β-葡聚糖-提取工艺

β-葡聚糖保健食品批文申报研发报告30

产品研发报告；一．产品的研发思路；β-葡聚糖是禾谷类植物籽粒胚乳和糊粉层细胞壁的主；燕麦作为世界8大粮食作物之一，也是我国北方各省的；目前,燕麦β-葡聚糖的结构已被确认,它是由β（1；β-葡聚糖在增强免疫力方面的作用已经被大量学者实；此外，从燕麦中提取的β-葡聚糖目前已被证实在以下；1．抑制肿瘤,防止癌变；2．降血脂；3．降血糖；目前，增强免疫力类功能食品是

产品研发报告

一．产品的研发思路

β-葡聚糖是禾谷类植物籽粒胚乳和糊粉层细胞壁的主要成分。近20年来，围绕着从禾谷类植物中提取的β-葡聚糖，国内外学者进行了大量的的人体和动物试验，发现其在增强免疫力、加快人体免疫反应、降血脂及血清胆固醇、控制由胰岛素引起的糖尿病等方面均具有良好的效果。

燕麦作为世界8大粮食作物之一，也是我国北方各省的重要的小杂粮作物。医学研究证明，长期服用燕麦，有增强免疫力、降血脂、降血糖和减少心血管疾病的作用。而燕麦的保健功能，都归功于其中的主要功效成分，可溶性膳食纤维——β-葡聚糖。

目前,燕麦β-葡聚糖的结构已被确认,它是由β（1-3）, β（1-4）糖苷键连接组成的线性β-葡聚糖，相对分子质量为2.62×106 。

β-葡聚糖在增强免疫力方面的作用已经被大量学者实验并验证。早在1982年,图伦大学医学院研究表明，以β-葡聚糖免疫的小白鼠在经过高浓度的大肠

杆菌注射后数小时内，不论死亡率还是血液中细菌浓度都较未处理者低得多，证明β-葡聚糖的确具有免疫保护功能。上海第三军医大学郭波等进行的动物实验，结果证明，β-葡聚糖可明显提高小鼠的特异性IgG、IgG2a、IgG1抗体应答，具有促进抗体产生的作用[1]。加拿大的YUN CH等用感染了艾美球虫的大鼠实验同样证明，燕麦中提取的β-葡聚糖（oat-glucan）可明显提高大鼠血清中总IgG, IgG1, IgG2a, IgM 和 IgA抗体水平【2】。在后续研究中，发现从燕麦中提取的β-葡聚糖可明显提高对细菌及寄生感染等的抵抗力【3】。Estrada A等研究发现燕麦β-葡聚糖可促进腹膜巨噬细胞IL-1、TNF-alpha等细胞免疫因子的分泌，对脾细胞也具有促进IL-2,、IFN-gamma 、IL-4等细胞免疫因子分泌的作用【4】。对于燕麦β-葡聚糖增强免疫力方面的机理,目前主要认为, 燕麦β－葡聚糖与体内的巨噬细胞、嗜中性细胞表面的受体（CR3）结合,从而刺激免疫细胞,提高其活力,达到增强机体免疫力的效果，J. M. Davis等人的研究也确认了燕

麦β－葡聚糖增强巨噬细胞等活力的作用【5】。

此外，从燕麦中提取的β-葡聚糖目前已被证实在以下方面具有良好的作用：1．抑制肿瘤,防止癌变。燕麦中的β-葡聚糖可以刺激体内巨噬细胞、嗜中性细胞，提高活力，增强对癌细胞毒素的抵抗能力。美国的一项大鼠实验证明，在大鼠灌喂了燕麦β-葡聚糖10天后，静脉注射2 x 105的同源的B16黑素瘤细胞，之后继续灌喂14天。检测结果发现，大鼠的肺肿瘤病灶明显减少，同时巨噬细胞的细胞毒作用（macrophage cytotoxicity）则也有所增强。另外，作为一种水溶性膳食纤维，燕麦β-葡聚糖在肠内促进肠管蠕动，缩短了废弃物通过肠道的时间, 减少了肠内致癌物对肠管的污染, 达到防癌作用【6－8】。

2．降血脂。国内外已有大量的人体、动物实验探讨了燕麦β-葡聚糖降血脂的效果与机理【9－11】。相关研究均表明，燕麦β-葡聚糖可明显降低血清中血脂总量及对人体有害的低密度脂蛋白含量，同时，对人体有益的高密度脂蛋白含量基本保持不变。关于其作用机理，主要以下方面：①燕麦β-葡聚糖可减少小肠对脂肪及胆固醇的吸收率,从而降低血清胆固醇；另外,燕麦β-葡聚糖还可以减少对碳水化合物的吸收,从而降低血浆胰岛素浓度,减弱对胆固醇及脂蛋白合成的刺激；②燕麦β-葡聚糖在小肠内与胆汁酸结合,增加了胆汁酸的排泄及初级胆汁酸的合成,从而加速胆固醇向胆汁酸的转化；③燕麦β-葡聚糖在结肠内通过微生物的发酵降解产生短链脂肪酸,抑制了胆固醇的合成。

3．降血糖。燕麦β-葡聚糖作为一种水溶性膳食纤维，它的存在增加了胃内容物的粘滞性，使得胃排空延迟，从而防止了食后血糖急剧上升。同时，可溶性膳食纤维进入人小肠，肠道粘表面的脂类微团和蛋白多糖复合物相互作用，导致粘膜表面水层厚度增加，降低了糖的吸收。国内汪海波等进行的一项动物实验也证实了燕麦β-葡聚糖显著的血糖调节作用【12】。综上所述，燕麦β-葡聚糖的各项保健作用已被众多国内外专家学者研究证实，是结构、功能、机理均已明确的具有极大发展潜力的功能食品。

目前，增强免疫力类功能食品是国内需求量及消费量最大的功能食品种类，其市场规模、潜在消费群体仍然在保持不断扩大的趋势。随着人们对中老年人提高免疫力的必要性认识的提高，中老年人服用具有增强免疫力效果的功能食品也越来越成为一种普遍现象。在各类增强免疫力的功能食品中，β-葡聚糖等多糖类保健食品已被众多消费者所熟知和接受。燕麦β-葡聚糖在国外更早已成为人们熟知的保健功能成分，美国FDA曾2次（1995，1996）对燕麦β-葡聚糖的保健功能做出声明。

国内目前销售的功能多糖提取物类产品种类繁多，从原料上来看，主要以从真菌类等原料提取的β-葡聚糖为主，包括香菇多糖、灵芝多糖、姬松茸多糖、酵母多糖等；从功能上看，大部分的功能诉求点为增强免疫力，也有少量为降血脂，降血糖，抑制肿瘤，抗疲劳，改善睡眠等。从类型上来看，也多种多样，有经国家食品药品监督管理局批准的国产保健食品和进口保健食品，有特殊营养食品、进口的营养健康食品等；从剂型上来看，硬胶囊制剂，软胶囊制剂、片剂、冲剂等均有销售。

对国内市场上的同类及相似产品的调查结果如下：

1．多糖类保健食品中，以多糖为功效成分的产品共435种，其中300余种含增强免疫力（免疫调节）功能，以葡聚糖为功效成分的产品共50种，其中增强免疫力（免疫调节）功能的为25种，其他功能为降血脂，改善睡眠，抗疲劳等。

2．以燕麦为原料的保健食品，目前市场上有售的主要为两种，一为北京特品降脂燕麦开发公司“世壮牌燕麦片”，其功能为调节血脂，另一产品佛山市麦之素食品工业有限公司的“一生伴润通冲剂”(原名：麦之素) ，其功能为润肠通便。二者均为以燕麦为原料简单加工而制，而非有效成分提取物。国内市场上目前尚无燕麦β-葡聚糖类保健食品销售。

3．燕麦相关其他产品中，主要以普通食品及营养食品为主，主要是品类众多的营养麦片等。

4．国外市场上，燕麦β-葡聚糖产品功能主要集中在免疫调节、降血脂、降血糖、减肥4个方面。剂型上包括胶囊、片剂、冲剂等。消费对象主要为中老年男女。

相对于其他多糖类产品而言，本产品（燕麦β-葡聚糖）具有以下特点及优势：

1.原料来源上，燕麦β-葡聚糖提取自人们所熟知的普通食品——燕麦中，是燕麦中起主要生理健康功能的功效成分的浓缩，相对于从某些真菌、酵母等产品来说，更易为人们所接受。

2.产品以燕麦β-葡聚糖为主要功能成分，原料、成分、结构、功能、机理明确，并均具有大量的科学研究作为依据。

3.相对于其他真菌等多糖产品，以燕麦为原料提取的β-葡聚糖不存在甘露醇等可能导致部分人出现过敏反应的成分，服用更安全。

目前国内尚无禾谷中提取的多糖类免疫调节功能方面的保健食品，如果能通过国家食品药品监督管理局批准一种燕麦β-葡聚糖保健食品，占据一定的市场份额是大有可能的。

二．保健功能筛选

燕麦是我国北方一种常见的粮食作物，利用燕麦加工而成的各类燕麦片产品已经是众多人们日常饮食的重要一部分。燕麦及麦片对于人体的保健作用，如有助于增强免疫力，降低血脂，降低心脏病危险等，已成为食品健康中的常识内容。提取出燕麦中中有益于人体健康的，尤其是有益于增强免疫力的功效成分是产品配方筛选的目的。

燕麦中的成分主要包括蛋白、脂类、矿物质、维生素、膳食纤维、淀粉等。国内外的众多科学研究发现，燕麦的保健作用，主要都归功于其中的水溶性膳食纤维——β-葡聚糖【13－15】。国内的张丽萍，胡新中，黄相国等专家学者均

对燕麦的营养成分及生理功能做了分析论述，阐明了燕麦中的β-葡聚糖，尤其是水溶性的β-葡聚糖正是起到保健作用的主要功效成分。而如本文的第一部分产品研发思路中所述，大量的实验验证了燕麦β-葡聚糖在增强免疫力方面具有的良好效果。与燕麦β-葡聚糖功能类似的还有大麦、小麦等提取的β-葡聚糖，但其水溶性β-葡聚糖含量均比燕麦要低。所以综合考虑功效与成本，本产品采用优质燕麦为原料，从中提取燕麦β-葡聚糖作为基物，并以它作为主要功效成分。

根据对众多专家学者的文献分析及本公司的实验测定，并经省疾病预防控制中心功能学实验证明，燕麦β-葡聚糖每日服用量在400-600mg时便可达到良好的增强免疫力效果。在产品的安全用量方面，产品长期服用，无毒副作用及其他不良反应。美国食品和药品管理局(FDA) 1997年即允许燕麦水溶性膳食纤维食品无需批报，就可以进行功效宣传，并允许燕麦β-葡聚糖日服用量高达三克以上。

在产品的工艺上，因主要功效成分为燕麦β-葡聚糖中的水溶性部分，所以产品在提取工艺上采用了热水提取后，加淀粉酶去淀粉，调等电点去蛋白，浓缩醇析的工艺处理，最后经过干燥粉碎得到固体燕麦β-葡聚糖粉末。产品的工艺路线比较简单，提取后得到的为固体粉末，易于灌装胶囊。

工艺优选过程：

燕麦中β－葡聚糖分为水溶性与水不溶性2种，其中大部分为水溶性β－葡聚糖，它作为水溶性膳食纤维，具有一系列的有益生理作用，它的含量在燕麦总β－葡聚糖中约为65－90％。此外，燕麦中还包括蛋白质、淀粉以及游离糖分和少量矿物质等。故本工艺主要采取水提取法去除不溶性聚糖、加淀粉酶去淀粉、等电点沉淀法去蛋白，最后通过醇析得到纯度较高的水溶性β－葡聚糖。

产品工艺中对燕麦β－葡聚糖的提取过程：

1) 水提取：按水料比18：1的比例加80℃温水搅拌，同时加入NaOH调节p H为10.0。提取时间为2小时。

水料比设定：经研究水料比在9：1－21：1区间的提取情况，随着液固比的增加，β一葡聚糖得率逐渐增加，当液固比在15～21之间时，β一葡聚糖产率提高非常有限，另考虑增加水的比例后，浓缩成本的提高，故水料比定为18：1。

提取温度设定：经研究，在18：1的水料比、提取1小时的情况下，随水温提高，β一葡聚糖提取率逐渐增加，当温度达到80℃时，β一葡聚糖基本溶出完全，故工艺采用80℃为提取温度。

pH的设定：由于β－葡聚糖本身的碱溶性质，随着pH的升高，提取率逐渐升高，但在pH>10以后，体系会发生美拉德反应导致得率下降，综合考虑，工艺采用体系pH为10。

提取时间的设定：在水料比18：1，水温80℃，pH10的情况下，随提取时间增加，提取率逐渐升高，2小时后趋于平缓，在3小时后基本不变。综合考虑，采用提取时间为2小时。

2) 去淀粉：耐热α一淀粉酶以30U／100mL量加入，作用时间为30分钟。

经检测，当淀粉酶以10U／100mL的量加入时，需75分钟以上方可基本反应完

QB/T 4572-2013 酵母β-葡聚糖

第6章紫杉醇生产工艺

第六章紫杉醇的生产工艺 6.1 概述 6.1.1 紫杉醇类药物 1、紫杉醇紫杉醇（Paclitaxel，Taxol?）的化学名称为5β,20-环氧-1β,2α,4α,7β,13α-五羟基-紫杉-11-烯-9-酮-4-乙酸酯-2-苯甲酸酯-10-乙酰基-13-[(2′R,3′S) -N-苯甲酰基-3′-苯基异丝氨酸酯] ，英文化学名称为13-[(2′R,3′S) -N-carboxyl-3′-phenylisoserine, N-benmethyl ester, 13-ester with 5β,20-epoxyl-1β,2α,4α,7β,13α-hexahydroxytax-11-en-9-one-4-acetate-2-benzoate,trihydrate。紫杉醇具有复杂的化学结构，属三环二萜类化合物，整个分子由三个主环构成的二萜核和一个苯基异丝氨酸侧链组成（图6－1）。分子中有11个手性中心和多个取代基团。分子式为C47H51NO14，分子量为853.92，元素百分比为C：66.41，H：6.02，N：1.64，O：26.23。紫杉醇难溶于水，易溶于甲醇、二氯甲烷和乙氰等有机溶剂。图6－1 紫杉醇的化学结构 2、多烯紫杉醇多烯紫杉醇（多西他赛，Docetaxel，Taxotere?，图6－2）是在开展紫杉醇半合成研究过程中发现的一种紫杉醇类似物，两者仅在母环10位和侧链上3'位上的取代基略有不同。多烯紫杉醇的化学名称是5β,20-环氧-1β,2α,4α,7β,10β,13α-六羟基-紫杉-11-烯-9-酮-4-乙酸酯-2-苯甲酸酯-13-[(2′R,3′S) -N-叔丁氧羰基-3′-苯基异丝氨酸酯]·三水合物，英文化学名称为-13-[(2′R,3′S) -N-carboxyl-3′-phenylisoserine, N-tertbutyl ester, 13-ester with 5β,20-epoxyl-1β,2α,4α,7β,10β,13α-hexahydroxytax-11-en-9-one-4-acetate-2-benzoate,trihydrate 。分子式为C43H53NO14·3H2O，相对分子质量为861.9。 1985年，法国罗纳普朗克乐安公司（Rhone-Poulenc Rorer）公司和法国国家自然科学研究中心（CNRS）以10-DAB作为母环骨架，通过半合成方法成功地合成出多烯紫杉醇，目

真菌 D葡聚糖检测反应机理

真菌(1-3)-?-D葡聚糖检测反应机理目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用,其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低,且检测周期长,不能适应临床治疗诊断的要求,因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)-?-D 葡聚糖快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。人体血浆中(1-3)-?-D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)-?-D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应,通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)-?-D葡聚糖含量. 内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素. 一、检测体液内毒素的临床意义

由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时，也会使后者释放出一定数量的内毒素，从而加重内毒素血症。早期诊断的细菌学培养需时长，而且由于抗生素的应用，其培养阳性率低。早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。过去的内毒素检测能定性而不能定量，而且个体差异和实验室间的误差较大，无法成为有价值的临床检验项目，北京金山川公司研制的MB-80微生物快速动态检测系统能定量检测体液内毒素的含量，经国内多家单位使用现已在其他省市开始作为临床检验项目进行收费。该仪器检测内毒素具有结果稳定、检测快（1小时）、重复性好、准确率高、不同的检测人员操作引起的误差小等优点。内毒素定量检测在重症病人、感染病人（如脑膜炎）以及其他有严重创伤等疾病的病人均有重要的临床意义，这使得内毒素研究一直是热点，但过去由于方法的限制，内毒素检测也是临床的难点。二、深部真菌检测的临床意义动态定量检测体液中真菌含量是应用MB-80微生物快速动态检测系统进行的。该方法可以快速诊断用常规方法难以确诊的深部真菌感染，应用MB-80检测真菌，其检出率远远高于传统的血培养方法，使病原体的监测更加准确，更快速，MB-80系统具有很高的灵敏度和优异的数据分析功能，检测低限5pg/ml的真菌1-3--β-D葡聚糖量。

β葡聚糖提取工艺

β-葡聚糖保健食品批文申报研发报告30 产品研发报告;一.产品的研发思路;β-葡聚糖就是禾谷类植物籽粒胚乳与糊粉层细胞壁的主;燕麦作为世界8大粮食作物之一,也就是我国北方各省的;目前,燕麦β-葡聚糖的结构已被确认,它就是由β(1;β-葡聚糖在增强免疫力方面的作用已经被大量学者实;此外,从燕麦中提取的β-葡聚糖目前已被证实在以下;1.抑制肿瘤,防止癌变;2.降血脂;3.降血糖;目前,增强免疫力类功能食品就是产品研发报告一. 产品的研发思路 β-葡聚糖就是禾谷类植物籽粒胚乳与糊粉层细胞壁的主要成分。近20年来,围绕着从禾谷类植物中提取的β-葡聚糖,国内外学者进行了大量的的人体与动物试验,发现其在增强免疫力、加快人体免疫反应、降血脂及血清胆固醇、控制由胰岛素引起的糖尿病等方面均具有良好的效果。燕麦作为世界8大粮食作物之一,也就是我国北方各省的重要的小杂粮作物。医学研究证明,长期服用燕麦,有增强免疫力、降血脂、降血糖与减少心血管疾病的作用。而燕麦的保健功能,都归功于其中的主要功效成分,可溶性膳食纤维——β-葡聚糖。目前,燕麦β-葡聚糖的结构已被确认,它就是由β(1-3), β(1-4)糖苷键连接组成的线性β-葡聚糖,相对分子质量为2、62×106 。

β-葡聚糖在增强免疫力方面的作用已经被大量学者实验并验证。早在1982年,图伦大学医学院研究表明,以β-葡聚糖免疫的小白鼠在经过高浓度的大肠杆菌注射后数小时内,不论死亡率还就是血液中细菌浓度都较未处理者低得多,证明β-葡聚糖的确具有免疫保护功能。上海第三军医大学郭波等进行的动物实验,结果证明,β-葡聚糖可明显提高小鼠的特异性IgG、IgG2a、IgG1抗体应答,具有促进抗体产生的作用[1]。加拿大的YUN CH等用感染了艾美球虫的大鼠实验同样证明,燕麦中提取的β-葡聚糖(oat-glucan)可明显提高大鼠血清中总IgG, IgG1, IgG2a, IgM 与 IgA抗体水平【2】。在后续研究中,发现从燕麦中提取的β-葡聚糖可明显提高对细菌及寄生感染等的抵抗力【3】。Estrada A等研究发现燕麦β-葡聚糖可促进腹膜巨噬细胞IL-1、TNF-alpha等细胞免疫因子的分泌,对脾细胞也具有促进IL-2,、IFN-gamma 、IL-4等细胞免疫因子分泌的作用【4】。对于燕麦β-葡聚糖增强免疫力方面的机理,目前主要认为, 燕麦β－葡聚糖与体内的巨噬细胞、嗜中性细胞表面的受体(CR3)结合,从而刺激免疫细胞,提高其活力,达到增强机体免疫力的效果,J、 M、 Davis等人的研究也确认了燕麦β－葡聚糖增强巨噬细胞等活力的作用【5】。此外,从燕麦中提取的β-葡聚糖目前已被证实在以下方面具有良好的作用: 1.抑制肿瘤,防止癌变。燕麦中的β-葡聚糖可以刺激体内巨噬细胞、嗜中性细胞,提高活力,增强对癌细胞毒素的抵抗能力。美国的一项大鼠实验证明,在大鼠灌喂了燕麦β-葡聚糖10天后,静脉注射2 x 105的同源的B16黑素瘤细胞,之后继续灌喂14天。检测结果发现,大鼠的肺肿瘤病灶明显减少,同时巨噬细胞的细胞毒作用(macrophage cytotoxicity)则也有所增强。另外,作为一种水溶性膳食纤维,燕麦β-葡聚糖在肠内促进肠管蠕动,缩短了废弃物通过肠道的时间, 减少了肠内致癌物对肠管的污染, 达到防癌作用【6－8】。

紫杉醇提炼步骤

紫杉醇规模生产工艺及方案（1500吨/年规模）一、项目规模生产工艺方案 1、紫杉醇概述紫杉醇具有复杂的化学结构，母核部分是一个复杂的四环体系，有许多的功能基团和立体化学特征，化学名称为：5β，20-环氧-1，2α，4，7β，10β，13α-六羟基紫杉烷-11-烯-9-酮-4，10-二乙酸酯-2-苯甲酸酯-13-[（2’R，3’S）-N-苯甲酰-3-苯基异丝氨酸酯，分子由3个主环构成二萜核，上连1个苯异丝氨酸侧链，分子中有11个手性中心和多个取代基团，分子式为C47H51NO14，相对分子质量853.92，元素百分比（%）C：66.41，H:6.02，N:1.64，O:26.23。紫杉醇结构式为：紫杉醇为白色结晶性粉末，无臭，无味，在甲醇、乙醇或氯仿中溶解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。甲醇制3mg/ml 的溶液，比旋度为-48℃~56℃。甲醇制15μg/ml的溶液，在227nm处有最大紫外吸收，10mg紫杉醇加甲醇溶液10ml溶解后应澄清无色。紫杉醇注射剂是新型抗微管药物，通过促进微管蛋白聚合抑制解聚，保持微管蛋白稳定，抑制细胞有丝分裂。体外实验证明紫杉醇具有显著的放射增敏作用，可能是使细胞中止于对放疗每咸的G2和M期，适用于卵巢癌和乳腺癌及NSCLC的一线的二线治疗。用于头颈癌、食管癌、精原细胞瘤，复发非何金氏淋巴瘤等治疗，静脉给予紫杉醇注射剂，药物血浆浓度呈双曲线，蛋白结合率89%~98%，主要在肝脏代谢，随胆汗进入肠道，经粪便排出体外（﹥90%），经肾清除只占总清除的1%~8%。红豆杉浸膏

1.1操作过程：（1）浸提：将原料投入提取罐内，干红豆杉每罐填装约1.2吨的原料，加入约4吨的甲醇浸提，温度为45±5℃，每遍循环浸提大于4小时，浸提完成后，将浸提液排入浸提液储罐中，进行蒸汽吹渣，温度控制在85±5℃,压力小于等0.2Mpa，回收残余的甲醇溶液，吹渣结束后，将废渣移到废料堆场集中处理。（2）浓缩：浓缩温度控制在45±5℃，真空度控制在-0.07±00.1Mpa，浸提液浓缩至比重达到0.95~1.05时，将浓缩液放出到专用的储罐中。（3）萃取：将计量后的浸提浓缩液注入萃取罐，加入醋酸乙酯（按物料：醋酸乙酯=1：1），萃取三次，将醋酸乙酯层重液排入指定贮罐，将贮罐内的醋酸乙酯液抽入浓缩锅进行初浓缩预处理，温度控制在45±5℃，待浓缩液比重达到1.40±0.05时，将浓缩后的醋酸乙酯液排入指定贮罐中。（4）干燥：将浓缩后的醋酸乙酯萃取液抽入蒸发罐内，罐内温度不超过45±5℃，真空度为-0.06±00.1Mpa，浸膏置真空干燥箱内干燥，干燥完成后，取出产品，凉干，敲碎，经检验合格后即成为紫杉醇浸膏，用铁桶封装，入库阴凉保存。 1.2紫杉醇粗制工艺步骤 1.2.1操作过程（1）配料、装柱：将紫杉醇浸膏约100kg按物料、重量比1：1的比例加入100-200目的硅胶搅拌均匀，真空干燥，装柱。（2）一次层析、浓缩：配制不同极性的淋洗液（乙酸乙酯：正已烷

小檗碱的提取分离及结构鉴定

天然药物化学课程设计性实验一、实验题目：小檗碱提取及结构鉴定二、简介：黄连：黄连为毛茛科(Ranunculaceae)的黄连属植物黄连(Coptis chinesis Franch)、三角叶黄连(Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao)或云连(Coptis teeta Wall)的干燥根茎。为我国名贵中药材之一，享有“中药抗生素”美称，其主要功能为清热燥湿，泻火解毒。黄连抗菌能力强，对降热阵痛、抗肠道细菌感染、急性结膜炎、口疮、急性细菌性痢疾等均有很好的疗效，在临床中有较多应用。小檗碱：（1）小檗碱(Berberine，又称黄连素)一种常见的异喹啉生物碱，分子式C20H18NO4。为黄连主要有效成分，其含量约为4%~10%，但根据野生和栽培产地的不同，其含量各异。（2）小檗碱是黄色针状结晶体，能缓慢溶于水（1:20），乙醇（1:100），较易于溶于热水，热乙醇，微溶于丙酮、氯仿、苯、几乎不溶于石油醚中。（3）小檗碱的结构式以稳定的季铵盐为主，其结构式如下图所示。在自然界，多以季铵盐形式存在，其盐酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐均难溶于水，易溶于热水，且各种盐的纯化都比较容易。小檗碱（4）小檗碱是一种常用的广谱抗菌药，具有看细菌性感染、抗肿瘤、抗心律失常、降压降血糖等功效，在临床上越来越广泛的应用。三、提取方案 (1)目前传统的提取技术主要是溶剂提取法。此法是从中草药中提取有效成分的常用方法，通过浸渍、渗漉、回流等方式将有效成分从药材组织内溶解，进行萃取。

传统的提取技术：酸水法提取小檗碱、石灰乳法提取小檗碱、乙醇回流提取法等提取的新技术有：微波法提取小檗碱、微波—索氏联合工艺提取小檗碱、超声波法提取小檗碱、酶法、超临界提取法等。 (2)本实验选用酸水法提取小檗碱酸水法是利用小檗碱的硫酸盐在酸性溶液中的溶解度大、而盐酸盐几乎不溶于水的性质来实现提取分离的，其提取流程为：黄连粗粉滤液滤液固体滤液结晶（粗品）滤液晶体盐酸小檗碱四、实验所用试剂 0.2%硫酸溶液，石灰乳，浓盐酸，10%Nacl 溶液，蒸馏水，乙醇。五、鉴定方法 1显色反应： (1)浓硝酸或漂白粉实验：取2支已加入酸性小檗碱的试管，分别加入少量的漂白粉和2滴浓硝酸，都显樱红色。 (2) 丙酮加成反应：在盐酸小檗碱水溶液中，加入氢氧化钠使呈碱性，然后滴加丙酮数滴，即可生成黄色结晶性小檗碱丙酮加成物。 2纸色谱法：静置至大量黄色结晶析出加0.2%硫酸，煎煮2次（800ml 、45min ，400ml 、30min ）纱布过滤加石灰乳调节PH=12 静置10min 过滤滴加浓HCL ，调节PH=2~3，加入10%Nacl 溶液，至饱和静置30min ，抽滤加25倍蒸馏水，加热至澄明趁热抽滤用蒸馏水洗涤，抽滤加30~40ml 乙醇，水浴加热溶解趁热抽滤静置析晶抽滤 80°C 干燥

葡聚糖检测方法

葡聚糖检测方法（试剂盒方法翻译）一．提供试剂瓶1：exo-1,3-β-Glucanase (100 U/mL) plus β-Glucosidase(20 U/mL) suspension, 2.0 mL 瓶2：Amyloglucosidase (1630 U/mL) plus invertase(500 U/mL) solution in 50 % v/v glycerol, 20 mL 瓶3：GOPOD Reagent Buffer. Buffer (48 mL,pH 7.4), p-hydroxybenzoic acid and sodium azide(0.4 % w/v). 瓶4：GOPOD Reagent Enzymes. Glucose oxidaseplus peroxidase and 4-aminoantipyrine. Freeze-dried powder. 瓶5：D-Glucose standard solution (5 mL, 1.00 mg/mL) in0.2 % w/v benzoic acid 瓶6：Contr ol yeast β-glucan preparation ( 2 g, β-glucan content stated on the bottle label). 二．提供试剂的处理 1.向瓶1中加入8ml醋酸钠缓冲液，分装-20℃存放。 2.直接使用瓶2中的试剂，稳定在4°C ~ 2年或者-20°C > 4 年。 3.将瓶3的GOPOD试剂用纯化稀释水定容到1L，稳定在4°C > 2年。 4.将瓶4的GOPOD试剂用纯化稀释水定容到1L，黑暗环境存放，稳定在4 °C 2 - 3个月,在-20°C或> 12个月。

葡甘聚糖的提取工艺综述

魔芋葡甘聚糖的提取工艺综述摘要目的:综述魔芋葡甘聚糖的提取及分离方法研究现状。方法:对国内外文献进行归纳、分析及总结。结果:魔芋葡甘聚糖是天然高分子多糖，理化性质稳定。结论:魔芋葡甘聚糖在医药、化工、食品等方面具有广泛的应用前景，在药用辅料方面值得开发。关键词: 魔芋葡甘聚糖提取分离综述 0 前言魔芋属天南星科, 多年生草木植物。研究表明, 魔芋精粉中约含40 %～70 %的葡甘聚糖, 还含有少量蛋白质、食物纤维、淀粉、游离还原糖、氨基酸及微量无机盐等[1 ]。魔芋的主要活性成分为葡甘聚糖,它是对魔芋进行深加工利用的重要成分。魔芋葡甘聚糖的含量高,分子量大,其精粉及其相应产品的质量就好。由于葡甘聚糖及其改性产物水溶胶的高粘度、稳定性、乳化性、高膨胀性、成膜性、凝胶性和特定的生物活性,使得它们在食品、医药、化工、日化、造纸、纺织、石油和环保等领域具有很好的应用前景。因此,研究魔芋葡甘聚糖的提取分离方法具有重要的意义。 1 魔芋葡甘聚糖(KGM)的提取[ 2 ] 1.1粗提魔芋粉 80g→150ml石油醚→60cC-65℃加热回流0.5h→过滤斗回收石油醚后→150mL 90%乙醇→70-80℃加热回流0.5h→过滤→回收乙醇→滤渣→60℃干燥→粗魔芋葡甘露聚糖。样品重71g，产品收率为89%。用分光光度法[6.71测得葡甘露聚糖含量为74.2%o 1.2精制 1.2.1乙醇沉淀法粗魔芋葡甘聚糖(5g)→配成1%溶胶→95%乙醇沉淀→80%乙醇洗涤两次→85%乙醇50℃洗涤30min→95%乙醇沉淀→60℃干燥→粉碎→KGM。用分光光度法16,71测得KGM的含量为90.1%，产品收率为90.5%o 1.2.2酸水解法粗魔芋葡甘聚糖(5g) →配成1%溶胶酸→水解(10%HCI调pH2-pH3,85℃-90℃水解15h)→95%

【免费下载】小檗碱的提取分离及鉴定

盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。 [目的要求] 1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。 2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。 [实验原理] 小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。

O O 33NH CHO O O OCH 3OCH 3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）N +O O 33小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。N +H 3CO H 3CO OCH 3OCH 3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。[实验内容]一、提取分离通过管线敷设技术，不仅可以解决吊顶层配置不规范问题，而且可保障各类管路习题到位。在管路敷设过程中，要加强看护关于管路高中资料试卷连接管口处理高中资料试卷弯扁度固定盒位置保护层防腐跨接根据生产工艺高中资料试卷要求，对电气设备进行空载与带负荷下高中资料试卷调控试验；对设备进行调整使其在正常工况下与过度工作下都可以正常工作；对于继电保护进行整核对定值，审核与校对图纸，编写复杂设备与统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。力保护高中资料试卷配置技术是指机组在进行继电保护高中资料试卷总体配置时，需要在最大限度内来确保机组高中资料试卷安全，并且尽可能地缩小故障高中资料试卷破坏范围，或者对某些异常高中资料试卷工况进行自动处

【CN110003357A】一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘露聚糖提取工艺及应用【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910369078.3 (22)申请日 2019.05.05 (71)申请人汕头市捷成生物科技有限公司地址 515000 广东省汕头市金平区潮汕路金园工业城6B5片区 (72)发明人黄林青　 (74)专利代理机构汕头兴邦华腾专利代理事务所(特殊普通合伙) 44547 代理人张树峰　聂文文 (51)Int.Cl. C08B 37/02(2006.01) A23C 9/13(2006.01) A23C 9/156(2006.01) (54)发明名称一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘露聚糖提取工艺及应用 (57)摘要本发明公开了一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用。本发明将魔芋粉提取淀粉后的残渣采用超声波—微波联合辅助乙醇沉淀法提取纯化魔芋葡甘聚糖，采用酸性乙醇法除去杂质、异味，提高魔芋葡甘聚糖含量，使魔芋中的营养成分得到充分利用，节约资源；将魔芋葡甘聚糖、异麦芽酮糖醇配伍使用具有较好的改善肠道内环境及调节肠道菌群功能，可润肠通便，防止便秘，不仅安全有效，还可促进营养成分的吸收，真正做到排而不泄，通而不痛的效果。权利要求书1页说明书4页CN 110003357 A 2019.07.12 C N 110003357 A

1.一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用，其特征包括以下步骤：（1）将魔芋粉残渣加入乙醇溶液中，搅拌均匀，70℃水浴加热，再分别经超声、微波处理，离心取沉淀；沉淀经上述工艺反复操作3～4次，再经60～70℃热风干燥后，得魔芋葡甘聚糖粗品；（2）将魔芋葡甘聚糖粗品加纯化水溶胀，过滤取滤渣，滤渣加入乙醇溶液，用盐酸调节溶液pH，60℃水浴加热搅拌60min，过滤取滤渣；滤渣经不同浓度乙醇溶液梯度洗涤后，干燥得纯品；（3）将魔芋葡甘聚糖纯品吸水膨胀成糊状，取出冷冻干燥，粉碎成粒度80 ~100目得速溶葡甘聚糖；（4）将制备的速溶魔芋葡甘聚糖与异麦芽酮糖醇按配比混合，经微波灭菌后分装即得。 2.如权利要求1所述一种具有减肥功效的水果味奶昔的配方，其特征在于，所述步骤（1）中乙醇溶液浓度为70～80%，添加量为魔芋粉残渣的100倍。 3.如权利要求1所述一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用，其特征在于，所述步骤（1）中超声处理条件为：超声功率180W，时间50～60min，微波处理条件为：微波功率480W，时间20～30s。 4.如权利要求1所述一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用，其特征在于，所述步骤（2）中溶胀纯化水添加量为魔芋葡甘聚糖粗品的100倍。 5.如权利要求1所述一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用，其特征在于，所述步骤（2）中滤渣提取乙醇溶液浓度为80%，添加量为魔芋葡甘聚糖粗品的100倍。 6.如权利要求1所述一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用，其特征在于，所述步骤（2）中盐酸调节pH至4～5。 7.如权利要求1所述一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用，其特征在于，所述步骤（2）中梯度洗涤乙醇溶液浓度依次为85%、95%、无水乙醇。 8.如权利要求1所述一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用，其特征在于，所述步骤（3）中冷冻干燥温度为-20～-30℃。 9.如权利要求1所述一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用，其特征在于，所述步骤（4）中速溶魔芋葡甘聚糖与异麦芽酮糖醇配比按重量份比包括：速溶魔芋葡甘聚糖60～70份、异麦芽酮糖醇30～40份。 10.如权利要求1所述一种魔芋粉残渣中魔芋葡甘聚糖提取工艺及应用，其特征在于，所述步骤（4）中微波灭菌条件为：微波功率360W，时间4～5min。权　利　要　求　书1/1页 2 CN 110003357 A

从活化酵母中提取葡聚糖的工艺研究

从活化酵母中提取β-葡聚糖的工艺研究［摘要］笔者采用酸法、碱法和酸碱融合法提取酵母细胞壁中的β- 葡聚糖，对得率和纯度进行对比分析后，发现用碱法浸提工艺从破壁酵母中提取碱不溶性β- 葡聚糖效率最高。通过正交试验得出最佳提取条件为：在75°C 条件下、0.75mol/L 的碱液处理15min。不同脱水和干燥条件的对比实验表明：脱水和干燥条件影响产品的色泽；溶剂和水分蒸发得越快，产品最终含水率越低，产品颜色越白。［关键词］酵母细胞壁β- 葡聚糖碱法酸法酸碱法 0.引言 β- 葡聚糖作为活性多糖不仅具有免疫促进作用，而且具有抗癌、抗肿瘤、提高抗病能力和降低胆固醇等生理活性，是一类研究较多的活性多糖。由于其具有高粘性、高持水性和热稳定性，以及制备工艺简单等方面的优点，在食品、医学、化妆品、造纸和建筑材料等行业得以广泛应用。在国内外相关研究报道中，对于β-葡聚糖的制备，有酸法，碱法，以及酸碱、有机溶剂和酶相结合的方法。其中，碱法由于其浸提工艺简单，产品纯度高，是从废弃酵母中有效提取高纯度β-葡聚糖的理想途径。本文在对比酸法、碱法和酸碱法的基础上，主要研究用碱法工艺提取β- 葡聚糖的最佳条件，并分析不同提取条件对产物得率和纯度的影响，以及干燥和脱水条件的选择对结果的影响，为啤酒生产中的废酵母泥利用提供技术参考。 1.材料与方法 1.1 材料和试剂酵母粉，乙酸，NaOH, 无水乙醇，无水乙醚，硫酸等，均为分析纯。 1.2 方法 1.2.1 酵母破壁盐法破壁：在酵母菌体浓度 10％，氯化钠浓度 2.5％，破壁时间 2.5h，破壁温度70℃的实验条件下进行破壁。 1.2.2 酸法配制 1.0mol/L 醋酸溶液 60mL，加入酵母粉 3g，在70℃下水浴 1- 2 小时。3000r/min 离心 15min,沉淀物水洗 2 次，然后用无水乙醇洗涤，无水乙醚脱水，在37℃条件下干燥至恒重。 1.2.3 碱法配制 1.0mol/L NaOH 溶液 60mL，加入酵母粉 3g，在70℃下水浴 1- 2 小时。3000r/min 离心 15min,沉淀物水洗 2 次，然后用无水乙醇洗涤，无水乙醚脱水，在37℃条件下干燥至恒重。 1.2.4 酸碱法 4g 酵母粉加适量水制成酵母泥，加入 200mL 1mol/L NaOH 在90℃ 下，作用 2h 后 3000r/min 离心 15min，水洗 2 遍，加入 4%的乙酸溶液 50mL 室温处理 2h，3000r/min 离心 10min 后，用无水乙醇和无水乙醚分别脱水两次，在37℃下干燥 12h 至恒重。 1.2.5 碱法分离提取的最佳实验条件

中药化学实验指导—实验十黄连中盐酸小檗碱的提取分离与检识

实验十黄连中盐酸小檗碱的提取分离与检识（一）目的要求学习提取精制和检识黄连中的小檗碱，通过实验要求： 1．掌握小檗碱的结构特点和理化性质。 2．熟悉浸渍法、盐析法、结晶法和薄层色谱法的基本操作过程及注意事项。 3．了解盐酸小檗碱的检识方法。（二）主要化学成分的结构及性质黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao 、峨嵋野连Coptis omeiensis (Chen)C.Y.Cheng 或云连Coptis teeta Wall.的根茎。黄连的根状茎含多种生物碱，主要为小檗碱（黄连素），约5％～8％，其次为黄连碱、甲基黄连碱、掌叶防己碱、药根碱、木兰碱等。叶含小檗碱1.49％。小檗碱(berberine)：分子式(C 20H 18NO 4)＋，分子量336.37。系季铵生物碱。游离小檗碱为黄色针状结晶（乙醚），mp.145℃，能缓缓溶于冷水（1∶20），可溶于冷乙醇（1∶100），易溶于热水或热乙醇，难溶于丙酮、氯仿、苯，几乎不溶于石油醚。盐酸小檗碱(C 20H 17NO 4·HCl ·2H 2O)，为黄色结晶，微溶于冷水（1∶500），易溶于沸水，几乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。硫酸小檗碱( (C 20H 18NO 4)2·SO 4·3H 2O)，溶于水（1∶30），溶于乙醇。重硫酸小檗碱(C 20H 18NO 4·HSO 4)为黄色结晶或粉末，溶于水（1∶150），微溶于乙醚。 N O C H 3 O C H 3O O + N + H O C H 3O H O C H 3O C H 3C H 3 小檗碱木兰碱（三）实验原理根据小檗碱的盐酸盐在水中溶解度小，而小檗碱的硫酸盐水中溶解度较大。因此，从植物原料中提取小檗碱时常用稀硫酸水溶液浸泡或渗漉，然后向提取液中加入10％的食盐，在盐析的同时，也提供了氯离子，使其硫酸盐转变为氯化小檗碱（即盐酸小檗碱）而析出。

真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂盒(显色法)产品技术要求kehe

真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂盒（显色法）适用范围：用于体外定量测定人血清样本中真菌(1-3)-β-D葡聚糖的含量。1.1 规格 24人份/盒、48人份/盒 1.2 主要组成成分校准品靶值批特异，详见靶值单质控范围批特异，详见靶值单 2.1 外观反应主剂为白色冻干块状物，样品处理液、溶解液和主剂复溶液为无色透明液体。 2.2 装量处理液、溶解液和主剂复溶液装量不小于标示量。 2.3 准确度

试剂盒的回收率须在85%～115%范围内。 2.4 重复性检测浓度为125pg/mL的溶液，重复检测10次，其变异系数（CV）值应不大于10％。 2.5 线性 2.5.1在浓度[31.25,500]pg/mL范围内，其线性相关系数的绝对值r≥0.990; 2.5.2在浓度[31.25 ,125）pg/mL范围内，其线性绝对偏差的绝对值不大于12.5 pg/mL；在浓度[125 ,500]pg/mL范围内，其线性相对偏差的绝对值不大于10%。 2.6 空白限试剂盒的空白限不大于16 pg/mL。 2.7 溯源性根据GB/T21415的有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定等内容，溯源至企业工作校准品。 2.8 质控品赋值有效性检测质控品，检测结果应在质控范围内。 2.9 批内瓶间差同一批号的10个待检试剂盒对浓度为250pg/mL的标准溶液进行测试，重复10次，瓶间差的变异系数不得大于10%。 2.10 批间差 3个批号的试剂盒检测结果的变异系数应不大于15％。 2.11 稳定性 2.11.1 2℃～8℃保存，有效期12个月，取过有效期3个月以内的试剂盒进行测定，应符合2.3、2.3、2.5、2.6、2.7、2.8的要求； 2.11.2校准品溶解后，-20℃保存10天后进行测定，应符合2.3的要求； 2.11.3质控品溶解后，-20℃保存10天后进行测定，应符合2.8的要求； 2.11.4反应主剂溶解后，立即冻存至-20℃保存7天后进行测定，应符合2.3、2.5的要求。

β 葡聚糖提取工艺

β-葡聚糖保健食品批文申报研发报告 30 产品研发报告；一．产品的研发思路；β-葡聚糖是禾谷类植物籽粒胚乳和糊粉层细胞壁的主；燕麦作为世界8大粮食作物之一，也是我国北方各省的；目前,燕麦β-葡聚糖的结构已被确认,它是由β（1；β-葡聚糖在增强免疫力方面的作用已经被大量学者实；此外，从燕麦中提取的β-葡聚糖目前已被证实在以下；1．抑制肿瘤,防止癌变；2．降血脂；3．降血糖；目前，增强免疫力类功能食品是产品研发报告一．产品的研发思路 β-葡聚糖是禾谷类植物籽粒胚乳和糊粉层细胞壁的主要成分。近20年来，围绕着从禾谷类植物中提取的β-葡聚糖，国内外学者进行了大量的的人体和动物试验，发现其在增强免疫力、加快人体免疫反应、降血脂及血清胆固醇、控制由胰岛素引起的糖尿病等方面均具有良好的效果。燕麦作为世界8大粮食作物之一，也是我国北方各省的重要的小杂粮作物。医学研究证明，长期服用燕麦，有增强免疫力、降血脂、降血糖和减少心血管疾病的作用。而燕麦的保健功能，都归功于其中的主要功效成分，可溶性膳食纤维——β-葡聚糖。目前,燕麦β-葡聚糖的结构已被确认,它是由β（1-3）, β（1-4）糖苷键连接组成的线性β-葡聚糖，相对分子质量为2.62×106 。

β-葡聚糖在增强免疫力方面的作用已经被大量学者实验并验证。早在1982年,图伦大学医学院研究表明，以β-葡聚糖免疫的小白鼠在经过高浓度的大肠杆菌注射后数小时内，不论死亡率还是血液中细菌浓度都较未处理者低得多，证明β-葡聚糖的确具有免疫保护功能。上海第三军医大学郭波等进行的动物实验，结果证明，β-葡聚糖可明显提高小鼠的特异性IgG、IgG2a、IgG1抗体应答，具有促进抗体产生的作用[1]。加拿大的YUN CH等用感染了艾美球虫的大鼠实验同样证明，燕麦中提取的β-葡聚糖（oat-glucan）可明显提高大鼠血清中总IgG, IgG1, IgG2a, Ig M 和 IgA抗体水平【2】。在后续研究中，发现从燕麦中提取的β-葡聚糖可明显提高对细菌及寄生感染等的抵抗力【3】。Estrada A等研究发现燕麦β-葡聚糖可促进腹膜巨噬细胞IL-1、TNF-alpha等细胞免疫因子的分泌，对脾细胞也具有促进IL -2,、IFN-gamma 、IL-4等细胞免疫因子分泌的作用【4】。对于燕麦β-葡聚糖增强免疫力方面的机理,目前主要认为, 燕麦β－葡聚糖与体内的巨噬细胞、嗜中性细胞表面的受体（CR3）结合,从而刺激免疫细胞,提高其活力,达到增强机体免疫力的效果，J. M. Davis等人的研究也确认了燕麦β－葡聚糖增强巨噬细胞等活力的作用【5】。此外，从燕麦中提取的β-葡聚糖目前已被证实在以下方面具有良好的作用：1．抑制肿瘤,防止癌变。燕麦中的β-葡聚糖可以刺激体内巨噬细胞、嗜中性细胞，提高活力，增强对癌细胞毒素的抵抗能力。美国的一项大鼠实验证明，在大鼠灌喂了燕麦β-葡聚糖10天后，静脉注射2 x 105的同源的B16黑素瘤细胞，之后继续灌喂14天。检测结果发现，大鼠的肺肿瘤病灶明显减少，同时巨噬细胞的细胞毒作用（macrophage cytotoxicity）则也有所增强。另外，作为一种水溶性膳食

紫杉醇提取工艺原理及操作技术

紫杉醇提取工艺原理及操作技术紫杉醇为白色结晶性粉末，无臭，无味，在甲醇、乙醇或氯仿中溶解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。紫杉醇常规的提取工艺各个生产环节需控制在低温下操作，保证产品活性。各个工时段应尽快完成，可选水浴加热提取罐(含溶剂回收装置)，旋转真空浓缩机组(低温浓缩，1-2秒完成)，层析柱(精制分离)，板式真空干燥箱(低温干燥、速度快)。紫杉醇提取操作过程 (1)浸提：将原料投入提取罐内，干红豆杉每罐填装约1.2吨的原料，加入约4吨的甲醇浸提，温度为45±5℃，每遍循环浸提大于4小时，浸提完成后，将浸提液排入浸提液储罐中，进行蒸汽吹渣，温度控制在85±5℃,压力小于等0.2Mpa，回收残余的甲醇溶液，吹渣结束后，将废渣移到废料堆场集中处理。 (2)浓缩：浓缩温度控制在45±5℃，真空度控制在-0.07±00.1Mpa，浸提液浓缩至比重达到0.95~1.05时，将浓缩液放出到专用的储罐中。 (3)萃取：将计量后的浸提浓缩液注入萃取罐，加入醋酸乙酯(按物料：醋酸乙酯=1：1)，萃取三次，将醋酸乙酯层重液排入指定贮罐，将贮罐内的醋酸乙酯液抽入浓缩锅进行初浓缩预处理，温度控制在 45±5℃，待浓缩液比重达到1.40±0.05时，将浓缩后的醋酸乙酯液排入指定贮罐中。 (4)干燥：将浓缩后的醋酸乙酯萃取液抽入蒸发罐内，罐内温度不超过45±5℃，真空度为 -0.06±00.1Mpa，浸膏置真空干燥箱内干燥，干燥完成后，取出产品，凉干，敲碎，经检验合格后即成为紫杉醇浸膏，用铁桶封装，入库阴凉保存。甲醇制3mg/ml的溶液，比旋度为-48℃~56℃。甲醇制15μg/ml的溶液，在227nm处有最大紫外吸收，10mg紫杉醇加甲醇溶液10ml溶解后应澄清无色。紫杉醇注射剂是新型抗微管药物，通过促进微管蛋白聚合抑制解聚，保持微管蛋白稳定，抑制细胞有丝分裂。体外实验证明紫杉醇具有显著的放射增敏作用，可能是使细胞中止于对放疗每次的G2和M期，适用于卵巢癌和乳腺癌及NSCLC的一线的二线治疗。用于头颈癌、食管癌、精原细胞瘤，复发非何金氏淋巴瘤等治疗，静脉给予紫杉醇注射剂，药物血浆浓度呈双曲线，蛋白结合率89%~98%，主要在肝脏代谢，随胆汗进入肠道，经粪便排出体外(﹥90%)，经肾清除只占总清除的1%~8%。莱特莱德膜分离技术有限公司致力于膜分离和脱盐浓缩技术以及冷冻浓缩分离技术推广与工艺设备开发。通过多年的努力，已具备丰富的工程经验，为客户提供从小试、中试、工业化设备的工艺设计到设备生产、安装调试等一系列服务，能够提供整体解决方案和交钥匙工程，并成功应用于冶金、环保、制药、化工、食品等领域，赢得了客户和业内的良好口碑。

小檗碱的提取分离及鉴定

盐酸小檗碱得提取分离及鉴定黄连具有清热燥湿、清心除烦,泻火解毒得功效。黄连得有效成分主要就是生物碱，已分离出得主要生物碱有小檗碱(berbｅrｉｎe)、掌叶防己碱（palmaｔine)、黄连碱(jatrorrｈizine）等。其中小檗碱含量最高，可达1０%左右,就是以盐酸盐得状态存在于黄连中。小檗碱有很强得抗菌作用,已广泛地应用于临床,掌叶防己碱也作药用,其抗菌性能与小檗碱相似。［目得要求] 1．学习与掌握水溶性生物碱得提取方法。 2.学习与掌握生物碱得柱色谱分离方法。 [实验原理] 小檗碱为黄色针状结晶,ｍp为145℃，游离得小檗碱能缓缓溶于水(1：2０)及乙醇中（1:1０0）,易溶于热水及热醇,难溶于乙醚,石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂,其盐在水中溶解度很小，尤其就是盐酸盐。盐酸盐为l：50０，枸橼酸盐1:１25,酸性硫酸盐1:1０0，硫酸盐ｌ:3０,但在热水中都比较容易溶解。小檗碱常以季铵碱形式存在,碱性强(pka11、5３),能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。 O 3 3 NH CHO O O OCH3 OCH3季铵式(红棕色）醇式(黄色) 醛式(黄色) N+ O O OCH3 3 小檗碱（黄连素) 掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶,溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶,并有强烈

得黄色荧光。易溶于热水或热乙醇,在冷水中得溶解度也比盐酸小檗碱大。 N + H 3CO H 3CO OCH 3 OCH 3 掌叶防己碱本实验就是利用小檗碱与掌叶防己碱得硫酸盐在水中溶解度大得性质,用硫酸水提取出来总生物碱,再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用,使生物碱盐析出,以除去水溶性杂质。再利用两种生物碱极性不同,采用柱色谱分离。 [实验内容] 一、提取分离黄连粗粉50ｇ O 4５０0ml,浸渍20分钟加石灰乳调ＰH 值至中性放置１0分钟，抽滤滤液加HC ｌ调PH2～3 加滤液体积4~5%得NaCl,放置30分钟,抽滤沉淀滤液 (主要含小檗碱、掌叶防己碱、黄连碱等生物碱）加２00ml 水加热至澄明趁热抽滤滤液放置、抽滤沉淀二、生物碱类检识

真菌βD葡聚糖检测与真菌感染诊断

真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染诊断一、概述经研究表明，(1-3)-β-D-葡聚糖是一种广泛存在于真菌细胞壁的抗原成分, 占其干燥重量的80%～90%，其它微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有。深部真菌感染患者中血浆(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,两者存在相关性。? 当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化代谢后，（1-3）-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液或其它体液中（1-3）-β-D葡聚糖含量增高。当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速对其清除。而在浅部真菌感染中，（1-3）-β-D葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高，它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI（深部真菌感染）的标志。二、深部真菌感染的诊治近年来，由于造血干细胞移植、实体器官移植的广泛开展、高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用以及各种导管的体内介入、留置等，临床上侵袭性真菌感染(invasive fungal infections，IFI)的患病率明显上升。IFI也日益成为导致骨髓及器官移植受者、接受化疗的恶性血液病和恶性肿瘤患者、AIDS以及其他危重病患者的严重并发症及重要死亡原因之一。由于缺少有效的早期诊断手段，深部真菌感染病死率居高不下。对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断，及早用药治疗。常规病原学诊断“微生物培养”可为临床提供直接的诊断依据，但其培养方法耗时长（4-7天），不适宜用作早期诊断。并且，随着光谱抗生素、抗菌药物的大量应用，使得培养的阳性率极低。常用的免疫学方法，也由于抗原抗体反应的特异性差，往往对某一疑似真菌感染患者要作多种真菌抗原或抗体检测，既费时又不经济，而且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊。对一些以往接触过相应真菌抗原的个体，作抗体检测时还会出现阳性反应，因而对抗体的检测往往要求作动态观察才能作出诊断，期末属性较差。有研究报道血清葡聚糖在念珠菌血症时明显升高，将其用于念珠菌血症的早期诊断明显优于传统的培养法和血清学诊断试验。虽然检测（1-3）-β-D葡聚糖只能提示有无真菌侵袭性感染，不能确定为何种真菌，但也可能转化为一种优势。因近年来，一些罕见的条件致病真菌也可引起深部感染，这就要求一种能迅速确定有无深部真菌感染的方法。因系统抗真菌药物种类较少，抗菌谱较广，且不因真菌种类而异，当检测到标本中的（1-3）-β-D葡聚糖含量较高时，可给予以系统治疗，不必耗时等待鉴定出种属，否则会贻误最佳治疗时机。因此，血清（1-3）-β-D葡聚糖含量检测不失为一种实用的真菌感染早期诊断方法。并且，相关研究表明，（1-3）-β-D葡聚糖水平在确诊IFI患者的血清中出现持续升高，而随着药物的使用，对药物敏感者可很快出现（1-3）-β-D葡聚糖水平下降及转阴，而药物治疗无效人群（1-3）-β-D葡聚糖值无明显改变。因此，（1-3）-β-D葡聚糖可以用来判断药物的疗效，以协助临床医师及时进行药物种类及剂量的调整。通过对人体体液进行（1-3）-β-D葡聚糖含量检测，可帮助判断人体是否已被真菌感染。对高危患者的样本进行连续分析，可为临床检测提供入侵真菌的量值或阴性预示值，为临床诊断和