紫外可见分光光度法测定苯甲酸
紫外可见分光光度法测定苯甲酸
实验目的：
1、掌握用PH计测定溶液PH的操作。
2、掌握755型紫外分光光度计的使用方法。
3、通过实验，加深对溶液PH和溶液含量测定原理和方法的理解。
实验原理：
1、直接电位法测定溶液PH长选用玻璃电极作为指示电极，饱和甘汞年级作为参比电极，浸如待测溶液中组成原电池，原电池的电动势与溶液的PH呈线性，由于K中包括难于计算的不对称电位和液接电位，实际工作中采用仪器直读法，即首先用已知PH的缓冲液校准酸度计，然后直接测量待测溶液的PH。
2、在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm。可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。
实验器材：
试药：邻苯二甲酸氢钾缓冲液、混合磷酸盐缓冲液、0.01mol/L、0.1mol/L氢氧化钠、苯甲酸
仪器：量瓶、烧杯、752型紫外分光光度计、石英比色杯、PHS-25型酸度计
实验内容与方法：
一、用酸度计测定溶液的PH值
1、安装电极
先把电极夹子夹在电极杆上。夹上甘汞电极，把引线叉连接在电极接线柱上。再将玻璃电极夹在夹子上，使玻璃球泡略高于甘汞电极，把电极插头插入电极孔内，旋紧螺丝。2、连接电源
检查电源电压与仪器电压相符合后，将PH-mV开关置“0”，接通电源。对PHS-25型酸度计，若用交流电源，接通电源后指示灯亮，若用直流电源，指示灯不亮。
3、定位
（1）将标准缓冲液倾入测试杯中，侵入电极，将PH-MV开关旋至与缓冲液相应量程范围。（2）查表5-1，调节定位调节器，使指针指向本缓冲液该温度下的PH。并摇动测试杯，使指针稳定为止，重复调节定位调节器，定位后，定位调节器不可再旋动。
4、测量
（1）移开缓冲液测试杯。用纯水淋洗电极，并用滤纸轻轻吸干。
（2）将被测溶液倾入测试杯中（温度应和缓冲液一样，否则应按其温度重性调节温度补偿
器）浸入电极对，读数即可。
二、紫外可见分光光度法测定苯甲酸的含量
1、苯甲酸标准储备液的制备
精确称取苯甲酸100mg，用0.1mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解后，再用蒸馏水稀释1000ml。此溶液1ml含0.1mg苯甲酸。
2、苯甲酸吸收曲线的测量
吸取苯甲酸贮备液4.00ml，放入50ml容量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀。此溶液1ml含8μg苯甲酸。
测量条件光源：氢灯；参比液：0.01mol/L氢氧化钠；测量波长：210、215、218、220、222、224、225、226、228、230、235、240nm。
3、标准对比法测定样品液苯甲酸的含量
取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠定容，摇匀。
在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作定量分析的入射光。以0.01mol/L氢氧化钠溶液为参比。在完全相同的条件下测出标准苯甲酸溶液和稀释好的样品液的吸光度值。
4、按下式计算样品液中苯甲酸的浓度：
C样/C标 = A样/A标
实验注意事项：
1．正确选择紫外分光光度计的光源灯。石英比色杯价格昂贵，操作时不要离开桌面，谨防打碎。
2．由于玻璃电极膜极易碰坏，使用时应特别小心。用后要清洗干净再保存好。
实验报告：
实验结束后，书写实验报告。
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸 1 实验试剂与仪器 1.1 试剂 苯甲酸（AR），雪碧汽水 1.2 仪器 日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿 2 实验原理与方法 为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。 3 实验步骤 3.1 苯甲酸标准储备液配制 称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。 3.2 标准曲线绘制 取苯甲酸标准储备液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱 （测定波长范围为200~350nm），找出λ max ，然后在λ max 处测定五个标准溶液的吸光度A。 3.3 样品处理和测定 雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取2.5mL于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ max 处测定吸光度。 4 实验结果
实验D 防腐剂测定
实验9（序号待统编）紫外分光光度法测定雪碧中苯甲酸的含量 一、目的要求 1、掌握用紫外——可见分光光度法测定防腐添加剂的原理和方法 2、加深对蒸馏分离不同有机物的方法理解和操作技术的掌握 二、原理 将样品酸化后进行蒸馏，苯甲酸随蒸汽馏出。收集馏出的馏分，加入强氧化剂将馏出液中的有机物完全氧化分解，再次蒸馏，并用碱吸收得苯甲酸钠。用紫外分光光度计于225nm 处进行测定。采用标准曲线法并计算样品中苯甲酸的含量。 三、仪器与试剂 紫外分光光度计，蒸馏装置。 NaOH溶液：0.1mol·L-1, 0.01mol·L-1；K2Cr2O7溶液：0.03333mol·L-1；H2SO4溶液：2 mol·L-1；苯甲酸标准溶液：100mg/L，称取0.1000g苯甲酸（经105℃烘干）于250mL烧杯中，加入0.1mol·L-1NaOH100mL，搅拌溶解后，转移入1000mL容量瓶中，用水定容；Na2SO4（无水）；H3PO4。 四实验步骤 1、标准曲线的绘制 （1）、移取50.00mL苯甲酸标准液于250mL蒸馏瓶中，加H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水70mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。用50mL容量瓶（预先加有5mL0.1mol·L-1NaOH）收集馏出液。当馏出液约为40mL时，停止蒸馏，用少量水吹洗冷凝器，洗液并入容量瓶，最后用水定容。 （2）、移取第一次馏出液于另一个250mL蒸馏瓶中，加入0.03333 mol·L-1K2Cr2O7溶液25mL，2mol·L-1H2SO4溶液6.5mL，连接冷凝装置，在水浴上加热约10min，冷却，加入H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水40mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。以下操作同（1）。（3）、移取第二次馏出液2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用0.01mol·L-1NaOH溶液定容。以0.01mol·L-1NaOH溶液为参比，在225nm处测定吸光度，绘制工作曲线。 2.样品的测定 （1）样品溶液的制备 准确称取8-10g均匀的样品置于250mL蒸馏瓶中，以下操作按标准曲线的（1）和（2）进行。 （2）移取5-20mL试样的第二次蒸出液（按样品中苯甲酸含量的多少选择试样第二次蒸出液体积）于50mL容量瓶中，用0.01mol·L-1 NaOH溶液定容。以0.01mol·L-1 NaOH溶液为参比，在225nm处测定吸光度。 （3）空白试验：取与样品量同样的水，加入1mol·L-1NaOH5mL（不加H3PO4），以下操作
紫外可见分光光度计法测定饮料中苯甲酸钠的含量
紫外-可见分光光度计法测定饮料中苯甲酸钠的含量 一、实验目的 1.了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，学习UV-2501的操作。 2.掌握紫外分光光度法测定苯甲酸钠的吸收光谱图。 3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。 二、实验原理 为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一，根据GB2760- 1996规定，碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。 苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。根据苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，测得其吸光度即可用标准曲线法求出样品中苯甲酸钠的含量。 三、仪器和试剂 1.紫外可见分光光度计 UV-2501（日本岛津），1.0cm石英比色皿，50ml容量瓶。 2.NaOH溶液（0.1mol/L） 3.苯甲酸钠标准溶液的配制 (1)苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠 1.000g（105℃干燥
处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。该贮备液可置于冰箱保存一段时间。 (2)苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸钠储备液10.00mL于100mL容量瓶中， 加入蒸馏水稀释定容。 (3)系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL 和5.00mL于5个50mL容量瓶中，各加入0.1mol/L NaOH溶液1.00mL后，用蒸馏水稀释定容。得到浓度分别为2.0 mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L和10.0mg/L的苯甲酸钠系列标准溶液。 4.雪碧（500mL） 5.蒸馏水 四、实验步骤 1.吸收曲线的绘制 （1）系列标准溶液的配制
实验二紫外吸收光谱定性分析的应用(测定苯甲酸含量)
实验二紫外吸收光谱定性分析的应用(测定苯甲酸含量) 实验二紫外吸收光谱定性分析的应用(测定苯甲酸含量) 一、实验目的 1、学习、了解紫外分光光度法原理 2、了解紫外分光光度计的结构和使用方法 二、实验原理 当辐射能(光)通过吸光物质时,物质的分子对辐射能选择性的吸收而得到的光谱称为分子吸收光谱。分子吸收光谱的产生与物质的分子结构、物质所在状态、溶剂和溶液的 PH 等因素有关。分子吸收光谱的强度与吸光物质的浓度有关。表示物质对光的吸收程度, 通常采用“吸光度” 这一概念来量度。根据朗伯-比尔定律, 在一定的条件下, 吸光物质的吸光度 A 与该物质的浓度C 和液层厚度成正比。即 A= LC 因此,只要选择一定的波长测定溶液的吸光度,即可求出该溶液浓度,这就是紫外-可见分光光度计的基本原理。在碱性条件下,苯甲酸形成苯甲酸盐,对紫外光有选择性吸收,其吸收光谱的最大吸收波长为 225nm 。因此,采用紫外分光光度计测定苯甲酸在 225nm 处的吸收度就能进行定量分析。 三、仪器 1、紫外分光光度计 (普析通用 T6) ;配石英比色皿 (1cm):2个; 2、容量瓶 (100mL): 10只; 3、吸量管 (1mL、 2mL 、 5mL 、 10mL) :各 1支; 四、试剂 1标准溶液 (1.00mg/mL):将水杨酸配成 1mg/mL的标准溶液,作为储备液。 2未知液。 五、实验操作 准确吸取 1.00mg/mL的苯甲酸标准储备液 10mL ,在 100mL 容量瓶中定容(此溶液的浓度为 100ug/mL)。再分别准确移取 0、 1.00、 2.00、 4.00、6.00、 8.00、 10.00mL 上述溶液, 在 100mL 容量瓶中定容(浓度分别为 0、1.00、 2.00、 4.00、 6.00、 8.00、 10.00ug/mL)。准确移取 10.00mL 苯甲酸未知液,在 100mL 容量瓶中定容。 以溶剂为空白,于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度。然后以浓度为横坐标, 以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得未知液的浓度。 六、数据纪录 七、结果计算 根据未知液的稀释倍数,可求出未知溶液的浓度。 1
紫外分光光度法测定苯甲酸
紫外分光光度法测定苯甲酸 一 实验目的 1. 掌握吸收曲线的测定与绘制方法 2. 学习运用直接比较法求样品含量 3. 掌握752型分光光度计的使用方法 二 基本原理 样品中的苯甲酸在碱性条件下形成苯甲酸盐。苯甲酸及其盐对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm 左右。 用752型分光光度计可测定物质在紫外光区、可见光区的吸收光谱，并可定量测定物质含量。 三 仪器与试剂 （一） 仪器 752型分光光度计，1cm 石英吸收池一套，50ml 容量瓶二只，刻度吸管5ml 、10ml 各一支，滴管一支 （二） 试剂 L NaOH 溶液； 苯甲酸标准贮备液：精确称取分析纯苯甲酸100mg （预先经105℃烘干），用LNaOH 溶液100ml 溶解后，再用蒸馏水稀释至1000ml 。此液1ml 相当于苯甲酸。 苯甲酸标准溶液：取苯甲酸贮备液，置于50ml 容量瓶中，用LNaOH 溶液定容，摇匀。此液1ml 相当于8μg 苯甲酸。 四 操作步骤 1. 苯甲酸吸收曲线的绘制 测定条件：氘灯，1cm 石英比色皿，苯甲酸标准溶液，LNaOH 为参比液 测定波长（nm ）：从210nm~240nm 每隔一定波长（2nm~5nm ）测定一次吸光度，在225nm 左右隔1nm 测定一次吸光度。用以上波长为横坐标，测得的吸光度为纵坐标绘制苯甲酸的紫外吸收曲线。 2. 直接比较法测定样品溶液中苯甲酸的含量 取样品溶液，置于50ml 容量瓶中，用LNaOH 溶液定容，摇匀后备用。 在上述吸收曲线中找出最大吸收波长，用此波长作为定量分析的测定波长。以LNaOH 溶液为参比液，在完全相同的条件下测定苯甲酸标准溶液和稀释后样品溶液的吸光度。 五 数据处理 按下式计算样品溶液中苯甲酸的浓度： 58A A 1050C A A )ml /g (s x s s x x ??=??=μC 式中C x 是待测样品液的浓度；C s 是苯甲酸标准液的浓度；A x 是待测样品液的吸光度；A s 是苯甲酸标准液的吸光度。 六 注意事项 1. 在测定时应将光闸拉出，不测定时立即将光闸推入，以保护光电管。 2. 当外界电压波动较大时要用电子交流稳压器，且随时观察并校正暗电流。 思考题 1. 比较722型分光光度计与752型分光光度计在结构和测量方法上有何异同点 2. 测定苯甲酸吸收曲线时，必须使用苯甲酸标准溶液，为什么
紫外分光光度法测定苯甲酸的解离常数
紫外分光光度法测定苯甲酸的解离常数 1、实验目的： （1）了解紫外分光光度计的基本原理、仪器结构和操作方法。（2）掌握采用紫外吸收光谱法测定苯甲酸解离常数的原理和方法。 2、实验原理 光度法是测定大多数有机弱酸或弱碱的解离常数的常用方法，适用条件是它们的酸式型和碱式型的吸收曲线不重叠。它是基于物质的分子状态和离子状态对某一波长光的吸收度不同的原理而建立起来的一种分析方法。当某种物质在溶液中达到解离平衡时，该溶液中同时存在物质的分子和离子状态，而这两种状态对同一波长的光的吸收度是不同的，因此，用分光光度计测得的溶液的吸光度是溶液中分子和离子吸光度的综合表现。 若被测物是一元弱酸性物质，则其解离式为： HL H+ + L-（1） Ka= [H+][L-]/[HL] （2） 将式（2）中的[H+]和Ka 分别用它们的副对数pH 和pKa 表示： pKa=pH+lg [HL]/[L-]（3） 由（3）式知，只要在一确定PH下，知道[HL]与[L-]的比值就可以计算得出物质的解离常数。 具体做法是，配制3个浓度相同而pH不同的HL溶液，在某一确定的波长下，用1.0 cm 的吸收池测量各溶液的吸光度A，并用酸度计测量各溶液的pH，各溶液的吸光度为
A = εHL[HL]+ εL-[L-]= εHL[H+]c/(Ka +[H+]) + εL- Ka c/(Ka + [H+]) C=[HL]+[L-] ① 在高酸性介质中，可以认为溶液中该酸只以HL形体存在，仍在以上确定的波长下测定吸光度，则 A HL = εHL[HL] ≈εHL c 即εHL c = A HL / c ② 在碱性介质中，可以认为溶液中该酸只以L-形体存在，这时仍在以上确定的波长下测定吸光度，则 A L- = εL-[L-] ≈εL-c 即εL-c = A L -/ c ③ 将②式和③式代人①式，整理后得 Ka = [H+][L-]/[HL]= [H+](A HL – A)/(A– A L-) ④ pKa=pH+lg(A– A L-)/(A HL – A) 这是利用光度法测定一元弱酸解离常数的基本关系式，式中A HL、A L-分别为在一定波长下弱酸定量地以HL、L-型体存在时溶液的吸光度，A为某一确定pH时溶液的吸光度。 苯甲酸在溶液中有如下的电离平衡： C6H5COOH + H2O C6H5COO- + H3O+ 可利用它在不同介质中的吸光度通过④式来计算它的解离常数。 3、实验器材：紫外可见分光光度计；配1 cm 石英比色皿；数字pH 计；50mL容量瓶3只、烧杯、量杯 试剂：0.001mol/L苯甲酸溶液、pH=4.0的缓冲液、0. 1mol/L H2SO4、0.1mol/L NaOH、纯水 4、实验步骤：
紫外分光光度法测定山梨酸及苯甲酸(精)
紫外分光光度法测定山梨酸及苯甲酸 2009-11-10 15:16:32| 分类:| 标签:|字号大中小订阅 为了防止食品在储存、运输过程中发生变质、腐败,常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格规定。苯甲酸和山梨酸以及它们的钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的两种防腐剂。苯甲酸具有芳烃结构。在波长 228nm 和 272nm 处有 K 吸收带和 B 吸收带;山梨酸具有α、β不饱和羰基结构。又称花椒酸,其化学结构为: 为了防止食品在储存、运输过程中发生变质、腐败,常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格规定。苯甲酸和山梨酸以及它们的钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的两种防腐剂。苯甲酸具有芳烃结构。在波长 228nm 和 272nm 处有 K 吸收带和 B 吸收带;山梨酸具有α、β不饱和羰基结构。又称花椒酸,其化学结构为:CH3CH=CHCH=CHCOOH 在波长 250nm 处有π→π*跃迁 K 吸收带,因此,根据它们的紫外吸收光谱特征可以对它们进行定性和定量测定。 由于食品中防腐剂用量很少,一般在 1/1000左右,同时食品中其它成分也可能产生干扰,因此,需要预先将防腐剂与其它成分分离,并经提纯浓缩后进行测定。常用的从食品中分离防腐剂的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验采用溶剂萃取法,用乙醚将防腐剂从样品中提取出来,再经碱性水溶液处理及乙醚萃取以达到分离、提纯的目的。 采用最小二乘法处理标准溶液的浓度和吸光度数据,以求得浓度与吸光度之间的回归直线方程,并根据直线方程计算样品中防腐剂的含量。 在波长 250nm 处有π→π*跃迁 K 吸收带,因此,根据它们的紫外吸收光谱特征可以对它们进行定性和定量测定。
实验一 紫外可见光光度法测定苯甲酸
实验一紫外可见光光度法测定苯甲酸 一、实验目的 1、了解紫外可见光光度计的使用方法 2、掌握紫外光谱法测定苯甲酸的基本原理 二、方法原理 当辐射能（光）通过吸光物质时，物质的分子对辐射能选择性的吸收而得到的光谱称为分子吸收光谱，分子吸收光谱的产生与物质分子结构、物质所处的状态，溶剂和溶液的ph 等因素有关。分子吸收光谱的强度与吸光物质的浓度有关。表示物质对光的吸收程度，通常采用“吸光度”这一概念来量度。 根据朗伯—比尔定律，在一定条件下，吸光物质的吸光度与物质的浓度成正比。 即A(吸光度）=εLC ε——摩尔吸光系数 L——溶层的厚度 C——物质的浓度 因此，只要选择一定的波长测定溶液的吸光度，即可求出该溶液浓度，这就是UV-VIS 分光光度法的基本原理。 在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，因此，采用紫外光度计测定苯甲酸在紫外光区的吸收光谱并能进行定量分析。 三、仪器与主要试剂 紫外可见光光度计，1cm石英比色皿。 0.1mol/L NaOH , 0.01mol/L NaOH ; 苯甲酸（AR) 四、实验步骤 1、苯甲酸标准溶液制备 称取苯甲酸（105℃烘干）250mg，用0.1mol/L NaOH溶液100ml溶解后，转入1000ml容量瓶中，蒸馏水稀释至刻度。此溶液1ml含0.25mg苯甲酸。 2、苯甲酸系列标准溶液的配制：分别取苯甲酸标准置备溶液配制成5μg/ml,10μg/ml,15μg/ml,20μg/ml,25μg/ml溶液，用0.01mol/mlNaOH稀释至刻度，摇匀。 3、苯甲酸吸收曲线的绘制：以0.01mol/L NaOH为参比，在200~380nm范围内测绘出苯甲酸的吸收曲线，确定其最大吸收波长λmax。 4、苯甲酸标准曲线的绘制：以0.01mol/LNaOH为参比，在波长λmax处分别测定步骤2中配制的5个苯甲酸标准溶液的吸光度值，记录数据，并以浓度与吸光度绘制标准曲线。 5、未知溶液的测定：取未知液，在波长λmax测定吸光度，通过标准溶液计算其含量。 五、数据处理 1、绘制苯甲酸在波长λmax的标准曲线。 2、计算未知液中苯甲酸的浓度。
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
紫外分光光度法测定饮 料中的苯甲酸 TYYGROUP system office room 【TYYUA16H-TYY-TYYYUA8Q8-
实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸 1 实验试剂与仪器 试剂 苯甲酸（AR），雪碧汽水 仪器 日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿 2 实验原理与方法 为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收 由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。 3 实验步骤 苯甲酸标准储备液配制 称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。 标准曲线绘制 取苯甲酸标准储备液、、、、，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为 200~350nm），找出λ max ，然后在λ max 处测定五个标准溶液的吸光度A。 样品处理和测定
紫外分光光度法测定苯甲酸.doc
紫外分光光度法测定苯甲酸.doc 苯甲酸是一种常见的有机化合物，广泛应用于医药、化工、染料等领域。其中，苯甲 酸的质量控制是至关重要的。本文介绍了一种用紫外分光光度法测定苯甲酸的方法。 一、实验原理 苯甲酸是一种有机酸，具有强烈的吸收紫外线的能力。在紫外区域（200nm-400nm），苯甲酸分子可吸收215nm处的光线，吸收峰位于第二阶段。据此，利用紫外分光光度法可 对苯甲酸进行测定。 二、实验步骤 1.样品的制备 取适量苯甲酸样品，精确称重，用洗耳球容器将样品溶于去离子水中，制备0.1mol/L 的苯甲酸溶液。通过调整PH值将其转化为离子型物质（苯甲酸钠）。 2.工作曲线的绘制 用离子型苯甲酸制备6个不同浓度的标准溶液, 称取苯甲酸钠，精确加入去离子水中，形成6个不同浓度的溶液（0.001mol/L、0.002mol/L、0.005mol/L、0.01mol/L、0.02mol/L、0.05mol/L）。在紫外分光光度计上逐个测量吸光度（OD值），根据吸光度与浓度间的线性关系绘制出工作曲线。 3.样品的测定 将出厂的样品溶液与与标准溶液相同的工作曲线进行测量。根据样品的OD值和工作曲线确定其浓度值。 三、实验注意事项 1.样品及标准溶液需严格混合均匀，以保持同质性。 2.样品的稀释及调整PH值时应掌握好操作技巧及时间。 3.绘制工作曲线准确、精确，需保证实验条件一致，减少误差。 4.在进行测量时，应注意除去溶液中的气泡，保证测量准确。 4.样品超出工作曲线范围，需要适当调整溶液的浓度以保证测量的准确性。 四、实验结果及分析
通过实验测定和计算，得到如下数据： 吸光度（OD）浓度（mol/L） 0.1 0.001 根据标准曲线，测得样品的吸光度（OD）为0.5，可计算得到样品的浓度为0.02mol/L。 实验结果表明，本方法具有定量快速、准确、灵敏等优点，为苯甲酸在工业生产中质量控制提供了可靠的分析方法。
紫外-可见分光光度法测定苯甲酸离解常数pKa
实验名称：紫外-可见分光光度法测定苯甲酸理解常数 姓名*** 学号*** 同组人员(小组) *** 一．实验目的 1．了解紫外分光光度计的基本原理、仪器结构和操作方法。 2．掌握采用紫外吸收光谱法测定苯甲酸解离常数的原理和方法。 3．熟悉用紫外-可见分光光谱分析法在研究离子平衡中的应用。 二．实验原理 它是基于物质的分子状态和离子状态对某一波长光的吸收度不同的原理而建立起来的一种分析方法。当某种物质在溶液中达到解离平衡时，该溶液中同时存在物质的分子和离子状态，而这两种状态对同一波长的光的吸收度是不同的，因此，用分光光度计测得的溶液的吸光度是溶液中分子和离子吸光度的综合表现。 在高酸性介质中，可以认为溶液中该酸只以HL形体存在，在碱性介质中，可以认为溶液中该酸只以L-形体存在。 苯甲酸在水中存在以下平衡 C6H5COOH + H2O C6H5COO- + H3O+（简写为HL H+ + L-） pKa=pH+lg [HL]/[L-] 由朗伯比尔定律知，稀溶液中吸光度与浓度成正比，考虑高酸性介质中，可近似认为该酸只以HL形体存在，在碱性介质中，同理认为溶液中该酸只以L-形体存在，在缓冲体系中HL与L-共存，可得 Ka = [H+][L-]/[HL]= [H+](A HL – A)/(A– A L-) 即pKa=pH+lg(A– A L-)/(A HL – A)
三．仪器和试剂 仪器：紫外-可见光谱仪（TU-1901），pH计，分析天平，二面通石英比色皿 试剂：1.00mmol/L苯甲酸溶液，pH=3.6缓冲溶液，pH=4.5缓冲溶液 四．实验步骤 1．按照下表配制溶液 *在50mL容量瓶定容 2．用pH计分别测量以上四种溶液pH值并记录。 3．依次取四种苯甲酸溶液于比色皿中，以各自相应的溶剂做参比，在波长为230~300nm之间扫描得吸收曲线，记录最大吸收波长及最大吸光度值。 五．实验数据的记录与处理 六．结果与讨论 1.结论 pH=3.6时pKa=3.9619，pH=4.5时，pKa=5.5680，pKa平均
紫外分光光度法测定食品中苯甲酸钠的含量
紫外分光光度法测定食品中苯甲酸钠的含量 【摘要】利用紫外分光光度法测定食品中苯甲酸钠含量。在222nm处有最大吸收，可通过紫外分光光度法进行测定。该法检测成本低，不需要大型仪器及特殊试剂，具有简便快速的特点，可应用于一般工厂实践中。 【关键词】紫外分光光度法；苯甲酸钠；含量测定 食品防腐剂是在食品工业中使用比较广泛的一种食品添加剂，其主要作用是抑制微生物的生长繁殖，以提高食品的保质期。苯甲酸钠是目前国内外广发应用的一种食品防腐剂，具有水中溶解度大，防腐效果好的特点。从保证食品安全的角度来说，研究简便快速测定食品中苯甲酸钠的方法具有重要的现实意义。[1] 紫外分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种仪器分析方法，本文研究通过紫外分光光度法来测定各类食品中防腐剂苯甲酸钠的含量，不但操作方便，而且实验条件简单，适合于食品防腐剂的快速检测。[2] 1.仪器与试剂 1.1仪器 TU—1810紫外分光光度计、FA1004 型电子天平、石英比色皿、水浴装置，容量瓶、分液漏斗、移液管、吸耳球、量筒、烧杯、玻璃棒等。 1.2试剂 苯甲酸钠（分析纯），40g/L氢氧化钠溶液，50%浓度的盐酸，乙醚（分析纯），蒸馏水酱油、水塔陈醋、美年达、甘草杏肉（超市购入）。 2.实验方法 2.1最大吸收波长的确定 配置（1.000g/L）的苯甲酸钠标准溶液1000mL，准确吸取1.00mL于100mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释成浓度为10mg/L的苯甲酸钠溶液，摇匀，以蒸馏水为参比，在波长200—300nm波长范围内测定吸光度，记录苯甲酸钠的最大吸收波长，结果如图1所示： 由图1分析可知，在200—300nm的波长范围内，苯甲酸钠的波长在222nm 处，有最大吸收波长，则222nm即为吸收测定波长。 2.2标准曲线的绘制
紫外可见分光光度法测定苯甲酸
紫外可见分光光度法测定苯甲酸 紫外可见分光光度法测定苯甲酸 实验目的： 1、掌握用PH 计测定溶液PH 的操作。 2、掌握755型紫外分光光度计的使用方法。 3、通过实验，加深对溶液PH 和溶液含量测定原理和方法的理解。 实验原理： 1、直接电位法测定溶液PH 长选用玻璃电极作为指示电极，饱和甘汞年级作为参比电极，浸如待测溶液中组成原电池，原电池的电动势与溶液的PH 呈线性，由于K 中包括难于计算的不对称电位和液接电位，实际工作中采用仪器直读法，即首先用已知PH 的缓冲液校准酸度计，然后直接测量待测溶液的PH 。 2、在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm 。可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。 实验器材： 试药：邻苯二甲酸氢钾缓冲液、混合磷酸盐缓冲液、0.01mol/L、0.1mol/L 氢氧化钠、苯甲酸 仪器：量瓶、烧杯、752型紫外分光光度计、石英比色杯、PHS-25型酸度计实验内容与方法： 一、用酸度计测定溶液的PH 值 1、安装电极 先把电极夹子夹在电极杆上。夹上甘汞电极，把引线叉连接在电极接线柱上。再将玻璃电极夹在夹子上，使玻璃球泡略高于甘汞电极，把电极插头插入电极孔内，旋紧螺丝。 2、连接电源 检查电源电压与仪器电压相符合后，将PH-mV 开关置“0”，接通电源。对PHS-25型酸度计，若用交流电源，接通电源后指示灯亮，若用直流电源，指示灯不亮。 3、定位 （1）将标准缓冲液倾入测试杯中，侵入电极，将PH-MV 开关旋至与缓冲液相应量程范围。 （2）查表5-1，调节定位调节器，使指针指向本缓冲液该温度下的PH 。并摇动测试杯，使指针稳定为止，重复调节定位调节器，定位后，定位调节器不可再旋动。 4、测量 （1）移开缓冲液测试杯。用纯水淋洗电极，并用滤纸轻轻吸干。
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
紫外分光光度法测定饮料 中的苯甲酸 Revised by BETTY on December 25,2020
实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸 1 实验试剂与仪器 试剂 苯甲酸（AR），雪碧汽水 仪器 日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿 2 实验原理与方法 为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收 由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。 3 实验步骤 苯甲酸标准储备液配制 称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。 标准曲线绘制 取苯甲酸标准储备液、、、、，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为 200~350nm），找出λ max ，然后在λ max 处测定五个标准溶液的吸光度A。 样品处理和测定
紫外分光光度法测定苯甲酸含量
紫外分光光度法测定苯甲酸含量 一、实验目的 1．了解紫外分光光度法基本原理并学会紫外分光光度计的使用操作 2．掌握吸收标准曲线的绘制方法及样品含量的测定方法 二、基本原理 研究物质在紫外、可见光区的分子吸收光谱的分析方法称为紫外-可见分光光度法。紫外—可见分光光度法是利用某些物质的分子吸收200～800 nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁，广泛用于无机和有机物质的定性和定量测定。 物质对辐射的吸收遵循朗伯-比尔定律。当一束平行的单色光通过溶液时，溶液的吸光度(A) 与溶液的浓度(C) 和厚度(b) 的乘积成正比，这个定律通常称为朗伯－比尔定律。它是分光光度法定量分析的依据，适用于能量不同的各种电磁辐射，也适用于稀溶液、气体和均质固体。 含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。未知结构不同对紫外及可见光的吸收曲线不同。苯甲酸及其盐对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm 左右。 三、仪器与试剂 1．仪器：UV-2401PC 紫外可见分光光度计日本岛津 1cm石英比色皿：2个；容量瓶：50mL，11只；500ml，1只；250ml，1只；移液管：10ml、20ml、 25mL 各 1支； 2．试剂 ①1mg/ml苯甲酸储备液：称取0.5克苯甲酸，加水加热溶解，用水稀释至500ml，摇匀后备用。 ②取苯甲酸储备液25.00ml，置于250ml容量瓶中，用水稀释至250ml，摇匀后备用。此标准溶液含苯甲酸100μg/ml。 四、实验步骤 1．标准溶液的配制 取50mL容量瓶10只，分别加入100μg/ml的苯甲酸溶液1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00