微生物课件上思考题及答案
微生物学思考题答案
绪论1、你如何使你的朋友相信微生物不仅仅是一种病原？尽管目前微生物仍在严重威胁人类的生存，但另一方面，我们必须强调，大多数微生物对人类是无害的。
事实上，大多数微生物对人类社会还有巨大的价值。
整个农业系统在许多方面都依赖微生物的活动。
许多主要的农作物属于豆科植物，它们的生长同专一性细菌紧密相连，这些细菌可在植物的根部形成根瘤结构。
根瘤结构中，大气中的氮转变成可用于生长的氮化物。
根瘤细菌的固氮活动，减少了昂贵肥料的需要。
微生物在农业上的另一个重要性在于，某些动物是反刍动物，这些主要的农业动物具有瘤胃，微生物在瘤胃中进行消化。
没有这些微生物牛羊的饲养是不可能的。
植物营养方面，微生物在碳、氮、硫这些重要营养成分的循环起着关键作用。
土壤和水中的微生物可见这些元素转化成植物容易利用的形式。
微生物与食品的关系，不仅仅是产生腐败变质等不利影响。
奶制品的制造至少部分是借助微生物的活动，包括乳酪、酸乳酪和黄油，都是主要的具有经济价值的产品。
泡菜、腌制食品和一些腊肠也归功于微生物的活动。
可烘焙的食品及乙醇的制造也基于酵母菌的发酵。
微生物在能源生产方面也起着重要作用。
天然气是细菌作用的产物，由甲烷细菌代谢产生。
光营养的微生物能够收集太阳能生产生命有机体中的储存物——生物量。
废物如生活垃圾、剩余谷物、动物废料等通过微生物转化微生物燃料——甲醇和乙醇。
利用微生物清理被人类活动污染的大气——生物整治。
利用微生物降解油污、溶剂、杀虫剂和其他环境污染物。
通过基因操纵技术，能在微生物种生产出人类胰岛素。
利用基因组学方法搜索带几百个目的蛋白的基因蓝图，然后将它们转入到合适的受体中由于生产重要的、有商业价值的蛋白质。
在自然界中，它无限小，但作用无限大。
2、胡克和列文虎克对微生物学的贡献有那些？科恩对微生物学的贡献有那些？1665年，罗伯特.胡克描述了霉菌的子实体结构，因此他是第一个描述微生物的人。
1676年，列文虎克在研究辣椒水渗出的过程中发现了细菌，因此他是首次描述细菌的人。
微生物实验思考题参考标准答案及知识要点
微生物实验思考题参考答案及知识要点一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。
因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。
二.细菌的简单染色和革兰氏染色1.革兰氏染色中那一步是关键？为什么？你是如何操作的?革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间）。
如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。
脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s)。
2. 固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同?自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。
固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。
３. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？能。
在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋),被酒精脱色为革兰氏阴性菌。
最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。
4．涂片为什么要固定,固定适应注意什么问题?a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上;b增加其对染料的亲和力。
固定时应注意：手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。
三. 霉菌、放线菌的形态观察1．镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状,比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体。
微生物学课程思考题
微生物学课程思考题《微生物学》课程复习思考题绪论1.什么是微生物？它包括哪些类群？2.人类迟至19世纪才真正认识微生物其中主要克服了哪些重大障碍？3.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？4.什么是微生物学？学习微生物学的任务是什么？5. 用一个具体事例说明人类与微生物的关系，为什么说微生物是人类的敌人，更是我们的朋友？（建议将一些具体事例延伸成为展板制作的题目）6. 为什么微生物能成为生命科学研究的“明星”?7. 为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人?（请不要简单罗列二个人的工作，而应该对他们的工作及意义进行评论）第一章1.试图示G+和G-细菌细胞壁的主要构造井简要说明其异同。
2.试图示肽聚糖的模式构造，并指出G+和G-细茵肽聚糖结构的差别。
3.试述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。
4.渗透调节皮层膨胀学说是如间解释芽袍耐热机制的？5.裂异形胞原体与始体．类支原体，浚酶体袍囊，磁小体。
第二章1.试解释菌物、真菌、酵母茵、霉菌和章菌。
2.试简介菌丝、茵丝体、菌丝球、真酵母、假酵母、芽痕、蒂痕、真菌丝、假菌丝等名词。
3.霉菌的营养菌丝恻气生菌丝各有何特点？它们分别可分化出哪些特化构造？4.试列表比较各种真菌胞子的特点。
5.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落有何不同？为什么？第三章1.什么是真病毒？什么是亚病毒？2.病毒的一般太小如何？试图示病毒的典型构造。
3.病毒粒有哪几种对称形式？每种对称又有几类特殊外形？试各举一例。
4.什么叫烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。
5.什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？6.试解释溶源性、溶源菌、温和噬菌体。
第四章1.什么叫能源？试以能源为主、碳源为辅对微生物的营养类型进行分类。
2.什么叫生长因子？它包括哪几类化合物？微生物与生长因子的关系有哪几类？试举例加以说明。
3.什么叫水活度（a）？它对微生物的生命活动有间影响？对人类的生产实践w和日常生活有何意义？4.什么是选择性培养基？试举一例并分析其中的原理。
微生物复习思考题与答案
微生物学绪论一、选择题b1. 大部分微生物（）。
A 是原生动物B 帮助改善生活质量C生活在海洋的底层D发现于外层空间。
c2. 适合所有微生物的特殊特征是（）。
A 它们是多细胞的B 细胞有明显的核C 只有用显微镜才能观察到D 可进行光合作用c3.人类通过微生物产生的食品有（）。
A 牛奶B 火腿C 酸乳酪D 黄瓜a4. 第一位观察到微生物的科学家是（）。
A Robert HookeB Louis PasteurC Joseph ListerD James T. Watsona5. 自然发生说的理论认为（）。
A 微生物来自无生命的物质B 大动物中发现有系统发育C人类是从类人猿进化的 D病毒是从细菌退化的d6. 广泛进行微生物研究的17世纪70年代荷兰商人（）。
A van GophB van HoogenstyneC van DyckD van Leeuwenhoekd7. 路易.巴斯德对微生物的贡献在于他（）。
A 发现了病毒B 提出了自然发生说理论C抨击了进化论D 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性b8. 阐明微生物是传染病原因的概念称为（）。
A 进化论B 病原菌学说C 生物学细胞论D 报酬递减论a9. 巴斯德采用曲颈瓶试验来（）。
A 驳斥自然发生学说B 证明微生物致病C 认识到微生物的化学结构D 提出细菌和原生动物分类系统b10. 在微生物学中采用化学治疗剂治疗传染病是由于（）。
A Hooke的工作B发现了抗生素C 阐明了DNA的结构D 发展了遗传工程D11.病毒研究工作的迅猛发展取决于（）。
A 光学显微镜B 暗视野显微镜C 紫外线显微镜D 电子显微镜B12.下列的所有特征均与病毒相联系，除了（）之外。
A 它们很少或没有其它的化学物质B 用抗生素干扰病毒的活性C 病毒引起麻疹、腮腺炎和（病毒性）风疹D 它们不是细菌的类型C13. 所有微生物的遗传物质是（）。
A A TPB DNPC DNAD AMPC14. 由一团缠绕的核酸和蛋白质外壳所包围的粒子是对（）最好的描述。
微生物思考题与答案
微⽣物思考题与答案⽣长与控制11、微⽣物⽣长与繁殖的定义微⽣物⽣长是细胞物质有规律地、不可逆的增加，导致细胞体积扩⼤的⽣物学过程。
繁殖是微⽣物⽣长到⼀定阶段，由于细胞结构的复制与重建并通过特定⽅式产⽣新的⽣命个体，引起⽣命个体数量增加的⽣物学过程。
在微⽣物学⾥, 繁殖定义为细胞数量的增加。
2、快速⽣长的细菌⾥DNA复制与细胞分裂是如何协调的？细菌中DNA的复制和细胞分裂两个过程的控制是不连接的，具有多个复制叉。
在细菌个体细胞⽣长的过程中，染⾊体以双向的⽅式进⾏连续的复制，在细胞分裂之前不仅完成了染⾊体的复制，⽽且也开始了两个⼦细胞内DNA分⼦的复制。
3、细菌的⼆等分裂在细菌长度的中间位置，通过细胞质膜内陷并伴随新合成的肽聚糖插⼊，导致横隔壁向⼼⽣长，最后在中⼼会合，经⼀个细菌分裂成两个⼤⼩相等的⼦细菌。
4、在给定温度下，细菌中各组分的变化量与什么有单⼀的函数关系，与什么⽆关？与⽣长速度有关，与培养基中营养成分⽆关5、细菌群体⽣长有哪些不同时期？其原因是什么？1、迟缓期：细菌数不增加。
原因：（1）种⼦⽼化（2）适应新环境的酶系统没有表达2、对数⽣长期：最⼤⽣长速率，对数增加，平衡⽣长3、稳定⽣长期：⽣长速率为零，活菌数最多。
原因：营养物质耗尽、代谢产物积累、pH等环境变化引起细菌不宜⽣长4、衰亡期：代谢活性降低、衰⽼⾃溶。
原因：营养物质耗尽，有毒代谢产物⼤量积累6、概念：Quorum sensing、代时、⽐⽣长速率、倍增时间、迟缓时间Quorum sensing：细菌通过监测细胞分泌的特定信号分⼦浓度从⽽监测种群⾃⾝密度的⽅式。
此种现象⼜被称为⾃诱导，因为信号分⼦的浓度会随着菌密度增加⽽增加，超过阈值后细菌开始表达⼀系列的密度依赖型基因（QS），合成⽣物膜、次级代谢旺盛、不再⽣长等等。
[个体细胞间的信息交流分化结构的确定]代时：在细菌个体⽣长⾥每个细菌分裂繁殖⼀代所需要的时间倍增时间：群体⽣长⾥细菌数量增加⼀倍所需要的时间迟缓时间：微⽣物在⽣长过程中，在实际条件下达到对数⽣长期所需要时间与理想条件（即⽆迟缓期）下达到对数⽣长期所需时间之差，可⽤作图⽅法求出7、代时、⽐⽣长速率、⽣长基质浓度之间的数学关系代时G = 0.693/u；⽐⽣长速率u=u m×S/（Ks + S）u m: 最⼤⽐⽣长速率；S：⽣长基质浓度；Ks: u为u m⼀半时的基质浓度8、什么是细菌的平衡⽣长？在对数⽣长期内，细胞数量对数增加、细胞各成分按⽐例稳定增长。
[课件]微生物思考题PPT
![[课件]微生物思考题PPT](https://img.taocdn.com/s3/m/f045511667ec102de2bd8939.png)
思考题
• 青霉素是如何发挥杀菌作用的？为何不影响人类 细胞的功能？ • 细菌有那些特殊结构？细胞特殊结构有什么功能？ • 简述细胞壁的功能。 • G+菌和G-菌细胞壁结构在致病性、检测和治疗 上有何差别？
思考题：
1、引起腹泻的大肠杆菌有几种类型？其主 要传播和感染特点是什么？ 2．肥达试验原理、结果和解释 3． 细菌性痢疾的主要 临床类型是什么？ 典型症状有哪些？产生机制如何？
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思考题
• 1.试述我国病毒性肝炎的流行现状及防治策略。 • 2.试述HBV的感染类型及致病机制。 • 3.试述HBV抗原抗体系统检测的临床意义。
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思考题
1.肠道病毒的共同特征是什么？
2.肠道病毒主要包括哪几种？可引起哪
些疾病？
3.脊髓灰质炎病毒的免疫性及特异性预
防有哪些特点？
4.甲肝病毒的生物学特点
思考题 1．致病性葡萄球菌的特点是什么？ 2．葡萄球菌和链球菌致病有何异同点？ 3．抗“O”试验的临床意义是什么？ 4． 葡萄球菌A蛋白（SPA）的结构和特点。
思考题
1、简述结核分枝杆菌的免疫性和超敏反应之 间的关系。 2、试述结核分枝杆菌的致病机理。 3、简述结核菌素试验的意义、方法和结果分 析。
思考题 1、钩端螺旋体的传播途径和致病物质有哪些？ 2、简述衣原体的独特发育周期。 3、简述梅毒螺旋体的传播途径和梅毒的临床 表现。 4、名词解释：支原体、原体、始体、外斐反 应（Weil－Felix reaction)
思考题
1.病毒感染的类型？
2.什么是干扰素? 它有哪些特性，是怎样产生的，其抗病毒 作用机理如何? 3.试述抗病毒的特异性免疫？ 4.试述病毒致病机制与细菌致病机制有何不同？ 5.常用组织培养法有几种？各有何应用？ 6.病毒在组织细胞中增殖的指标是什么？ 7.病毒性感染的快速诊断方法有哪些？ 8.预防病毒性感染有哪些人工自动免疫制剂？ 9.诊断病毒的核酸技术有哪些？
微生物思考题及参考答案
微生物思考题及参考答案The document was prepared on January 2, 2021微生物思考题及参考答案1.用油镜观察时应注意哪些问题在载玻片和镜头之间加滴什么油起什么作用答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比有公式,同时与波长成正比.2.什么是物镜的同焦现象它在显微镜观察中有什么意义答：在一般情况下,当物像在一种物镜中已清晰聚焦后,转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时,物像将保持基本准焦的状态,这种现象称为物镜的同焦.利用这种同焦现象,可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦,从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片.3.影响显微镜分辨率的因素有哪些答：物镜的NA值物镜的数值孔径与照明光源的波长.4.美蓝染色液作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响,试分析原因答：会造成更多的死细胞,在显微镜下观察,活的是透明无色,衰老的是淡蓝色,死亡的是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液,影响实验结果.5.镜检时如何区分放线菌基内菌丝,气生菌丝以及孢子丝一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体.6.在进行细菌涂片时应注意哪些环节1、载玻片应该冷却后再涂片.2、如果是涂布液体,可以用毛细管或接种环滴一小滴,然后轻轻抹开,一圈足够. 3、如果是涂布菌落或菌苔,应该在载玻片上先滴一滴水,再将菌落或菌苔涂布上去,接种环的尖蘸一点点即可. 4、为了节省时间,可以将干燥和热固定合并成一步.但是应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形. 5、染色时间视染色液种类而定.如结晶紫只需几十秒,亚甲基蓝则需一到两分钟. 6、冲洗时,水流不能太大,而且尽量避免水流直接冲在涂片上. 7、冲洗后干燥,可以用酒精灯加热以节省时间,同样的,应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形.7.进行细菌制片时为什么要进行加热固定在加热固定时应注意什么固定的目的有三个：1杀死微生物,固定细胞结构.2保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉.3改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色.固定时应注意：手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次手指触摸玻片反面,不烫手为宜,固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩.8.为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察1.因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近.如果未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头.镜头非常精密,被污染后不利于下次观察.2、若未完全干燥,水滴会影响油与玻璃之间折光率,造成视野不够清晰.9.哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性其中最关键的环节是什么答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键的环节是脱色环节.10.进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色会出现什么问题答：菌龄太老,细胞壁通透性改变.着色不均,染色效果不好.阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌.11.革兰氏染色中那一步是关键为什么你是如何操作的革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色是脱色时间.如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌.脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s.12.革兰氏染色中,哪个步骤可以省略在什么情况下采用媒染目的是在所有的内形成了不溶于水的与碘的复合物. 脱色后使变为无色. 复染使革兰氏阴性菌染成红色. 所以鉴别细菌的革兰氏阴阳性只须媒染,复染的目的是为了看清革兰氏阴性菌.13.你主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌曲霉:具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗,顶端膨大成球状顶囊,表面辐射出一层或两层小梗,小梗上着生成串的球形分生孢子.分生孢子梗生于足细胞上,并通过足细胞与营养菌丝相连.根霉:菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝和假根.在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗,其顶端膨大成球形孢子囊.囊的基部有囊托,中间有球形或半球形囊轴.毛霉:菌丝无隔、多核、分枝状,无假根或匍匐菌丝.菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗.各分枝顶端着生球形孢子囊,无囊托.青霉:菌丝有横隔,分生孢子梗亦有横隔,光滑或粗糙.基部无足细胞,顶端不形成膨大的顶囊,其分生孢子梗经过多次分枝,产生几轮对称或不对称的小梗,形如扫帚,称为帚状体.孢子颜色：黑曲霉是黑色,青霉是青色,根霉是白菌丝黑孢子,毛霉则是淡黄色.以上为实验室观察1菌丝特征：青菌与曲霉菌丝与膈；毛霉与根霉则无；2菌丝的特化结构：曲霉有足细胞,其它霉菌无；根霉有假根与匍匐枝,其它霉菌无；3孢子头特征：青霉的孢子头为扫帚状；根霉与毛霉的孢子头为囊状；曲霉为菊花状孢子头.14.为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正目镜测微尺中每小格代表的实际长度是不固定的,它是随所使用目镜和物镜的放大率的不同而改变的,故在测量前必须先用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正,以得出在显微镜的特定放大倍率下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度.15.在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,其测定结果是否相同为什么答:相同;目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分的刻度,有把毫米刻成为50 等分或把10 毫米长度刻成100 等分.测量时,将其放在接目镜中的隔板上来测量经显微镜放大后的细胞物象.由于在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,物象的放大倍数与每小格目镜测微尺所代表的长度在变化比例上是同步的,故而测定结果相同.16.哪些因素会造成血细胞计数板的计数误差,应如何避免操作时没有先盖盖玻片再滴加悬液,导致体积不准确.避免：先盖盖玻片再滴加悬液.细胞密度太高.避免：稀释溶液.溶液不均匀.避免：滴加溶液前混匀悬液.1、仪器误差：所用器材均应清洁干净,并且计数板计数区不应该有擦痕.2、计数室内可能有气泡.因为酵母细胞并没有染色,看起来是透明的,有气泡很容易被计入,使数值偏高；并且,气泡会影响菌悬液的随机分布.改进：若产生气泡,则用吸水纸吸出.3、菌体在计数板上分布不均,当用选取5格计数时,会造成很大误差.改进：应使菌液自然流入并混匀,进行观察时尽可能多数几个格子.4、配制稀释液时吸取的浓度过高或过低,导致稀释液浓度和原液不成正确比例,计算时产生误差.应将原液摇晃均匀后取中部的液体进行稀释.5、由于数菌体数目时视觉疲劳而导致的视觉误差.应多人观察,取记录平均数.6、计数时可能将格四周的菌都计算在内了,使数值偏高.改进：谨遵一个规则,计上不计下,计左不计右,不可以重复计数.7、可能出现有出芽的酵母菌,将出芽的酵母菌按两个计数了,使数值偏高.改进：计数时,只有当芽体于母细胞一样大的时候,才能计为两个.17.培养基配好后,为什么必须立即灭菌如何检查灭菌后的培养基是否无菌为什么要倒置培养答：由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌,如果来不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长系列而消耗养分和改变培养基的酸碱度所带来的不利影响.将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h,无菌生长即可证明灭菌后的培养基无菌.倒置培养的主要目的：1由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质,利于微生物生长；2防止空气中微生物的污染培养基及培养物：倒置时平板内的空气是不流动的,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌.3倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去,而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖和生存的环境.如果不倒置,大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况.而一些落菌等试验,需验证培养基无菌,就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌,水分散失是很重要的.19.在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题为什么答：一般而言,培养基的配置要注意如下几点原则：1营养成分的配比：碳源和氮源的比例C/N要适当；2适宜的酸碱度pH值：配制培养基时pH的调节；3渗透压：营养物质要有适合的浓度；4培养基不能反复高温灭菌.5 称不溶性固形物时,应单独称,若量少的可以与无机盐一起称,但一定要混匀再分装；6一般情况下培养基用自来水配制.操作细节上则要注意：1称药品用的牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖2调pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度3分装时注意不要污染棉塞、试管口,以免染菌.4及时灭菌,以免培养基及容器里的微生物生长繁殖消耗养分、改变酸碱度.1、当然是注意浓度配比不要搞错2、很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生3、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀4、不要忘了调节pH值一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定5、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质20.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽灭菌完毕后,为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀,开盖取物.答：1在使用高压蒸汽灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度.2压力未降至“0”便开盖取物的可能后果：压力锅内压力骤然降低,引起容器中的溶液喷出容器口导致污染或导致人员的烫伤.21.干热灭菌操作过程中应注意哪些问题为什么1、物品不要摆放太挤,以免妨碍空气流通2、灭菌物品不要接触干燥箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火3、灭菌时人不能离开4、灭菌结束后不能忘记关掉电源5、待温度降到70度以下再打开,否则冷热空气交替,玻璃器皿容易炸裂或发生烫伤事故22.为什么干热灭菌比湿热灭菌所需温度高时间长在湿热条件下,有水蒸汽的作用：a高温水蒸汽导热比干空气要快；b高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程；c高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜,直接进入细胞内破坏细胞；d高温水蒸汽能水解一部分细胞结构,加速导热.湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低；湿热的穿透力比干热大；湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2．26kJ千焦的热量.这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力.23.设计实验方案,比较干热灭菌和湿热灭菌的效果.以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件和等量原则.一实验材料试管镊子酒精灯嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC7053菌片纸片与菌片同大小同材料溴甲酚紫蛋白冻水培养基已灭菌等实验材料材料有余.二对照组取9支洁净试管,分为A1B1C1三组每3支一组,将A1组中放入菌片,B1组中放入纸片,C1组中什么也不加；不经灭菌,直接加入溴甲酚紫蛋白冻水培养基等量.三恒为培养将上述所有试管按分组在56℃恒温条件下培养48小时.24.如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养请写出实验的主要步骤纯培养的确定除观察其菌落特征外,还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定,有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到.25.配制牛肉膏蛋白胨培养基,有哪些操作步骤那几步易出错,如何防止称取药品—加热溶化—分装—加棉塞—包扎—灭菌—搁置斜面易出错的步骤有：a称取药品称取时钥匙专用,瓶盖不要错盖,易吸水的药品要快速称取；b加热溶化加入药品后要用玻璃棒不停搅拌,以免糊底在琼脂熔化过程中,应控制火力,以免培养基因沸腾而溢出容器,同时,需不断搅拌,以防琼脂糊底烧焦.；c分装分装时培养基不能粘在三角瓶或试管口,以免接种时染菌；d搁置斜面斜面长度约试管长度一半为宜.26.平板菌落计数法的原理是什么它适用于那些微生物的计数平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞.统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数.但是,由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞.因此平板菌落计数的结果往往偏低.现在常使用菌落形成单位.平板计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个微生物繁殖而形成的现象进行的,也就是一个菌落可代表一种微生物并不绝对.通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量.8、微量移液器的最小量程太大,在加样时,容易加多,使盖玻片鼓起,血球计数板所技术的体积变大,最终结果偏大.改进：用量程的小的微量移液器并少加一些.27.如果一项科学研究内容需从自然界中筛选到能产生高温蛋白酶的菌株,你将如何完成写出实验方案产蛋白酶菌株在酪素平板上能形成降解酪素透明圈.以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件一材料准备 1 土壤有机质特别是蛋白质含量丰富的土壤2 灭菌生理盐水%NaCl3 灭菌移液管4 添加酪素的B—4牛肉膏蛋白胨完全培养基经灭菌5 B—4斜面经灭菌6 其他材料：接种环酒精灯等二操作方法1在盛有10ml灭菌生理盐水的烧杯中添加1g土壤,配成悬浮液；2 稍静止后,用灭菌移液管移取部分上清液,将其制成10^4—10^6倍的稀释液；3 用灭菌移液管吸取各稀释液用稀释倒平板法或涂布平板法将其接入添加酪素的B—4平板上；4 在55—65℃下培养1—2天；5 挑取形成降解酪素透明圈的菌落透明圈直径D与菌落直径d之比较大者,转接入B—4斜面上培养；若无特定菌落形成,则需另取土样从开始重复试验6 将B—4斜面上的菌落再用平板纯培养,依次重复2—3次后即可得到纯培养镜检；7 纯培养细菌中蛋白酶的提取及活性鉴定摇瓶培养若提取蛋白酶及其活性正常,则纯培养成功,否则,重取土样重复以上实验.28.为什么熔化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板低于这个温度琼脂会凝固,温度过高,如果是做倾倒琼脂做菌落计数,会杀死一部分细菌,如果只是只是制备琼脂平板,那么温度太高就进行倾倒会导致琼脂凝固后偏软,水汽过多.29.要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键为什么1 无菌操作2 稀释良好,不会太浓或太稀.3 菌落生长时间控制好,不会长的太大不便区分,也不至于太小影响计数.30.当你的平板上长出的菌落不是均匀分散的而是集中在一起时,你认为问题出在哪里1.太浓2.没涂匀31.用倾注法和涂布法计数,其平板上长出的菌落有何不同为什么要培养较长时间48h后观察结果倾注法是在培养皿中接种好样品之后,倾注琼脂并培养；而涂布法则是在琼脂表面接种并使用L型棒涂布.因此,倾注法的菌落将出现在琼脂的各个部位,包括底层和中层,但涂布法培养后形成的菌落只出现在琼脂表面.32.你如何解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶答：①淀粉是大分子物质,进入细胞十分困难,甚至需要高耗能的胞吞作用.因而通过胞外酶的作用,将淀粉水解为葡萄糖后运入细胞,较方便高效.②试验中出现透明圈,说明培养基内淀粉被水解,可推测是细菌产生的胞外的淀粉酶起的作用.33.不利用碘液,你能否证明淀粉水解的存在答：由于淀粉水解生成葡萄糖,即多羟基醛,因此可利用醛的性质进行检验,如银镜试验,斐林试验等.呈阳性者,说明产生了葡萄糖,淀粉被水解；阴性者说明淀粉未被水解.34.假如某些微生物可以有氧代谢葡萄糖,发酵试验应该出现什么结果答微生物有氧代谢葡萄糖产气不产酸,因此发酵结果是小管中生气泡但是溶液不变黄.35.解释在细菌培养中吲哚检测的化学原理,为什么在这个试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸答：化学原理：有些细菌产生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚和丙酮酸.吲哚与对二甲基氨基甲醛结合,形成红色的玫瑰吲哚.但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力,因此吲哚试验可以作为一个生物化学检测的指标.因为丙酮酸是生物体呼吸作用的产物,无论是有氧还是无氧,都会产生丙酮酸,因而无法作为色氨酸酶活性的指示剂进行区分.同时吲哚能通过有明显颜色变化的化学反应观测到,而丙酮酸不能,所以试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸.36.为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性,而产气杆菌为阴性答：当细菌代谢糖产生酸时,培养基就会变酸,使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色转变为红色,即甲基红反应.而大肠杆菌和产气肠杆菌在培养的早期均产生有机酸,但大肠杆菌在培养的后期仍能维持酸性PH4,而产气肠杆菌则转化有机酸为非酸性末端产物,如乙醇、丙酮酸等,使PH升至大约6.因此,大肠杆菌为阳性,产气肠杆菌为阴性.37.用紫外线进行诱变时,为什么要打开皿盖为什么要在红光灯下操作紫外线不容易穿透玻璃,所以打开盖,自然光下容易光复活,红光下不会所以在红光下操作。
微生物思考题
1. 微生物：是一切体形微小，单细胞或个体结构简单的多细胞，甚至没有细胞结构的低等生物的统称。
2. 种（species）：是一个基本分类单位；是一大群表型特征高度相似、亲缘关系极其接近，与同属内其他种有明显差别的菌株的总称。
3. 菌株（strain）: 表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体及其一切后代菌株强调的是遗传型纯的谱系4. 微生物分类：原核生物：酵母菌、霉菌、原生动物、单细胞藻类真核生物：真细菌(放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、蓝细菌)、古细菌非细胞结构生物：病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)1. 观察细菌形态时，为什么要用染色法，常用的染色方法有几种？一般微生物菌体小且无色透明，在光学显微镜下细胞体液及结构的折光率与其背景相差很小，因此用压法或悬滴法进行观察时，只能看到其大体形态和运动情况，若要在光学显微镜下观察其细致形态和主要结构，一般都需要对他们染色，从而借助颜色的反衬作用提高观察样品不同部位的反差。
细菌染色法：活菌：用没蓝或TTC等做活菌染色死菌：负染色和正染色：简单染色法和鉴别染色法（革兰氏染色法、抗酸性染色法、芽孢染色法、）2. 图示细菌细胞模式图，并注明各部分名称3. 原生质：通过溶菌酶去除细胞壁或使用青霉素抑制细胞壁合成，而得到的仅有细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞。
4. 球状体：还残留着部分细胞壁的圆球状渗透敏感细胞5. L型细菌：通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株。
6. 支原体：在长期进化过程中形成后适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物7. 糖被：包被于某些细菌细胞壁外地一层厚度不定的胶状物质被称糖被8. 芽孢：某些细菌子啊某生长发育后期，在细胞，内形成一个圆形或椭圆形，厚壁含水量极低抗逆性极强的休眠体9. 伴孢晶体:少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁边形成一个菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体称伴胞晶体。
10. 菌落:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长繁殖带一定程度可以形成肉眼可见的，有一定形态结构的子细胞生长群体。
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第一章细菌的形态与结构
1.细菌有哪3种形态
2.细菌的基本结构和特殊结构有哪些特殊结构各有何作用
+菌和G-菌细胞壁的结构由哪几部分组成
4.青霉素和溶菌酶为什么不能杀灭革兰阴性菌
5.简述革兰染色法操作步骤
参考答案
1 基本形态三种：球菌；杆菌；螺形菌
2基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质
特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞
荚膜功能：抗吞噬作用：是病原菌的重要毒力因子
抗杀菌物质损伤：如溶酶体、补体
粘附作用：形成生物膜与致病性有关
鞭毛功能；有鉴别意义,
鞭毛蛋白有抗原性：H抗原
某些细菌的鞭毛与致病有关
菌毛功能：细菌的黏附结构
介导细菌在局部定植
与细菌的致病性密切相关
性菌毛还能传递细菌的毒力和耐药性
芽孢功能：具有很强的抗高温、抗干燥、抗化学消毒剂和抗射线能力
3 革兰阳性菌：由肽聚糖和磷壁酸组成。
其中肽聚糖又由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成三维立体结构。
革兰阴性菌：由肽聚糖和外膜组成。
肽聚糖仅由聚糖骨架、四肽侧链构成二维平面结构
4 G-有外膜阻止抗菌素进入；保护细胞壁组分肽聚糖不受溶菌酶分解
5 革兰染色法步骤：
涂片→固定→结晶紫初染→碘液媒染→95%酒精脱色→复红复染
观察结果：Ｇ＋菌：紫色Ｇ－菌：红色
第二章细菌的生理
2.细菌生长曲线分哪4个阶段
3.细菌根据对氧的需要程度分为哪几种类型
4.细菌合成代谢产物有哪几种
5.常用的消毒剂有哪些种类
6.简述化学消毒剂的杀菌机制
7简述紫外线杀菌的作用机制
8.在温度和时间相同的情况下，为什么湿热灭菌法的效果比干热法好
参考答案
2.迟缓期、对数期、稳定期、衰退期四阶段
3．专性需氧菌2）专性厌氧菌3）兼性厌氧菌4）微需氧菌
4．源质、毒素和侵袭性酶、抗生素、细菌素、维生素、色素等
5．①酚类②醇类③重金属盐类④氧化剂⑤表面活性剂
6.①使菌体蛋白质变性或凝固②破坏细菌的酶系统③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通透性，导致细菌死亡7．其波长在200-300nm有杀菌作用，其中以265-266nm最强，这与细菌DNA吸收光谱一致。
细菌DNA吸收紫外线后，使一DNA条链上两个相邻胸腺嘧啶公假结合成二聚体，改变了DNA分子构型，干扰了DNA 的复制和转录，导致细菌变异或死亡。
8.①温热中细菌菌体蛋白较易凝固②湿热的穿透力比干热大③湿热的蒸汽有潜热
第四章噬菌体
1. 噬菌体的概念及其特征。
2.毒性噬菌体和温和噬菌体、前噬菌体、溶原性细菌、溶原性转换的概念及特征。
3.溶菌性周期与溶原性周期的区别
4.什么是质粒有什么特征
5.基因转移与重组的方式有哪些
参考答案
1噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称
特征：1分布广泛
2只有一种类型的核酸，即DNA或RNA
•3体积小，可通过细菌滤器
•4不具有独立的酶系统，必须在活的宿主细胞内才能增殖, 专性细胞内寄生
•5有严格的宿主特异性
2毒性噬菌体：能在宿主菌内以复制的方式增殖，产生许多子代噬菌体，并最终使宿主菌裂解。
温和噬菌体：将其基因组整合到宿主菌的核酸中，并随宿主菌核酸的复制而复制，且伴宿主菌分裂而分配到两个子代菌细胞中的噬菌体。
前噬菌体：整合在宿主菌核酸上的噬菌体基因组
溶原性细菌：带有温和噬菌体基因组的细菌
溶原性转换：前噬菌体的基因有时会在溶原性细菌中表达，从而导致宿主菌获得新的性状
3溶菌性周期会造成细菌裂解死亡而溶原性周期不会
4. 质粒：细菌染色体外的遗传物质，是环状闭合的双链DNA。
带有遗传性息，能自行复制，随细菌分裂转移到子代细胞，并非细菌生长所必需。
5. 细菌基因转移和重组分为转化、转导、接合和溶源性转换
第九章球菌
1、简述葡萄球菌、链球菌的分类及意义。
2、简述葡萄球菌的重要致病物质和所致疾病。
参考答案
1葡萄球菌据色素、生化反应分金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌；根据有无凝固酶分：凝固酶阳性菌株、凝固酶阴性菌株；还可根据核酸分析的遗传学分型。
意义：
链球菌1) 根据溶血现象分类: 甲型溶血性链球菌，乙型溶血性链球菌，丙型链球菌；2）抗原结构分类：A—H,K—V20个群；3）据生化反应分类。
意义：
2致病物质：金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。
①侵袭性酶：血浆凝固酶；
②外毒素：葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1(TSST-1);
③表面结构或蛋白：如粘附素、荚膜、肽聚糖和SPA等。
所致疾病
皮肤化脓性感染
侵袭性疾病（化脓性感染）各种器官的化脓性感染
全身感染——引起败血症和脓毒血症
食物中毒（肠毒素）
毒素性疾病烫伤样皮肤综合征（表皮剥脱毒素）
毒性休克综合征（毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)
第十章肠杆菌科
2大肠埃希菌肠最常见的外源性感染有哪几种
3归纳志贺菌所致疾病.
4简述肥达反应的原理.
第十四章分支杆菌
1.简述结核分枝杆菌的主要生物学特性
2.简述结核菌素试验原理、结果判断及意义
3.简述结核病的预防及抗结核药物的治疗原则
4.何为卡介苗简述卡介苗在实际工作中的应用及对其效果的评价
参考答案：
1.形态：细长略弯，有时呈分枝状，无芽胞、鞭毛和荚膜；染色：齐-尼（Ziehl-Neelsen）抗酸染色阳性（被染成红色）, 其它细菌为蓝色；培养特性：专性需氧，营养要求高，生长缓慢，固体培养基上菜花状菌落，液体培养基菌膜状生长
2.原理：人类感染结核分支杆菌后，产生免疫力的同时也会发生迟发型超敏反应。
结果判断：阳性反应则表明集体已感染过结核分枝杆菌或卡介苗接种成功，对结核分支杆菌有迟发型超敏反应，并说明有特异性免疫力，强阳性则表明可能有活动性的结核病，阴性则表明受试者可能未感染过结核分支杆菌或未接种过卡介苗。
意义：（1）诊断婴儿的结核病（2）测定接种卡介苗的效果（30)在未接种卡介苗的人群作结核分支杆菌感染的流行病学调查（4）用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。
3.预防：广泛接种卡介苗能大大降低结核病的发病率。
婴儿因为免疫力低，为卡介苗接种的主要对象。
治疗：结核病的治疗在于控制疾病，促使病灶愈合。
常用抗结核药物有异烟肼（INH）、链霉素、对氨基水杨酸钠等。
且治疗过程中应对患者体内分离的结核分支杆菌菌株做药敏试验。
4.卡介苗：将有毒力的牛型结核分支杆菌在含胆汁，甘油和马铃薯的培养基中经过230次传代，使毒力发生变异，成为对人无致病，保持良好免疫原性的疫苗株
应用效果及评价：卡介苗是减毒活疫苗，因此剂型及苗内活菌数会直接影响免疫效果，另外卡介苗不能提供百分百保护，尤其对成年人结核感染保护率不高。
第十九章支原体
1、细菌L型与支原体在生物学性状方面有何相似之处其主要区别是什么
2、简述支原体形态结构的主要特征。
3、简述致病性支原体的种类及其致病性。
4、名词解释：支原体(mycoplasma)
参考答案
1支原体与细菌L型的异同点
相同点
固体培养—菌落呈荷包蛋样或颗粒状。
缺乏细胞壁，形态多样，能通过滤菌器。
临床表现相似—间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等
不同点
2 形态:原核生物中最小～μm)无细胞壁,高度多形性:球,杆,丝状和分枝状等, G-,不易着色,一般Giemsa染色较好,染为淡紫色。
结构：内外两层为蛋白质及糖类,中层为脂类（磷脂为主,固醇占36%）,凡作用于胆固醇的物质,如皂素,毛地黄甙,二性霉素B等均能破坏细胞膜致其死亡。
特殊的顶端结构：粘附宿主上皮细胞表面，与支原体的致病有关。
3主要有肺炎支原体、溶脲脲原体、人型支原体、生殖支原体、穿透支原体和发酵支原体。
肺炎支原体引起原发性非典型性肺炎;溶脲脲原体、人型支原体和生殖支原体可引起泌尿生殖系统感染和不育症;穿透支原体和发酵支原体为艾滋病的辅助致病因素
4支原体：是一类缺乏细胞壁，呈多形性能通过除菌滤器, 能在无生命培养基中独立生长繁殖形成有分支长丝的最小原核细胞型微生物
第二十章立克次体
1.立克次体的概念及点有哪些
参考答案
1立克次体是一类生物学性状介于细菌与病毒之间的、形态结构与细菌相似，生活要求接近于病毒，严格细胞内寄生，并以节肢动物为媒介传播疾病的原核生物界微生物。
1.多数引起自然疫源性疾病,大多是人系畜共患病病原体。
2.以节肢动物作为传播媒介或储存宿主
3.大小介于细菌和病毒之间
4.有细胞壁，形态多样以球杆状为主，革兰阴性
5.多数专性细胞内寄生，以二分裂方式繁殖.
6.对多数抗生素敏感
第二十一章衣原体
衣原体；一类能通过细菌滤器，严格在真核细胞内寄生，并有独特发育周期的原核细胞型微生物。
第十六章病毒学概述
1.病毒的基本特征
①个体微小②结构简单，无细胞结构③仅含有一种类型核酸（DNA或RNA）④因缺乏产生的能量的酶系
统，必须在易感的活细胞内寄生⑤以复制的方式增值⑥对抗生素不敏感
2.病毒的形态、结构
病毒的形态有多种类型，大多数病毒呈球形或近球形，少数呈杆状丝状体、弹状、传型和蝌蚪状。
结构包
括核心与外围的衣壳，构成核衣壳
3.病毒的增值过程
包括吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装、成熟和释放
4.病毒的感染与免疫
隐形感染、显现感染；机体抗病毒感染免疫包括非特异性免疫和特异性免疫。