17β-雌二醇和他莫西芬对人胃癌细胞株BGC-823活力及ER-α36蛋白表达的影响

力， 且与作 用时间相 关， 随着干预时间增加 ， 其抑制作 用更加 明显。Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ 检测结果显示， １ ７ ３一雌二醇作 用于 １
Ｂ Ｇ Ｃ一 ８ ２ ３细胞 ２ ４ ｈ后 ， 药物浓度为 １ ×１ ０ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ和 １ ×１ ０ 。 ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ时， Ｅ Ｒ—ｏ ｔ ３ ６蛋 白表达量显著 高于对照组 （ Ｐ＜
０ ． Ｏ １ ） ； １ ７ １ ３一 雌二醇作用 ４ ８ ｈ后 ， Ｅ Ｒ一 ６的表达水平均低 于对 照组（ Ｐ＜ ０ ． ０ １ ） 。他莫 西芬 处理 ２ ４ ｈ后 ， Ｅ Ｒ— ｃ ｔ ３ ６ 的表达量较对照组显著升 高（ Ｐ＜ ０ ． ０ １ ） ； 而他莫西芬作 用４ ８ ｈ后 ， Ｅ Ｒ—ｏ ： ３ ６的表达呈浓度依赖性改变， 与对照组比较
基， Ｐ Ｂ Ｓ洗 ２次 ， 加入经 过活性碳 处理 的含 １ ％ 胎 牛 血 清 的无 酚 红 Ｒ Ｐ Ｍ Ｉ １ ６ ４ ０培 养 基 培 养 ６ ｈ后 ， 实 验 组 加
剪切变体 ， 主要位于细胞膜上 ， 该受体通过膜雌 激素途
径激活 Ｅ Ｒ Ｋ １ ／ ２细 胞 增 殖 通 路 ， 并 且 其 生 物 学 作 用 有
广东 医学
２ ０ １ ５年 ７月 第 ３ ６卷第 １ ３期 Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ Ｊ ｕ １ ．２ ０ １ ５ ，Ｖ ｏ １ ．３ ６ ，Ｎ ｏ ．１ ３
・
２ ０Ｏ１ ・
１ ７ １ ３一雌 二 醇 和他 莫 西 芬 对 人 胃癌 细胞 株 Ｂ Ｇ Ｃ Ｅ Ｒ—ｏ Ｌ ３ ６蛋 白表 达 的影 响 ８ ２ ３活 力 及
性， 采用 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ 法检 测 Ｅ Ｒ—ｏ ｔ ３ ６的表 达水平。对照组不加药物干预。结果 ＷＳ Ｔ一１实验结果显 示 ， １ ７ ｐ一
雌二 醇可显著增加 Ｂ Ｇ Ｃ一 ８ ２ ３细胞活力 ， 且 随着干预 时间增加 ， 其作 用效果更加 明显； 他莫西芬干预可减 弱细胞 活
１ ． ２及 药 物处 理 Ｂ Ｇ Ｃ一８ ２ ３细 胞于 含 １ ０ ％小牛血清的 Ｒ Ｐ ＭＩ １ ６ ４ ０培养基 中培养 ， 待细胞 约
８ ０ ％融合时胰酶 消化 传代 ， ３～ ５ ｄ传 代 １次 ， 细胞 于 ３ ７ ｏ Ｃ、 ５ ％Ｃ Ｏ ： 培养箱 中培养 。取 对数生 长期细胞 常规 消化接种于 ６孔培 养板 中 ， 常规培养 ２ ４ ｈ后弃 去培养
周迪 炜 ，范军 ，刘 丽江
华 中科 技 大 学 同 济 医 学 院 附 属 协 和 医 院 病 理 科 （ 武汉４ ３ ０ ０ ５ ６ ）
【 摘 要】 目的
探讨 １ ７ ｐ一 雌 二醇和他莫西芬对人 胃癌细胞株 Ｂ Ｇ Ｃ一８ ２ ３细胞 活力及 Ｅ Ｒ—ｄ ３ ６蛋 白表 达的
影 响 。方 法 实验 组 给 予 １ ７ ３一雌 二 醇 及 他 莫 西 芬 干 预 人 胃癌 细胞 株 Ｂ １ Ｇ Ｃ一８ ２ ３后 ， 采 用 ＷＳ Ｔ一１法 检 测 细胞 活
入含不 同浓度 的 １ ７ １ ３一雌二 醇 （ １×１ ０ 、 １×１ ０ 、 １ ×１ ０ ” ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ） 和他 莫西芬 （ ５×１ ０ 一、 １×１ ０ 。ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ） 的上述培养基培养 ２ ４ ｈ及 ４ ８ ｈ ， 对照 组 中加入 不含药 物（ 含 １ ： １ ０ ０ ０体积无水 乙醇 ） 的上述 培养基培 养相应
别于传统 的雌 激素受 体 Ｅ Ｒ ａ和 Ｅ Ｒ ３ １ 。在前 期研 究
中， 本课 题组 发现在人 胃癌细胞 株和人 体 胃癌组 织 中 均有 Ｅ Ｒ— ｃ ｘ ３ ６ 表达 ， 且其表达 强度与 胃癌淋 巴结 转移
情 况 密 切 相 关 ， 提示 Ｅ Ｒ— ｄ ３ ６可 能 在 胃癌 的 转 移 过
差异有统计 学意义（ Ｐ＜ ０ ． ０ １ ） 。结论
凋 亡过 程 中发挥 作 用。
不 同浓度 １ ７ １ ３一 雌二醇和他 莫西芬干预可影响 Ｂ Ｇ Ｃ一８ ２ ３细胞 活力和 Ｅ Ｒ—
ａ ３ ６在蛋白质水平的表达， 并且细胞活力的改变与 Ｅ Ｒ— ａ ３ ６的表达情况有关， Ｅ Ｒ— ａ ３ ６可能在 Ｂ Ｇ Ｃ一 ８ ２ ３细胞的增殖与 【 关键词 】 雌 激素受体 一ａ ３ ６ ；１ ７ ｔ ３一雌二醇 ； 他 莫西芬 ； 细胞活力
流行病学 调查发 现 ， 男性 胃癌发病率 显著 高于女 性 ， 且绝 经 后 女性 胃癌 的发 病 率 较 绝 经 前 明显 升 高 ， 提示雌激素在 胃癌 的发生 发展 中可能发 挥重 要 作用 。雌激素 主要 通 过其受 体 （ ｅ ｓ ｔ ｒ ｏ ｇ ｅ ｎ ｒ ｅ ｃ ｅ ｐ ｔ ｏ ｒ ， Ｅ Ｒ） 发挥生物学作 用 ， 研 究证 实 胃癌组 织 中存 在 Ｅ Ｒ的表
时间 。
程发挥重 要作 用 ， 但 Ｅ Ｒ—ｃ Ｌ ３ ６与 胃癌 的关 系 尚未 明
了。２ ０ ０ ６年 ９月至 ２ ０ ０ ７年 ６月 ， 本研究采用不 同浓度 的１ ７ １ ３ 一 雌二醇 和选择性雌激 素受体调 节剂他莫 西芬
作用 于人 胃癌细胞株 Ｂ Ｇ Ｃ一 ８ ２ ３ ， 通 过 ＷＳ Ｔ一１ 法检测 细胞 的活力 ， 并 采 用 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ 方 法 检测 Ｅ Ｒ一仅 ３ ６ 蛋 白表达水平 ， 探讨 Ｅ Ｒ一仅 ３ ６在蛋 白水 平的表 达情况 及其与细胞活力的关系 ， 为 明确 Ｅ Ｒ一仅 ３ ６在人 胃癌细
达 ， 并且 Ｅ Ｒ与 胃癌 的发 生及 预后 关 系密 切 。 Ｅ Ｒ— ｏ ｔ ３ ６是新近在乳腺癌细胞 ＭＣ Ｆ一 ７中发现 的 Ｅ Ｒ ａ
所； Ｅ Ｒ一 ０ ｔ ３ ６兔多克 隆抗 体 由美 国 Ｃ ｒ ｅ ｉ ｇ ｈ ｔ ｏ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ
医学 中心王兆一教授惠赠 。