浓缩血小板的制备及临床应用
浓缩血小板的制备及临床应用
【摘要】随着现代医学科学技术的迅速发展，使现代输血法进入了成分输血的新时代。成分输血能够提高临床输血疗效，减少输血不良反应，并且还可以使血液综合利用，因此，它被视为临床输血中的一大重要进展。当今，成分输血成为临床治疗中一种新的特殊方法。其中，浓缩血小板可为骨髓移植病人提供血液保障，使他们能够安全度过骨髓抑制期，为骨髓移植的成功提供了保证。
【关键词】血小板的制备；临床应用
制备浓缩血小板的技术目前主要有手工分离法和自动化的机器分离法。前者需要多个供血者才能达到一个治疗量，后者只需要一个供血者即可达到治疗量，并且产品纯度高，质量好超浓缩，治疗效果好，最大限度地减少了肝炎、梅毒、艾滋病等血液传染病的传播。我们利用美国BAXTER公司CS3000PLUS的血细胞分离机采集血小板10袋，与手工采集血小板对比，其特点总结见下表。
附表采集血小板方法比较
1 制备方法
应用美国BAXTER公司生产的CS3000 PLUS血细胞分离机，选择程序：①分离夹TNS-6; ②产品收集夹A-35; ③抗凝剂ACD-A; ④采用双臂式循环采血，分别穿刺双肘正中静脉，一侧采血，一侧回输; ⑤采用1次性全密闭式分离管道，采集过程中献血员血容量始终保持平衡;⑥全血与抗凝剂之比为9～11:1，离心速度为1600rpm,产品容量为190ML，血小板计数可达3.0～5.0×1011个。
浓缩血小板采集后，可以立即输注，也可以保存5天，保存时需放在22°C 振荡器上，保存期末PH值顺大于6.0。
2 质量标准
浓缩血小板的质量与供血者密切相关。选择供血者，除了要符合国家卫生部献血员体检标准外，还要求献血员血小板计数为1.5×1011/L以上，且供血者前1周不得服用阿司匹林、消炎药、保太松、布洛芬、潘生丁及抗过敏药物。以避免血小板功能遭到抑制，造成受血者输注无效。供血者前一天避免进食高脂肪食物，以防出现脂肪血。
3 采集过程
血小板在采集过程中，供血者血小板计数越高，产量也高;采集时间长，处理全血量多，产量亦高，血流速度增加至≥50min时，产量也有所增高。机采的每份浓缩血小板应采取作PH测定，血小板计数，白细胞，红细胞计数，以保证
浓缩血小板的制备及临床应用
浓缩血小板的制备及临床应用 【摘要】随着现代医学科学技术的迅速发展，使现代输血法进入了成分输血的新时代。成分输血能够提高临床输血疗效，减少输血不良反应，并且还可以使血液综合利用，因此，它被视为临床输血中的一大重要进展。当今，成分输血成为临床治疗中一种新的特殊方法。其中，浓缩血小板可为骨髓移植病人提供血液保障，使他们能够安全度过骨髓抑制期，为骨髓移植的成功提供了保证。 【关键词】血小板的制备；临床应用 制备浓缩血小板的技术目前主要有手工分离法和自动化的机器分离法。前者需要多个供血者才能达到一个治疗量，后者只需要一个供血者即可达到治疗量，并且产品纯度高，质量好超浓缩，治疗效果好，最大限度地减少了肝炎、梅毒、艾滋病等血液传染病的传播。我们利用美国BAXTER公司CS3000PLUS的血细胞分离机采集血小板10袋，与手工采集血小板对比，其特点总结见下表。 附表采集血小板方法比较 1 制备方法 应用美国BAXTER公司生产的CS3000 PLUS血细胞分离机，选择程序：①分离夹TNS-6; ②产品收集夹A-35; ③抗凝剂ACD-A; ④采用双臂式循环采血，分别穿刺双肘正中静脉，一侧采血，一侧回输; ⑤采用1次性全密闭式分离管道，采集过程中献血员血容量始终保持平衡;⑥全血与抗凝剂之比为9～11:1，离心速度为1600rpm,产品容量为190ML，血小板计数可达3.0～5.0×1011个。 浓缩血小板采集后，可以立即输注，也可以保存5天，保存时需放在22°C 振荡器上，保存期末PH值顺大于6.0。 2 质量标准 浓缩血小板的质量与供血者密切相关。选择供血者，除了要符合国家卫生部献血员体检标准外，还要求献血员血小板计数为1.5×1011/L以上，且供血者前1周不得服用阿司匹林、消炎药、保太松、布洛芬、潘生丁及抗过敏药物。以避免血小板功能遭到抑制，造成受血者输注无效。供血者前一天避免进食高脂肪食物，以防出现脂肪血。 3 采集过程 血小板在采集过程中，供血者血小板计数越高，产量也高;采集时间长，处理全血量多，产量亦高，血流速度增加至≥50min时，产量也有所增高。机采的每份浓缩血小板应采取作PH测定，血小板计数，白细胞，红细胞计数，以保证
浓缩血小板悬液的三种制备方法比较
浓缩血小板悬液的三种制备方法比较 作者：杨世明张勇萍杨枨林费红毅【关键词】制备方法关键词:制备方法;检测比较;血小板悬液0引言浓缩血小板悬液（PC）在白血病、再障等血小板减少的出血及外科手术中均有显著的止血作用，而PC中血小板数量的多少和质量的高低又是影响临床输注效果的重要因素.为探讨PC的最佳制备方法和条件，我们对二次离心法、白膜回浆法和机器单采法三种方法制备的PC细胞参数进行了检测比较. 1材料和方法 1.1供血者选择按国家卫生部规定标准，对献血员进行体格检查和ALT，HA V，HBV，HCV，HIV及RPR等化验检测均合格，5d内未服阿斯匹林等影响血小板功能的药物，静脉血管良好，血小板计数在150×109・L-1以上者. 1.2器材设备图门产LSG-04R型大容量低温离心机，超净台，分浆夹，F-800型血细胞分析仪（日本产），CPD保养液三联血袋，规格为400mL. 1.3制备方法①二次离心法:采集全血400mL按文献［1］规程进行分离制备;②白膜回浆法:采集与受血者ABO血型相同的全血400mL，置低温离心机，在22℃以3500r・min-1离心10min，在超净台内分出血浆至1号袋，保留80～100mL血浆，白膜层分至2号袋，静置30～40min后，在22℃以1400r・min-1离心6min后，将白膜层以上部分分出约60mL呈浑浊状的血浆，即为白膜回浆法制备的1U 浓缩血小板悬液;③机器单采法:由西安市中心血站制备. 1.4检测方法及指标血小板、红细胞、白细胞计数，均用F-800型血细胞分析仪进行测定.血小板回收率=（PC中血小板数/制备前血小板总数）×100%;PC中血小板数=血小板计数/L÷1000×容量（mL）. 2结果用F-800型血细胞分析仪，对三种不同方法制备的浓缩血小板悬液细胞参数检测，结果见表1. 表1三种方法制备浓缩血小板悬液的检测结果（略）3讨论二次离心法制备浓缩血小板悬液的优点是简单易行，缺点是PC中血小板数量少，而WBC含量较多.PC中混入过多的WBC不利于血小板的贮存，另外血小板的贮存质量也与制备过程中血小板的损伤程度有关.PC中混入过多的WBC可使患者产生白细胞凝集素或HLA抗体而影响输注效果，一般认为PC中WBC<106才能有效地防止同种免疫，本文二次离心法制备的PC中WBC计数达6.98×109・L-1，输注后仍有产生免疫的可能. 机器单采法制备血小板的优点是能够获得高质量的血小板制品，可从单个供体采集到浓度高、纯度好、体积小、无聚集的8～10个单位的血小板制品［2］，但由于其设备昂贵，在基础医院目前还难以普及.近年来已采用白膜回浆法制备PC，该法的优点是简便易行，血小板获得量较多，制备过程中血小
血小板功能检测及其临床应用
血小板功能检测及其临床应用 【关键词】血小板; 功能检测; 临床应用 血小板检测方法可归纳为出血、血栓和药物监测3大类。虽则有些方法能应用于多种检测 目的，但为特殊目的而创建的方法亦有重要价值。故在检测时应合理地运用。 1 出血性疾病监测中的应用 血小板的基本功能是黏附、聚集、分泌、促凝血、血块回缩。通过这些功能维持着正常人体的初期止血作用。由于这些功能异常而导致的出血疾病包括遗传性和获得性两类，在有些疾病同时会有血小板功能异常和数量减少。 1.1 遗传性血小板功能异常疾病 ①黏附受体蛋白异常：GPIb Ⅴ Ⅸ(BSS,血小板型vWD,Bolin Jamieson 综合征)、GPⅡb/Ⅲa(血小板无力症)、GPⅠa/Ⅱa、GPⅥ、GPⅣ。 ②可溶性激动剂受体异常:TXA2受体,P2Y12受体、α2 肾上腺素能受体。 ③血小板颗粒异常:δ 颗粒(δ 贮存池缺陷、Hermansky Pudlak综合征等)、α 颗粒(灰色血小板综合征，Quebec血小板病等)。 ④信号传递途径异常:TXA2途径异常、Ca离子流动异常、Gαq缺陷、GSα高反应、PLC pleckstrin磷酰化缺陷。 ⑤膜磷脂异常:Scott综合征、Stormorken综合征。 ⑥其他异常:原发性释放异常、Montreal综合征、Ehlers Danlos综合征、 May Hegglin综合征等 1.2 遗传性血小板数量减少疾病 ①体积减小：Wiskott Aldrich综合征、性联血小板减少症。 ②体积正常：家族性血小板病、先天性无巨核细胞性血小板减少症。 ③体积增大：巨大血小板综合征、血小板型vWD、May Haegglin异常、灰色血小板综合征、Montreal血小板综合征。 1.3 获得性血小板功能异常这种异常十分常见，可由下列不同原因引起：①药物、食物和维生素;②慢性肾衰;③体外循环;④骨髓增生异常疾病;⑤抗血小板抗体等。 血小板功能缺陷检测的方法包括：①血细胞分析仪在测定血小板数量及外形大小中应用;②血小板功能:出血时间(血小板功能分析仪，(FPA 100R)、黏附性测定、聚集功能测定、释放功能测定(致密颗粒：5 HT、ADP、ATP、δ 颗粒缺陷 Hermansky Pudlak 综合征、Chediak Hygashi 综合征(荧光法)、α 颗粒：TF4、β TG(α 颗粒缺陷 灰色血小板综合征、Quebec 血小板病、Jacobsen或Paris Trousseau 综合征)(ELISA法，试剂盒),PF3有效性; Ca2+释放与内流,、血栓烷形成、cAMP、GAMP;血块回缩;③膜受体分
血小板输注指南
尽管此指南中的建议和相关信息在印刷出版时被认为是真实准确的，但是不论作者或发行机构都对任何可能的错误或遗漏没有任何法律责任或义务。 1. 方法 经使用合适的关键词在数据库中进行文献检索，并对现有的专家组出版的指南（BCSH1992；Schfffer 等，2001）包括由英国血液学标准委员会在 MedLiny（联机医学文献分析和检索系统）和其（BCSH）之前出版的血小板输注指南和标准委员会的建议（国立卫生研究院标准委员会，1987；血小板输注标准会议，1998）进行了回顾性研究后，在基于以上文献检索、回顾性研究的结果和作者多年的血小板输注经验，起草了本指南。 血小板输注指征部分系作者与 BCSH 的临床血液学特别委员会合作起草。本指南作者来自血小板输注治疗有关的各个专业，包括临床和实验血液学、儿科、外科、麻醉和危重监护以及护理。 2. 证据的分级和建议的力度 在本标准中使用的证据类型的定义和推荐的分等源于美国卫生保健政策和研究署。 3. 背景 在过去的 40 年中，血小板输注治疗取得了明显的进展，但是在某些方面仍有争议，例如对预防性血小板输注。美国（国立卫生研究院标准委员会，1987；Schfffer，2001）和英国（BCSH，1992；血小板输注标准委员会，1998）付出了许多努力以期在血小板输注治疗的各方面，包括临床指征达成一致。 尽管目前许多随机对照研究在本领域已经产生了有用的信息，但是由于缺少客观资料，基于客观证据的举荐受到了限制。 血小板的输注持续增长，和去年相比，英国 2001-02 年度医院对浓缩血小板的需求（共 215，050 成人剂量）增长了 2.3%。浓缩血小板十分昂贵，其采集、制备、贮存和使用的发展仍以提高临床效果和减少副作用为目的。 本指南的目的是对医院中负责处方、使用和提供血小板输注的医疗、护理和技术人员给予血小板输注方面的指导。献血员的选择和浓缩血小板的制备在英国输血服务机构指南（英国输血服务机构 / 国立生物标准和控制研究院，2001）中已描述，不在本文中详细说明。 4. 浓缩血小板的制备 4.1 方法 在英国，浓缩血小板根据批准的指南（英国输血服务机构 / 国立生物标准和控制研究院，2001）采用提取白膜法从全血中制备或用血小板单采术制备。必须符合献血员筛选的标准和强制性的微生物检测的要求。 白膜法制备的混合浓缩血小板来自于四个供者的全血。采血后 8 小时内重离心全血，使血小板位于红细胞和血浆交界面的白膜层上。白膜层用系统分离，使其重新悬浮在血浆或血小板悬浮介质（PSM）中。然后进行第二步轻离心，使血小板仍悬浮在液体中，其下层为红细胞和白细胞浓集。接下来的混合步骤在采血后的 24 小时内完成，去白细胞是通过符合标准的方法过滤完成。 单个献血员机采浓缩血小板可采用不同的机采系统用不同的方案收集。血小板得率可能不同，每一个制备过程或方案必须经过充分验证，用文件记载并设置相应的规范。每一个单采过程可能得到 1 到 3 个治疗剂量，并可根据血小板计数分成 2-3 袋。可能需要使用一些附加的过滤系统滤除白细胞。
【CN109876214A】一种混合浓缩血小板的制备方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910262799.4 (22)申请日 2019.04.02 (71)申请人 西安市中心血站（陕西省血液中心） 地址 710000 陕西省西安市雁塔区朱雀大 街407号 (72)发明人 张雅莉 (74)专利代理机构 北京众达德权知识产权代理 有限公司 11570 代理人 刘杰 (51)Int.Cl. A61M 1/02(2006.01) A61K 35/19(2015.01) (54)发明名称一种混合浓缩血小板的制备方法(57)摘要本发明公开了一种混合浓缩血小板的制备方法，属于医学输血技术领域，通过获得采集到的第一预设容量的全血；根据第一预设条件，采用离心机对所述全血进行离心；采用血液成分分离机对离心后的所述全血中的血浆层，按照贫血小板血浆层和富血小板血浆层进行分离；采用所述血液成分分离机对离心后的所述全血中的白膜层进行分离；采用所述血液成分分离机将所述富血小板血浆转移至白膜层袋中，并获得富血小板的白膜；将所述富血小板的白膜置于预设温度下储存；重复上述步骤，获得多份同血型的所述富血小板的白膜；在第二预设条件下，离心之后，获得浓缩血小板，并同血型汇集至血小板贮存血袋中，获得混合浓缩血小板。达到了混合浓缩血小板容量低，血小板计数能满足使用要求，节约 血液资源的技术效果。权利要求书1页 说明书5页 附图1页CN 109876214 A 2019.06.14 C N 109876214 A
权 利 要 求 书1/1页CN 109876214 A 1.一种混合浓缩血小板的制备方法，其特征在于，包括： 步骤1：获得采集到的第一预设容量的全血； 步骤2：根据第一预设条件，采用离心机对所述全血进行离心，其中，离心分层后的所述全血包括血浆层、白膜层和红细胞层； 步骤3：采用血液成分分离机对离心后的所述全血中的血浆层，按照贫血小板血浆层和富血小板血浆层进行分离； 步骤4：采用所述血液成分分离机对离心后的所述全血中的白膜层进行分离； 步骤5：采用所述血液成分分离机将所述富血小板血浆转移至白膜层袋中，并获得富血小板的白膜； 步骤6：将所述富血小板的白膜置于预设温度下储存； 步骤7：重复上述步骤1-6，获得多份同血型的所述富血小板的白膜； 步骤8：在第二预设条件下，利用离心机离心之后，获得浓缩血小板，并汇集至血小板贮存血袋中，获得混合浓缩血小板。 2.如权利要求1所述的混合浓缩血小板的制备方法，其特征在于，还包括： 当所述血液成分分离机中的光感器探测到所述白膜层后，降低分离速度，将所述血浆层中的血浆继续分离第二预设容量至贫血小板血浆袋之后，关闭贫血小板血浆袋管； 将所述白膜层靠近上方位置处，第三预设容量的富含血小板的血浆导入至浓缩血小板收集袋中，并利用止流夹夹住导管。 3.如权利要求1所述的混合浓缩血小板的制备方法，其特征在于，在所述步骤4中，还包括： 将所述白膜层中的白膜及靠近白膜层位置处的红细胞导入所述白膜层袋中，并关闭红细胞导管。 4.如权利要求1所述的混合浓缩血小板的制备方法，其特征在于，所述第一预设条件为：离心力为1800-2100×g，加速档为5-8，减速档为3-5，时间为14-16min，温度为22℃±2℃。 5.如权利要求1所述的混合浓缩血小板的制备方法，其特征在于，所述预设温度的范围为20℃～24℃。 6.如权利要求1所述的混合浓缩血小板的制备方法，其特征在于，所述第二预设条件为：离心力为210-400×g，加速档5-8，减速档3-5，时间为10-15min，温度为22℃±2℃。 7.如权利要求1所述的浓缩血小板的制备方法，其特征在于，所述富血小板的白膜利用离心机进行离心之后，获得浓缩血小板之前，还包括： 血小板悬浮于所述血袋上方的血浆层中，且，白细胞和红细胞位于所述血袋底部。 8.如权利要求7所述的浓缩血小板的制备方法，其特征在于，还包括： 采用所述血液成分分离机，或，分浆夹将血小板分离至存储袋中，获得浓缩血小板。 9.如权利要求1所述的混合浓缩血小板的制备方法，其特征在于，所述获得混合浓缩血小板之后，还包括： 采用血小板计数仪获得所述混合浓缩血小板中血小板数量； 采用计数板法获得红细胞混入量的数量； 采用Nageotte板计数白细胞混入数量。 2
血小板浓缩制品PRP PRF CGF 综述(仅供参照)
血小板浓缩制品 血小板作为一种多功能细胞,不仅在血栓形成和止血中发挥作用,而且在血管发生、组织修复和炎症过程中也扮演着重要的角色[1]。血小板被激活后，可释放多种生物活性物质，在促进组织愈合方面起重要作用。目前的血小板浓缩制品经过几代发展主要有以下几种：富血小板血浆（platelet rich plasma，PRP），富血小板纤维蛋白（platelet rich fibrin，PRF）,浓缩生长因子（CGF，Concentrate Growth Factors）。 一发展历史 1984年，As s o i o n[2]等发现了人血浆中提取的富血小板血浆(platelet—rich plasma，PRP)中含有多种生长因子，当PRP与氯化钙以及牛凝血酶混合后，各种生长因子即从血小板中的α颗粒中释放出来。但是牛凝血酶的使用往往伴随着凝血因子Ⅴ、Ⅺ抗体的形成，并且存在着威胁生命的凝血紊乱发生的可能性[3]。作为第二代浓缩血小板，富血小板纤维蛋白（PRF）是由Choukroun。PRF是富纤维蛋白凝胶，由患者静脉中抽取的新鲜血液制作而成，属于新一代的血小板浓缩物，它制备简单无需任何生物添加剂的处理。在PRF通过离心分离的制备过程中，血小板被激活同时大量脱颗粒细胞中蕴含的重要的生长因子释放出来[4]。浓缩生长因子(CGF)是Sacco首先研发的[5]，与PRF一样，CGF由静脉血分离制备而成。不过，两项技术的离心速度有所不同。与PRF不同，CGF技术采用的速度从2400到2700rpm不等，这是为了分离静脉血中的细胞，因此CGF中富含纤维蛋白凝块比PRF中的大得多，而且更粘稠，纤维蛋白的含量也更多。 二详细介绍 1 PRP 1.1 PRP 制取方法及组成结构 PRP 最早由 Assoian 于 1984 年提取制备[2]，是自身静脉血经梯度离心分层后位于白细胞上方的富含血小板的血浆部分，含有全血中 70%以上的血小板，于其中加入凝结剂(常用 10%氯化钙和凝血酶)可形成胶状物，激活后血小板α颗粒释放出多种生长因子，如转化生长因子-β(TGF-β)、骨形成蛋白(BMPs)、血小板衍生生长因子(PDGF)、类胰岛素生长因子(IGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子(FGF)等[6-8]。这些生长因子在 PRP 中浓度很高，根据不同的制作方法，约为体内正常浓度的几倍甚至几百倍[9-11]。PRP 血浆成分中的纤维素，纤连蛋白及亲玻粘连蛋白，可作为生长因子的载体，同时也是一种非常良好的细胞黏附分子。 1.2 PRP 的现状 在过去的20余年间，PRP已经逐渐被应用于临床，其中包括促进软组织愈合和促进骨组织再生方面的应用。应用较多的领域主要有整形美容和创伤外科专业等[12，13]。1998年PRP由Marx首次引入口腔医学领域中，并逐渐成为口腔医学的研究热点之一。其中PRP在口腔种植学骨增量方面相关的研究进行的较多，并且得到了多数的肯定。但是，PRP的应用一直争议不断，这些争议集中于其疗效的稳定性[14-19]和使用的安全性上。后者的矛盾最为尖锐。此矛盾的产生源于PRP在制备过程中需要加入异种凝血酶和抗凝血制品，这被认为可能导致免疫排斥反应的发生和感染性疾病的传播。 2 PRF
5.血小板的基础知识
血小板的基础知识 血小板（blood platelet）是哺乳动物血液中的有形成分之一。形状不规则，比红细胞和白细胞小得多，无细胞核，成年人血液中血小板数量为100~300×1000000000个/L，它有质膜，没有细胞核结构，一般呈圆形，体积小于红细胞和白细胞。血小板在长期内被看作是血液中的无功能的细胞碎片。血小板具有特定的形态结构和生化组成，在正常血液中有较恒定的数量（如人的血小板数为每立方毫米10～30万），在止血、伤口愈合、炎症反应、血栓形成及器官移植排斥等生理和病理过程中有重要作用。血小板只存在于哺乳动物血液中。 1．血小板增多：当血小板计数>400×10^9/L时为血小板增多，原发性血小板增多常见于骨髓增生性疾病，如慢性粒细胞白血病，真性红细胞增多症，原发性血小板增多症等；血小板增多症常见于急慢性炎症，缺铁性贫血及癌症患者，此类增多一般不超过500×10^9/L，经治疗后情况改善，血小板数目会很快下降至正常水平。脾切除术后血小板会有明显升高，常高于 600×10/L，随后会缓慢下降到正常范围。 2．血小板减少：当血小板计数<100×10^9/L即为血小板减少，常见于血小板生成障碍，如再生障碍性贫血，急性白血病，急性放射病等；血小板破坏增多，如原发性血小板减少性紫癜，脾功能亢进，消耗过度如弥漫性血管内凝血，家族性血小板减少如巨大血小板综合征等。 浓缩血小板的汇集滤白及深低温保存 血小板输注是治疗各种因血小板减少或功能障碍引起出血的有效治疗手段。目前国内血小板制备多采用机采制备，由于机采无偿献血者的招募有一定难度并且随着临床血小板用量的逐年增加，很多地方的血小板供应单独靠机采已不能满足临床需求，而现有的血液资源大量被浪费，如何利用现有的血液资源分离手工浓缩血小板供应临床，同时尽量减少手工血小板多人份输注，容易引起同种免疫导致输注无效的弊端是解决目前血小板临床供应的一个有效途径。由于血小板免疫性输注无效主要为HLA抗体引起，其次为HPA 抗体[1，2]，去除手工浓缩血小板中的白细胞就可减少输血反应和最大限度地避免同种免疫的发生。本站采用血小板专用滤白滤器以每10u为一治疗量，制备新鲜汇集滤白血小板用于预防性血小板输注患者，同时制备冰冻汇集滤白血小板，用于急诊和手术止血患者，取得了较好的临床效果。现将方法报告如下。 1 材料与方法
浓缩血小板的制备白膜法、富浆法
手工分离浓缩血小板(PC)的制备 Ⅰ.富含血小板血浆(PRP)法分离制备血小板法（富浆法）先将全血经轻离心，分离制备富含血小板血浆，之后将富含血小板血浆重离心，移去上层血浆，下层沉淀即为浓缩血小板。在第二次重离心制备浓缩血小板前，可将第一次轻离心获得的富含血小板血浆进行白细胞过滤处理。具体操作如下： 1.采血 2.轻离心成分分离制得红细胞、富含血小板血浆。 建议离心条件：温度：22℃±2℃，加速：9 r/min，减速：3 r/min，200ml袋离心力为478g，400ml袋离心力为850g，离心时间为8分钟。（贺利氏离心机） 轻离心,使红细胞（RBC）、白细胞（WBC）沉淀，上层血浆的大部分血小板（PLT）尚未沉淀，分离此血浆即为富含血小板血浆，约含全血中70%的PLT（根据调节离心机的离心力和时间有所不同）。 3.重离心富含血小板血浆。 第二次离心：温度：22℃±2℃，加速：9 r/min，减速：3 r/min，离心力2988g，离心时间为10分钟。浓缩血小板1个单位留浆20－25ml，2个单位留浆30－45ml。 4.挤去上层贫血小板血浆, 再回部分贫血小板血浆置血小板内, 形成血小板悬液，静置1.5-2h；8h内制备必须完毕。 5.血小板悬液振荡保存，等待检测报告,不合格剔除。
6.根据需求选择合格血小板悬液进行汇集过滤。 7.开放式6h内输完。 8.密闭式振荡保存（无菌接驳，血小板贮存袋，细菌监测）。 富浆法的特点：PRP-PC质量不稳定，WBC残留量高，输洼安全性差，反复输注常会诱发血小板输注无效。 Ⅱ.白膜(BC)法分离制备血小板法 全血首先经重离心后分离白膜层，将白膜层再经轻离心后，去除红细胞和白细胞，即得浓缩血小板。具体操作如下： 1.采血 2.成分分离并制备白膜得少白红细胞（白细胞去除率约85 %）、血浆、白膜。 建议离心条件：温度：22℃±2℃，400ml袋离心力转速2515转/2100g，离心时间为14分钟。 3.分离白膜层，约含全血中90%的PLT，室温静置至少4h，可保存24h。 目视挑选白膜，发生了凝聚及白膜太薄者予以淘汰，不用于制备浓缩血小板。 4.白膜置于血小板保存箱过夜但不振荡，同时等待病毒等检测结果 5.等待血小板需求，根据需求选择合格白膜进行汇集血小板的制备。将10-12单位（5-6袋）白膜混合，总重约500-580ml，充分混匀。 6.轻离心 离心条件：温度：22℃±2℃，400ml袋离心力转速800转/212g，
【专家共识】浓缩血小板制品在创面修复中应用的全国专家共识(2020版)
【专家共识】浓缩血小板制品在创面修复中应用的全国 专家共识（2020版） 【摘要】以浓缩血小板衍生物为代表的创面生物治疗受到人们的关注，但由于在制备的质量控制、使用方式等方面不统一，导致有一些不一致观点。本共识编写组成员通过复习大量文献，筛选出高质量的证据文章，结合创面修复领域专家反复的研讨，形成具有指导意义的专家共识，以指导从事创面修复的医护人员科学、规范地使用浓缩血小板治疗技术。 创面愈合问题一直是组织修复领域工作的重点之一。创面愈合是由多种细胞、ECM及生长因子/细胞因子共同参与、高度协调的生物学活动，出凝血、炎症反应、增殖及重塑4个阶段渐次发生又相互重叠[1]。伴随近年来再生医学的迅猛发展，采用细胞及其衍生物行创面治疗取得令人瞩目的效果[2]。 浓缩血小板是通过离心从全血中提取出来的血小板浓缩液，含有高浓度的血小板、白细胞和纤维蛋白。目前的浓缩血小板及衍生制品在临床应用最为常见的形式为富血小板血浆（platelet-rich plasma，PRP），其他的有浓缩血小板、血小板凝胶（PG）、富血小板凝胶（platelet-rich gel，PRG）、富血小板纤维蛋白（platelet-rich fibrin，PRF）、富含生长因子血浆、浓缩生长因子以及血小板裂解液等。又可根据是否含有中性粒细胞、淋巴细胞分为几种浓缩血小板亚型，如高浓度白细胞-PRP和高浓度白细胞-PRF，低浓度白细胞-PRP和低浓度白细胞-PRF以及纯的PRP和PRF。也有人根据是否激活血小板、是否含有血小板外膜进行浓缩血小板制品分类。甚至将浓缩血小板制品制备成血小板来源的细胞外囊泡或PRP衍生的外泌体。总之，可将所有这些制品统称为浓缩血小板衍生物或浓缩血小板制品，这类制品能促进创
血小板输注指南
血小板输注指南 英国血液学标准委员会(BCSH)， 输血特别委员会（主席： Kelsey P） 工作组成员： Murphy MF (会议召集人)， Brown M， Carryington P， Hall G，Jeffrey RR，Machin S， Taylor C&Thomas D。 特别委员会委员：Boulton F, Bruce M, Cohen H, Duguid J, Knowles SM,Murphy M F, Poole G和Williamson LM 尽管此指南中的建议和相关信息在印刷出版时被认为是真实准确的，但是不论作者或发行机构都对任何可能的错误或遗漏没有任何法律责任或义务。 1.方法 经常使用合适的关键词在数据库中进行文献检索，并对现有的专家组出版的指南（BCSH，1992；Schiffer等，2001），包括由英国血液学标准委员会在MedLine（联机医学文献分析和检索系统）和其（BCSH）之前出版的血小板输注指南和标准委员会的建议（国立卫生研究院标准委员会，1987；血小板输注标准会议，1998）进行了回顾性研究后，在基于以上文献检索、回顾性研究的结果和作者多年的血小板输注经验，起草了本指南。血小板输注指征部分系作者与BCSH的临床血液学特别委员会合作起草。本指南作者来自血小板输注治疗有关的各个专业，包括临床和实验血液学、儿科、外科、麻醉和危重监护以及护理。 2.背景 在过去的40年中，血小板输注治疗取得了明显的进展，但是在某些方面仍有争议，例如对预防性血小板输注。美国（国立卫生研究院标准委员会，1987；Schiffer，2001）和英国（BCSH，1992；血小板输注标准委员会，1998）付出了许多努力以期在血小板输注治疗的各方面，包括临床指征达成一致。尽管目前许多随机对照研究在本领域已经产生了有用的信息，但是由于缺少客观资料，基于客观证据的举荐受到了限制。 血小板的输注持续增长，和去年相比，英国2001~2002年度医院对浓缩血小板的需求（共215050成人剂量）增长了2.3%。浓缩血小板十分昂贵，其采集、制备、贮存和使用的进展仍以提高临床效果和减少副作用为目的。 本指南的目的是对医院中负责处方、使用和提供血小板输注的医疗、护理和技术人员给予血小板输注方面的指导。献血者的选择和浓缩血小板的制备在英国输血服务机构指南（英国输血服务机构/国立生物标准和控制研究院，2001）中已描述，不在本文中详细说明。
全自动血液成分分离机和传统手工法制备浓缩血小板的质量比较
■1526 ■吉林医学2018年8月第39卷第8期 ?临床经验? 全自动血液成分分离机和传统手工法制备浓缩血小板的 质量比较 安蓬蓬，李浩泷，刘春燕（天津市血液中心，天津300110) [摘要]目的：对比采用全自动血液成分分离机法和传统手工法分离得到的浓缩血小板的质量，比较两种制备 方法的优劣。方法：分别采用CompoMat G5全自动血液成分分离机（机器组）和手工法制备（手工组）浓缩血小板，各 10袋，然后检测两种浓缩血小板的容量、血小板含量和红细胞混入量等参数，并将结果进行比较与分析。结果:机器 组和手工组制备的浓缩血小板容量分别为（61. 716 7 ±5. 4〇2 0)m l和（66.02 0 ±8.26 0)m l，差异有统计学意义（尸< 0.01);血小板含量分别为（6.034 7 ±1.698 1) x l010个/袋和（5.533 6 ±1. 377 1) x l010个/袋，差异无统计学意义（尸> 0.05);红细胞混入量（x109个/袋）分别为0.851 7 ±0.336 9和1.760 0 ±0. 180 8,差异有显著统计学意义（P < 0.01)。结论：两种方法制备的浓缩血小板均符合G B18469 -2012《全血及成分血质量要求》，但通过实验结果的对比 和分析可以发现，全自动血液成分分离机制备的浓缩血小板质量和效率均优于传统手工法。 [关键词]全自动血液成分分离机;手工法；浓缩血小板 C o m p a r i s o n bet^veen the quality of platelets f r o m automatic a n d m a n u a l preparation metliods AN Peng-peng,LI Hao- long,LIU Chun-yan(Tianjin Blood Center,Tianjin300110, China) Abstract：Objective To compare the quality of the platelets respectively prepared by automatic tor and manual method so as t o compare the advantage and the disadvantages of the two methods.Metliod The platelets were prepared by automatic blood components separator and manual method,each group were 100 bags,the prepared platelets were measured on the capacity,platelets count,red blood cell count,these result obtained from different m and analyzed.Results The capacity(ml)of the platelets from the automatic group and the manual group were (61. 716 7 土 5.402 0) and (6 6. 025 0 ± 8.256 0) ,respectively(P< 0.01 )；the platelets count(x1010//bag)were (6. 034 7 ± 1.698 1) and (5. 533 6 ± 1.377 1),respectively(P > 0.05 ) ;the red blood cell count(x 109//bag)were (0.851 7 ±0.336 9) and (1. 760 0 ± 0. 180 8 ), respectively(P< 0.01) .Conclusion A L L platelets in this research meet the criterion of G B 18469 - 2012. However,the quality and separation efficiency of platelets made by automatic blood component separator are obviously higher than those by manual method. K ey Wo r d s：Automatic blood components separator；Manual method；Platelets 随着血液制备自动化技术的不断发展，全自动血液分离 机已越来越多地被应用于浓缩血小板的制备过程中。我中心 于2016年12月引进了 15台CompoMat G5全自动血液成分分 离机，并于2017年4月正式投人使用。全自动血液分离机制 备浓缩血小板可以减少人为因素的影响,规范操作步骤，减轻 劳动强度，从而更好地保障血液产品的质量。我中心将C o m-poMat G5 全自动血液成分分离机与传统手工法进行分离效果 比较,现将结果报告如下。 1资料与方法 1.1血液来源：017年10月，采集本市街头无偿献血者血液 于C P D A五联袋中，共200袋，每袋容量为(400 ± 40)m l，要求 采血顺利，采血440 m l用时< 10 min,( 22 ± 2 )丈条件下保存，采后18 h内分离制备浓缩血小板。 1.2仪器与资料1. 2.1 仪器与设备:CompoMat G5全自动血液成分分离机, 费森尤斯卡比（中国）投资有限公司；X S- 800:全自动血液分 析仪，希森美康医用电子（上海）有限公司；贝克曼库尔特J6 -M I大容量冷冻离心机，美国贝克曼库尔特有限公司。 1.2.2主要耗材及试剂:一次性使用塑料血袋P-400P(四 川南格尔生物科技有限公司，批号:批170731);稀释液（希森 美康生物科技有限公司，批号:G7068);溶血剂（希森美康生物 科技有限公司，批号:A6014);全血质控物（希森美康生物科技 有限公司，批号：2680805)。 1.3制备方法及分组：将200袋全血分为两组，各100袋。机器组按照CompoMat G5全自动血液成分分离机使用说明使 用分离机制备浓缩血小板，手工组按照《血站技术操作规程》(2015版）使用传统手工法（白膜法）制备血小板。离心机程 序均为:第一次离心3 000 r/min,14 min,刹车档加速9减速 6;第二次离心800 r/min,10 min,刹车档加速9减速6;温度设
去白细胞混合浓缩血小板的制备和质量控制
去白细胞混合浓缩血小板的制备和质量控制 1 范围 本标准规定了去白细胞混合浓缩血小板的制备、质量控制、标识、标签、储存、运输要求。 本标准适用于去白细胞混合浓缩血小板的制备和质量控制。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 18467 献血者健康检查要求 GB 18469 全血及成分血质量要求 WS/T 203-2001 输血医学常用术语 WS 399 血液储存要求 WS/T 400 血液运输要求 WS/T 550 全血及成分血质量监测指南 3 术语和定义 WS/T 203-2001界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 制备血小板的起始全血whole blood qualified for platelet concentrates preparation 符合制备浓缩血小板成分血质量要求的全血。 3.2 浓缩血小板 platelet concentrates 以单人份全血制备、质量达到规定要求的血小板悬液。 3.3 白膜层 buffy coat layer 全血经重离心后，自上而下分成明显可见的血浆部分和细胞部分，在上层血浆与下层红细胞之间形成的肉眼可见的灰白色细胞混合层，其主要包括比重在1.030～1.092之间的血小板、淋巴细胞、早幼粒细胞、单核细胞、网织红细胞、粒细胞、晚幼粒细胞、嗜碱性粒细胞和中性粒细胞等有形细胞成分。
3.4 白膜 buffy coat 将白膜层单独分离制备而成的成分血。 3.5 白膜法 buffy coat method 重离心全血，分离含适量血浆的白膜，再经轻离心分离出浓缩血小板的制备方法。 3.6 富血小板血浆法 platelet-rich plasma method 轻离心全血，自上而下分成富含血小板血浆和红细胞两部分，留取富含血小板血浆，重离心分出上层血浆，获得下层浓缩血小板的制备方法。 3.7 白膜汇集法 buffy coats pooling method 通过无菌接驳汇集多袋ABO同型含适量血浆的白膜或汇集多袋ABO同型白膜和其中一人份血浆，形成白膜和血浆的混合物，再经轻离心，分离出混合浓缩血小板的制备方法。3.8 单人份浓缩血小板汇集法 single-donor whole blood platelets pooling method 多袋ABO同型单人份浓缩血小板用无菌接驳的方法进行连接、汇集，制得混合浓缩血小板的制备方法。 3.9 白细胞滤除 leukocyte depletion 全血或成分血通过去白细胞滤器去除血液中白细胞的过程。 3.10 血小板成人治疗剂量 platelets adult therapy dosage 将输注至少2.5 ×1011个血小板界定为1个血小板成人治疗剂量。 3.11 去白细胞混合浓缩血小板 leukocyte-reduced pooled platelet concentrates 汇集多袋ABO及RhD同型浓缩血小板并完成白细胞滤除的血小板成分血。 4 制备 4.1 原理 利用血细胞的比重和各种血细胞的体积等因素的不同，通过离心使全血分层，将多个献血者的ABO及RhD同型的新鲜全血中大部分血小板汇集，悬浮于血浆，经白细胞滤除，制备成1个治疗剂量或0.5个治疗剂量，即为去白细胞混合浓缩血小板。 4.2 制备血小板起始全血的基本要求 4.2.1 全血应由符合GB18467的献血者捐献。
谈国产血小板聚集仪
谈国产血小板聚集仪 谈国产血小板聚集仪 一.血小板聚集仪：属于临床检验仪器。 （一）应用领域：临床医学.药物研究.科研教学 （二）测定方法：比浊法 （三）测定仪器分类：● 血小板聚集仪● 全血（血浆）血小板聚集仪● 多通道（单/双/四通道）血小板聚集仪● 血小板聚集凝血因子分析仪 二.分析血小板聚集仪： （一）全血（血浆）血小板聚集仪：A.产品功能：采用微量全血直接测定血小板聚集功能。B.临床应用：它广泛应用于血小板无力症，血管性假血友病，血小板增多症等疾病的诊断，并在伴有高凝状态的疾病：如中风.冠心病.糖尿病.肾病综合症等和低凝状态的疾病：如上消化道出血.流行性出血热等疾病的临床防治，以及在评价各种血栓病药物治疗作用和中医活血化癌药物对血小板聚集的抑制和解聚的研究等方面也是一个重要指标。C.产品特点：D.主要零配件及耗材：一次性测试杯.测试株。G.代表机型：QX-200全血血小板聚集仪H.主要技术参数：测量范围测量速度温度控制测量误差电源外形尺寸重量△R=20.0Ω5分/次 37±0.5℃不大于±0.3ΩAC220V,50Hz,135W500×330×130mm11kg （二）多通道（双/四通道）血小板聚集仪：a)
产品功能：根据 BORN 方法进行血小板聚集功能测定。●曲线显示；参数设置；最大聚集；最大斜率；解聚时间；面积计算等；统计功能.回归与偏差比较；直方图等；可使用多种诱导剂。 ●可测量参数：最大聚集；斜率（Slope)；双相聚集(Biphasic aggregarion)；解聚(Desaggregation)；解聚斜率(Slope (Desaggregation))；形状变化(Shape change)；延迟相(Lagphase)；面积(Arca)；角度(Angle)。 ●测量体积：200ulRRP+20ul诱导剂；最小测量体积 180~200ul。 ●统计：可进行Student-t和Wilconxon检验；回归与偏差比较；直方图；曲线放大.平滑等。 ● 诱导剂：可用多种诱导剂。b) 测定方法及原理：流式密度测定法（可用各种澄清或混浊试剂）。据 BORN 方法而发展的专利测量技术-涡流式密度测量法，自动校零和磁力搅拌棒组成光学－机械结合系统，保证反应系统的均一性和提高灵敏度。c) 应用范围：可用ADP.COL.RIS.ADR等诱导的血小板聚集试验。由血小板聚集功能异常可检测出因聚集功能低下，所造成出血倾向疾病，或因聚集功能过高所形成血栓，诊断血栓栓塞并发症，如中风，心梗等疾病源监测，并可提早预防避免发生。e) 产品特点：● BORN方法和电流法相比，最大的优点在于对血小板含量较低的样本可以进行富积处理后再测量，而用全血作样
输注血小板的剂量和方法
输注血小板的剂量和方法 一、剂量 输注血小板取决于输血小板前患者的血小板数和预期要达到的血小板数以及患者是否有出血或同种免疫等情况。目前使用的血小板有浓缩血小板和单采血小板两种。 1.浓缩血小板：是将室温保存多连袋内的全血，于采集后6小时内在20 ----24度的全封闭条件下将血小板分离出并悬浮在血浆内所制成的成分血。国内以200ml全血分离制备的血小板为1U浓缩血小板，国家标准要求血小板的含量≥ 2.0×1010。 一般情况输注10U手工血小板可以使患者血小板升高36×109/L，但是实际情况与患者病情和输血史等有关。第一次可以按2U/10kg体重输注浓缩血小板，以后根据病情调整。 2.单采血小板：是采用血液成分单采机在全封闭的条件下自动将全血中的血小板分离出并悬浮在一定量的血浆内制成的单采成分血。国家标准为1个单位单采血小板（即1个治疗量）含量≥2.5×1011个。 成人每次输注一袋（≥2.5×1011），严重出血或已产生同种免疫者应加大输注剂量，如一次输注两个治疗量。 儿童患者根据年龄和病情将一个治疗量的血小板分2----4次输注。 新生儿，一次可输注成人剂量的1/5----1/10，体积控制在20----30ml。 ▲输注的血小板存活期为5天，故应该2----3天输注一次。 二、方法 1.输注前轻摇血袋，使血小板和血浆充分混匀。 2.输注时应使用Y形标准输血器，并以患者可以耐受的最快速度输注（一般在4小时内）,因为存在细菌污染的危险。 3.从血库取回来的血小板应尽快输注，如果未及时输注应放在室温下暂时保存。
4.在输注过程中应该严密监测病情变化，婴幼儿、老年及心功能不全等患者，应酌情减慢输注速度。 输注时应注意： ①如用全血制备的浓缩血小板，多个单位合并后应尽快输注（一般在4小时内），因为存在细菌污染的危险； ②血小板在输注前不能在4℃储血冰箱保存，因为可降低血小板的功能； ③应在30分钟内输完； ④Rh（D）阳性献血者的血小板不能输给可能怀孕的Rh（D）阴性妇女； ⑤应输注ABO同型血小板，因血小板表面有ABO血型抗原，而受血者体内的抗-A/抗-B与输入血小板表面的红细胞A/B抗原相互作用，可导致血小板破坏；若悬浮在高滴度的抗-A、抗-B血浆中，可引起受血者红细胞溶血。
血小板聚集试验
「参考值」玻片定性法大多数在++～+++ 比浊法：为均值±ISD 浓度6×10-6M 的ADP可引起最大的可逆性聚集，此时，最大聚集率为35.23±13.52%，坡度为63.91±22.17度。浓度4.5×10-6M的肾上腺素可引起双相聚集曲线，此时第1相的最大聚集率为20.25±4.82%，坡度为61.92±32.90度。「生物学变异」使用某些药物后，如阿司匹林，右旋糖苷、保泰松等，可使聚集性减低，故在本试验前应停用有关药物。「临床意义」血小板聚集系指血小板之间相互粘着的能力。血小板膜上存在着ADP特殊受体，ADP可使血小板聚集。ADP主要来源于血管损伤部位发生血小板粘附后的损伤组织及红细胞释放的ADP，但主要是由血小板释放内源性ADP可使血小板聚集，如果血小板释放内源性ADP量不足或不能释放，血小板就会解聚而恢复正常形态。除ADP外，胶原纤维、凝血酶、肾上腺素等也可使血小板发生聚集并诱发血小板释放内源性ADP. 1.血小板聚集性增加见于手术后，糖尿病，急性心肌梗塞，静脉血栓形成：青紫型先天性心脏病、肺炎、高β-脂蛋白血症，抗体-抗原复合物反应，肾移植的排异反应，人工心脏瓣膜移植术，多发性硬化症。口服避孕药，高脂肪食谱、吸烟。 2.血小板聚集性降低血小板无力症（Glanzmann病）原发及继发血小板疾病Bernard-soulier综合症，释放反应异常（贮藏池疾患），血管性假性血友病，May-Hegglin异常，Swisscheese病，先天性低纤维蛋白原血症。迁延性及严重肝病，Wilson病、肾病（尿毒症）维生素B12缺乏、细菌性心内膜炎、抗血小板抗体、术后低纤维蛋白原血症。在有血小板缺陷患者中，血小板加入肾上腺素后第二波可以不出现，这是由于血小板内源性ADP释放不佳所致。