利用酵母双杂交系统研究水稻条纹病毒三个功能蛋白的互作
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蛋白的酵母双杂交实验——以钓饵蛋白筛选cDNA 文库研究蛋白相互作用第一部分 系统简介1. 实验原理蛋白的酵母双杂交实验是以酵母的遗传分析为基础，研究反式作用因子之间的相互作用 对真核基因转录调控影响的实验。
很早就已知道，转录活化蛋白可以和DNA 上特异的序列结合而启动相应基因的转录反应。
这种DNA 结合与转录激活的功能是由转录活化蛋白上两个相互独立的结构域即DNA 结合结构域(Binding Domain, BD)和转录活化结构域(Activation Domain, AD)分别来完成的，并且这两个结构域对于基因的转录活化都是必须的。
目前酵母双杂交实验采用的系统有LexA 系统和Gal4系统两种。
在LexA 系统中，DNA 结合结构域由一个完整的原核蛋白LexA 构成，转录活化结构域则由一个88个氨基酸的酸性的大肠杆菌多肽B42构成，它在酵母中可以活化基因的转录; 在Gal4系统中，BD 和AD 分别由Gal4蛋白上不同的两个结构域(1-147aa 与768-881aa)构成。
在利用GAL4系统筛选cDNA 文库或研究蛋白间的相互作用时，DNA 结合结构域与靶蛋白即“诱饵”相结合，转录活化结构域与文库蛋白或要验证的蛋白相结合。
一般情况下，单独的BD 可以与GAL4上游活化序列（GAL UAS）结合但不能引起转录，单独的AD 则不能与GAL UAS 结合，只有当BD 与AD 分别表达的融合蛋白由于相互作用而导致两者在空间上相互靠近时，BD 与AD 才能与GAL UAS 结合并且引起报道基因的转录。
在BD 与AD 要导入的酵母菌AH109中，通过基因工程的方法在GAL4 UASs 和启动子的下游构建了3个报道基因——ADE2，HIS3，MEL1（或LacZ ），因此可以通过营养缺陷筛选和酵母菌表型的改变来筛选或验证两个蛋白之间是否存在相互作用。
GAL4系统的原理如图所示：图一：酵母双杂交系统工作原理Kan r Amp r pGBKT7-bait pACT2-cDNA2．系统特点同以往研究蛋白质—蛋白质之间相互作用的实验手段相比，双杂交系统具有其独特优势。
酵母双杂交的原理和应用
酵母双杂交的原理和应用前言酵母双杂交技术是一种常用的分子生物学实验方法，用于研究蛋白质间相互作用。
本文将介绍酵母双杂交的原理和应用，并详细说明相关实验步骤和注意事项。
一、酵母双杂交原理酵母双杂交利用酵母细胞中的转录因子来检测两个蛋白质是否发生相互作用。
该技术包括两个主要步骤：酵母杂交库的构建和蛋白质相互作用的检测。
1.酵母杂交库的构建–首先，需要构建一个酵母细胞库，其中包含目标蛋白的编码序列，以及与之它相互作用的蛋白编码序列。
–这些蛋白编码序列被插入一个特殊的酵母表达载体中，该载体包含一个转录因子启动子和一个可变启动子。
当目标蛋白与与之相互作用的蛋白结合时，转录因子被激活，并启动报告基因的表达。
2.蛋白质相互作用的检测–将酵母杂交库与一个可能与目标蛋白相互作用的蛋白质编码序列进行杂交。
–利用筛选或选择的方法，检测是否存在转录因子的激活，从而判断蛋白质是否发生相互作用。
二、酵母双杂交的应用酵母双杂交技术在生物学研究中有广泛的应用，主要用于以下方面：1.蛋白质相互作用的筛选–酵母双杂交可以用于大规模筛选蛋白质间的相互作用。
通过构建酵母杂交库，并与目标蛋白进行杂交，可以鉴定潜在的相互作用蛋白，从而探索蛋白质间的相互作用网络。
2.功能区域的鉴定–通过酵母双杂交，可以鉴定特定的蛋白质功能区域。
例如，在研究某个转录因子的结构和功能时，可以利用酵母双杂交技术识别其与其他蛋白质相互作用的功能区域。
3.药物靶点的鉴定–酵母双杂交可以用于鉴定药物的靶点。
通过与已知药物相互作用的酵母杂交库进行筛选，可以发现与特定药物相互作用的蛋白质，进而确定药物的作用机制和潜在靶点。
4.疾病相关基因的鉴定–酵母双杂交还可以用于鉴定疾病相关基因。
通过与疾病相关蛋白相互作用的酵母杂交库进行筛选，可以发现与疾病发生发展相关的基因，从而揭示疾病的发病机制。
三、酵母双杂交实验步骤酵母双杂交实验包括以下步骤：1.构建酵母杂交库：–从样品中提取RNA或DNA片段；–将片段克隆到酵母表达载体中；–将载体转化至酵母细胞中。
3.互作蛋白筛选与验证平台(1 酵母双杂交操作步骤)
酵母双杂交筛选互作蛋白方法与注意事项金名捺提供（酵母菌储存在-70℃中，引物和质粒DNA储存在-20℃中）概念：1、次序转化：指的是先将一种质粒转化进酵母中（常是DNA-BD/baitplasmid）,在选择培养基中选择出阳性克隆，之后再将另外一个质粒（ADfusionlibrary）转化进去。
优点：就是比共转化使用更少的质粒DNA，也就是节约质粒DNA。
2、共同转化：将两种质粒一起转化进酵母中。
优点：比次序转化更容易操作。
pGBKT7的抗性选择物是：kanamycin（卡那霉素）pGADT7的抗性选择物是：ampicillin（氨苄西林）各种SD培养基：1）SD/-ade（腺嘌呤）/-leu（亮氨酸）/-trp（色氨酸）/-his（组氨酸）（1000ml）（四缺）酵母氮源（YNB）：6.7g；-ade/-leu/-trp/-hisDOsupplement：0.60g；葡萄糖：20g（即2%）；2）SD/-leu/-trp/-his（1000ml）酵母氮源（YNB）：6.7g；-leu/-trp/-hisDOsupplement0.62g；葡萄糖20g.（即2%）；3）SD/-leu/-trp（1000ml）酵母氮源（YNB）：6.7g；-ade/-leu/-trp/-hisDOsupplement0.64g；葡萄糖20g（即2%）；4）SD/-leu（1000ml）酵母氮源（YNB）：6.7g；-leuDOsupplement0.69g；葡萄糖20g（即2%）5）SD/-trp（1000ml）酵母氮源（YNB）：6.7g；-ade/-leu/-trp/-hisDOsupplement0.74g；葡萄糖20g（即2%）。
注意：YNB有两种，一种含有硫酸胺，另外一种不含硫酸胺。
我们这用的是含硫酸铵的。
（买来就加进去了的）。
如果不含硫酸铵，那么要在终浓度0.17%的YNB中再加入0.5%的硫酸铵，即最终在1000ml溶液中加入总量为6.7g的YNB与硫酸铵。
酵母双杂交文库筛选与蛋白互作验证服务
expressed 99.76%
65 Os02g46520 hydrolase, putative,expressed 95.22%
22 Os05g40180 serine/threonine-protein kinase stt7, chloroplast
precursor, putative, expressed 77.27%
克隆编号相似序列登录号蛋白功能描述相似百分比 56 Os02g50240 glutamine synthetase, catalytic domain containing protein,expressed 96.89%
67 Os06g40640 fructose-bisphospatealdolaseisozyme, putative,
酵母双杂mRNA分离―cDNA制备―cDNA连接A等 合相互作用蛋白： 服务内容： l 诱饵质粒的构建及自算及接 酵母双杂交等网站进行序 列比对，公布最终 详细的筛选报告和阳性克隆实物，客户需要提供诱饵基因信息。 3．酵母双杂交技术检测指定蛋白对之间的相互作用：技术服务内容： l 诱饵蛋白表达载体与猎物蛋白表达载体的构建 l 表达载体转化酵母的验证及自激活活性，毒性检测 l 诱饵蛋白质粒与猎物蛋白质粒共转化酵母的验证以及相互作用的检测 报告 l 无相互作用时诱饵和猎物蛋白的表达情况的Western blotting检测 合作方式： 为客户对指定的2个或多个蛋白之间进行酵母双杂交实验，验证其相互 作用。由客户提供基因克隆，抗体，或从公司购买抗体。实验完成后向 客户提供详细的实验报告和相互作用阳性的酵母共转化菌株。 部分实验案例图示
பைடு நூலகம்
在GAL4
UASs和启动子的下游构建了3个报道基因--ADE2，HIS3，
酵母双杂交原理ppt演示
当两个蛋白质之间发生相互作用时，DNA结合域和转录激活域之间的空间构象发生 变化，从而激活报告基因的表达。
酵母双杂交系统的应用领域
蛋白质相互作用研究
通过酵母双杂交系统可以检测蛋白质 之间的相互作用，为研究蛋白质的功 能和调控机制提供有力支持。
将诱饵蛋白基因克隆到表达载 体中，转化大肠杆菌进行表达。
通过亲和纯化技术，如镍柱亲 和纯化，分离纯化诱饵蛋白。
目的
• 制备钓饵蛋白，用于与诱饵蛋白进行相互作用筛 选。
目的
• 将诱饵蛋白和钓饵蛋白导入酵母细胞中， 通过相互筛选找到与诱饵蛋白相互作用的 蛋白质。
目的
• 验证筛选得到的阳性克隆是否真正与诱饵蛋白相互作用。
03 酵母双杂交系统的应用实 例
蛋白质相互作用研究
01 02
蛋白质相互作用研究
酵母双杂交系统能够用于研究蛋白质之间的相互作用，通过将两个蛋白 质分别与转录激活域和转录抑制域融合，观察它们之间的相互作用是否 会导致转录活性的变化。
验证已知相互作用
利用酵母双杂交系统可以验证已知的蛋白质相互作用，从而验证相关生 物学过程的机制。
缺点
由于酵母双杂交系统依赖于真核生物的转录调控机制，因此对于某些在酵母中 不表达或表达水平较低的蛋白质可能无法检测到相互作用。此外，酵母双杂交 实验也可能受到非特异性干扰因素的影响。
02 酵母双杂交系统的实验流 程
目的
• 制备诱饵蛋白，用于筛选与钓饵蛋白相互作用的蛋白质。
步骤
设计诱饵蛋白的基因序列，确 保其在大肠杆菌中表达，并具 有可纯化的标签。
昆虫学报第63卷第1-12期总目录
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C.BEATTIE，岑伊静174水稻条纹花叶病毒对介体电光叶蝉生长繁殖及取食行为的影响李吩，张洁，岳g,陈红燕，吴维，魏太云，贾东升181PVY侵染后烟草营养成分的变化及其对介体烟酚生长发育的影响陈茜，刘金燕，徐蓬军，刘英杰，董勇浩，臧云，蔡宪杰，任广伟191nC22矿物油及其与毗虫咻混用对柑橘木虱的室内毒力评价高晶，杨琼玉，冯耀恒，毛润乾199水稻施硅对白背飞虱刺吸和寄主选择行为的影响贾路瑶，刘丹丹，侯茂林207携带与未携带松材线虫的松墨天牛转录组差异表达基因分析李鸣宇，周娇，王海香，赵莉蔺218若虫生种及快速检测辛—，AtifMANZOOR，曹亮明，王小艺245家蚕miR-2769靶基因的鉴定及表达分析孙妍妍，王景娅，王露，李晓哲，阚云超，乔惠丽255亚洲玉米螟卵黄原蛋白基因的克隆、表达谱及对UV-A胁迫的响应刘芳，孟建玉，杨昌利，张长禹266学相关基因的转学高艳，朱雅楠，张威，王雪妍，李秋方，苏松坤，聂红毅278 285 381 390 401 413 421 433 439 523 533 545 655 667 679 688 697 708 717 779 788 798 807蚯蚓提取物对家蚕中肠氧化损伤、总抗氧化能力及抗氧化酶含量的影响徐麒麟，齐桂兰，蒋易龙，倪奎，陈亚迎，刘瀚扬，朱佳文，吴永胜雌性中华蜜蜂胚胎发育组织形态观察朱翔杰，徐新建，周姝嫡，郝振帮，陈琳，周冰峰松墨天牛漆酶基因的克隆、原核表达及表达谱分析陈昊，罗巧玉，马秋雨，初旭，袁超，刘颖，余伟，吴松青，王荣，梁光红，张飞萍，胡霞花椒窄吉丁气味结合蛋白基因AzanOBP/的克隆、原核表达及组织表达谱分析巩雪芳，杨平，王延来，郭莉，陈迪，谢寿安，呂淑杰小麦吸浆虫保幼激素酯酶和保幼激素环氧水解酶基因的克隆及在滞育和变态发育过程中的表达动态王晶晶，梁婷婷，成卫宁，朱克岩利用单感器记录与神经元示踪结合对棉铃虫主要性信息素感器内神经元投射的鉴定马百伟，刘晓岚，常亚军，谢桂英，陈文波，刘杨，赵新成，王桂荣合哑蝉成虫消化道形态、组织结构及超微结构（英文）钟海英，张雅林，魏琮有翅型和无翅型大豆酚卵巢和胚胎发育的差异许向利，仟均祥访花昆虫红腹毛蚊触角感器扫描电镜观察袁轲，朱慧，曲业宽，任炳忠，尤杨草地贪夜蛾雄性成虫和5龄幼虫的转录组比较分析廖永林，李燕芳，杨斌，赵华，高燕，陈伟平，蔡时可，王继华草地贪夜蛾热激蛋白基因S0sp9O的克隆及在高低温和UV-A胁迫下的表达分析周呂，孟建玉，杨昌利，李锦，胡朝兴，张长禹草地贪夜蛾幼虫对四种刺激物质的味觉感受和取食选择侯文华，孙龙龙，马英，孙惠婉，张佳佳，白润娥，赵新成，汤清波梨小食心虫生物钟基因Gmper和Gmtim的鉴定及其对羽化节律的影响方海波，张璟，刘小侠，张青文，李贞二点委夜蛾非典型嗅觉受体AlepOrcc的基因克隆、原核表达及多克隆抗体制备田彩红，刘晓光，黄建荣，王瑛，封洪强松毛虫赤眼蜂一氧化氮合酶基因的克隆、原核表达及在不同滞育阶段的表达谱分析姜雪冰，张雪，杜文梅，邹振，张俊杰低温下的表达基因姚丹，周姝嫡，周冰峰，徐新建，朱翔杰信息素雄性信息素受基因表达的刘俊峰，李茫，王子龙，何旭江，曾志将茶足柄瘤场茧蜂滞育和非滞育蛹中与能量代谢相关的差异表达蛋白刘敏，韩海斌，刘爱萍，高书晶，徐林波，岳方正，黄海广七星瓢虫触角转录组及嗅觉相关基因分析杨雪娇，张蔓，江宇航，唐启河，张棋麟，林连兵，陈均远褐飞虱丝氨酸蛋白酶抑制剂基因Nl S erpm4的克隆及表达模式分析王正亮，朱杭锋，潘海波，俞晓平沙葱萤叶甲表皮蛋白基因的鉴定及表达谱分析段天凤，李玲，马红悦，庞保平，单艳敏，张卓然家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂Bmserpin2对酚氧化酶原激活和抗菌肽基因表达的抑制作用李冰，孙帆，陶姗姗，夏家凤，叶崇军疆夜蛾Plus-2气味结合蛋白PsauOBP7的组织表达谱及配体结合特性分析孙亚兰，呂琪卉，杨海博，胡镇杰，李定旭，董钧锋817825 913 924 932 941 952 1039 1048 1059 1070 1159 1171 1287 1295 1305 1314 1325 1431 1441 1452! 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2936 470 558 565 574 582 590 843转录组分析揭示东方蜜蜂微抱子虫侵染意大利蜜蜂的分子机制耿四海，周丁丁，范小雪，蒋海宾，祝智威，王杰，范元婵，王心蕊，熊翠玲，郑燕珍，付中民，陈大福，郭睿三种跳虫肠道菌群的多样性分析及功能预测陈伟，陈霞，李娟，马欣然，崔薇，渠凤甜，谢桂林，赵红庆肠道细菌弗氏柠檬酸杆菌和产酸克雷伯氏菌对斑翅果蝇生长发育和物质代谢的影响高欢欢，覃冬云，代晓彦，刘洁，于毅家蚕微抱子虫海藻糖酶3的表达、定位及功能张轶岭，李俊昊，宁嘉兴，Bismark KYEI，沈中元利用酵母双杂交技术筛选鉴定与番茄环纹斑点病毒NSs蛋白互作的西花蓟马蛋白赵星月，陈建斌，王曙光，张晓林，穆野，魏辉，赵立华，陈永对，郑雪，陈勇，郑立敏，张洁昆虫病原真菌长抱蜡翰菌TF-2菌株对豌豆场的侵染过程和致病力张挺峰，王睿，刘长仲对桃酚高毒力的蜡（菌菌株筛选刘明科，闫芳芳，齐禹哲，黄岩，闫雪梨，钱逸彬，李茂业抱悬液浓度和宿主体型大小对球抱白僵菌对松墨天牛幼虫的致病力的影响郭涵，刘柱东，孙江华七氟菊酯和45菊酯对棉铃虫肠道菌群的影响姜笑维，关丹阳，李清亚，刘晓，Hongmei LEBYARLAY,贺秉军绿僵菌MaFZB3对橙带蓝尺蛾幼虫致病力及林间防治效果郑宏家蚕BmPGRP-S5蛋白的抑菌活性及其在细胞免疫中的作用陈雪，周虹，李晓凤，j阳，钟仰进，杨婉莹基于蜜蜂球囊菌纳米孔测序数据的基因非翻译区延长"SSR位点发掘及未注释基因和转录本鉴定杜宇，付中民，祝智威，王杰，冯睿蓉，王秀娜，蒋海宾，范元婵，范小雪，熊翠玲，郑燕珍，徐国钧，陈大福，郭基于第三代纳米孔测序技术的东方蜜蜂微抱子虫全长转录组构建及注释陈华枝，杜宇，范小雪，祝智威，蒋海宾，王杰，范元婵，熊翠玲，郑燕珍，付中民，徐国钧，陈大福，郭睿毒理与抗性八种新烟碱类杀虫剂对地熊蜂工蜂的毒性及风险评估王烁，谢丽霞，陈浩，吴光安，周浩，王瑜，于毅，郑礼，翟一凡，闫毅亚致死浓度4虫X和毒死脾对等钳赚蟻生长繁殖和解毒酶的影响杨娟生，丛林，王翠伦，侯栋元，周浩楠，于士将，成禄艳，雷双，傅云梅，程明明，冉春基于转录组的苹小卷叶蛾杀虫剂靶标及解毒代谢相关基因分析孙丽娜，张怀江，刘孝贺，仇贵生乙基多杀菌素对草地贪夜蛾幼虫的毒力及对其解毒酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响高祖鹏，郭井菲，何康来，王振营三种杀虫剂亚致死剂量对草地贪夜蛾细胞色素P450基因表达的影响张百重，苏%，卢留洋，甄丛爱，朱斌，李亚设，董文阳，汪耿，胥燕博，孔凡彬，刘润强，陈锡岭，高希武我国草地贪夜蛾田间种群有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂靶标基因a）B的基因型和突变频率李妍，龚丽凤，王欢欢，李曦，孙歌，谷少华，梁沛，高希武湖北四个地区草地贪夜蛾田间种群的杀虫剂敏感性及靶标突变检测郭志敏，邓晓倩，李静，袁茂钧，万虎，李建洪，马康生化学杀虫剂对草地贪夜蛾毒力的生物测定方法比较呂圣兰，王有兵，谷少华，梁沛，张雷，高希武转飞蝗j酸酯酶基因果蝇品系的构建及其在有机磷农药代谢解毒中的作用尹菲，杨洋，张徐波，张建珍，张建琴9611201 1473! 4654 63 309 317 327 334 343 482 494 597 604 613 759 851 861 973 981 992细胞色素P450基因AsGYP6Z2在中华按蚊45菊酯抗性维持中的作用韩宝珠，车林茸，陈晓洁，闫振天，乔梁，陈斌转crylAb/crylAc基因玉米Cry1Ab/Cry1Ac融合蛋白表达及对亚洲玉米螟的室内杀虫效果刘晓贝，（树雄，王振营，王月琴，王勤英，何康来绿豆胰蛋白酶抑制剂对绿豆象生长发育及体内解毒酶和保护酶活性的影响樊艳平，党海燕，王宏民，郑海霞，成小芳，张耀文，张仙红生态与害虫治理不同大豆品种上红绿两种色型豌豆酚的种群参数马亚玲，李春杰亚洲玉米螟交配率和交配次数与其日龄、性比和精巢大小的关系冯波，张万民，张丹，屈丽莉，孟威，王巍，王浩杰，杜永均黄翅绢野螟生物学特性及田间种群动态王政，张绍华，杨陈军，孟倩倩，孙世伟，高圣风，刘爱勤，杨嫡麦长管酚的低温适应性及陕西杨凌小麦田春季虫源分析许向利，何乐乐，俞晓婷，仟均祥日龄和交配状态对亚洲玉米螟雄蛾内生殖器特征的影响冯波，张万民，张丹，屈丽莉，孟威，王巍，王浩杰，杜永均川硬皮肿腿蜂在松褐天牛幼虫上的合作繁育行为赵琪，孟玲，李保平红火蚁入侵强度对本地蚂蚁群落物种的发现-支配权衡的影响燕迪，卢志兴，王庆，于潇雨，张念念，李巧，陈又清外来西方蜜蜂放蜂密度对云南罗平本地传粉蜂群落结构及物种多样性的影响胡晓玲，任晓晓，马方舟，孟柏达，张睿，黄永权，吴水菊，顾忠堂，吴军，董坤华北大黑鲫金龟引诱剂配方筛选及引诱效果评价李晓峰，李金桥，曹雅忠，尹姣，张帅，秦建辉，王思雨，陆俊姣，李克斌红火蚁巢穴土壤中生物碱成分分析李晓玲，陈立，方守国草地贪夜蛾幼虫在玉米和小麦上的取食和生长发育特性比较呂亮，李雨晴，陈从良，常向前，张舒，许冬，万鹏草地贪夜蛾对水稻和玉米的取食和产卵选择性与适合度邱良妙，刘其全，杨秀娟，黄晓燕，关瑞峰，刘必炮，何玉仙，占志雄草地贪夜蛾在浙江东阳田间玉米植株上的发生及防治策略韩海亮，章金明，徐红星，包斐，刘敏，赵福成，呂要斌，呂仲贤，王桂跃二化螟的多次交配及其对雌蛾产卵量的影响冯波，刘天伟，陆明红，钟玲，郭荣，刘万才，郭前爽，杜永均桃红颈天牛成虫的交配行为及对不同寄主植物的栖落和产卵选择性陈俊蓉，闫诗谣，曹丹丹，靖金蕊，张阔菅凯敏，马海峰，魏建荣粉小粉与间的汪雪敏，苗白鸽，彭艳琼黑刺粉虱危害对黄金芽茶叶生化成分含量及抗氧化酶活力的影响李程锦，宋长远，王鹏，陈珍珍，许永玉枣飞象对枣树植物挥发物的EAG和行为反应阎雄飞，刘永华，王亚文，李刚，景瑞，杨亚洁取食和交配对苹小吉丁飞行能力的影响马志龙，彭彬，卡德艳•卡德尔，阿地力•沙塔尔，张元明9991010 1081 1091 1101 1108 1117 1207 1215 1223 1234 1242 1358 1366 1482 1490 1497! 7385 97 354 502三种稻田常见螯蜂对半翅目害虫的寄主偏好性及控害作用何雨婷，何佳春，魏琪，赖凤香，杨中侠，傅强丝光绿蝇蛹壳颜色变化及其对死后间隔时间推断的意义王贺，唐晁，齐莉莉，董春楠，宋兆昱，任晓鹏绿原酸对美国白蛾幼虫生长发育和解毒相关蛋白活性的影响潘忠玉，莫夏娜，孟香，陈敏保幼激素类似物对烟场茧蜂生长发育、寄生率和蜕皮相关酶活性的影响白晶晶，顾钢，赖荣泉，周挺，吴晓婷，陈丹明，舒静烟场茧蜂寄生对烟酚生长发育和繁殖的影响陈丹明，顾钢，赖荣泉，周挺，白晶晶，陈志厚，吴晓婷变温对甘蓝夜蛾生长发育和繁殖的影响赵晨宇，李新畅，崔娟，高宇，史树森沿海拔梯度的表型可塑性影响银胶菊叶甲的取食效率和发育（英文）Daya Ram BHUSAL，Kishor Chandra GHIMIRE，Rekha UPADHYAY，Mahadev BISTA，Bhupendra KUMAR 基于EPG的三种刺吸式害虫在苹果苗上的取食行为比较周昊，李锤，滕子文，杜凌君，万方浩，周洪旭微波辐射对桃场生长发育和繁殖的影响张宣，易蓬，褚平富，袁向群，展恩玲，冷春蒙，李引，胡迪,李怡萍石蒜绵粉（在七种多肉植物上的生物学特性潘颖佳，崔旭红，邵峑，商啥武园林害虫大袋蛾在四种寄主植物上的繁殖潜能评估（英文）陈琪，王睿，魏亚娟，刘建军茶园周边景观格局对茶小绿叶蝉种群遗传结构的影响李金玉，牛东升，陈杰，尤士骏，尤民生温度对亚洲小车蝗成虫体内呼吸代谢相关酶和抗氧化酶活性的影响郭娜，高书晶，王宁，韩海斌，徐林波，董瑞文，娜仁满都呼，娜布其亚转基因抗除草剂大豆对大豆田节肢动物及杂草多样性的影响陈彦君，刘来盘，关潇，刘标东方绢金龟雌成虫对桃树挥发物的触角电位和行为反应张萌萌，陈宏潮，王文凯，陈立暗期5h不同波长LED光照对斜纹夜蛾生长发育及繁殖的影响钟春兰，陈苏泓，周小妹，翁如玉，肖国权，郑欢欢，涂小云湖北三峡库区兴山县昆虫多样性调查与评估郑晓旭，j能文，赵慕华，文栋，何帅洁，李雪梅，杨凤连，吴刚进化与系统学基于微卫星标记的中国东北地区灰飞虱遗传变异及种群遗传结构分析姜姗，王兴亚，王小奇基于mtDNA COI基因序列的中国柑橘果实蝇的分子鉴定及柑橘大实蝇种群的遗传多样性分析崔中翌，周琼，刘一鹏，司品法，汪洋通用引物双重PCR在节肢动物物种鉴定中的应用王彦坤，李天楚，粘景梓，陈思聪，郝志霞，姜金壮，黄大卫甜果蟻全线粒体基因组测序与分析赵亚男，李朝品基于线粒体16S rRNA基因的舟山群岛碧蛾蜡蝉种群遗传多样性分析李奎，周传江，梁爱萍512绿豆象幼虫虫龄的划分及末龄幼虫头部形态和感器观察崔小林，王宏民，张静，张仙红，郑海霞769基于mtCOI基因序列的中国葱斑潜蝇不同地理种群遗传多样性分析钟裕俊，杜素洁，潘立婷，王玉生，王福莲，刘万学870基于GC-MS的异翅亚目臭腺分泌物化学分类学分析张嫣，夏炎，陈企发，卜文俊1016基于线粒体基因组序列的鞘翅目肉食亚目水生类群系统发育分析田天，袁缓，陈斌1028绿眼赛茧蜂线粒体基因组全序列测定和分析王丹阳，王予形，于良斌，韩海斌，徐林波，崔艳伟，康爱国，庞红岩1125斑衣蜡蝉雌性生殖系统超微结构刘佳宁，秦道正1260湖南龙山不同海拔中华蜜蜂种群遗传多样性的微卫星DNA分析徐浩，陈孝梅，蔺哲广，吉挺1377基于线粒体基因和核基因的中华虎凤蝶指名亚种地理种群遗传分化分析向颖，董婉未，蒋国芳，洪芳，张佑祥，张文武1385云南锦斑蛾成虫触角、喙管和踰节感器超微结构李根层，赵昱杰，李嘉莉，鲁国艳，刘乃勇1508薜荔榕小蜂幼虫虫龄的划分包甜甜，陈友铃，吴文珊，吴婷婷，张兴坦，周莲香1516中国北方黑唇苜蓿盲蜻种群遗传多样性和遗传分化分析王梦琦，张利娟，张宏瑞，孙跃先1525基于线粒体基因序列的中国橙黄豆粉蝶遗传分化和谱系生物地理研究（英文）陈可可，罗阿蓉，王运良，司成才，黄敦元，苏成勇，郝家胜，朱朝东综述104昆虫多巴胺及其受体的研究进展及展望徐刚，叶恭银229植物病媒昆虫的翅型分化俞金婷，陈小芳，任应党，崔峰235柑橘木虱蜜露排泄机制:进展与展望舒本水，吴仲真，崔扬，林家豪，林进添365昆虫气味结合蛋白的研究进展杜亚丽，徐凯，赵慧婷，刘玉玲，牛庆生，姜玉锁624我国草地贪夜蛾的生物学、生态学和防治研究概况与展望梁沛，谷少华，张雷，高希武889节肢动物内共生菌WolbacCia的研究进展朱翔宇，尤士骏，刘天生，张玲，尤民生902双翅目害虫性别分离技术的研究进展及展望彭威，李云欣，翁诗函，周若涵，潘熙，李佳洋，韩宝瑜1136雄性棉铃虫感受性信息素的分子和神经机制研究进展刘晓岚，尹新明，王桂荣，赵新成1145树木病虫害缺陷精准检测方法的综述和展望，姜，刘，，李，玲1268昆虫着色及体表黑色斑纹和斑点形成机制研究进展高云，梁燕婷，留怡勤，徐豫松，王华兵1276纳米杀虫剂及其在农业害虫防治中的应用张大侠，潘寿贺，白海秀，杜江，刘峰，侯有明1399昆虫离子型受体及其功能研究进展郭金梦，董双林1411景观基因组学的研究进展及其在害虫综合治理中的应用陈燕婷，尤士骏，柯富士，刘天生，李建宇，尤民生1536昆虫嗅觉中枢系统对外周信号的整合编码研究进展刘伟，王桂荣1546蛾类性信息素受体研究进展曹松，刘杨，王桂荣简报639不同地区田间草地贪夜蛾卵巢的结构和发育冯波，郭前爽，毛必鹏，钟玲，宋建辉，肖明徽，杜永均649东亚小花蜻对草地贪夜蛾1龄幼虫的捕食能力代晓彦，王瑜，翟一凡，周浩，李丽莉，郑礼，陈浩1153取食不同寄主植物的桃小食心虫飞行能力龚强，宫亚军，曹利军，郑小锤，蒲德强，黄琼，魏书军ACTA ENTOMOLOGICA SINICA Vol.63No.1-12GENERAL CONTENTSINTRODUCTION123Plant pathogen-insect vector interactions:research progress and prospectsYAN Feng-MingRESEARCH PAPERS!Physiology and BiochemistryI Expression of glutathione S-tronsferose gene LsGSTe；and ito relationship with ethyl formate tolerance in the cigarett ebeetle,Lasioderma s&ricome(Coleoptere：AnobiiPae)YAN Y,XU Kang-Kang,YANG Hong,HU Da-MPg,YANG Wen-JioII Ultrastractura of aduf compound eyes of Manulea affineola(Lepiooptere：Erebidae：Arctiinae) CHEN Qing-Xiao131Identification of the IKK related genes and their antivirel roles in response te Rice stripe vims infection in Laodeiphax striatellus(Hemiptero：DelphaciOae)LU Yan-Hua,LU Gang,QI Yu-Hua,YE Zhuang-Xin,LI Jun-Min,CHEN Jian-Ping142RNAi ot the calcium-Xinding protein gene and ite biological effects in Bemisia tabaci MED(Hemiptero:AleyrodiOae)GUO Lei,PAN Zheng-Yuan,LIU Jio-Xin,HAN Ming-Xuan,CHU Dong149Primer screening and amplification protocol optimization ot ropiO detection technique for Cucurbit chlorotic yellows vimusWANG Ke,HE Yan-Yan,ZHANG YouXun,WU Qing-Jun,WANG ShaoXi159Development and application ot a TaqMan real-time fluorescent quantitative PCR method to opid detection of Tomatc chlorosis vimsWANG Ji-Cheng,LI Jie,DING Tian-Bo,CHU Dong166Comparison of feeding behaviors and pathogen acquisition rotes of adults and the5th inster nymphs of Diaphobna citoi (Hemnpeeea：Lnv n d ae)onhuangeongbnngXnneeceedcneeus peanesWU Tian-Xu,ZHANG Xu-Ying,George A. C.BEATTIU,CEN Yi-Jing174Eff e cte of Rice stripe mosaic vims on the growth,reproduction and feeding behavioo of the vectoo Recilia dorsalis(Hemnpee0a：Cncade e ndae)LIPan,ZHANG Jne,YUEYue,CHEN Hong XYan,WUWen,WEITanXYun,JIADongXSheng181Changes in the nutrient composition of tobacco plants aftar Potato vims/infection and their effects on the growth and development of the vector Myzus persicae(Hemiptero：AphidiOae)CHEN Xi,LIU Jin-Yan,XU Peng-Jun,LIU Ying-Jio,DONG Yong-Hao,ZANG Yun,CAI Xian-Jio,REN Guang-Wei 191Evaluation of laborotoo texicitios ot nC22agriculturai mineroe oil and its mixture with imiOaclopriO against the Asiancitros psylliO,Diaphorina ciai(Hemiptero：LiviiOae)GAO Jnng,YANG QnongXYu,FENG YaoXHeng,MAO RunXQnan199Effecte ot silicon amendment to rice on piorcing and host selection behaviors ot the white-Xacked planthoppee, Sogatell o fumifem(Hemiptero：DelphaciOae)JUALuXYao,LUUDanXDan,HOUMaoXLnn207Tronscriptome analysis ot differentially expressed genes in Monochamus aOamatus(Coleoptere：CeombyciOae) carying and without car o Pg pine wood nematode(Bursaphelonchus xylop h ilus)LUMnngXYu,ZHOUJnao,WANG HanXXnang,ZHAO LnXLnn218 245 255 266 278 285 381 390 401 413 421 433 439 523Genetic differences among geographical populations and rapid early detection of a nymphal parasitoid of Lycormadelicatula(Hemiptora：Fulgoridae)XIN Bei,Atif MANZOOR,CAO Liang-Ming,WANG Xiao-YiIdentification and expression analysis of mid-2769target gene in Bombyx mo+SUN Yan-Yan,WANG Jing-Ya,WANG Lu,LI Xiao+he,KAN Yun-Chao,QIAO Hui+iCloning and expression profiling of vitellogenin gene and its response to UV-A stress in Ostrinia fumacalis (LepiOoptore：CrembiOae)LIU Fang,MENG Jian-Yu,YANG Chang-U,ZHANG Chang-YuTrenscriptomic analysis of learning and memo0-relatod genes in nurses of Apis mellifem Hgustica(Hymenoptore：Apndae)GAO Yan,ZHUYa+Nan,ZHANG Wen,WANG Xue+Yan,LAQnu+Fang,SU Song+Kun,NAEHong+YnEff e cto of eartOworm extrect on toe oxiOative damage,total antioxiOant capacity and antioxiOant enzyme contento in tOe midgut of the silkworm&Bombyx momXU Qi+in,QI Gui+an,JIANG Yi-2ong,Nl Kui,CHEN Ya-Ying,LIU Han+ang,ZHU Jio-Wen,WU Yong+heng Histomorphological obseeation ot the embeonic development ot female Apis cemna cemna(Hymenoptore:ApiOae) ZHU Xiang-Jio,XU Xin-Jian,ZHOU Shu-Jing,HAO Zhen-Bang,CHEN Lin,ZHOU Bing+engMolecular cloning&prekaeotic expression and expression prefiling of the laccase gene MaLac；in Monochamus afematus(Coleoptore：Cerembyciaae)CHEN Hao,LUO Qiao-Yu,MA Qin-Yu,CHU Xu,YUAN Chao,LIU Ying,YU Wei,WU Song-Qing,WANG Rong, LIANG Guang-Hong,ZHANG Fei-Ping,HU XiaCloning,prekaeotic expression and tissue expression prefiling of odorent binding pretein gene AzanOBF?frem Aghius zantUoxylumi(Coleoptore：Buprestiaae)GONG Xue+ang,YANG Ping,WANG Yan+ai,GUO Li,CHEN Di,XIU Shou+n,LV Shu-JiaCloning of juvenile hormone estorese and juvenile hormone epoxiae hydrolase genes and their expression dynamicsduring diapause and metamorphosis in Sitodiplosis mosellana(Diptore:CeciOomyiiaae)WANG Jnng+Jnng,LUANG Tnng+Tnng,CHENG Wen+Nnng,ZHUKe+YanPrejection of major pheremone tuned olfactory receptor neurens of Hefcovema armigem(LepiOoptore:Noctuiaae) eeveaoedby usnngsnngoesensn um eecoednngandsoannnngMA Bai-Wei,LIU Xiao+an,CHANG Ya-Jun,XIE Gui-Ying,CHEN Wen+o,LIU Yang,ZHAO Xin-Cheng,WANG Gun+RongMorphology,histology and ultrastructure of ie alimentory canal of ie adult muto cicada&Kamnia caelatato (Hemiptere：Cicadiaae)(G English)ZHONG Han+Ynng,ZHANG Ya+Lnn,WEUCongDifferences in ovarian and embryonic development between alate and aptoreus morphs of ie soybean aphia&Aphis gtycces(Hemiptora：Aphidiaae)XU Xna$g+Ln,WU Ju$+X na$gObservation of antennal sensill a of flower-visiting insect Bibis mfiventas(Diptore:Bibionidae)wit scanning electren mnceoscopeYUAN Ke,ZHU Hui,QU Ye-Kuan,REN Bing+hong,YOU YangComparative analysis of ie trenscriptomes of male adult and ie5i instor larva of Spodoptom Uhgipeha (Lepndopoeea：Nocoundae)LUAO Yong+Lnn,LUYan+Fang,YANG Bnn,ZHAO Hua,GAO Yan,CHENWen+Pnng,CAUShn+Ke,WANG Jn+Hua533 545 655 667 679 688 697 708 717 779 788 798 807 817 825Cloning of heat shock protein gene SfHspQ Z and its expression under high and low temperature and UV-A stresses in Spodoptera f+giperda(LepiOoptsra:NoctuiOae)ZHOU Lu,MENG JianAu,YANG Chang-Ai,LI Jin,HU Chao-Xing,ZHANG Chang-AuGustatory perception and feeding preference of Spodoptera fagpe+a(Lepidoptera：Noctuidae)laoae ts four stimuli HOU Wen-Hua,SUN Long-Aong,MA Ying,SUN Hui-Wan,ZHANG丿也+诅，BAI Run-E,ZHAO Xin-Cheng,TANG Qing-BoIdentification of circadian clock genes Gmper and Gmtim and tUeir contributions to tUe emergence rhythm in GraphoHte moleste(Lepiaoptere:Tortriciaae)FANG Hai-Bo,ZHANG Jing,LIU Xiao Ain,ZHANG Qing-Wen,LI ZhencDNA cloning,prekagotic expression and polyclonai antinody preparetion of the olfoctoe receptor co-receptor AlepOrco from Attetip lepipone(Lepiooptere：Noctuidae)TUANCanAHong,LUUXnaoAGuang,HUANG JnanARong,WANG Ynng,FENG HongAQnangMolecular cloning and prokaeotic expression of nitric oxole syntOase gene Oom Trphogramma dendralimi (Hymenoptere：TrichogremmatiOae)and its expression prefiling acress different diapause stagesJIUNG Xue-Bing,ZHANG Xue,DU Wen-Mei,ZOU Zhen,ZHANG Jun-JioTrend analysis of differentially expressed genes in prepupae of Apis mellifera ligustica under low temperature stress YAO Dan,ZHOU Shu-Jing,ZHOU Bing-Aeng,XU Xin-Jian,ZHU Xiang-JiaEff e cts of queen mandiOular pheremone on ie expression of candiOate sex pheremone receptor genes in honeybee deonesLIU Jun-Aeng,LI Mang,WANG Zi-Aong,HE Xu-Jiang,ZENG Zhi-JiangDifferentially expressed preteins associated wii energy metabolism in diapause and non-Aiapause pupae of Lysiphlebus testaceipes(Hymenoptere：BreconiOae)LIU Min,HAN Hai-Bin,LIU Ai-Ping,GAO Shu-Jing,XU Lin-Bo,YUE Fang-Aheng,HUANG Hai-Guang Analysis ot ie antennal trenscriptome and olfaction-related genes ot Coccinell e septempunctate(Coleoptere：Coccnne o ndae)YANG Xue-Jiao,ZHANG Man,JIANG Yu-Hang,TANG QOHe,ZHANG Qi-Ain,LIN Lian-Bing,CHEN Jun-Auan Cloning and expression prefiling of ie serine pretease Ohibitor gene Nlserpir.in ie brewn plantUopper,Nilapa+ate eugens(Hemnpeeea：Deophacndae)WANG ZhengALnang,ZHUHangAFeng,PAN Ha nABo,YUXnaoAPnng Udenenencaenonandexpeessnonpeoenonngoecuencuoaepeoeenngenes nn Gaeeaucadauapca(Cooeopeeea：Cheysomeondae) DUAN Tnan AFeng,LULnng,MAHongAYue,PANG BaoAPnng,SHAN Yan AM nn,ZHANG ZhuoARanInhibition o O ie activation of prophenoO oxiOase and ie expression oe antimicrobiaO peptiOe genes by ie serine pretease inhibitor BmserpOV in Bombyx mopLUBnng,SUN Fan,TAO ShanAShan,XUAJnaAFeng,YEChongAJunTissue expression prefiling and ligand binding charecterization oe ie Plus-C odorent binding pretein PsauOBP7oe Pead+ma saucia(LepiOoptere：NoctuiOae)SUN Ya-Aan,LV Qi-Hui,YANG Hai-Bo,HU Zhen-Jia,LI Ding-Xu,DONG Jun-AengDnscoveey andchaeaceeenzaenonoeanendogenous eeeeovneaoeoemene,PxERV,nnehegenomeoeehednamondback moeh,Peuee e a xyeosee e a(Lepndopeeea：Pouee o ndae)WANG Yue,LU Cong,LIU Tian-Sheng,CHEN Shao-Ping,YOU Min-Aheng Udenenencaenonoepeoeenns nnehe)ueoe Tsaee+mes ampeceps(Usopeeea：Rhnnoeeemnendae)SU Li-Juan,WU Zhi-Wei,GAO Xin-Hao,ZHAO Peng-Aei,XIAO Yuan-Ai,CHU Jun-Peng,SONG An-Dong。
酵母双杂交系统原理
酵母双杂交系统原理酵母双杂交系统是一种常用的蛋白质相互作用研究方法，它通过酵母细胞内两个蛋白质的相互作用来筛选出蛋白质间的相互作用关系，从而揭示细胞内蛋白质相互作用的网络。
酵母双杂交系统的原理主要包括构建酵母表达载体、转化酵母细胞、筛选阳性克隆和验证蛋白质相互作用。
下面将详细介绍酵母双杂交系统的原理。
首先，构建酵母表达载体。
在酵母双杂交系统中，需要构建两个不同的表达载体，一个用于携带“诱饵”基因，另一个用于携带“靶标”基因。
诱饵基因编码的蛋白质与靶标基因编码的蛋白质是我们想要研究的两个相互作用蛋白。
这两个基因分别被插入到酵母表达载体的多个位点上，以便在酵母细胞内进行表达。
其次，转化酵母细胞。
构建好的酵母表达载体需要通过转化的方式导入到酵母细胞内。
在酵母细胞内，这两个载体会分别表达诱饵蛋白和靶标蛋白，从而在细胞内形成一种相互作用的条件。
接着，筛选阳性克隆。
经过转化后的酵母细胞需要进行筛选，以筛选出表达了诱饵蛋白和靶标蛋白的阳性克隆。
这一步通常通过对酵母细胞进行培养和筛选培养基来实现，只有表达了两个蛋白质的酵母细胞才能生长并形成克隆。
最后，验证蛋白质相互作用。
经过筛选得到的阳性克隆需要进行蛋白质相互作用的验证。
这一步通常通过蛋白质相互作用实验来进行，例如酵母双杂交实验、共免疫沉淀实验等。
通过这些实验，可以验证诱饵蛋白和靶标蛋白之间是否存在相互作用关系。
总的来说，酵母双杂交系统的原理是通过构建酵母表达载体、转化酵母细胞、筛选阳性克隆和验证蛋白质相互作用来揭示蛋白质间的相互作用关系。
这一方法在蛋白质相互作用研究中具有重要的应用价值，可以帮助科研人员更好地理解细胞内蛋白质相互作用的网络，从而为疾病治疗和药物开发提供重要的理论基础。
酵母双杂交系统
酵母双杂交系统酵母双杂交系统，又称蛋白阱捕获系统，是由Fields和Song等人根据真核转录调控的特点创建的。
利用酵母双杂交系统能够快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用，并能寻找、分离与已知蛋白相互作用的配体，在研究抗原和抗体相互作用、发现新的蛋白质和发现蛋白质的新功能、筛选药物作用位点及药物对蛋白互作影响、建立基因组蛋白连锁图等方面应用广泛。
酵母双杂交原理酵母双杂交系统的建立是基于对真核生物转录调控过程的认识。
真核生物中基因转录需要转录激活因子的参与，真核生物的转录激活因子含有两个不同的结构域：DNA结合结构域（DNA binding domain，DNA-BD）和DNA转录激活结构域（Activation domain，AD），这两个结构域可以独立分开，功能互不影响。
BD和AD分别单独作用并不能激活转录反应，只有当二者在空间上充分接近时，才呈现完整的转录激活因子活性，使下游基因得到转录。
根据这一原理，可设计酵母双杂交系统。
将两待研究蛋白（蛋白X与蛋白Y）分别与BD、AD结构域构建融合质粒。
将构建好的两个质粒转入同一酵母细胞中表达，如果两蛋白之间不存在相互作用，则下游基因（报告基因）不会转录表达；如果两个蛋白存在相互作用，则BD与AD两结构域空间上很接近，从而下游基因（报告基因）得到转录。
判断通过报告基因表达与否，即可判断两蛋白之间是否存在相互作用。
图1：酵母双杂交原理如何判断是否存在相互作用？报告基因作为一种营养标记，常用的有HIS3，URA3，LacZ和ADE2等，对应的宿主菌则是相应标记的缺陷型细胞，必须要在含有该营养标记的培养基中生长。
因此，当有相互作用的蛋白存在时，激活报告基因的表达，从而能够在不含营养标记的培养基中生长，以此验证是否存在相互作用。
酵母双杂交系统重要元件酵母双杂交系统由三个部分组成：•与DNA结合结构域（BD）融合的蛋白表达载体（BD-X），被表达的蛋白称为诱饵蛋白（bait）或称为诱饵，通常诱饵蛋白为已知蛋白。
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本 研究 利用 酵母 蔓 雅交 系统 ，榆 测了 Ｒ Ｖ 的 Ｃ Ｓ Ｐ、
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利 用酵 母堡 雅交 系统研究水稻僚纹病毒三佃 功能蛋 白的互作
鹿建 明 ，秦梅玲 ，谢荔 岩 ，林奇 英 ，吴祖 建 ，谢 骄辉
（ 福建 省植物病毒学重黠寅聆 室，福建晨林大擎植物 病毒研 究所 ，福 州 ３ ０ ０ ５ ０ ２）
摘 要 ：通 迫 Ｒ －Ｃ ＴＰ Ｒ撮 增 援得 水稻 僚 纹病 毒 （ ｉｅ ｔｐ ｉ ｓ Ｒ ｃ ｒ ｅ ｒ ，ＲＳ ）的 Ｃ ｓｉ ｖ ｕ Ｖ Ｐ、５ Ｐ和 Ｎ ｖ４基 因 ，分 Ｓｃ
具。Ｒ Ｖ 粒髓 属核糖 核蛋 白 （ ＮＰ ｏＲＳ 的 Ｒ Ｐ Ｓ Ｒ Ｖ Ｎ 是 由 Ｒ Ａ 和 一 檀核衣 觳 蛋 白 （ ＣＰ）组 成 。Ｒ Ｖ Ｎ Ｎ Ｓ 有 可能 是 ＲＳ 的 还助 蛋 白。 Ｖ
研究 表 明 ，Ｃ Ｐ和 ｓ Ｐ均仔 在 于 Ｒ Ｖ 侵 染 的水 Ｓ 稻檗 绿髓 中 ，月． 髓 中 Ｃ 某绿 Ｐ、Ｓ Ｐ的含 量 同植株 褪
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酵 母 竖 雅 交 系统 是 研 究 蛋 白耍 嗣相 互 作 用 的
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獯有 效 方法 ，具 有操 作 筒便 、囊敏度 都尚不明碓。
另外 ，Ｒ Ｖ 抗 血清 免疫 睦髓 金 檩 示 ，在水 稻某 Ｓ 肉组 娥 绌 胞 壁 的胞 阴连 绦 中仔 在 Ｃ ，摭 此 推 测 Ｐ】
Ｃ Ｐ也可 能 舆病毒 的还 输有 嗣 ，ＲＳ 的 ＭＰ桠 有可 Ｖ 能是和 Ｃ Ｐ编 同作 用 。 因此 ，明 碓 ＲＳ 的 Ｃ Ｖ Ｐ、Ｓ Ｐ
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ｐ Ｋ ＧＢ —Ｐ、ｐ ＡＤ． Ｓ ｖ 、ｐ Ｋ． Ｓ ｖ 。利 用 酵母笺 雅 交 系统研 究 了 Ｃ 、Ｓ 、ＮＳ ｃ －￣ 白的 自激 活 、 Ｇ Ｎ ｎ ４ ＧＢ Ｎ ｎ ４ Ｐ Ｐ ｖ４５ ４ 蛋 －
本 文受 圆家９ ３ 目 （ 目编虢 ：２ ０ Ｃ ０ ２ ３），国家 自然科 学基金 （ 目编虢 ：３ ６ １５ ７项 项 ０ ６ Ｂ１０ ０ 项 ０ ７ ３７），教 育部 博士黠基金 （ 项
目编虢 ：２ ０ ０ ８０ ２） 福 建 省科 技 魔 项 目 （ 目鳊 虢 ：Ｋ ３ ０ ）资助 。 ０４ ３９０ 和 项 ００ ５
蛋白自身以及５ ４ 蛋白雨雨之 问的互作情况。结果蹬现 ： Ｓ －￣ － Ｒ Ｖ的 Ｃ 、Ｓ Ｐ Ｐ和 Ｎ ｖ４５４ 蛋白都不具有 自 Ｓ ｃ －￣ － 激 活现 象； Ｐ蛋 白自身能够餮生互作 ， Ｐ和 Ｎ ｖ４蛋白未视察到 自身互作现 象；而 Ｃ 、Ｓ 和 Ｎ ｖ４三佃 Ｃ Ｓ Ｓｃ Ｐ Ｐ Ｓｃ 蛋 白雨雨之 闰也 未 检测到 互作 现 象的存 在 。兹 研 究结 果初 步 明碓 了 Ｒ Ｖ 的 Ｃ 、Ｓ Ｓ Ｐ Ｐ和 ＮＳ ｃ －￣蛋 白之 ｖ４ ５ ４ －