紫外分光光度计的概念及测定范围
紫外分光光度计的概念及测定范围介绍如下：
紫外分光光度计（UV-Vis分光光度计）是一种化学分析仪器，用于分析物质的吸收和反射特性。它可以测量样品对紫外光和可见光的吸收率，从而确定其化学成分和浓度。
紫外分光光度计测定范围通常在190-1100纳米之间，可以分为两个主要的测量区域：
1.紫外区域：190-400纳米，主要用于测量芳香族化合物、蛋白
质、核酸、药物、有机物等吸收率。
2.可见光区域：400-1100纳米，主要用于测量无机化合物和染料
的吸收率。
紫外分光光度计通常由光源、单色器、样品室、检测器和计算机等部分组成。它被广泛应用于医药、化学、食品、环保、生物等领域中对物质的分析和研究。
紫外分光光度法
标题：紫外分光光度法 分发部门：总经理室、质量技术部，行政部（存档） 紫外分光光度法 1 简述 紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。 定量分析通常选择物质的最大吸收波长测出吸收度，然后用对照品或百分吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用吸收峰波长或吸收度比值作为鉴别方法；若化合物本身在紫外光区无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或杂质的吸收峰处化合物无吸收，则可用本法作杂质检查。 物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区（200～400nm ）或可见光区（400～850nm ）产生吸收。通常使用的紫外分光光度计的工作波长范围为190～900nm ，因此又称紫外一可见分光光度计。 紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。朗伯-比尔（Lambert-Beer ）定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为： 式中 A 为吸收度； T 为透光率； ECL T A ==1log
E 为吸收系数； C 为溶液浓度； L 为光路长路。 如溶液的浓度（C ）为1%（g/ml ），光路长度（L ）为1cm ，相应的吸收系数为百分 吸收系数，以E １％ １ｃｍ 表示。如溶液浓度（C ）为摩尔浓度（mol/L ），光路长度为1cm 时，则相应有吸收系数摩尔吸收系数，以ε表示。 2 仪器 紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。 为了满足紫外-可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氚灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。 单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件、聚焦透镜或反射镜等组成。色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200～400nm 波长光的色散能力很强，对600nm 以上波长的光色散能力较差，棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。光栅系将反射或透射光经衍射而达到色散作用，故常称为衍射光栅，光栅光谱是按波长作线性排列，故为匀排光谱，双光束仪器多用光栅为色元件。 检测器有光电管和光电倍增管二种。 紫外分光光度计依据其结构和测量操作方式的不同可分为单光束和双光束分光光度计二类。单光束分光光度计有些仍为手工操作，即固定在某一波长，分别测量比较空白、样品或参比的透光率或吸收度，操作比较费时，用于绘制制吸收光谱图时很不方便，但适用于单波长的含量测定。双光束分光光度计藉扇形镜交替切换光路使分成样品（S ）和参比（R ）两光束，并先后到达检测器，检测器信号经调制分离成两光路对应信号，信号的比值可直接用记录仪记录，双光束分光光 度计操作简单，测量快速，自动化程度高，但作含量测定时，为求准确起见，仍宜用固定波长测量方式。 3 紫外分光光度计的检定 3.1 波长准确度 3.1.1 波长准确度的允差范围 双光束光栅型紫外-可见分光光度计波长准确度允许误差为±0.5nm 。单光束棱镜型350nm 处±0.7nm ，500nm 处±2.0nm ，700nm 处± 4.8nm 。
紫外分光光度法原理
紫外分光光度法原理，使用范围，仪器的校正，测定方法和注意事项 紫外分光光度法 一、原理 可见光、紫外线照射某些物质，主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收，而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择性吸收的特性而建立分光光度法或称吸收光谱法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律为基础。 1 朗伯—比耳定律 A = lg—- = ECL T 式中 A为吸收度； T为透光率； E为吸收系数，采用的表示方法是（E１％１ｃｍ），其物理意义为当溶液浓度为1%（g/ml），液层厚度为1cm时的吸收度数值； C为100ml溶液中所含被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g； L为液层厚度，cm。 二、使用范围 凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物，根据在特定吸收波长处所测得的吸收度，可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。 三、仪器 可见-紫外分光光度计。其应用波长范围为200～400nm的紫外光区、400～850nm的可见光区。主要由辐射源（光源）、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。 本仪器是根据相对测量的原理工作的，即先选定某一溶剂（或空气、试样）作为标准（空白或称参比）溶液，并认为它的透光率为100％（或吸收度为0），而被测的试样透光率（或吸收度）是相对于标准溶液而言，实际上就是由出射狭缝射出的单色光，分别通过被测试样和标准溶液，这两个光能量之比值，就是在一定波长下对于被测试样的透光率（或吸收度）。 本仪器可精密测定具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物、有色物质或在适当条件下能与某些试剂作用生成有色物的物质。 使用前应校正测定波长并按仪器说明书进行操作。 四、仪器的校正 1.波长的准确度试验 以仪器显示的波长数值与单色光的实际波长值之间误差表示，应在±1.0nm 范围内。 可用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正。 2.吸收度的准确度试验
(整理)紫外可见分光光度计及其应用
科技论文写作期末作业西北民族大学生命科学与工程学院 11级生物技术（1）班 符朝方 学号：P112114841
紫外可见分光光度计及其应用 李诗哲 西北民族大学生命科学与工程学院兰州730100 摘要：紫外可见分光光度计对于分析人员来说是最有用的分析工具之一，几乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。下面介绍了紫外分光光度计的原理、结构及其特点，并介绍了它在生物领域的应用及其他方面的应用 1引言：紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器，无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域，还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业，紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。 2原理：紫外可见分光光度法 紫外可见分光光度法【1】是根据物质分子对波长为200~760nm 的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长的光线能量小，波长短的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的
某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。 2.1有机化合物的紫外可见吸收光谱【2】 有机化合物的电子跃迁 与紫外可见吸收光谱有关的电子有三种[[4]，即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。 跃迁类型有:σ→σ*、n→σ*，π→π*、n→π四种。 饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*，n→σ*跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*，π→π*跃迁，吸收峰一般大于200nm. 2.2有机化合物的吸收带 吸收带(absorption band):在紫外光谱中，吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类，可将吸收带分为四种类型。 (1)R吸收带 (2)K吸收带 (3)B吸收带 (4)E吸收带 2.3无机化合物的紫外可见吸收光谱 无机化合物的UV-Vis光谱吸收光谱主要有:电荷迁移跃迁及配位场跃迁。
紫外分光光度计
紫外分光光度计： 工作原理： 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。 又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰，所以可用紫外分光光度法对这些物质分别进行测定（定量分析和定性分析）。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。 利用物质的分子或离子对某一波长范围光的吸收作用，对物质进行定性、定量分析以及结构分析。紫外分光光度法 首先确定实验条件，并在此条件下测得标准物质的吸收峰以及其对应波长值（同时可获得该物质的最大吸收波长）；再在选定的波长范围内（或最大波长值处），分别以（不同浓度）标准溶液的吸光度和溶液浓度为横、纵坐标绘出化合物溶液的标准曲线得到其所对应的数学方程；接着在相同实验条件下配制待测溶液，测得待测溶液的吸光度，最后用已获得的标准曲线方程求出待测溶液中所需测定的化合物的含量。使用范围： 凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物，根据在特定吸收波长处所测得的吸收度，可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。分光光度法只适用于微量组分的定量分析(稀溶液，浓度在线性范围内，（c ＜0.01 mol/L)，浓溶液中光吸收定律将发生偏离，最适宜的吸光度测量范围为0.2-0.8之间（此时误差小）。波长范围： 可见-紫外分光光度计。其应用波长范围为200～400nm的紫外光区、400～850nm的可见光区。主要由辐射源（光源）、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。 光源：在仪器的波长范围内提供足够的、稳定的连续的光。 汞灯：标准光源、最为精确，常用于校准作用。 氘灯、钨灯、氙灯 样品池：在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池也可用石英池。当溶液中含有染料（如考马斯亮兰）时，必须采用一次性的塑料杯，因为染料能让石英和玻璃着色，而且不易清洗干净。 应用： 1 检定物质——根据吸收光谱图上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长虽ax和摩尔吸收系数是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中，已将众多的药物紫外吸收光谱的最大吸收波长和吸收系数载入其中，为药物分析提供了很好的手段。 2 与标准物及标准图谱对照——将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样，也可以和现成的标准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。 3 比较最大吸收波长吸收系数的一致性 4 纯度检验 5 推测化合物的分子结构 6 氢键强度的测定——实验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。 7 络合物组成及稳定常数的测定 8 反应动力学研究 9 在有机分析中的应用 单点标定法：测量一个标准样品的吸光度与坐标零点建立工作曲线，测定未知样品浓度 多点标定法：测量已知浓度的一系列标准样品吸光度，建立工作曲线来测定未知浓度
紫外-可见分光光度法
紫外-可见分光光度法 1 简述 紫外-可见分光光度法是在190-800nm 波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和含量测定的方法。 定量分析通常选择物质的最大吸收波长处测出吸光度，然后用对照品或吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若该物质本身在紫外光区无吸收，而其杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或杂质的吸收峰处该物质无吸收，则可用本法作杂质检查。 物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环等发色基团，均可在紫外区（200~400nm ）或可见光区（400~850nm ）产生吸收。通常使用的紫外-可见分光光度计的工作波长范围为190~900nm 。 紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。朗伯-比尔（Lambert-Beer ）定律为光的吸收定律，它是紫外-可见分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为: A=log T 1=ECL 式中 A 为吸光度; T 为透光率; E 为吸收系数; C 为溶液浓度; L 为光路长度。 如溶液的浓度（C ）为1%（g/ml ），光路长度（L ）为lcm ，相应的吸光度即为吸 收系数以%11cm E 表示。如溶液的浓度（C ）为摩尔浓度（mol/L ），光路长度为lcm 时，则相应有吸收系数为摩尔吸收系数，以ε表示。 2 仪器 紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系
统和数据处理系统等部分组成。 为了满足紫外-可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。 单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件，聚焦透镜或反射镜等组成。色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200~40Onm波长光的色散能力很强，对600nm以上波长的光色散能力较差，棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。光栅系将反射或透射光经衍射而达到色散作用，故常称为衍射光栅，光栅光谱是按波长作线性排列，故为匀排光谱，双光束仪器多用光栅为色散元件。 检测器有光电管和光电倍增管二种。 紫外-可见分光光度计依据其结构和测量操作方式的不同可分为单光束和双光束分光光度计二类。单光束分光光度计有些仍为手工操作，即固定在某一波长，分别测量比较空白、样品或参比的透光率或吸收度，操作比较费时，用于绘制吸收光谱图时很不方便，但适用于单波长的含量测定。双光束分光光度计藉扇形镜交替切换光路使分成样品（S）和参比（R）两光束，并先后到达检测器，检测器信号经调制分离成两光路对应信号，信号的比值可直接用记录仪记录，双光束分光光度计操作简单，测量快速，自动化程度高，但作含量测定时，为求准确起见，仍宜用固定波长测量方式。 3 紫外-可见分光光度计的检定 3.1 波长准确度 3.1.1 波长准确度的允差范围紫外-可见分光光度计波长准确度允许误差，紫外区为±1.0nm，500nm处±2.0nm，700nm处± 4.8nm。 3.1.2 波长准确度检定方法 3.1.2.1 用低压汞灯检定关闭仪器光源，将汞灯（用笔式汞灯最方便）直接对准进光狭缝，如为双光束仪器，用单光束能量测定方式，采用波长扫描方式，扫描速度“慢”（如l5nm/min）、响应“快”、最小狭缝宽度（如0.lnm）、量程0~100%，在200~800nm范围内单方向重复扫描3次，由仪器识别记录各峰值（若仪器无“峰检测”功能，必要时可对指定波长进行“单峰”扫描）。
紫外分光光度计标准
紫外分光光度计标准 紫外分光光度计是一种常用的分析仪器，用于测定物质在紫外光区域的吸收光谱，广泛应用于化学、生物、医药等领域。为了保证测量结果的准确性和可比性，国际上制定了一系列的标准，下面就对其中的几个进行介绍。 1. ISO 17025标准 ISO 17025是国际标准化组织（ISO）制定的实验室能力认可标准，是全球实验室认证的最高标准。该标准要求实验室必须具备一定的技术能力和管理能力，能够提供可靠的测试结果。对于紫外分光光度计实验室而言，必须建立完善的质量管理体系，包括校准、验证、质量控制等方面的要求。 2. USP标准 USP是美国药典，是美国药品监督管理局（FDA）批准的药品质量标准。USP 对于紫外分光光度计的要求主要包括：仪器必须满足特定的光谱范围、分辨率、波长准确度等要求；必须进行校准和验证，确保测量结果的准确性和可靠性；必须建立质量控制程序，确保测试结果的稳定性和可重复性。 3. EP标准
EP是欧洲药典，是欧洲药品管理局（EMA）批准的药品质量标准。EP对于紫外分光光度计的要求与USP类似，但在一些细节方面有所不同。例如，EP要求仪器必须能够进行自动波长扫描，并能够记录扫描过程中的数据，以便后续分析和验证。 4. ASTM标准 ASTM是美国材料和试验协会，是全球最大的标准制定组织之一。ASTM对于紫外分光光度计的要求主要包括：仪器必须满足特定的光谱范围、分辨率、波长准确度等要求；必须进行校准和验证，确保测量结果的准确性和可靠性；必须建立质量控制程序，确保测试结果的稳定性和可重复性。 总之，紫外分光光度计的标准主要包括ISO 17025、USP、EP和ASTM等，这些标准都要求仪器必须具备一定的技术能力和管理能力，能够提供可靠的测试结果，从而保证测量结果的准确性和可比性。
紫外分光光度法
紫外分光光度法 1 简述 紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长X 围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。 定量分析通常选择物质的最大吸收波长测出吸收度，然后用对照品或百分吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用吸收峰波长或吸收度比值作为鉴别方法；若化合物本身在紫外光区无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或杂质的吸收峰处化合物无吸收，则可用本法作杂质检查。 物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区（200～400nm ）或可见光区（400～850nm ）产生吸收。通常使用的紫外分光光度计的工作波长X 围为190～900nm ，因此又称紫外一可见分光光度计。 紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。朗伯-比尔（Lambert-Beer ）定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为： 式中 A 为吸收度； T 为透光率； E 为吸收系数； C 为溶液浓度； L 为光路长路。 如溶液的浓度（C ）为1%（g/ml ），光路长度（L ）为1cm ，相应的吸收系数为百分 吸收系数，以E １％ １ｃｍ表示。如溶液浓度（C ）为摩尔浓度（mol/L ），光路长度为1cm 时， 则相应有吸收系数摩尔吸收系数，以ε表示。 2 仪器 紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处 ECL T A ==1log
紫外分光光度计的用途
紫外分光光度计的用途 1.药物分析：紫外分光光度计在医药领域被广泛用于药物的定量分析、质量控制和指纹图谱的建立。通过测定药物在特定波长下的吸光度，可以 计算出其浓度，用于药品质量评估。 2.化学分析：紫外分光光度计可用于测定溶液中一些离子或有机化合 物的浓度。例如，可以通过测定其中一种金属离子溶液在紫外区域的吸光 度来判定溶液中该金属的浓度。 3.环境监测：紫外分光光度计可以用于检测大气中有毒气体、污染物、水中有机物的浓度等。例如，利用紫外吸收分析方法可监测大气中臭氧、 二氧化硫等污染物的浓度，从而评估大气污染的程度。 4.食品安全：紫外分光光度计可以用于食品中添加剂、农药、重金属 离子等物质的检测。通过测定食品样品在紫外区域的吸光度，可以确定其 中的有害物质含量，保证食品的安全性。 5.生物分析：紫外分光光度计在生物学研究中也有广泛应用。比如， 用于测定蛋白质、核酸、酶等生物分子的浓度和纯度。此外，还可以通过 测定细胞培养液中细胞生长相关物质的吸光度来监测细胞培养进程。 6.荧光分析：紫外分光光度计可以用于荧光分析中。例如，可以用于 测定荧光染料的浓度、研究荧光化学反应等。 7.质量控制：紫外分光光度计广泛应用于工业生产中的质量控制。通 过测定产品中其中一种物质的浓度，判断产品的质量是否符合要求，保障 生产过程的稳定性和产品的一致性。
总之，紫外分光光度计作为一种重要的分析仪器，通过测定物质在紫外光区域的光强变化，实现了对物质的定量分析、质量控制和研究。在医药、环境监测、食品安全、生物学研究等领域都有广泛的应用，对于提高分析精度、保障工业生产和人类生活的安全起着重要作用。
紫外可见分光光度计主要功能
紫外可见分光光度计主要功能 紫外可见分光光度计（UV-Vis Spectrophotometer）是一种常用的实验仪器，主要用于测量物质在紫外和可见光波段的吸光度，具有多种功能和应用。本文将从几个方面介绍紫外可见分光光度计的主要功能。 一、吸收光谱测量 紫外可见分光光度计的主要功能之一是测量物质的吸收光谱。吸收光谱是指物质对不同波长的光的吸收情况。通过测量样品在不同波长下的吸光度，可以得到吸收光谱曲线。吸收光谱曲线可以用于分析物质的结构、浓度和纯度等信息。这对于化学、生物、药学等领域的研究具有重要意义。 二、定量分析 紫外可见分光光度计可以用于定量分析。通过建立标准曲线，测量未知样品的吸光度，并根据标准曲线确定样品的浓度。这种定量分析方法被广泛应用于环境监测、食品安全、药物分析等领域。紫外可见分光光度计的高精度和灵敏度使其成为定量分析的重要工具。 三、动力学研究 紫外可见分光光度计可用于动力学研究。动力学研究是研究化学反应速率和反应机理的重要手段之一。通过测量反应物或产物在不同时间点的吸光度变化，可以推断出反应速率和反应机理。紫外可见分光光度计的高时间分辨率和灵敏度使其成为动力学研究的有力工
具。 四、荧光测量 紫外可见分光光度计还可以进行荧光测量。荧光是物质受激发后发出的特定波长的光。通过测量样品在不同波长下的荧光强度，可以研究物质的结构和性质。荧光测量在生物医学、环境监测等领域具有广泛应用。 五、扫描测量 紫外可见分光光度计还具有扫描测量的功能。扫描测量可以快速获取整个波长范围内的吸光度数据。这对于快速分析和杂质检测非常有用。扫描测量还可以用于寻找物质的吸收峰和波长范围，为后续的定量分析和质谱分析提供重要信息。 六、温度控制 紫外可见分光光度计还可以进行温度控制。温度对于某些化学反应和生物学过程具有重要影响。通过在紫外可见分光光度计中设置温控装置，可以控制样品温度，从而研究温度对反应速率、平衡常数等的影响。 紫外可见分光光度计具有吸收光谱测量、定量分析、动力学研究、荧光测量、扫描测量和温度控制等多种功能。它在化学、生物、药学等领域的研究中发挥着重要作用，为科学研究和实验分析提供了有力支持。随着技术的不断进步，紫外可见分光光度计的功能还将
紫外可见分光光度法合适的检测波长范围
紫外可见分光光度法合适的检测波长范围 紫外可见分光光度法是一种常用的分析技术，用于测量物质在紫 外和可见光区域的吸收和传输特性。这种方法可以应用于各种领域， 包括药学、化学、环境科学和生物学等。 紫外可见分光光度法的检测波长范围是非常关键的。一般来说， 紫外可见分光光度法可以在200纳米至800纳米的波长范围内进行测量。这个范围可以覆盖大部分物质的吸收峰，并提供准确的测量结果。 紫外可见分光光度法的原理是基于物质对特定波长光的吸收。当 光通过样品时，被吸收的光的量与样品中存在的物质的浓度成正比。 根据比尔定律，吸光度与光程和浓度之间存在一个线性关系。因此， 通过测量样品的吸光度，可以计算出样品中物质的浓度。 在实际应用中，选择合适的检测波长范围非常重要。波长范围的 选择应根据被测物质的特性和所需的精确度来确定。一般来说，如果 已知被测物质对某个特定波长光的吸收峰的位置和强度，可以选择该 波长进行测量。然而，如果被测物质的吸收峰未知，可以进行范围扫 描实验，寻找吸光度最大的波长作为检测波长。 此外，还需要注意样品的浓度范围。在选择检测波长范围时，应 确保所选范围内，样品的吸光度变化与浓度的变化之间存在线性关系。如果吸光度与浓度之间的关系不是线性的，可以选择多个波长进行测量，并通过多元回归分析等方法来获得更准确的结果。
在进行紫外可见分光光度法实验时，还应注意光源的选择和光路的校准。合适的光源可以提供稳定的光强，确保测量结果的准确性和可重复性。同时，光路的校准对于消除仪器的偏差和优化分析结果也非常重要。 总之，紫外可见分光光度法是一种常用的分析技术。选择合适的检测波长范围对于获得准确的测量结果非常重要。在实际应用中，应考虑被测物质的特性、浓度范围等因素，选择适当的波长进行测量，并注意光源选择和光路校准，以确保实验的成功和结果的准确性。
紫外可见分光光度计技术与检定
紫外可见分光光度计技术与检定 紫外可见分光光度计是一种用于定量测量化学物质的吸收和反射能力的分析仪器。该 仪器广泛应用于药品、化工、食品、医疗卫生、环保等行业，具有测定精度高、灵敏度高、使用方便等优点，是化学分析领域不可或缺的工具。本文将介绍紫外可见分光光度计的工 作原理、检定方法及检定要求。 一、工作原理 紫外可见分光光度计采用分光光度法进行定量分析。其核心部件是光学系统，包括光源、单色器和检测系统。当被测样品溶液经过光的作用下吸收一部分光线后，通过单色器 将被测样品溶液吸收的光线谱分离成不同波长的单色光。接着，检测系统对各波长单色光 的强度进行检测并输出信号，最终通过符合Beer-Lambert定律的计算公式完成对样品吸光度的测量。 二、检定方法 1. 波长准确性检定 波长准确性是指仪器对波长的设置是否准确。检定方法如下： （1）准备氘灯或汞灯，检查仪器是否能够正确检测波长。 （2）使用具有已知吸收峰的样品，如对苯二酚(259nm)，测量吸收峰的位置，与标准 数据进行比较，计算误差。 （3）不同波长下，重复上述操作，可得到不同波长下的曲线，检查仪器的波长准确性。 2. 分辨力检定 分辨力是指相邻波长的吸收光谱相差多少才能够被区分。检定方法如下： （1）想办法制备具有两个吸收峰的样品(如酚酞)，测定两峰之间的波长差值，该差值即为仪器的分辨力。 3. 灵敏度检定 灵敏度是指仪器检测范围内测量值与物质浓度之间的关系。检定方法如下： （1）准备标准曲线和样品。
（2）将标准溶液浓度按规定的量吸取到光管或样品池中，进行读数。根据吸收光谱的线性范围，绘制标准曲线。 （3）检测样品浓度时，根据标准曲线计算浓度。 4. 稳定性检定 稳定性是指仪器在一定时间内对同一浓度标准样品的测量值的变化具有稳定性。检定方法如下： （1）将同一浓度标准溶液分别测定6次，间隔时间为1小时。 （2）计算各次检测结果的平均值和标准差，检查仪器灵敏度稳定性。 三、检定要求 1. 波长准确性误差要求小于±0.3nm。 2. 分辨力要求大于等于1.0nm。 以上要求是在检定条件符合标准的情况下确定的，检定应严格按照国家相关标准进行。 综上所述，紫外可见分光光度计是化学分析领域不可或缺的工具，对其正常工作和精度的检查具有重要意义。因此，必须严格依照国家相关标准进行检定，并对检定结果进行认真分析和记录，确保进行检定的仪器能够正常工作并提供准确可靠的数据。
紫外分光光度计
紫外分光光度计 紫外分光光度计，就是依据物质的汲取光谱讨论物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的汲取光谱就是物质中的分子和原子汲取了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其汲取光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的汲取光谱曲线，可依据汲取光谱上的某些特征波优点的吸光度的高处与低处判别或测定该物质的含量。 目录重要应用校正方法常见类型工作原理产品简介 重要应用 1检定物质 依据汲取光谱图上的一些特征汲取，特别是汲取波长λmax和摩尔汲取系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中，已将浩繁的药物紫外汲取光谱的汲取波长和汲取系数载入其中，为药物分析供给了很好的手段。 2与标准物及标准图谱对比 将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见汲取光谱。若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。假如没有标样，也可以和现成的标准谱图对比进行比较。这种方法要求仪器精准，精密度高，且测定条件要相同。 3比较汲取波长汲取系数的一致性 4纯度检验 5推想化合物的分子结构 6氢键强度的测定
试验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用 紫外光谱来判定化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。 7络合物构成及稳定常数的测定 8反应动力学讨论 9在有机分析中的应用 有机分析是一门讨论有机化合物的分别、辨别及构成结构测定的 科学，它是在有机化学和分析化学的基础上进展起来的综合性学科。 日常维护 一、温度和湿度是影响仪器性能的紧要因素。他们可以引起机械 部件的锈蚀，使金属镜面的干净度下降，引起仪器机械部分的误差或性 能下降；造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光 能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。维 护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室，配置恒温设备， 特别是地处南方地区的试验室。 二、环境中的尘埃和腐蚀性气体亦可以影响机械系统的快捷性、 降低各种限位开关、按键、光电偶合器的牢靠性，也是造成必需学部件 铝膜锈蚀的原因之一。因此必需定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘。 三、仪器使用肯定周期后，内部会积累肯定量的尘埃，由维护和 修理工程师或在工程师引导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作， 同时将各发热元件的散热器重新紧固，对光学盒的密封窗口进行清洁， 必要时对光路进行校准，对机械部分进行清洁和必要的润滑，恢复原状，再进行一些必要的检测、调校与记录。 校正方法 紫外分光光度计的校正方法：分光光度法的最紧要的一个物理化 学量是吸光度。为了获得精准的讨论结果，精准测得样品溶液的吸光度
中国药品检验标操作规程紫外-可见分光光度法
紫外—可见分光光度法 1 简述 紫外一可见分光光度法是通过被浏物质在紫外光区或可见光区的特定波长处或一定波长范围内的吸光度，对该物质进行定性和定量分析的方法。本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。 定量分析通常选择物质的最大吸收波长处测出吸光度，然后用对照品或吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若该物质本身在紫外光区无吸收，而其杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或杂质的吸收峰处该物质无吸收，则可用本法作杂质检查。 物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环等发色基团，均可在紫外区(200～400nm)或可见光区(400～850nm)产生吸收。通常使用的紫外一可见分光光度计的工作波长范围为190—900nm． 紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图．朗伯一比尔( Lambert-Beer)定律为光 的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为： 式中： —A为吸光度；
—T为透光率； —E为吸收系数； —c为溶液浓度， —l为光路长度。 如溶液的浓度(c)为1%( g/ml)，光路长度(l)为lcm．相应的吸光度即为吸收系数，以 表示。如溶液的浓度(f)为摩尔浓度(mol/L)，光路长度为lcm时，则相应的吸收系数为摩尔吸收系数，以ε表示。 2 仪器 紫外一可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。 为了满足紫外一可见光区全波长范围的测定，仪器备有两种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。 单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件，聚焦透镜或反射镜等组成。色散元件有棱镜和光栅两种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200---400nm波长光的色散能力很强，对600nm以上波长的光色散能力较差，棱镜色散所得的光谱为非匀捧光谱，光栅系将反射或透射光经衍射而达到色散作用，故常称为衍射光栅，光栅光谱是按波长作线性排列，故为匀排光谱，双光束仪器多用光栅为色散元件。 检测器有光电管和光电倍增管两种。