Bio Rad电泳仪操作规程
BIO-RAD ChemiDocXRS+化学发光凝胶成像仪中文简易说明书
ChemiDocXRS+化学发光凝胶成像仪的应用一、实验流程：1、实验前需提前半小时打开冷CCD镜头的开关，打开仪器的开关，最后打开软件。
2、实验时先将抽屉拉开放置核酸凝胶或转印膜（若是蛋白凝胶需放在暗箱中的白光板上，不用时白光板竖立卡好在暗箱中），关上抽屉，检查暗箱门是否关好。
确认好后，打开ImageLab软件，设置拍照程序，当选择不同凝胶拍摄方法时，会提示滤光片的位置和使用激发光的类型（例如拍摄化学发光会提示：无光源，无滤光片，此时滤光片的位置要调到“0档”），严格按照软件中的提示操作。
等拍照结束后保存拍照程序及最终生成的图片，便于后续数据的分析及程序的再次调用。
普通核酸凝胶和蛋白质凝胶的成像步骤与GelDocXR+的操作一样，也可参照《ImageLab中文操作指南》。
化学发光成像的拍摄方法如下：（1） 在凝胶成像（Gel Imaging）对话框中选择Chemi（化学发光）应用程序（2）在成像区域（Imaging Area）对话框中的下拉菜单里选择合适的样品大小（非必需）（3）选择成像曝光（Image Exposure）方法可以人为估计曝光时间并手控设定（Manual Exposure），或者使用信号累积模式（Signal Accumulation Mode，SAM）。
在建立一个化学发光的程序时最难的任务就是图像曝光的确定，因为您想获得一个充分利用了相机大的动态范围的图像。
过短的图像曝光时间可能使高于膜背景的微弱信号不能被识别；过长的图像曝光时间能够使得某些条带饱和（也就是说，超出了相机准确报告信号的能力）。
如果这是您第一次用ChemiDoc XRS+分析化学发光样品，您需要在使用手控或信号累积模式（SAM）之前决定一个合适的成像时间框架。
获得这个信息的最好的方式是取得一个相对短的手工曝光并利用Image Lab里的工具估计最适的曝光时间。
手控曝光1. 选择手控设定曝光时间（Manually setexposure time）并在读秒框中输入10秒。
电泳仪操作及维护保养作业指导书
广州东盛生物科技有限公司
实验仪器
编号:
操作及维护保养作业指导书
电泳仪
1.0目的：保证实验仪器的有效使用，确保产品实现过程的质量。
2.0适用范围：本公司电泳仪（百晶BG-Power600i）。
3.0工作环境：保持电泳仪环境温度在15℃~30℃；相对湿度不大于70％；周围空气中无腐
蚀性的气体存在。
4.0操作流程：
4.1打开电源，按电泳仪面板上的“SET”按钮，使仪器进入电压及电泳时间设置状态，根
据上下箭头设置所要的电压及电泳时间。
4.2将需要点样的DNA样品以移液器点进琼脂糖胶孔中。
4.3按下电泳仪面板的“start”按钮，运行指示亮起红色，电泳进行。
4.4按照预定时间进行电泳后，电泳仪鸣叫，提示电泳结束，按压电泳仪面板上的“stop”
按钮，电泳停止，运行指示灯灭。
4.5从电泳仪中取出琼脂糖胶，进行下一步的凝胶成像系统分析。
5.0维护保养方法：
5.1维护保养周期：两周。
5.2维护保养条件：依照3.0工作环境实施。
5.3外观检查：
5.3.1 仪器需保持清洁，表面外周干净清洁。
5.3.2 保证运行指示灯正常亮与灭。
5.3.3 检查电泳插头是否完后无损。
5.3.4 观察液晶屏字幕显示是否清晰，外观是否完整无损。
5.4 注意事项：
5.4.1 电泳时，防止无DNA样品空跑。
5.4.2 防止电极正反反插。
6.0 表单记录：电泳仪维护保养记录表格。
编制/时间：审批/时间：。
(完整版)Bio_Rad电泳仪操作规程
Bio—rad小电泳槽及电泳仪操作规程一．目的为规范Bio—rad小电泳槽及电泳仪的基本操作、维护保养、异常处理程序，防止人为操作失误，确保Bio-rad小电泳槽及电泳仪正常运转，特制定本程序。
二．适用范围本程序适用于Bio—rad小电泳槽及电泳仪.三．责任1. 本程序的实施者为Bio-rad小电泳槽及电泳仪操作者，各实验室负责人对本程序的实施情况进行监督。
2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由Bio-rad小电泳槽及电泳仪操作者负责。
四．内容1.灌胶a、取出灌胶模具，打开封底盘至完全开放的状态,松开两侧螺丝，向外侧打开夹子。
b、取长方形和带凹槽的长玻板各一块，从内到外依次按带凹槽玻板及长方形玻板的顺序排列,形成gel sandwich.注意正确排列以防漏胶。
c、短玻板朝外将sandwich放入模具中,检测sandwich的底是否紧靠底面.旋紧螺丝。
将封底盘锁至密闭状态。
d、将模具放在桌面上准备灌胶.e、根据需要配制一定浓度的胶.1、分离胶的灌制:用加样枪慢慢将胶加入sandwich中，注意不要有气泡。
其上加0.1%SDS 封顶。
2、浓缩胶的灌制：待分离胶凝后弃去SDS，开始灌浓缩胶,最后轻轻插入梳子。
f、待胶聚合后，拔出梳子，用电泳缓冲液清洗加样槽，去除未聚合的胶。
g、模具放入电泳槽中。
2.电泳a、加适量的电泳缓冲液b、准备样品，加样。
c、盖上电泳槽的盖子，注意红色对正极，黑色对负极。
打开电源，开始电泳.初始电压100V， 15分钟后改为120v。
d、直至指示剂距前沿1cm处结束电泳,拔掉电源，小心取出胶，根据需要进行染色或转膜，回收电泳缓冲液（可重复利用3次）。
五．注意事项：a、每次用完后，立即清洗电泳槽，灌胶模具，玻璃板（先用自来水洗干净，再用蒸馏水冲一遍后放在架子上晾干)。
b、扣紧或打开灌胶模具时要用力均匀，以免压坏玻璃板。
c、盖上电泳槽的盖子时，务必注意正负极不要接反。
Bio-Rad电泳仪操作规程
Bio-Rad电泳仪操作规程一、实验室准备及前置操作1.确认所需试剂齐全，按照试剂说明书正确配制试剂。
2.准备电泳池：将电泳池放在水平台上，并在池底加入适量的电泳缓冲液，上层电泳缓冲液加入清水至电泳池上部。
3.安装电泳模板：将电泳模板安装于电泳池内，使用扳手或洛氏钳拧紧螺丝未水密。
4.准备样品：将样品于电泳缓冲液中混合均匀，加入电泳模板中的样品槽中，尽量避免气泡。
5.准备DNA标尺：选择合适的DNA标尺，并按照说明书添加至样品中。
二、电泳仪的操作流程1.打开电源：按照电泳仪说明书将电泳仪电源插座插入电源接口，按下电源开关按钮打开电泳仪电源。
2.设置温度：根据实验需要，在电泳仪面板上按照说明书设置电泳仪的工作温度。
3.设置电压和电流：根据实验需要，在电泳仪面板上按照说明书设置电泳仪的电压和电流，通常情况下，实验初期需要较低电流和电压，随后增加直到试样达到最佳分离效果。
4.加载样品：将样品及DNA标尺加入电泳模板，并注意样品槽的填充水平是否均匀，注意避免样品和标尺之间的干扰。
5.开始电泳：确认样品准备和电泳仪设置无误后，按下“开始电泳”按钮启动电泳过程。
6.结束电泳：确定电泳时间到达后，按下“停止电泳”按钮停止电泳过程。
7.处理电泳后试样：将电泳模板取出，使用染色剂染色并传递至显微镜下观察或进行下一步实验步骤。
8.关闭电源：关闭电泳仪电源，拔下电源接口。
三、维护和清洁电泳仪1.频繁检查电泳仪电路板的情况，并用除尘器清洁电泳仪的内部环境，保持电泳仪清洁干净。
2.经常检查电泳仪的液位是否充足、密封是否完好，电泳模板螺钉是否松动等问题，及时维护。
3.定期对电泳仪进行全面的清洁、保养和维修，确保电泳仪的准确性和稳定性。
四、实验注意事项1.电泳缓冲液的pH值要控制在所选用DNA电泳缓冲液的限度内。
2.电泳的时间、电压、电流、电极介质、电泳芯板质量等参数的选择应根据实验目的、样品性质和操作经验等综合考虑。
3.操作时注意安全，不要将电泳仪中的试样触碰到电极、线路和电泳芯板，以免引起放电等事故。
BIO－RAD凝胶电泳成像系统的操作方法
BIO－RAD凝胶电泳成像系统的操作方法BIO－RAD凝胶电泳成像系统的操作方法
1.接通电源和照相机电源
2.打开开关，预热30分钟
3.打开软件，文件菜单中gel-doc.xr
4.按live/focus,30s后按autoexpose or manualexpose
5.调iris,zoom ,focus调节图像清晰度，之后按freeze拍照，保存。
BIO-RAD 凝胶成像系统Universal Hood Ⅱ
仪器性能：
拍摄对象：核酸琼脂糖凝胶电泳
X光胶片
软件功能：获取并处理图像
测定图像光密度
操作步骤：
1. 开启成像系统，电脑电源
2. 打开Quality One软件，调整光源所示图像
3. 观察并调整曝光时间，获得图像并保存
4. 调整图像，并对图像进行光密度分析
5. 关闭所有电源。
电泳纯度(非还原型SDS-PAGE)测定标准操作规程
细胞因子电泳纯度（非还原型SDS-PAGE）测定标准操作规程依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。
范围：适用于细胞因子纯度的检测。
目的：检测细胞因子蛋白质纯度。
原理：蛋白质具有不同的电荷和分子量，在经过阴离子去污剂SDS处理后，蛋白质分子上的电荷被中和，在聚丙稀酰胺凝胶电泳时，不同的蛋白质按照其分子量大小进行分布，电泳迁移率仅取决于蛋白质的分子量。
由于不连续的PH梯度作用，样品被压缩成一条狭窄区带，采用染色液染色，经扫描仪扫描胶片可及时观察结果。
内容：1 材料1．1样品：经二人复核批号无误后检测1．2试剂甲醇 CH3OH 分析纯无水乙醇 CH3CH2OH 分析纯浓盐酸 HCl 分析纯甘油 C3H8O3分析纯硝酸银 AgNO3分析纯重铬酸钾 K2Cr2O7分析纯正丁醇 C4H9OH 分析纯甲醛 HCHO 分析纯丙烯酰胺 CH2CHCONH2分析纯甲叉双丙烯酰胺（CH2CHCONH2）2CH2分析纯过硫酸铵（NH4）2S2O8分析纯TEMED（四甲基乙二胺）(CH3)2N(CH2)2N(CH3)2分析纯甘氨酸 C2H5NO2分析纯SDS（十二烷基硫酸钠）C12H25O4SNa 分析纯乙酸 CH3COOH 分析纯碳酸钠 Na2CO3分析纯溴酚蓝 C19H10Br4O5S 分析纯1．3注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版要求。
1．4设备1．4．1扭力天平上海第二天平仪器厂1．4．2垂直板状电泳槽北京东方仪器厂1．4．3恒温恒流电泳仪法玛西亚公司1．4．4快速电泳槽BIORAD USA1．4．5全自动扫描仪CS-930 日本岛津1．4．6TS-1型摇床1．5器皿：500ml瓶、100ul移液器、1ml吸管、10ml吸管3000ml三角瓶、平皿、1000ml烧杯、80ml烧杯，以上器皿经本室洗刷组处理。
2 方法2．1准备工作2．1．1工作环境：控制区，确认场地清场合格，摘下“清场合格”标志牌，挂上“使用中”标志牌。
BIORAD电泳仪及SDS-PAGE凝胶电泳操作规范
使用BIO-RAD电泳仪进行SDS-PAGE凝胶电泳的操作规范实验原理根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白，在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后，蛋白质亚基的电泳迁移速率主要取决于亚基分子量的大小。
实验所用仪器FR-200A全自动紫外与可见分析装置上海复日科技有限公司电泳仪 BIO-RAD公司TS-1型脱色摇床江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司实验用试剂低分子量蛋白Maker TAKARA4*上样缓冲 TAKARAPagn Blue protein staining solution Fermentas试剂的配制1.贮液的配制（1）凝胶储液取30g丙烯酰胺+0.8g甲叉双丙烯酰胺0.8g ,先用35ml双蒸水溶解，搅拌，直到溶液变成透明，再用双蒸水稀释至100ml，过滤。
棕色瓶4℃保存一个月。
（2）1 mol/l Tris-HCL (PH 8.8)12.1g Tris(三羟甲基氨基甲烷)溶解在80ml双蒸水中，用4mol/l盐酸调PH至8.8。
再用双蒸水稀释至100ml，保存在4℃冰箱。
（3）1.0 mol/l Tris-HCL (PH 6.8)6.06g Tris溶解在40ml双蒸水中，用用4mol/l盐酸调PH至6.8。
再用双蒸水稀释至50ml，保存在4℃冰箱。
（4）10%过硫酸铵（APS）0.1g过硫酸铵+1ml双蒸水。
使用前新鲜配制（5）Tris–甘氨酸电泳缓冲液的配制（25mmol/L Tris；250mmol/L甘氨酸(pH8.3)）30.3gTris+ 144.2g甘氨酸+ 10gSDS，双蒸水定容至1L。
每次使用时10倍稀释。
（6）样品缓冲液使用4*SDS-PAGE loading buffer(Takara公司)，上样缓冲与样品比例1:3混匀，之后煮沸5min。
2.凝胶的配制注：上表所标体积为配制两块胶的用量。
若配制一块或多块，可按比例减半或加倍。
具体步骤如下：1、样品制备：40 µL蛋白+5*上样缓冲液10 µL，煮沸5 min，冷却后放冰箱下层保存，备用2、制胶1）用专用的医用棉口罩将胶板擦拭干净，电泳槽清洗干净，组装模具。
BIORAD-2DE中文操作说明
目录第一章样品制备 21.1 一般性原则 21.2 样品制备程序 3 1.2.1 培养细胞样品处理方法 31.2.2 组织样品处理方法 31.2.3文献报道较多的裂解液配方 4第二章第一向等电聚焦（IEF） 72.1 IPG胶条的水化和电泳 72.1.1 仪器 72.1.2 试剂 72.1.3 实验步骤 72.2 IPG胶条的平衡 92.2.1 仪器 102.2.2 试剂 102.2.3 实验步骤 10第三章第二向SDS电泳 123.1 垂直SDS-PAGE 123.1.1 溶液 123.1.2 灌胶步骤 123.1.3 电泳步骤 14第四章 2-DE胶蛋白质点的检测 154.1 考马斯亮兰染色 154.1.1 经典的考马斯亮兰染色程序 154.1.2 Neuhoff胶体考染法 154.1.3 热考马斯亮兰染色及二次染色法 164.2 硝酸银染色 16Appendix I Troubleshooting 18 Appendix II Solutions 232DE分析流程：样品制备（Sample preparation）固相pH梯度胶条的水化（IPG strip rehydration）第一向等电聚焦（IEF）第一向胶条的平衡（ IPG strip equilibration）第二向SDS电泳（SDS-PAGE）检测染色（Detection/Staining）第一章样品制备（Sample Preparation）1.1一般性原则：样品制备是双向电泳中最为关键的一步，这一步处理的好坏将直接影响2-DE结果。
目前并没有一个通用的制备方法，尽管处理方法是多种多样，但都遵循几个基本的原则：1）尽可能的提高样品蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的损失；2）减少对蛋白质的人为修饰；3）破坏蛋白质与其他生物大分子的相互作用，并使蛋白质处于完全变性状态。
根据这一原则，样品制备需要四种主要的试剂：离液剂(chaotropes),主要包括尿素（Urea）和硫脲（thiourea）；表面活性剂（sufactants），也称去垢剂，早期常使用NP-40、TritonX-100等非离子去垢剂，近几年较多的改用如CHAPS与Zwittergent系列等双性离子去垢剂；还原剂（reducing agents），最常用的是二硫苏糖醇（DTT），也有用二硫赤藓糖醇（DTE）以及磷酸三丁酯（TBP）等。
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Bio-rad小电泳槽及电泳仪操作规程
一．目的
为规范Bio-rad小电泳槽及电泳仪的基本操作、维护保养、异常处理程序，防止人为操作失误，确保Bio-rad小电泳槽及电泳仪正常运转，特制定本程序。
二．适用范围
本程序适用于Bio-rad小电泳槽及电泳仪。
三．责任
1. 本程序的实施者为Bio-rad小电泳槽及电泳仪操作者，各实验室负责人对
本程序的实施情况进行监督。
2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由Bio-rad小电泳槽及电泳
仪操作者负责。
四．内容
1.灌胶
a、取出灌胶模具，打开封底盘至完全开放的状态，松开两侧螺丝，向外侧打开夹子。
b、取长方形和带凹槽的长玻板各一块，从内到外依次按带凹槽玻板及长方形玻板的顺序排列，形成gel sandwich。
注意正确排列以防漏胶。
c、短玻板朝外将sandwich放入模具中，检测sandwich的底是否紧靠底面。
旋紧螺丝。
将封底盘锁至密闭状态。
d、将模具放在桌面上准备灌胶。
e、根据需要配制一定浓度的胶。
1、分离胶的灌制：用加样枪慢慢将胶加入sandwich中，注意不要有气泡。
其上加0.1%SDS封顶.
2、浓缩胶的灌制：待分离胶凝后弃去SDS，开始灌浓缩胶，最后轻轻插入梳子。
f、待胶聚合后，拔出梳子，用电泳缓冲液清洗加样槽，去除未聚合的胶。
g、
模具放入电泳槽中。
2.电泳
a、加适量的电泳缓冲液
b、准备样品，加样。
c、盖上电泳槽的盖子，注意红色对正极，黑色对负极。
打开电源，开始电泳。
初始电压100V,15分钟后改为120v。
d、直至指示剂距前沿1cm处结束电泳，拔掉电源，小心取出胶，根据需要进行染色或转膜，回收电泳缓冲液（可重复利用3次）。
五．注意事项：
a、每次用完后，立即清洗电泳槽，灌胶模具，玻璃板（先用自来水洗干净，再用蒸馏水冲一遍后放在架子上晾干）。
b、扣紧或打开灌胶模具时要用力均匀，以免压坏玻璃板。
c、盖上电泳槽的盖子时，务必注意正负极不要接反。