用紫外分光光度计测定溶液溶度的实验步骤

用紫外分光度计测定溶液的浓度

一、实验材料与仪器

罗丹明B,蒸馏水,紫外分光度计,10ml比色皿(2个),250ml容量瓶,烧杯,移液管,比色管(若干)

二、实验步骤

①用称量纸称取0.0025g的罗丹明B,放入烧杯中加入适量的蒸馏水

溶解,并用玻璃棒搅拌均匀,然后转入250ml容量瓶中,贴上标签待用(此时的溶液的溶度为10mg/L)。

②取5支25ml的比色管,用量液管分别加入1.00,2.00,3.00,4.00,

5.00ml的已配好的罗丹明B溶液。然后加入蒸馏水稀释至10ml,

此时的比色管中溶液的浓度分别为1,2,3,4,5mg/L。

③打开紫外分光光度计,预热30分钟,让机器稳定下来,然后以蒸

馏水作为参比溶液,加入比色皿中(适量),然后用吸水纸把比色皿表面的溶液吸干,放入五联池中,盖上盖,在电脑界面上点击,“基线”图标,进行消除基线,由于罗丹明B的最大吸收峰为554,故把波长扫描范围定在400~650nm。

④消除基线后,取出盛参比溶液的比色皿,把未知浓度的溶液加入

比色皿中,用紫外分光光度计进行测定。

三、数据处理与matlab绘图

x=1:5;

y=[0.242 0.507 0.788 1.044 1.254]

p=polyfit(x,y,1);

xi=0:6;

yi=polyval(p,xi);

plot(x,y,'ob',xi,yi,'r')

ylabel('吸光度值')

xlabel('罗丹明B 的浓度(mg/L)') 01234

56

-0.20

0.2

0.4

0.6

0.811.2

1.4

1.6

罗丹明B 的浓度(mg/L)吸光度值

实际值点拟合曲线

6 用紫外分光光度计测定

实验六 用紫外分光光度计测定 萘在硫酸铵水溶液中的活度系数 1 目的要求 (1)了解非电解质在盐水溶液中活度系数的测定方法 (2)掌握UV-紫外分光光度计的使用方法 2 实验原理 萘的水溶液符合比耳-朗伯定律。用三个不同波长(λ=267,275,283nm )的光,测定不同相对浓度的萘溶液的光密度,以光密度对萘的相对浓度作图,得到三条通过零点的直线。 A 0=K 'C 0L 式中为萘在纯水中的光密度;为萘在纯水中的溶液浓度,为消光系数。 对于萘的盐溶液,用同样的波长进行测定得到图 从图可以看出,萘在水溶液中和盐溶液中,都是在λ=267,275,283nm 处出现三个峰,吸收光谱几乎相符。说明盐(硫酸铵)的存在并不影响萘的吸收光谱。两种溶液中的消光系数是相同的。 A=K 'CL 式中A 为萘在盐水溶液中的光密度,C 为萘在水中的浓度。 把盐加入饱和的非电解质水溶液,非电解质的溶解度就起变化。如果盐的加入增加非电解质的活度系数,这个现象叫盐析,反之叫盐溶。 Setschenon 提出盐效应经验公式 lg C C 0=KC S 式中r ,r 0为活度系数。 lg 0r r =lg C C 0= KC S 通过测定萘水溶液的光密度与萘盐水溶液的光密度就可以求出活度系数。 本实验是用不同浓度的硫酸铵盐溶液测定萘在盐溶液中的活度系数,了解萘在水中溶解度随硫酸铵的浓度增加而下降,硫酸铵对萘起盐析作用。 3 仪器 药品 UV-紫外分光光度计1台,容量瓶50ml 6只,25ml 3只,锥形瓶25ml 6只,刻度移液管25ml 1支。 萘(A.R.);硫酸铵(A.R.)

4 实验步骤 (1)在25℃下制备萘在纯水中饱和溶液100ml,取三只25ml容量瓶,分别配制相对浓度为0.75、0.5、0.25三个不同浓度的萘水溶液。 (2)6个50ml的容量瓶配置硫酸铵溶液1.2mol/l, 1.0mol/L,0.6mol/l, 0.4mol/l, 0.2mol/l,每份溶液倒出一半至25ml锥形瓶中,加入萘使成为相应盐溶液浓度的饱和萘水溶液。 (3)用5ml饱和萘水溶液与1mol/l硫酸铵溶液混合,用5ml(1mol/l)硫酸铵溶液为参比液,测定λ=260nm~290nm间萘的吸收光谱。 (4)用(λ=267,275,283nm)的光测定不同相对浓度的萘水溶液的光密度,以水作为参比液。 (5)同浓度的硫酸铵水溶液作为参比液,在λ=267,275,283nm波长处分别测定不同浓度的饱和萘~硫酸铵水溶液的光密度。 5 数据处理 (1)根据所得不同浓度萘水溶液的光密度值对萘液的相对浓度作图,得三条通过零点的直线,求出消光系数。 (2)根据测得不同浓度的硫酸铵饱和萘溶液的光密度计算出活度系数γ值,以lgγ对硫酸铵溶液的相应浓度作图呈直线关系。 (3)从图上求出极限盐效应常数。 6 注意事项 (1) 本实验所用试剂萘和硫酸铵纯度要求较高,可以通过结晶处理,提高试剂纯度,满足实验需要。 (2) 水饱和溶液和萘的盐水饱和溶液的饱和度一定要充分,可以通过振荡器,使其充分饱和。 7思考题 (1)什么要测定λ=260nm~290nm的萘水溶液及萘水溶液的吸收光谱? (2)影响本实验的因素有哪些?

紫外分光光度计操作规范

721紫外分光光度计操作规范 产品概述: 721分光光度计采用经典的光路系统和精良的制造工艺,使仪器的测试精度及稳定性较传统产品有很大的提高;广泛适用于冶金、化工、机械、医学、生物、农业、环保、教学等行业和领域。该仪器也是食品厂、饮用水厂办QS认证中的必备检验设备。主要技术指标波长范围:360∽800nm 波长精度:360∽600±3nm 600∽700±6nm 700∽800±8nm 透射比正确度:±2.5% 透射比重复性:0.5。 产品结构: 使用规程: 1、预热仪器。为使测定稳定,将电源开关打开,使仪器预热20min,为了防止光电管疲劳,不要连续光照。预热 仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。2 2.选定波长。根据实验要求,转动波长调节器,使指针指示所需要的单色光波长。 3.调T零。放入遮光体(黑色),合上盖子,在透射比下按0%T按钮,调节T=0%。 4.调100%T。调节T=100%。将盛蒸馏水或参比溶液的比色皿放入比色皿座架中的第一格内,有色溶液放在其它格内,把比色皿暗箱盖子轻轻盖上,使透光度T=100%, 3.重复进行打开样品室盖,调0,盖上样品室盖,调透射比为100%的操作至仪器稳定。 吸光度测定 1)按“功能键”,切换至透射比测试模式。 2)置入遮光体,合上样品室盖,并使其进入光路,按动“0%T”键调T零,此时仪器显示“00.0”或者“-00.0”。 3)按动“功能键”,切换至吸光度测试模式。 4)置入参比样品,按动“100%T”键,此时仪器显示“BL”延时数秒后便显示“.000”或“-.000”。 5)置入待测溶液,读取测试数据。 透射比测定 1)按”功能键”,切换至透射比测试模式。

用紫外分光光度计测定溶液溶度的实验步骤

用紫外分光度计测定溶液的浓度 一、实验材料与仪器 罗丹明B,蒸馏水,紫外分光度计,10ml比色皿(2个),250ml容量瓶,烧杯,移液管,比色管(若干) 二、实验步骤 ①用称量纸称取0.0025g的罗丹明B,放入烧杯中加入适量的蒸馏水 溶解,并用玻璃棒搅拌均匀,然后转入250ml容量瓶中,贴上标签待用(此时的溶液的溶度为10mg/L)。 ②取5支25ml的比色管,用量液管分别加入1.00,2.00,3.00,4.00, 5.00ml的已配好的罗丹明B溶液。然后加入蒸馏水稀释至10ml, 此时的比色管中溶液的浓度分别为1,2,3,4,5mg/L。 ③打开紫外分光光度计,预热30分钟,让机器稳定下来,然后以蒸 馏水作为参比溶液,加入比色皿中(适量),然后用吸水纸把比色皿表面的溶液吸干,放入五联池中,盖上盖,在电脑界面上点击,“基线”图标,进行消除基线,由于罗丹明B的最大吸收峰为554,故把波长扫描范围定在400~650nm。 ④消除基线后,取出盛参比溶液的比色皿,把未知浓度的溶液加入 比色皿中,用紫外分光光度计进行测定。 三、数据处理与matlab绘图 x=1:5; y=[0.242 0.507 0.788 1.044 1.254] p=polyfit(x,y,1);

xi=0:6; yi=polyval(p,xi); plot(x,y,'ob',xi,yi,'r') ylabel('吸光度值') xlabel('罗丹明B 的浓度(mg/L)') 01234 56 -0.20 0.2 0.4 0.6 0.811.2 1.4 1.6 罗丹明B 的浓度(mg/L)吸光度值 实际值点拟合曲线

紫外分光光度法测定蛋白质浓度的原理

紫外分光光度法测定蛋白质浓度的原理 介绍 紫外分光光度法是常用的一种测定蛋白质浓度的方法。本文将详细介绍紫外分光光度法的原理以及其在蛋白质浓度测定中的应用。 紫外分光光度法原理 紫外分光光度法利用蛋白质溶液对紫外光的吸收特性进行测量,从而确定蛋白质的浓度。蛋白质分子中的色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)和酪氨酸(Tyr)等芳香 族氨基酸在紫外光区域具有吸收峰,通过测量吸光度可以间接测定蛋白质的浓度。 实验步骤 以下是使用紫外分光光度法测定蛋白质浓度的一般实验步骤: 1. 制备蛋白质样品 制备含有待测蛋白质的溶液样品。确保溶液浓度适中,避免过高或过低浓度对测定结果产生影响。 2. 预热紫外分光光度计 打开紫外分光光度计并进行预热,使其达到稳定的工作温度。 3. 校准光程 使用标准样品校准紫外分光光度计的光程,确保准确测量待测样品的吸光度。 4. 测定吸光度 将待测样品倒入光度池,使用紫外分光光度计测量样品溶液在特定波长下的吸光度。常用波长为280nm,其对色氨酸具有最大吸收峰。

5. 绘制标准曲线 制备一系列已知浓度的蛋白质标准溶液,分别测定它们的吸光度。利用这些测定值绘制标准曲线,用于计算待测样品的蛋白质浓度。 6. 计算蛋白质浓度 根据标准曲线,计算出待测样品的蛋白质浓度。根据不同的光吸收系数和波长,可以得出不同氨基酸的摩尔吸光系数,再根据摩尔吸光系数进行计算。 紫外分光光度法的优势 紫外分光光度法具有以下优势: 1.灵敏度高:对浓度较低的蛋白质样品也能够进行准确测量。 2.快速便捷:测量过程简单,不需要复杂操作。 3.非破坏性:样品在测量过程中不受损伤,可以进行进一步的分析。 紫外分光光度法的局限性 紫外分光光度法也存在一定的局限性: 1.干扰物质:一些样品中可能含有其他吸收波长与蛋白质相近的物质,会对测 定结果产生干扰。 2.重复性:在批量测定时,光度池的装填和清洗对结果的重复性有一定影响。 3.波长选择:根据不同蛋白质的吸收特性,选择适当的波长进行测量,否则会 导致测定结果不准确。 结论 紫外分光光度法是一种常用的测定蛋白质浓度的方法。通过测量蛋白质对紫外光的吸光度,可以间接测定蛋白质的浓度。该方法具有灵敏度高、操作简便等优势,但也存在一定的局限性。在实际应用中,需要根据具体的实验条件和样品特性进行优化,以获得准确可靠的测定结果。 参考文献 1.Smith, P.K., et al. (1985). Measurement of Protein Using Bicinchoninic Acid. Analytical Biochemistry, 150(1):76-85.

溶度积常数的测定实验报告

溶度积常数的测定实验报告 溶度积常数的测定实验报告 引言: 溶度积常数是描述溶解度的物理量,它反映了在一定温度下,溶质在溶液中达到饱和时的溶解度。溶度积常数的测定对于了解溶解度规律、溶解平衡以及溶解过程的研究具有重要意义。本实验旨在通过测定铅(II)碘化物的溶度积常数,探究溶解度与温度的关系。 实验方法: 1. 实验器材准备: - 烧杯:用于装载试剂和溶液。 - 热水浴:用于控制溶液温度。 - 电子天平:用于称量试剂。 - 离心机:用于加速溶质溶解。 - 滴定管:用于加入溶液。 - 恒温槽:用于控制溶液温度。 - 紫外可见分光光度计:用于测定溶液浓度。 2. 实验步骤: a) 将烧杯称重,并记录质量。 b) 向烧杯中加入一定量的铅(II)碘化物固体。 c) 向烧杯中加入适量的水溶解铅(II)碘化物固体。 d) 使用滴定管将溶液搅拌均匀。 e) 将烧杯放入热水浴中,保持一定温度。

f) 离心溶液,以去除悬浮固体。 g) 取出一定体积的溶液,用紫外可见分光光度计测定其吸光度。 h) 根据吸光度和标准曲线,计算溶液中铅(II)离子的浓度。 i) 根据溶液体积和铅(II)离子的浓度,计算溶度积常数。 实验结果与分析: 在不同温度下,测定了铅(II)碘化物的溶度积常数,并绘制了溶度积常数与温度 的关系曲线。实验结果表明,溶度积常数随温度的升高而增大。这与热力学理 论中的溶解平衡原理相符合,即在一定温度下,溶质溶解过程中吸热与放热的 平衡关系。 实验中,我们使用了紫外可见分光光度计测定溶液中铅(II)离子的浓度。通过构 建标准曲线,我们能够准确地计算出溶液中铅(II)离子的浓度,从而得出溶度积 常数。这种测定方法具有高精度和可重复性的优点,能够有效地评估溶解度的 变化。 结论: 本实验通过测定铅(II)碘化物的溶度积常数,探究了溶解度与温度的关系。实验 结果表明,溶度积常数随温度的升高而增大。通过测定溶液中铅(II)离子的浓度,我们能够准确地计算出溶度积常数。这一实验结果对于了解溶解度规律、溶解 平衡以及溶解过程的研究具有重要意义。 未来研究方向: 本实验只针对铅(II)碘化物进行了溶度积常数的测定,未来可以扩展研究范围, 探究其他物质的溶度积常数,并研究其与温度、压力等因素的关系。此外,可 以通过改变溶剂的性质,如溶剂极性、溶剂中其他溶质的存在等,来研究这些

紫外分光光度计操作流程

紫外分光光度计操作流程 紫外分光光度计是一种常用的实验仪器,用于测量样品在紫外光区域的吸光度。本文将详细介绍紫外分光光度计的操作流程,让读者对该仪器的使用有更清晰的了解。 1. 准备工作 在操作紫外分光光度计之前,需要做一些准备工作。首先,确保仪器已经连接好电源并开启。然后,检查样品室是否干净,并准备好待测样品溶液。此外,还需要准备一支清洁的玻璃汇流排,用于清洁样品室。 2. 校正仪器 在正式进行样品测量之前,需要对紫外分光光度计进行校正,以确保测量结果的准确性。具体的校正步骤根据具体仪器的型号和品牌而有所不同,一般包括:零点校正、波长校正和光程校正。按照仪器说明书上的要求进行操作,校正完成后即可进行样品测量。 3. 设定波长 在测量样品前,需要设定所需的波长。根据待测样品的特性,选择适当的波长进行测量。将波长盘设置至所需的波长,可以通过旋钮或者数字输入的方式设定波长值。 4. 清洁样品室

在每次更换样品之前,需要对样品室进行清洁,以避免前一次样品残留对当前测量结果的干扰。使用清洁的玻璃汇流排将样品室内的杂质和残留溶液清除,确保样品室处于干净的状态。 5. 放置参比溶液 为了进行准确测量,需要放置一瓶参比溶液在样品室中。参比溶液是已知吸光度的溶液,可以用于校正光的强度。根据仪器操作要求,将参比溶液放置在样品室内,然后关闭样品室。 6. 测量样品吸光度 样品室准备好后,将待测样品溶液倒入样品池中。然后,将样品池放入样品室并关闭。选择测量模式(例如,吸光度或浓度测量),并按下开始测量的按钮。 7. 记录测量结果 等待测量完成后,将测量结果记录下来。通常,紫外分光光度计会在显示屏上显示吸光度值。注意,结果可能是负值,这是由仪器内部自动修正造成的,并不代表实际的吸光度。 8. 清洁样品池 测量完毕后,需及时清洁样品池,以防止样品残留对下次测量的干扰。将样品池取出,用溶剂或纯水彻底清洗干净,然后将其晾干或用气流吹干。 9. 关闭仪器

紫外分光光度计的使用方法

紫外分光光度计的使用方法 一、仪器简介 紫外分光光度计是一种常用的实验室仪器,主要用于分析物质在紫外 光区域的吸收情况,从而进行定量或定性分析。其基本原理是利用物 质对紫外光的吸收特性,测量样品溶液对不同波长紫外光的吸收率, 并根据样品吸收率与标准曲线之间的关系计算出样品中所含物质的浓度。 二、操作步骤 1. 开机:将紫外分光光度计插电,并打开电源开关。待仪器自检完成后,按下“测量”键进入测量模式。 2. 标定:在进行样品测试之前,需要进行标定操作。首先取一定量的 纯水放入比色皿中,将比色皿放置于仪器台面上。然后按下“标定”键,在弹出窗口中选择“空白”,并确认。此时仪器会自动调零并记 录下当前空白状态。 3. 放置样品:取一定量的待测试样品溶液放入比色皿中,并将比色皿 放置于仪器台面上。注意避免气泡产生。 4. 测量:按下“开始”键开始测量。仪器会自动扫描一定的波长范围,并记录下样品吸光度数据。测量完成后,仪器会自动计算出样品的吸 光度值。 5. 计算:根据样品吸光度值与标准曲线之间的关系,可以计算出样品

中所含物质的浓度。如果需要进行定性分析,则可以根据不同物质在 不同波长下的吸收特性进行判断。 三、注意事项 1. 操作前应检查仪器是否处于正常工作状态,并确认比色皿清洁干燥。 2. 测量时应尽量避免气泡产生,以保证数据准确性。 3. 标定操作应在每次使用前进行,以确保测量结果的准确性。 4. 操作完毕后应及时清洗比色皿和仪器表面,并将仪器关闭。 四、总结 紫外分光光度计是一种常用的实验室仪器,在化学、生物等领域有着 广泛的应用。正确使用该仪器可以提高实验效率和数据可靠性,但也 需要注意操作细节和安全问题。希望通过本文介绍,读者能够更好地 掌握紫外分光光度计的使用方法。

紫外分光度法实验报告

紫外分光度法实验报告 紫外分光度法实验报告 引言: 紫外分光度法是一种常用的分析方法,通过测量样品在紫外光区域的吸收特性,可以确定样品的化学组成、浓度和结构等信息。本实验旨在通过使用紫外分光 光度计,分析不同浓度的对苯二酚溶液的吸收光谱,研究其吸收特性与浓度的 关系。 实验步骤: 1. 准备工作: a. 洗净试管和石英比色皿,确保无杂质。 b. 使用纯水和酒精清洗紫外光度计的比色皿,保持其干净。 c. 准备一系列不同浓度的对苯二酚溶液,如0.1mol/L、0.08mol/L、0.06mol/L 等。 2. 测量吸收光谱: a. 将石英比色皿放入紫外光度计的比色皿槽中,调节光程为1cm。 b. 使用纯水校正基线,确保光谱仪的零点准确。 c. 依次将不同浓度的对苯二酚溶液倒入石英比色皿中,记录吸收光谱。 d. 注意避免气泡和污染物的干扰,确保测量结果准确可靠。 3. 数据处理: a. 通过光谱仪的软件,将吸收光谱数据导出到电脑中。 b. 利用数据处理软件(如Excel),绘制对苯二酚溶液的吸收光谱曲线。 c. 分析光谱曲线的特点,确定吸收峰的位置和强度。

结果与讨论: 根据实验数据和处理结果,我们得到了对苯二酚溶液在紫外光区域的吸收光谱 曲线。观察光谱曲线,我们可以发现在约280nm处有一个较强的吸收峰。该吸收峰的强度随着对苯二酚溶液浓度的增加而增加,说明对苯二酚在紫外光区域 的吸收能力与其浓度呈正相关关系。 进一步分析发现,对苯二酚溶液的吸收峰位置和强度与溶液的浓度存在一定的 线性关系。通过绘制吸收峰强度与浓度的曲线,我们可以得到一个标准曲线, 用于测定未知浓度的对苯二酚溶液。 通过实验,我们还可以了解到对苯二酚溶液在紫外光区域的吸收特性与其分子 结构有关。对苯二酚分子中存在着苯环和酚基团,这些结构使得对苯二酚具有 较好的紫外吸收能力。在实验中,我们还可以通过比较不同化合物的吸收光谱,研究其分子结构和化学性质。 结论: 通过紫外分光度法实验,我们成功地分析了对苯二酚溶液在紫外光区域的吸收 特性。实验结果表明,对苯二酚溶液的吸收峰位置和强度与其浓度呈正相关关系。实验还揭示了对苯二酚分子结构与其紫外吸收能力之间的关联。 紫外分光度法作为一种常用的分析方法,具有广泛的应用领域。通过测量样品 在紫外光区域的吸收特性,我们可以快速、准确地确定样品的化学组成和浓度。在实际应用中,紫外分光度法常用于药物分析、环境监测和生物化学等领域。 总之,本实验通过紫外分光度法分析对苯二酚溶液的吸收光谱,探究了其吸收 特性与浓度的关系。实验结果对深入理解紫外分光度法的原理和应用具有重要 意义,也为今后的科研工作提供了基础。

紫外分光光度法的使用流程

紫外分光光度法的使用流程 概述 紫外分光光度法是一种常用的分析测试方法,常用于测量物质在紫外光区域的 吸光度。本文档介绍了紫外分光光度法的使用流程,包括仪器准备、样品处理、操作步骤和结果分析等方面的内容。 仪器准备 在使用紫外分光光度法之前,需要准备以下仪器: •紫外分光光度计:用于测量样品在紫外光区域的吸光度。 •常规实验室用具:如移液器、容量瓶、比色皿等。 样品处理 在进行紫外分光光度法实验前,需要对样品进行处理: 1.样品制备:根据实验要求,准备需要测量吸光度的样品。样品可以是 溶液、药物片剂或悬浮液等。 2.样品处理:根据实验需求,对样品进行必要的处理。例如,可以使用 溶解剂将药物片剂溶解成溶液。 操作步骤 在进行紫外分光光度法实验时,需要按照以下步骤进行: 1.打开紫外分光光度计:按照仪器说明书的操作步骤,正确打开紫外分 光光度计。 2.设置实验条件:根据实验要求,设置紫外分光光度计的参数,例如波 长范围、光强度等。 3.校准仪器:根据实验要求,进行仪器的校准操作,以确保测量结果的 准确性。 4.测量基线:使用纯溶剂进行基线测量,以排除仪器和溶剂的吸光度对 测量结果的影响。 5.测量样品:将处理好的样品放入比色皿中,将比色皿放入光度计中进 行测量。记录下样品的吸光度值。 6.处理数据:将测得的吸光度值进行计算和处理,得出最终的测试结果。 7.清洗仪器:实验结束后,将仪器清洗干净,以保证下次使用的准确性。

结果分析 在紫外分光光度法实验结束后,需要对结果进行分析和解读: 1.利用标准曲线:根据实验所采用的标准品,制作标准曲线。通过比较 样品的吸光度值和标准曲线上的对应值,可以计算出样品中目标物质的含量。 2.数据处理:根据实验要求,对测得的吸光度值进行计算和处理,例如 计算吸光度差、相对浓度等。 3.结果解读:根据实验目的和需求,对结果进行解读和分析。 小结 紫外分光光度法是一种重要的分析测试方法,可用于测量物质在紫外光区域的吸光度。本文档介绍了紫外分光光度法的使用流程,包括仪器准备、样品处理、操作步骤和结果分析等方面的内容。通过按照本文档的流程进行操作,可以得到准确的测试结果,并进行合理的数据分析和解读。

紫外可见光光度计标准溶液配置

紫外可见光光度计标准溶液配置 紫外可见光光度计标准溶液配置 一、实验目的 1、制备紫外可见光光度计的标准溶液,以供后续的光度测定实验及其他研究使用; 2、根据现有的仪器性能,建立准确的校准曲线; 3、掌握紫外可见光光度计的基本工作原理。 二、实验原理 紫外可见光光度计是一种用于测量液体样品在紫外可见光波段 的可见光吸收的仪器,可以用来快速、准确地测量液体样品的吸收度及比吸收度,是一种全自动的、快速的、具有准确性的仪器,能够对样品中的有效成分进行测定,提供研究者重要的实验数据和结论。 在实验中,需要制备一系列标准溶液,分别为各个不同浓度的标准溶液。制备标准溶液的步骤为:1)根据标准溶液的浓度,计算所需量的未稀释溶液的药品量;2)将所需药品放入容量瓶中,加入一定体积的适当的溶剂;3)稀释溶液,直到达到预期浓度为止;4)首先,在紫外可见光光度计上面测量空白,然后再将各个不同浓度的标准溶液依次测定,直到所有的标准溶液都完成测试为止。 三、实验程序 1、准备标准溶液: 根据标准溶液的浓度,计算所需的药品量。将药品放入容量瓶中,加入适当体积的溶剂,稀释溶液,直到达到预期浓度为止,或使用要

测样品自身的未稀释溶液来进行测量。 2、设定测量的波长范围: 选择紫外可见光光度计,根据要测样品的特性,设定测量波长范围,一般情况下,吸收度的测定范围以200nm - 800nm为宜。 3、测量样品的空白: 在测量样品之前,应先进行空白测量,以确定该样品是否有测量时污染,以便于更准确地衡量。 4、测量样品吸收率: 接着测量各个不同浓度的标准溶液,比较其结果,绘制出校准曲线,以便用来测量样品的吸收度。 5、确定误差: 计算校准曲线各点吸收度与其浓度的差值,如果误差比较大,则应重新绘制调整校准曲线,以保证准确性。 四、实验结果 在本实验中,根据紫外可见光光度计绘制的校准曲线如下: 浓度(mg/L) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 吸收度 0.05 0.15 0.25 0.35 0.45 五、实验结论 本实验中,我们制备了一系列的标准溶液,并且利用紫外可见光光度计测得了各个标准溶液的吸收度,并且根据这些测量结果绘制出校准曲线。通过本次实验,我们掌握了紫外可见光光度计的基本工作原理,熟悉了如何制备标准溶液,及如何建立准确的校准曲线,为今

紫外分光光度计操作步骤

紫外分光光度计使用操作步骤 1、开机 1.1.打开电源 测试前需让仪器至少预热15分钟. 1.2空白校正 UV-4802型光度计,由于机内储存有系统基线,一般情况下,可不做空白校正,只要将参比放入参比光路,样品放入样品光路即可获得测试结果。1 对于定点测试,若欲得到更为准确的测试结果,可按如下步骤进行: a. 将盛参比液的参比比色皿放入参比光路,盛参比液的样品比色皿放入样品光路,按【0Abs/100%T】键,进行空白校正。b.将样品比色皿中的参比液倒出,经过冲洗,盛入样品溶液,置入样品光路,读取试验结果或按【START】键进行测量并得到结果。2.对于定性测试(光谱扫描),在设置好扫描参数后,将盛参比液的参比比色皿放入参比光路,盛样品的样品比色皿放入样品光路,按【START】键可直接得到扫描图谱,为了消除系统基线可能带来的影响,可将盛参比液的参比比色皿放入参比光路,盛参比液的样品比色皿放入样品光路,按【0Abs/100%T】键得到当前设置下的用户基线,再将盛样品的样品比色皿放入样品光路,按【START】键得到扫描图谱。 1.3.波长设置 在“光度计模式”中设置波长步骤如下:按【SETλ】键,用数字键输入欲去波长。 2、测定功能 2.1光度计模式 在主菜单中按【1】键便进入“光度计模式”测试界面,将盛参比液的参比比色皿放入参比光路,盛参比液的样品比色皿放入样品光路,按【0Abs/100%T】键,进行空白校正,将样品比色皿中的参比液倒出,经过冲洗,盛入样品溶液,置入样品光路,读取试验结果。若按【ESC/STOP】则回到主菜单. 2.2光谱扫描 按【3】直接进入“光谱扫描”界面,按F1设置扫描参数,包括扫描的开始波长,结束波长,扫描时间间隔和速度。将参比液置入参比光路和样品光路后,按【0Abs/100%T】键可建立当 前扫描参数设置下的用户基线. 按【ESC/STOP】键可以停止 扫描; 用用户基线扫描:将待分析样品置入光路后,按【START】键进行样品扫描。 用系统基线扫描:将参比液置入参比光路,将待分析样品置入样品光路中,按【START】键进行样品扫描。 图谱处理:扫描结束后按【<】或【>】键可以改变X轴标尺而按【∧】或【∨】键可以改变Y轴标尺,按【F3】键进入图49所示界面,进行峰谷检索,仪器设计有两类检索供你选择:a.逐点检索:按【>】键从左到右逐点检索,按【<】键从右到

分光光度法的具体步骤

https://www.360docs.net/doc/f219232666.html,/view/168b8186bceb19e8b8f6ba5b.html https://www.360docs.net/doc/f219232666.html,/view/923046.htm 一、开机 开机前将样品室内的干燥剂取出,确认电源是否连接。打开仪器电源开关,等待仪器自检通过,自检过程中禁止打开样品室。 二、使用 仪器自检结束后(7个自检项目均出现OK字样),按[MAIN MENU]键(主菜单),屏幕显示如下5个功能项:1. Phtometry(定量运算);2.Wavelength Scan(波长扫描模式);3.Time Scan(时间曲线扫描);4.System(系统校正); 5.Data display(光度直接测量模式)。按相应选项前的数字键,即可进入该选项的下一级子菜单。 1.目的 规范Cary100紫外可见分光光度计的使用和维护。 2.适用范围 本规程适用于Cary100紫外可见分光光度计的使用和维护。 3.职责 研发实验室负责人负责本文件的起草,实验室仪器管理员负责Cary100紫外可见分光光度计的日常使用和维护。4.系统组成 本系统由Cary100紫外可见分光光度计主机、Cary Winuv软件、Dell计算机等组成。 5.程序 5.1接通电源,打开机算计、主机电源开关,仪器进行自检。 5.2自检结束后,双击“Cary winUV”图标。主机同时会发出吱吱的声响(表示脉冲电源正常工作)。 5.3单波长扫描 5.3.1在Cary winUV 文件夹下双击“Simple Reads”快捷键,进入“Simple Reads-Online”状态。 在该程序下点击“Setup”,对所需的波长、信号平均时间(Ave time(s))、狭缝宽度(SBW(nm))、Y-轴参数设置等参数进行设置,设好后,按“OK”返回。 5.3.2在参比池、样品池中放空白液,关上盖板,单击“Zero”图标,完成较零。 5.3.3取出样品池,用待测溶液冲洗数次后,倒入待测溶液,单击“READ”读数;继续放入样品按“READ”读数,直到全部样品读完。 5.3.4用编辑菜单完成数据整理。 5.3.5按Print…打印报告,完成测试。 5.4全波长扫描 5.4.1在Cary winUV 文件夹下双击“Scan”快捷键,进入“Scan-Online”状态。 在该程序下点击“Setup”,进入参数设置页面。分别对“Cary”、“Options”、“Baseline”、“Reports”、“Auto Store”项下参数进行设置。设好后,按“OK”返回。 5.4.2在参比池、样品池中放空白液,关上盖板,单击“Baseline”图标,仪器开始对设定的波长范围进行扫描。5.4.3扫描结束后,将样品池中空白溶液更换为待测样品溶液,单击“START”,输入所要保存的文件名,按“OK”后开始扫描;继续放入样品按“START”扫描,直到全部样品扫描结束。 5.4.4如果需要可以用编辑菜单对数据进行整理。 5.4.5按Print…打印报告,完成测试。 5.5标准曲线 5.5.1在Cary winUV 文件夹下双击“Concentration”快捷键,进入“Concentration-Online”状态。 在该程序下点击“Setup”,进入参数设置页面。分别对“Cary”、“Standards”、“Samples”、“Reports”、“Auto Store”项下参数进行设置。设好后,按“OK”返回。 5.5.2在参比池、样品池中放空白液,关上盖板,单击“Zero”图标,完成较零。 5.5.3按所设定的标准样品顺序,单击“READ”依次对标准样品进行测定。 5.5.4标样测试完毕后,更换待测样品,单击“READ”进行待测样品测试。

紫外可见分光光度计的操作步骤

紫外可见分光光度计的操作步骤紫外可见分光光度计操作步骤 紫外可见分光光度计是一种常用的实验仪器,常用于测量溶液的吸光度和透过率。下面将介绍紫外可见分光光度计的操作步骤,帮助读者了解如何正确地使用该仪器。 1. 准备工作 在开始使用紫外可见分光光度计之前,需要进行一些准备工作。首先,检查仪器是否正常运行,包括电源、灯泡和检测器等。确保仪器处于正确的工作状态。其次,准备好所需的样品溶液,并将其放置在透明的玻璃或石英容器中,以避免对测量结果的影响。最后,检查擦拭仪器的可见光波长校准标准溶液,并确保其符合标准要求。 2. 打开仪器并调整参数 将仪器接通电源并打开开关。在仪器界面上选择所需的波长,可以通过键盘或旋钮来输入目标波长。根据样品的特点和需要测量的光谱范围,选择起始波长和终止波长,并设置扫描速度。一般情况下,快速扫描适用于样品溶液透过率的快速测量,而慢速扫描适用于吸光度的测量。 3. 校正零点 在进行样品测量之前,需要对仪器进行零点校准。校准零点是为了消除仪器的内部误差,确保测量结果的准确性和可靠性。校正零点的

方法是切换至“T”模式,即透过率模式,并将空白试剂(如纯溶剂或去离子水)放入光池中进行测量。记录下校正后的透过率值。 4. 测量样品溶液吸光度 将样品容器放入光池中,并选择“Absorbance”模式。确保样品溶液充满光池,避免气泡的存在。开始测量后,仪器将自动测量样品的吸光度,并显示在仪器界面上。记录下测量值,可以根据需要保存或导出数据。 5. 数据处理与分析 获取吸光度数据后,可以进行相应的数据处理与分析。比如,可以计算样品溶液的浓度、绘制吸光度曲线等。根据实验需求,选择不同的数据处理方法,并使用相应的软件进行分析。确保选择合适的数据处理方法和参数,以获得准确的结果。 6. 关闭仪器 在使用完毕后,需要正确地关闭紫外可见分光光度计。首先,将波长设定为较高的数值,以避免损坏检测器。然后,关闭仪器的电源开关,将仪器断电。最后,清洁仪器的外部表面,并进行日常维护,以保持仪器的良好状态。 总结: 紫外可见分光光度计的操作步骤包括准备工作、打开仪器并调整参数、校正零点、测量样品溶液吸光度、数据处理与分析以及关闭仪器等。正确地操作紫外可见分光光度计可以确保测量结果的准确性和可

紫外分光光度法检测标准操作规程完整

1. 目的:建立用紫外分光光度法检测药品质量的标准操作规程,保证标准操作。 2. 引用标准:《中华人民国药典》(2015年版四部)通则。 3. 围:本标准适用于用紫外分光光度法进行的检测。 4. 责任人: QC检验员对本标准的实施负责,QC主管负责检查监督。 5. 容: 5.1定义:紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长围光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法,本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。 5.1.1. 定量分析通常选择在物质的最大吸收波长处测出吸收度,然后用对照品或百分吸收系数计算出被测物质的含量,多用于制剂的含量测定。 5.1.2. 对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法;若化合物本身在紫外光区无吸收,而杂质在紫外光区有相当强度的吸收,或在杂质的吸收峰处该化合物无吸收,则可用本法作杂质检查。 5.2 原理:物质对紫外辐射的吸收,是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的,因此,紫外吸收主要决定于分子的电子结构,故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团,均可在近紫外区(200~400nm)或可见光区(400~760nm)产生吸收。通常使用的紫外分光光度计的工作波长围为190~900nm,因此又称紫外-可见分光光度计。紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。朗伯·比耳(lambert-Beer)定律为光的吸收定律,它是紫外分光光度法定量分析的依据,其数学表达式为: A=lg 1 =ECL T

式中:A 为吸光度 T 为透光率 E 为吸收系数 C 为溶液浓度 L 为光路长度 若溶液的浓度(C)为1%(g/ml),光路长度(L)为1cm,相应的吸收系数为百分吸收系数,以E1% 表示。若溶液的浓度(C)为摩尔浓度(mol/L),光路长度为1cm时,1cm 则相应吸收系数为摩尔吸收系数,以ε来表示。 5.3. 仪器: 5.3.1. 紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。 5.3.2.为了满足紫外—可见光区全波长围的测定,仪器备有二种光源,即氘灯和碘钨灯,前者用于紫外区,后者用于可见光区。 5.3.3.单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件、聚焦透镜或反射镜等组成,色散元件有棱镜和光栅二种,棱镜多用天然石英或熔融硅石制成,对200~400nm波长光的色散能力很强,对600nm以上波长的光色散能力较差,棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。光栅系将反射或透射光经衍射而达到色散作用,故常称为衍射光栅,光栅光谱是按波长作线性排列,故为匀排光谱,双光束仪器多用光栅为色散元件。 5.3.4.检测器有光电管和光电倍增管二种。 5.3.5.紫外分光光度计依据其结构和测量操作方式的不同,可分为单光束和双光束分光光度计二类。单光束分光光度计有些仍为手工操作,即固定在某一波长,分别测量比较空白、样品或参比的透光率或吸收度,操作比较费时,用于绘制吸收光谱图时很不方便,但适用于单波长的含量测定。双光束分光光度计藉扇形镜交替切换光路,使光分成样品(S)和参比(R)两光束,并先后到达检测器,检测器信号经调制分离成两光路对应信号,信号的比值直接用记录仪记录,双光束分光光度计操作简单,测量快速,自动化程度高,但作含量测定时,为求准确起见,仍宜用固定波长测量方式。 5.4. 紫外分光光度计的检定:

相关文档
最新文档