红细胞裂解液使用方法
脾细胞分离 红细胞裂解液配制
1.小鼠脾细胞的制备：
Balb/c小鼠摘眼球放血，处死，75％浸泡消毒2~3min
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超净台内解剖、取脾，剪碎
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于200目筛网中研磨过筛，小平皿收集（小皿放约5ml 20%血清的1640）
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移至离心管中，800rpm，离心5min，弃上清
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加入5ml红细胞裂解液，吹打均匀，静置3～4min
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1000rpm离心5min，弃上清，少量RPMI 1640洗涤2～3遍
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加入2ml RPMI 1640（含10％FBS），吹打均匀，计数
红细胞裂解液配方：
NH4Cl: 0.747g
Tris：0.26g
定容100ml
PH=7.4
0.22um的滤膜抽滤除菌。
注：红细胞裂解液可以从冰箱拿直接出来用，预冷的红细胞裂解液加到细胞中后可以在冰上放置1min左右，裂解更充分些。
我做实验时，一般红细胞裂解液加完离心后，只用1640洗一次，一只小鼠的脾脏细胞最后悬浮于3ml 1640中，稀释50倍计数，即：100ul台盼蓝+880ul 1640（或PBS）+20ul 细胞。
那个问题等师兄过来了帮你问一下。
裂解液配制方法
裂解液配制方法 The document was finally revised on 20211、红细胞裂解液（去除红细胞）配制试剂所需材料：1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solutiona) NH4Cl (1.5 M) 80 gb) KHCO3 (100 nM) 10 gc) Na4EDTA (10 nM) 3.7 gd) Distilled H2O 1000 mL2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用）配制步骤：1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中；2.调节溶液pH值到，加去离子水定容到1000ml；3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。
保存：储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）；2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。
2、ripa裂解液NP-40 or Triton-100 1%TrisHCl (pH 50mmol/LNaCl 150mmol/LPMSF（苯甲基磺酰氟） L(100μg/ml)Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/Lμg/ml)Leupeptin（亮抑制肽） mlAprotinin（抑蛋白酶肽）μmol/L(1μg/ml)（注：PMSF 贮存液：100mmol/L即ml于异丙醇中；Aprotinin 贮存液：10mg/ml溶于LHEPES；Leupeptin 贮存液：10mg/ml溶于水中；Pepstatin 贮存液 10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存）3、细胞裂解液（Tris－HCL）1．1M Tris 溶液的配置取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。
2．1M Tris－HCL Ph=溶液的配置取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=（需浓盐酸约），加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。
红细胞裂解液的配方
红细胞裂解液的配方红细胞裂解液是一种可以用于制备单细胞悬液的液体，是用于培养细胞、测定细胞特性或进行免疫学和细胞生物学分析时必不可少的。
红细胞裂解液的配方可能会随着应用不同而有所不同，一般来说，红细胞裂解液应该包含两种主要成分：溶剂和除去红细胞壁的酶。
第一步，选择溶剂。
红细胞裂解液的溶剂有多种，如水、生理盐水、PBS(phosphate buffered saline)、Tris-HCl（tris hydrochloric acid）及EDTA （ethylenediaminetetraacetic acid）等。
其中，生理盐水和PBS是最常用的，因为它们能够保持细胞环境的稳定性，PBS也是大多数细胞生物学实验中最常用的溶剂之一，而EDTA是一种有助于去除红细胞壁的溶剂。
第二步，选择酶。
红细胞裂解液中的酶一般是由trypsin或RNase组成，这两种酶都有助于去除红细胞壁，以便使细胞可以被溶解。
有些研究者会添加DNAse （deoxyribonuclease），这种酶可以帮助降解DNA，从而减少胎牛血清白蛋白对细胞的污染。
第三步，添加抗凝剂。
抗凝剂可以防止细胞在悬液中凝结，常用的抗凝剂有EDTA、heparin、citrate等。
抗凝剂的用量一般以0.1%~0.5%的浓度添加到溶剂中。
第四步，添加抗生素。
抗生素可以有效预防致病微生物的污染，常用的抗生素有penicillin/streptomycin、gentamicin、amphotericin B等，一般以100U/ml的浓度添加到溶剂中，以防止污染。
最后，将上述所有成分添加到一定的比例中，并搅拌均匀，就可以制备出一种完整的红细胞裂解液了。
通常情况下，红细胞裂解液的配方可以根据具体的实验要求而有所不同，可根据实验的具体要求调整添加的各种成分的比例，以满足实验的要求。
总之，红细胞裂解液的配方应当包括溶剂、除去红细胞壁的酶、抗凝剂和抗生素，经过调整添加各种成分的比例，即可制备出一种完整的红细胞裂解液。
红细胞稀释液说明书
红细胞稀释液说明书一、原理：
将血液用稀释液作一定量稀释后,注入计数池在显微镜下计数,然后计算出血液中红细胞数。
二、规格：
1×100m1；3×IOOm1
三、操作：
1、于清洁小试管中加入红细胞稀释液2.0m1o
2、自指端或耳垂准确吸取血液IoU1擦去管外附着的血液，置于红细胞稀释液内，立即混匀。
3、取上述混匀的红细胞悬液加至血球计数池内,静置2~3分钟。
4、用低倍镜计数左上、左下、右上、右下及中央五个中方格，五个中方格总数乘以
0.0IX1012/1即为每升红细胞数。
四、正常参考值：
成人：男:4.0-5.5X1012/1；女：3.5-5.0X1012/1：
新生儿：6-7×1012∕1‹,
五、贮存条件：温度2~25℃,相对湿度40~75%,避光。
六、有效期：一年。
elisa 细胞裂解方法
elisa 细胞裂解方法Elisa细胞裂解方法引言：Elisa（酶联免疫吸附测定法）是一种常用的生物技术手段，用于检测和定量分析蛋白质或其他化合物在样本中的存在量。
Elisa细胞裂解方法是Elisa实验中的重要步骤之一，用于从细胞中释放目标分子，以便进行后续的检测和分析。
本文将介绍Elisa细胞裂解方法的原理、步骤和常用的裂解缓冲液。
一、原理：Elisa细胞裂解方法的原理是通过破坏细胞膜和细胞核膜，释放出细胞内的目标分子。
细胞裂解液中含有能够破坏细胞膜和细胞核膜的物质，如洗涤剂（如Triton X-100、NP-40等）和蛋白酶抑制剂。
洗涤剂能够破坏细胞膜的脂质双层结构，使细胞膜溶解；蛋白酶抑制剂则可以避免目标分子在裂解过程中被降解。
二、步骤：1. 收集待裂解的细胞：将要进行Elisa实验的细胞培养物收集到离心管中，并用生理盐水或PBS缓冲液进行洗涤，去除培养基中的残留物。
2. 加入细胞裂解液：向细胞沉淀中加入适量的细胞裂解液，使细胞完全浸润其中。
细胞裂解液的配制要根据实验的要求来确定，常用的细胞裂解液包括RIPA缓冲液、SDS裂解缓冲液等。
3. 振荡裂解：将细胞裂解液和细胞沉淀充分混合后，使用振荡器进行振荡裂解。
振荡的时间和强度要根据实验要求进行调整，通常在低温下进行，以避免目标分子的降解。
4. 离心：将裂解后的混合液进行离心，使细胞碎片和细胞核沉淀到离心管底部。
5. 收集上清液：将离心后得到的上清液转移至新的离心管中，即为细胞裂解液。
细胞裂解液中含有目标分子以及其他细胞内的蛋白质、核酸等物质。
三、常用的裂解缓冲液：1. RIPA缓冲液：RIPA缓冲液是一种常用的细胞裂解液，其成分包括1% NP-40（或Triton X-100）、0.5% 钠盐牛磺酸、0.1% SDS、150 mM氯化钠和50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）。
RIPA缓冲液具有较强的细胞裂解能力，适用于多种细胞类型。
血液基因组DNA 提取试剂盒 说明书
广州东盛生物科技有限公司 电话：020-87791356
传真：020-87791381 网址：
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核酸纯化系列
操作步骤-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1 取血液样本，每 400 μl 血液加入到一只 1.5 ml 离心管中。加入 2 倍体积的红细胞裂解液 RS。漩涡振荡或上下来回颠倒混匀。 5,000 rpm 离心 3min，弃上清，收集白色或淡红色沉淀。
血液基因组 DNA 提取试剂盒（硅胶膜离心柱法）
核酸纯化系列
产品组分
组分
红细胞裂解液 RS 消化缓冲液 DS 裂解液 MS 蛋白酶 K 去蛋白液 PS 漂洗液 PE 纯化液 TE DNA 纯化柱 说明书
N1121
80 ml 15 ml 20 ml 1 ml 30 ml 15 ml 5 ml 50 个 1份
液氮，并在样品未完全解冻前加入含有抑制核酸酶作用的螯合剂的裂解液。
问：提取的基因组 DNA 生物活性差，为什么？
答：1 提取的基因组 DNA 盐浓度过高，沿管壁四周加入漂洗液 PE，这样有利于提高清洗效果；
2 DNA 中含有乙醇，严格按第 8 步的离心速度和时间操作；
3 进行 DNA 洗脱时请一定在膜的中央加入纯化液，尽量不要沾染管壁。
广州东盛生物科技有限公司 电话：020-87791356
C3702 红细胞裂解液(碧云天)
红细胞裂解液产品简介：碧云天生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称ACK Lysis Buffer，是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本裂解液经过优化配方，在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
本裂解液的主要有效成分为氯化铵。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
保存条件：4℃保存，一年有效。
室温保存， 3个月有效。
注意事项：本裂解液为无菌产品，请注意保持无菌，使用本产品时宜在超净工作台内进行。
如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：对于组织细胞样品：1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。
例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂解液。
本步骤在室温或4度操作均可。
3.400-500g离心5分钟，弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5.洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。
可再重复1次，共洗涤1-2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
4℃离心效果更佳。
6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤：1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
人外周血白细胞分离液使用说明
人外周血白细胞分离液使用说明货号:P8670规格：200ml/kit保存：18℃-25℃避光保存，有效期两年。
启封后置4℃保存，有效期一周。
一、分离方法说明及图例A．取1ml新鲜抗凝血，与全血及组织稀释液1:1混匀后小心加于1份本分离液之液面上；B.以500g（约1800转/分）离心25分钟(半径15cm水平转子)。
此时离心管中由上至下细胞分四层。
第一层；为血浆层。
第二层；为环状乳白色的白细胞层。
第三层；为略带混浊的分离液层（富集一定量的白细胞）。
第四层；为红细胞层。
弃去第一层血浆层，收集第二层细胞、第三层分离液层和第四层红细胞层，放入含细胞洗涤液10ml的试管中，充分混匀后，以500g 约（1800转/分）离心30分钟。
沉淀经1次洗涤后用红细胞裂解液裂解红细胞，再经3次洗涤去除红细胞内溶物和碎片后取沉淀细胞即为所需白细胞。
注：提取率约为80%。
二、红细胞裂解液使用说明红细胞裂解液用于从血液或组织细胞样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
不适用于禽类等有细胞核红细胞的裂解。
本裂解液经过无菌处理，分离的细胞可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
使用说明：A.对于组织细胞样品：a.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
b.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。
如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂解液。
c.400-500g离心5分钟，弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
d.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
e.洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。
可再重复1次，共洗涤1-2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
4℃离心效果更佳。
f.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
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红细胞裂解液使用方法
红细胞裂解液是一种常用的实验室试剂，它可以用来破坏血液红细胞膜从而释放出血红蛋白。
红细胞裂解液使用方法很简单，只要按照以下步骤进行即可。
第一步，准备材料和设备。
需要准备的材料包括红细胞裂解液和待处理的血液样品，需要准备的设备包括离心管、离心机、移液管等。
第二步，制备血浆。
将血液样品放入离心管中，以3000rpm的速度离心10分钟，将血细胞和血浆分离。
将血浆转移到另一个离心管中。
第三步，加入红细胞裂解液。
在离心管中加入适量的红细胞裂解液，根据不同的实验要求可以添加不同的浓度。
第四步，混匀。
使用移液管将红细胞裂解液和血浆充分混合，然后放置在室温下静置30分钟。
第五步，离心。
将混合液置于离心机中，以3000rpm的速度离心10分钟，离心之后可以直接利用上清液继续进行实验。
注意事项：
1、最好在使用前检查红细胞裂解液的药物有效期，避免因为过期而导致实验结果不准确。
2、在制备血浆的过程中一定要避免将红细胞破坏，否则可能会影响到实验数据的准确性。
3、离心过程中要注意离心管的平衡性，避免因为离心速度不均匀而使血细胞重新沉淀。
总之，红细胞裂解液是一种常用的实验试剂，其使用方法不仅简单易行，而且操作方便，适用于各种血液学和生物学实验。
但是在使用时需要注意一些细节问题，遵守操作规程，确保实验结果的准确性。