裸鼠
裸鼠成瘤实验方法
裸⿏成瘤实验⽅法肿瘤细胞有良性和恶性之分；癌细胞则是恶性，是会扩散的细胞。
肿瘤细胞包含癌细胞，它们共同特点是从基因⽔平上失控的、能⽆限增殖的细胞。
癌细胞有三个显著的基本特征即：不死性、迁移性和失去接触抑制。
常规较容易成瘤的细胞Hep-G2（肝癌），Hep2（喉癌），NCI-H460(⼤细胞肺癌)， SK-OV-3（卵巢癌），MCF-7（乳腺癌）SKBR3， A375/B16-F10（⼈⿊⾊素瘤细胞），SGC7901 ⼈胃肿瘤细胞，CNE（⿐咽癌），H1299（肺癌）， SPC-A-1（肺腺癌）， HT-29/HCT116（结肠癌），BEL-7402（肝癌），MDA-MB-231 乳腺癌， CT26 （⼩⿏结肠癌细胞），U87 （⼈胶质瘤细胞）， MGC-803（⼈胃癌细胞），PC-3 （⼈前列腺癌细胞）。
裸⿏的选择实验室常⽤的是BALB/c-nu裸⼩⿏ ,随着裸⼩⿏年龄增长或有关因素的影响(如病毒感染),裸⿏体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验⼀般采⽤4--6周龄的裸⿏。
裸⿏成瘤实验技巧1、细胞的状态是成瘤实验的关键，所以细胞⽣长状态⼀定要好，取处于对数⽣长期的细胞，细胞达80-90%左右密度为宜。
收集细胞前⼀天晚上更换新鲜培养基。
2、胰酶消化细胞后⽤预冷的PBS洗两遍，⽬的为去除细胞中残余的⾎清。
3、⽤PBS或者⽆⾎清培养基吹打细胞沉淀⾄合适的浓度，⼀般⽪下瘤接种的细胞量为1-5×10^6个细胞/⽀，接种体积为0.1-0.2ml，因此细胞悬液的浓度为1-5×10^7个细胞/ml，如若有条件的实验室，也可以加基质胶以加速瘤块的⽣成，基质胶与PBS或⽆⾎清的⽐列为1:1。
4、细胞消化后应尽快接种到裸⿏⽪下，⼀般尽量在半⼩时内完成（如果接种量⼤，可以分批接种），途中将细胞悬液放在冰上降低细胞的代谢以保持细胞的活性。
5、选择的裸⿏⼀般在4-6周龄，体重16-18g左右，种植部位选择⾎供丰富区域，如腋窝中后部。
裸鼠
页码，4/15巴性白血病 1 非洲淋巴细胞癌 1 人体肿瘤移植于免疫缺陷动物，能保持其生物学特性，用于研究人体肿瘤对药物的敏感性有很大帮助。早期 工作是将人体肿瘤移植于动物缺乏免疫机能的特殊部位，如鸡胚、动物的眼前房，仓鼠颊囊内等，虽有一定比例 的成活率，但因肿瘤生长缓慢又受移入部位包膜的限制，肿块往往较小，难于传代，更不能适应需要较多瘤 帮助
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无胸腺裸鼠
编辑词条
百科名片
裸鼠
无胸腺裸鼠（Nude，简称裸鼠）目前已成为医学生物学研究领域中不可缺少的实验动物模 型。特别是在肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等实验方 面，它有着特殊的价值。裸鼠在科学研究中所以能成为有巨大潜力的试验模型，是由于nu基 因有独特的遗传特性。经过世界各国实验动物遗传育种学家的努力，目前已将nu基因导入不 同近交系动物，成为系列动物模型，仅小鼠模型一种，已建立了二十余种近交系裸鼠。由于 它们具有不同的遗传背景和nu基因的遗传特性，使医学生物学研究者获得一种极其宝贵的试 验材料。
裸鼠的饲料和繁殖要求条件比较严格，我国已有这方面的经验报导。国外一些国家经过一段时间的摸索，196 9年里加德（Rygaard）和Ffiis报告采用无特定病原体（简称SPF）级定义裸鼠级别。饲养条件为屏障系统或隔离 系统，但也发生传染性疾病。近十年来，许多国家建立了自己的有封闭屏障系统的饲料设施以及相应的质量控制 办法，进一步促进了裸鼠研究工作的迅速发展。1978年根据英国LAc News的报告，除用“nu”基因导入近交小 鼠的方法成功地培育成千余种遗传背景明确的裸鼠外，还培育了无胸腺肥胖裸鼠，无胸腺无脾脏裸鼠以及裸体大 鼠等，预计不久的将来，根据不同的实验需要，将会培育出更多的无胸腺杂交品系。目前，已成立了国际性专门 组织一国际裸鼠管理及应用委员会，并分别在1973年、1976年1979年召开了三次裸鼠会议。我国实验动物工作者 过去在小鼠的大量繁殖中也曾发现过无毛小鼠，但未进行研究。最近三、四年来，由于科研工作的需要从国外引 起了裸鼠。1978～1980年间，中国医学科学院所属单位曾先后从法国、英国、美国获得裸鼠。北京卫生部药品生 物制品检定所在1980年从日本引进裸鼠鼠种进行了繁殖，饲料在屏障室内，经过16个月的饲料，繁殖正常，并已 提供给科研工作使用。
不同裸鼠品系的特征
BALB/c Nude
专业名称：CAnN.Cg-Foxn1nu
/CrlVr
近交系（Inbred Mice ） 毛色：无毛，白化背景 特性和用途：
生长发育不良，繁殖力低下，易发生严重感染 胸腺缺失，为第11对染色体隐性遗传 由于无胸腺，仅有胸腺残迹或异常上皮 不能使T 细胞正常分化，故T 细胞免疫缺陷
B 淋巴细胞正常，但功能缺陷，抗体主要为IgM ，只有少量IgG
无接触敏感性，无移植排斥反应，因此可广泛用于免疫学、肿瘤学和疾病发生机理的研究
生长体重标线
CD-1 Nude
专业名称：Vr:CD1-Foxn1nu
封闭群（Outbred Mice）毛色：无毛，白化背景
特性和用途：
胸腺缺失，T细胞免疫缺陷
可用于免疫学、肿瘤学等方面的研究
由于是封闭群动物，有较好的生长繁殖能力
机体抵抗力较强，更利于长期及慢性实验
生长体重标线
NU/NU
专业名称：Vr:NU-Foxn1
nu
封闭群（Outbred Mice ） 毛色：无毛，白化背景 特性和用途：
通常NU/NU 与CD-1®
Nude 小鼠表现相同 胸腺缺失，T 细胞免疫缺陷
可用于免疫学、肿瘤学等方面的研究
生长繁殖能力强，机体抵抗力强，更利于长期及慢性实验
价 格
生长体重标线。
裸鼠成瘤实验安全操作及保养规程
裸鼠成瘤实验安全操作及保养规程引言近年来，裸鼠成瘤实验逐渐成为一种常见的实验手段，被广泛应用于生物医学领域的基础、药物研究。
然而，由于实验过程中需要使用大量的化学试剂和高度精密的操作，所以如果在实验操作过程中未能注意安全问题，会带来诸多安全隐患。
因此，为了确保实验的顺利进行，有效避免实验操作中出现意外情况，本文将针对裸鼠成瘤实验，列出相应的安全操作及保养规程。
裸鼠成瘤实验前的准备工作在进行裸鼠成瘤实验时，需要提前准备充足的实验器材和生化试剂，同时也需要对实验室的环境进行合理的调整。
下面列出相应的注意事项：1.实验室环境要求实验室环境需保持干净整洁，避免有任何因素干扰实验的进行。
库房要求干燥、通风，实验区不得放置一切与实验无关的器械、试剂或物品，以确保实验室内部的清洁程度，并保持实验设备的灭菌。
2.实验器材和试剂的准备裸鼠成瘤实验器材需保证正常功能，严格按照使用说明使用，并对每种器材进行标注。
在实验前，应对涉及到的试剂进行检查，确保其没有已失效或污染，充分消毒。
对于不同类型的裸鼠成瘤实验所需要的各种器材和试剂的使用方法进行预见性的了解，将可在实验操作之前大幅降低因操作不当而产生的误差和成本。
3.人员准备实行裸鼠成瘤实验的操作人员应具有科学背景，拥有必要的实验技能和实验安全意识。
在实验操作之前，必须全面了解实验流程及实验器材的使用，以及实验操作过程中所需要的基本操作技能并保证其全面掌握。
裸鼠成瘤实验中的关键操作技能为了确保裸鼠成瘤实验的成功，降低实验操作中产生的偏差，必须合理掌握实验中的关键操作技能。
下面分别介绍实验中的几个关键操作技能：1.裸鼠的饲养和保养保证裸鼠进食和饮水的质量和数量，确保空气清洁，为其提供足够的光源和温度环境，定期检查和清理它们的笼子和环境等都是保证裸鼠安全、健康和成瘤的关键操作技能。
2.药物的制备及添加药物的选择要合理，必须进行初步检测。
准确制备药物，严格按照说明书添加化学试剂，安全量。
在无特定病原体环境条件下,裸鼠能存活22个月,
第九节皮肤病学研究中实验动物的选择与应用一、无胸腺裸鼠的选择与应用（一）麻风病研究裸鼠对麻风杆菌具有高度易感性，1975年发现麻风杆菌接种于裸鼠足垫后能大量繁殖，并扩散至全身，引起瘤型麻风。
以往麻风杆菌只有在背上长够九条纹的犰狳身上才能生长，而这种产于南美等地的动物难于寻找，也不易饲养和操作。
现在可以在裸鼠身上接种麻风杆菌，并且生长良好，这样就给研究麻风病提供了十分有利的条件。
在无特定病原体环境条件下，裸鼠能存活22个月，在这期间制作模型足以为实验室提供研究活动。
有人证实大约在100到280天麻风杆菌就可播散至肝和脾，到565天，除脑之外所有器官都有瘤型浸润、足垫内含菌量高达109。
尽管体温很高，在内脏内还是有明显的细菌增殖，甚至在肝的实质细胞、肾和其它组织中也有。
病理组织学检查结果类似人的瘤型麻风感染，这为研究麻风杆菌生理学特性、免疫原性和麻风病发病机理提供了极为有用的实验模型。
裸鼠的感染能传代，有再现性，在裸鼠的足垫内接种麻风杆菌，并分别一次给0.5mg和每二周0.2mg利福平，结果类似于人一次服利福平的1500mg或者每天给600mg共二周那样的效果。
从每天用利福平治疗的病人那里取来麻风杆菌接种裸鼠，结果表明仅在服用利福平450mg2天以后细菌即丧失其感染力。
异烟肼、二甲胺四环素、氯洁酶素对裸鼠体内麻风杆菌无致死作用。
氨苯矾对裸鼠中生长的麻风杆菌起抑制作用或抑菌作用。
这些结果提示，裸鼠作为麻风化疗研究的模型有着重大的价值。
（二）皮肤移植研究裸鼠能接受异种组织移植，包括正常的和牛皮癣皮肤。
1973年Manning等在BALB/C裸鼠身上建立了人的全层包皮及其他种类的皮肤移植后能终身耐受的实验。
1974年Rygarrd 报告，将人的皮肤和其他种类皮肤移植到BALB/C/A/BOMF裸鼠得到成功。
移植人的皮肤在6～10天期间有再生血管形成的迹象。
1981年Haftek等在BALB/C裸鼠身上建立了累及牛皮癣皮肤植片的40%保持牛皮癣预期杆状变（指、趾）和典型的棘皮症。
裸鼠顺铂方案
裸鼠顺铂方案背景裸鼠（Nude mice）是一种严重免疫缺陷的实验动物模型，常被用于进行肿瘤药物研究。
顺铂（Cisplatin）是一种常用的抗肿瘤药物，已被广泛应用于临床治疗。
本方案旨在探索裸鼠体内给予顺铂的最佳方案，以便在裸鼠模型中更好地评估该药物的抗肿瘤效果。
实验目的1.确定裸鼠对顺铂的最佳耐受剂量2.评估裸鼠给予顺铂后的肿瘤生长抑制效果3.探索顺铂在裸鼠体内的药代动力学特征实验设计1. 动物模型建立根据实验需要，选取裸鼠作为动物模型。
裸鼠的肿瘤模型可以通过多种方式建立，例如移植裸鼠体内的肿瘤细胞株。
在实验开始前，确保裸鼠没有任何感染和疾病。
2. 药物制备从可靠的药物供应商购买顺铂，并按照制造商的说明书制备药物溶液。
确保药物的浓度准确无误。
3. 药物给药方案根据实验目的和文献报道，设计以下不同给药方案：1.单次给药：给予裸鼠一次性的顺铂剂量，观察短期内的药物效应。
2.多次给药：将顺铂剂量分为多次给药，观察长期的药物效应。
3.不同给药时间间隔：给予裸鼠不同时间间隔下的顺铂剂量，以模拟临床应用中的间歇治疗。
4. 实验组设置根据实验设计，将裸鼠分为不同的实验组，每个组内包括适量的动物数量。
每个实验组按照给药方案进行接受顺铂给药。
5. 肿瘤生长抑制效果评估定期检测和记录各实验组裸鼠的肿瘤大小和体重变化。
常用的评估指标包括肿瘤体积、肿瘤抑制率和生存期延长。
6. 药代动力学研究收集不同时间点的裸鼠血液样本，并经过适当的处理，使用高效液相色谱法（HPLC）或其他适当的技术分析顺铂在血浆中的浓度变化。
在药代动力学研究中，可以计算药物的半衰期、清除率等参数，以更好地了解顺铂在裸鼠体内的代谢和消除特征。
结论通过以上的实验设计，我们可以评估裸鼠对顺铂的耐受性、顺铂的抑制肿瘤生长效果以及顺铂在裸鼠体内的药代动力学特征。
这些结果将有助于进一步的药物研发和临床应用中的优化治疗方案。
需要注意的是，裸鼠模型作为实验动物模型，虽然在一定程度上可以反映人体肿瘤的生长和治疗情况，但仍然存在一定的局限性。
裸鼠成瘤实验-超详细资料
裸鼠成瘤实验-超详细资料裸鼠成瘤实验总结-超详细资料接种量接种部位接种部位:腋窝中部外侧皮下为好。
皮下肿瘤模型中，想要成瘤率高就接种在腋下。
接种时由裸鼠体侧腰部稍靠上的部位进针，要保证与接种点的距离小于针头的长度，向头部方穿行，绝对不能刺破皮肤或者刺破肌肉层，当针头到达接种位点时注射，退出针头，这样操作的目的并不完全是避免漏液，其实熟练后，不需要皮下穿行也不会漏液，主要是避免污染，进针点还有少量污染的可能性的，针头在皮下穿行一段后，接种点离进针点较远，最大限度减少污染的可能。
如果是用于正式实验，那么一只老鼠就只能接种一个位点，不可以接种多个位点用于保证可用的模型数。
因为在有些情况下，一个老鼠身上有多于一个肿瘤的情况下，会有相互影响的可能，无论这几个肿瘤相距有多远。
要是想多打几个部位做做预试验，倒也不是不可以，但是我觉得，基本上没有什么必要。
皮肤不用绷得太紧，平展就可以了，另外接种的时分进针点很靠下，针头在皮下走一段再注射，速度不要太快。
注射前针头稍微动一动，能动就申明在皮下，不然大概在皮内或者肌肉内。
普通来说都是有鼓包的但是要是你接种位置太深入腋窝，你是看不到鼓包的。
主要靠针头稍微动一动来判断。
是否应用免疫抑制剂裸鼠皮下种瘤后，可以通过应用免疫抑制剂，比如环磷酰胺（2mg每只，打两天）来加速瘤体的生长，当然我知道裸鼠是T免疫缺陷动物，但是人家说的CTX可以进一步抑制裸鼠的体液免疫和NK细胞杀伤的保护作用，可以加快瘤子的生长，这样造模的周期很短，也可以进行人为的控制，不知道这个观点是不是有道理，实践中是不是真有人这么做呢？楼上说的文献中也有报道，而且还有预先用放射照射抑制动物免疫功能再接种的方法，但是一般常规应用中大多数时候不推荐这么做。
另外还有一个问题应该被考虑到，大家现在都在琢磨着怎么让肿瘤出瘤的更快，造模周期更短，但是如果人为的把肿瘤生长加速，其实对实验并不好。
因为造模周期短，很可能生长速度也会被加快，肿瘤可能很快就溃烂了，这样就不得不被迫中止实验，而用药却没有用到足够的时间，药效还没有发挥出来就结束了，这样是很不利的。
裸鼠的分类
（一）基本概念无胸腺裸鼠（Nude，简称裸鼠）目前已成为医学生物学研究领域中不可缺少的实验动物模型。
特别是在肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等实验方面，它有着特殊的价值。
裸鼠在科学研究中所以能成为有巨大潜力的试验模型，是由于nu基因有独特的遗传特性。
经过世界各国实验动物遗传育种学家的努力，目前已将nu基因导入不同近交系动物，成为系列动物模型，仅小鼠模型一种，已建立了二十余种近交系裸鼠。
由于它们具有不同的遗传背景和nu基因的遗传特性，使医学生物学研究者获得一种极其宝贵的试验材料。
裸鼠是随着近代医学发展，特别是肿瘤学和免疫学研究的需要，在近十几年中发展起来的动物模型。
它是先天性胸腺缺陷的突变小鼠，是由于第Ⅶ连锁群（Linkage group）内裸体位点的等位基因发生纯合而形成的突变小鼠新品种。
裸鼠（纯合子nu/nu突变鼠）主要表现为无毛（但可看到一种细毛组织学证明有被毛滤泡）以及缺乏正常胸腺。
杂合子小鼠（nn/+）各方面表现都正常。
小鼠中有若干突变基因，它可产生一种为无毛的表现型（phenotype），例如无胸腺裸鼠（Nude、）裸鼠（Naked）、无毛鼠（Hairless）、无鼻毛鼠（Rhinol），不要把这些突变鼠基因相互混淆。
裸鼠的唯一特性是胸腺缺陷表现型，因此，不能将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。
现代免疫学的发展，指示了胸腺为中枢性免疫器官，揭示了胸腺和胸腺依赖淋巴细胞（T细胞）的功能，这是免疫学的重大突破，开创了细胞免疫的新途径。
无胸腺裸体鼠是研究胸腺功能最适宜的天然动物模型，它的发现和应用，大大促进了实验免疫学研究的发展。
（二）裸鼠的发现和发展情况1962年英国格拉斯哥医院Grist在非近交系的小鼠中偶然发现有个别无毛小鼠。
四年后，爱丁堡动物研究所沸拉那根（Flanagan）又证实这种无毛小鼠是由于染色体上等位基因突变引起的，发现该种鼠皮肤组织学和以往无毛小鼠不同，检查发现，常因染色体退化，有一种新的无毛基因，因此，认为是一种新的自发突变种，并命名为“裸体”（Nude）小鼠，用“nu”表示为基因符号，但当时未被人们注意。
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裸鼠百科内容来自于：
：1962年英国格拉斯医院Grist 在非近交的小鼠中偶然发现有个别无毛小鼠，后来证实是由于基因突变造成的并伴有先天性胸腺发育不良，称为裸小鼠(nude mice)，用“nu”表示裸基因符号。
裸鼠简介T淋巴细胞功能缺陷的动物有裸小鼠(基因符号nu)和裸大鼠(基因符号rnu)利用育种技术已将裸基因nu或rnu导入其它品系动物，作为背景品系可以是近交系也可以是封闭群，目前nu基因已导入的近交系有数个以上。
rnu基因导入的大鼠品系也有10余种。
我国使用较多的裸鼠品系BALB/c-nu、NC-nu、Swiss-nu、NIH-nu。
1980年和1982年中国药品生物制品检定所分别从瑞士和日本引进裸小鼠，上海中山医院肝癌研究所1983年从美国引进了裸大鼠Rowett。
裸小鼠
(一)概念及命名：1962年英国格拉斯医院Grist 在非近交的小鼠中偶然发现有个别无毛小鼠，后来证实是由于基因突变造成的并伴有先天性胸腺发育不良，称为裸小鼠(nude mice)，用“nu”表示裸基因符号。
裸小鼠是由于染色体上等位基因(第11对染色体上)突变引起的，已失去正常胸腺，原胸腺残留结构部分上皮样细胞呈巢状排列而部分呈外分泌腺结构。
裸鼠淋巴结胸腺依赖区的淋巴细胞消失，外周血中淋巴细胞数目减少。
1969年丹麦Rygaard首先将人类结肠腺癌移植裸小鼠成功，为免疫缺陷动物研究和应用开创
裸鼠
了新局面。
(二)特性：裸小鼠的主要特征表现为无毛(hair less)和无胸腺(athymus)。
随着鼠龄增加皮肤变薄、头颈部皮皱褶、发育迟缓。
由于无胸腺,仅有胸腺残迹或异常上皮,这种上皮不能使T细胞正常分化，缺乏成熟T细胞的辅助、抑制及杀伤功能，因而细胞免疫力低下。
裸小鼠B淋巴细胞正常，但功能欠正常，免疫球蛋白主要是IgM,只含少量IgG。
裸鼠由于T淋巴细胞缺陷，不能执行正常T淋巴细胞功能，在混合淋巴细胞反应中全无有丝分裂反应，也不产生细胞毒效应细胞，对刀豆A或植物凝集素亦无有丝分裂应答,无接触敏感性，无移植排斥，成年裸小鼠(6－8周龄)较普通鼠有较高水平的NK细胞活性，但幼鼠(3－4周龄)的NK细胞活性低下。
裸小鼠粒细胞比普通小鼠数量少。
由于背景品系不同，不同品系的裸鼠往往具有不同的生物学特征。
必须指出，随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响
(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验一般采用4￣8周小鼠。
(三)繁殖：裸小鼠抵抗力差，易患病毒性肝炎和肺炎，因而饲养和繁殖要求条件比较严格，在SPF环境下可生存，所用的笼具、垫料、饲料、饮水等都要求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养，以保证长期存活并进行繁殖。
由于纯合型雌裸小鼠nu/nu 受孕率低，乳腺发育不良且有食仔的习惯，因此生产上一般采用纯合型雄鼠与杂合型雌鼠交配(♂nu/nu×♀nu/＋)可获1/2纯合型仔代。
裸大鼠
(一)概念及命名：裸大鼠由英国Rowett研究所在1953年发现，基因符号为rnu，属染色体隐性遗传。
裸大鼠免疫器官的组织学与裸小鼠极为相似。
3 周龄裸大鼠纵膈的连续切片中，只见胸腺残体，未见淋巴细胞，淋巴结副皮质区实际上无淋巴细胞。
T 细胞功能丧失。
(二)特征：裸大鼠的一般特征似裸小鼠，但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无毛，头部及四肢毛更多，繁殖方法与裸小鼠相同。
裸大鼠易患呼吸道疾病( 溃疡性气管支气管炎及化脓性支气管肺炎，病因可能与仙台病毒感染有关)。
裸大鼠的发现及人癌异种移植成功，给肿瘤免疫研究增添一个新的手段。
以裸大鼠代替裸小鼠，具有移植肿瘤大，取血量多，可行某些外科小手术等优点。
因此比裸小鼠有一定优越性，其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高。