工 作的特 点是, 研究 对象 为活 的细 胞, 手工操作 多、环节 多、时间 较长, 易 受各 种因 素的 影响 而导致结果 的 偏离 [ 6] 。提 高 染色 体畸 变 检出 率和 阅 片效 率, 及时准确反映辐射损 伤情 况, 需要 优 良的 染色 体片, 这 就要 求我们必须做好染 色体 标本 制备的 质量 控制工 作。根据 本实 验室细胞遗传学工 作的 经验, 简 要介 绍适合 于职 业健康 检查
品中生物可利用镉 [ J] . 光谱实验室, 2007, 24 ( 4) : 751 753. [ 4] R oa G, R am irez S ilva M T, R om ero R om o M A, et a.l D eterm ina
tion of lead and cadm ium us ing a polycyclodextrin m od ified carbon paste electrode w ith anod ic stripp ing voltamm etry [ J] . A nal B ioan al Chem, 2003, 377 ( 4) : 763 769. [ 5 ] 谢华林, 李爱阳. 电感耦合等离子体质谱测定陶瓷器皿中微晶溶 出铅镉的研究 [ J] . 中国陶瓷工业, 2004, 11 ( 4) : 36. [ 6] 滕文锋, 彭茵, 杨 波. 巯基棉 富集分 离 火 焰原子 吸收光 谱法测 定食盐中痕量镉 [ J] . 光谱实验室, 2004, ( 3 ): 402 404. [ 7 ] W alter N L S, Jorge L O C, R ennan G O A, et a.l A n onl ine p re concent rat ion system for determ ination of cadm ium in d rink ing w ater u sing FAA S [ J] . Journal ofH azardous M aterials, 2006, 137 ( 3 ): 1357 1361. [ 8] 杨慧仙, 李 贵荣, 何爱桃, 等. Cd2+ I- CV 三元 缔合物 共振瑞 利散 射 法 测 定 镉 [ J ] . 中 国 卫 生 检 验 杂 志, 2007, 17 ( 8 ): 1366 1367.
【国家自然科学基金】_人外周血淋巴细胞_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140801
科研热词 淋巴细胞 流式细胞术 dna损伤 阿糖胞苷 铅 量子点 连接蛋白类 辐射 载脂蛋白bmrna编辑酶催化多肽 表达 荧光 自身免疫疾病 肺肿瘤 聚合酶链反应 缺氧 细菌噬菌体 细胞分裂周期 白血病细胞 氯乙烯 核定位信号 染色体畸变率 杀伤细胞,天然 抗体 微核率 异时相表达 尘螨变应原 外周血淋巴细胞 外周血单个核细胞 基因多态性 基因克隆 变应性哮喘的预防 变应性哮喘 原核表达 单个核细胞 切尔诺贝利核事故 凋亡 信号传导及转录激活子 代谢酶 人源抗体fab片段 亚细胞定位 中子辐射 γ 射线 t淋巴细胞 p53基因 p53 hprt基因突变率 hbv fitc cdkn1a cd44 cd4 cadd45
科研热词 推荐指数 淋巴细胞 4 电离辐射 2 外周血淋巴细胞 2 铜绿 1 钙 1 超抗原 1 融合蛋白 1 脂联素 1 肿瘤坏死因子α 拮抗剂 1 职业接触工人 1 职业卫生 1 缺氧反应元件 1 碳离子 1 真核表达 1 癌胚抗原 1 氯乙烯 1 植物凝集素 1 染色体畸变 1 染色体损伤 1 昼夜节律 1 时间效应 1 早熟染色体凝聚 1 抗体多样性 1 弥漫大b细胞淋巴瘤 1 实时定量pcr 1 基因多态性 1 噬菌体展示库 1 可溶性肿瘤坏死因子受体ⅱ 1 受体 1 剂量效应 1 免疫表型 1 免疫球蛋白重链基因 1 免疫球蛋白fab片段 1 免疫基因治疗 1 假单胞菌 1 三磷酸腺苷酶 1 γ -h2ax 1 xrcc1 1 pm2.5 1 pcc环 1 p53基因 1 mrna表达 1 clock 1 cea阳性肿瘤 1 calyculin a 1 bmal1 1 balb/c鼠 1 a20细胞株 1 3-氧十二烷酰高丝氨酸内酯 1 3-丁二烯 1 1 1
2011年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49
体外培育牛黄的诱变性研究
体外培育牛黄的诱变性研究徐以平;宋瑞琨;石年;李龙【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2003(015)001【摘要】目的:对体外培育牛黄的诱变性进行研究.方法:采用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、人外周血淋巴细胞体外培养染色体畸变试验等方法进行检测.结果:①Ames试验在1 250、5 000、10 000 μg/皿的浓度范围内,各浓度组MR值在加代谢活化剂S9和不加代谢活化剂S9两种情况时均未超过2;②微核试验在50、150、500 mg/kg 3个剂量水平,各剂量组的微核率均数及PCE/NCE比值与空白对照组比较均未见显著性差异(P＞0.05);③人外周血淋巴细胞体外培养染色体畸变试验在样品浓度为1、10、100μg/ml(不加代谢活化剂,-S9)和1、10μg/ml(加代谢活化剂,+S9)两种情况下,各处理组测得的细胞畸变率与空白对照组比较均无统计学意义(P＞0.05).结论:体外培育牛黄在所给剂量范围进行的3种诱变性试验结果均为阴性.【总页数】3页(P35-37)【作者】徐以平;宋瑞琨;石年;李龙【作者单位】华中科技大学同济医学院公共卫生学院卫生毒理学系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院公共卫生学院卫生毒理学系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院公共卫生学院卫生毒理学系,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院公共卫生学院卫生毒理学系,湖北,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R994【相关文献】1.酸角的诱变性与抗诱变性研究 [J], 杨虎;冯森;张家华2.复方首乌片的诱变性和抗诱变性研究 [J], 王民明;姚玉龙3.体外培育牛黄对人冠状病毒肺炎湿毒疫模型的机制研究 [J], 赵荣华;崔晓兰;王道涵;郭姗姗;孙静;时宇静;包蕾;耿子涵;鲍岩岩;周冠儒;高英杰4.氟化钠诱变性与阻诱变性剂量—反应关系的离体实验研究 [J], 江帆5.生源健身茶的诱变性与抗诱变性研究 [J], 黄晓沐;刘茜;赵恒奎;姜宗荣;蒋家璞;姚根和因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人血淋巴细胞检测浊漳河地表水的遗传毒性
人血淋巴细胞检测浊漳河地表水的遗传毒性常惠丽;任嘉红;霍转转;刘瑞祥【摘要】为评价浊漳河水体中有机污染物的致突变性,采用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术,研究了浊漳河水体3个不同样点的有机提取物对人外周血淋巴细胞DNA损伤效应.结果显示,各水样中的有机提取物均能引起DNA损伤,且随剂量的增高,有机物对DNA的损伤加重；细胞DNA损伤与对照组相比均有显著性差异(p＜0.01).这表明人外周血淋巴细胞对水体有机污染物的毒作用非常敏感.细胞彗星尾部DNA 含量(％DNAT)和染毒剂量呈极显著正相关(R2＞ 0.8547,p＜0.01).以上结果表明,浊漳河水体受到一定程度的有机物污染,这些有机污染物可诱导淋巴细胞DNA损伤,具有遗传毒性.SCGE技术作为一种简便、快速和灵敏的检测方法在水环境遗传毒性监测方面具有较大的应用价值.【期刊名称】《生态毒理学报》【年(卷),期】2012(007)006【总页数】5页(P615-619)【关键词】有机污染物;DNA损伤;彗星试验;遗传毒性【作者】常惠丽;任嘉红;霍转转;刘瑞祥【作者单位】长治市环境监测站,长治046000;长治学院生物科学与技术系,长治046011;长治学院生物科学与技术系,长治046011;长治学院生物科学与技术系,长治046011【正文语种】中文【中图分类】X172地表水与人体健康直接相关，水体中的有机污染物在低剂量长期暴露的情况下可导致肿瘤甚至死亡［1］。
常规的理化分析方法不足以对水质状况进行全面评价。
对于水体有机污染物遗传毒性评估，一般都采用体外短期生物测试系统进行，如Ames试验、微核试验、V79细胞致突变试验等［2］。
近年来，单细胞凝胶电泳试验(SCGE，又称彗星试验)由于其快速、敏感、可靠、经济等诸多优点正越来越多地应用于环境污染物的遗传毒性检测与评价［3］。
本研究采用人外周血淋巴细胞彗星试验，对浊漳河具有代表性的3 个样点水样的有机提取物进行了遗传毒性研究，为长治市水环境生物监测及其对人体健康的影响提供参考。
微核
微核微核（micronucleus, 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。
微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。
在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下。
微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。
一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片产生的。
有实验证明，整条染色体或几条染色体也能形成微核。
这些断片或染色体在分裂过程中行动滞后，在分裂末期不能进入主核，便形成了主核之外的核块。
当子细胞进入下一次分裂间期时，它们便浓缩成主核之外的小核，即形成了微核。
已经证实，微核率的大小是和作用因子的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点与染色体畸变的情况一样。
所以许多人认为可用简易的周期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。
由于大量新的化合物的合成，原子能的应用，各种各样工业废物的排出等都存在污染环境的可能性，欲了解这些因素对机体潜在的遗传危害，需要有一套高度灵敏，技术简单易行的测试系统来监测环境的变化。
只有真核类的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。
目前国内外不少部门已把微核测试用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面。
70年代初，Matter和Schmid首先用啮齿类动物骨髓细胞微核率来测定疑有诱变活力的化合物，建立了微核测定法。
此后，微核测定逐渐从动物、人扩展到植物领域。
人和动物的微核测试多用骨髓和外周血细胞，这需要一定的培养条件与时间，细胞同步化困难，微核率低，一般只在0.2%左右。
而植物系统则更直接、更简便。
如采用高等植物花粉孢子利用其天然的同步性作微核测试材料，取得较好效果，其中70年代末Te-Hsiu Ma 用一种原产于美洲的鸭跖草（Tradescantia paludosa），建立的四分孢子期微核率计数（MCN-in-tetrad）的测试系统是较好的系统之一。
放射工作人员外周血淋巴细胞染色体畸变和微核细胞变化的影响因素分析
毒理习题-含答案
第1题：亚慢性毒性试验中一般化验指标有（）。
A．血象、肝肾功能B．病理学检查C．灵敏指标的检查D．特异指标的检查E．特异基因的测试【答案】A第2题：接触化合物的途径不同，其毒性大小的顺序是（）。
A．静脉注射＞经呼吸道B．静脉注射＞腹腔注射C．腹腔注射＞经口D．经口＞经皮E．以上都是【答案】E第3题：目前常用的化学物质有（）。
A．500万种B．300万种C．100万种D．10万种E．6～7万种【答案】E第4题：急性，亚慢性，慢性毒性试验分别选择动物年龄为（）。
A．初成年，性刚成熟，初断乳B．初断乳，性刚成熟，初成年C．初断乳，初成年，性刚成熟D．初成年，初断乳，性刚成熟E．性刚成熟，初断乳，初成年【答案】A第5题：急性经口染毒，为了准确地将受试物染入消化道中，多采用（）。
A．灌胃B．喂饲C．吞咽胶囊D．鼻饲E．饮水【答案】A第6题：最小有作用剂量是（）。
A．一种化合物按一定方式与人接触，出现了亚临床症状的最小剂量B．一种化合物按一定方式与人接触造成显微镜下可观察到的损伤的最小剂量C．一种化合物按一定方式与人接触引起免疫功能减低的最小剂量D．DNA大段损伤的最小剂量E．一种化合物按一定时间内，按一定方式与机体接触，使某项指标开始出现异常变化的最低剂量【答案】E第7题：亚慢性毒性试验对动物的要求是（）。
A．成年动物B．大鼠100g左右，小鼠15g左右C．大、小鼠，狗，家兔均可用D．必须为啮齿类或非啮齿类动物E．仅使用单一性别【答案】B第8题：碱基转换的后果是出现（）。
A．同义密码B．错义密码C．终止密码D．氨基酸改变E．以上都对【答案】E第9题：苯环上的一个氢被烷基取代，其毒性发生改变（）。
A．苯对造血功能主要是抑制作用，而甲苯为麻醉作用B．苯主要从呼吸道排泄，对呼吸系统有毒性作用，而甲苯没有C．苯中毒产生过量的儿茶酚胺刺激心肌细胞发生心室颤动，而甲苯没有D．甲苯的肝脏中氧化，对肝有损害作用，而甲苯没有E．苯为致癌物，甲苯为工业毒物【答案】A第10题：化学结构与毒效应（）。
外周血单个核细胞
外周血单个核细胞外周血单个核细胞是指外周血液中存在的一种细胞类型，具有单个核的特点。
这些细胞在身体的免疫系统中起着重要的作用，帮助身体抵抗疾病和保持健康。
外周血单个核细胞主要包括淋巴细胞和单核细胞。
淋巴细胞是一种重要的免疫细胞，它们在身体免疫反应中起着关键的作用。
淋巴细胞分为T细胞、B细胞和自然杀伤细胞。
T细胞在免疫应答中起着核心作用，它们能识别并杀伤感染体内的病原体。
B细胞主要负责产生抗体，这些抗体能识别和中和外来的细菌和病毒。
自然杀伤细胞则负责直接杀伤肿瘤细胞和感染的细胞。
单核细胞是另一类外周血单个核细胞，它们是免疫系统中的“垃圾清道夫”，主要负责吞噬和清除白细胞分解产物、细菌、病毒和其他病原体。
单核细胞也起着侦测和报告导致炎症和感染的信号的重要作用。
在感染或炎症发生时，单核细胞会被激活，释放出一系列信号分子，促进免疫系统的反应。
外周血单个核细胞的数量和比例可以通过外周血常规检查来确定。
正常情况下，淋巴细胞在外周血细胞中占据较大的比例，单核细胞则相对较少。
这反映了免疫系统的正常功能。
然而，某些疾病和情况可以导致外周血单个核细胞计数的异常。
首先，淋巴细胞计数过高可能是由细菌或病毒感染引起的。
在这种情况下，淋巴细胞会大量增加，以应对感染。
此外，某些疾病如淋巴瘤和白血病也会导致淋巴细胞计数异常增高。
相反，单核细胞计数过高可能是由某些病毒感染、结核病或其他炎症性疾病引起的。
在这些情况下，单核细胞会增加，以清除病原体和炎症因子。
此外，单核细胞数量的异常增加也可能是白血病等血液恶性肿瘤的表现之一。
除了计数异常，外周血单个核细胞的形态也可以提供一些关于疾病的线索。
细胞形态学分析可以检测出淋巴细胞或单核细胞的异常形态，例如细胞增大、细胞核形变等。
这些异常形态可能提示一些疾病如感染、炎症或免疫系统异常。
总之，外周血单个核细胞是身体免疫系统中的重要成分之一，对于维持健康和抵抗疾病起着重要的作用。
通过检测外周血单个核细胞的计数和形态，可以了解免疫系统的状况，并且可以提供一些关于疾病的提示。
细胞培养法淋巴细胞微核标本的制作过程及注意事项
二、论文细胞培养法淋巴细胞微核标本的制作过程及注意事项北京市预防医学研究中心于贵新1材料与方法1．1人员：接触放射性工作的岗前、在岗及离岗人员。
1．2接种：消毒1640培养基，抽静脉血接种于1640培养基内，混匀，浓度适当。
瓶上写清楚受检者姓名或者实验室自行编号。
1．3培养：接种后将培养基放于(37±0．5)℃恒温培养箱内培养72h。
1．4收获：1．4．1收集细胞：将细胞悬液混匀倒人编好号的离心管中，离心1000rpm，6min，弃上清液。
1．4．2低渗：加入0．075mol／L氯化钾低渗液5ml，用滴管轻打混匀，低渗6—8min。
1．4．3预固定：加入lml固定液，轻轻混匀后1000rpm离心6min。
固定液为甲醇：冰醋酸(3：1)。
1．4．4固定：弃上清液，加入5ml固定液，轻轻混匀，静置10min。
1000rpm 离心6min，弃上清液。
重复操作固定步骤2—3次，直至固定液透明为止。
1．4．5制悬液：弃上清液后，视细胞数量多少加入适量固定液打匀。
1．5滴片：吸取细胞悬液滴在一张洁净的4℃湿的载玻片上，轻吹散，风干，及时正确编号。
1．6染色：Giemsa染液染色20min左右，细水冲洗多余染液，风干。
1．7镜检：光学显微镜下计数1000个胞体完整、已转化的淋巴细胞，计数淋巴细胞微核，以千分率(‰)表示。
1．8微核判定标准：微核应位于完整的淋巴细胞胞浆内，与主核完全分开(如有重叠或相切，必须看到各自的完整核膜)，呈圆形或椭圆形，结构与主核相同，着色与主核一致或略浅，不折光，大小为主核的1／3以下的小核姑3。
2评价为好片的标准细胞数量多、分布均匀、密度适中、染色清晰、核浆分明、透明度好。
3注意事项3．1要严格进行消毒，避免细胞在培养过程中细菌污染，影响制片效果及阅片。
3．2接种血液量要适当，太多不容易打散，太少不易观察。
3．3培养温度应严格控制在(37±0．5)。
C。
3．4微核制备操作过程中最关键的步骤是低渗处理，低渗使红细胞膜破裂，淋巴细胞膨胀。
微核实验方法的比较研究
微核实验方法的比较研究作者：王宗霞刘菏月杨美霞查娜娜布其阿拉坦其其格来源：《科技传播》2010年第19期摘要微核实验作为快速检测体内染色体畸变的方法,以其简便、迅速,敏感为优点广泛应用于遗传、食品,药物,环境等很多领域,为此,我们对微核实验染色方法、基本实验方法与自动化检测方法进行比较,以提供在不同实验条件和实验目的下应选用的方法。
关键词微核;染色方法;实验方法;比较研究中图分类号Q93文献标识码A文章编号1674-6708(2010)28-0110-021基本染色方法的比较1.1基本染色方法吉姆萨染色法:吉姆萨染液由天青,伊红组成。
与嗜酸性颗粒结合,染粉红色;与嗜碱性物质结合,染紫蓝色;中性物质,染淡紫色。
吖啶橙荧光染色法:荧光色素吖啶橙透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。
在荧光镜下吖啶橙使细胞核呈绿色或黄绿色荧光;凋亡细胞中,吖啶橙使凋亡小体呈黄绿色荧光;坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。
1.2染色时间的比较染色时间对吉姆萨染色效果有影响,时间太短如染色5min～7min,整个细胞染成浅紫色,效果不明显,发生微核的细胞区分不明显;染色时间太长,则染色太深,会使整个细胞都成深紫色,观察不出细胞膜和细胞核的边界和细胞核分成的小核;染色10min效果较好,孙华明等在2个不同时间进行Giemsa染色,比较了不同时间染色对结果的影响,结果差异并不显著。
吖啶橙染色的荧光会在短时间内发生淬灭,淬灭会在短时间内对实验结果有一定影响,所以吴娣等实验观测时采用先在镜下对选定视野进行拍照,再在图像上进行细胞计数的方法,能够减少淬灭对结果造成的影响。
1.3染色方法改进比较胡冰冰等将丫啶橙显微镜法改进,在干净玻片上滴加AO染液10μL,取骨髓细胞悬液5 μL直接滴在染液内,混匀后盖片,在室温(11℃33℃)下可立即计数,效果较好。
王襄等Ⅲ通过人外周血淋巴细胞的毛细管法,用瑞氏和染色姬姆萨联合染色(姬姆萨1mL加蒸馏水20mL),瑞氏染色1min,姬姆萨染10min,效果较好。