优化喜树果中喜树碱和10羟基喜树碱的匀浆提取工艺
喜树碱
现在世界范围内喜树碱唯一可行的市场来源仍然是从野生植 物(主要是喜树)中提取，然而，喜树(Camptotheca acuminata)为珙桐科喜树属植物，中国特有树种，国家二级 保护植物。喜树野生资源毕竟有限，单纯靠从植株中提取势 必造成对自然资源和生态环境的巨大破坏，也不能满足市场 的需要，利用植物细胞培养法生产喜树碱被认为是一条很有 希望的替代途径。 据估计，喜树碱类药物全球年销售额大约是10亿美元 。
喜树碱的生产
姓名：孙玉蓉 学号：20082926335 班级：生工学0801
喜树碱
一、喜树碱的理化性质
分子式C20H16N2O4
浅黄色针状结晶(甲醇-乙腈) ，分解264℃∽267℃， [α]25D +31.3。 (氯仿-甲醇) 。在紫外光下表现强烈 的蓝色荧光，和酸不能生成稳定的盐
二、喜树碱的应用
生产喜树碱的主要公司
国内大约60多家生产公司 淄博奥特精细化工厂（山东） 上海北卡医药技术有限公司 （专业生产） 上海龙翔生物医药开发有限公司 （上海） 四川锐博科技有限公司 成都天源天然产物有限公司
喜树碱生产工艺
以喜树果实为原料，将其粉碎后用8～10倍量60％～90％乙 醇对其进行浸泡24～48小时后渗漉，渗漉时间为10～15小时， 减压70～80℃浓缩渗漉液至原体积的1/6～1/9，将所得浓缩 液静置5～48小时，滤过，以氯仿萃取滤液，用量为浓缩液 体积的0.5～3.0 倍量，萃取次数为2～4次，合并氯仿萃取 液经浓缩得膏状物，再依次以甲醇作溶剂对其进行重结晶纯 化得喜树碱粗品，以氯仿-甲醇(1∶3～3∶1)混合溶剂对所 得粗品重结晶纯化得喜树碱粗晶，以N，N-二甲基甲酰胺-乙 醇(1∶ 5～5∶1)混合溶剂对粗晶进行精制纯化得喜树碱精 品，即喜树碱产品。
一种治疗癌症的纯天然中药及其制备方法
一种治疗癌症的纯天然中药及其制备方法专利名称：一种治疗癌症的纯天然中药及其制备方法技术领域：本发明属于治疗癌症的药物技术领域，具体涉及一种治疗癌症的纯天然中药。
据研究表明，喜树果中含有10余种生物碱，具有抗癌作用，现临床上广泛运用羟基喜树碱治疗恶性肿瘤。
它是从喜树果中提炼成的针剂，对肺癌、大肠癌、血液系统恶性肿瘤等有较好疗效。
但临床上有明显并且很大的副作用，如恶心、呕吐、血白细胞下降、腹泻等，因此不能长时间运用，一般与其它化疗药物联合使用。
另外，羟基喜树碱需静脉输液化疗，不方便，容易发生血管性静脉炎，也不便于长时间使用。
本发明针对上述抗癌药物存在的不足，提出一种采用天然喜树果配制成抗癌中药，疗效明显，副作用极小。
本发明的技术方案如下本中药是由喜树果、丹参、黄芪、茯苓、山豆根、川芎、黄药子、七位天然药物制成。
其主要药物是喜树果、丹参、茯苓、黄芪次要药物山豆根、川芎、黄药子。
各药物配比的剂量范围1.其常用药物剂量范围喜树果9-15、丹参9-20、黄芪10-30、茯苓6-12、山豆根5-9、川芎5-9、黄药子6-9。
2.其最佳药物剂量范围喜树果10-13、丹参10-15、黄芪15-20、茯苓6-9、山豆根6-8、川芎6-8、黄药子6-8。
3.其常用及最佳方剂喜树果12、丹参12、黄芪20、茯苓8、山豆根7、川芎8、黄药子8。
本中药制剂的制备方法是需将喜树果煎熬30分钟后，再将另几位药物煎制，然后需用小火煎制2-3小时即可，可制成口服液。
以下是对本中药制剂的药理成份、药理效果分析本品是采用大自然中的天然药物，经过配方，不经过化学加工提制，含有多种有效抗癌成份，是一种纯天然真正的绿色抗癌药物。
它含有多种有效抗癌活性成份，一是含有抗癌作用的多种生物碱，如喜树果中含有喜树碱、羟基喜树碱、去氧喜树碱、喜树次碱等，山豆根中含有苦参碱、氧化苦参碱等；二是含有抗癌活性物质黄酮类如黄芪中含有芒柄花黄素，3-羟基芒柄花黄素等黄酮类，丹参中含有丹参酮等；三是含有多糖类抗癌活性物质，如茯苓中含有茯苓聚糖、茯苓多糖等；川芎中还含有生物碱类。
HPLC法测定喜树果中喜树碱和羟基喜树碱的含量
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!&$ 温浸 : 次 ’每次 "&)>? 提取最佳 & #"# 喜树碱和 )*+羟基喜树碱均有强的紫外吸收
以喜树碱的吸收更强 & 在实际工作中以紫外分 光光度法测定 #&, 羟基喜树碱含量时 ( 无论是采用 对照品比较法还是采用吸收系数法都常出现含量 超过 #&#<&" 的现象 ( 其原因是 #&, 羟基喜树碱中混 有部分喜树碱及其它高吸收系数物质的缘故 ( 采用
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树脂柱层析法分离喜树碱
树脂柱层析法分离喜树碱施荣富王瑞芳史作清温珍珍何炳林南开大学吸附分离功能高分子材料国家重点实验室，高分子化学研究所，天津３０００７ｌ喜树为珙桐科乔术，是我国特有植物，广泛分布于长江以南各地区，资源丰富。
喜树中成分复杂．至今已发现二十余种，包括喜树碱类，喜果甙，鞣花酸类及微量的吲哚碱类等．经过几十年的大量实践，证明喜树碱（ＣＰＴ）对胃癌、结肠、。
直肠癌、绒毛膜上皮癌、头颈部肿瘤、膀胱癌和白血病等多种恶性肿瘤都有较好的近期疗效．提取喜树碱的传统方法是氯仿萃取重结晶法，此法要消耗大量的有机溶剂，生产成本高，溶剂毒性大，产率低．且提取物中往往包含多种性质、结杜Ｊ近似的喜树碱类化合物，若要对组分进行进一步的分离以获得高纯度的单一组分．用常规的溶剂摹取法难以实现．但用树脂柱层析法进行分离，有可能解决这一难题．啦附树脂在许多中药有效成分的提取分离中已经取得很好的结果，可能成为一种推进中药继续发眨的、不可缺少的分离技术，而国内外关于用吸附树脂提纯分离喜树碱的技术报道很少。
因此树＂ｈ＃ｊ包谱分离提纯喜树碱的研究存在很大的必要性和开发潜力．本组曾就吸附树脂在水体系中对简单有机碱体系（苯胺、Ｎ一甲基苯胺、Ｎ，Ｎ－二甲基苯胺）的吸附规律及色谱分离进千亍了考察，并得割了很好的分离效果（如Ｆｉｇ．１所示）．此实验利川三种胺与ＡＤＳ一１７物理作用力的差异．采埘梯度洗脱的方法把二者分开．此结果说明可刚普通颗粒的暇附树脂，以梯度泓洗常压色谱法米分离结构性能类似的生物碱．喜树碱（Ｉ）在喜树各部位中晌含鲑以累最高，率组用８０％的乙醇水溶液对喜树果进行提取，减压浓缩．过滤得橙黄色清夜．ＨＰＬＣ捡测发现，除前面一大的加质峰外．保留时问８ｍｉｎ左右有一吸收峰，己确定是喜树碱．保留时间１４ｍｉｎ左右有一更大的吸收蜂，尚未确定是何组分．其他绲分的吸收峰均根小．ｏ加４０∞舶瑚埘１４０蛐瑚Ｖ缸）Ｆｉ９１翱疆ａ匕妇西和ｌｉ呜蜥喊叫枷ｌ矗ＥＭ牛ｄｊⅢ酣刚部ｍｊ豳加鲫阳）舶０ｏｈ助：ｌ∞・８皿Ｆ１＿ｍ嚏∞栅‘本组选用了五种树脂进行色谱分离Ｏｍｓ－５，Ｄｒ５２，ＡＤＳ一１７．Ｘ－５，凝交型后交联的ＰＳＴ）．过柱进行树脂筛选时．提取液上柱币．先用稀的乙醇水溶液把＾＝量杂质洗下．然后增加乙醇浓度继续淋洗，分部收集．结果发现，１Ｆ极性的树脂分离效果较好．如图Ｆｉｇ．２，Ｆｉｇ３所示．树脂填料是凝交ｈ．５２型后交联的ＰＳＴ，ＣＰ］、一ａ是前儿组流份的混台液．ＣＰＴ—ｂ是后几组流份的混合液．由色谱图可看出，保留时间为１４ｍｉｎ左右的绵分宽被人鼙淋洗ｒ米，喜树碱只有小部分被洗一Ｆ．增加乙醇浓度后，喜树碱可被完全淋洗干净，而树脂ｉｒ直接水洗再利Ｈｊ，所以此法不仅操作简便．而且通过梯度淋洗・大大提高了喜树碱的纯度。
实验二喜树碱含量的高效液相色谱分析
一、实验目的
掌握高效液相色谱仪的使用技术
二 、实验原理
高效液相色谱法是根据不同物质的不同色谱行为， 高效液相色谱法是根据不同物质的不同色谱行为， 依靠高压泵系统产生的动力， 依靠高压泵系统产生的动力，使样品在流动相的 作用下， 作用下，在高效色谱柱中实现分离并经相应检测 器检测的一种分析方法。 器检测的一种分析方法。 在相同色谱条件下，同一物质的保留时间不变， 在相同色谱条件下，同一物质的保留时间不变， 因此在特定条件下可根据保留时间的差别对物质 进行定性分析。 进行定性分析。 在特定检测条件下，在一定浓度范围， 在特定检测条件下，在一定浓度范围，物质的含 量与色谱峰面积（或峰高） 量与色谱峰面积（或峰高）成正比 C1 C2
10000000 9000000 8000000 7000000 6000000 5000000 4000000 3000000 2000000 1000000 0 0 20 y = 114021x + 110330 R = 0.9994
2
40
60
80
100
二 、实验原理
喜树碱(camptothecin)，我国特有树种喜 ， 喜树碱 树中含有的生物碱，可溶于氯仿、甲醇、 树中含有的生物碱，可溶于氯仿、甲醇、乙 醇等有机溶剂。 醇等有机溶剂。
四、实验材料
喜树果实 2006年3月取自四川，60℃下烘干48小 2006年 月取自四川，60℃下烘干48小 下烘干48 时，粉碎备用
五、实验步骤
准确称取1g喜树果粉放入25mL容量瓶中 准确称取1g喜树果粉放入25mL容量瓶中 1g喜树果粉放入25mL 加入60 乙醇溶液约20mL 60％ 加入60％乙醇溶液约20mL 混匀后超声提取10 10分钟 混匀后超声提取10分钟 取出静置，至室温时定容至25mL 取出静置，至室温时定容至25mL 室温， 离心10 10分钟 室温，12000rpm 离心10分钟 取上清液转移至样品瓶中， 取上清液转移至样品瓶中，进行液相色谱分析 采用515-2487系统检测喜树碱含量 采用515-2487系统检测喜树碱含量 样品中喜树碱含量： CPT（µg/g）= （ ） C×V × M
响应曲面法优化喜树碱的超声提取工艺
响应曲面法优化喜树碱的超声提取工艺康大力;沈小钟;张洪利【摘要】Objective To optimize the extraction technology of camptothecin (CPT) by response surface methodology(RSM) .Meth-od RSM was used to optimize the extraction process of CPT by optimizing the extraction temperature ,extraction time and ratio of material to liquid .The content of CPT was determined by HPLC-DAD .Results The optimal extraction parameters were as fol-lows :extraction temperature 49 ℃ ,extraction time 2 .5 h and the ratio of material to liquid 1∶17 .Concl usion The established ex-traction technology is stable and feasible .%目的：用响应曲面法优选喜树碱的超声提取工艺。
方法以提取时间、提取温度和料液比为考察因素，用 HPLC-DAD法测定喜树碱的含量，通过响应曲面法优化喜树碱超声提取工艺。
结果最佳提取工艺为提取温度49℃，提取时间2．5h，料液比1∶17。
结论响应曲面法筛选的喜树碱提取工艺稳定、可行。
【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】4页(P350-353)【关键词】喜树碱;响应曲面法;提取工艺【作者】康大力;沈小钟;张洪利【作者单位】广东食品药品职业学院，广州 510520;广东省中药研究所，广州510520;广东食品药品职业学院，广州 510520【正文语种】中文【中图分类】R284喜树（Camptotheca acuminata）为珙桐科喜树属植物，为我国南方特有品种。