拟南芥种植方法

合集下载

拟南芥种植及处理基本方法

拟南芥种植及处理基本方法

培养基MS培养基 (Sigma公司)B5培养基 (pH 5.5)Content mg/L Content mg/L Content mg/LKNO3 2500ZnSO47H2O 2.0Nicoti nic1CaCl22H2O 150 H3BO3 3.0 Thiami ne HCl 10 MgSO47H2O 250 KI 0.75 Pyri ndox ine 1 NaH2PO4'H2O 150 Na2MoO42H2O 0.25 m-I no sitol 100 FeSC47H2O 27.8 CoCl26H2O 0.025 Glyci ne 200 MnSO4H2O 10 Na2EDTA 37.3 Ki netin 0.1 CuSO45H2O 0.025 IAA 0.1-1改良的1/4 Hoagland 培养液(mM, pH6.0):Content mM Content mMKNO3 1.25Zn SO40.002Ca(NO3)2 1.50 H3BO3 0.050MgSO40.75 KCl 0.050KH2PO4 0.5 (NH4)6Mo7°24 0.075FeSq0.072 CuSO40.0015Na2EDTA 0.072 Na2SiO30.12植物材料的常规种植拟南芥种子均匀地播撒于1/3 B5液体培养基浸润的蛭石上,塑料膜遮盖至种子萌o发,揭开膜,让其自然生长,适当间苗,烤苗至蛭石表面干燥后加水。

置于23 C,16/8 h的光照培养间中生长。

3拟南芥种子的表面灭菌处理1)拟南芥种子在4 C下春化3-5天2)在超净台上用70%酒精处理种子2-5分钟3)弃去酒精,用无菌水洗1-2次。

4)将种子用15% Bleach (KAO公司)处理15分钟,间歇振荡。

5)用无菌水洗4-6次,每次充分振荡混匀。

6)将种子悬浮在灭菌的0.1% Agar中。

7)均匀地将种子播撒在B5培养基平皿中。

4植物材料的水培体系拟南芥种子经表面灭菌处理后均匀播撒于1/2 MS固体培养基上,10-15粒/ 皿,生长2周后,小心地将其转入水培体系中。

绿萝栽种方法

绿萝栽种方法

绿萝栽种方法
绿萝(又名拟南芥)是一种热带植物,生长在地表上会有不同的形状和色泽,一旦放在室内,它就会完美展现出它的美丽。

绿萝的种植是很容易的,下面就介绍一下绿萝的栽种方法:
首先,先在室内准备绿萝的穴盆,可以使用旧的或者新的穴盆,里面应该填充一定量的泥土和有机肥料,以保证穴盆里的土壤质量。

然后,将绿萝的苗木放入穴盆,使表面排列在搅拌好后的土壤上,把多余的土壤补充到穴盆中,双手轻轻按压平坦即可,避免了尖刺,后期浇水时能够更轻松些。

最后,完成了穴盆的装填,绿萝会慢慢吸收养分,准备为它浇水,一般使用温开水适量和每次浇水的时间控制在5-10分钟内,也可以在短时间后补充少量水分,保证小苗身上的水分稳定。

在季节更替之前,每隔一段时间添加有机肥料及腐熟的肥料到穴盆,以增加养分,使植物更加健康鲜艳,同时需要注意穴盆土壤千万不要过湿以及植物两边不要暴晒,长时间避免曝晒,保持穴盆温暖干燥,每隔一段时间对穴盆进行除虫,以保护植物的安全。

绿萝是应季节温度变化而发生变化的植物,如果是冬季,它新的叶片会慢慢地休眠,如果是夏季,则会有繁盛的叶片,所以每一季顺应环境的变化,及时调整浇水的频率,才能让绿萝生长得茁壮。

通过以上简单的步骤就可以轻松的栽种绿萝。

拟南芥盆栽方案

拟南芥盆栽方案

拟南芥盆栽方案拟南芥(学名:Arabidopsis thaliana)是一种小型的一年生植物,因其生命周期短、易于培养和遗传实验的可行性,被广泛应用于植物科学研究中。

在本文中,我们将提供一个拟南芥盆栽方案,以帮助那些对这一植物进行自家种植的人。

1. 材料准备- 拟南芥种子:可在植物学实验室、种子公司或在线购买。

- 盆:选择适宜大小的盆,保证拟南芥根系能够充分扩展。

- 泥土:使用适宜的培养土,可在花草市场或园艺店购买。

- 平底盘或托盘:用于放置盆,以避免水滴在室内滴落。

2. 盆栽步骤2.1 准备盆土选择质地疏松、排水良好的培养土。

可以将培养土轻轻湿润,但避免过于湿润,以免引发根部腐烂。

2.2 播种将拟南芥种子均匀撒在培养土表面上,并轻轻压实,不要完全覆盖种子。

拟南芥种子较小,所以要小心操作,以确保均匀分散。

2.3 浇水使用喷壶或水壶从顶部轻轻喷洒水,保持培养土湿润。

避免使用喷头过大或水流过大的工具,以免种子被冲走。

2.4 光照与温度控制拟南芥适宜在温度适宜、充足的光照下生长。

将盆栽置于明亮的窗户旁或人工照明设备下。

室温保持在20-25摄氏度之间。

2.5 生长环境调节拟南芥对于光照的要求较高,因此要经常转动盆栽,以保证植株各个方向都能得到充足的光照。

如果环境光线不足,可以补充使用植物专用灯。

2.6 浇水与施肥保持培养土湿润,但避免过度浇水,以免引发根系病害。

约每周浇水一次,根据环境湿度和季节的变化做适当调整。

在生长过程中可以适时施加适量的植物营养液,以促进拟南芥的生长和发育。

3. 生长管理3.1 害虫防治定期检查拟南芥植株,如发现害虫如蚜虫、螨虫等,可以使用适量的杀虫剂进行处理,但要遵循产品说明。

3.2 避免拥挤随着拟南芥生长,植株之间可能会产生拥挤。

在植株茁壮成长后,适当间隔并摘除较弱的植株,以保证光照和营养的充足供给。

3.3 测量和记录生长数据观察拟南芥的生长情况,使用尺子或其它测量工具记录植株的高度、叶片数量等数据,以便后续分析比较。

拟南芥种植方法.doc

拟南芥种植方法.doc

培养基上点种子:1.种子处理1.1 种子消毒处理在培养基中点样前,必须对种子进行消毒,防止感菌,具体方法为:先将种子倒在干净的纸上,挑去大的杂质,再将种子倒入EP管中,加入1mL70%酒精,振荡10min,将种子放在超净台中吹干。

1.2 点样将消毒处理后的种子,可以利用牙签点到培养基上,每次仅点一粒种子,根据培养皿的大小,确定一个里面能够点多少个种子,每个90mm培养皿上大约种30粒种子,防止植株长大后影响根与子叶的发育。

1.3 春化种子点样完毕后,将培养基密封,置于4℃冰箱里放置72h后,放回温室。

土培法:1.种种子前,要将营养土用自来水混匀后,121℃灭菌30min,待土冷却后,装入种植拟南芥的方盒中,再将方盒放入红色托盘中。

2.将要点的种子平铺在称量纸上,用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记,以免遗种某个盒子。

(每个小盒子种5粒种子,每个大方盒子种9粒种子)3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室,并用一个干净的托盘盖在上面,大约两天后就可以打开上面的托盘,待植物长出4片叶子时,可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。

4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内,保证温室温度恒定在22℃,空气湿度70—80%,光照强度100—150μmol/m2/s,每天浇两次纯净水,上午9点左右一次,下午5点左右一次;一周浇一次营养液(1平匙溶于1L水中),营养液要灌在盆底。

浇水注意事项:1)水不可以浇的过多或过少,用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿;2)水要浇均匀,托盘四个角的方向如果喷壶喷不到,可以用挤瓶均匀地喷一些水;3)用喷壶浇水时,喷壶的水柱不可以太大,以免把植物连根拔起;4)当植株出现花芽时,一定要保证水分的供应,促进果实的发育。

当植株结有豆荚时,可以适当的减少供水量,每两三天浇一次水便可,以利于种子的成熟。

开花后的植物不能再用喷壶浇水,要从盆底灌水,但不可以一次性灌太多水;5)在盆底灌水后,待植物吸收完水后,可以将盆底多余的水分倒出来;6)拟南芥受到胁迫判断标准:叶柄发紫,叶片发黄,开花期提前等;7)如果做生理实验,植物一旦受到胁迫,需要把植物丢弃,重新种植,以免实验数据不准确。

实验室拟南芥常用种植方法

实验室拟南芥常用种植方法
4.2 种子的干燥和贮存
贮存过程中影响种子寿命的主要是温度和含水量。温度越高,含水量越多,则种子寿命 越短。因此刚采集的种子必须要经过干燥才能保存。最安全的种子干燥的方法是将采集的种 子置于干燥环境下,在室温条件下放置 2-3 周便可。
种子的贮存可根据贮存的目的不同,分为短期、中期、长期贮藏。一般短、中期贮藏是 将种子贮存在 4℃,而长期贮藏是保持在-20℃温度下。当取用长期贮藏的种子前,先将贮 存种子的容器预热到室温,或者将其置于 37℃水浴 10min,以尽量使冰害降至最低。为了 及时了解贮存过程合适与否,一般对种子定期进行生活力测定,而种子发芽率是测定其生活 力的最佳选择。
拟南芥实验室的常用种植方法刘金亮西北师范大学生命科学学院730070摘要拟南芥由于其生活周期短种植和生长不受季节限制并且为自花受粉植物而作为实验最常用的模式植物因此拟南芥如何能够在实验室较好较快地生长便成为实验成败的关键由于拟南芥存在多种生态性各实验室均有各自适合栽培种植的方法如在土壤石英砂琼脂等均可种植但土壤种植种子萌发率低生长过程中受其它方面影响大故本方法重点介绍利用琼脂无菌培养基培养幼苗和移植相结合的方法来快速种植拟南芥该过程主包括种子的处理琼脂无要菌培养基上种子的培养和幼苗的移植以及成熟后种子的保存
过厚或过薄。过薄,点种子后水分蒸发快,培养基有可能干涸;过厚,种子发芽后,有可能 使叶子浸入平板中,影响幼苗后期发育并且过厚平板易开裂。
1.2 种子处理 1.2.1 种子消毒处理
在培养基中点样前,必须对对钟子进行消毒,防止感菌,具体方法为:利用 1%Naclo 浸泡 10min,离心后,倒掉 Naclo,然后用无菌蒸馏水洗涤 5-6 遍,时间间隔为 1min,注意 的是 Naclo 浓度不易过高和种子处理时间不易过长,有可能伤害种子。

拟南芥

拟南芥

拟南芥种植花序浸染法转化拟南芥(1)种植:选择吸水性好,土质松软的蛭石配合营养土(1:1/2)作为拟南芥种植土壤。

直径9cm的花盆,每盆播种20-30颗。

播种以后在花盆上罩上薄膜,给植株的生长提供一个湿润的环境。

(2)去顶:在拟南芥初次开花时将花蕾剪掉,可以促进侧枝更多的花枝的增生。

适合转化植株的花卉并没有成熟,也没有产生已受精的角果。

(3)配制浸染液:在5%的蔗糖溶液中重悬农杆菌使OD=0.8,为了保持蔗糖溶液的新鲜,可以现配现用,无需灭菌。

100-200ml浸染2-3个小盆植株,400-500ml浸染,2-3个花盆(9cm)植株。

在浸染之前加入表面活性剂至浓度0.05%(500ul/L),如果产生表面活性剂的毒性现象(浸过部分发黄或死亡),将浓度降至0.02%。

(4)浸染:将盛花期拟南芥的花表面部分浸泡在农杆菌悬浮液中2-3s,同时轻轻旋转。

(5)暗培养:将浸染后植株套袋保持高度的湿润状态暗室培养24h。

(6)浸染后培养:隔天浇水,保证水分充足即可。

(7)种子收集:种子成熟,角果自然开裂后可以收种子。

(8)转基因种子筛选:在含有Kan抗生素的平板上培养浸染后所得种子。

40mg的种子大约200颗于含kan 10-50μg/ml 的0.5×MS培养基上春化2天,之后在持续光照条件下培养7-10天。

根据生长状况判断是否为转基因种子。

成功转入重组质粒的种子能够在抗性培养及上正常生长出4片以上真叶。

非转基因种子不能正常生长,仅能长出2片子叶,根的生长也受到严重抑制,一般萌发10天以后死亡。

(9)转基因植株转土栽培。

转基因种子在MS+kan平板上萌发2周以后,将阳性植株转入土壤继续培养。

转基因拟南芥纯合子筛选由于农杆菌介导的花序浸染法只能将目标片段整合到一条DNA单链上,为后续生理性状实验需要,将T0代转基因种子培育至T2代,利用抗性筛选得到纯合子。

根据杂合子在发生性状分离时会产生野生型后代,而野生型种子不能在MS+Kanr(50μg/ml)平板上正常生长,进行转基因植株纯合子的筛选。

拟南芥种植方法

拟南芥种植方法

培养基上点种子:1.种子处理1.1种子消毒处理在培养基中点样前,必须对种子进行消毒,防止感菌,具体方法为:先将种子倒在干净的纸上,挑去大的杂质,再将种子倒入EP管中,加入1mL70%酒精,振荡10min,将种子放在超净台中吹干。

1.2点样将消毒处理后的种子,可以利用牙签点到培养基上,每次仅点一粒种子,根据培养皿的大小,确定一个里面能够点多少个种子,每个90mm培养皿上大约种30粒种子,防止植株长大后影响根与子叶的发育。

1.3春化种子点样完毕后,将培养基密封,置于4℃冰箱里放置72h后,放回温室。

土培法:1.种种子前,要将营养土用自来水混匀后,121℃灭菌30min,待土冷却后,装入种植拟南芥的方盒中,再将方盒放入红色托盘中。

2.将要点的种子平铺在称量纸上,用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记,以免遗种某个盒子。

(每个小盒子种5粒种子,每个大方盒子种9粒种子)3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室,并用一个干净的托盘盖在上面,大约两天后就可以打开上面的托盘,待植物长出4片叶子时,可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。

4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内,保证温室温度恒定在22℃,空气湿度70—80%,光照强度100—150μmol/m2/s,每天浇两次纯净水,上午9点左右一次,下午5点左右一次;一周浇一次营养液(1平匙溶于1L水中),营养液要灌在盆底。

浇水注意事项:1)水不可以浇的过多或过少,用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿;2)水要浇均匀,托盘四个角的方向如果喷壶喷不到,可以用挤瓶均匀地喷一些水;3)用喷壶浇水时,喷壶的水柱不可以太大,以免把植物连根拔起;4)当植株出现花芽时,一定要保证水分的供应,促进果实的发育。

当植株结有豆荚时,可以适当的减少供水量,每两三天浇一次水便可,以利于种子的成熟。

开花后的植物不能再用喷壶浇水,要从盆底灌水,但不可以一次性灌太多水;5)在盆底灌水后,待植物吸收完水后,可以将盆底多余的水分倒出来;6)拟南芥受到胁迫判断标准:叶柄发紫,叶片发黄,开花期提前等;7)如果做生理实验,植物一旦受到胁迫,需要把植物丢弃,重新种植,以免实验数据不准确。

拟南芥种植到培养基中的方法

拟南芥种植到培养基中的方法

拟南芥种植到培养基中的
方法
It was last revised on January 2, 2021
拟南芥种植到培养基中的方法
材料:1/2MS培养基、植物组织培养专用琼脂、1ml吸头(灭菌)、0.1%琼脂糖、水(灭菌)、75%酒精
种植过程在超净工作台内进行,具体方法为:
1、种植前先将实验过程中用到的物品放到超净工作台,紫外线灭菌15分钟左右,提供一个相对无菌的环境。

注:种子不能放在紫外灯下照射,以免引起损伤和变异。

2、用75%酒精棉球将暴露于实验台内的手及其他部分擦拭一遍,起消毒作用,种植过程中最好不要在上风向放东西,手也最好不要在上风向经过。

3、在放有种子的离心管中加入75%的酒精,消毒5分钟左右,时间不宜过长以免影响种子的活性。

酒精的量大约为离心管体积的2/3,上下颠倒离心管使种子与酒精充分接触。

种子不宜过多(超过50ul),否则消毒效果不好。

4、消毒完后,将离心管中的酒精吸出,用灭菌的ddH2O漂洗3-5遍,注意有一些种子会漂浮在水中。

在洗的过程中用移液器慢慢吹打,注意更换吸头,避免交叉污染。

5、种子漂洗完后将适量0.1%琼脂糖加入离心管中。

之所以用琼脂糖而不是水是因为琼脂糖有粘性,种子会悬浮在其中,而在水中种子一般都沉在底部不便于种植。

将种子均匀滴到1/2MS培养基中,每个平皿大约种植30粒左右,在培养皿的盖和底部最好都要写上种植的拟南芥的名称以及日期,最后用胶条将培养皿封口。

6、将培养皿放到4℃冰箱中(主要是让种子均匀发芽),2-3天后便可拿到培养间中。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

拟南芥种植方法
This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020
培养基上点种子:
1.种子处理
1.1 种子消毒处理
在培养基中点样前,必须对种子进行消毒,防止感菌,具体方法为:先将种子倒在干净的纸上,挑去大的杂质,再将种子倒入EP管中,加入1mL70%酒精,振荡10min,将种子放在超净台中吹干。

1.2 点样
将消毒处理后的种子,可以利用牙签点到培养基上,每次仅点一粒种子,根据培养皿的大小,确定一个里面能够点多少个种子,每个90mm培养皿上大约种30粒种子,防止植株长大后影响根与子叶的发育。

1.3 春化
种子点样完毕后,将培养基密封,置于4℃冰箱里放置72h后,放回温室。

土培法:
1.种种子前,要将营养土用自来水混匀后,121℃灭菌30min,待土冷却后,装入种植拟南芥的方盒中,再将方盒放入红色托盘中。

2.将要点的种子平铺在称量纸上,用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记,以免遗种某个盒子。

(每个小盒子种5粒种子,每个大方盒子种9粒种子)
3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室,并用一个干净的托盘盖在上面,大约两天后
就可以打开上面的托盘,待植物长出4片叶子时,可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。

4.植株生长条件的控制
幼苗移植后将花盆置于温室内,保证温室温度恒定在22℃,空气湿度70—80%,光照强度100—150μmol/m2/s,每天浇两次纯净水,上午9点左右一次,下午5点左右一次;一周浇一次营养液(1平匙溶于1L水中),营养液要灌在盆底。

浇水注意事项:
1)水不可以浇的过多或过少,用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿;
2)水要浇均匀,托盘四个角的方向如果喷壶喷不到,可以用挤瓶均匀地喷一些水;
3)用喷壶浇水时,喷壶的水柱不可以太大,以免把植物连根拔起;
4)当植株出现花芽时,一定要保证水分的供应,促进果实的发育。

当植株结有豆荚时,可以适当的减少供水量,每两三天浇一次水便可,以利于种子的成熟。

开花后的植物不能再用喷壶浇水,要从盆底灌水,但不可以一次性灌太多水;
5)在盆底灌水后,待植物吸收完水后,可以将盆底多余的水分倒出来;
6)拟南芥受到胁迫判断标准:叶柄发紫,叶片发黄,开花期提前等;
7)如果做生理实验,植物一旦受到胁迫,需要把植物丢弃,重新种植,以免实验数据不准确。

注:温室202光照时间:9:00—19:00为短日照,有利于营养生长
温室203光照时间:6:00—22:00为长日照,有利于生殖生长
5.种子的收集和保存
6.拟南芥种子处在长角果中,当逐渐成熟时,长角果由绿变黄,最后成褐色。

当长角果变黄时,可以开始单个采集长角果,但此时种子中含有较多的生长抑制剂。

因而,当长角果变褐时及时采集,可得到成熟又易发芽的种子。

收获的种子应立即脱粒、清洁、干燥。

种子的收集:在桌面上铺几张干净的纸,戴上手套,将要收种的植物的花序用手将种子搓揉到纸上,再将纸上的大的杂质挑去后,将种子装到信封中,密封后将装有种子的信封置于干燥环境下,在室温条件下放置 2-3 周便可进行储藏。

种子的贮存可根据贮存的目的不同,分为短期、中期、长期贮藏。

一般短、中期贮藏是将种子贮存在4℃,而长期贮藏是保持在-20℃温度下。

当取用长期贮藏的种子前,先将贮存种子的容器预热到室温,或者将其置于37℃水浴 10min,以尽量使冰害降至最低。

相关文档
最新文档