禽流感病毒分子生物学检测方法
禽流感的流行特点和检测技术
中国动物保健2021.06禽流感（avian influenza ，AI ）的潜伏期一般较短，通常为4～5d 。
发病时精神沉郁，食欲、饮欲降低甚至废绝，被毛散乱，体温升高，趴卧不动，偶有流泪。
头部、面部水肿，脚鳞发紫出血，肉垂和鸡冠呈干枯紫色，甚至坏死。
呼吸困难，咳嗽，听诊呈啰音；下痢，粪便呈淡黄或白色。
出现神经症状，共济失调，不能站立或行走。
并且该病为人畜共患病，处理不好不但会危害养禽业的经济发展，还会危害人类身体健康。
1禽流感的流行病学特点1.1传染源主要由感染或携带禽流感病毒的鸡、鸭、鹅等家禽，野外野生鸟类，特别是迁徙性水禽相互传染所致。
1.2传播途径主要通过病禽的分泌物、排泄物、尸体，污染的饮水、饲料和其他物体，直接或间接接触引发感染，主要感染途径为呼吸道和消化道，以及直接接触病毒毒株感染。
人工接种可通过气溶胶经口鼻内、气管内、眼结膜、腹腔、肌肉、静脉和泄殖腔内等途径使易感禽类感染。
1.3易感动物禽流感病毒在世界范围内广泛分布。
许多家禽、野禽、人类、特别是鸭等迁徙水禽，发生病毒感染的概率比其他禽类高，而家养的鸡和火鸡所发生的流感最为严重。
1.4特点多为大流行，世界范围流行。
过去呈三年小流行，五年大流行。
该病主要在寒流较多，气温变化大的秋冬、冬春交替季节流行。
2禽流感的检测技术2.1血清学诊断技术中和试验中和试验的操作步骤复杂，容易造成材料的浪费，临床上不常用，但其为最原始的病毒检测技术，常用来做标准与其他检测方法作比较。
本试验常用鸡胚或组织培养细胞作为样本鉴定禽流感病毒。
中和试验是具有高度的灵敏性和特异性的血清学方法，抗体只和病毒上表面抗原相对应，特别是已吸附的宿主细胞上的病毒颗粒表面的抗原相对应。
所以，在某种特定血清型的中和实验中，抗体只和组内的其他病原发生有限的交叉反应。
琼脂扩散试验琼脂扩散试验检测禽流感时，以具有血凝素活性的鸡胚尿囊液作为样品，采用已知的阳性血清和未知抗原进行病毒抗原型的特异性鉴定。
禽流感实验室检测技术方案
禽流感实验室检测技术方案禽流感，这个让无数人闻之色变的词汇，已经成为我们生活中无法回避的一部分。
如何快速、准确地检测出禽流感病毒，成为了当务之急。
今天，就让我来为大家详细介绍一下禽流感实验室检测技术方案。
我们需要明确检测的目标。
禽流感病毒有多种亚型，我们要检测的是哪些亚型，需要根据实际情况来确定。
一般来说，H5和H7亚型的禽流感病毒对我国养殖业和公共卫生安全威胁较大，因此，我们将重点检测这两种亚型。
我们要选择合适的检测方法。
目前，实验室检测禽流感病毒的主要方法有病毒分离、血清学检测和分子生物学检测。
病毒分离是传统的检测方法，准确性较高，但操作复杂，耗时较长。
血清学检测通过检测抗体来判断病毒感染情况，速度快，但准确性相对较低。
分子生物学检测，尤其是实时荧光定量PCR技术，具有高灵敏度、高特异性、快速简便等优点，成为近年来禽流感病毒检测的主流方法。
下面，我将详细介绍实时荧光定量PCR技术在禽流感实验室检测中的应用。
一、实验材料1.样本：采集疑似感染禽流感的家禽咽喉拭子、泄殖腔拭子等。
2.试剂：实时荧光定量PCR试剂盒、病毒提取试剂盒等。
3.仪器：实时荧光定量PCR仪、离心机、恒温箱等。
二、实验步骤1.样本处理：将采集的拭子样本放入病毒提取试剂盒中，按照说明书操作，提取病毒RNA。
2.模板制备：将提取的病毒RNA与实时荧光定量PCR试剂盒中的缓冲液、酶混合，进行模板制备。
4.结果分析：观察实时荧光定量PCR仪上的扩增曲线和溶解曲线，判断样本是否为阳性。
三、注意事项1.实验过程中要严格遵循无菌操作原则，防止样本污染。
2.实验室人员要具备一定的分子生物学实验技能，确保实验顺利进行。
3.实验结果要及时记录，并与临床诊断相结合，为疫情防控提供有力支持。
通过实时荧光定量PCR技术，我们可以快速、准确地检测出禽流感病毒，为我国养殖业和公共卫生安全保驾护航。
当然，实验室检测只是禽流感防控工作的一部分，我们还需要加强疫情监测、疫苗接种、生物安全等措施，共同抵御禽流感病毒的侵袭。
禽流感病毒检测方法研究进展
收 稿 日期 ：０ ６— ０ ２０ ４— １ １
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・ 论 综述 ・ 专
禽 流 感 病 毒 检 测方 法 研 究 进 展
韩春 华 ， 马鸣潇 金 明兰 ， （＿ １ 内蒙 古呼伦 贝尔市莫旗 动物防疫监 督检验所 ， 内蒙古 呼伦 贝尔 １２５ １． ６ ８ ０２锦州 医学 院 畜牧 兽医学 院， 宁 辽 锦 州 １ １０ ；． ２ ０ １３通化 市畜牧兽 医总站 ， 吉林
传统 Ａ Ｖ检 测方法主要 有病毒分离培养 和血 Ｉ 清学 诊断（ 如琼脂扩 散实验、 酶联免疫吸 附实验 、 问 接 血凝抑制实验及 病毒 中和实验 等） 传统 的 Ａ Ｖ ， Ｉ 检测 方法不足之 处在于操作繁琐 、 断时 间长 、 诊 结 果 重复性不好等 。特 别是 Ａ Ｖ血清 型众 多，且新 Ｉ 的变 异株不断 出现 ， 而制备血清型特异性单克隆抗 体 相对 困难 ， 近来研 究发现 ， 用鸡胚分离和 培养 的 流感病毒常 出现宿主介导变 异 ， 所有这些都 限制 了 传 统方法在 实际 中的应 用 。但是 由于传统检 测方 法， 对实验条件要求不高 ， 无须特殊 实验仪器设 备， 易于在基层兽 医检测部 门推广 ，特别 是一些 新 的 Ａ Ｖ检测方法建 立都要 以传 统的 Ａ Ｖ检测 方法为 Ｉ Ｉ 标准进行 比较验 证， 为此 国内外 学者对 传统 的Ａ Ｖ Ｉ 检 测方法也进行 了积 极探索和 改进 。
禽流感病毒的分离与鉴定技术
禽流感病毒的分离与鉴定技术孙建宏,刘景利,张从禄①（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，黑龙江哈尔滨150001）①摘要：禽流感病毒的诊断一般是通过鸡胚分离病毒，检测其血凝活性，并应用琼脂扩散试验或其他试验确定其是否为禽流感病毒，再进一步进行亚型鉴定、致病力测定。
如果是H5或H7亚型，还应采用PCR等方法对血凝素裂解位点的氨基酸序列进行测定。
①关键词:流感病毒;分离;鉴定①禽流感（Avianinfluenza，AI）由正黏病毒科A型流感病毒属的流感病毒引起。
该病毒的血清型分为15个HA亚型和9个NA亚型。
禽流感病毒可感染各种家禽和野禽，但多数呈亚临床感染。
一些H5和H7亚型可引起高致病性禽流感，可使鸡群100%死亡。
高致病性禽流感因其传播快、危害大，有的血清型可感染人，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类动物疾病，我国将其列为一类动物疫病。
①禽流感病毒的诊断可以根据临床症状、剖检变化做出初步诊断，进一步确诊需进行实验室检测。
目前一般是通过病毒分离和血清学试验检测病毒或是检测感染鸡的抗体进行鉴定。
近年来，随着分子生物学技术的发展，RT-PCR方法日臻成熟，也逐渐成为一种常用的诊断技术。
文章对这些禽流感的诊断技术分别做一些介绍。
①1禽流感病毒的分离①样本可采集死禽样本或活禽样本。
死禽样本一般采集肠内容物或泄殖腔拭子、鼻拭子、咽喉拭子以及内脏组织（气管、肺、气囊、肠、脾脏、肾、脑、肝脏和心脏等）；活禽样本可采集气管拭子、泄殖腔拭子。
由于采集棉拭子时幼禽容易受伤，所以还可取粪便。
①采集的拭子放入1.0mLPBS（pH7.0～7.4，含抗生素）的离心管中，静止作用30min。
对于泄殖腔拭子和粪便，用过滤器过滤除菌，上清液作为样本。
内脏样本应无菌取样，放于灭菌的玻璃研磨器，用PBS配成100g/L的悬液，加入1/10体积的抗生素，将处理过的样本移至离心管内，3000r/min离心10min，取上清液接种。
①采集或处理的样本在2℃～8℃条件下保存应不超过24h；如果需长期保存，需放置-70℃条件，但应避免反复冻融（最多冻融3次）。
禽流感病毒的监测及诊断
禽流感病毒的监测及诊断禽流感是家禽中易感性极高的病害之一，由禽流感病毒引起，具有高度致死性和传染性。
禽流感病毒由禽类呼吸道分泌物和粪便等直接或间接传播，易在家禽养殖场内蔓延，造成重大经济损失和公共卫生问题。
因此，及时、准确地监测及诊断禽流感病毒的存在和传播情况，对于防控禽流感具有重要意义。
一、禽流感病毒的监测禽流感病毒的监测主要包括三个方面，分别是采样、检测和数据分析。
1.采样禽流感病毒的采样包括环境、家禽和野禽样本的采集。
一般采样地点有禽类养殖场、市场和自然湖泊等。
环境样本主要包括禽类排泄物、地面沉积物和空气等；家禽样本包括禽类的食管、喉咙、鼻腔、肠道、粪便和血液等；野禽样本主要是采集禽类的翅膀、鼻腔和粪便等。
在采样前应先消毒工具和手部，避免污染样本。
2. 检测目前常用的检测方法包括病毒分离、实时荧光定量PCR技术和血清学检测等。
（1）病毒分离病毒分离是检测禽流感病毒的传统方法，其基本步骤为：首先从采集的样本中提取病毒RNA，然后以细胞培养的形式增殖禽流感病毒，最后进行毒株鉴定和病毒抗原鉴定等。
病毒分离的优点是准确性高，但其操作时间长、施行条件苛刻，同时还存在毒株异质性等问题。
（2）实时荧光定量PCR技术实时荧光定量PCR技术是现行检测禽流感病毒的主要方法之一。
该技术可以应用于禽类、环境和野生鸟类等多种样本类型。
其操作流程包括提取RNA，合成cDNA，筛选引物和探针并进行PCR扩增。
该方法具有灵敏性高、特异性强、快速方便等优点，能够快速检测样本中是否存在禽流感病毒。
（3）血清学检测血清学检测是通过检测鸡或其他禽类机体内的抗体水平来判断是否感染禽流感病毒的一种方法。
血清学方法主要有酶联免疫吸附测定（ELISA）和补体结合试验等。
血清学检测具有操作简单、成本低、易于推广的特点，但是其检测灵敏性较低，不能直接检测病毒。
3. 数据分析禽流感病毒的监测得到的数据需要进行分析，从而发现该病毒的分布规律、病毒株间的遗传关系等。
禽流感病毒三种病原学检测方法的比较研究
禽流感病毒（AIV ）为正粘病毒科甲型流感病毒属，单股负链RNA 病毒。
依据其外膜血凝素（H ）和神经氨酸酶（N ）蛋白可分为H 亚型和N 亚型，目前已发现18个HA 和11个NA 亚型［1］。
已报道能感染人类的禽流感病毒有H5［2］、H7［3］、H9［4］等亚型。
其中H5、H7为高致病性亚型，潜伏期短，大多无临床症状而突然死亡，发病率和致死率极高［5-6］；H9为中低致病性亚型，几乎所有的养禽场均存在［7］，各型禽流感还可与其他病原混合感染，导致禽病复杂化。
禽流感不仅危害养禽业，也严重威胁人类健康，影响国际贸易。
因此，研发、筛选和使用快速准确的临床检测方法对于禽流感的防控具有重要意义［8］。
目前，禽流感诊断方法较多，国标方法有鸡胚培养分离法、血凝和血凝抑制试验、琼脂凝胶免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验、RT-PCR 、荧光定量RT-PCR ，以及农业农村部推荐的免疫酶渗滤（Dot-ELISA ）法和胶体金免疫层析试纸条法［9］，这些方法各有优缺点和适用范围。
本试验主要选用了目前已商品化的禽流感病原高敏快速荧光免疫法、胶体金免疫层析纸条法和实时荧光RT-PCR 法进行研究，对比这三种方法在临床快速诊断中的实用性，为禽流感病毒检测提供指导。
1材料与方法1.1材料1.1.1禽流感病毒H5、H7和H9亚型血凝抑制试验抗原，均购自哈尔滨兽医研究所。
1.1.2试剂禽流感病毒高敏快速荧光免疫检测试剂盒由成都微瑞生物科技有限公司提供；禽流感病毒荧光RT-PCR 检测试剂盒（通用型）购自哈尔滨国生生物科技股份有限公司；国产禽流感病毒抗原检测卡购自国内某生物股份有限公陈弟诗1，陈斌1，章健2，邱明双1，邓飞1，王泽洲1（1.四川省动物疫病预防控制中心，四川成都610041；2.成都微瑞生物科技有限公司，四川郫都611731）中图分类号：S854.43文献标识码：B文章编号：1001-8964（2019）04-0027-04收稿日期：2018-12-18作者简介：陈弟诗（1981-），男，四川雅安市人，预防兽医博士，高级兽医师，主要从事动物疫病防控工作以及动物传染病病原分子生物学研究。
禽流感病毒检测方法研究进展
禽流感检测方法研究进展郑胜男本硕21摘要:禽流感是一种可以感染多种禽类和人的烈性传染病,其病毒亚型众多,宿主范围广，容易发生变异和重组，由于各亚型之间无交叉反应性,使得禽流感病毒的检测工作较为困难。
目前，该病毒的检测方法主要有病毒分离鉴定、血清学方法和分子生物学方法，同时,人们也正致力于用一些新兴检测方法来检测禽流感病毒。
现就禽流感病毒的检测方法做一综述。
关键词:禽流感病毒;检测方法;AIV；血清;诊断；分子生物；禽流感是由正黏病毒科、A型流感病毒属中的不同亚型引起的禽类的一种急性高度接触性传染病。
目前已知禽流感病毒的血凝素包括16种亚型，[1]神经氨酸酶包括9种亚型。
其中H5和H7亚型常为高致病性的禽流感病毒。
1.病原学检测方法1 .1病毒分离与鉴定病毒的分离鉴定是禽流感的经典诊断方法，最常用的为细胞接种和鸡胚接种法，以细胞发生病变，鸡胚死亡或培养物尿囊液具有凝集红细胞特性作为判定依据作初步鉴定，也可用针对NP的单抗,用免疫荧光染色作病毒的初步鉴定。
[2]确诊还需其它辅助检测手段。
其检测结果准确可靠，灵敏，极少量病毒也可检出。
但其操作程序繁杂，费用高，实验室要求高，耗时费力，周期长，检测时间需1～3 周，大面积应用推广受到较大限制。
1 .2电镜检测技术用电镜技术或免疫电镜技术诊断禽流感病毒，可以在电子显微镜下清楚观察到粒子形态，确定病毒的有无。
[3]、[4]电镜技术快速、准确，但检验结果与样品制备技术、取病材料的部位和时间有关，且本方法不能用于亚型及致病性的测定。
2.免疫学检测2 .1血凝(HA )和血凝抑制(HI)试验HA 和HI 简单、快速、特异性好，但是操作繁琐费时，不能用已知HA亚型的抗血清检出禽流感新的HA亚型。
HI试验是WHO进行全球流感监测所采用的普及方法。
[5]一般先将可疑病料接种适龄鸡胚或细胞进行病毒分离，然后用HA试验检测出培养物是否具血凝素活性，再用已知阳性血清进行HI试验来验证。
禽流感病毒的检测方法
Ｉ 血细胞 凝集抑制试验 （Ｉ Ｈ）鉴定病毒或血 的 ＡＶ诊 断技 术包括病毒分离鉴 定试验
清抗体 的亚 型 ，以及神经氯酸酶 抑制试 周期长 的缺点 ， ＡＶ 期快速诊 断提供 为 Ｉ早 验 （Ｉ Ｎ） 鉴定病毒或血清抗体亚型等 ． 这些 了敏感 ， 快速、实用的方法 ， 而且研究试 检测方法步骤繁琐 ．但特异性好 。 验发现 Ｒ — Ｃ Ｔ Ｐ Ｒ的灵敏度高于 Ｅ Ｉ Ｌ Ａ，可 Ｓ
起 的禽 类全 身性或 呼吸 器官性传 染病 ， 结合 ， 来特异的定性 、 定量 的检测病毒 的 ＯＥ把该病定为 Ａ类烈性传染病 。 Ｉ 禽流感 存 在 。 于 标 记酶 酶 促 反 应 的 放 大 作 用 ， 由
病毒 （ －ｖ ｎ ｉ ｌ ｎａｖｒｓＡＶ）隶属 其 灵敏 度 比常 规 血清 学 检 测 要 灵 敏 的 多 ， Ａ ｉ ｎ ｕ ｚ ｉ ． Ｉ ａ ｆｅ ｕ
有 无和 滴度变化 。如琼脂 凝胶扩散试验 如 果检测 出了相 应的扩增带 ，则 判为阳 无扩增带则 为阴性反应 。 （Ｇ） Ａ Ｐ 和血细胞凝集抑制试验 （Ｉ。Ａ Ｐ 性 反应。反之 ． Ｈ） Ｇ
试 验鉴 定病毒或检测 特异性的血清 抗体 Ｒ － Ｃ 分 子诊断技术 ， Ｔ ＰＲ 可从基 因水平检 Ｉ 具有高度 的敏感性和特异性 ， 并 或基 质蛋白 ＭＰｍａｒ ｒｔｉ） （ ｔｘ ｐｏｅｎ ．检测特 测 ＡＶ． ｉ 异 性核 蛋白 Ｎ 。血细胞凝集试验 （Ａ） Ｐ Ｈ 和 可大大缩短 ＡＶ Ｉ的检 出时 间 ， 克服 了传统
动物保 健 ’ ０ ２ ６年第 ３期 ０＿ Ｊ３ ０ 总第 ｏ 斯
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猪 免疫 抑 制 病 的 危 害 与 防制
已 发 现 有 １ 种 ， 经 氯酸 酶 有 １ 种 ．其 印迹 免 疫 测 定 法 可 以 显 示 病 禽 不 同 部 位 ６ 神 ０
引起禽类疾病的病原微生物及诊断方法
引起禽类疾病的病原微生物及诊断方法禽类疾病是指由各种病原体引起的禽类健康问题，它们会影响禽类的健康和生产能力，甚至会导致禽类的死亡。
禽类疾病给禽类养殖业带来了很大的经济损失。
因此，了解引起禽类疾病的病原微生物及诊断方法十分重要。
常见的引起禽类疾病的病原微生物1. 病毒病毒是引起禽类疾病的主要病原微生物之一。
以下是一些常见的禽类病毒疾病：•禽流感病毒：该病毒是由禽流感病毒（IAV）引起的，是禽类疾病中最为严重的一种。
禽流感病毒会引起鸟类呼吸系统疾病，导致禽类死亡率较高。
•新城疫病毒：该病毒是由新城疫病毒引起的，可影响禽类的神经系统功能，严重时会导致禽类死亡。
•禽传染性喉气管炎病毒：该病毒是由传染性支气管炎病毒引起的，它会影响禽类的呼吸系统，导致禽类的生产性能下降。
2. 细菌细菌是另一个导致禽类疾病的病原微生物。
以下是一些常见的禽类细菌疾病：•亿胞菌病：由亿胞菌引起，可导致禽类肺炎，严重时会导致禽类死亡。
•沙门氏菌病（盘尾病）：由沙门氏菌引起，会导致禽类腹泻和腹部肿胀。
•大肠杆菌毒素病：由大肠杆菌引起，会出现禽类腹泻、腹痛和衰竭等症状。
3. 真菌真菌也会引起禽类疾病。
以下是一些常见的禽类真菌疾病：•鸟瞳宁霉病：由鸟瞳宁霉引起，会影响禽类的眼睛和呼吸系统。
•鸟脚菌病：由皮肤寄生菌引起，可以导致病鸡的脚趾变形和易于感染其他疾病。
诊断方法为了确诊禽类疾病和寻找病原体，需要进行以下诊断方法：1. 细菌培养细菌培养是一种诊断禽类细菌疾病的方法。
将采集到的病禽组织样本、排泄物或分泌物在适当的培养基上进行培养，寻找可疑细菌的形态和芽胞等特征，进而诊断疾病类型。
2. 血清学检测血清学检测可以用于检测禽类感染病毒的血清学反应。
通过这种方法，可以检测感染禽流感、新城疫、传染性支气管炎等禽类病毒疾病的抗体水平。
3. 分子生物学检测分子生物学检测是一种新兴的禽流感、新城疫等禽类病毒疾病的诊断技术。
利用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对禽病样本进行分子检测，能够迅速并具有高灵敏度地检测到禽类病毒的存在。
禽流感病毒基因组及检测方法概述
Ｕ Ｃ Ｕ Ｃ一 Ｕ Ｇ Ｃ ５。研究发现 ， 和 ３末端序列部分互补， ５ 形成锅柄状结构 ， 该结构对于病毒 Ｒ Ａ聚合酶的结 Ｎ
合 是必 需 的 。 １ ２ １ 血 凝素蛋 白（ ｅ ｇｌｔ ｉ ， Ａ） 迄今 为止 ， ．． Ｈ ｍａｇ ｉ ｎ Ｈ ｕｎ 已经 发现 的 Ｈ Ａ亚 型有 １ （ 一Ｈ１ ） 。Ｈ ６种 Ｈ１ ６ Ａ是
作者简 介： 刘志杰 （９ ６一 ） 男 ， １８ ， 安徽合肥人 ， 硕士研究生 。研究方向 ： 动物传染病及病原分子生物学 。
＋ 通讯 作者 ： 曾智勇 ， 博士 ， 副教授 ， 硕士生导师。研究方向： 动物传染病及病 原分子生物学。Ｅｍ ｉ ａ ｚ ｅｇ ｚ．ｄ ．Ｆ － ａ ； ． ｚ ＠ｇ ｅｕ Ｃ ｌ ｓｙ ｎ ｕ Ｉ
第 ３期
刘 志杰 ， ： 流感 病毒 基 因组 及检 测方 法概 述 等 禽
２９ ５
单 股 负链 Ｒ Ａ构成 ， Ｎ 每个 Ｒ Ａ节段 的两端都 有 相对保 守 的非编码 序 列 ， ５端存 在 ｌ 核苷 酸 ， 序列 Ｎ 如 ３个 其 为 ： ｐｐ ｕ Ｇ Ａ Ｃ Ａ Ｇ一 ３端 也 有 ｌ 高度 保守 的核 苷酸 ， Ｃ Ｇ Ｕ Ｕ Ｇ Ｕ一 且 ５端 ５ 一Ａ ｐＣ Ａ Ａ Ａ Ａ Ｇ ３ ， ２个 ５ 一Ｃ Ｕ Ｃ Ｕ Ｕ Ｃ ３ ， 与 ３端反 向互 补 ， 成锅 柄状 结构 。这些 结 构参 与病 毒 Ｒ Ａ 的复制 和 ｍＲ Ａ 的转 录 ， Ｒ Ａ聚合 酶结合 形 Ｎ Ｎ 在 Ｎ 活性 、 动 子 活 性 以及 激 活核 酸 内切 酶活 性 中具 有重 要 作用 ， 流 感 病 毒复 制 、 录 、 启 是 转 包装 的重要 调 控 成
起形成新的毒粒。此外 ， Ａ蛋白分子上个别关键氨基酸位点 的突变 ， Ｈ 尤其是受体结合部位 的氨基酸发生 替换 ， 就有可能造成毒粒致病性和传播能力 的改变。这一方面是 因为 Ｒ Ａ聚合酶缺乏校正功能 ， Ｎ 病毒基
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饲料博览 ，０ １ （ ） １—Ｏ ２ ０ ，９ ｌ９ ． ２
［ ２ 任睿 玲 ， 振均 ， 经元＋ ２］ 孙 宋 药物饲料 添加剂对 环境影响 的研究 进展 ［ 饲料工业 ２ ０ ，６ 。３３ ． 刀． ０ ６ （ ） ３—６ ［ ３ 马明颖 ， 沐森 。 ２３ 李 吴
家禽和野禽的病毒性传染病 。该 病于 １７ ８８年在 意 术 的飞速 发展 ， 流 感 病毒 分 子 生 物学 检 测 方 法不 禽 大利鸡群中首次暴发 ， 现已遍布世 界许 多国家 。世 断 取得新 的进展 。
界 各地 的高致病 性 禽 流感 主要 由 Ｈ５和 Ｈ７亚 型 禽
收 稿 日期 ：０ ６０ —０ ２ ０ —８１
［２ 王玉堂． １３ 开发 中草药饲料添加剂大有可为［ 中国禽业 导刊 ， 刀．
２０ ，２ ５ ｔ３３ ０ ５２ （） ３ —．
畜禽业 ｔ０ ３ （）一０４ ． ２ ０ ， ２ ４－２ ［ １ 武 ２］
瑞， 康世 良． 中草药饲 料添加 剂与绿 色生态． 畜牧业 ［ 刀．
［３ 胨寒青 。 １］ 金征宇． 中草药饲料 添加剂 研究进展 ［ ］ 饲料 工业 ， Ｊ．
物疾 病 ， 国将 其 列为 一类 动 物疫病 ［ 我 １ ］
禽流感 的诊 断包括 临 床诊 断 和实 验室诊 断 。由
于流感病毒的亚型众多， 毒力差别很大， 所以临床症 状也千差万别 ， 难以与其他有类 似症状的传染病 区 分。而且流感的临床症状和病理变化因感染动物的
重视 ， 文章 就禽 流 感 病毒 分 子 生物 学检 测 方
兽 医药研究进展 ， ０ ３ （ ） １ １１２ ２ ０ ，８ 。３— ３． ［ ９ 马美蓉 ， 淑琴 ． 饲料安全 谈 中草药饲料 添加剂 的开发利 １］ 竺 从 用 ［］ 饲料研究 ，０ ４ （ ） ８１． Ｊ． ２ ０ ，２ 。１Ｌ９
［Ｏ 张君涛 ， ２］ 王建 华 ， 常文环． 中草药饲料添加剂开发与应用［ 刀．
（ 南 省兽 药监 察所 ， 南 郑 州 ４０ ０ ） 河 河 ５ ０ ８
中圈 分 类 号 ：８ ２ ６９ ５ ￥ ５ ． ５ ．
文 献 标 识 码 ： Ｂ
文 章 编 号 ；０ ７５ ３ （０ ６１—１ ８０ １ ０—０ ８ ２ ０ ） １ ０ —４ ０
其不 摘 要 ： 流感是 由流 感 病毒 引起 的 一种人 流感病 毒 引起 ， 仅 给养 禽业 带来 了毁灭 性 打击 ， 禽
作者简介 ： 京燕（９ ５ ， ， 黄 １ ５ 一） 女 河南郑州人 ， 医师， 兽 主要从事疲病监控和兽 药检 验工作
甘 辛鬻杀鬻谱黼 黼 ｝ 鬻诺书谱书毒木靠皋 诺皓禾杀毒罐弗靠杂靠木 书 雌 咔索靠啦靠书矗皋难啦弗睾靠带’ 畚畦书谁嵛卉书靠 皓÷ 靠 ＊
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和 动物 的 高 度 传 染 性 疾 病 。 由 于 其 危 害 严 还严重影响了人类健康 。高致病性禽流感因其传播
危 被 Ｏ Ｅ 列为 Ａ 类动 重 ， 速 、 确 的诊 断技 术 对 于 禽 流 感 的 防 控 快 、 害 大 ， 世界 动 物卫 生组 织 （ Ｉ ） 快 准
显得非常 重要 。除 常规 的 临床 诊 断 、 毒 分 病 离鉴定、 血清 学检测 外 ， 分子 生物 学检 测方 法 由于具有 更加 快速 、 准确 的特 点愈 来愈 受到
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动物 医学进 展 ．０ ６ ２ （ １ ：０ —１ ２ ０ ，７ １ ） １ ８１ １
Ｐｒ ｇ ｅ ｓ ｉ ｔ ｒｎ ｒ ｅ ｉｉ ｏ ｒ ｓ ｎ Ｖｅ ｅ ｉ ａ ｙ Ｍ ｄ ｃｎｅ
禽流 感病毒分子生物学检测方 法
黄 京 燕 ， 红 霞 ， 富娜 ， 周 邱 韩 立
［４ 徐 １］
岩ｔ 刁新平． 从饲料安全 的角度看 中草药饲料添加剂［ 刀．
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［５ 庾莉萍． １］ 发展 中 草药 饲料 添加 剂 任重 道远 ［］ 湖南 饲料 ， Ｊ．
２ ０ ，（ ） ３ — ３ ０ ６ ３ 。１３．
法研 究进展 做 一 综述 ， 以期 为有 效地 控 制禽 种类 、 年龄、 病程长短 、 并发感 染情况及感染毒株毒 流感的流行和暴发提供有 力技 术支撑 。 力等不同而有所不 同， 可能缺 乏特征性症状和剖检 关键词 ： 禽流 感病毒 ； 分子生物学 ； 研究进展
Ａ 型 流感 病毒属 中的禽 流感病 毒 引起 的发 生于 各种 变化 ， 给 流感 的 诊 断 和 防控 带 来 极 大 的 困难 。因 这 诊 流感 的惟一 有 效 途 径 ， 尤其 是 随着 分 子 生 物 学技 禽 流感 （ ｉ ｆ ｅｚ ， ） 由 正 黏 病 毒 科 此 ， 靠 临床 诊 断 常 常难 以确 诊 。实验 室 诊 断是 确 Ａｖ ｎｉ ｌ ｎｅ ＡＩ是 ａ ｎｕ 单
［ Ｏ 祝耀德 ， 庆平 ， 兴 隆． １３ 胡 刘 中草药 饲 料 添加剂 的作用 与开 发
［ 中国兽药 杂志 ，０ ５ ３ （ ０ 。８３ ． 刀． ２ ０ ，９ １ ） ２添加 扪介 绍［ 广西 ｉ３ 刀．
畜 牧兽 医 ，９ ９ １ （） ｔＯ４ ． １９ ，５ ４ ４ 一２
［ ］ 孝 子石 。 ９ 金晓红 ， 宋振清 ， 中草 药饲料 添加剂在 养鸡业 中的 等．
应用现状 ［ 现代 畜牧兽 医，０ ６ （ ） ６８ 刀． ２ ０ ， ５ 。—．
富 ，０ ５ （ ） ５ ２ ０ ， ５ 。。 ［ ８ 侯俊峰 ， 玉俊 ． 研究中草药饲料 添加剂 的初步设想［］ 中 １］ 徐 对 Ｊ．